專利名稱：可用作蛋白激酶抑制劑的苯并咪唑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及蛋白激酶抑制劑化合物、含有這類化合物的組合物、制備這類化合物的方法和使用方法。更具體地說，這些化合物是FLT-3、PDK1和Aurora激酶的抑制劑，可用于治療被這些激酶抑制劑減輕的疾病狀態(tài)，例如癌癥。

背景技術(shù)：
Aurora蛋白是一族三種高度相關(guān)的絲氨酸/蘇氨酸激酶(稱為Aurora-A、-B和-C)，它們是通過細(xì)胞周期的有絲分裂期進(jìn)展所必需的。具體而言，Aurora-A在中心體成熟和分離、有絲分裂紡錘體的形成和染色體的可靠分離中發(fā)揮決定性作用。Aurora-B是一種染色體信使蛋白，在調(diào)節(jié)染色體在中期平板上的排列、紡錘體裝配檢查點(diǎn)和胞質(zhì)分裂的正確完成中發(fā)揮核心作用。
已經(jīng)在一些人類癌癥中觀察到Aurora-A、Aurora-B或Aurora-C的過度表達(dá)，包括結(jié)腸直腸、卵巢、胃和侵襲性導(dǎo)管腺癌。
一些研究現(xiàn)已證明，人癌細(xì)胞系中Aurora-A或-B被siRNA、顯性陰性或中和性抗體所減少或抑制破壞通過有絲分裂的進(jìn)展，伴有4NDNA細(xì)胞的蓄積。在有些情況下，這之后是內(nèi)加倍和細(xì)胞死亡。
FLT-3在造血和非造血細(xì)胞的維持、生長和發(fā)育中發(fā)揮重要作用[Scheijen，B，Griffin JD，Oncogene，2002，21，3314-3333 andReilly，JT，British Journal of Hema tology，2002，116，744-757]。FLT-3是一種受體酪氨酸激酶，它調(diào)節(jié)干細(xì)胞/早期祖代池的維持以及成熟淋巴樣與髓樣細(xì)胞的發(fā)育[Lyman，S，Jacobsen，S，Blood，1998，91，1101-1134]。
已經(jīng)顯示FLT-3在多種造血與非造血惡性腫瘤中發(fā)揮作用。誘導(dǎo)配體獨(dú)立性FLT-3活化的突變已經(jīng)在急性骨髓性白血病(AML)、急性淋巴細(xì)胞性白血病(ALL)、肥大細(xì)胞病和胃腸基質(zhì)腫瘤(GIST)中有牽連。除了活化性突變以外，過度表達(dá)的野生型FLT-3的配體依賴性(自分泌或副分泌)刺激也能夠?qū)盒员硇陀凶饔肹Scheijen，B，Griffin JD，Oncogene，2002，21，3314-3333]。
PDK1(3-磷酸肌醇-依賴性蛋白激酶-1)在介導(dǎo)很多不同的細(xì)胞事件中發(fā)揮關(guān)鍵作用，磷酸化發(fā)揮重要作用的關(guān)鍵調(diào)節(jié)蛋白，例如細(xì)胞存活、生長、增殖和葡萄糖調(diào)節(jié)[(Lawlor、M.A.等人，J.CellSci.，114，pp.2903-2910，2001)、(Lawlor、M.A.等人，EMBO J.，21，pp.3728-3738，2002)]。很多人類癌癥、包括前列腺和NSCL的PDK1信號(hào)傳導(dǎo)途徑功能都升高了，由一些不同的遺傳事件所導(dǎo)致，例如PTEN突變或某些關(guān)鍵調(diào)節(jié)蛋白的過度表達(dá)[(Graff，J.R.，ExpertOpin.Ther.Targets，6，pp.103-113，2002)，(Brognard，J.，等人，Cancer Res.，61，pp.3986-3997，2001)]。用指向PDK1的反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染PTEN陰性人癌細(xì)胞系(U87MG)，證明了PDK1抑制作為治療癌癥的機(jī)理。所致PDK1蛋白水平降低引起細(xì)胞增殖和存活的減少(Flynn，P.，等人，Curr.Biol.，10，pp.1439-1442，2000)。
蛋白激酶是治療廣泛人類疾病的新治療劑的誘人和已證實(shí)的目標(biāo)，治療劑的實(shí)例包括Gleevec和Tarceva。Aurora、FLT-3和PDK1激酶尤其是誘人的，因?yàn)樗鼈兣c大量人類癌癥有關(guān)，并且它們在這些癌細(xì)胞的增殖中發(fā)揮作用。因此，對(duì)于抑制蛋白激酶的化合物存在需求。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供化合物和其藥學(xué)上可接受的組合物，它們可用作蛋白激酶的抑制劑，例如Aurora蛋白激酶(Aurora A，Aurora B，AuroraC)、FLT-3激酶和PDK1激酶。這些化合物具有式I
或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中Q、R1和R2如下所定義。
這些化合物和其藥學(xué)上可接受的組合物可用于治療或預(yù)防多種疾病、疾患或病癥，包括但不限于癌癥和其他增殖性疾患。
由本發(fā)明所提供的化合物也可用于生物學(xué)與病理學(xué)現(xiàn)象中的激酶研究；由這類激酶介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的研究；和新的激酶抑制劑的對(duì)比評(píng)價(jià)。
本發(fā)明也提供制備本發(fā)明化合物的方法。
發(fā)明詳細(xì)內(nèi)容 本發(fā)明涉及式I化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽， 其中 Q選自下組
R1是H、C1-6脂族基或C3-8環(huán)脂族基，選擇性地被0-4個(gè)JR取代； 每個(gè)R2獨(dú)立地是ZR、MR、(LR)-ZR或(XR)-MR； 每個(gè)JQ獨(dú)立地是ZQ、MQ、(LQ)-ZQ或(XQ)-MQ； 每個(gè)LR、LQ、XR和XQ獨(dú)立地是C1-6烷基，選擇性地被至多2次出現(xiàn)的-NR-、-O-、-S-、-CO2-、-OC(O)-、-C(O)CO-、-C(O)-、-C(O)NR-、-C(＝N-CN)、-C(＝N-OH)、-NRCO-、-NRC(O)O-、-SO2NR-、-NRSO2-、-NRC(O)NR-、-OC(O)NR-、-NRSO2NR-、-SO-或-SO2-中斷； 其中 每個(gè)LR獨(dú)立地和選擇性地被0-2個(gè)JLR取代； 每個(gè)LQ獨(dú)立地和選擇性地被0-2個(gè)JLQ取代； 每個(gè)XR獨(dú)立地和選擇性地被0-2個(gè)JXR取代； 每個(gè)XQ獨(dú)立地和選擇性地被0-2個(gè)JXQ取代； 每個(gè)ZR和ZQ獨(dú)立地是H；C1-6脂族基；具有0-3個(gè)獨(dú)立選自氮、氧和硫的雜原子的3-8元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)；或者具有0-5個(gè)獨(dú)立選自氮、氧和硫的雜原子的8-12元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)環(huán)系；其中 每個(gè)ZR獨(dú)立地和選擇性地被0-4個(gè)JZR取代； 每個(gè)ZQ獨(dú)立地和選擇性地被0-4個(gè)JZQ取代； 每個(gè)MR和MQ獨(dú)立地是鹵代基、CN、CF3、NO2、OR、SR或N(R)2； 每個(gè)JR獨(dú)立地是C1-6脂族基、C1-6鹵代烷基、鹵代基、OH、C1-3烷氧基、NO2或CN； 每個(gè)JLR、JLQ、JXR、JXQ、JZR和JZQ獨(dú)立地是V、M、(LV)-V、(LM)-M、C1-6鹵代烷基、鹵代基、OH、C1-3烷氧基、NO2或CN； 每個(gè)R獨(dú)立地是H、C1-6脂族基、C6-10芳基、-(C1-6脂族基)-(C6-10芳基)、C3-8環(huán)脂族基、-C(＝O)(C1-6脂族基)、-C(＝O)(C3-8環(huán)脂族基)或-C(＝O)O(C1-6脂族基)；其中每個(gè)R獨(dú)立地和選擇性地被0-2個(gè)J取代； 每個(gè)LV和LM獨(dú)立地是C1-6烷基，選擇性地被至多2次出現(xiàn)的-NR-、-O-、-S-、-CO2-、-OC(O)-、-C(O)CO-、-C(O)-、-C(O)NR-、-C(＝N-CN)、-C(＝N-OH)、-NRCO-、-NRC(O)O-、-SO2NR-、-NRSO2-、-NRC(O)NR-、-OC(O)NR-、-NRSO2NR-、-SO-或-SO2-中斷； 其中 每個(gè)LV獨(dú)立地和選擇性地被0-2個(gè)JLV取代； 每個(gè)LM獨(dú)立地和選擇性地被0-2個(gè)JLM取代； 每個(gè)V獨(dú)立地是H；C1-6脂族基；具有0-3個(gè)獨(dú)立選自氮、氧和硫的雜原子的3-8元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)；或者具有0-5個(gè)獨(dú)立選自氮、氧和硫的雜原子的8-12元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)環(huán)系；其中每個(gè)V獨(dú)立地和選擇性地被0-2個(gè)JV取代； 每個(gè)J、JLV、JLM和JV獨(dú)立地是R′、C3-6環(huán)烷基、C1-6鹵代烷基、鹵代基、NO2、CN、OH、OR′、SH、SR′、NH2、NHR′、N(R′)2、COH、COR′、CONH2、CONHR′、CON(R′)2、NHCOR′、NR′COR′、NHCONH2、NHCONHR′、NHCON(R′)2、NR′CONH2、NR′CONHR′、NR′CON(R′)2、SO2NH2、SO2NHR′、SO2N(R′)2、NHSO2R′或NR′SO2R′； R′是未取代的C1-6脂族基；或者兩個(gè)R′基團(tuán)與它們所鍵合的原子一起構(gòu)成未取代的具有0-1個(gè)獨(dú)立選自氮、氧和硫的雜原子的3-8元飽和或部分飽和單環(huán)； 每個(gè)M獨(dú)立地是鹵代基、CN、CF3、NO2、OH、O(C1-6烷基)、SH、S(C1-6烷基)、NH2、NH(C1-6烷基)或N(C1-6烷基)2。
一種實(shí)施方式提供了 當(dāng)Q是

