專利名稱：嘧啶化合物的制作方法
相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用
根據(jù)35 USC§119(e)，本申請(qǐng)要求2005年6月14日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)60/690,267和2006年5月8日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)60/798,596的優(yōu)先權(quán)，該兩篇專利申請(qǐng)的內(nèi)容引入本文作為參考。
背景技術(shù)：
趨化因子屬于細(xì)胞因子家族，其在免疫和炎癥反應(yīng)中調(diào)節(jié)白細(xì)胞的粘附和經(jīng)內(nèi)皮的遷移(Mackay C.R.，Nat.Inmunol.，(2001)295；Olson等，Am.J.Physiol.Regul.Integr.Comp.Physiol.，(2002)283R7)。趨化因子也調(diào)節(jié)T細(xì)胞與B細(xì)胞的遷移，以及促進(jìn)淋巴細(xì)胞生成系統(tǒng)和造血系統(tǒng)的發(fā)育(Ajuebor等，Biochem.Pharmacol.，(2002)631191)。在人體中已鑒定出大約50種趨化因子。基于N-末端的保守半胱氨酸殘基的位置，可將它們分為四個(gè)亞家族，即CXC、CX3C、CC和C趨化因子(Onuffer等，Trends Pharma Col Sci.，(2002)23459)。趨化因子的生物功能是由它們結(jié)合和活化細(xì)胞表面的G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)所介導(dǎo)。以CXCR4受體為例，它能被CXC趨化因子的一員基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1或SDF-1所活化。
SDF-1最初由骨髓基質(zhì)細(xì)胞系克隆而來(lái)，并發(fā)現(xiàn)其作為祖B細(xì)胞的生長(zhǎng)因子起作用(Nishikawa等，Eur.J.Immunol.，(1988)181767)。SDF-1還在胚胎發(fā)生中誘導(dǎo)造血前體細(xì)胞的骨髓建群(Bleul等，J.Exp.Med.，(1996)1841101)。SDF-1的生理功能由CXCR4受體所介導(dǎo)。缺少SDF-1或CXCR4受體的小鼠在骨髓髓細(xì)胞形成、B細(xì)胞淋巴細(xì)胞形成和小腦發(fā)育中顯示致死性異常(Nagasawa等，Nature(1996)383635；Ma等，Proc.Natl.Acad.Sci.，(1998)959448；Zou等，Nature(1998)393595；Lu等，Proc.Natl.Acad.Sci.(2002)997090)。CXCR4受體在多種組織中廣泛表達(dá)，特別是在免疫系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，并且已描述其是HIV-1/2在T淋巴細(xì)胞上的主要輔助受體(co-recepter)。雖然對(duì)CXCR4拮抗作用的興趣最初著重在其對(duì)AIDS治療的潛在應(yīng)用上(Bleul等，Nature(1996)382829)，但目前已逐漸清楚CXCR4受體和SDF-1還參與其它病理狀況，如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、哮喘和腫瘤轉(zhuǎn)移(Buckley等，J.Immunol.，(2000)1653423)。還發(fā)現(xiàn)CXCR4受體與SDF-1在胚胎發(fā)育中在很多組織中廣泛表達(dá)。此外，已表明CXCR4/SDF-1途徑在幾種組織損傷模型的再生中起關(guān)鍵的作用。特別是，已發(fā)現(xiàn)損傷部位的SDF-1的水平升高并且CXCR4陽(yáng)性細(xì)胞積極參與組織再生過(guò)程。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是基于這一發(fā)現(xiàn)，即某些嘧啶化合物通過(guò)它們與趨化因子受體(例如CXCR3或CXCR4受體)結(jié)合而有效地治療炎癥性和免疫性疾病(例如視網(wǎng)膜病變)、發(fā)育性或退行性疾病或組織損傷。另外，當(dāng)這些化合物與G-CSF生長(zhǎng)因子組合使用時(shí)，其在干細(xì)胞和內(nèi)皮祖細(xì)胞活化中顯示出協(xié)同作用。
一個(gè)方面，本發(fā)明描述了式(I)的嘧啶化合物及其鹽
在該式中，X為-N(Ra)-或-O-；或者X與R5一起為C3-C20雜環(huán)烷基；或者X與L2和L3一起為C3-C20雜環(huán)烷基；L1和L2各自獨(dú)立地為C1-C10亞烷基、C1-C10亞雜烷基，-C(O)-或不存在；或者L1與L3、R4和連接至R4的氮一起為C3-C20雜環(huán)烷基，或者L2與L3和X一起為C3-C20雜環(huán)烷基；L3為-N(Rb)-、-O-、芳基、雜芳基或C3-C20環(huán)烷基，或者L3與L1、R4和連接至R4的氮一起為C3-C20雜環(huán)烷基；或者L3與L2和X一起為C3-C20雜環(huán)烷基；R1、R2和R3各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、鹵素、CN、ORc、COORc、OC(O)Rc、C(O)Rc、C(O)NRcRd或NRcRd；R4為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基；且R5為C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或者被C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基或N(ReRf)取代的C1-C10烷基；或者R5與X一起為C3-C20雜環(huán)烷基；其中Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Rf各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或-C(O)R；R為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷、芳基或雜芳基。
關(guān)于式(I)，上述嘧啶化合物的一個(gè)子集是其中X可以為-N(Ra)-，L1和L2可以各自獨(dú)立地為C1-C10亞烷基、-C(O)-或不存在；且L3可以為-N(Rb)-、-O-、芳基或C3-C20環(huán)烷基的化合物。作為一個(gè)實(shí)例，在某些嘧啶化合物中，L3為-N(Rb)-。在這些化合物中，R5可以為C3-C20環(huán)烷基(例如

)，被C3-C20環(huán)烷基取代的C1-C10烷基(例如

)，或被C1-C10烷基取代的C3-C20雜環(huán)烷基(例如

)；Rb可以是被N(R’R”)取代的C1-C10烷基，其中R’和R”各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基；且R1可以為C3-C20雜環(huán)烷基(例如

或

)。作為另一個(gè)實(shí)例，在某些嘧啶化合物中，L3可以是芳基(例如亞苯基)。在這些化合物中，R5可以是被C3-C20雜環(huán)烷基取代的C1-C10烷基(例如

或

)或被N(ReRf)取代的C1-C10烷基(例如


或

)；或者R5與X一起為C3-C20雜環(huán)烷基(例如

)。R3可以為H、鹵素、C1-C10烷基、ORc、NRcRd或者任選被C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、OR’、C(O)R’、COOR’、C(O)N(R’R”)、SO2R’、C(S)N(R’R”)、OSO3R’或PO(OR’)2取代的C3-C20雜環(huán)烷基，其中R’和R”各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。例如，R3可以為H、Cl、CH3、Oph、

任選被OH取代的

任選被C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、OH、C(O)R’、COOR’、C(O)N(R’R”)、SO2R’、C(S)N(R’R”)、OSO3R’、PO(OR5)2取代的

或者被OH或NHC(O)R”取代的NH(R’)。作為另一個(gè)實(shí)例，在某些嘧啶化合物中，L3可以為C3-C20環(huán)烷基(例如亞環(huán)己基)。在這些化合物中，R5可以為被N(ReRf)取代的C1-C10烷基(例如

)，且R3可以為被C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、OR’、C(O)R’、COOR’、C(O)N(R’R”)、SO2R’或C(S)N(R’R”)取代的C3-C20雜環(huán)烷基，其中R’和R”各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
術(shù)語(yǔ)“烷基”指飽和或不飽和的、直鏈或支鏈的烴基團(tuán)，例如-CH3、-CH2-CH＝CH2或支鏈的-C3H7。術(shù)語(yǔ)“亞烷基”指二價(jià)、飽和或不飽和的、直鏈或支鏈的烴基團(tuán)，例如-CH2-或-CH＝CH-。術(shù)語(yǔ)“亞雜烷基”指具有至少一個(gè)雜原子(例如N、O或S)的亞烷基基團(tuán)。術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”指飽和或不飽和的、非芳香性的環(huán)狀烴基團(tuán)，例如環(huán)己基或環(huán)己烯-3-基。術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)烷基”指具有至少一個(gè)環(huán)雜原子(例如N、O或S)的飽和或不飽和的、非芳香性的環(huán)狀基團(tuán)，例如4-四氫吡喃基或4-吡喃基。術(shù)語(yǔ)“芳基”指具有一個(gè)或多個(gè)芳環(huán)的烴基團(tuán)。芳基基團(tuán)的實(shí)例包括苯基(Ph)、亞苯基、萘基、亞萘基、芘基、蒽基和菲基。術(shù)語(yǔ)“雜芳基”指具有一個(gè)或多個(gè)含有至少一個(gè)雜原子(例如N、O或S)的芳環(huán)的基團(tuán)。雜芳基基團(tuán)的實(shí)例包括呋喃基、亞呋喃基、芴基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、咪唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、喹唑啉基、喹啉基、異喹啉基和吲哚基。
除非另有規(guī)定，本文提及的烷基、亞烷基、亞雜烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基和雜芳基包括取代和未取代的基團(tuán)。在環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基和雜芳基上的可能的取代基包括但不限于C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20環(huán)烯基、C3-C20雜環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烯基、C1-C10烷氧基、芳基、芳氧基、雜芳基、雜芳氧基、氨基、C1-C10烷基氨基、C1-C20二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、羥基、鹵素、硫代(thio)、C1-C10烷硫基、芳硫基、C1-C10烷基磺?；?、芳基磺酰基、酰氨基、氨?；被蝓；?、脒基、胍、脲基、氰基、硝基、?；⒘蝓；?、酰氧基、羧基和羧酸酯。另一方面，在烷基、亞烷基或亞雜烷基上可能的取代基包括除C1-C10烷基、C2-C10烯基和C2-C10炔基之外的所有上述的取代基。環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基和雜芳基也可以彼此稠合。
另一方面，本發(fā)明描述了以上所示的式(I)的嘧啶化合物或其鹽，其中X為-N(Ra)-或-O-；L1和L2各自獨(dú)立地為C1-C10亞烷基、C1-C10亞雜烷基、-C(O)-或不存在；L3為-N(Rb)-、C3-C20環(huán)烷基、芳基、雜芳基或不存在；R1為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、芳基、雜芳基、鹵素、CN、ORc、COORc、OC(O)Rc、C(O)Rc、C(O)NRcRd或NRcRd；R2和R3各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、鹵素、CN、ORe、COORe、OC(O)Re、C(O)Re、C(O)NReRf或NReRf；且R4和R5各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基；或者R4和R5一起為C1-C10亞烷基或C1-C10亞雜烷基；其中Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Rf各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
關(guān)于式(I)，剛才描述的嘧啶化合物的一個(gè)子集是其中X為-N(Ra)-；L1和L2各自獨(dú)立地為C1-C10亞烷基；L3不存在；R1為NRcRd，R2和R3各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、鹵素或C3-C20環(huán)烷基；且R4和R5各自獨(dú)立地為H或C3-C20環(huán)烷基；或者R4和R5一起為C1-C10亞烷基或C1-C10亞雜烷基的化合物。在這些化合物中，R5可以為

或者R4和R5一起為-CH2CH2-；Rc和Rd之一可以為被N(RR’)或芳基取代的C1-C10烷基，其中R和R’各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基(例如Rc和Rd之一為

或

)；R3可以為被C1-C10烷基取代的

，所述C1-C10烷基進(jìn)一步被C3-C20雜環(huán)烷基或OR取代，R為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
另一方面，本發(fā)明描述了用于治療炎癥性或免疫性疾病、發(fā)育性或退行性疾病或組織損傷的方法。該方法包括給藥有此需要的個(gè)體有效量的一種或多種以上所示的式(I)的嘧啶化合物。
術(shù)語(yǔ)“ 治療”指給藥個(gè)體一種或多種嘧啶化合物，所述個(gè)體具有上述的疾病、該疾病的癥狀或易患該疾病的傾向，其目的在于獲得治療效果，如治愈、減輕、改變、其作用、緩解或預(yù)防上述疾病、其癥狀或患有其的傾向。
炎癥性疾病以局部或全身性、急性或慢性炎癥為特征。實(shí)例包括視網(wǎng)膜病變、炎癥性皮膚病(例如皮炎、濕疹、特應(yīng)性皮炎、變應(yīng)性接觸性皮炎、蕁麻疹、壞死性血管炎、皮膚血管炎、過(guò)敏性血管炎、嗜酸細(xì)胞性肌炎、多肌炎、皮肌炎和嗜酸性筋膜炎)、炎癥性腸病(例如克隆氏病和潰瘍性結(jié)腸炎)、過(guò)敏性肺病(例如過(guò)敏性肺炎、嗜酸細(xì)胞性肺炎、延遲型過(guò)敏癥、間質(zhì)性肺病或ILD、特發(fā)性肺纖維化以及與類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎有關(guān)的ILD)、哮喘和變應(yīng)性鼻炎。
免疫性疾病以免疫系統(tǒng)的反應(yīng)過(guò)度或不足為特征。實(shí)例包括自身免疫性疾病(例如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、重癥肌無(wú)力、青少年型糖尿病、腎小球腎炎、自身免疫性甲狀腺炎、強(qiáng)直性脊柱炎、系統(tǒng)性硬化癥和多發(fā)性硬化癥)、急性和慢性炎癥性疾病(例如全身性過(guò)敏反應(yīng)或超敏反應(yīng)、藥物過(guò)敏、昆蟲(chóng)蜇傷過(guò)敏、包括同種異體移植物排斥和移植物抗宿主疾病在內(nèi)的移植排斥)、斯耶格倫氏綜合癥、人免疫缺陷病毒感染、癌癥(例如腦癌、乳癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、腎癌、卵巢癌、甲狀腺癌、肺癌和造血系統(tǒng)癌(haematopoietic cancer))以及瘤轉(zhuǎn)移。
發(fā)育性疾病為導(dǎo)致功能喪失或功能獲得的生長(zhǎng)或分化相關(guān)的病癥。退行性疾病通常指組織向更低或更少功能形式的改變。發(fā)育性或退行性疾病的實(shí)例包括脊髓性肌萎縮、杜興氏肌營(yíng)養(yǎng)不良、帕金森氏病和阿爾茨海默氏病。組織損傷可以由氧化應(yīng)激(例如中風(fēng)或心肌梗死中的缺血再灌注)、補(bǔ)體激活、移植排斥、化學(xué)品(例如酒精誘導(dǎo)的肝損傷或癌癥治療中粘膜組織損傷)、病毒感染(例如與丙型肝炎感染相關(guān)的腎小球損傷)和機(jī)械力(例如運(yùn)動(dòng)損傷)所引起。組織損傷的實(shí)例包括腦損傷、心臟損傷、肝損壞、骨骼肌損傷、腎損傷、胰腺損傷、肺損傷、皮膚損傷或胃腸道損傷。
也可以將上述的嘧啶化合物和一種或多種其它治療劑同時(shí)給藥至需要治療上述疾病的個(gè)體。這樣的治療劑的實(shí)例包括G-CSF生長(zhǎng)因子、甾體或非甾體抗炎藥、COX2抑制劑、白三烯受體抑制劑、前列腺素調(diào)節(jié)劑、TNF調(diào)節(jié)劑和免疫抑制劑(例如環(huán)胞菌素A)。術(shù)語(yǔ)“同時(shí)給藥”指在治療期間的相同時(shí)間或不同時(shí)間給藥嘧啶化合物和一種或多種其它治療劑。
另一方面，本發(fā)明描述了用于增強(qiáng)骨髓衍生細(xì)胞遷移至血液的方法。該方法包括給藥有此需要的個(gè)體有效量的一種或多種以上所示的式(I)的嘧啶化合物。術(shù)語(yǔ)“骨髓衍生細(xì)胞”指源白骨髓的細(xì)胞。骨髓衍生細(xì)胞的實(shí)例包括但不限于CD34+細(xì)胞和CD133+細(xì)胞。優(yōu)選地，骨髓衍生細(xì)胞為干細(xì)胞或內(nèi)皮祖細(xì)胞。
另一方面，本發(fā)明描述了一種化學(xué)合成方法。所述方法包括使式

的化合物與式

的化合物反應(yīng)，得到式(II)的化合物

在該式中，A為亞苯基、亞環(huán)己基、

或

R1、R2和R3各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、鹵素、CN、ORa、COORa、OC(O)Ra、C(O)Ra、C(O)NRaRb或NRaRb；R6為鹵素；且R7為氨基保護(hù)基(例如叔丁氧羰基、芐氧羰基、乙?；?、苯基羰基或三烷基甲硅烷基)；其中Ra和Rb各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或-C(O)R；R為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
所述方法可以進(jìn)一步包括使式(II)的化合物脫保護(hù)，得到式(III)的化合物

在式(III)化合物的一個(gè)子集中，R1為N(RaRb)，其中Ra和Rb各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。在這些化合物中，Ra和Rb之一可以為

或

在式(III)化合物的另一個(gè)子集中，其中R3為任選被C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基或芳基取代的
至于式(II)，當(dāng)R3為鹵素時(shí)，式(II)的化合物可以進(jìn)一步與式

的化合物反應(yīng)，得到式(IV)的化合物

在該式中，Y為-O-、-CH2-或-N(Rc)-，其中Rc為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或鹵素?？梢允故?IV)的化合物脫保護(hù)，得到式(V)的化合物

至于式(IV)，當(dāng)Y為NH時(shí)，式(IV)的化合物可以進(jìn)一步與式

的化合物反應(yīng)，得到式(IV)的化合物

其中Z為-CH2-或-C(O)-；Rd為C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基；且Re為鹵素?？梢允故?VI)的化合物脫保護(hù)，得到式(VII)的化合物

作為另一個(gè)實(shí)例，當(dāng)Y為NH時(shí)，式(IV)的化合物可以進(jìn)一步與式

的化合物反應(yīng)，得到亞胺化合物。然后，通過(guò)還原所述亞胺化合物，得到式(VI)的化合物。在式

中，Z為-C(O)-；Rd為C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基；且Re為H。作為另一個(gè)實(shí)例，當(dāng)Y為NH時(shí)，式(IV)的化合物可以進(jìn)一步與式

的化合物反應(yīng)，得到酯化合物，然后水解該酯化合物，得到式(VIII)的化合物

其中Rd為C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。可以使式(VIII)的化合物脫保護(hù)，得到式(IX)的化合物

作為進(jìn)一步的實(shí)例，當(dāng)Y為NH時(shí)，式(IV)的化合物可以進(jìn)一步與式

的化合物反應(yīng)，得到式(X)的化合物

其中Rd為C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基?？梢允故?X)的化合物脫保護(hù)，得到脫保護(hù)的化合物，然后水解該脫保護(hù)的化合物，得到式(XI)的化合物
至于式(II)，當(dāng)R3為鹵素時(shí)，式(II)的化合物可以進(jìn)一步與式RcOH的化合物反應(yīng)，得到式(XII)的化合物

其中Rc為C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基?？梢允故?XII)的化合物脫保護(hù)，得到式(XIII)的化合物
至于式(II)，當(dāng)R2為CN時(shí)，可以還原式(II)的化合物，得到式(XIV)的化合物

式(XIV)的化合物可以進(jìn)一步與式RcNH2的化合物反應(yīng)，得到亞胺化合物，然后還原該亞胺化合物，得到式(XV)的化合物

其中Rc為C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基?？梢允故?XV)的化合物脫保護(hù)，得到式(XVI)的化合物
另一方面，本發(fā)明描述了一種化學(xué)合成方法，其包括使式

的化合物與式

的化合物反應(yīng)，得到式(XVII)的化合物

在式(XVII)中，R1和R2各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、鹵素、CN、ORa、COORa、OC(O)Ra、C(O)Ra、C(O)NRaRb或NRaRb；R3為鹵素；且R6為氨基保護(hù)基；其中Ra和Rb各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或-C(O)R；R為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。所述方法可以進(jìn)一步包括保護(hù)式(XX)的化合物，然后使式(XVII)的被保護(hù)的化合物與式

的化合物反應(yīng)，得到式(XVIII)的化合物

在式(XVIII)中，R7為氨基保護(hù)基；且Y為-O-、-CH2-或-N(Rc)-，其中Rc為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或鹵素。
至于式(XVIII)，當(dāng)Y為NH時(shí)，所述方法可進(jìn)一步包括(1)使式(XVIII)的化合物與式

的化合物反應(yīng)，得到酯化合物；(2)水解該酯化合物，得到酸化合物；和(3)使該酸化合物脫保護(hù)，得到式(XIX)的化合物

其中Rd為C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基；且Re為鹵素。
另外，本發(fā)明包括一種藥物組合物，其包含有效量的至少一種上述嘧啶化合物和藥學(xué)可接受的載體。
上述嘧啶化合物包括化合物本身及其合適的鹽、前藥和溶劑合物。例如，鹽可以由陰離子和嘧啶化合物上的帶正電荷的基團(tuán)(例如氨基)形成。適宜的陰離子包括氯、溴、碘、硫酸根、硝酸根、磷酸根、檸檬酸根、甲磺酸根、三氟乙酸根、乙酸根、蘋(píng)果酸根、甲苯磺酸根、酒石酸根、富馬酸根、谷氨酸，谷氨酸根、葡糖醛酸根、乳酸根、戊二酸根和馬來(lái)酸根。此外，鹽也可以由陽(yáng)離子和嘧啶化合物上的帶負(fù)電的基團(tuán)(羧酸根)形成。適宜的陽(yáng)離子包括鈉離子、鉀離子、鎂離子、鈣離子和銨陽(yáng)離子，例如四甲基銨離子。所述嘧啶化合物還包括那些含有季氮原子的鹽。前藥的實(shí)例包括酯及其它藥學(xué)可接受的衍生物，當(dāng)將其給藥個(gè)體時(shí)，其能提供活性嘧啶化合物。溶劑合物指由活性嘧啶化合物和藥學(xué)可接受的溶劑形成的復(fù)合物。藥學(xué)可接受的溶劑的實(shí)例包括水、乙醇、異丙醇、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。
另外，用于治療上述疾病的包含一種或多種上述嘧啶化合物的組合物以及該組合物用于制備上述治療的藥物中的用途也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
在下面的具體實(shí)施方式
中詳細(xì)闡述了本發(fā)明的一種或多種實(shí)施方案。本發(fā)明的其它特征、目的和優(yōu)點(diǎn)從該實(shí)施方式和權(quán)利要求中將變得清楚。