，R2不是在苯并咪唑環(huán)5或6位的
當(dāng)Q是

或

且R2是在苯并咪唑環(huán)5或6位的H、F、Cl、CH3、CF3、OCH3或OCH2CH3時(shí)，JQ不是-O-(C1-3脂族基)； 當(dāng)Q是

或

時(shí)，JQ不是選擇性地被甲基取代的
當(dāng)R1和R2是H時(shí)，Q不是

或
當(dāng)Q是

時(shí)，JQ不是Cl、NH2、

或NR”-Ar，其中Ar是選擇性地被取代的基團(tuán)，選自苯基、胡椒基或吡啶基；而R”是H或選擇性地被取代的C1-6脂族基。
本發(fā)明化合物包括如上一般性描述的那些，進(jìn)一步闡述為本文所公開的大類、小類和品種。除非另有說明，將適用以下定義。出于本發(fā)明的目的，化學(xué)元素將根據(jù)元素周期表CAS版Handbook ofChemistry and Physics，75th Ed進(jìn)行識(shí)別。另外，有機(jī)化學(xué)的一般原理描述在“Organic Chemistry”，Thomas Sorrell，UniversityScience Books，Sausalito1999，和“March′s Advanced OrganicChemistry”，5th Ed.，Ed.Smith，M.B.and March，J.，John Wiley&Sons，New York2001中，其完整內(nèi)容引用在此作為參考。
正如本文所述，所指定的原子數(shù)量范圍包括其中的任意整數(shù)。例如，具有1-4個(gè)原子的基團(tuán)可以具有1、2、3或4個(gè)原子。
正如本文所述，苯并咪唑環(huán)的編號(hào)如下所示。