具體實(shí)施例方式 下面顯示的是本發(fā)明的示例性化合物，化合物1-268
















以上描述的嘧啶化合物可以通過(guò)本領(lǐng)域公知的方法制備。以下實(shí)施例1-268提供了制備本發(fā)明的化合物1-268的詳細(xì)說(shuō)明。
如下所示的路線I描述了用于合成某些示例性化合物的一般合成路線。在該路線中，R1、R2、R3、R6和R7如發(fā)明內(nèi)容中所定義。特別地，含有鹵素基團(tuán)的嘧啶化合物與含有兩個(gè)被保護(hù)的氨基和一個(gè)未被保護(hù)的伯氨基反應(yīng)，得到式(2)的化合物，隨后通過(guò)除去所述氨基保護(hù)基而脫保護(hù)，得到式(3)的化合物。示例性的氨基保護(hù)基包括叔丁氧羰基、芐氧羰基、乙?；⒈交驶腿榛坠柰榛?。
路線I
可以以多種方式對(duì)式(2)的化合物進(jìn)行修飾，得到本發(fā)明的其它化合物。例如，如在以下路線II中所示，當(dāng)R3為鹵素時(shí)，式(2)的化合物與含有環(huán)氮原子的雜環(huán)化合物反應(yīng)，得到式(4)的化合物，隨后使其脫保護(hù)，得到式(5)的化合物。作為另一個(gè)實(shí)例，當(dāng)R3也為鹵素時(shí)，使式(2)的化合物與醇反應(yīng)，得到式(8)的化合物，隨后使其脫保護(hù)，得到式(9)的化合物。
路線II
如以下路線III中所示，當(dāng)R2為CN時(shí)，可以首先還原式(2)的化合物，得到含有醛基的式(10)的化合物。然后，可以使式(10)的化合物與伯胺反應(yīng)，得到式(11)的化合物，隨后使其脫保護(hù)，形成式(12)的化合物。
路線III
可以進(jìn)一步以多種方式對(duì)以上獲得的式(4)的化合物進(jìn)行修飾，得到本發(fā)明的其它化合物。例如，如在以下路線IV中所示，當(dāng)Y為NH時(shí)，使式(4)的化合物與含有鹵化物基團(tuán)、醛基團(tuán)或酰氯基團(tuán)的化合物反應(yīng)，得到式(6)的化合物，隨后使其脫保護(hù)，得到式(7)的化合物。作為另一個(gè)實(shí)例，當(dāng)Y為NH時(shí)，式(4)的化合物與α，β-不飽和酯反應(yīng)，然后水解，得到式(13)的化合物，隨后脫保護(hù)，得到式(14)的化合物。作為另一個(gè)實(shí)例，當(dāng)Y為NH時(shí)，式(4)的化合物與乙烯基膦酸酯反應(yīng)，得到式(15)的化合物。然后，使式(15)的化合物脫保護(hù)和水解，得到式(16)的化合物 路線IV
可以通過(guò)例如柱色譜法、高壓液相色譜或重結(jié)晶等方法來(lái)純化如此合成的嘧啶化合物。
其它的嘧啶化合物可以使用其它適宜的原料通過(guò)以上的合成路線和本領(lǐng)域已知的其它路線來(lái)制備。上述方法也可另外包括步驟，該步驟在本文所特定描述的步驟之前或之后，以加成或除去適宜的保護(hù)基使得最終合成嘧啶化合物。另外，可以以交替的次序或順序進(jìn)行多種合成步驟，以得到所需的化合物。對(duì)于合成可適用的嘧啶化合物有用的合成化學(xué)轉(zhuǎn)化和保護(hù)基方法(保護(hù)和脫保護(hù))是本領(lǐng)域已知的，其包括例如在下述文獻(xiàn)所述的那些R.Larock，Comprehensive Organic Transformations，VCH Publishers(1989)；T.W.Greene and P.G.M.Wuts，Protective Groupsin Organic Synthesis，2nd Ed.，John Wiley and Sons(1991)；L.Fieser and M.Fieser，F(xiàn)ieser and Fieser‘s Reagents for Organic Synthesis，John Wiley andSons(1994)；和L.Paquette，ed.，Encyclopedia of Reagents for OrganicSynthesis，John Wiley和Sons(1995)及其后續(xù)版本。
本文提及的嘧啶化合物可包含非芳香性的雙鍵和一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱中心。因此，它們可以作為外消旋物和外消旋混合物、單一對(duì)映體、單個(gè)非對(duì)映體、非對(duì)映體混合物以及順式或反式異構(gòu)形式存在。所有這些異構(gòu)體形式都被涵蓋。
包含有效量的至少一種上述的嘧啶化合物和藥物可接受的載體的藥物組合物也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。另外，本發(fā)明包括給藥有效量的一種或多種嘧啶化合物至患有上述發(fā)明內(nèi)容部分中描述的疾病的患者的方法。本發(fā)明還包括給藥有效量一種或多種所述嘧啶化合物用于增強(qiáng)骨髓衍生細(xì)胞遷移至血液的方法?！坝行Я俊敝笇?duì)治療個(gè)體產(chǎn)生治療效果所需的活性嘧啶化合物的量。如本領(lǐng)域技術(shù)人員所認(rèn)識(shí)到的，有效量可以根據(jù)受治療的疾病的類(lèi)型、給藥途徑、賦形劑的使用以及與其它治療共同使用的可能性而變化。
為實(shí)施本發(fā)明的方法，可將具有一種或多種嘧啶化合物的組合物經(jīng)腸胃外、口服、鼻、直腸、局部或口含(buccally)給藥。本文使用的術(shù)語(yǔ)“腸胃外”指皮下、皮內(nèi)、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸骨內(nèi)、鞘內(nèi)、損害部位內(nèi)或顱內(nèi)注射以及任何適宜的輸注技術(shù)。
無(wú)菌可注射用組合物可以是在無(wú)毒、腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的溶液或懸浮液，例如在1，3-丁二醇中的溶液。其中可以施用的可接受的賦形劑和溶劑為甘露糖醇、水、林格氏液和等滲氯化鈉溶液。此外，非揮發(fā)油通常作為溶劑或懸浮介質(zhì)(例如合成的單酸甘油酯或甘油二酯)施用。脂肪酸例如油酸及其甘油酯衍生物以及天然的藥學(xué)可接受的油例如橄欖油或蓖麻油，特別是它們的聚氧乙烯化形式可用于制備可注射用制劑。這些油溶液或懸浮液也可包含長(zhǎng)鏈醇稀釋劑或分散劑、羧甲基纖維素或類(lèi)似的分散劑。其它通常使用的表面活性劑例如吐溫或司盤(pán)或在制備藥學(xué)可接受的固體、液體或其它劑型中通常使用的其它類(lèi)似的乳化劑或生物利用增強(qiáng)劑也可以用于制劑的目的。
用于口服給藥的組合物可以是任何口服可接受的劑型，包括膠囊劑、片劑、乳劑和含水混懸劑、分散體及溶液劑。在片劑的情況下，通常使用的載體包括乳糖和玉米淀粉。典型地還添加潤(rùn)滑劑例如硬脂酸鎂。對(duì)于膠囊形式的口服給藥，有用的稀釋劑包括乳糖和干玉米淀粉。當(dāng)口服給藥含水混懸劑或乳劑時(shí)，可以將活性成分和乳化劑或混懸劑懸浮或溶解在油相中。如果需要的話，可以添加某些甜味劑、調(diào)味劑或著色劑。
可以根據(jù)藥物制劑領(lǐng)域眾所周知的技術(shù)制備鼻用氣霧或吸入組合物。例如，可以施用苯甲醇或其它適宜的防腐劑、用于增加生物利用度的吸收促進(jìn)劑、碳氟化合物和/或本領(lǐng)域已知的其它增溶劑或分散劑，將這些組合物制備成在生理鹽水中的溶液。
具有一種或多種活性嘧啶化合物的組合物也可以以用于直腸給藥的栓劑形式給藥。
在所述藥物組合物中的載體必須是“可接受的”，其意指它與所述組合物中的活性成分相容(且優(yōu)選能穩(wěn)定所述活性成分)，并且對(duì)受治療的個(gè)體無(wú)害?？梢允褂靡环N或多種增溶劑作為用于遞送活性嘧啶化合物的藥物賦形劑。其它載體的實(shí)例包括膠態(tài)二氧化硅、硬脂酸鎂、纖維素、十二烷基硫酸鈉和D&C Yellow#10。
上述嘧啶化合物治療上述疾病的功效可以通過(guò)體外測(cè)定(參見(jiàn)下述實(shí)施例269和270)進(jìn)行初步篩選，然后通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)和臨床試驗(yàn)來(lái)證實(shí)。其它方法對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員也將是清楚的。
以下具體實(shí)施例僅作例示用。而不以任何方式限制本發(fā)明公開(kāi)內(nèi)容的其余部分。不需要進(jìn)一步詳述，相信本領(lǐng)域技術(shù)人員基于本文的說(shuō)明書(shū)可以最大限度地利用本發(fā)明。本文中引用的所有出版物以其全部?jī)?nèi)容引入本文作為參考。
實(shí)施例1化合物1的制備
在0℃下，將六亞甲基亞胺(0.673g)緩慢地加入2，4-二氯嘧啶(1g)在THF(50mL)中的攪拌溶液中。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌2小時(shí)，使反應(yīng)物暖至室溫，保持過(guò)夜。然后濃縮溶液，得到殘余物，通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/5)純化，得到中間體1-I(1.234g)，收率86％。
用微波在120℃下加熱中間體1-I(0.46g)和三(2-氨基乙基)-胺(1.6g)在DMSO(2mL)中的溶液8小時(shí)。將所述溶液在CH2Cl2和H2O之間分配。分離有機(jī)層，然后濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/3)純化殘余物，得到中間體1-II(0.454g)，收率65％。
在室溫下，在短時(shí)間內(nèi)將環(huán)己酮(488mg)和NaBH(OAc)3(1320mg)加入中間體1-II(200)在CH2Cl2(50mL)中的攪拌溶液中。將所得溶液在室溫下攪拌8小時(shí)，然后用飽和NaHCO3水溶液終止反應(yīng)。分離水層，用CH2Cl2萃取。隨后，用水洗滌合并的有機(jī)層，干燥，過(guò)濾并濃縮，得到粗殘余物，通過(guò)硅膠色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/10)純化，得到化合物1(217mg)，收率72％。
CI-MS(M++1)486.4。
將1M鹽酸(6mL)和CH2Cl2(4ml)加入化合物1(217mg)中。將混合物在室溫下攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物1的鹽酸鹽(268mg)，收率95％。
實(shí)施例2化合物2的制備
在化合物1的制備中獲得中間體2-I。
用微波在120℃下加熱中間體2-I(200mg)和三-(2-氨基乙基)胺(70mg)在DMSO(2mL)中的溶液8小時(shí)。將溶液在CH2Cl2和H2O之間分配。分離有機(jī)層，然后濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(21％NH5(aq)/MeOH＝1/5)純化殘余物，得到中間體2-II(296mg)，收率63％。
在室溫下，在短時(shí)間內(nèi)將環(huán)己酮(234mg)和NaBH(OAc)3(506mg)加入中間體2-II(296mg)在CH2Cl2(30mL)中的攪拌溶液中。將所得溶液在室溫下攪拌8小時(shí)，然后用飽和NaHCO3水溶液終止反應(yīng)。分離水層，用CH2Cl2萃取。隨后，用水洗滌合并的有機(jī)層，干燥，過(guò)濾并濃縮，得到粗殘余物，通過(guò)硅膠色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/15)純化，得到化合物2(266mg)，收率77％。
CI-MS(M++1)579.4。
將1M鹽酸(6mL)和CH2Cl2(4ml)加入化合物2(266mg)中。將混合物在室溫下攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物2的鹽酸鹽(302mg)，收率91％。
實(shí)施例3化合物3的制備 用類(lèi)似于制備化合物1所使用的方法制備化合物3。
CI-MS(M++1)472.4。
實(shí)施例4化合物4的制備 用類(lèi)似于制備化合物1所使用的方法制備化合物4。
CI-MS(M++1)514.4。
實(shí)施例5化合物5的制備
將三-(2-氨基乙基)-胺(2.0g)和Boc2O(1.0g)在CH2C12(280mL)中的溶液在25℃下攪拌15小時(shí)，然后濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/MeOH＝1/1)純化所得殘余物，得到中間體5-I(2.04g)，收率43％。
在室溫下，在短時(shí)間內(nèi)將1-芐基-4-哌啶酮(2.177g)和NaBH(OAc)3(3.665g)加入中間體5-I(2.0g)在MeOH(30mL)中的攪拌溶液中。將所得溶液在室溫下攪拌8小時(shí)，然后用飽和NaHCO3水溶液終止反應(yīng)。分離水層，用CH2Cl2萃取。隨后，用水洗滌合并的有機(jī)層，干燥，過(guò)濾并濃縮，得到粗殘余物，通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/MeOH＝9/1)純化，得到中間體5-II(2.488g)，收率83％。
將20％TFA/CH2Cl2(20mL)溶液加入在CH2Cl2(10mL)中的中間體5-II(1.0g)中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/4)純化殘余物，得到中間體5-III(0.54g)，收率88％。
在室溫下，在短時(shí)間內(nèi)將環(huán)己酮(1,323mg)和NaBH(OAc)3(3,220mg)加入中間體5-III(540mg)在CH2Cl2(30mL)中的攪拌溶液中。將所得溶液在室溫下攪拌8小時(shí)，然后用飽和NaHCO3水溶液終止反應(yīng)。分離水層，用CH2Cl2萃取。隨后，用水洗滌合并的有機(jī)層，干燥，過(guò)濾并濃縮，得到粗殘余物，通過(guò)硅膠色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/10)純化，得到中間體5-IV(0.58g)，收率71％。
將中間體5-IV(580mg)、Boc2O(863mg)和Et3N(485mg)在CH2Cl2(150ml)中的溶液在25℃下攪拌15小時(shí)，然后濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/5)純化所得殘余物，得到中間體5-V(865mg)，收率92％。
在25℃和H2(氣球)下，將中間體5-V(865mg)和Pd/C(90mg)在MeOH(20ml)中的混合物攪拌15小時(shí)，然后通過(guò)硅藻土柱過(guò)濾，并濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/MeOH＝15/1)純化所得殘余物，得到中間體5-VI(681mg)，收率89％。
將二異丙基乙胺(0.1mL)加入5-VII(30mg；在化合物1的制備中獲得)和中間體5-VI(100mg)在1-戊醇(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在140℃下攪拌過(guò)夜。然后在真空下除去溶劑，通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/1)純化所得殘余物，得到中間體5-VIII(76mg)，收率61％。
將20％TFA/CH2Cl2(2mL)溶液加入在CH2Cl2(1mL)中的中間體5-VIII(76mg)中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。將1M鹽酸(2mL)和CH2Cl2(1mL)加入所得殘余物中。將混合物在室溫下攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物5的鹽酸鹽(81mg)，收率85％。
CI-MS(M++1)569.5。
實(shí)施例6化合物6的制備 用類(lèi)似于制備化合物1所使用的方法制備化合物6。
CI-MS(M++1)572.5。
實(shí)施例7化合物7的制備 用類(lèi)似于制備化合物1所使用的方法制備化合物7。
CI-MS(M++1)458.4。
實(shí)施例8化合物8的制備
將4-氰基苯甲醛(5g)和N-環(huán)己基-1，3-丙二胺(6g)在CH3OH(100mL)中的溶液加熱至60℃，保持6小時(shí)。冷卻至室溫后，將NaBH4(2.5g)緩慢地加入以上溶液中。再攪拌混合物30分鐘。然后濃縮混合物，用NH4Cl(aq)終止反應(yīng)，用CH2Cl2萃取。合并有機(jī)層，用無(wú)水MgSO4干燥并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/Et3N＝4/1)純化殘余物，得到中間體8-I(7.2g)，收率70％。
將中間體8-I(7.2g)和Boc2O(17.3g)在CH2Cl2(280ml)中的溶液在25℃下攪拌15小時(shí)，然后濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/1)純化所得殘余物，得到中間體8-II，為黃色油狀物(10.6g，收率85％)。
首先，將中間體8-II(4.7g)和NiCl2(64mg)在CH3OH(100ml)中的溶液在25℃下攪拌。冷卻至0℃后，緩慢地加入NaBH4(1.83g)，再攪拌混合物15小時(shí)。濃縮溶液，用NH4Cl(aq)終止反應(yīng)，用CH2Cl2萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，過(guò)濾，用無(wú)水MgSO4干燥并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/19)純化殘余物，得到中間體8-III(2.36g)，收率50％。
將二異丙基乙胺(0.1mL)加入2-氯-6-甲基-4-二甲基氨基嘧啶(110mg)和中間體8-III(150mg)在1-戊醇(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在150℃下攪拌過(guò)夜。在真空下除去溶劑，通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/1)純化，得到中間體8-IV(88mg)，收率47％。
將20％TFA/CH2Cl2(2mL)溶液加入在CH2Cl2(1mL)中的中間體8-IV(88mg)中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。將1M鹽酸(2mL)和CH2Cl2(1mL)加入所得殘余物中。將混合物在室溫下攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物8的鹽酸鹽(60mg)，收率80％。
CI-MS(M++1)411.3。
實(shí)施例9化合物9的制備
將N-環(huán)己基-1，3-丙二胺(2.6g)、Et3N(3.8mL)和2，4，6-三氯嘧啶(1g)在THF(50mL)中的溶液在60℃下攪拌過(guò)夜，并通過(guò)在真空下除去溶劑來(lái)濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝5/95)純化殘余物，得到化合物9(1.7g)，收率75％。
CI-MS(M++1)423.3。
將1M鹽酸(3mL)和CH2Cl2(2ml)加入化合物9(100mg)中。將混合物在室溫下攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物9的鹽酸鹽(130mg)，收率97％。
實(shí)施例10化合物10的制備
在室溫下，將N-環(huán)己基-1，3-丙二胺(0.808g)緩慢地加入2，4，6-三氯嘧啶(1g)在THF(50mL)中的攪拌溶液中。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌2小時(shí)，使反應(yīng)物暖至室溫，保持過(guò)夜。然后濃縮溶液，得到殘余物，通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/2)純化，得到中間體10-I(1.386g)，收率60％。
將中間體10-I(500mg)和Boc2O(770mg)在CH2Cl2(15mL)中的溶液在25℃下攪拌過(guò)夜。然后濃縮溶液，通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/9)純化所得殘余物，得到中間體10-II(590mg)，收率80％。
將二異丙基乙胺(0.25mL)加入中間體10-II(590mg)、實(shí)施例8中制備的中間體8-III(700mg)和NaI(260mg)在1-戊醇(20mL)中的溶液中。然后將反應(yīng)混合物在120℃下攪拌24小時(shí)，然后通過(guò)在真空下除去溶劑濃縮。將所得殘余物溶于CH2Cl2中，用水洗滌，用無(wú)水MgSO4干燥并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/10)純化所得殘余物，得到中間體10-III(865mg)，收率70％。
將20％TFA/CH2Cl2(3mL)溶液加入中間體10-III(150mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。將1M鹽酸(3mL)和CH2Cl2(2mL)加入殘余物中。將混合物在室溫下再攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物10的鹽酸鹽(107mg)，收率80％。
CI-MS(M++1)542.4。
實(shí)施例11化合物11的制備
在室溫下，緩慢地將N-環(huán)己基-1，3-丙二胺(0.808g)加入2，4，6-三氯嘧啶(1g)在THF(50mL)中的攪拌溶液中。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌2小時(shí)，使反應(yīng)物暖至室溫，保持過(guò)夜。然后濃縮溶液，得到殘余物，通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/4)純化，得到中間體11-I(0.349g)，收率21％。
將中間體11-I(349mg)和Boc2O(540mg)在CH2Cl2(15mL)中的溶液在25℃下攪拌過(guò)夜。然后濃縮溶液，并將所得殘余物通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/10)純化，得到中間體11-II(400)，收率86％。(CI-MS(M++1)403.4)。
將二異丙基乙胺(0.17mL)加入中間體11-II(400mg)、(在實(shí)施例8中制備的)中間體8-III(475mg)和NaI(176mg)在1-戊醇(20mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在120℃下攪拌24小時(shí)，然后通過(guò)在真空下除去溶劑濃縮。將所得殘余物溶于CH2Cl2中，用水洗滌，用無(wú)水MgSO4干燥并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/1)純化所得殘余物，得到中間體11-III(427mg)，收率51％。
將20％TFA/CH2Cl2(4mL)溶液加入中間體1l-III(200mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。將1M鹽酸(5mL)和CH2Cl2(2mL)加入殘余物中。將混合物在室溫下再攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物11的鹽酸鹽(117mg)，收率91％。
CI-MS(M++1)542.4。
實(shí)施例12化合物12的制備 用類(lèi)似于制備化合物8所使用的方法制備化合物12。
CI-MS(M++1)422。
實(shí)施例13化合物13的制備 用類(lèi)似于制備化合物10所使用的方法制備化合物13。
CI-MS(M++1)508.4。
實(shí)施例14化合物14的制備 用類(lèi)似于制備化合物8所使用的方法制備化合物14。
CI-MS(M++1)387。
實(shí)施例15化合物15的制備 用類(lèi)似于制備化合物8所使用的方法制備化合物15。
CI-MS(M++1)403。
實(shí)施例16化合物16的制備 用類(lèi)似于制備化合物8所使用的方法制備化合物16。
CI-MS(M++1)354.3。
實(shí)施例17化合物17的制備 用類(lèi)似于制備化合物11所使用的方法制備化合物17。
CI-MS(M++1)522.4。
實(shí)施例18化合物18的制備 用類(lèi)似于制備化合物10所使用的方法制備化合物18。
CI-MS(M++1)522.4。
實(shí)施例19化合物19的制備 用類(lèi)似于制備化合物11所使用的方法制備化合物19。
CI-MS(M++1)522.4。
實(shí)施例20化合物20的制備
中間體20-I作為在化合物15的制備中的中間體獲得。將NaH(110mg)加入中間體20-I(200mg)和苯酚(250mg)在DMSO(3mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在25℃下攪拌1小時(shí)。然后在微波下于120℃下加熱混合物8小時(shí)，冷卻至室溫，通過(guò)除去溶劑濃縮。將所得殘余物溶于CH2Cl2中，用飽和NaHCO3水溶液洗滌，用無(wú)水MgSO4干燥并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/1)純化殘余物，得到中間體20-II(65mg)，收率30％。
將在CH2Cl2(1mL)中的中間體20-II(65mg)加入20％TFA/CH2Cl2(2mL)溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。隨后，將1M鹽酸(2mL)和CH2Cl2(1mL)加入殘余物中。將混合物在室溫下攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物20的鹽酸鹽(45mg)，收率80％。
CI-MS(M++1)461.3。
實(shí)施例21化合物21的制備
中間體21-I作為在化合物20的制備中的中間體獲得。
將21-I(2g)和哌嗪(10g)在1-戊醇(3mL)中的溶液在120℃下攪拌4小時(shí)，并通過(guò)在真空下除去溶劑濃縮。將得到的混合物溶于CHCl3中，用水洗滌，用無(wú)水MgSO4干燥并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/99)純化殘余物，得到中間體21-II(1.5g)，收率60％。