正如本文所述，本發(fā)明化合物可以選擇性地被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，例如如上一般性描述的那些，或者被闡述為本文所公開的大類、小類和品種。將領(lǐng)會(huì)到，措辭“選擇性地被取代的”與措辭“取代或未取代的”可互換使用。一般而言，術(shù)語“取代”無論前面有無術(shù)語“選擇性地”，都表示給定結(jié)構(gòu)中的氫原子團(tuán)被特定取代基的原子團(tuán)所代替。除非另有說明，選擇性地被取代的基團(tuán)可以在該基團(tuán)每個(gè)可取代的位置上具有取代基，若任意給定結(jié)構(gòu)中一個(gè)以上位置可以被一個(gè)以上選自指定組的取代基所取代，則取代基可以在每個(gè)位置上是相同或不同的。本發(fā)明所關(guān)注的取代基組合優(yōu)選地是能形成穩(wěn)定的或化學(xué)上可行的化合物的那些。
本文所用的術(shù)語“穩(wěn)定的”表示在受到用于它們的制備、檢測、優(yōu)選它們的回收、純化的條件的作用和用于一種或多種本文所公開的目的時(shí)基本上不變的化合物。在有些實(shí)施方式中，穩(wěn)定的化合物或化學(xué)上可行的化合物是在沒有水分或其他化學(xué)反應(yīng)性條件的存在下、在40℃或以下的溫度下保持至少一周而基本上不發(fā)生變化的化合物。
本文所用的術(shù)語“脂族基”或“脂族基團(tuán)”表示直鏈(即未分支)或支鏈的取代或未取代的烴鏈，它是完全飽和的或者含有一個(gè)或多個(gè)不飽和單元，具有單一的與分子其余部分連接的點(diǎn)。除非另有說明，脂族基團(tuán)含有1-20個(gè)脂族碳原子。在有些實(shí)施方式中，脂族基團(tuán)含有1-10個(gè)脂族碳原子。在其他實(shí)施方式中，脂族基團(tuán)含有1-8個(gè)脂族碳原子。在其他實(shí)施方式中，脂族基團(tuán)含有1-6個(gè)脂族碳原子，在其他實(shí)施方式中，脂族基團(tuán)含有1-4個(gè)脂族碳原子。適合的脂族基團(tuán)包括但不限于直鏈或支鏈的取代或未取代的烷基、烯基或炔基。具體實(shí)例包括但不限于甲基、乙基、異丙基、正丙基、仲丁基、乙烯基、正丁烯基、乙炔基和叔丁基。
術(shù)語“環(huán)脂族基”(或者“碳環(huán)”或“環(huán)烷基”或“環(huán)烷基”)表示單環(huán)C3-C8烴或二環(huán)C8-C12烴，它是完全飽和的或者含有一個(gè)或多個(gè)不飽和單元，但不是芳族的，它具有單一的與分子其余部分連接的點(diǎn)，其中所述二環(huán)環(huán)系中任意單個(gè)的環(huán)是3-7元環(huán)。適合的環(huán)脂族基團(tuán)包括但不限于環(huán)烷基和環(huán)烯基。具體實(shí)例包括但不限于環(huán)己基、環(huán)丙烯基和環(huán)丁基。在有些實(shí)施方式中，所述環(huán)脂族基團(tuán)可以是“橋連”的。
“橋連”的環(huán)由含有附加烷基鏈的環(huán)組成，其中所述鏈的每個(gè)末端鍵合于該環(huán)的環(huán)成員，其條件是該鏈的兩個(gè)末端不鍵合于相同的環(huán)成員。所述烷基鏈可以選擇性地被選自O(shè)、N和S的雜原子中斷。橋連環(huán)脂族基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于二環(huán)[3.3.2]癸烷、二環(huán)[3.1.1]庚烷和二環(huán)[3.2.2]辛烷。
本文所用的術(shù)語“雜環(huán)”、“雜環(huán)基”、“雜環(huán)脂族基”或“雜環(huán)的”表示非芳族的、單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)環(huán)系，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)成員是獨(dú)立選擇的雜原子。在有些實(shí)施方式中，“雜環(huán)”、“雜環(huán)基”、“雜環(huán)脂族基”或“雜環(huán)的”基團(tuán)具有三至十四個(gè)環(huán)成員，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)成員是獨(dú)立選自氧、硫、氮或磷的雜原子，該系統(tǒng)中每個(gè)環(huán)含有3至7個(gè)環(huán)成員。在有些實(shí)施方式中，所述環(huán)是橋連的。橋連雜環(huán)的實(shí)例包括但不限于7-氮雜-二環(huán)[2.2.1]庚烷和3-氮雜-二環(huán)[3.2.2]辛烷。
適合的雜環(huán)包括但不限于3-1H-苯并咪唑-2-酮，3-(1-烷基)-苯并咪唑-2-酮，2-四氫呋喃基、3-四氫呋喃基、2-四氫噻吩基、3-四氫噻吩基、2-嗎啉代基、3-嗎啉代基、4-嗎啉代基、2-硫嗎啉代基、3-硫嗎啉代基、4-硫嗎啉代基、1-吡咯烷基、2-吡咯烷基、3-吡咯烷基、1-四氫哌嗪基、2-四氫哌嗪基、3-四氫哌嗪基、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、1-吡唑啉基、3-吡唑啉基、4-吡唑啉基、5-吡唑啉基、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基、2-噻唑烷基、3-噻唑烷基、4-噻唑烷基、1-咪唑烷基、2-咪唑烷基、4-咪唑烷基、5-咪唑烷基、二氫吲哚基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基、苯并硫雜環(huán)戊烷、苯并二噻烷(benzodithiane)和1，3-二氫-咪唑-2-酮。
術(shù)語“雜原子”表示一個(gè)或多個(gè)氧、硫、氮、磷或硅(包括氮、硫、磷或硅的任意氧化形式；任意堿性氮或雜環(huán)可取代氮的季銨化形式，例如N(如在3，4-二氫-2H-吡咯基中)、NH(如在吡咯烷基中)或NR+(如在N-取代的吡咯烷基中))。
本文所用的術(shù)語“不飽和的”意味著該部分具有一個(gè)或多個(gè)不飽和單元。
本文所用的術(shù)語“烷氧基”或“硫代烷基”表示如前文所定義的烷基通過氧(“烷氧基”)或硫(“硫代烷基”)原子與主體碳鏈連接。
術(shù)語“鹵代烷基”、“鹵代烯基”和“鹵代烷氧基”表示被一個(gè)或多個(gè)鹵原子取代的烷基、烯基或烷氧基，視情況而定。術(shù)語“鹵素”表示F、Cl、Br或I。
單獨(dú)或者作為更大部分“芳烷基”、“芳烷氧基”或“芳氧基烷基”的一部分使用的術(shù)語“芳基”表示具有總計(jì)五至十四個(gè)環(huán)成員的單環(huán)、二環(huán)和三環(huán)環(huán)系，其中該系統(tǒng)中至少一個(gè)環(huán)是芳族的，并且其中該系統(tǒng)中每個(gè)環(huán)含有3至7個(gè)環(huán)成員。術(shù)語“芳基”可以與術(shù)語“芳基環(huán)”互換使用。
單獨(dú)或者作為更大部分“雜芳烷基”或“雜芳基烷氧基”的一部分使用的術(shù)語“雜芳基”表示具有總計(jì)五至十四個(gè)環(huán)成員的單環(huán)、二環(huán)和三環(huán)環(huán)系，其中該系統(tǒng)中至少一個(gè)環(huán)是芳族的，該系統(tǒng)中至少一個(gè)環(huán)含有一個(gè)或多個(gè)雜原子，并且其中該系統(tǒng)中每個(gè)環(huán)含有3至7個(gè)環(huán)成員。術(shù)語“雜芳基”可以與術(shù)語“雜芳基環(huán)”或術(shù)語“雜芳族基”互換使用。適合的雜芳基環(huán)包括但不限于2-呋喃基、3-呋喃基、N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基、苯并咪唑基、3-異噁唑基、4-異噁唑基、5-異噁唑基、2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基、N-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、噠嗪基(例如3-噠嗪基)、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、四唑基(例如5-四唑基)、三唑基(例如2-三唑基和5-三唑基)、2-噻吩基、3-噻吩基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基(例如2-吲哚基)、吡唑基(例如2-吡唑基)、異噻唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基、1，2，4-噁二唑基、1，2，3-三唑基、1，2，3-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、嘌呤基、吡嗪基、1，3，5-三嗪基、喹啉基(例如2-喹啉基、3-喹啉基、4-喹啉基)和異喹啉基(例如1-異喹啉基、3-異喹啉基或4-異喹啉基)。
芳基(包括芳烷基、芳烷氧基、芳氧基烷基等)或雜芳基(包括雜芳烷基和雜芳烷氧基等)可以含有一個(gè)或多個(gè)取代基，因而可以是“選擇性地被取代的”。除非上下文另有定義，芳基或雜芳基的不飽和碳原子上適合的取代基一般選自鹵素；-Ro；-ORo；-SRo；選擇性地被Ro取代的苯基(Ph)；選擇性地被Ro取代的-O(Ph)；-(CH2)1-2(Ph)，選擇性地被Ro取代；-CH＝CH(Ph)，選擇性地被Ro取代；選擇性地被Ro取代的5-6元雜芳基或雜環(huán)；-NO2；-CN；-N(Ro)2；-NRoC(O)Ro；-NRoC(S)Ro；-NRoC(O)N(Ro)2；-NRoC(S)N(Ro)2；-NRoCO2Ro；-NRoNRoC(O)Ro；-NRoNRoC(O)N(Ro)2；-NRoNRoCO2Ro；-C(O)C(O)Ro；-C(O)CH2C(O)Ro；-CO2Ro；-C(O)Ro；-C(S)Ro；-C(O)N(Ro)2；-C(S)N(Ro)2；-OC(O)N(Ro)2；-OC(O)Ro；-C(O)N(ORo)Ro；-C(NORo)Ro；-S(O)2Ro；-S(O)3Ro；-SO2N(Ro)2；-S(O)Ro；-NRoSO2N(Ro)2；-NRoSO2Ro；-N(ORo)Ro；-C(＝NH)-N(Ro)2；-P(O)2Ro；-PO(Ro)2；-OPO(Ro)2；或-(CH2)0-2NHC(O)Ro；其中每次獨(dú)立出現(xiàn)的Ro選自氫、選擇性地被取代的C1-6脂族基、未取代的5-6元雜芳基或雜環(huán)、苯基、-O(Ph)或-CH2(Ph)，或者盡管有如上定義，相同取代基或不同取代基上兩次獨(dú)立出現(xiàn)的Ro與每個(gè)Ro基團(tuán)所鍵合的原子一起構(gòu)成選擇性地被取代的3-12元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)或二環(huán)，具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。
Ro的脂族基團(tuán)上可選的取代基選自NH2、NH(C1-4脂族基)、N(C1-4脂族基)2，鹵素、C1-4脂族基、OH、O(C1-4脂族基)、NO2、CN、CO2H、CO2(C1-4脂族基)、O(鹵代C1-4脂族基)或鹵代C1-4脂族基，其中Ro的每個(gè)上述C1-4脂族基團(tuán)是未取代的。
脂族基團(tuán)或非芳族雜環(huán)可以含有一個(gè)或多個(gè)取代基，因而可以是“選擇性地被取代的”。除非上下文另有定義，脂族或雜脂族基團(tuán)或者非芳族雜環(huán)的飽和碳原子上適合的取代基選自上文關(guān)于芳基或雜芳基不飽和碳所列舉的那些，并且另外包括下列基團(tuán)＝O、＝S、＝NNHR*、＝NN(R*)2、＝NNHC(O)R*、＝NNHCO2(烷基)、＝NNHSO2(烷基)、或＝NR*，其中每個(gè)R*獨(dú)立地選自氫或選擇性地被取代的C1-6脂族基團(tuán)。
除非上下文另有定義，非芳族雜環(huán)氮上可選的取代基一般選自-R+、-N(R+)2、-C(O)R+、-CO2R+、-C(O)C(O)R+、-C(O)CH2C(O)R+、-SO2R+、-SO2N(R+)2、-C(＝S)N(R+1)2、-C(＝NH)-N(R+)2或-NR+SO2R+；其中R+是氫、選擇性地被取代的C1-C6脂族基、選擇性地被取代的苯基、選擇性地被取代的-O(Ph)、選擇性地被取代的-CH2(Ph)、選擇性地被取代的-(CH2)1-2(Ph)、選擇性地被取代的-CH＝CH(Ph)或者未取代的5-6元雜芳基或雜環(huán)，具有一至四個(gè)獨(dú)立選自氧、氮或硫的雜原子，或者盡管有如上定義，在相同取代基或不同取代基上兩次獨(dú)立出現(xiàn)的R+與每個(gè)R+基團(tuán)所鍵合的原子一起構(gòu)成選擇性地被取代的3-12元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)或二環(huán)，具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。
R+的脂族基團(tuán)或苯基環(huán)上可選的取代基選自-NH2、-NH(C1-4脂族基團(tuán))、-N(C1-4脂族基團(tuán))2、鹵素、C1-4脂族基團(tuán)、-OH、-O(C1-4脂族基團(tuán))、-NO2、-CN、-CO2H、-CO2(C1-4脂族基團(tuán))、-O(鹵代C1-4脂族基團(tuán))和鹵代C1-4脂族基團(tuán)，其中R+的每個(gè)上述C1-4脂族基團(tuán)是未取代的。
術(shù)語“亞烷基鏈”表示直鏈或支鏈碳鏈，它可以是完全飽和的或者具有一個(gè)或多個(gè)不飽和單元，并且具有兩個(gè)與分子其余部分連接的點(diǎn)。
本文所用的術(shù)語“保護(hù)基團(tuán)”表示用于暫時(shí)封閉多官能團(tuán)化合物中一個(gè)或多個(gè)所需反應(yīng)性位置的成分。在某些實(shí)施方式中，保護(hù)基團(tuán)具有下列特征中的一個(gè)或多個(gè)或者優(yōu)選全部a)以良好的收率選擇性反應(yīng)，得到被保護(hù)的底物，它對(duì)發(fā)生在一個(gè)或多個(gè)其他反應(yīng)性位置的反應(yīng)而言是穩(wěn)定的；和b)以良好的收率被不攻擊所再生的官能團(tuán)的試劑所選擇性除去。示范性保護(hù)基團(tuán)參見Greene，T.W.，Wuts，P.G in″Protective Groups in Organic Synthesis″，Third Edition，JohnWiley & Sons，New York1999，其完整內(nèi)容引用在此作為參考。本文所用的術(shù)語“氮保護(hù)基團(tuán)”表示用于暫時(shí)封閉多官能化合物中一個(gè)或多個(gè)所需氮反應(yīng)性位置的成分。優(yōu)選的氮保護(hù)基團(tuán)也具備上述特征，某些示范性氮保護(hù)基團(tuán)也參見Chapter 7 in Greene，T.W.，Wuts，P.G in ″Protective Groups in Organic Synthesis″，Third Edition，John Wiley & Sons，New York1999，其完整內(nèi)容引用在此作為參考。
如上所述，在有些實(shí)施方式中，兩次獨(dú)立出現(xiàn)的Ro(或者R+、R、R′或任何其他在本文中有類似定義的變量)與它們所鍵合的原子一起構(gòu)成選擇性地被取代的3-12元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)或二環(huán)，具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。
兩次獨(dú)立出現(xiàn)的Ro(或者R+、R、R′或任何其他在本文中有類似定義的變量)與每個(gè)變量所鍵合的原子一起所構(gòu)成的示范性環(huán)包括但不限于下列a)兩次獨(dú)立出現(xiàn)的Ro(或者R+、R、R′或任何其他在本文中有類似定義的變量)鍵合于同一原子，并且與該原子一起構(gòu)成一個(gè)環(huán)，例如N(Ro)2，其中出現(xiàn)的兩個(gè)Ro與氮原子一起構(gòu)成哌啶-1-基、哌嗪-1-基或嗎啉-4-基；和b)兩次獨(dú)立出現(xiàn)的Ro(或者R+、R、R′或任何其他在本文中有類似定義的變量)鍵合于不同原子，并且與這些原子一起構(gòu)成一個(gè)環(huán)，例如

其中苯基被兩次出現(xiàn)的ORo取代，這兩次出現(xiàn)的Ro與它們所鍵合的氧原子一起構(gòu)成稠合的6-元含氧環(huán)