將20％TFA/CH2Cl2(3mL)溶液加入中間體20-II(130mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，然后通過(guò)除去溶劑濃縮。將1M鹽酸(3mL)和CH2Cl2(2mL)加入所得殘余物中。將混合物在室溫下再攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物21的鹽酸鹽(90mg)，收率80％。
CI-MS(M++1)453.3。
實(shí)施例22化合物22的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物22。
CI-MS(M++1)497.4。
實(shí)施例23化合物23的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物23。
CI-MS(M++1)467.4。
實(shí)施例24化合物24的制備 用類(lèi)似于制備化合物10所使用的方法制備化合物24。
CI-MS(M++1)522.4。
實(shí)施例25化合物25的制備 用類(lèi)似于制備化合物11所使用的方法制備化合物25。
CI-MS(M++1)466.4。
實(shí)施例26化合物26的制備 用類(lèi)似于制備化合物8所使用的方法制備化合物26。
CI-MS(M++1)394.3。
實(shí)施例27化合物27的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物27。
CI-MS(M++1)454.3。
實(shí)施例28化合物28的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物28。
CI-MS(M++1)452.3。
實(shí)施例29化合物29的制備
中間體29-I作為在化合物26的制備中的中間體獲得。
在-70～-78℃和N2(g)下，將1M DIBAL/乙醚(8.35mL)加入中間體29-I(1.24g)在無(wú)水甲苯(100mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在該溫度下攪拌2小時(shí)。然后在-60～-70℃下，將5％HCl(aq)(9mL)加入溶液中，并在將反應(yīng)溫度升高至25℃后，再將混合物攪拌0.5小時(shí)。向溶液中加入CH2Cl2(100mL)和H2O。用CH2Cl2萃取水層兩次。合并有機(jī)層，用無(wú)水MgSO4干燥，并通過(guò)在真空下除去溶劑濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/2)純化所得殘余物，得到中間體29-II(620mg)，收率50％。
在60℃下，加熱色胺(99mg)和中間體29-II(170mg)在CH3OH(6mL)中的溶液6小時(shí)。冷卻至室溫后，將NaBH4(20mg)緩慢地加入溶液中，再攪拌混合物30分鐘。濃縮混合物，用NH4Cl(aq)終止反應(yīng)，并用CH2Cl2萃取。用無(wú)水MgSO4干燥有機(jī)層并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/MeOH＝9/1)純化殘余物，得到中間體29-III(150mg)，收率70％。
將在CH2Cl2(2ml)中的中間體29-III(150mg)加入20％TFA/CH2Cl2(3mL)溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。將1M鹽酸(3mL)和CH2Cl2(2mL)加入以上殘余物中。將混合物在室溫下再攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物29的鹽酸鹽(92mg)，收率70％。
CI-MS(M++1)541.4。
實(shí)施例30化合物30的制備 用類(lèi)似于制備化合物29所使用的方法制備化合物30。
CI-MS(M++1)528.3。
實(shí)施例31化合物31的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物31。
CI-MS(M++1)481.4。
實(shí)施例32化合物32的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物32。
CI-MS(M++1)547.4。
實(shí)施例33化合物33的制備
中間體33-I作為在化合物21的制備中的中間體獲得。
將二異丙基乙胺(0.1mL)和環(huán)己烷碳酰氯(55mg)加入中間體33-I(200mg)在CH2Cl2(10mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，然后通過(guò)除去溶劑濃縮。將得到的混合物溶于CHCl3中，用水洗滌，用無(wú)水MgSO4干燥并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/1)純化殘余物，得到中間體33-II(140mg)，收率60％。
將20％TFA/CH2Cl2(3mL)溶液加入中間體33-II(140mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。將1M鹽酸(3mL)和CH2Cl2(2mL)加入殘余物中。在室溫下再攪拌得到的混合物10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物33的鹽酸鹽(100mg)，收率80％。
CI-MS(M++1)563.4。
實(shí)施例34化合物34的制備
中間體34-I作為在化合物21的制備中的中間體獲得。首先，將中間體34-I(166mg)溶于CH3CN(10mL)中。然后將2-氯甲基苯并咪唑(42mg)和K2CO3(79mg)加入以上溶液中。將混合物在室溫下攪拌48小時(shí)后，過(guò)濾并濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/MeOH＝10/1)純化所得殘余物，得到中間體34-II(70mg)，收率35％。
將20％TFA/CH2Cl2(2mL)溶液加入中間體34-II(70mg)在CH2Cl2(1mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。將1M鹽酸(2mL)和CH2Cl2(1mL)加入所得殘余物中。將混合物在室溫下再攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物34的鹽酸鹽(50mg)，收率80％。
CI-MS(M++1)583.4。
實(shí)施例35化合物35的制備
中間體35-I作為在化合物21的制備中的中間體獲得。
將NaBH(OAc)3(215mg)加入中間體35-I(166mg)在MeOH(10mL)和環(huán)己烷甲醛(57mg)中的溶液中。然后加入幾滴乙酸。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌48小時(shí)，并通過(guò)蒸餾除去溶劑濃縮。將得到的混合物溶于CH2Cl2中，并用飽和NaHCO3水溶液終止反應(yīng)。分離水層，用CH2Cl2萃取。隨后，用水洗滌合并的有機(jī)層，用無(wú)水MgSO4干燥，過(guò)濾并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝2/1)純化殘余物，得到中間體35-II(120mg)，收率65％。
將20％TFA/CH2Cl2(3mL)溶液加入中間體35-II(120mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。將1M鹽酸(3mL)和CH2Cl2(2mL)加入殘余物中。將混合物在室溫下再攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物35的鹽酸鹽(85mg)，收率80％。
CI-MS(M++1)549.4。
實(shí)施例36化合物36的制備 用類(lèi)似于制備化合物35所使用的方法制備化合物36。
CI-MS(M++1)543.4。
實(shí)施例37化合物37的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物37。
CI-MS(M++1)563.4。
實(shí)施例38化合物38的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物38。
CI-MS(M+H+1)564.4。
實(shí)施例39化合物39的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物39。
CI-MS(M++1)566.4。
實(shí)施例40化合物40的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物40。
CI-MS(M++1)587.4。
實(shí)施例41化合物41的制備 用類(lèi)似于制備化合物33所使用的方法制備化合物41。
CI-MS(M++1)523.4。
實(shí)施例42化合物42的制備 用類(lèi)似于制備化合物33所使用的方法制備化合物42。
CI-MS(M++1)557.4。
實(shí)施例43化合物43的制備
使用苯甲胺(645mg)作為原料以類(lèi)似于在實(shí)施例10第一段中描述的方法制備中間體43-I，收率45％。
將二異丙基乙胺(0.27mL)加入中間體43-I(625mg)、實(shí)施例8中制備的中間體8-III(741mg)和NaI(275mg)在1-戊醇(20mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在120℃下攪拌24小時(shí)，并通過(guò)在真空下除去溶劑濃縮。將得到的混合物溶于CH2Cl2中，用水洗滌，用無(wú)水MgSO4干燥并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/3)純化殘余物，得到中間體43-II(1,100mg)，收率65％。
將中間體43-II(200mg)和N-甲基哌嗪(2,000mg)在1-戊醇(1mL)中的溶液在120℃下攪拌4小時(shí)。然后在真空下除去溶劑。將得到的混合物溶于CHCl3中，用水洗滌，用無(wú)水MgSO4干燥并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/MeOH＝20/1)純化殘余物，得到中間體43-III(215mg)，收率70％。
將20％TFA/CH2Cl2(4mL)溶液加入中間體43-III(215mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。將1M鹽酸(4mL)和CH2Cl2(2mL)加入殘余物中。將混合物在室溫下再攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物43的鹽酸鹽(150mg)，收率80％。
CI-MS(M++1)557.4。
實(shí)施例44化合物44的制備
將1-甲基哌嗪(0.76g)和Et3N(0.8mL)加入2，4-二氯-6-甲基嘧啶(1g)在EtOH(60mL)中的溶液中。將反應(yīng)溶液在0℃下攪拌1小時(shí)，然后在3小時(shí)內(nèi)使其暖至室溫。然后濃縮溶液，得到殘余物，通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/MeOH＝6/1)純化，得到中間體44-I(0.76g)，收率55％。
將二異丙基乙胺(0.25mL)加入中間體44-I(300mg)、實(shí)施例8中制備的中間體8-III(689mg)和NaI(260mg)在1-戊醇(20mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在120℃下攪拌24小時(shí)，并通過(guò)在真空下濃縮。將得到的混合物溶于CH2Cl2中，用水洗滌，用無(wú)水MgSO4干燥并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/MeOH＝5/1)純化殘余物，得到中間體44-II(530mg)，收率60％。
將20％TFA/CH2Cl2(3mL)溶液加入化合物中間體44-II(150mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。將1M鹽酸(3mL)和CH2Cl2(2mL)加入殘余物中。將混合物在室溫下再攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物44的鹽酸鹽(100mg)，收率80％。
CI-MS(M++1)466.4。
實(shí)施例45化合物45的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物45。
CI-MS(M++1)493.3。
實(shí)施例46化合物46的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物46。
CI-MS(M++1)587.4。
實(shí)施例47化合物47的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物47。
CI-MS(M++1)549.4。
實(shí)施例48化合物48的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物48。
CI-MS(M++1)524.4。
實(shí)施例49化合物49的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物49。
CI-MS(M++1)521.4。
實(shí)施例50化合物50的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物50。
CI-MS(M++1)550.4。
實(shí)施例51化合物51的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物51。
CI-MS(M++1)580.4。
實(shí)施例52化合物52的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物52。
CI-MS(M++1)567.4。
實(shí)施例53化合物53的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物53。
CI-MS(M++1)542.4。
實(shí)施例54化合物54的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物54。
CI-MS(M++1)548.4。
實(shí)施例55化合物55的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物55。
CI-MS(M++1)520.4。
實(shí)施例56化合物56的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物56。
CI-MS(M++1)562.5。
實(shí)施例57化合物57的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物57。
CI-MS(M++1)508.4。
實(shí)施例58化合物58的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物58。
CI-MS(M++1)496.4。
實(shí)施例59化合物59的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物59。
CI-MS(M++1)534.4。
實(shí)施例60化合物60的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物60。
CI-MS(M++1)556.4。
實(shí)施例61化合物61的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物61。
CI-MS(M++1)618.4。
實(shí)施例62化合物62的制備
將1-(二苯基甲基)哌嗪(3.78g)和Et3N(2.3mL)加入2，4-二氯-6-甲基嘧啶(2.43g)在EtOH(200mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，然后在15小時(shí)內(nèi)使其暖至室溫。然后濃縮溶液，得到殘余物，通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/5)純化，得到中間體62-I(4.0g)，收率70％。
將二異丙基乙胺(4.09g)加入中間體92-I(4.0)、實(shí)施例8中制備的中間體8-III(5.29g)和NaI(2.38g)在1-戊醇(10mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在140℃下攪拌15小時(shí)，并通過(guò)在真空下除去溶劑濃縮。將得到的混合物溶于CH2Cl2中，用水洗滌，用無(wú)水MgSO4干燥并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/1)純化殘余物，得到中間體62-II(2.7g)，收率31％。
在60℃和H2(氣球)下，將中間體62-II(2.7g)和Pd/C(2.0g)在異丙醇(30ml)中的溶液攪拌3小時(shí)，然后通過(guò)硅藻土柱過(guò)濾，并濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/MeOH＝10/1)純化所得殘余物，得到中間體62-III(1.1g)，收率50％。
首先，將中間體62-III(200mg)溶于CH3CN(10mL)中。然后將2-氯甲基苯并咪唑(51mg)和K2CO3(86mg)加入以上溶液中。將混合物在室溫下攪拌48小時(shí)后，過(guò)濾并濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/MeOH＝10/1)純化所得殘余物，得到中間體62-IV(100mg)，收率42％。
將20％TFA/CH2Cl2(3mL)溶液加入中間體62-IV(100mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。將1M鹽酸(3mL)和CH2Cl2(2mL)加入殘余物中。將混合物在室溫下再攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物62的鹽酸鹽(100mg)，收率84％。
CI-MS(M++1)582.4。
實(shí)施例63化合物63的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物63。
CI-MS(M++1)572.4。
實(shí)施例64化合物64的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物64。
CI-MS(M++1)576.4。
實(shí)施例65化合物65的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物65。
CI-MS(M++1)525.4。
實(shí)施例66化合物66的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物66。
CI-MS(M++1)535.4。
實(shí)施例67化合物67的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物67。
CI-MS(M++1)569.4。
實(shí)施例68化合物68的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物68。
CI-MS(M++1)525.4。
實(shí)施例69化合物69的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物69。
CI-MS(M++1)547.3。
實(shí)施例70化合物70的制備
中間體70-I在化合物21的制備中獲得。
將中間體70-I(150mg)、3-苯氧基苯基異氰酸酯(48mg)和Et3N(46mg)在CH2Cl2(15ml)中的溶液在25℃下攪拌過(guò)夜，然后濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/MeOH＝20/1)純化所得殘余物，得到中間體70-II(163mg)，收率82％。
將20％TFA/CH2Cl2(3mL)溶液加入中間體70-II(163mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。將1M鹽酸(3mL)和CH2Cl2(2mL)加入殘余物中。將混合物在室溫下再攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物70的鹽酸鹽(164mg)，收率86％。
CI-MS(M++1)664.4。
實(shí)施例71化合物71的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物71。
CI-MS(M++1)597.4。
實(shí)施例72化合物72的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物72。
CI-MS(M++1)468.3。
實(shí)施例73化合物73的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物73。
CI-MS(M++1)530.4。
實(shí)施例74化合物74的制備 用類(lèi)似于制備化合物35所使用的方法制備化合物74。
CI-MS(M++1)523.4。
實(shí)施例75化合物75的制備 用類(lèi)似于制備化合物35所使用的方法制備化合物75。
CI-MS(M++1)537.4。
實(shí)施例76化合物76的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物76。
CI-MS(M++1)566.4。
實(shí)施例77化合物77的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物77。
CI-MS(M++1)386。
實(shí)施例78化合物78的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物78。
CI-MS(M++1)565.4。
實(shí)施例79化合物79的制備 用類(lèi)似于制備化合物70所使用的方法制備化合物79。
CI-MS(M++1)640.4。
實(shí)施例80化合物80的制備 用類(lèi)似于制備化合物33所使用的方法制備化合物80。
CI-MS(M++1)537.4。
實(shí)施例81化合物81的制備 用類(lèi)似于制備化合物33所使用的方法制備化合物81。
CI-MS(M++1)537.4。
實(shí)施例82化合物82的制備 用類(lèi)似于制備化合物33所使用的方法制備化合物82。
CI-MS(M++2)521.4。
實(shí)施例83化合物83的制備 用類(lèi)似于制備化合物33所使用的方法制備化合物83。
CI-MS(M++2)586.4。
實(shí)施例84化合物84的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物84。
CI-MS(M++1)524.4。
實(shí)施例85化合物85的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物85。
CI-MS(M++2)546.3。
實(shí)施例86化合物86的制備 用類(lèi)似于制備化合物70所使用的方法制備化合物86。
CI-MS(M++1)552.4。
實(shí)施例87化合物87的制備 用類(lèi)似于制備化合物35所使用的方法制備化合物87。
CI-MS(M++1)523.4。
實(shí)施例88化合物88的制備 用類(lèi)似于制備化合物35所使用的方法制備化合物88。
CI-MS(M++1)509.4。
實(shí)施例89化合物89的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物89。
CI-MS(M++1)475.3。
實(shí)施例90化合物90的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物90。
CI-MS(M++1)453.4。
實(shí)施例91化合物91的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物91。
CI-MS(M++1)494.4。
實(shí)施例92化合物92的制備 用類(lèi)似于制備化合物34所使用的方法制備化合物92。
CI-MS(M++1)601.4。
實(shí)施例93化合物93的制備 用類(lèi)似于制備化合物34所使用的方法制備化合物93。
CI-MS(M++1)535.4。
實(shí)施例94化合物94的制備 用類(lèi)似于制備化合物33所使用的方法制備化合物94。
CI-MS(M++1)577.4。
實(shí)施例95化合物95的制備
中間體95-I在化合物21的制備中獲得。
將中間體95-I(150mg)、三氟乙酸酐(240mg)和Et3N(230mg)在CH2Cl2(10ml)中的溶液在25℃下攪拌過(guò)夜，然后濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/MeOH＝20/1)純化所得殘余物，得到中間體95-II(148mg)，收率76％。
將20％TFA/CH2Cl2(3mL)溶液加入化合物95-II(148mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。將1M鹽酸(3mL)和CH2Cl2(2mL)加入殘余物中。將混合物在室溫下再攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物95的鹽酸鹽(127mg)，收率92％。
CI-MS(M++1)645.3。
實(shí)施例96化合物96的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物96。
CI-MS(M++1)515.4。
實(shí)施例97化合物97的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物97。
CI-MS(M++1)519.3。
實(shí)施例98化合物98的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物98。
CI-MS(M++1)511.3。
實(shí)施例99化合物99的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物99。
CI-MS(M++1)459.3。
實(shí)施例100化合物100的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物100。
CI-MS(M++1)638.5。
實(shí)施例101化合物101的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物101。
CI-MS(M++1)605.5。
實(shí)施例102化合物102的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物102。
CI-MS(M++1)553.4。
實(shí)施例103化合物103的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物103。
CI-MS(M++1)549.4。
實(shí)施例104化合物104的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物104。
CI-MS(M++1)523.4。
實(shí)施例105化合物105的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物105。
CI-MS(M++1)524.4。
實(shí)施例106化合物106的制備 用類(lèi)似于制備化合物33所使用的方法制備化合物106。
CI-MS(M++1)580.4。
實(shí)施例107化合物107的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物107。
CI-MS(M++1)580.4。
實(shí)施例108化合物108的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物108。
CI-MS(M++1)563.4。
實(shí)施例109化合物109的制備
中間體109-I在化合物21的制備中獲得。
將中間體109-I(100mg)、異丙基磺酰氯(35mg)和Et3N(30mg)在CH2Cl2(10ml)中的溶液在25℃下攪拌過(guò)夜，然后濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/MeOH＝20/1)純化所得殘余物，得到中間體109-II(100mg)，收率86％。
將20％TFA/CH2Cl2(3mL)溶液加入化合物109-II(100mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。將1M鹽酸(3mL)和CH2Cl2(2mL)加入殘余物中。將混合物在室溫下再攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物109的鹽酸鹽(80mg)，收率87％。
CI-MS(M++1)559.3。
實(shí)施例110化合物110的制備 用類(lèi)似于制備化合物70所使用的方法制備化合物110。
CI-MS(M++1)602.4。
實(shí)施例111化合物111的制備 用類(lèi)似于制備化合物70所使用的方法制備化合物111。
CI-MS(M++1)582.4。
實(shí)施例112化合物112的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物112。
CI-MS(M++1)537.4。
實(shí)施例113化合物113的制備 用類(lèi)似于制備化合物33的方法制備化合物113。
CI-MS(M++1)563.4。
實(shí)施例114化合物114的制備
將4-(叔丁氧羰基氨基-甲基)苯甲酸(1,000mg)溶于CH2Cl2(50mL)中。將N-環(huán)己基-1，3-丙二胺(745mg)、1-羥基苯并-三唑水合物(HOBt，645mg)、4-甲基嗎啉(1,607mg)和1-(3-(二甲基氨基)丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC，740mg)順次加入以上溶液中。將反應(yīng)混合物在25℃下攪拌18小時(shí)，然后在水(150mL)和EtOAc(2×150mL)之間分配。用Na2SO4干燥合并的有機(jī)層，并濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/MeOH＝20/1)純化所得殘余物，得到中間體114-I(1,000mg)，收率65％。
在25℃下，將HCl在乙醚中的溶液(1.0M，20mL)加入114-I(1,000mg)在MeOH(10mL)中的溶液中。將混合物在室溫下攪拌12小時(shí)。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到中間體114-II的鹽酸鹽(743mg)，收率73％。
將二異丙基乙胺(134mg)加入中間體114-II(250mg)、實(shí)施例90中制備的中間體90-I(184mg)和NaI(22mg)在1-戊醇(5mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在140℃下攪拌15小時(shí)，并通過(guò)在真空下除去溶劑濃縮。將得到的混合物溶于CH2Cl2中，用水洗滌，用無(wú)水MgSO4干燥并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/15)純化殘余物，得到化合物114(213mg)，收率53％。
CI-MS(M++1)467.3。
實(shí)施例115化合物115的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物115。
CI-MS(M++1)536.4。
實(shí)施例116化合物116的制備
中間體116-I在化合物62的制備中獲得。
將Et3N(0.18mL)和環(huán)丙基碳酰氯(96mg)加入中間體116-I(200mg)在CH2Cl2(10mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，然后通過(guò)除去溶劑濃縮。將得到的混合物溶于CHCl3中，用水洗滌，用無(wú)水MgSO4干燥并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/1)純化殘余物，得到中間體116-II(126mg)，收率57％。
將20％TFA/CH2Cl2(3mL)溶液加入中間體116-II(126mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。將1M鹽酸(3mL)和CH2Cl2(2mL)加入殘余物中。在室溫下再攪拌得到的混合物10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物116的鹽酸鹽(93mg)，收率80％。
CI-MS(M++1)520.4。
實(shí)施例117化合物117的制備
中間體117-I在化合物62的制備中獲得。
將中間體117-I(200mg)、環(huán)己基異氰酸酯(42mg)和Et3N(62mg)在CH2Cl2(10ml)中的溶液在25℃下攪拌過(guò)夜，然后濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/MeOH＝20/1)純化所得殘余物，得到中間體117-II(172mg)，收率72％。
將20％TFA/CH2Cl2(3mL)溶液加入化合物117-II(172mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。將1M鹽酸(3mL)和CH2Cl2(2mL)加入殘余物中。將混合物在室溫下再攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物117的鹽酸鹽(145mg)，收率91％。
CI-MS(M++1)577.4。
實(shí)施例118化合物118的制備 用類(lèi)似于制備化合物117所使用的方法制備化合物118。
CI-MS(M++1)551.4。
實(shí)施例119化合物119的制備 用類(lèi)似于制備化合物116所使用的方法制備化合物119。
CI-MS(M++1)565.4。
實(shí)施例120化合物120的制備 用類(lèi)似于制備化合物117所使用的方法制備化合物120。
CI-MS(M++1)551.4。
實(shí)施例121化合物121的制備
中間體121-I在化合物62的制備中獲得。
將中間體121-I(200mg)、三氟乙酸酐(257mg)和Et3N(155mg)在CH2Cl2(10ml)中的溶液在25℃下攪拌過(guò)夜，然后濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/MeOH＝15/1)純化所得殘余物，得到中間體121-II(163mg)，收率71％。
將20％TFA/CH2Cl2(3mL)溶液加入化合物121-II(163mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。將1M鹽酸(3mL)和CH2Cl2(2mL)加入殘余物中。將混合物在室溫下再攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物121的鹽酸鹽(127mg)，收率84％。
CI-MS(M++1)548.3。
實(shí)施例122化合物122的制備 用類(lèi)似于制備化合物62所使用的方法制備化合物122。
CI-MS(M++1)600.4。
實(shí)施例123化合物123的制備 用類(lèi)似于制備化合物62所使用的方法制備化合物123。
CI-MS(M++1)520.4。
實(shí)施例124化合物124的制備 用類(lèi)似于制備化合物117所使用的方法制備化合物124。
CI-MS(M++1)567.4。
實(shí)施例125化合物125的制備 用類(lèi)似于制備化合物117所使用的方法制備化合物125。
CI-MS(M++1)583.4。
實(shí)施例126化合物126的制備 用類(lèi)似于制備化合物116所使用的方法制備化合物126。
CI-MS(M++1)522.4。
實(shí)施例127化合物127的制備 用類(lèi)似于制備化合物116所使用的方法制備化合物127。
CI-MS(M++1)562.3。
實(shí)施例128化合物128的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物128。
CI-MS(M++1)514.3。
實(shí)施例129化合物129的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物129。
CI-MS(M++1)530.3。
實(shí)施例130化合物130的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物130。
CI-MS(M++1)528.3。
實(shí)施例131化合物131的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物131。
CI-MS(M++1)609.5。
實(shí)施例132化合物132的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物132。
CI-MS(M++1)613.4。
實(shí)施例133化合物133的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物133。
CI-MS(M++1)624.5。
實(shí)施例134化合物134的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物134。
CI-MS(M++1)622.4。
實(shí)施例135化合物135的制備 用類(lèi)似于制備化合物109所使用的方法制備化合物135。
CI-MS(M++1)573.4。
實(shí)施例136化合物136的制備 用類(lèi)似于制備化合物109所使用的方法制備化合物136。
CI-MS(M++1)599.3。
實(shí)施例137化合物137的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物137。
CI-MS(M++1)496.4。
實(shí)施例138化合物138的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物138。
CI-MS(M++1)511.4。
實(shí)施例139化合物139的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物139。
CI-MS(M++1)541.4。
實(shí)施例140化合物140的制備 用類(lèi)似于制備化合物21所使用的方法制備化合物140。
CI-MS(M++1)510.4。
實(shí)施例141化合物141的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物141。
CI-MS(M++1)540.4。
實(shí)施例142化合物142的制備
中間體142-I在化合物65的制備中獲得。
將中間體142-I(200mg)、甲氧基乙酰氯(60mg)和Et3N(60mg)在CH2Cl2(10ml)中的溶液在0℃下攪拌，然后在3小時(shí)內(nèi)使其暖至室溫。然后濃縮溶液，得到殘余物，將其通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/1)純化，得到中間體142-II(107g)，收率48％。
將20％TFA/CH2Cl2(3mL)溶液加入化合物142-II(107mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。將1M鹽酸(3mL)和CH2Cl2(2mL)加入殘余物中。將混合物在室溫下再攪拌10分鐘。除去上清液后，在真空下干燥固體，得到化合物142的鹽酸鹽(92mg)，收率93％。
CI-MS(M++1)597.4。
實(shí)施例143化合物143的制備 用類(lèi)似于制備化合物142所使用的方法制備化合物143。
CI-MS(M++1)641.4。
實(shí)施例144化合物144的制備
在0℃下，將乙酰氧基乙酰氯(304mg)逐滴加入化合物142-I(200mg)和Et3N(0.3mL)在CH2Cl2(10mL)中的攪拌溶液中，保持2小時(shí)，得到殘余物。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/1)純化所得殘余物，得到中間體144-II(200mg)，收率90％。
將20％LiOH水溶液(4mL)加入在THF(5mL)中的144-II(200mg)中。在攪拌12小時(shí)后，用2M HCl酸化混合物，得到粗產(chǎn)物。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/MeOH＝20/1)純化粗產(chǎn)物，得到中間體144-III(98mg)，收率51％。
在室溫下，用20％TFA/CH2C12(2mL)處理化合物144-III(98mg)12小時(shí)，然后濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/19)純化所得殘余物，得到化合物144(65mg)，收率90％。然后用在CH2Cl2(2mL)中的1M HCl(2mL)處理化合物144 0.5小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，用乙醚處理殘余物，并過(guò)濾，得到化合物144的鹽酸鹽。
CI-MS(M++1)583.4。
實(shí)施例145化合物145的制備 用與制備中間體144-II所使用的相同的方法制備化合物145。
CI-MS(M++1)625.5。
實(shí)施例146化合物146的制備 用類(lèi)似于制備化合物144所使用的方法制備化合物146。
CI-MS(M++1)625.5。
實(shí)施例147化合物147的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物147。
CI-MS(M++1)441.3。
實(shí)施例148化合物148的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物148。
CI-MS(M++1)654.0。
實(shí)施例149化合物149的制備 用類(lèi)似于制備化合物116所使用的方法制備化合物149。
CI-MS(M++1)509.8。
實(shí)施例150化合物150的制備 用類(lèi)似于制備化合物116所使用的方法制備化合物150。
CI-MS(M++1)567.7。
實(shí)施例151化合物151的制備 用類(lèi)似于制備化合物116所使用的方法制備化合物151。
CI-MS(M++1)537.7。
實(shí)施例152化合物152的制備 用類(lèi)似于制備化合物116所使用的方法制備化合物152。
CI-MS(M++1)620.3。
實(shí)施例153化合物153的制備 用類(lèi)似于制備化合物116所使用的方法制備化合物153。
CI-MS(M++1)551.8。
實(shí)施例154化合物154的制備
用類(lèi)似于制備化合物144所使用的方法從化合物62-III制備化合物154。
CI-MS(M++1)538.4。
實(shí)施例155化合物155的制備 用類(lèi)似于制備化合物144所使用的方法從化合物62-III制備化合物155。
CI-MS(M++1)552.4。
實(shí)施例156化合物156的制備 用類(lèi)似于制備化合物144所使用的方法從化合物62-III制備化合物156。
CI-MS(M++1)510.3。
實(shí)施例157化合物157的制備 用類(lèi)似于制備化合物109所使用的方法從化合物109-I制備化合物157。
CI-MS(M++1)569.4。
實(shí)施例158化合物158的制備 用類(lèi)似于制備化合物109所使用的方法從化合物109-I制備化合物158。
CI-MS(M++1)539.4。
實(shí)施例159化合物159的制備 用類(lèi)似于制備化合物109所使用的方法從化合物109-I制備化合物159。
CI-MS(M++1)525.4。
實(shí)施例160化合物160的制備 用類(lèi)似于制備化合物109所使用的方法從化合物109-I制備化合物160。
CI-MS(M++1)567.4。
實(shí)施例161化合物161的制備
用類(lèi)似于制備化合物154所使用的方法從化合物21-II制備化合物161。
CI-MS(M++1)539.3。
實(shí)施例162化合物162的制備 用類(lèi)似于制備化合物154所使用的方法從化合物21-II制備化合物162。
CI-MS(M++1)511.3。
實(shí)施例163化合物163的制備 用類(lèi)似于制備化合物154所使用的方法從化合物21-II制備化合物163。
CI-MS(M++1)511.1。
實(shí)施例164化合物164的制備 用類(lèi)似于制備化合物154所使用的方法從化合物21-II制備化合物164。
CI-MS(M++1)511.7。
實(shí)施例165化合物165的制備 用類(lèi)似于制備化合物154所使用的方法從化合物21-II制備化合物165。
CI-MS(M++1)539.4。
實(shí)施例166化合物166的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物166。
CI-MS(M++1)597.4。
實(shí)施例167化合物167的制備 用類(lèi)似于制備化合物43所使用的方法制備化合物167。
CI-MS(M++1)613.4。
實(shí)施例168化合物168的制備 用類(lèi)似于制備化合物109所使用的方法制備化合物168。
CI-MS(M++1)553.4。
實(shí)施例169化合物169的制備 用類(lèi)似于制備化合物34所使用的方法從化合物34-I制備化合物169。
CI-MS(M++1)520.4。
實(shí)施例170化合物170的制備 用類(lèi)似于制備化合物34所使用的方法從化合物34-I制備化合物170。
CI-MS(M++1)492.3。
實(shí)施例171化合物171的制備 用類(lèi)似于制備化合物70所使用的方法從化合物70-I及其相應(yīng)的硫異氰酸酯制備化合物171。
CI-MS(M++1)570.3。
實(shí)施例172化合物172的制備 用類(lèi)似于制備化合物70所使用的方法從化合物70-I及其相應(yīng)的硫異氰酸酯制備化合物172。
CI-MS(M++1)539.4。
實(shí)施例173化合物173的制備 用類(lèi)似于制備化合物70所使用的方法從化合物70-I及其相應(yīng)的硫異氰酸酯制備化合物173。
CI-MS(M++1)574.3。
實(shí)施例174化合物174的制備 用類(lèi)似于制備化合物70所使用的方法從化合物70-I及其相應(yīng)的硫異氰酸酯制備化合物174。
CI-MS(M++1)568.3。
實(shí)施例175化合物175的制備 用類(lèi)似于制備化合物70所使用的方法從化合物70-I及其相應(yīng)的硫異氰酸酯制備化合物175。
CI-MS(M++1)553.4。
實(shí)施例176化合物176的制備 用類(lèi)似于制備化合物70所使用的方法從化合物70-I及其相應(yīng)的硫異氰酸酯制備化合物176。
CI-MS(M++1)568.3。
實(shí)施例177化合物177的制備 用類(lèi)似于制備化合物70所使用的方法從化合物70-I及其相應(yīng)的硫異氰酸酯制備化合物177。
CI-MS(M++1)552.2。
實(shí)施例178化合物178的制備 用類(lèi)似于制備化合物70所使用的方法從化合物70-I及其相應(yīng)的硫異氰酸酯制備化合物178。
CI-MS(M++1)554.2。
實(shí)施例179化合物179的制備 用類(lèi)似于制備化合物70所使用的方法從化合物70-I及其相應(yīng)的硫異氰酸酯制備化合物179。
CI-MS(M++1)584.3。
實(shí)施例180化合物180的制備 用類(lèi)似于制備化合物70所使用的方法從化合物70-I及其相應(yīng)的硫異氰酸酯制備化合物180。
CI-MS(M++1)598.5。
實(shí)施例181化合物181的制備 用類(lèi)似于制備化合物70所使用的方法從化合物70-I及其相應(yīng)的硫異氰酸酯制備化合物181。
CI-MS(M++1)553.4。
實(shí)施例182化合物182的制備 用類(lèi)似于制備化合物109所使用的方法從化合物109-I制備化合物182。
CI-MS(M++1)566.3。
實(shí)施例183化合物183的制備 用類(lèi)似于制備化合物109所使用的方法從化合物109-I制備化合物183。
CI-MS(M++1)524.3。
實(shí)施例184化合物184的制備 用類(lèi)似于制備化合物109所使用的方法從化合物109-I制備化合物184。
CI-MS(M++1)565.3。
實(shí)施例185化合物185的制備 用類(lèi)似于制備化合物109所使用的方法從化合物109-I制備化合物185。
CI-MS(M++1)550.3。
實(shí)施例186化合物186的制備 用類(lèi)似于制備化合物109所使用的方法從化合物109-I制備化合物186。
CI-MS(M++1)547.4。
實(shí)施例187化合物187的制備 用類(lèi)似于制備化合物35所使用的方法從化合物35-I制備化合物187。
CI-MS(M++1)533.4。
實(shí)施例188化合物188的制備 用類(lèi)似于制備化合物33所使用的方法從化合物33-I制備化合物188。
CI-MS(M++1)537.4。
實(shí)施例189化合物189的制備 用類(lèi)似于制備化合物33所使用的方法從化合物33-I制備化合物189。
CI-MS(M++1)583.4。
實(shí)施例190化合物190的制備 用類(lèi)似于制備化合物33所使用的方法從化合物33-I制備化合物190。
CI-MS(M++1)537.4。
實(shí)施例191化合物191的制備 用類(lèi)似于制備化合物44所使用的方法制備化合物191。
CI-MS(M++1)463.2。
實(shí)施例192化合物192的制備
將叔丁氧羰基氨基乙胺(5.4g)加入2，4-二氯-6-甲基嘧啶(5g)在THF(350mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，然后在3小時(shí)內(nèi)使其暖至室溫。然后在濃縮溶液并用在MeOH(50mL)中的1M HCl(40mL)處理后，再將其在室溫下攪拌8小時(shí)。然后再次濃縮溶液。然后用NH4OH中和所得殘余物，并用CH2Cl2萃取。濃縮溶液，通過(guò)硅膠色譜法(MeOH作為洗脫液)純化所得殘余物，得到中間體192-II(4.6g)，收率90％。
將丁酰氯(430mg)加入192-II(680mg)在CH2Cl2(35mL)中的溶液中。在室溫下攪拌1小時(shí)后，濃縮溶液，并加入1-戊醇(2mL)。將二異丙基乙胺(0.2mL)、實(shí)施例8中制備的中間體8-III(150mg)和NaI(110mg)也加入該溶液中，然后在120℃下攪拌24小時(shí)。將所得混合物溶于CH2Cl2中，用水洗滌，用無(wú)水MgSO4干燥并蒸發(fā)，在通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/MeOH＝5/1)純化后得到192-IV，收率50％。
用1M HCl(20mL)處理192-IV(950mg)，并攪拌過(guò)夜。除去上清液后，通過(guò)過(guò)濾收集化合物192。
CI-MS(M++1)498.4。
實(shí)施例193化合物193的制備 用類(lèi)似于制備化合物192所使用的方法制備化合物193。
CI-MS(M++1)493.4。
實(shí)施例194化合物194的制備 用類(lèi)似于制備化合物192所使用的方法制備化合物194。
CI-MS(M++1)542.4。
實(shí)施例195化合物195的制備 用類(lèi)似于制備化合物192所使用的方法制備化合物195。
CI-MS(M++1)510.4。
實(shí)施例196化合物196的制備 用類(lèi)似于制備化合物192所使用的方法制備化合物196。
CI-MS(M++1)526.4。
實(shí)施例197化合物197的制備 用類(lèi)似于制備化合物192所使用的方法制備化合物197。
CI-MS(M++1)524.4。
實(shí)施例198化合物198的制備
將2，4-二氯-6-氨基嘧啶(2.0g)溶于1-戊醇(10mL)中。然后加入環(huán)己基氨基丙胺(1.92g)。將反應(yīng)混合物在120℃下攪拌24小時(shí)。濃縮溶液，通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/3)純化殘余物，得到198-I(1.8mg)，收率52％。
在25℃下，使中間體198-I(1.8g)的溶液與在CH2Cl2(120mL)中的(Boc)2O反應(yīng)8小時(shí)。濃縮溶液，通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/9)純化殘余物，得到198-II(1.06)，收率70％。