將領(lǐng)會(huì)到，兩次獨(dú)立出現(xiàn)的Ro(或者R+、R、R′或任何其他在本文中有類似定義的變量)與每個(gè)變量所鍵合的原子一起可以構(gòu)成多種其他環(huán)，并且上述詳細(xì)實(shí)例不打算是限制性的。
在有些實(shí)施方式中，烷基或脂族基鏈可以選擇性地被另一原子或基團(tuán)中斷。這意味著烷基或脂族基鏈的亞甲基單元選擇性地被所述其他原子或基團(tuán)代替。這類原子或基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于-NR-、-O-、-S-、-CO2-、-OC(O)-、-C(O)CO-、-C(O)-、-C(O)NR-、-C(＝N-CN)、-NRCO-、-NRC(O)O-、-SO2NR-、-NRSO2-、-NRC(O)NR-、-OC(O)NR-、-NRSO2NR-、-SO-或-SO2-，其中R如本文所定義。除非另有說明，所述選擇性的替代生成化學(xué)上穩(wěn)定的化合物。所述選擇性的中斷可以發(fā)生在該鏈以內(nèi)和該鏈兩端之一；也就是連接的點(diǎn)和/或末端。兩個(gè)選擇性的替代也可以在鏈內(nèi)彼此相鄰，只要其導(dǎo)致化學(xué)上穩(wěn)定的化合物。除非另有說明，如果替代或中斷發(fā)生在末端，替代原子鍵合于末端上的H。例如，如果-CH2CH2CH3選擇性地被-O-中斷，所致化合物可能是-OCH2CH3、-CH2OCH3或-CH2CH2OH。
除非另有規(guī)定，本文所描繪的結(jié)構(gòu)也意味著包括該結(jié)構(gòu)的所有異構(gòu)(例如對(duì)映異構(gòu)、非對(duì)映異構(gòu)和幾何異構(gòu)(或構(gòu)象異構(gòu)))形式；例如每個(gè)不對(duì)稱中心的R與S構(gòu)型，(Z)與(E)雙鍵異構(gòu)體，和(Z)與(E)構(gòu)象異構(gòu)體。因此，這些化合物的單一立體化學(xué)異構(gòu)體以及對(duì)映異構(gòu)、非對(duì)映異構(gòu)和幾何異構(gòu)(或構(gòu)象異構(gòu))混合物都屬于本發(fā)明的范圍。
除非另有規(guī)定，本發(fā)明化合物的所有互變異構(gòu)形式都屬于本發(fā)明的范圍。
除非另有規(guī)定，取代基可以自由地圍繞任意可旋轉(zhuǎn)的價(jià)鍵旋轉(zhuǎn)。例如，被畫作

的取代基也代表
另外，除非另有規(guī)定，本文所描繪的結(jié)構(gòu)也意味著包括僅在一個(gè)或多個(gè)同位素富集原子的存在上有所不同的化合物。例如，除了氫被氘或氚代替或者碳被13C-或14C-富集的碳代替以外具有本發(fā)明結(jié)構(gòu)的化合物都屬于本發(fā)明的范圍。這類化合物例如可用作生物學(xué)測定法中的分析工具或探針。
使用下列縮寫 DBU是二氮雜二環(huán)十一烷 DCM是二氯甲烷 DIPEA是二異丙基乙基胺 DMSO是二甲基亞砜 DMF是二甲基甲酰胺 EtOAc是乙酸乙酯 HPLC是高效液相色譜 i-PrOH是異丙醇 MeCN是乙腈 TEA是三乙胺 TFA是三氟乙酸 TMP是2，2，6，6-四甲基哌啶 Rt是保留時(shí)間 LCMS是液相色譜-質(zhì)譜 1H NMR是核磁共振 按照本發(fā)明的一種實(shí)施方式，R1是H。
在另一種實(shí)施方式中，Q是
在有些實(shí)施方式中，Q是
在有些實(shí)施方式中，Q是
在其他實(shí)施方式中，Q是
在其他實(shí)施方式中，Q是
在有些實(shí)施方式中，JQ是(LQ)-ZQ或(XQ)-MQ。
在本發(fā)明的有些實(shí)施方式中，Q被JQ單取代，如式II所示
在有些實(shí)施方式中，JQ是(LQ)-ZQ。
在某些實(shí)施方式中，LQ是C1-6烷基，選擇性地被至多2次出現(xiàn)的-NR-、-O-、-S-、-C(O)-、-C(O)NR-、-NRCO-、-SO2NR-或-NRSO2-中斷。
在其他實(shí)施方式中，LQ是C1-6烷基，選擇性地被至多2次出現(xiàn)的-NR-、-O-或-S-中斷。
在有些實(shí)施方式中，LQ是C1-6烷基，選擇性地被至多1次出現(xiàn)的-NR-中斷。在某些實(shí)施方式中，1次出現(xiàn)的-NR-直接連接于環(huán)Q。
在有些實(shí)施方式中，LQ是-NH-、-NR-、-NH(C1-5烷基)-或-NR(C1-5烷基)-；其中R是C1-6烷基。
在本發(fā)明的有些實(shí)施方式中，每個(gè)JLQ獨(dú)立地是鹵代基、C1-6脂族基或C1-6鹵代烷基。
在本發(fā)明的另一種實(shí)施方式中，ZQ選自H或者如下選擇性地被取代的基團(tuán)C1-6脂族基、C3-10環(huán)脂族基、苯基、5-8元雜芳基和5-8元雜環(huán)基。
在有些實(shí)施方式中，ZQ是H或選擇性地被取代的C1-6脂族基。
在其他實(shí)施方式中，ZQ是選擇性地被取代的苯基。
在其他實(shí)施方式中，ZQ是5-8元雜環(huán)基，含有至多2個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子。在有些實(shí)施方式中，ZQ是5-8元雜環(huán)基，含有至多2個(gè)氮原子。在有些實(shí)施方式中，所述雜環(huán)基是哌啶、哌嗪、高哌啶或高哌嗪。在有些實(shí)施方式中，所述雜環(huán)基是哌啶或哌嗪。
在本發(fā)明的另一種實(shí)施方式中，JQ是(XQ)-MQ。
在有些實(shí)施方式中，XQ是C1-6烷基，選擇性地被至多2次出現(xiàn)的-NR-、-O-、-S-、-C(O)-、-C(O)NR-、-NRCO-、-SO2NR-或-NRSO2-中斷。在有些實(shí)施方式中，XQ是C1-6烷基，選擇性地被至多2次出現(xiàn)的-NR-、-O-或-S-中斷。在其他實(shí)施方式中，XQ是C1-6烷基，選擇性地被至多1次出現(xiàn)的-NR-中斷。在其他實(shí)施方式中，1次出現(xiàn)的-NR-直接鍵合于環(huán)Q。
在本發(fā)明的有些實(shí)施方式中，每個(gè)JXQ獨(dú)立地是鹵代基、C1-6脂族基或C1-6鹵代烷基。
在某些實(shí)施方式中，MQ是OR或N(R)2。在其他實(shí)施方式中，MQ是NH2。
在有些實(shí)施方式中，JQ是ZQ或MQ。在有些實(shí)施方式中，JQ是ZQ。在其他實(shí)施方式中，JQ是MQ。
在有些實(shí)施方式中，JQ是選擇性地被取代的基團(tuán)，選自N(R)2、-NR-(C1-3烷基)-N(R)2或-NR-(5-8元雜環(huán)基)。
在本發(fā)明的一種實(shí)施方式中，JQ是NH2、-NHCH2CH2NH2、-NHCH(JXQ)CH2NH2或
在有些實(shí)施方式中，JQ是-NHCH(JXQ)CH2NH2。
在有些實(shí)施方式中，JXQ是H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基。
在另一種實(shí)施方式中，R2選自ZR或MR。
在某些實(shí)施方式中，ZR是H或者選自如下的選擇性地被取代的基團(tuán)C1-6脂族基、C3-6環(huán)脂族基和C3-6雜環(huán)基。在有些實(shí)施方式中，ZR是H或選擇性地被取代的C1-6脂族基。在有些實(shí)施方式中，ZR是選擇性地被取代的基團(tuán)，選自C1-6脂族基、C3-6環(huán)脂族基和C3-6雜環(huán)基。
在有些實(shí)施方式中，MR是鹵代基、CN、CF3、NO2、OR或N(R)2，其中R是H或C1-3烷基。
本發(fā)明的一種實(shí)施方式可以由式II-a所代表
本發(fā)明的另一種實(shí)施方式可以由式III所代表
本發(fā)明的另一種實(shí)施方式可以由式III-a所代表
III-a。
在本發(fā)明的有些實(shí)施方式中，至少一個(gè)R2不是H。在有些實(shí)施方式中，兩個(gè)R2都不是H。在有些實(shí)施方式中，每個(gè)R2獨(dú)立地是ZR或MR。在有些實(shí)施方式中，兩個(gè)R2基團(tuán)都是ZR或MR。在有些實(shí)施方式中，兩個(gè)R2基團(tuán)都是ZR。在其他實(shí)施方式中，R2是C1-3烷基。在有些實(shí)施方式中，R2是甲基。
在有些實(shí)施方式中，ZR是C1-6脂族基；具有0-3個(gè)獨(dú)立選自氮、氧和硫的雜原子的3-8元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)；或者具有0-5個(gè)獨(dú)立選自氮、氧和硫的雜原子的8-12元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)環(huán)系。在有些實(shí)施方式中，ZR是C1-6脂族基。
在有些實(shí)施方式中，各變量是如表1化合物所描繪的。
本發(fā)明的代表性化合物列在下表1中。
表1式I化合物的實(shí)例



本發(fā)明化合物一般可以借助本領(lǐng)域技術(shù)人員已知用于類似化合物的方法加以制備，如下流程所述。
流程I
流程I描繪制備其中Q是2，4-嘧啶的化合物的方法。NHR’代表JQ基團(tuán)，其中JQ經(jīng)由氮原子連接于嘧啶。
流程I’
流程I’描繪制備其中Q是2，4-嘧啶的化合物的方法。NH-JJ代表JQ基團(tuán)，其中JQ經(jīng)由氮原子連接于嘧啶。
流程I-a
流程I-a描繪制備其中Q是


或

的化合物的方法；R1、R2和JQ如本文所定義。
適合用在流程I-a中的堿的實(shí)例包括但不限于DIPEA、TEA、DBU和TMP。
適合用在流程I-a中的溶劑的實(shí)例包括但不限于DMF、i-PrOH、正丁醇、叔丁醇、乙腈、THF和二噁烷。
流程I-b
流程I-b描繪制備其中Q是

或

的化合物的方法；R1、R2和JQ如本文所定義；-B(ORX)2代表本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的代硼酸酯或酸。
正如將為本領(lǐng)域技術(shù)人員所認(rèn)識(shí)到的，代硼酸和酯可以經(jīng)由多種已知條件與苯并咪唑的氮原子偶聯(lián)。通常，這些條件包括但不限于催化劑、堿和配體，在適合的溶劑中。
適合的催化劑的實(shí)例包括但不限于Pd(OAc)2和Pd2(dba)3。
適合的溶劑的實(shí)例包括但不限于甲苯、二甲苯和二噁烷。
適合的堿的實(shí)例包括但不限于叔丁醇鈉、叔丁醇鉀和Cs2CO3。
適合的配體的實(shí)例包括但不限于BINAP、DPPF、(o-tol)3P和(±)PPF-OMe。
流程II
流程II描繪制備其中R2是芳基或雜芳基的化合物的方法。
一種實(shí)施方式提供制備式I化合物的方法
其中R1、R2和JQ如本文所定義； 環(huán)Q是

或
包含使式a化合物
其中R1和R2如本文所定義； 與式b化合物
其中環(huán)Q是

或
JQ如本文所定義； 在適合的代硼酸/酯偶聯(lián)條件下反應(yīng)。
另一種實(shí)施方式提供制備式I化合物的方法
其中R1、R2和JQ如本文所定義； 環(huán)Q是
包括使式a化合物
其中R1和R2如本文所定義； 與式c化合物
其中JQ如本文所定義；而 環(huán)Q是
在適合的置換條件下反應(yīng)。
在有些實(shí)施方式中，式c中的鹵代基是氯。
另一種實(shí)施方式提供制備式I化合物的方法
其中R2、R2、環(huán)Q和JQ如本文所定義； 包括使式7化合物
其中R2和環(huán)Q如本文所定義； 與CN-Br在適合的環(huán)化條件下環(huán)化。環(huán)化條件的實(shí)例包括但不限于在室溫下、在MeOH中攪拌30h。
另一種實(shí)施方式提供制備式7化合物的方法，包括還原式6化合物
其中R2和環(huán)Q如本文所定義； 在本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的還原條件下，生成式7化合物。還原條件的實(shí)例包括但不限于SnCl2/EtOH、Fe/AcOH、In/HCl和Pd/C。
另一種實(shí)施方式提供制備式6化合物的方法，包括使式5化合物
其中R2如本文所定義； 與

反應(yīng)，其中環(huán)Q如本文所定義； 在適合的置換條件下，生成式6化合物。適合的置換條件包括但不限于堿和溶劑。適合的堿的實(shí)例包括但不限于Cs2CO3和K2CO3。適合的溶劑包括但不限于DMF和EtOH。
另一種實(shí)施方式提供制備式5化合物的方法，包括使式4化合物去保護(hù)
在本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的適合的去保護(hù)條件下，生成式5化合物。適合的去保護(hù)條件的實(shí)例包括但不限于在適合的溶劑中(例如MeOH、EtOH)使用一種酸(例如HCl或H2SO4)。
另一種實(shí)施方式提供制備式4化合物的方法，包括使式3化合物
與H2N-C(CH3)3在適合的置換條件下反應(yīng)，生成式4化合物。適合的置換條件包括但不限于適合的堿，例如DIPEA、TEA、DBU或TMP，并且在適合的溶劑中，例如DMF、二噁烷或THF。
另一種實(shí)施方式提供制備式3化合物的方法，包括偶聯(lián)

與R2-B(ORX)2，其中R2如本文所定義，-B(ORX)2代表本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的代硼酸酯或酸；在本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的適合的Suzuki(代硼酸/酯)偶聯(lián)條件下，生成式3化合物。適合的Suzuki偶聯(lián)條件通常牽涉使用催化劑、堿和代硼酸或酯，并且在適合的溶劑中。適合的催化劑的實(shí)例包括但不限于Pd(PPh3)2Cl2、Pd(PPh3)4和PdCl2(dppf)。適合的堿包括但不限于K2CO3和Na2CO3。適合的溶劑包括但不限于四氫呋喃、二噁烷、甲苯和乙醇。
另一種實(shí)施方式提供制備式1化合物的方法
包括使式a化合物
其中R1和R2如本文所定義； 與