將N1-嗎啉-N1-哌嗪乙烷(0.3g)加入198-II(130mg)中。在120℃下攪拌混合物8小時(shí)。濃縮溶液，用水處理殘余物，并用CH2Cl2萃取。收集有機(jī)層，并濃縮，得到粗產(chǎn)物，將其通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝10/1)純化，得到198-III(100mg)，收率72％。
用20％TFA/CH2Cl2(2mL)處理化合物198-III(100mg)8小時(shí)，然后濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/19)純化所得殘余物，得到化合物198(69mg)，收率85％。然后用在CH2Cl2(2mL)中的1MHCl(2mL)處理化合物198 0.5小時(shí)。在蒸發(fā)溶劑后，用乙醚處理殘余物，并過(guò)濾，得到198的鹽酸鹽。
CI-MS(M++1)447.4。
實(shí)施例199化合物199的制備 用類(lèi)似于制備化合物197所使用的方法制備化合物199。
CI-MS(M++1)408.3。
實(shí)施例200化合物200的制備 用類(lèi)似于制備化合物197所使用的方法制備化合物200。
CI-MS(M++1)422.2。
實(shí)施例201化合物201的制備
將3-氰基苯甲醛(1.0g)和N-環(huán)己基-1，3-丙二胺(2.4g)在CH3OH(150mL)中的溶液加熱至60℃，保持18小時(shí)。冷卻至室溫后，將NaBH4(1.5g)緩慢地加入以上溶液中。再攪拌混合物30分鐘。然后濃縮混合物，用NH4Cl(aq)終止反應(yīng)，并用CH2Cl2萃取。合并有機(jī)層，用無(wú)水MgSO4干燥并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/Et3N)純化殘余物，得到中間體201-I(1.6g)，收率80％。
將中間體201-I(1.6g)和Boc2O(3.5g)在CH2Cl2(160ml)中的溶液在25℃下攪拌15小時(shí)，然后濃縮。通過(guò)硅膠色譜法(EtOAc/己烷＝1/1)純化所得殘余物，得到中間體201-II，為黃色油狀物(2.36g)，收率85％。
將中間體201-II和LiAlH4(2.3g)在THF(230mL)中的溶液在0℃下攪拌4小時(shí)。在加入Na2SO4·10H2O后，將溶液在室溫下攪拌0.5小時(shí)。然后通過(guò)硅藻土墊(celite pad)過(guò)濾溶液。用無(wú)水MgSO4干燥濾液并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/Et3N)純化殘余物，得到中間體201-III(1.1g)，收率50％。
將二異丙基乙胺(1.1mL)加入2，4-二氯-6-氨基哌啶(0.41g)和中間體201-III(1.1g)在1-戊醇(10mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在120℃下攪拌過(guò)夜。在真空下除去溶劑，通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝3/7)純化殘余物，得到201-IV(1.0g)，收率65％。
向中間體201-IV(1.0g)在1-戊醇(1mL)中的溶液中加入N1-羥乙氧基乙基哌嗪(0.25g)。將溶液在120℃下攪拌8小時(shí)后，將其濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝4/1)純化如此獲得的殘余物，得到中間體201-V(730mg)，收率60％。
將20％TFA/CH2Cl2(5mL)溶液加入中間體201-V(0.73g)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，通過(guò)除去溶劑濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/19)純化所得殘余物，得到化合物201(434mg)，收率85％。然后用在CH2Cl2(2mL)中的1MHCl(4mL)處理化合物201 0.5小時(shí)。在除去溶劑后，用乙醚處理殘余物，并過(guò)濾，得到化合物201的鹽酸鹽。
CI-MS(M++1)541.3。
實(shí)施例202化合物202的制備 用類(lèi)似于制備化合物200所使用的方法制備化合物202。
CI-MS(M++1)566.4。
實(shí)施例203化合物203的制備 用類(lèi)似于制備化合物200所使用的方法制備化合物203。
CI-MS(M++1)525.4。
實(shí)施例204化合物204的制備
在60℃下，加熱4-氰基苯甲醛(3.0g)和叔丁氧氨基丙胺(3.9g)在MeOH(60mL)的溶液6小時(shí)。在將溶液冷卻至室溫后，緩慢地加入NaBH4(2.5g)。攪拌混合物30分鐘后，將其濃縮，用NH4Cl(aq.)終止反應(yīng)，并用CH2Cl2萃取。分離有機(jī)層并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/3)純化如此獲得的殘余物，得到中間體204-I(5.8g)，收率88％。
將中間體204-I(5.8g)和1M HCl(40mL)在MeOH(50mL)中的溶液在室溫下攪拌8小時(shí)。然后濃縮溶液，用NH4OH中和所得殘余物，并用CH2Cl2萃取。分離有機(jī)層并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(使用MeOH作為洗脫液)純化殘余物，得到中間體204-II(3.4g)，收率90％。
向化合物204-II(3.5g)在MeOH(50mL)中的溶液加入四氫-4H-吡喃-4-酮(2g)。然后在60℃下加熱溶液6小時(shí)，在冷卻溶液至室溫后，緩慢地加入NaBH4(1.85g)。攪拌混合物30分鐘后，將其濃縮，用NH4Cl(aq.)終止反應(yīng)，并用CH2Cl2萃取。分離有機(jī)層并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝1/1)純化如此獲得的殘余物，得到中間體204-III(3.5g)，收率70％。
將中間體204-III(12.99g)和Boc2O(20.76g)在1，4-二噁烷(200ml)和H2O(100mL)中的溶液在室溫下攪拌15小時(shí)，然后濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝IV/3)純化如此獲得的殘余物，得到中間體204-IV(21.5g)，收率95％。
將LiAlH4(8.6g)加入中間體204-IV(21.5g)在THF(500mL)和乙醚(500mL)中的溶液中。將溶液在0℃下攪拌2小時(shí)后，將其用飽和NH4Cl水溶液處理，用CH2Cl2萃取，并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(使用MeOH作為洗脫液)純化如此獲得的殘余物，得到中間體204-V(13.0g)，收率60％。
在120℃下，使中間體204-V(7.6g)在1-戊醇(50mL)中的溶液與2，4-二氯-6-氨基嘧啶(3.1g)反應(yīng)12小時(shí)。然后除去溶劑，并通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝5/1)純化殘余物，得到中間體204-VI(7.2g)，收率75％。
將中間體204-VI(400mg)加入在1-戊醇(1mL)中的N1-嗎啉-N1-哌嗪乙烷(470mg)中。在120℃下，加熱反應(yīng)混合物12小時(shí)。然后在真空下除去溶劑，通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝1/1)純化殘余物，得到中間體204-VII(386mg)，收率76％。
將20％TFA/CH2Cl2(3mL)溶液加入中間體204-VI(386mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌8小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/19)純化所得殘余物，得到化合物204(256mg)，收率85％。然后用在CH2Cl2(1mL)中的1M HCl(3mL)處理化合物204 0.5小時(shí)。除去溶劑后，用乙醚處理殘余物，并過(guò)濾，得到204的鹽酸鹽。
CI-MS(M++1)568.4。
實(shí)施例205化合物205的制備 用類(lèi)似于制備化合物204所使用的方法制備化合物205。
CI-MS(M++1)527.3。
實(shí)施例206化合物206的制備 用類(lèi)似于制備化合物204所使用的方法制備化合物206。
CI-MS(M++1)543.3。
實(shí)施例207化合物207的制備 用類(lèi)似于制備化合物204所使用的方法制備化合物207。
CI-MS(M++1)554.4。
實(shí)施例208化合物208的制備 用類(lèi)似于制備化合物204所使用的方法制備化合物208。
CI-MS(M++1)529.3。
實(shí)施例209化合物209的制備 用類(lèi)似于制備化合物204所使用的方法制備化合物209。
CI-MS(M++1)513.3。
實(shí)施例210化合物210的制備 用類(lèi)似于制備化合物204所使用的方法制備化合物210。
CI-MS(M++1)538.4。
實(shí)施例211化合物211的制備 用類(lèi)似于制備化合物204所使用的方法制備化合物211。
CI-MS(M++1)513.4。
實(shí)施例212化合物212的制備 用類(lèi)似于制備化合物204所使用的方法制備化合物212。
CI-MS(M++1)497.3。
實(shí)施例213化合物213的制備 用類(lèi)似于制備化合物204所使用的方法制備化合物213。
CI-MS(M+H-I)512.4。
實(shí)施例214化合物214的制備 用類(lèi)似于制備化合物204所使用的方法制備化合物214。
CI-MS(M++1)471.4。
實(shí)施例215化合物215的制備 用類(lèi)似于制備化合物204所使用的方法制備化合物215。
CI-MS(M++1)501.4。
實(shí)施例216化合物216的制備 用類(lèi)似于制備化合物204所使用的方法制備化合物216。
CI-MS(M++1)485.3。
實(shí)施例217化合物217的制備 用類(lèi)似于制備化合物204所使用的方法制備化合物217。
CI-MS(M++1)578.4。
實(shí)施例218化合物218的制備 用類(lèi)似于制備化合物204所使用的方法制備化合物218。
CI-MS(M++1)553.4。
實(shí)施例219化合物219的制備 用類(lèi)似于制備化合物204所使用的方法制備化合物219。
CI-MS(M++1)537.4。
實(shí)施例220化合物220的制備 用類(lèi)似于制備化合物204所使用的方法制備化合物220。
CI-MS(M++1)553.3。
實(shí)施例221化合物221的制備 用類(lèi)似于制備化合物204所使用的方法制備化合物221。
CI-MS(M++1)537.4。
實(shí)施例222化合物222的制備
將NaBH(OAc)3(52.68g)加入(2-氨甲基)乙酸乙酯(25.5g)和環(huán)己酮(24.45g)在CH2Cl2(200ml)和MeOH(300ml)中的溶液中。將混合物在室溫下攪拌6小時(shí)。加入飽和NaHCO3水溶液后，用EtOAc萃取混合物，用無(wú)水MgSO4干燥并過(guò)濾。然后除去溶劑，通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/1)純化殘余物，得到中間體222-I(32.9g)，收率76％。
將中間體222-I(32.9g)和Boc2O(36.0g)在CH2Cl2(300mL)中的溶液在25℃下攪拌過(guò)夜。然后濃縮溶液，通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/9)純化所得殘余物，得到中間體222-II(39.5g)，收率80％。
在-70～-78℃和N2(g)下，將1M DIBAL/乙醚(85mL)加入中間體222-II(15g)在無(wú)水甲苯(500mL)中的攪拌溶液中。將反應(yīng)混合物在該溫度下攪拌2小時(shí)。然后在-60～-70℃下，將5％HCl(aq)(85mL)加入溶液中，將反應(yīng)溫度升高至25℃后，再攪拌混合物0.5小時(shí)。用CH2Cl2萃取水層兩次。合并有機(jī)層，用無(wú)水MgSO4干燥，并通過(guò)在真空下除去溶劑濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/5)純化所得殘余物，得到中間體222-III(7.7g)，收率60％。
在室溫下，緩慢地將二-2-氨基乙基乙醚(1.0g)加入2，4-二氯-6-甲基嘧啶(2.0g)在THF(15ml)中的攪拌溶液中。在0℃下攪拌混合物2小時(shí)，使反應(yīng)物暖至室溫，保持過(guò)夜。然后濃縮溶液，并通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝1/1)純化所得殘余物，得到中間體222-IV(1.5g)，收率53％。
將中間體222-IV(0.7g)和中間體222-III(0.77g)在MeOH(60mL)中的溶液在60℃下攪拌8小時(shí)。然后在0℃下，將NaBH4(0.17g)加入溶液中。將溶液攪拌0.5小時(shí)后，加入飽和NH4Cl水溶液，用EtOAc萃取混合物，用無(wú)水MgSO4干燥并過(guò)濾。然后濃縮溶液，通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝2/1)純化所得殘余物，得到中間體222-V(356mg)，收率25％。
將中間體222-V(356mg)和Boc2O(180mg)在CH2Cl2(10mL)中的溶液在25℃下攪拌過(guò)夜。然后濃縮溶液，通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/5)純化所得殘余物，得到中間體222-VI(410mg)，收率95％。
將N1-嗎啉-N1-哌嗪乙烷(221mg)加入中間體222-VI(210mg)在1-戊醇(1mL)中的溶液中。在120℃下攪拌混合物12小時(shí)。然后將其濃縮，并通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝10/1)純化所得殘余物，得到中間體222-VII(100mg)，收率37％。
將20％TFA/CH2Cl2(2mL)溶液加入中間體222-VII(100mg)在CH2Cl2(1mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌8小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/19)純化所得殘余物，得到化合物222(65mg)，收率90％。然后用在CH2Cl2(1mL)中的1M HCl(2mL)處理化合物222 0.5小時(shí)。除去溶劑后，用乙醚處理殘余物，并過(guò)濾，得到222的鹽酸鹽。
CI-MS(M++1)533.4。
實(shí)施例223化合物223的制備 用類(lèi)似于制備化合物222所使用的方法制備化合物223。
CI-MS(M++1)528.4。
實(shí)施例224化合物224的制備
緩慢地將N-叔丁氧羰基哌啶基-4-甲胺(5.0g)加入2，4-二氯-6-氨基嘧啶(5.7g)在1-戊醇(20mL)中的攪拌溶液中。將溶液在120℃下攪拌12小時(shí)。然后濃縮溶液，通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/9)純化所得殘余物，得到中間體224-I(3.6g)，收率45％。
然后將中間體224-I(2.4g)溶于CH2Cl2(80mL)中，并加入20％TFA/CH2Cl2(20mL)。將溶液在室溫下攪拌過(guò)夜。然后濃縮溶液，并通過(guò)硅膠柱色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/19)純化所得殘余物，得到中間體224-II(1.5g)，收率90％。
將實(shí)施例222中制備的中間體222-III(3.3g)加入中間體224-II(1.9g)在MeOH(40mL)中的溶液中。在60℃下攪拌混合物12小時(shí)。然后在0℃下加入NaBH4(0.3g)。攪拌混合物1小時(shí)后，加入NH4Cl的水溶液(10％，10mL)。用EtOAc萃取混合物，用無(wú)水MgSO4干燥并過(guò)濾。然后濃縮如此所得溶液。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/1)純化所得殘余物，得到中間體224-III(1.5g)，收率40％。
將N1-嗎啉-N1-哌嗪乙烷(370mg)加入在1-戊醇(1mL)中的中間體224-III(300mg)中。在120℃下攪拌混合物12小時(shí)。在濃縮溶液后，用水處理殘余物，并用CH2Cl2萃取。分離有機(jī)層并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/9)純化所得殘余物，得到中間體224-IV(281Mg)，收率70％。
將20％TFA/CH2Cl2(3mL)溶液加入中間體224-IV(281mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌8小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/19)純化所得殘余物，得到化合物224(200mg)，收率85％。然后用在CH2Cl2(1mL)中的1M HCl(4mL)處理化合物224 0.5小時(shí)。除去溶劑后，用乙醚處理殘余物，并過(guò)濾，得到化合物224的鹽酸鹽。
CI-MS(M++1)544.4。
實(shí)施例225化合物225的制備 用類(lèi)似于制備化合物224所使用的方法制備化合物225。
CI-MS(M++1)503.4。
實(shí)施例226化合物226的制備 用類(lèi)似于制備化合物224所使用的方法制備化合物226。
CI-MS(M++1)519.4。
實(shí)施例227化合物227的制備
在25℃下攪拌哌啶基-4-甲胺(3.6g)和N-叔丁氧羰基咪唑(5.3g)在甲苯(80mL)中的溶液。然后濃縮溶液，并通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/2)純化所得殘余物，得到中間體227-I(4.7g)，收率70％。
在120℃下，使在1-戊醇(20mL)中的中間體227-I(4.7g)和Et3N(2.7mL)與2，4-二氯-6-氨基嘧啶(5.4g)反應(yīng)12小時(shí)。除去溶劑后，通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/9)純化殘余物，得到中間體227-II(5.2g)，收率70％。
在室溫下攪拌用在CH2Cl2(10mL)中的1 M HCl(20mL)處理的中間體227-II(1.0g)的溶液8小時(shí)。濃縮溶液后，用NH4OH中和所得殘余物，并用CH2Cl2萃取。分離有機(jī)層并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(使用MeOH作為洗脫液)純化如此獲得的殘余物，得到中間體227-III(636mg)，收率90％。
將實(shí)施例222中制備的中間體222-III(790mg)加入中間體227-III(450mg)在MeOH(20mL)中的溶液中。在25℃下攪拌混合物2小時(shí)。然后在25℃下加入NaBH(OAc)3(2.0g)，保持12小時(shí)。濃縮溶液后，將飽和NaHCO3水溶液加入所得殘余物中。然后用CH2Cl2萃取混合物兩次。分離有機(jī)層并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(使用MeOH作為洗脫液)純化如此獲得的殘余物，得到中間體227-IV(539mg)，收率60％。
將N1-嗎啉-N1-哌嗪乙烷(240mg)加入中間體227-IV(160mg)在1-戊醇(1mL)中的溶液中。在120℃下攪拌混合物8小時(shí)。濃縮溶液，并通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝5/1)純化殘余物，得到中間體227-V(85mg)，收率40％。
將20％TFA/CH2Cl2(1mL)溶液加入中間體227-V(85mg)在CH2Cl2(1mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌8小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/19)純化所得殘余物，得到化合物227(65mg)，收率90％。然后用在CH2Cl2(1ML)中的1MHCl(1mL)處理化合物227 0.5小時(shí)。除去溶劑后，用乙醚處理殘余物，并過(guò)濾，得到化合物227的鹽酸鹽。
CI-MS(M++1)544.4。
實(shí)施例228化合物228的制備
向22-II(500mg)在THF(10mL)中的溶液中加入三氧化硫吡啶復(fù)合物(457mg)。在25℃下攪拌混合物12小時(shí)。過(guò)濾溶液并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(EA/MeOH＝10/1)純化所得殘余物，得到中間體228-II(82mg)，收率10％。
將20％TFA/CH2Cl2(1mL)溶液加入中間體228-II(82mg)在CH2Cl2(1mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌8小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/19)純化所得殘余物，得到化合物228(54mg)，收率90％。然后用在CH2Cl2(1mL)中的1MHCl(1mL)處理化合物228 0.5小時(shí)。除去溶劑后，用乙醚處理殘余物，并過(guò)濾，得到化合物228的鹽酸鹽。
CI-MS(M++1)577.2。
實(shí)施例229化合物229的制備
將乙烯基膦酸二乙酯(377mg)加入實(shí)施例21中制備的中間體21-II(500mg)在MeOH(10mL)中的溶液中。將溶液在25℃下攪拌12小時(shí)。濃縮溶液，并通過(guò)硅膠柱色譜法(EA/MeOH＝5/1)純化殘余物，得到中間體229-II(438mg)，收率70％。
將20％TFA/CH2Cl2(5mL)溶液加入中間體229-II(438mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌8小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(EA/MeOH＝1/1)純化所得殘余物，得到化合物229(165mg)，收率50％。
CI-MS(M++1)617.4。
實(shí)施例230化合物230的制備
在25℃下攪拌化合物229(600mg)和三甲基溴甲硅烷(1.19g)在CH2Cl2(30mL)中的溶液72小時(shí)。然后真空濃縮溶液，得到橙黃色泡沫狀物，將其重溶于水(50mL)中。用乙醚(3X35mL)洗滌溶液，然后真空濃縮，得到固體。通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱(Dowex AG50X8)純化固體，首先用水(約500mL)然后用0.2M氨水洗脫柱，得到化合物230的銨鹽(58mg)，收率10％。
CI-MS(M++1)561.1。
實(shí)施例231化合物231的制備
將中間體222-III(4.5g)加入反式-1，4-二氨基環(huán)己烷(3g)在MeOH(200mL)中的溶液中。在60℃下攪拌混合物8小時(shí)。在0℃下加入NaBH4(0.7g)后，攪拌混合物0.5小時(shí)，然后通過(guò)除去溶劑濃縮。將NH4Cl的水溶液(10％，10mL)加入所得殘余物中。用CH2Cl2萃取混合物，用無(wú)水MgSO4干燥，過(guò)濾并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(使用MeOH作為洗脫液)純化殘余物，得到中間體231-I(6.0g)，收率65％。
在120℃下，使在1-戊醇(30mL)中的中間體231-I(6.0g)和Et3N(6.0mL)與2，4-二氯-6-氨基嘧啶(2.7g)反應(yīng)12小時(shí)。然后除去溶劑，通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝11/11)純化殘余物，得到中間體231-III(5.7g)，收率70％。
將N1-嗎啉-N1-哌嗪乙烷(620mg)加入在1-戊醇(5mL)中的中間體231-II(500mg)中。在120℃下攪拌混合物8小時(shí)，然后濃縮。用水處理如此獲得的殘余物，并用CH2Cl2萃取，得到中間體231-III(468mg)，收率70％，將其通過(guò)硅膠柱色譜法純化，使用21％NH3(aq)和MeOH作為洗脫液。
將20％TFA/CH2Cl2(5mL)溶液加入中間體231-III(468mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌8小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/19)純化所得殘余物，得到化合物231(356mg)，收率90％。然后用在CH2Cl2(2mL)中的1M HCl(4mL)處理化合物231 0.5小時(shí)。除去溶劑后，用乙醚處理殘余物，并過(guò)濾，得到化合物231的鹽酸鹽。
CI-MS(M++1)544.4。
實(shí)施例232化合物232的制備 用類(lèi)似于制備化合物231所使用的方法制備化合物232。
CI-MS(M++1)503.4。
實(shí)施例233化合物233的制備 用類(lèi)似于制備化合物231所使用的方法制備化合物233。
CI-MS(M++1)519.4。
實(shí)施例234化合物234的制備
在室溫和50psi下，在10％Pd/C(200mg)存在下，將在MeOH(20mL)中的從實(shí)施例8制備的化合物8-III(1.0g)氫化18小時(shí)。然后將混合物過(guò)濾并濃縮，得到中間體234-II(500mg)，不需要進(jìn)一步純化。
在120℃下，使在1-戊醇(3mL)中的粗中間體234-II(0.5g)與2，4-二氯-6-氨基嘧啶(0.2g)反應(yīng)15小時(shí)。然后濃縮溶液，并通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝3/7)純化所得殘余物，得到中間體234-III(0.3g)，收率65％。
將N1-嗎啉-N1-哌嗪乙烷(0.3g)加入在1-戊醇(1ml)中的中間體234-III(0.5g)中。在120℃下攪拌混合物18小時(shí)。濃縮溶液，得到殘余物，然后將其用SiO2包覆，并通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝7/3)純化，得到中間體234-IV(0.23g)，收率60％。