在適合的置換條件下反應(yīng)，生成式1化合物。適合的置換條件包括但不限于適合的堿，例如DIPEA、TEA、DBU或TMP，在適合的溶劑中，例如DMF、二噁烷或THF。
另一種實(shí)施方式提供制備式2化合物的方法
包括加熱式1化合物與NH2-JJ(含有反應(yīng)性氨基的JQ基團(tuán))，在適合的置換條件下，生成式2化合物。適合的置換條件包括但不限于加熱適合的堿，例如DIPEA、TEA、DBU或TMP，并且在適合的溶劑中，例如DMF、異丙醇、二噁烷或THF。
本發(fā)明的一方面涉及在患者中治療被蛋白激酶抑制劑治療減輕的疾病狀態(tài)的方法，該方法包括對(duì)需要這樣一種治療的患者給予治療有效量的式I化合物。
該方法特別可用于治療被Aurora激酶(Aurora A，Aurora B，Aurora C)，F(xiàn)LT-3或PDK1的使用所減輕的疾病狀態(tài)。
可以體外、體內(nèi)或者在細(xì)胞系中測定化合物作為蛋白激酶抑制劑的活性。體外測定法包括測定對(duì)激酶活性或活化激酶的ATP酶活性的抑制作用。作為替代選擇，體外測定法量化抑制劑與蛋白激酶結(jié)合的能力，可以這樣測量，在結(jié)合之前放射性標(biāo)記抑制劑，分離抑制劑/激酶復(fù)合物，再測定所結(jié)合的放射性標(biāo)記的量，或者進(jìn)行競爭實(shí)驗(yàn)，其中將新抑制劑和與已知放射性配體結(jié)合的激酶一起溫育。
本發(fā)明的另一方面涉及在有此需要的接受者中治療癌癥的方法，包括先后或共同給予本發(fā)明化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和抗癌劑。在有些實(shí)施方式中，所述抗癌劑選自喜樹堿、阿霉素、伊達(dá)比星、順鉑、紫杉醇、泰索帝(taxotere)、長春新堿、tarceva、MEK抑制劑、U0126、KSP抑制劑或vorinostat。
蛋白激酶抑制劑或其藥物鹽可以被配制成供動(dòng)物或人給藥的藥物組合物。這些藥物組合物包含有效治療或預(yù)防Aurora、FLT-3或PDK1介導(dǎo)病癥的量的蛋白激酶抑制劑和藥學(xué)上可接受的載體，是本發(fā)明的另一種實(shí)施方式。
本文所用的術(shù)語“蛋白激酶-介導(dǎo)的病癥”表示已知蛋白激酶在其中發(fā)揮作用的任何疾病或其他有害病癥。這類病癥非限制性地包括自體免疫疾病、炎性疾病、神經(jīng)與神經(jīng)變性疾病、癌癥、心血管疾病、變態(tài)反應(yīng)和哮喘。
術(shù)語“癌癥”包括但不限于下列癌癥口的表皮樣瘤口腔、唇、舌、口、咽；心肉瘤(血管肉瘤、纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤、脂肉瘤)、粘液瘤、橫紋肌瘤、纖維瘤、脂肪瘤和畸胎瘤；肺支氣管癌(鱗狀細(xì)胞或表皮樣、未分化小細(xì)胞、未分化大細(xì)胞、腺癌)、肺泡(支氣管泡)癌、支氣管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、錯(cuò)構(gòu)軟骨瘤、間皮瘤；胃腸食管(鱗狀細(xì)胞癌、喉、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)、胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)、胰腺(管腺癌、胰島瘤、高血糖素瘤、胃泌素瘤、癌樣腫瘤、vipoma)、小腸(腺癌、淋巴瘤、癌樣腫瘤、卡波濟(jì)氏肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、神經(jīng)纖維瘤、纖維瘤)、大腸(腺癌、管狀腺瘤、絨毛狀腺瘤、錯(cuò)構(gòu)瘤、平滑肌瘤)、結(jié)腸、結(jié)腸-直腸、結(jié)直腸、直腸；生殖泌尿道腎(腺癌、維爾姆氏瘤(腎胚細(xì)胞瘤)、淋巴瘤、白血病)、膀胱與尿道(鱗狀細(xì)胞癌、過渡型細(xì)胞癌、腺癌)、前列腺(腺癌、肉瘤)、睪丸(精原細(xì)胞瘤、畸胎瘤、胚胎癌、畸胎癌、絨毛膜癌、肉瘤、間質(zhì)細(xì)胞癌、纖維瘤、纖維腺瘤、腺瘤樣腫瘤、脂肪瘤)；肝肝細(xì)胞瘤(肝細(xì)胞癌)、膽管癌、肝胚細(xì)胞瘤、血管肉瘤、肝細(xì)胞腺瘤、血管瘤、膽道；骨骨原性肉瘤(骨肉瘤)、纖維肉瘤、惡性纖維組織細(xì)胞瘤、軟骨肉瘤、尤因氏肉瘤、惡性淋巴瘤(網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤)、多發(fā)性骨髓瘤、惡性巨細(xì)胞腫瘤脊索瘤、骨軟骨瘤(骨軟骨外生骨疣)、良性軟骨瘤、成軟骨細(xì)胞瘤、軟骨粘液纖維瘤、骨樣骨瘤和巨細(xì)胞腫瘤；神經(jīng)系統(tǒng)頭顱(骨瘤、血管瘤、肉芽瘤、黃瘤、畸形性骨炎)、腦膜(腦膜瘤、腦膜肉瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤病)、腦(星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、室管膜瘤、生殖細(xì)胞瘤(松果體瘤)、多形性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤、神經(jīng)鞘瘤、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、先天性腫瘤)、脊髓神經(jīng)纖維瘤、腦膜瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、肉瘤)；婦科子宮(子宮內(nèi)膜癌)、宮頸(宮頸癌、腫瘤前宮頸發(fā)育異常)、卵巢(卵巢癌(嚴(yán)重囊腺癌、粘液囊腺癌、未分類的癌)、粒層-泡膜細(xì)胞腫瘤、Sertoli-Leydig細(xì)胞腫瘤、無性細(xì)胞瘤、惡性畸胎瘤)、外陰(鱗狀細(xì)胞癌、上皮內(nèi)癌、腺癌、纖維肉瘤、黑素瘤)、陰道(明細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、葡萄樣肉瘤(胚胎橫紋肌肉瘤)、輸卵管(癌)、乳腺；血液血液(骨髓性白血病(急性和慢性)、急性成淋巴細(xì)胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、骨髓增殖疾病、多發(fā)性骨髓瘤、脊髓發(fā)育不良綜合征)、何杰金氏病、非何杰金氏淋巴瘤(惡性淋巴瘤)；毛發(fā)細(xì)胞；淋巴樣疾患；皮膚惡性黑素瘤、基底細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、卡波濟(jì)氏肉瘤、角化棘皮瘤、痣發(fā)育異常、脂肪瘤、血管瘤、皮膚纖維瘤、瘢痕瘤、牛皮癬；甲狀腺乳頭狀甲狀腺癌、濾泡性甲狀腺癌、骨髓性甲狀腺癌、未分化的甲狀腺癌、多發(fā)性內(nèi)分泌瘤形成2A型、多發(fā)性內(nèi)分泌瘤形成2B型、家族性骨髓性甲狀腺癌、嗜鉻細(xì)胞瘤、副神經(jīng)節(jié)瘤；和腎上腺成神經(jīng)細(xì)胞瘤。因而，由本文提供的術(shù)語“癌細(xì)胞”包括被任意一種上述病癥折磨的細(xì)胞。在有些實(shí)施方式中，癌癥選自結(jié)直腸、甲狀腺或乳腺癌。
本文所用的術(shù)語“Aurora-介導(dǎo)的病癥”或“Aurora-介導(dǎo)的疾病”表示已知Aurora(Aurora A，Aurora B和Aurora C)在其中發(fā)揮作用的任何疾病或其他有害病癥。這類病癥非限制性地包括癌癥，例如結(jié)直腸、甲狀腺和乳腺癌；和骨髓增殖性疾病，例如真性紅細(xì)胞增多、血小板增多、伴有骨髓纖維化的骨髓組織變形、慢性骨髓性白血病(CML)、慢性骨髓單核細(xì)胞性白血病、嗜曙紅細(xì)胞過多綜合征、青少年骨髓單核細(xì)胞性白血病和系統(tǒng)性肥大細(xì)胞病。
本文所用的術(shù)語“FLT-3-介導(dǎo)的疾病”或“FLT-3-介導(dǎo)的病癥”表示已知FLT-3家族激酶在其中發(fā)揮作用的任何疾病或其他有害病癥。這類病癥非限制性地包括造血系統(tǒng)疾病，特別是急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、急性前髓細(xì)胞性白血病(APL)和急性淋巴細(xì)胞性白血病(ALL)。
除了本發(fā)明的化合物以外，在治療或預(yù)防上述疾患的組合物中也可以采用本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的衍生物或前體藥物。
“藥學(xué)上可接受的衍生物或前體藥物”表示本發(fā)明化合物的任何藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或其他衍生物，在對(duì)接受者給藥后能夠直接或間接提供本發(fā)明化合物或者其抑制性活性的代謝產(chǎn)物或殘余物。特別可取的衍生物和前體藥物是這樣的，它們在這類化合物對(duì)哺乳動(dòng)物給藥時(shí)增加本發(fā)明化合物的生物利用度(例如允許口服給藥的化合物更容易吸收進(jìn)入血液)，或者相對(duì)于母體種類增強(qiáng)母體化合物向生物體腔的遞送(例如肝、腦或淋巴系統(tǒng))。
本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的前體藥物非限制性地包括酯、氨基酸酯、磷酸酯、金屬鹽和磺酸酯。
本發(fā)明也包括本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的鹽包括從藥學(xué)上可接受的無機(jī)與有機(jī)酸與堿衍生的那些。適合的酸式鹽的實(shí)例包括但不限于乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、富馬酸鹽、葡庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、草酸鹽、撲酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽和十一烷酸鹽。其他酸、例如草酸，盡管本身不是藥學(xué)上可接受的，不過可以用于制備在獲得本發(fā)明化合物和它們藥學(xué)上可接受的酸加成鹽中可用作中間體的鹽。
從適當(dāng)?shù)膲A衍生的鹽包括但不限于堿金屬(例如鈉和鉀)、堿土金屬(例如鎂)、銨和N+(C1-4烷基)4的鹽。本發(fā)明也涵蓋本文公開化合物的任何含堿性氮基團(tuán)的季銨化作用。這類季銨化作用可以得到水或油可溶性或可分散性產(chǎn)物。
可以用在這些組合物中的藥學(xué)上可接受的載體包括但不限于離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、血清蛋白質(zhì)例如人血清白蛋白、緩沖物質(zhì)例如磷酸鹽、甘氨酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、鹽或電解質(zhì)例如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、膠體二氧化硅、三硅酸鎂、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素類物質(zhì)、聚乙二醇、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、蠟類、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。
本發(fā)明的這類藥物組合物可以被口服、腸胃外、通過吸入噴霧、局部、直腸、鼻、口腔、陰道或經(jīng)由植入藥庫給藥。本文所用的術(shù)語“腸胃外”包括皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸骨內(nèi)、鞘內(nèi)、肝內(nèi)、損傷區(qū)內(nèi)與顱內(nèi)注射或輸注技術(shù)。優(yōu)選地，組合物是口服或靜脈內(nèi)給藥的。
本發(fā)明組合物的無菌可注射形式可以是水性或油性混懸劑。這些混懸劑可以按照本領(lǐng)域已知的技術(shù)、利用適合的分散或潤濕劑和懸浮劑加以配制。無菌的可注射制劑還可以是在無毒的腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液劑或混懸劑，例如在1，3-丁二醇中的溶液?？梢圆捎玫目山邮艿馁x形劑和溶劑是水、林格氏溶液和等滲的氯化鈉溶液。另外，無菌的不揮發(fā)油也經(jīng)常被用作溶劑或懸浮介質(zhì)。為此，可以采用任何溫和的不揮發(fā)油，包括合成的單-或二-甘油酯。脂肪酸、例如油酸及其甘油酯衍生物可用于制備注射劑，還有天然的藥學(xué)上可接受的油，例如橄欖油或蓖麻油，尤其是它們的聚氧乙基化形式。這些油溶液劑或混懸劑還可以含有長鏈醇稀釋劑或分散劑，例如羧甲基纖維素或相似的分散劑，它們普遍用于配制藥學(xué)上可接受的劑型，包括乳劑和混懸劑。出于制劑的目的，還可以使用其他常用的表面活性劑，例如吐溫類、司盤類，和其他乳化劑或生物利用度增強(qiáng)劑，它們普遍用在藥學(xué)上可接受的固體、液體或其他劑型的制備中。
本發(fā)明的藥物組合物可以按任意口服可接受的劑型口服給藥，包括但不限于膠囊劑、片劑、水性混懸劑或溶液劑。在口服用片劑的情況下，常用的載體包括乳糖和玉米淀粉。通常還加入潤滑劑，例如硬脂酸鎂。對(duì)于以膠囊劑型口服給藥而言，有用的稀釋劑包括乳糖和干燥的玉米淀粉。當(dāng)口服使用需要水性混懸劑時(shí)，活性成分是與乳化和懸浮劑聯(lián)用的。如果需要的話，還可以加入某些甜味劑、矯味劑或著色劑。
作為替代選擇，本發(fā)明藥物組合物可以以栓劑形式直腸給藥。它們可以如下制備，將藥物與適合的無刺激性賦形劑混合，所述賦形劑在室溫下是固體，但是在直腸溫度下是液體，因此將在直腸內(nèi)融化，釋放藥物。這類材料包括可可脂、蜂蠟和聚乙二醇。
本發(fā)明藥物組合物還可以被局部給藥，尤其當(dāng)治療靶包括容易為局部用藥接近的區(qū)域或器官時(shí)，包括眼、皮膚或下部腸道的疾病。適合的局部制劑容易根據(jù)每種這些區(qū)域或器官加以制備。
下部腸道的局部用藥可以以直腸栓劑(見上)或適合的灌腸劑進(jìn)行。還可以使用局部透皮貼劑。
就局部用藥而言，可以將藥物組合物配制成適合的軟膏劑，其中含有懸浮或溶解在一種或多種載體中的活性組分。用于本發(fā)明化合物局部給藥的載體包括但不限于礦物油、液體凡士林、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蠟和水。作為替代選擇，可以將藥物組合物配制成適合的洗劑或霜?jiǎng)?，其中含有懸浮或溶解在一種或多種藥學(xué)上可接受的載體中的活性組分。適合的載體包括但不限于礦物油、脫水山梨醇單硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、鯨蠟酯蠟、鯨蠟硬脂醇、2-辛基十二烷醇、芐醇和水。
就眼用而言，可以將藥物組合物配制成在等滲的經(jīng)過pH調(diào)節(jié)的無菌鹽水中的微粉化混懸劑，或者優(yōu)選為在等滲的經(jīng)過pH調(diào)節(jié)的無菌鹽水中的溶液，其中含有或沒有防腐劑，例如苯扎氯銨。作為替代選擇，就眼用而言，可以將藥物組合物配制成軟膏劑，例如凡士林。
本發(fā)明藥物組合物還可以借助鼻氣霧劑或吸入給藥。這類組合物是按照藥物制劑領(lǐng)域熟知的技術(shù)制備的，可以制成在鹽水中的溶液劑，其中采用苯甲醇或其他適合的防腐劑、增強(qiáng)生物利用度的吸收增強(qiáng)劑、碳氟化合物和/或其他常規(guī)的增溶或分散劑。
激酶抑制劑可以與載體材料組合形成單一劑型的量將因所治療的宿主和特定的給藥模式而異。優(yōu)選地，組合物應(yīng)當(dāng)被配制成可以對(duì)接受這些組合物的患者給予0.01-100mg/kg體重/天抑制劑之間的劑量。
也應(yīng)當(dāng)理解，就任意特定患者而言的具體劑量和治療制度將依賴于多種因素，包括所采用的具體化合物的活性、年齡、體重、一般健康狀況、性別、飲食、給藥時(shí)間、排泄速率、藥物組合、主治醫(yī)師的判斷和所治療特定疾病的嚴(yán)重性。抑制劑的量也將依賴于組合物中的特定化合物。
本發(fā)明的一種實(shí)施方式提供治療或預(yù)防Aurora-介導(dǎo)病癥的方法，包括對(duì)患者給予本文所述化合物或藥物組合物之一的步驟。本文所用的術(shù)語“患者”表示動(dòng)物，優(yōu)選人。
另一種實(shí)施方式提供治療或預(yù)防FLT-3-介導(dǎo)病癥的方法，包括對(duì)患者給予式I化合物或包含所述化合物的組合物的步驟。
另外一種實(shí)施方式提供治療或預(yù)防增殖疾患或癌癥的方法，包括對(duì)患者給予式I化合物或包含所述化合物的組合物的步驟。
本發(fā)明的另一方面涉及在患者中抑制Aurora或FLT-3活性的方法，該方法包括對(duì)該患者給予式I化合物或包含所述化合物的組合物。
一種實(shí)施方式提供在患者中抑制Aurora蛋白激酶活性的方法，包括對(duì)患者給予式I化合物或包含所述化合物的組合物。
另一種實(shí)施方式提供在患者中抑制FLT-3蛋白激酶活性的方法，包括對(duì)患者給予式I化合物或包含所述化合物的組合物。
另外一種實(shí)施方式提供在患者中抑制PDK1蛋白激酶活性的方法，包括對(duì)患者給予式I化合物或包含所述化合物的組合物。
在有些實(shí)施方式中，這些方法用于治療或預(yù)防病癥，選自癌癥，例如乳腺、結(jié)腸、前列腺、皮膚、胰腺、腦、生殖泌尿道、淋巴系統(tǒng)、胃、喉和肺的癌癥，包括肺腺癌和小細(xì)胞肺癌；中風(fēng)、糖尿病、骨髓瘤、肝腫大、心肥大、阿爾茨海默氏病、囊性纖維化和病毒疾病，或者本文所述的任意具體疾病或疾患。
按照另一種實(shí)施方式，本發(fā)明提供治療或預(yù)防選自增殖疾患或癌癥的病癥的方法，包括對(duì)患者給予本文所述化合物或藥物組合物之一的步驟。
在有些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供治療或預(yù)防癌癥的方法，包括對(duì)患者給予本文所述化合物或藥物組合物之一的步驟。在有些實(shí)施方式中，所述癌癥選自腦(神經(jīng)膠質(zhì)瘤)、乳腺、結(jié)腸、頭頸、腎、肺、肝、黑素瘤、卵巢、胰腺、前列腺、肉瘤或甲狀腺。在其他實(shí)施方式中，所述癌癥選自黑素瘤、骨髓瘤、白血病、淋巴瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤或者選自如下的癌癥結(jié)腸、乳腺、胃、卵巢、宮頸、肺、中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)、腎、前列腺、膀胱或胰腺癌。在其他實(shí)施方式中，所述癌癥選自胰腺、前列腺或卵巢癌。
按照另一種實(shí)施方式，本發(fā)明提供治療或預(yù)防FLT-3-介導(dǎo)病癥的方法，包括對(duì)患者給予式I化合物或包含所述化合物的組合物的步驟。
優(yōu)選地，該方法用于治療或預(yù)防選自造血疾患的病癥，特別是急性骨髓性白血病(AML)、急性前髓細(xì)胞性白血病(APL)、慢性骨髓性白血病(CML)和急性淋巴細(xì)胞性白血病(ALL)。
本發(fā)明的另一方面涉及在患者中抑制Aurora、FLT-3或PDK1活性，該方法包括對(duì)該患者給予式I化合物或包含所述化合物的組合物。
本發(fā)明的另一方面涉及在生物樣品或患者中抑制Aurora、FLT-3或PDK1活性，該方法包括使所述生物樣品與式I化合物或包含所述化合物的組合物接觸。本文所用的術(shù)語“生物樣品”表示體外或來自體內(nèi)的樣品，非限制性地包括細(xì)胞培養(yǎng)物及其提取物；從哺乳動(dòng)物或其提取物獲得的活組織檢查材料；和血液、唾液、尿、糞便、精液、淚液或其他體液或其提取物。
在生物樣品中抑制Aurora、FLT-3或PDK1活性可用于本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的多種目的。這類目的的實(shí)例包括但不限于輸血、器官移植、生物樣本貯存和生物測定。
另一種實(shí)施方式提供在有此需要的患者中治療癌癥的方法，包括通過用式I化合物或包含所述化合物的組合物抑制Aurora來破壞癌細(xì)胞有絲分裂的步驟。
另一種實(shí)施方式提供在有此需要的患者中治療癌癥的方法，包括通過用式I化合物或包含所述化合物的組合物抑制FLT-3來破壞癌細(xì)胞有絲分裂的步驟。
依賴于所要治療或預(yù)防的特定疾病或病癥，可以與本發(fā)明的抑制劑一起給予在正常情況下給藥治療或預(yù)防該病癥的附加藥物。例如，化療劑或其他抗增殖劑可以與本發(fā)明的Aurora、FLT-3或PDK1抑制劑聯(lián)合治療增殖疾病。
這些附加成分可以被獨(dú)立于含有Aurora、FLT-3或PDK1抑制劑的化合物或組合物給藥，作為多重劑量制度的一部分。作為替代選擇，這些成分可以是單一劑型的一部分，與Aurora、FLT-3或PDK1抑制劑一起混合在單一組合物中。