將20％TFA/CH2Cl2(5mL)溶液加入中間體234-IV(230mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌8小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/19)純化所得殘余物，得到化合物234(192mg)，收率85％。然后用在CH2Cl2(2mL)中的1M HCl(4mL)處理化合物234 0.5小時(shí)。除去溶劑后，用乙醚處理殘余物，并過(guò)濾，得到化合物234的鹽酸鹽。
CI-MS(M++1)572.5。
實(shí)施例235化合物235的制備 用類(lèi)似于制備化合物234所使用的方法制備化合物235。
CI-MS(M++1)531.4。
實(shí)施例236化合物236的制備 用類(lèi)似于制備化合物234所使用的方法制備化合物236。
CI-MS(M++1)547.4。
實(shí)施例237化合物237的制備 用類(lèi)似于制備化合物234所使用的方法制備化合物237。
CI-MS(M++1)555.5。
實(shí)施例238化合物238的制備 用類(lèi)似于制備化合物234所使用的方法制備化合物238。
CI-MS(M+H-I)549.4。
實(shí)施例239化合物239的制備 用類(lèi)似于制備化合物234所使用的方法制備化合物239。
CI-MS(M++1)503.4。
實(shí)施例240化合物240的制備
將實(shí)施例3中制備的中間體234-III(1.0g)加入哌嗪(0.36g)在1-戊醇(1.0mL)中的攪拌溶液中。將溶液在120℃下攪拌18小時(shí)。將其濃縮，得到殘余物，將其用SiO2包覆，并通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝9/1)純化，得到中間體240-I(0.82g)，收率75％。
在0℃下將甲氧羰基乙酰氯(0.2g)加入中間體240-I(0.82g)在CH2Cl2(50mL)和Et3N(0.3g)中的溶液中。在0℃下攪拌混合物1小時(shí)，然后濃縮。用水處理如此獲得的殘余物，并用CH2Cl2萃取。分離有機(jī)層并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝9/1)純化所得殘余物，得到中間體240-II(0.73g)，收率80％。
將溶于THF(10mL)中的中間體240-II(0.5g)加入0.5M LiOH水溶液(10mL)中。將混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。然后用2M HCl將其酸化，得到粗產(chǎn)物，將其通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝20/1)純化，得到中間體240-III(170 mg)，收率35％。
在室溫下用20％TFA/CH2Cl2(5mL)處理中間體240-III(170mg)12小時(shí)，然后濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/19)純化所得殘余物，得到化合物240(100mg)，收率85％。然后用在CH2Cl2(2mL)中的1M HCl(3mL)處理化合物240 0.5小時(shí)。除去溶劑后，用乙醚處理殘余物，并過(guò)濾，得到化合物240的鹽酸鹽。
CI-MS(M++1)545.4。
實(shí)施例241化合物241的制備 用類(lèi)似于制備化合物240所使用的方法制備化合物241。
CI-MS(M++1)558.5。
實(shí)施例242化合物242的制備 用類(lèi)似于制備化合物240所使用的方法制備化合物242。
CI-MS(M++1)560.4。
實(shí)施例243化合物243的制備 用類(lèi)似于制備化合物240所使用的方法制備化合物243。
CI-MS(M++1)576.4。
實(shí)施例244化合物244的制備 用類(lèi)似于制備化合物240所使用的方法制備化合物244。
CI-MS(M++1)559.4。
實(shí)施例245化合物245的制備 用類(lèi)似于制備化合物240所使用的方法制備化合物245。
CI-MS(M++1)531.4。
實(shí)施例246化合物246的制備 用類(lèi)似于制備化合物240所使用的方法制備化合物246。
CI-MS(M++1)517.4。
實(shí)施例247化合物247的制備 用類(lèi)似于制備化合物240所使用的方法制備化合物247。
CI-MS(M++1)515.4。
實(shí)施例248化合物248的制備 用類(lèi)似于制備化合物240所使用的方法制備化合物248。
CI-MS(M++1)531.4。
實(shí)施例249化合物249的制備
將中間體222-III(4.56g)加入2-氨基乙基苯胺(2.92g)在MeOH(300mL)中的溶液中。在60℃下攪拌混合物8小時(shí)。然后在0℃下加入NaBH4(0.68g)，保持0.5小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮混合物。將NH4Cl的水溶液(10％，10mL)加入所得殘余物中。用CH2Cl2萃取混合物，用無(wú)水MgSO4干燥，過(guò)濾并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝1/1)純化如此獲得的殘余物，得到中間體249-I(4.2g)，收率63％。
在25℃下將中間體249-I(4.2g)和Boc2O(2.8g)在CH2Cl2(250mL)中的溶液加入Et3N(1.4mL)中，保持過(guò)夜。然后濃縮溶液，并通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/5)純化所得殘余物，得到中間體249-II(4g)，收率75％。
在室溫和50psi下，在10％Pd/C(800mg)和5％Rh/C(400mg)存在下，將在MeOH(20mL)中的中間體249-II(4.0g)氫化18小時(shí)。然后過(guò)濾并濃縮混合物。通過(guò)硅膠柱色譜法(使用EtOAc/己烷作為洗脫液)純化所得殘余物，得到中間體249-III(2.8g)，收率69％。
在120℃下使在1-戊醇(5mL)中的中間體249-III(900mg)和Et3N(0.4mL)與2，4-二氯-6-氨基嘧啶(365mg)反應(yīng)24小時(shí)。然后除去溶劑，并通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/1)純化所得殘余物，得到中間體249-IV(I(842mg)，收率74％。
將N1-嗎啉-N1-哌嗪乙烷(300mg)加入在1-戊醇(1ml)中的中間體249-IV(300mg)中。在120℃下攪拌混合物18小時(shí)。然后濃縮溶液，得到殘余物，然后將其用SiO2包覆，并通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝7/3)純化，得到中間體249-V(243mg)，收率64％。
將20％TFA/CH2Cl2(5mL)溶液加入中間體249-V(243mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌8小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/19)純化所得殘余物，得到化合物249(151mg)，收率84％。然后用在CH2Cl2(2mL)中的1M HCl(4mL)處理化合物249 0.5小時(shí)。除去溶劑后，用乙醚處理殘余物，并過(guò)濾，得到化合物249的鹽酸鹽。
CI-MS(M++1)572.5。
實(shí)施例250化合物250的制備 用類(lèi)似于制備化合物249所使用的方法制備化合物250。
CI-MS(M++1)531.4。
實(shí)施例251化合物251的制備 用類(lèi)似于制備化合物249所使用的方法制備化合物251。
CI-MS(M++1)547.4。
實(shí)施例252化合物252的制備
在25℃下攪拌2-氨基乙基苯胺(5.0g)和Boc2O(6.8g)在CH2Cl2(200mL)中的溶液過(guò)夜。然后濃縮溶液，并通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1∶1作為洗脫液)純化所得殘余物，得到中間體252-I(6.8g)，收率83％。
將實(shí)施例222中制備的中間體222-III(7.3g)加入中間體252-I(6.8g)在CH2Cl2(250mL)中的溶液中。在25℃下攪拌混合物1.5小時(shí)。然后在0℃下加入NaBH(OAc)3(6.0g)和少量MeOH。將混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。濃縮溶液后，加入飽和NaHCO3溶液(250mL)。用EtOAc萃取混合物，用無(wú)水MgSO4干燥，過(guò)濾并濃縮，得到粗中間體252-II(6.0g)。
在室溫和50psi下，在5％Rh/C(300mg)和10％Pd/C(300mg)存在下，將在MeOH(15mL)中的粗中間體252-II(3.0g)氫化72小時(shí)。然后過(guò)濾混合物并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝1∶1)純化所得殘余物，得到中間體252-III(2.6g)，收率87％。
在室溫下攪拌用在乙醚(52mL)和MeOH(10mL)中的1M HCl處理的中間體252-III(1.5g)的溶液8小時(shí)。在加入另外的乙醚后，過(guò)濾溶液。在真空下干燥如此獲得的固體。在室溫下將K2CO3加入固體在CH3CN中的懸浮液中，保持10分鐘。加入水后，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，過(guò)濾，用無(wú)水MgSO4干燥，并濃縮，得到粗中間體252-IV(1.5g)。
在120℃下使在1-戊醇(14mL)中的中間體252-IV(1.5g)和Et3N(0.5mL)與2，4-二氯-6-氨基嘧啶(1.0g)反應(yīng)過(guò)夜。然后除去溶劑，得到粗中間體252-V(2.0g)。
在25℃下將中間體252-V(2.0g)和Boc2O(2.1g)在CH2Cl2(250mL)中的溶液加入Et3N(1.0mL)中，保持過(guò)夜。然后濃縮溶液，并通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1∶1)純化所得殘余物，得到中間體252-VI(1.7g)，收率56％。
將N1-嗎啉-N1-哌嗪乙烷(300mg)加入在1-戊醇(1mL)中的中間體252-VI(300mg)中。在120℃下攪拌混合物過(guò)夜，然后濃縮。用SiO2包覆如此獲得的殘余物，并通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝1/1)純化，得到中間體252-VII(260mg)，收率70％。
將20％TFA/CH2Cl2(5mL)溶液加入中間體252-VII(260mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌8小時(shí)，并通過(guò)除去溶劑濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/19)純化所得殘余物，得到化合物252(175mg)，收率91％。然后用在CH2Cl2(2mL)中的1M HCl(4mL)處理化合物252 0.5小時(shí)。除去溶劑后，用乙醚處理殘余物，并過(guò)濾，得到化合物252的鹽酸鹽。
CI-MS(M++1)572.5。
實(shí)施例253化合物253的制備 用類(lèi)似于制備化合物252所使用的方法制備化合物253。
CI-MS(M++1)531.4。
實(shí)施例254化合物254的制備 用類(lèi)似于制備化合物252所使用的方法制備化合物254。
CI-MS(M++1)547.4。
實(shí)施例255化合物255的制備
將中間體252-VI(1.0g)和Boc2O(0.42g)在1-戊醇(8mL)中的溶液在120℃下攪拌過(guò)夜。濃縮溶液后，用水處理殘余物，并用CH2Cl2萃取。分離有機(jī)層并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝2/2)純化如此獲得的殘余物，得到中間體255-I(0.9g)，收率84％。
向中間體255-I(0.4g)在CH3CN(6mL)中的溶液中加入溴乙酸乙酯(100mg)和K2CO3(400mg)。在60℃下攪拌混合物3小時(shí)。過(guò)濾溶液并濃縮后，通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝4/1)純化殘余物，得到中間體255-II(0.17g)，收率38％。
將溶于THF(2mL)中的中間體255-II(0.17g)加入0.5M LiOH水溶液(2mL)中。將混合物在室溫下攪拌15小時(shí)。將其用2.5M HCl(pH＝9)酸化并過(guò)濾，得到黃色固體。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝1/5)純化該黃色固體，得到中間體255-III(0.1g)，收率61％。
將20％TFA/CH2Cl2(3mL)加入中間體255-III(100mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中。將溶液在室溫下攪拌2小時(shí)，然后濃縮。在室溫下，將在丙酮(3mL)中的殘余物加入HCl(4M，在二噁烷中，1mL)中，并攪拌混合物30分鐘。除去溶劑后，用乙醚處理殘余物，并過(guò)濾，得到化合物255的鹽酸鹽(62mg)。
CI-MS(M++1)517.4。
實(shí)施例256化合物256的制備 用類(lèi)似于制備化合物255所使用的方法制備化合物256。
CI-MS(M++1)531.7。
實(shí)施例257化合物257的制備
在0℃下，將KOH(14g)和Boc2O(33.3g)加入反式-4-(氨甲基)環(huán)己烷羧酸(20g)在二噁烷(112mL)中的溶液中。將反應(yīng)物在25℃下攪拌過(guò)夜。在真空下將溶液濃縮至原始體積的一半，用2.5N HCl(PH＝3)酸化，并用EtOAc萃取。用鹽水洗滌合并的有機(jī)層，用無(wú)水MgSO4干燥，過(guò)濾并濃縮，得到白色固體中間體257-I(31.9g)。
在25℃下向以上固體在甲苯(150mL)中的懸浮液中加入疊氮磷酸二苯酯(phosphorazidic acid diphenyl ester)(32.4g)和Et3N(11.9g)，保持1.0小時(shí)。將反應(yīng)混合物加熱至80℃，保持3.0小時(shí)，然后冷卻至25℃。加入苯甲醇(20g)后，再將反應(yīng)混合物在80℃下攪拌3.0小時(shí)，然后加熱至120℃，保持過(guò)夜。然后將其濃縮，再次溶解在EtOAc和H2O中。分離有機(jī)層，然后收集。用EtOAc萃取水層。用2.5N HCl、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌合并的有機(jī)層，用無(wú)水MgSO4干燥，過(guò)濾并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/2)純化如此獲得的殘余物，得到中間體257-II(35g)，收率79％。
向中間體257-II(1.9g)在MeOH(10mL)中的懸浮液中加入10％Pd/C(190mg)。在氫氣氛和環(huán)境溫度下攪拌混合物4.0小時(shí)，過(guò)濾并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(使用EtOAc和MeOH作為洗脫液)純化如此獲得的殘余物，得到中間體257-III(750mg)，收率60％。
將實(shí)施例222中制備的中間體222-III(1,198mg)加入中間體257-III(750mg)在CH2Cl2(30mL)中的溶液中。在25℃下攪拌混合物2小時(shí)。然后在25℃下加入NaBH(OAc)3(1,046mg)，保持12小時(shí)。濃縮溶液后，將飽和NaHCO3水溶液加入所得殘余物中。用CH2Cl2萃取混合物。收集有機(jī)層并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(使用EtOAc和MeOH作為洗脫液)純化如此獲得的殘余物，得到中間體257-IV(1,200mg)，收率78％。
在室溫下攪拌用在MeOH(52mL)中的4N HCl/二噁烷(39mL)處理的中間體257-IV(5.2g)的溶液8小時(shí)。加入乙醚(104mL)后，過(guò)濾溶液。在真空下干燥如此獲得的固體。在室溫下將K2CO3(21g)加入該固體在CH3CN(230mL)中的懸浮液中，保持10分鐘。加入水(9mL)后，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。然后過(guò)濾混合物，用無(wú)水MgSO4干燥并濃縮，得到粗中間體257-V(2.8g)。
在100℃下使在1-戊醇(11.3mL)中的粗中間體257-V(2.8g)和Et3N(1.3mL)與2，4-二氯-6-氨基嘧啶(1,633mg)反應(yīng)12小時(shí)。然后除去溶劑，并通過(guò)硅膠柱色譜法(21％NH3(aq)/MeOH＝1/19)純化殘余物，得到中間體257-VI(3.3g)，收率75％。
在25℃下將中間體252-VI(3.3g)和Boc2O(4.189g)在CH2Cl2(60mL)中的溶液加入Et3N(1.0mL)中，保持過(guò)夜。然后濃縮溶液，并通過(guò)硅膠柱色譜法(使用EtOAc和己烷作為洗脫液)純化所得殘余物，得到中間體257-VII(3.2g)，收率64％。
在120℃下將在1-戊醇(5.2mL)中的中間體257-VII(2.6g)和哌嗪(1.127g)加入Et3N(0.5mL)中，保持18小時(shí)。濃縮溶液后，用水處理殘余物，并用CH2Cl2萃取。收集有機(jī)層并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(使用EtOAc/MeOH至21％NH3(aq)/MeOH作為洗脫液)純化如此獲得的殘余物，得到中間體257-VIII(1.8g)，收率64％。
向中間體257-VIII(200mg)在CH3CN(20mL)中的溶液中加入溴乙酸乙酯(52mg)和K2CO3(128mg)。在6O℃下攪拌混合物2小時(shí)。過(guò)濾溶液并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(使用EtOAc和MeOH作為洗脫液)純化殘余物，得到中間體257-IX(140mg)，收率62％。
將0.5M LiOH水溶液(10mL)加入溶于THF(10mL)中的中間體257-IX(500mg)中。將混合物在室溫下攪拌15小時(shí)。然后將其用2.5MHCl(pH＝9)酸化并過(guò)濾，得到黃色固體。通過(guò)硅膠柱色譜法(使用EtOAc/MeOH至21％NH3(aq)/MeOH作為洗脫液)純化該黃色固體，得到中間體257-X(337mg)，收率70％。
將20％TFA/CH2Cl2(l0mL)加入中間體257-X(400mg)在CH2Cl2(8mL)中的溶液中。將溶液在室溫下攪拌2小時(shí)，然后濃縮。在室溫下向在丙酮(7mL)中的殘余物中加入HCl(4M，在二噁烷中，1.3mL)，保持30分鐘。除去溶劑后，用乙醚處理殘余物，并過(guò)濾，得到化合物257的鹽酸鹽(257mg)。
CI-MS(M++1)503.4。
實(shí)施例258化合物258的制備 用類(lèi)似于制備化合物257所使用的方法制備化合物258。
CI-MS(M++1)531.4。
實(shí)施例259化合物259的制備 用類(lèi)似于制備化合物257所使用的方法制備化合物259。
CI-MS(M++1)517.4。
實(shí)施例260化合物260的制備
將用在MeOH(350mL)中的4N HCl/二噁烷(210mL)處理的中間體257-II(35g)的溶液在室溫下攪拌過(guò)夜。加入乙醚(700mL)后，過(guò)濾溶液。在真空下干燥如此獲得的固體。在室溫下將K2CO3加入固體在CH3CN和異丙醇中的懸浮液中，保持10分鐘。加入水后，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，過(guò)濾，用無(wú)水MgSO4干燥并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(使用CH2Cl2和MeOH作為洗脫液)純化所得殘余物，得到中間體260-I(19g)，收率76％。
將實(shí)施例222中制備的中間體222-III(21g)加入中間體260-I(19g)在CH2Cl2(570mL)中的溶液中。在25℃下攪拌混合物2小時(shí)。然后在25℃下加入NaBH(OAc)3(23g)，保持過(guò)夜。濃縮溶液后，將飽和NaHCO3水溶液加入所得殘余物中。然后用CH2Cl2萃取混合物。通過(guò)硅膠柱色譜法(使用EtOAc和MeOH作為洗脫液)純化殘余物，得到中間體260-II(23.9g)，收率66％。
在25℃下將中間體260-II(23.9g)和Boc2O(11.4g)在CH2Cl2(200mL)中的溶液加入Et3N(5.8mL)中，保持過(guò)夜。然后濃縮溶液，并通過(guò)硅膠柱色譜法(使用EtOAc和己烷作為洗脫液)純化所得殘余物，得到中間體260-III(22g)，收率77％。
將10％Pd/C(2.2g)加入中間體260-III(22g)在MeOH(44mL)中的懸浮液中。在氫氣氛和環(huán)境溫度下攪拌混合物過(guò)夜，過(guò)濾并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(使用EtOAc和MeOH作為洗脫液)純化如此獲得的殘余物，得到中間體260-IV(16.5g)，收率97％。
在120℃下使在1-戊醇(75mL)中的中間體260-IV(16.5g)和Et3N(4.4mL)與2，4-二氯-6-氨基嘧啶(21g)反應(yīng)過(guò)夜。然后除去溶劑，通過(guò)硅膠柱色譜法(使用EtOAc和己烷作為洗脫液)純化所得殘余物，得到中間體260-V(16.2g)，收率77％。
在120℃下將在1-戊醇(32mL)中的中間體260-V(16.2g)和哌嗪(11.7g)加入Et3N(3.3mL)中，保持過(guò)夜。濃縮溶液后，用水處理殘余物，并用CH2Cl2萃取。收集有機(jī)層并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(使用EtOAc/MeOH至21％NH3(aq)/MeOH作為洗脫液)純化如此獲得的殘余物，得到中間體260-VI(13.2g)，收率75％。
在25℃下將甲基丙烯酸酯(532mg)加入中間體260-VI(4g)在MeOH(200mL)中的溶液中，保持5小時(shí)。然后濃縮溶液，并通過(guò)硅膠柱色譜法(使用EtOAc和MeOH作為洗脫液)純化所得殘余物，得到中間體260-VII(3g)，收率66％。
將溶于THF(60mL)中的中間體260-VII(3g)加入0.5M的LiOH水溶液(60mL)中。將混合物在室溫下攪拌15小時(shí)。然后將其用2.5M HCl(pH＝8)酸化并過(guò)濾，得到黃色固體。通過(guò)硅膠柱色譜法(使用CH2Cl2和MeOH作為洗脫液)純化該黃色固體，得到中間體260-VIII(1.4g)，收率48％。
將20％TFA/CH2Cl2(34mL)加入中間體260-VIII(1.4g)在CH2Cl2(17mL)中的溶液中。將溶液在室溫下攪拌5小時(shí)，然后濃縮。在室溫下向在丙酮(20mL)中的殘余物中加入HCl(4M，在二噁烷中，4mL)，保持30分鐘。除去溶劑后，用乙醚(20mL)處理殘余物，并過(guò)濾，得到化合物260的鹽酸鹽(1.4g)。
CI-MS(M++1)517.4。
實(shí)施例261化合物261的制備 用類(lèi)似于制備化合物260所使用的方法制備化合物261。
CI-MS(M++1)531.4。
實(shí)施例262化合物262的制備 用類(lèi)似于制備化合物260所使用的方法制備化合物262。
CI-MS(M++1)503.4。
實(shí)施例263化合物263的制備 用類(lèi)似于制備化合物260所使用的方法制備化合物263。
CI-MS(M++1)545.4。
實(shí)施例264化合物264的制備 用類(lèi)似于制備化合物260所使用的方法制備化合物264。
CI-MS(M++I)545.4。
實(shí)施例265化合物265的制備
將順式-4-氨基-環(huán)己烷羧酸(20g)在MeOH(300mL)中的懸浮液冷卻至0℃。將亞硫酰氯(12.2mL)逐滴加入懸浮液中。將混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，然后濃縮。在室溫下向在CH3CN中的殘余物中加入K2CO3，保持10分鐘。加入水后，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，過(guò)濾，用無(wú)水MgSO4干燥，并濃縮，得到白色固體中間體265-I(25g)。
在0℃下將Boc2O(31.8g)加入粗中間體265-I(25g)在CH2Cl2(300mL)中的懸浮液中，保持0.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物在25℃下攪拌過(guò)夜，并傾入水中。用CH2Cl2萃取水層。收集合并的有機(jī)層，用無(wú)水MgSO4干燥，過(guò)濾并濃縮，得到粗中間體265-II(38g)。
在低于0℃下將粗中間體265-II(38g)在Et2O(100mL)中的溶液加入LiAlH4(6.7g)在Et2O(400mL)中的懸浮液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。用Na2SO4·10H2O終止混合物反應(yīng)，并通過(guò)硅藻土墊過(guò)濾。用無(wú)水MgSO4干燥濾液，過(guò)濾，并在減壓下干燥。通過(guò)硅膠柱色譜法(使用CH2Cl2和MeOH作為洗脫液)純化如此獲得的殘余物，得到中間體265-III(28g)，收率90％。
向中間體265-III(28g)在CH2Cl2(300mL)中的溶液中加入Et3N(30mL)、DMPA(0.7g)和對(duì)甲苯磺酰氯(25.8g)。將反應(yīng)混合物在25℃下攪拌過(guò)夜。濃縮所得溶液，并將殘余物重溶于EtOAc中。然后用水洗滌溶液，并用EtOAc萃取。收集有機(jī)層，用無(wú)水MgSO4干燥，濃縮得到中間體265-IV(50g)。
將NaN3(24g)加入中間體265-IV(50g)在DMF(300mL)中的溶液中。在60℃下攪拌所得混合物過(guò)夜，過(guò)濾并濃縮。用飽和NaHCO3水溶液洗滌在CH2Cl2中的殘余物。收集有機(jī)溶液，干燥并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠柱色譜法(使用EtOAc作為洗脫液)純化殘余物，得到中間體265-V(30g)，收率97％。
在低于0℃下向LiAlH4(5.4g)在Et2O(400mL)中的懸浮液中加入粗中間體265-V(30g)在Et2O(100mL)中的溶液。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。用Na2SO4·10H2O終止反應(yīng)物反應(yīng)，并通過(guò)硅藻土墊過(guò)濾。用無(wú)水MgSO4干燥濾液，過(guò)濾并在減壓下干燥。通過(guò)硅膠柱色譜法(MeOH作為洗脫液)純化如此獲得的殘余物，得到中間體265-VI(24.5g)，收率90％。
在120℃下使中間體265-VI(24.5g)和Et3N(13mL)在1-戊醇(75mL)中的溶液與2，4-二氯-6-氨基嘧啶(19.6g)反應(yīng)過(guò)夜。將反應(yīng)混合物在150℃下攪拌3小時(shí)，過(guò)濾，并在減壓下干燥。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc作為洗脫液)純化如此獲得的殘余物，得到中間體265-VII(26.2g)，收率68％。
在室溫下攪拌用在MeOH(200mL)中的4N HCl/二噁烷(160mL)處理的中間體265-VII(26.2g)的溶液過(guò)夜。加入乙醚后，過(guò)濾溶液。真空干燥如此獲得的固體。在室溫下，向以上固體在CH3CN和異丙醇中的懸浮液中加入K2CO3，保持10分鐘。在室溫下加入水，保持2小時(shí)后，過(guò)濾反應(yīng)混合物，用無(wú)水MgSO4干燥，過(guò)濾并濃縮，得到中間體265-VIII(15g)。
向中間體265-VIII(15g)在CH2Cl2(500mL)中的溶液中加入中間體222-III(18.6g)。在25℃下攪拌混合物2小時(shí)。然后在25℃下加入NaBH(OAc)3(11.7g)，并攪拌混合物過(guò)夜。然后濃縮溶液，加入飽和NaHCO3水溶液。用CH2Cl2萃取混合物。收集有機(jī)層，用無(wú)水MgSO4干燥，濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(MeOH作為洗脫液)純化如此獲得的殘余物，得到中間體265-IX(14.1g)，收率39％。
在25℃下將Et3N(2.2mL)加入中間體265-IX(14.1g)和Boc2O(6.6g)在CH2Cl2(150mL)中的溶液中。將溶液攪拌過(guò)夜，然后濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc作為洗脫液)純化所得殘余物，得到中間體265-X(12g)，收率71％。
在120℃下將Et3N(2.4mL)加入中間體265-X(12g)和哌嗪(5.1g)在1-戊醇(24mL)中的混合物中。將溶液攪拌過(guò)夜，然后濃縮。用水處理殘余物，并用CH2Cl2萃取。收集有機(jī)層，用無(wú)水MgSO4干燥。通過(guò)硅膠柱色譜法(MeOH作為洗脫液)純化如此獲得的殘余物，得到中間體265-XI(9.6g)，收率74％。
向中間體265-XI(500mg)在CH3CN(50mL)中的溶液中加入溴乙酸乙酯(127mg)和K2CO3(314mg)。在60℃下攪拌混合物2小時(shí)。過(guò)濾溶液并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc作為洗脫液)純化如此獲得的殘余物，得到中間體265-XII(230mg)，收率41％。
將0.5M LiOH(5mL)加入中間體265-IX(230mg)在THF(10mL)中的溶液中。將混合物在室溫下攪拌15小時(shí)。然后將其用2.5M HCl(pH＝8)酸化并過(guò)濾，得到黃色固體，將其通過(guò)硅膠柱色譜法(甲醇作為洗脫液)純化，得到中間體265-XIII(150mg)，收率68％。
向中間體265-XIII(150mg)在CH2Cl2(2mL)中的溶液中加入20％TFA/CH2Cl2(3mL)。將溶液在室溫下攪拌5小時(shí)，然后濃縮。在室溫下將HCl(4M，在二噁烷中，2mL)加入在丙酮中的殘余物中，保持30分鐘。除去溶劑后，用乙醚處理殘余物，并過(guò)濾，得到化合物265的鹽酸鹽(94mg)。
CI-MS(M++1)517.4。
實(shí)施例266化合物266的制備 用類(lèi)似于制備化合物265所使用的方法制備化合物266(參見(jiàn)實(shí)施例264)。
CI-MS(M++1)531.4。
實(shí)施例267化合物267的制備
將順式-4-氨基-環(huán)己烷羧酸(30g)在MeOH(500mL)中的懸浮液冷卻至0℃。逐滴加入亞硫酰氯(30.5mL)。將混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，并濃縮，得到白色固體中間體267-I(32.6g)。
向以上獲得的中間體267-I(32.6g)在CH2Cl2(500mL)中的懸浮液中依次加入Et3N(18mL)和Boc2O(50g)。將反應(yīng)混合物在25℃下攪拌過(guò)夜，并傾入水中。用CH2Cl2萃取水層。用無(wú)水MgSO4干燥合并的有機(jī)層，過(guò)濾并濃縮，得到粗中間體267-II(53.4g)。
在低于0℃下將粗中間體267-II(53.4g)在Et2O(100mL)中的溶液加入在0℃下冷卻的LiAlH4(11g)在Et2O(500mL)中的懸浮液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。在冰浴中冷卻所得溶液，用冷水終止反應(yīng)物反應(yīng)，通過(guò)硅藻土墊過(guò)濾。用無(wú)水MgSO4干燥濾液，過(guò)濾，用己烷洗滌，并在減壓下干燥，得到粗中間體267-II(43.21g)。
將Et3N(32mL)、DMPA(4.6g)和對(duì)甲苯磺酰氯(40g)加入中間體267-III(43.21g)在CH2Cl2(400mL)中的溶液中。在25℃下將反應(yīng)混合物攪拌過(guò)夜。濃縮所得溶液，并將殘余物重溶于EtOAc中。用水洗滌溶液，并用EtOAc萃取。用無(wú)水MgSO4干燥有機(jī)層并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/4)純化如此獲得的殘余物，得到中間體267-IV(57.34g)，收率71％。
將NaN3(29g)加入中間體267-IV(57.34g)在DMF(200mL)中的溶液中。在40℃下攪拌所得混合物過(guò)夜，過(guò)濾并濃縮。將殘余物溶于CH2Cl2中，并用飽和NaHCO3水溶液洗滌。濃縮溶液，得到殘余物，將其通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/6)純化，得到中間體267-V(30.48g)，收率80％。
將PPh3(12.9g)和H2O(0.9mL)加入中間體267-V(11.37g)在THF(200mL)中的溶液中。將溶液在25℃下攪拌過(guò)夜后，濃縮溶液，得到殘余物，將其通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝15/1)純化，得到中間體267-VI(9.44g)，收率93％。
使中間體267-VI(9.44g)和Et3N(4mL)在1-戊醇(40mL)中的溶液與2，4-二氯-6-氨基嘧啶(7.5g)反應(yīng)。將溶液在120℃下攪拌過(guò)夜。除去溶劑，并通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝1/2)純化如此獲得的殘余物，得到中間體267-VII(10.5g)，收率71％。
在室溫下攪拌用在MeOH(20mL)中的4N HCl/二噁烷(10mL)處理的中間體267-VII(2.0g)的溶液過(guò)夜。加入乙醚后，過(guò)濾溶液。在真空下干燥固體。在室溫下，向以上固體在CH3CN和異丙醇中的懸浮液中加入K2CO3，并攪拌10分鐘。在室溫下將水加入反應(yīng)混合物中后，將其再攪拌2小時(shí)。然后萃取混合物，用無(wú)水MgSO4干燥，過(guò)濾并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(CH2Cl2和MeOH作為洗脫液)純化所得殘余物，得到中間體267-VIII(1.1g)，收率77％。
將中間體222-III(1.58g)加入中間體267-VIII(1.10g)在CH2Cl2(40mL)中的溶液中。在25℃下攪拌混合物2小時(shí)。然后在25℃下加入NaBH(OAc)3(907g)，并攪拌混合物過(guò)夜。然后濃縮混合物，并將飽和NaHCO3水溶液加入所得殘余物中。用CH2Cl2萃取混合物。收集有機(jī)層并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc和MeOH作為洗脫液)純化如此獲得的殘余物，得到中間體267-IX(1.30g)，收率61％。
在25℃下將Et3N(0.3mL)加入中間體267-IX(1.30g)和Boc2O(0.63g)在CH2Cl2(150mL)中的溶液中。將溶液攪拌過(guò)夜，然后濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/1)純化所得殘余物，得到中間體267-X(1.30g)，收率83％。
在120℃下將Et3N(0.2mL)加入中間體267-X(800mg)和哌嗪(347mg)在1-戊醇(2mL)中的溶液中。將溶液攪拌過(guò)夜，然后濃縮。用水處理殘余物，并用CH2Cl2萃取。收集有機(jī)層并濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝1/1)純化如此獲得的殘余物，得到中間體267-XI(700mg)，收率81％。
在30℃下將甲基丙烯酸酯(93mg)加入中間體267-XI(700mg)在MeOH(7mL)中的溶液中。將溶液攪拌5小時(shí)，然后濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc和MeOH作為洗脫液)純化殘余物，得到中間體267-XII(460mg)，收率58％。
將0.5M LiOH(9.2mL)加入中間體267-XII(460mg)在THF(5mL)中的溶液中。將混合物在室溫下攪拌15小時(shí)。然后將其用2.5M HCl(pH＝8)酸化并過(guò)濾，得到黃色固體。通過(guò)硅膠柱色譜法(CH2Cl2和MeOH作為洗脫液)純化固體，得到中間體267-XIII(266mg)，收率59％。
將20％TFA/CH2Cl2(5mL)加入中間體267-XIII(266mg)在CH2Cl2(3mL)中的溶液中。將溶液在室溫下攪拌5小時(shí)。濃縮溶液。將HCl(4M，在二噁烷中，3mL)加入在丙酮的殘余物中。將混合物在室溫下攪拌30分鐘。除去溶劑后，用乙醚處理殘余物，并過(guò)濾，得到化合物267的鹽酸鹽(153mg)。
CI-MS(M++1)517.4。
實(shí)施例268化合物268的制備
將順式-4-(氨基)環(huán)己基羧酸甲酯(267-I，5.0g)和PhCH2OCOCl(6.5g在CH2Cl2(64mL)中的溶液在0℃下攪拌1小時(shí)。將溶液暖至室溫，并再攪拌12小時(shí)。然后將其濃縮，并通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/4)純化殘余物，得到中間體268-I(5.56g)，收率60％。
在N2(g)和-70～-78℃下將DIBAL(1.0M，在己烷中，34mL)加入中間體268-I(5.0g)在無(wú)水甲苯(170mL)中的攪拌溶液中。將反應(yīng)混合物在該溫度下攪拌2小時(shí)。然后在-60～-70℃下將5％HCl(aq)(34mL)加入溶液中，將反應(yīng)溫度升高至25℃后，再攪拌混合物0.5小時(shí)。用CH2Cl2萃取水層兩次。合并有機(jī)層，用無(wú)水MgSO4干燥，并通過(guò)在真空下除去溶劑濃縮，得到粗268-II(3.14g)。
然后在室溫下使中間體268-II(3.0g)與在MeOH(30mL)中的環(huán)己基氨基丙胺(1.8g)反應(yīng)。在60℃下攪拌混合物12小時(shí)。在0℃下加入NaBH4(0.43g)。攪拌0.5小時(shí)后，加入NH4Cl的水溶液(10％，20mL)，并用CH2Cl2萃取混合物。收集有機(jī)層，用無(wú)水MgSO4干燥，過(guò)濾并濃縮，得到殘余物。通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝4/1)純化所得殘余物，得到中間體268-III(2.54g)，收率55％。
將中間體268-III(2.5g)和Boc2O(3.0g)在CH2Cl2(130mL)中的溶液在25℃下攪拌過(guò)夜。然后濃縮溶液，并通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝1/9)純化所得殘余物，得到中間體268-IV(3.2g)，收率85％。
將10％Pd/C(570mg)加入中間體268-IV(3.2g)在EtOH(18mL)中的懸浮液中。在氫氣氛和環(huán)境溫度下攪拌混合物2.0小時(shí)，過(guò)濾并濃縮，得到粗中間體268-V(2.4g)。
在120℃下，使粗中間體268-V(2.4g)和Et3N(0.85mL)在1-戊醇(17mL)中的溶液與2，4-二氯-6-氨基嘧啶(1.0g)反應(yīng)15小時(shí)。除去溶劑，并通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/己烷＝3/1)純化殘余物，得到中間體268-VI(2.4g)，收率80％。
將哌嗪(1.0g)加入在1-戊醇(8mL)中的中間體268-VI(2.4g)中。在120℃下攪拌混合物15小時(shí)。濃縮溶液，用水處理殘余物，并用CH2Cl2萃取。收集有機(jī)層并濃縮，得到粗中間體268-VII(2.2g)。
將丙烯酸甲酯(0.1ml)加入粗中間體268-VII(700mg)在MeOH(10mL)中的溶液中。在30℃下攪拌混合物12小時(shí)。濃縮混合物后，用水處理殘余物，并用CH2Cl2萃取。收集有機(jī)層并濃縮，得到殘余物，將其通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝4/1)純化，得到中間體268-VIII(530mg)，收率67％。
將0.5M LiOH(7.2mL)加入中間體268-VIII(530mg)在THF(7.2mL)中的溶液中。將混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。然后將其用2M HCl(pH＝8)酸化并過(guò)濾，得到黃色固體，將其通過(guò)硅膠柱色譜法(EtOAc/MeOH＝1/9)純化，得到中間體268-IX(470mg)，收率90％。
將中間體268-IX(470mg)溶于CH2Cl2(8mL)中。加入TFA(2mL)，并將溶液在室溫下攪拌過(guò)夜。然后濃縮溶液，并在室溫下將HCl(4M，在二噁烷中，1.3mL)加入在丙酮(7mL)中的殘余物中，保持30分鐘。除去溶劑后，用乙醚處理殘余物，并過(guò)濾，得到化合物268的鹽酸鹽(390mg)。
CI-MS(M++1)517.4。
實(shí)施例269體外測(cè)定 使用DELFIA GTP-結(jié)合試劑盒(Wallac Oy，Turku，F(xiàn)inland)測(cè)定上述143種化合物結(jié)合CXCR4受體的功效。DELFIA GTP結(jié)合測(cè)定是一種時(shí)間分辨熒光測(cè)定，其基于G-蛋白亞單位上GDP-GTP交換，然后G蛋白偶聯(lián)受體被其激動(dòng)劑激活。將從Wallac Oy獲得的Eu-GTP用于該測(cè)定以監(jiān)測(cè)G-蛋白的激動(dòng)劑依賴性激活。SDF-1對(duì)CXCR4受體的刺激導(dǎo)致G-蛋白α-亞單位上的GTP替換GDP。該GTP-Gα復(fù)合體表示G-蛋白的活化形式?？墒褂貌豢伤獾腉TP類(lèi)似物Eu-GTP來(lái)定量活化的G-蛋白的量(Peltonen等，Eur.J.Pharmacol.(1998)355275)。
將表達(dá)CXCR4的HEK293細(xì)胞的質(zhì)膜懸浮在測(cè)定緩沖液(50mMNaCl、100μg/mL皂苷、3mM MgCl2、3μM GDP、5％BSA、50mMHEPES，pH7.4)中。將等分試樣(4μg蛋白)加入AcroPlate(Pall LifeSciences，Ann Arbor，MI)的每孔中。在加入測(cè)試化合物(10μM，在0.1％的DMSO中)和基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(4nM，在測(cè)試緩沖液中)后，將該測(cè)試板于室溫、暗處并緩慢搖動(dòng)下溫育10分鐘。將Eu-GTP加入每孔中，并將板再溫育60分鐘。用測(cè)定試劑盒中提供的洗滌溶液洗滌該板兩次以終止測(cè)定。根據(jù)來(lái)自Victor 2多標(biāo)記讀數(shù)器的熒光信號(hào)來(lái)測(cè)定Eu-GTP的結(jié)合。
意料不到地，表明測(cè)試化合物中的196種的IC50值為0.003μM至0.1μM；表明測(cè)試化合物中的56種的IC50值為0.1μM至1μM，表明測(cè)試化合物中的16種的IC50值為1μM至5μM。
實(shí)施例270放射性配體結(jié)合測(cè)定 使用玻璃纖維過(guò)濾板(Millipore，Billerica，MA)進(jìn)行測(cè)試化合物與人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1之間的競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合測(cè)定。用90μl的0.2％聚乙烯亞胺預(yù)包被玻璃纖維過(guò)濾板30分鐘，并用100μl的蒸餾水洗滌4次以減少非特異性結(jié)合。將在70μl測(cè)定緩沖液(50mM HEPES，pH7.4，0.5％小牛血清白蛋白，90mM NaCl，5mM MgCl2，lmM CaCl2)中的人CXCR4-轉(zhuǎn)染的HEK293細(xì)胞的膜(5-10μg蛋白質(zhì)/孔)以及20μl的測(cè)試化合物溶液和10μl[125I]-SDF-1溶液(各自的終濃度為150pM)一起在U型底測(cè)定板(Corning，Corning，NY)中溫育。將膜在室溫下溫育120分鐘后，通過(guò)向每個(gè)玻璃纖維板孔中轉(zhuǎn)移80μl的每種反應(yīng)混合物來(lái)終止溫育，并通過(guò)真空過(guò)濾(MultiScreen Vacuum Maniford，Millipore)來(lái)過(guò)濾。用80μl/孔的洗滌緩沖液(20mM HEPES，pH7.4和90mM NaCl)洗滌每板4次，然后風(fēng)干過(guò)夜。將35μl/孔的Supermix混合劑(cocktail)加入每板中后，用Trilux MicroBeta(PerkinElmer，Boston，MA)計(jì)數(shù)在每板上保留的放射性。
將在GTP結(jié)合測(cè)定中IC50值為0.003μM至0.1μM的196種化合物進(jìn)一步用放射性配體結(jié)合測(cè)定來(lái)篩選。結(jié)果表明，它們?cè)?0-1200nM的范圍內(nèi)顯示出抑制活性。
其它實(shí)施方案 本申請(qǐng)中公開(kāi)的所有特征可以以任意組合而結(jié)合。本申請(qǐng)中公開(kāi)的每個(gè)特征可以由起相同、等同或類(lèi)似目的的其它特征替代。因此，除非另有明述，所公開(kāi)的每個(gè)特征僅是一系列等同或類(lèi)似特征的實(shí)例。
從上述實(shí)施方式，本領(lǐng)域技術(shù)人員能容易地確定本發(fā)明的必要特征，且在不背離本發(fā)明的精神和范圍的前提下可以將本發(fā)明進(jìn)行各種變化和修改以適合各種使用和情況。因此，其它的實(shí)施方案也在所附的權(quán)利要求的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物或其鹽
其中
X為-N(Ra)-或-O-；或者X與R5一起為C3-C20雜環(huán)烷基；或者X與L2和L3一起為C3-C20雜環(huán)烷基；
L1和L2各自獨(dú)立地為C1-C10亞烷基、C1-C10亞雜烷基，-C(O)-或不存在；或者L1與L3、R4和連接至R4的氮一起為C3-C20雜環(huán)烷基，或者L2與L3和X一起為C3-C20雜環(huán)烷基；
L3為-N(Rb)-、-O-、芳基、雜芳基或C3-C20環(huán)烷基，或者L3與L1、R4和連接至R4的氮一起為C3-C20雜環(huán)烷基；或者L3與L2和X一起為C3-C20雜環(huán)烷基；
R1、R2和R3各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、鹵素、CN、ORc、COORc、OC(O)Rc、C(O)Rc、C(O)NRcRd或NRcRd；
R4為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基；且
R5為C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或者被C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基或N(ReRg)取代的C1-C10烷基；或者R5與X一起為C3-C20雜環(huán)烷基；
其中Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Rf各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或-C(O)R；R為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷、芳基或雜芳基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中L1和L2各自獨(dú)立地為C1-C10亞烷基、-C(O)-或不存在；且L3為-N(Rb)-、-O-、芳基或C3-C20環(huán)烷基。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中X為-N(Ra)-。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中L3為-N(Rb)-。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中R5為C3-C20環(huán)烷基、被C3-C20環(huán)烷基取代的C1-C10烷基，或者被C1-C10烷基取代的C3-C20雜環(huán)烷基。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中R5為
或
7.權(quán)利要求4的化合物，其中Rb為被N(R’R”)取代的C1-C10烷基，其中R’和R”各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
8.權(quán)利要求4的化合物，其中R1為C3-C20雜環(huán)烷基。
9.權(quán)利要求8的化合物，其中R1為
或
10.權(quán)利要求4的化合物，其中所述化合物為化合物1-7之一。
11.權(quán)利要求3的化合物，其中L3為芳基。
12.權(quán)利要求11的化合物，其中L3為亞苯基。
13.權(quán)利要求11的化合物，其中R5為被C3-C20雜環(huán)烷基或N(ReRf)取代的C1-C10烷基；或者R5與X一起為C3-C20雜環(huán)烷基。
14.權(quán)利要求13的化合物，其中R5為
或
或者R5與X一起為
15.權(quán)利要求11的化合物，其中R3為H、鹵素、C1-C10烷基、ORc、NRcRd或者任選被C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、OR’、C(O)R’、COOR’、C(O)N(R’R”)、SO2R’、C(S)N(R’R”)、OSO3R’或PO(OR’)2取代的C3-C20雜環(huán)烷基，其中R’和R”各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
16.權(quán)利要求15的化合物，其中R3為H、Cl、CH3、OPh、
任選被OH取代的
任選被C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、OH、C(O)R’、COOR’、C(O)N(R’R”)、SO2R’、C(S)N(R’R”)、OSO3R’、PO(OR’)2取代的
或者被OH或NHC(O)R”取代的NH(R’)。
17.權(quán)利要求11的化合物，其中所述化合物為化合物8、10、12-16、18、20-24、26-76、78-197、201-221和228-230之一。
18.權(quán)利要求3的化合物，其中L3為C3-C20環(huán)烷基。
19.權(quán)利要求18的化合物，其中L3為亞環(huán)己基。
20.權(quán)利要求18的化合物，其中R5為被N(ReRf)取代的C1-C10烷基。
21.權(quán)利要求20的化合物，其中R5為
22.權(quán)利要求18的化合物，其中R3為被C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、OR’、C(O)R’、COOR’、C(O)N(R’R”)、SO2R’或C(S)N(R’R”)取代的C3-C20雜環(huán)烷基，其中R’和R”各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
23.權(quán)利要求18的化合物，其中所述化合物為化合物231-268之一。
24.權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物為化合物222-227之一。
25.式(I)的化合物或其鹽
其中
X為-N(Ra)-或-O-；
L1和L2各自獨(dú)立地為C1-C10亞烷基、C1-C10亞雜烷基、-C(O)-或不存在；
L3為-N(Rb)-、C3-C20環(huán)烷基、芳基、雜芳基或不存在；
R1為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、芳基、雜芳基、鹵素、CN、ORc、COORc、OC(O)Rc、C(O)Rc、C(O)NRcRd或NRcRd；
R2和R3各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、鹵素、CN、ORe、COORe、OC(O)Re、C(O)Re、C(O)NReRf或NReRf；且
R4和R5各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基；或者R4和R5一起為C1-C10亞烷基或C1-C10亞雜烷基；
其中Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Rf各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
26.權(quán)利要求25的化合物，其中X為-N(Ra)-；L1和L2各自獨(dú)立地為C1-C10亞烷基；L3不存在；R1為NRcRd；R2和R3各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、鹵素或C3-C20環(huán)烷基；且R4和R5各自獨(dú)立地為H或C3-C20環(huán)烷基；或者R4和R5一起為C1-C10亞烷基或C1-C10亞雜烷基。
27.權(quán)利要求26的化合物，其中R5為
或者R4和R5一起為-CH2CH2-。
28.權(quán)利要求26的化合物，其中Rc和Rd之一為被N(RR’)或芳基取代的C1-C10烷基，其中R和R’各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
29.權(quán)利要求28的化合物，其中Rc和Rd之一為
或
30.權(quán)利要求26的化合物，其中R3為被C1-C10烷基取代的
所述C1-C10烷基進(jìn)一步被C3-C20雜環(huán)烷基或OR取代，R為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
31.權(quán)利要求26的化合物，其中所述化合物為化合物9、11、17、19、25和198-200之一。
32.用于治療炎癥性或免疫性疾病、發(fā)育性或退行性疾病或組織損傷的方法，其包括給藥有此需要的個(gè)體有效量的式(I)的化合物或其鹽
其中
X為-N(Ra)-或-O-；或者X和R5一起為C3-C20雜環(huán)烷基；或者X與L2和L3一起為C3-C20雜環(huán)烷基；
L1和L2各自獨(dú)立地為C1-C10亞烷基、C1-C10亞雜烷基、-C(O)-或不存在；或者L1與L3、R4和連接至R4的氮一起為C3-C20雜環(huán)烷基，或者L2與L3和X一起為C3-C20雜環(huán)烷基；
L3為-N(Rb)-、-O-、芳基、雜芳基或C3-C20環(huán)烷基；或者L3與L1、R4和連接至R4的氮一起為C3-C20雜環(huán)烷基；或者L3與L2和X一起為C3-C20雜環(huán)烷基；
R1、R2和R3各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、鹵素、CN、ORc、COORc、OC(O)Rc、C(O)Rc、C(O)NRcRd或NRcRd；
R4為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基；且
R5為C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或者被C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基或N(ReRf)取代的C1-C10烷基；或者R5與X一起為C3-C20雜環(huán)烷基；
其中Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Rf各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或-C(O)R；R為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
33.權(quán)利要求32的方法，其中L1和L2各自獨(dú)立地為C1-C10亞烷基、-C(O)-或不存在；且L3為-N(Rb)-、-O-、芳基或C3-C20環(huán)烷基。
34.權(quán)利要求33的方法，其中X為-N(Ra)-。
35.權(quán)利要求34的方法，其中L3為-N(Rb)-。
36.權(quán)利要求35的方法，其中R5為C3-C20環(huán)烷基、被C3-C20環(huán)烷基取代的C1-C10烷基或者被C1-C10烷基取代的C3-C20雜環(huán)烷基。
37.權(quán)利要求36的方法，其中R5為
或
38.權(quán)利要求35的方法，其中Rb為被N(R’R”)取代的C1-C10烷基，其中R’和R”各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
39.權(quán)利要求35的方法，其中R1為C3-C20雜環(huán)烷基。
40.權(quán)利要求39的方法，其中R1為
或
41.權(quán)利要求34的方法，其中L3為芳基。
42.權(quán)利要求41的方法，其中L3為亞苯基。
43.權(quán)利要求41的方法，其中R5為被C3-C20雜環(huán)烷基或N(ReRf)取代的C1-C10烷基；或者R5與X一起為C3-C20雜環(huán)烷基。
44.權(quán)利要求43的方法，其中R5為
或
或者R5與X一起為
45.權(quán)利要求41的方法，其中R3為H、鹵素、C1-C10烷基、ORc、NRcRd或者被C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、OR’、C(O)R’、COOR’、C(O)N(R’R”)、SO2R’、C(S)N(R’R”)、OSO3R’或PO(OR’)2取代的C3-C20雜環(huán)烷基，其中R’和R”各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
46.權(quán)利要求45的方法，其中R3為H、Cl、CH3、OPh、
任選被OH取代的
任選被C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、OH、C(O)R’、COOR’、C(O)N(R’R”)、SO2R’、C(S)N(R’R”)、OSO3R’、PO(OR’)2取代的
或者被OH或NHC(O)R”取代的NH(R’)。
47.權(quán)利要求34的方法，其中L3為C3-C20環(huán)烷基。
48.權(quán)利要求47的方法，其中L3為亞環(huán)己基。
49.權(quán)利要求47的方法，其中R5為被N(ReRf)取代的C1-C10烷基。
50.權(quán)利要求49的方法，其中R5為
51.權(quán)利要求47的方法，其中R3為被C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、OR’、C(O)R’、COOR’、C(O)N(R’R”)、SO2R’或C(S)N(R’R”)取代的C3-C20雜環(huán)烷基，其中R’和R”各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
52.權(quán)利要求32的方法，其中所述炎癥性或免疫性疾病為視網(wǎng)膜病變、哮喘、變應(yīng)性鼻炎、過(guò)敏性肺病、自體免疫性疾病、移植排斥、人免疫缺陷病毒感染或癌癥。
53.權(quán)利要求52的方法，其中所述癌癥為腦癌、乳癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、腎癌、卵巢癌、甲狀腺癌、肺癌或造血系統(tǒng)癌。
54.權(quán)利要求52的方法，其中所述過(guò)敏性肺病為特發(fā)性肺纖維化。
55.權(quán)利要求52的方法，其中所述自身免疫性疾病為類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、強(qiáng)直性脊柱炎或系統(tǒng)性硬化癥。
56.權(quán)利要求32的方法，其中所述發(fā)育性或退行性疾病為脊髓性肌萎縮、杜興氏肌營(yíng)養(yǎng)不良、帕金森氏病或阿爾茨海默氏病。
57.權(quán)利要求32的方法，其中所述組織損傷為腦損傷、心臟損傷、肝損壞、骨骼肌損傷、腎損傷、胰腺損傷、肺損傷、皮膚損傷或胃腸道損傷。
58.用于治療炎癥性或免疫性疾病、發(fā)育性或退行性疾病或組織損傷的方法，其包括給藥有此需要的個(gè)體有效量的式(I)的化合物或其鹽
其中
X為-N(Ra)-或-O-；
L1和L2各自獨(dú)立地為C1-C10亞烷基、C1-C10亞雜烷基，-C(O)-或不存在；
L3為-N(Rb)-、C3-C20環(huán)烷基、芳基、雜芳基或不存在；
R1為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、芳基、雜芳基、鹵素、CN、ORc、COORc、OC(O)Rc、C(O)Rc、C(O)NRcRd或NRcRd；
R2和R3各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、鹵素、CN、ORe、COORe、OC(O)Re、C(O)Re、C(O)NReRf或NReRf；且
R4和R5各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基；或者R4和R5一起為C1-C10亞烷基或C1-C10亞雜烷基；
其中Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Rf各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
59.權(quán)利要求58的方法，其中X為-N(Ra)-；L1和L2各自獨(dú)立地為C1-C10亞烷基；L3不存在；R1為NRcRd；R2和R3各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、鹵素或C3-CX20環(huán)烷基；且R4和R5各自獨(dú)立地為H或C3-C20環(huán)烷基；或者R4和R5一起為C1-C10亞烷基或C1-C10亞雜烷基。
60.權(quán)利要求59方法，其中R5為
或者R4和R5一起為-CH2CH2-。
61.權(quán)利要求59的方法，其中Rc和Rd之一為被N(RR’)或芳基取代的C1-C10烷基，其中R和R’各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
62.權(quán)利要求61的方法，其中中Rc和Rd之一為
或
63.權(quán)利要求59的方法，其中R3為被C1-C10烷基取代的
所述C1-C10烷基進(jìn)一步被C3-C20雜環(huán)烷基或OR取代，R為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
64.權(quán)利要求58的方法，其中所述炎癥性或免疫性疾病為視網(wǎng)膜病變、哮喘、變應(yīng)性鼻炎、過(guò)敏性肺病、自體免疫性疾病、移植排斥、人免疫缺陷病毒感染或癌癥。
65.權(quán)利要求58的方法，其中所述發(fā)育性或退行性疾病為脊髓性肌萎縮、杜興氏肌營(yíng)養(yǎng)不良、帕金森氏病或阿爾茨海默氏病。
66.權(quán)利要求58的方法，其中所述組織損傷為腦損傷、心臟損傷、肝損壞、骨骼肌損傷、腎損傷、胰腺損傷、肺損傷、皮膚損傷或胃腸道損傷。
67.用于增強(qiáng)骨髓衍生細(xì)胞遷移至血液的方法，其包括給藥有此需要的個(gè)體有效量的式(I)的化合物或其鹽
其中
X為-N(Ra)-或-O-；或者X與R5一起為C3-C20雜環(huán)烷基；或者X與L2和L3一起為C3-C20雜環(huán)烷基；
L1和L2各自獨(dú)立地為C1-C10亞烷基、C1-C10亞雜烷基，-C(O)-或不存在；或者L1與L3、R4和連接至R4的氮一起為C3-C20雜環(huán)烷基，或者L2與L3和X一起為C3-C20雜環(huán)烷基；
L3為-N(Rb)-、-O-、芳基、雜芳基或C3-C20環(huán)烷基，或者L3與L1、R4和連接至R4的氮一起為C3-C20雜環(huán)烷基；或者L3與L2和X一起為C3-C20雜環(huán)烷基；
R1、R2和R3各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、鹵素、CN、ORc、COORc、OC(O)Rc、C(O)Rc、C(O)NRcRd或NRcRd；
R4為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基；且
R5為C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或者被C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基或N(ReRf)取代的C1-C10烷基；或者R5與X一起為C3-C20雜環(huán)烷基；
其中Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Rf各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或-C(O)R；R為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷、芳基或雜芳基。
68.權(quán)利要求67的方法，其中L1和L2各自獨(dú)立地為C1-C10亞烷基、-C(O)-或不存在；且L3為-N(Rb)-、-O-、芳基或C3-C20環(huán)烷基。
69.權(quán)利要求68的方法，其中X為-N(Ra)-。
70.權(quán)利要求69的方法，其中L3為-N(Rb)-。
71.權(quán)利要求70的方法，其中R5為C3-C20環(huán)烷基、被C3-C20環(huán)烷基取代的C1-C10烷基，或者被C1-C10烷基取代的C3-C20雜環(huán)烷基。
72.權(quán)利要求71的方法，其中R5為
或
73.權(quán)利要求70的方法，其中Rb為被N(R’R”)取代的C1-C10烷基，其中R’和R”各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
74.權(quán)利要求70的方法，其中R1為C3-C20雜環(huán)烷基。
75.權(quán)利要求74的方法，其中R1為
或
76.權(quán)利要求69的方法，其中L3為芳基。
77.權(quán)利要求76的方法，其中L3為亞苯基。
78.權(quán)利要求76的方法，其中R5為被C3-C20雜環(huán)烷基或N(ReRf)取代的C1-C10烷基；或者R5與X一起為C3-C20雜環(huán)烷基。
79.權(quán)利要求78的方法，其中R5為
或
或者R5與X一起為
80.權(quán)利要求76的方法，其中R3為H、鹵素、C1-C10烷基、ORc、NRcRd或者任選被C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、OR’、C(O)R’、COOR’、C(O)N(R’R”)、SO2R’、C(S)N(R’R”)、OSO3R’或PO(OR’)2取代的C3-C20雜環(huán)烷基，其中R’和R”各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
81.權(quán)利要求80的方法，其中R3為H、Cl、CH3、OPh、
任選被OH取代的
任選被C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、OH、C(O)R’、COOR’、C(O)N(R’R”)、SO2R’、C(S)N(R’R”)、OSO3R’、PO(OR’)2取代的
或者被OH或NHC(O)R”取代的NH(R’)。
82.權(quán)利要求69的方法，其中L3為C3-C20環(huán)烷基。
83.權(quán)利要求82的方法，其中L3為亞環(huán)己基。
84.權(quán)利要求82的方法，其中R5為被N(ReRf)取代的C1-C10烷基。
85.權(quán)利要求84的方法，其中R5為
86.權(quán)利要求82的方法，其中R3為被C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、OR’、C(O)R’、COOR’、C(O)N(R’R”)、SO2R’或C(S)N(R’R”)取代的C3-C20雜環(huán)烷基，其中R’和R”各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
87.權(quán)利要求67的方法，其中所述骨髓衍生細(xì)胞為CD34+細(xì)胞或CD133+細(xì)胞。
88.權(quán)利要求67的方法，其中所述骨髓衍生細(xì)胞為干細(xì)胞或內(nèi)皮祖細(xì)胞。
89.權(quán)利要求67的方法，其進(jìn)一步包括同時(shí)給藥所述個(gè)體有效量的G-CSF生長(zhǎng)因子。
90.用于增強(qiáng)骨髓衍生細(xì)胞遷移至血液的方法，其包括給藥有此需要的個(gè)體有效量的式(I)的化合物或其鹽
其中
X為-N(Ra)-或-O-；
L1和L2各自獨(dú)立地為C1-C10亞烷基、C1-C10亞雜烷基、-C(O)-或不存在；
L3為-N(Rb)-、C3-C20環(huán)烷基、芳基、雜芳基或不存在；
R1為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、芳基、雜芳基、鹵素、CN、ORc、COORc、OC(O)Rc、C(O)Rc、C(O)NRcRd或NRcRd；
R2和R3各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、鹵素、CN、ORe、COORe、OC(O)Re、C(O)Re、C(O)NReRf或NReRf；且
R4和R5各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基；或者Re和R5一起為C1-C10亞烷基或C1-C10亞雜烷基；
其中Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Rf各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
91.權(quán)利要求90的方法，其中X為-N(Ra)-；L1和L2各自獨(dú)立地為C1-C10亞烷基；L3不存在；R1為NRcRd，R2和R3各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、鹵素或C3-C20環(huán)烷基；且R4和R5各自獨(dú)立地為H或C3-C20環(huán)烷基；或者R4和R5一起為C1-C10亞烷基或C1-C10亞雜烷基。
92.權(quán)利要求91的方法，其中R5為
或者R4和R5一起為-CH2CH2-。
93.權(quán)利要求91的方法，其中Rc和Rd之一為被N(RR’)或芳基取代的C1-C10烷基，其中R和R’各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
94.權(quán)利要求93的方法，其中Rc和Rd之一為
或
95.權(quán)利要求91的方法，其中R3為被C1-C10烷基取代的
所述C1-C10烷基進(jìn)一步被C3-C20雜環(huán)烷基或OR取代，R為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
96.權(quán)利要求90的方法，其中所述骨髓衍生細(xì)胞為CD34+細(xì)胞或CD133+細(xì)胞。
97.權(quán)利要求90的方法，其中所述骨髓衍生細(xì)胞為干細(xì)胞或內(nèi)皮祖細(xì)胞。
98.權(quán)利要求90的方法，其進(jìn)一步包括同時(shí)給藥所述個(gè)體有效量的G-CSF生長(zhǎng)因子。
99.一種化學(xué)合成方法，其包括使式
的化合物與式
的化合物反應(yīng)，得到式(II)的化合物
其中
A為亞苯基、亞環(huán)己基、
或
R1、R2和R3各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、鹵素、CN、ORa、COORa、OC(O)Ra、C(O)Ra、C(O)NRaRb或NRaRb；
R6為鹵素；且
R7為氨基保護(hù)基；
其中Ra和Rb各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或-C(O)R；R為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
100.權(quán)利要求99的方法，其進(jìn)一步包括使式(II)的化合物脫保護(hù)，得到式(III)的化合物
101.權(quán)利要求100的方法，其中R1為N(RaRb)，其中Ra和Rb各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
102.權(quán)利要求101的方法，其中Ra和Rd之一為
或
103.權(quán)利要求100的方法，其中R3為任選被C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基或芳基取代的
104.權(quán)利要求99的方法，其中R3為鹵素。
105.權(quán)利要求104的方法，其進(jìn)一步包括使式(II)的化合物與式
的化合物反應(yīng)，得到式(IV)的化合物
其中Y為-O-、-CH2-或-N(Rc)-，其中Rc為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或鹵素。
106.權(quán)利要求105的方法，其進(jìn)一步包括使式(IV)的化合物脫保護(hù)，得到式(V)的化合物
107.權(quán)利要求105的方法，其中Y為NH。
108.權(quán)利要求107的方法，其進(jìn)一步包括使式(IV)的化合物與式
的化合物反應(yīng)，得到式(VI)的化合物
其中Z為-CH2-或-C(O)-；Rd為C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基；且Re為鹵素。
109.權(quán)利要求108的方法，其進(jìn)一步包括使式(VI)的化合物脫保護(hù)，得到式(VII)的化合物
110.權(quán)利要求107的方法，其進(jìn)一步包括使式(IV)的化合物與式
的化合物反應(yīng)，得到亞胺化合物，然后還原該亞胺化合物，得到式(VI)的化合物
其中Z為-C(O)-；Rd為C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基；且Re為H。
111.權(quán)利要求110的方法，其進(jìn)一步包括使式(VI)的化合物脫保護(hù)，得到式(VII)的化合物
112.權(quán)利要求107的方法，其進(jìn)一步包括使式(IV)的化合物與式
的化合物反應(yīng)，得到酯化合物，然后水解該酯化合物，得到式(VIII)的化合物
其中Rd為C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
113.權(quán)利要求112的方法，其進(jìn)一步包括使式(VIII)的化合物脫保護(hù)，得到式(IX)的化合物
114.權(quán)利要求107的方法，其進(jìn)一步包括使式(IV)的化合物與式
的化合物反應(yīng)，得到式(X)的化合物
其中Rd為C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
115.權(quán)利要求114的方法，其進(jìn)一步包括使式(X)的化合物脫保護(hù)，得到脫保護(hù)的化合物，然后水解該脫保護(hù)的化合物，得到式(XI)的化合物
116.權(quán)利要求104的方法，其進(jìn)一步包括使式(II)的化合物與式RcOH的化合物反應(yīng)，得到式(XII)的化合物
其中Rc為C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
117.權(quán)利要求116的方法，其進(jìn)一步包括使式(XII)的化合物脫保護(hù)，得到式(XIII)的化合物
118.權(quán)利要求99的方法，其中R2為CN。
119.權(quán)利要求118的方法，其進(jìn)一步包括還原式(II)的化合物，得到式(XIV)的化合物
120.權(quán)利要求119的方法，其進(jìn)一步包括使式(XIV)的化合物與式RcNH2的化合物反應(yīng)，得到亞胺化合物，然后還原該亞胺化合物，得到式(XV)的化合物
其中Rc為C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
121.權(quán)利要求120的方法，其進(jìn)一步包括使式(XV)的化合物脫保護(hù)，得到式(XVI)的化合物
122.權(quán)利要求99的方法，其中R7為叔丁氧羰基、芐氧羰基、乙酰基、苯基羰基或三烷基甲硅烷基。
123.一種化學(xué)合成方法，其包括使式
的化合物與式
的化合物反應(yīng)，得到式(XVII)的化合物
其中
R1和R2各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、鹵素、CN、ORa、COORa、OC(O)Ra、C(O)Ra、C(O)NRaRb或NRaRb；
R3為鹵素；且
R6為氨基保護(hù)基；
其中Ra和Rb各自獨(dú)立地為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或-C(O)R；R為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
124.權(quán)利要求123的方法，其進(jìn)一步包括保護(hù)式(XX)的化合物，然后使式(XVII)的被保護(hù)的化合物與式
的化合物反應(yīng)，得到式(XVIII)的化合物
其中R7為氨基保護(hù)基；且Y為-O-、-CH2-或-N(Rc)-，其中Rc為H、C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基或鹵素。
125.權(quán)利要求124的方法，其中Y為NH。
126.權(quán)利要求125的方法，其進(jìn)一步包括使式(XVIII)的化合物與式
的化合物反應(yīng)，得到酯化合物；
水解該酯化合物，得到酸化合物；和
使該酸化合物脫保護(hù)，得到式(XIX)的化合物
其中Rd為C1-C10烷基、C3-C20環(huán)烷基、C3-C20雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基；且Re為鹵素。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于治療炎癥性疾病或免疫性疾病、發(fā)育性或退行性疾病或組織損傷的方法。所述方法包括給藥有此需要的個(gè)體有效量的一種或多種式(I)的化合物。該式中的每個(gè)變量在說(shuō)明書(shū)中定義。
文檔編號(hào)A61K31/5377GK101242848SQ200680029591
公開(kāi)日2008年8月13日 申請(qǐng)日期2006年6月13日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月14日
發(fā)明者嚴(yán)啟峰, 胡正洸, 周銘城, 曾丞佐, 吳建煌, 黃盈慧, 陳淑貞, 金其新 申請(qǐng)人:太景生物科技股份有限公司