具體實(shí)施例方式 為了更加充分地理解本發(fā)明，陳述下列制備和測試實(shí)施例。這些實(shí)施例僅供闡述的目的，不被解釋為以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例1
1-(6-氯嘧啶-4-基)-5，6-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-胺(1)向圓底燒瓶裝入4，6-二氯嘧啶(1.69g，11.3mmol)、2-氨基-5，6-二甲基苯并咪唑(1.83g，11.3mmol)、D I PEA(1.92ml，11.3mmol)和DMF(50ml)。將反應(yīng)混合物在80℃下劇烈攪拌6天，然后冷卻至室溫。然后在真空中除去反應(yīng)混合物的揮發(fā)性組分，使殘余物吸附上二氧化硅，然后經(jīng)過柱色譜純化，使用己烷(40-60)/EtOAc 0％至100％作為洗脫劑，得到黃色固體(1.09g，35％)。1H NMR(CDCl3)2.35(3H，s)，2.39(3H，s)，6.43(2H，brs)，7.25(2H，m)，7.75(1H，s)，8.93(1H，s).LC/MS 374.30[M+H] 372.50[M-H]。

1-(6-((S)-1-1-氨基-3-甲基丁烷-2-基氨基)嘧啶-4-基)-5，6-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-胺，二TFA鹽(化合物2)向試管裝入1-(6-氯嘧啶-4-基)-5，6-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-胺(1)(0.27g，1.0mmol)、叔丁基(S)-2-氨基-3-甲基丁基氨基甲酸酯(0.20g，1.0mmol)、DIPEA(0.34ml，2.0mmol)和異丙醇(5ml)，然后密封，加熱至120℃達(dá)2天。冷卻至室溫后，在真空中除去揮發(fā)性組分，殘余物經(jīng)過柱色譜純化，使用己烷(40-60)/EtOAc 0％至100％作為洗脫劑，得到蠟狀白色固體。將這種產(chǎn)物溶于DCM(5ml)和TFA(2ml)，在室溫下攪拌2h。然后在真空中除去揮發(fā)性組分，殘余物在C-18反相柱上經(jīng)過制備型HPLC純化，使用0％至100％梯度的MeCN和水/0.05％w/v TFA作為洗脫劑。然后將含有產(chǎn)物的級(jí)分冷凍干燥，得到所需產(chǎn)物，為白色固體(0.13g，29.6％)。1H NMR(DMSO-d6)0.94(6H，m)，1.95(1H，m)，2.31(6H，s)，2.87(1H，m)，3.11(1H，m)，4.34(1H，s)，6.90(1H，s)，7.25(1H，s)，7.36(1H，s)，7.94(4H，m)，8.55(1H，s)，8.84(2H，s)；LC/MS 340.45[M+H]338.63[M-H]。
以與實(shí)施例1相似的方式制備化合物1-15和19-44。以與實(shí)施例1相似的方式也可以制備化合物45-58。
實(shí)施例2
3-(4-氟-3-硝基苯基)吡啶將2.0g 3-吡啶代硼酸、3.22g 4-溴-1-氟-2-硝基苯和285mg Pd(PPh3)2Cl2先后加入到50mL經(jīng)過脫氣的1，4-二噁烷中，將混合物在室溫下攪拌20min。加入50mL經(jīng)過脫氣的碳酸鈉水溶液(1M)，在氬下將反應(yīng)混合物在回流下加熱1.5h。在真空中除去溶劑，加入乙酸乙酯，通過C鹽過濾溶液。將濾液用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，濃縮，得到粗品化合物3，為深褐色固體。粗混合物在60-120目硅膠柱上經(jīng)過柱色譜純化，使用2％MeOH/CHCl3作為洗脫劑，得到黃色固體(1.58g，80％)。m.p.87-88℃；
N-叔丁基-2-硝基-4-(吡啶-3-基)苯胺在氮?dú)夥障?，向攪拌?.58g 3-(4-氟-3-硝基苯基)吡啶的5.0mL DMF溶液加入1.124gN-乙基二異丙基胺，繼之以2.116g叔丁基胺。維持反應(yīng)混合物在50℃下達(dá)5.0h。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯和水稀釋。分離有機(jī)層，用水繼之以鹽水溶液洗滌。將有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，得到橙色固體(1.57g，85％)。m.p.67-69℃；
2-硝基-4-(吡啶-3-基)苯胺向攪拌的1.5g N-叔丁基-2-硝基-4-(吡啶-3-基)苯胺的15mL甲醇溶液加入9mL 6N HCl。使溶液回流3h。然后將反應(yīng)物用氯仿稀釋，用飽和NaHCO3溶液調(diào)節(jié)pH至7。分離有機(jī)層，用水繼之以鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，得到橙色固體(1.06g，90％)。

2-(2-硝基-4-(吡啶-3-基)苯基氨基)吡啶-3-甲腈向攪拌的0.5g 2-硝基-4-(吡啶-3-基)苯胺的3mL DMF溶液加入2.267g CS2CO3，繼之以0.386g 2-氯-3-氰基-吡啶。在氮?dú)夥障聦⒎磻?yīng)混合物加熱至130℃達(dá)5h。然后將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯和水稀釋。分離有機(jī)層，用水繼之以鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，得到黃色固體(0.440g，60％)。mp91-92℃。

2-(2-氨基-4-(吡啶-3-基)苯基氨基)吡啶-3-甲腈在室溫下，向攪拌的0.3g 2-(2-硝基-4-(吡啶-3-基)苯基氨基)吡啶-3-甲腈的15mL乙醇溶液加入0.471g氯化亞錫。使反應(yīng)混合物回流2.5h。將反應(yīng)物用20mL乙酸乙酯、15mL水稀釋，然后用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)至堿性pH 8-9。分離有機(jī)層，用水繼之以鹽水溶液洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，得到黃色固體(0.217g，80％)。mp67-68℃；
2-(2-氨基-5-(吡啶-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-1-基)吡啶-3-甲腈(化合物18)在0℃下，向攪拌的170mg 2-(2-氨基-4-(吡啶-3-基)苯基氨基)吡啶-3-甲腈的5mL甲醇與5mL水溶液加入65mg溴化氰。使反應(yīng)混合物達(dá)到室溫，在該溫度和氮?dú)夥障聰嚢?h。將反應(yīng)物用20mL乙酸乙酯、15mL水稀釋，然后用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)至堿性pH8。分離有機(jī)層，用水繼之以鹽水溶液洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，得到粗的固體。粗化合物經(jīng)過制備型TLC純化，使用5％MeOH/CHCl3作為洗脫劑，得到淡黃色固體(25mg，10.6％)。LC/MS 313.2[M+H]1HNMR(300MHz、CDCl3)8.99(br.d、J＝3.0Hz，1H)，8.83(dd、J＝8.1Hz，1H)，8.73(d、J＝8.4Hz，1H)，8.57(dd、J＝3.3Hz，1H)，8.24(br.s，1H)，8.18(dt、J＝2.1Hz，1H)，7.96(d，1H、J＝1.5Hz)，7.65(m，3H)，7.51(q，2H、J＝4.8Hz)。
以與實(shí)施例2相似的方式制備化合物16-18。
下表2描繪某些示范性化合物的數(shù)據(jù)?；衔锞幪?hào)對(duì)應(yīng)于在表1中描繪的那些化合物。
用到下列分析方法。
方法A 在MicroMass Quattro Micro質(zhì)譜儀上分析質(zhì)譜樣品，采用單一MS模式和電子噴霧電離。利用色譜法向質(zhì)譜儀引入樣品。全部質(zhì)譜分析的移動(dòng)相由10mM pH 7乙酸銨和1∶1乙腈-甲醇混合物組成，柱梯度條件為5％-100％乙腈-甲醇?xì)v經(jīng)4.5min梯度時(shí)間和6.2min運(yùn)行時(shí)間，柱子為ACE C8 3.0 x 75mm。流速為1.0ml/min。
方法B 在MicroMass ZQ、ZMD或Quattro II質(zhì)譜儀上分析質(zhì)譜樣品，采用單一MS模式和電子噴霧電離。利用流式注射(FIA)或色譜法向質(zhì)譜儀引入樣品。全部質(zhì)譜分析的移動(dòng)相由乙腈-水混合物組成，含有0.2％甲酸或0.1％TFA作為改性劑。柱梯度條件為10％-90％乙腈歷經(jīng)3min梯度時(shí)間和5min運(yùn)行時(shí)間，柱子為Waters YMC Pro-C18 4.6 x50mm。流速為1.5ml/min。
方法C 與方法C相同，但是柱梯度條件為5％-45％乙腈歷經(jīng)5min梯度時(shí)間和7min運(yùn)行時(shí)間，柱子為Waters YMC Pro-C18 2 x 50mm。流速為1.0ml/min。
表2 生物學(xué)方法 實(shí)施例1Aurora B抑制作用測定法(放射分析) 制備測定緩沖溶液，由25mM HEPES (pH 7.5)、10mM MgCl2、0.1％BSA和10％甘油組成。在測定緩沖液中制備22nM Aurora-B溶液，也含有1.7mM DTT和1.5mM Kemptide(LRRASLG)。在96-孔平板中，向22μL Aurora-B溶液加入2μl化合物的DMSO儲(chǔ)備溶液，使混合物在25℃下平衡10分鐘。酶反應(yīng)引發(fā)于加入在測定緩沖液中制備的16μl儲(chǔ)備[γ-33P]-ATP溶液(～20nCi/μL)，最終測定濃度為800μM。3小時(shí)后，反應(yīng)終止于加入16μL 500mM磷酸，借助下列方法測定向肽底物中結(jié)合33P的水平。
將磷酸纖維素96-孔平板(Millipore，Cat no.MAPHNOB50)用100μL 100mM磷酸預(yù)處理，然后加入酶反應(yīng)混合物(40μL)。用溶液浸泡磷酸纖維素膜達(dá)30分鐘，平板隨后用200μL 100mM磷酸洗滌四次。向干燥平板的每孔加入30μL Optiphase ‘SuperMix′液體閃爍雞尾酒試劑(Perkin Elmer)，然后閃爍計(jì)數(shù)(1450 Microbeta LiquidScintillation Counter，Wallac)。如下測定無酶催化的背景放射性水平，向?qū)φ湛准尤?6μL 500 mM磷酸，其中含有全部測定組分(起到使酶變性的作用)，然后加入[γ-33P]-ATP溶液。從在每個(gè)抑制劑濃度下所測量的計(jì)數(shù)值中減去平均背景計(jì)數(shù)值，計(jì)算酶催化的33P結(jié)合水平。就每個(gè)Ki測定而言，一式兩份獲得8個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)，通常覆蓋0-10μM的化合物濃度范圍(從初始的10mM化合物儲(chǔ)備液制備DMSO儲(chǔ)備液，隨后進(jìn)行1∶2.5系列稀釋)。利用Prism軟件包(Prism 3.0，Graphpad Software，San Diego，CA)，借助非線性回歸分析，從初始速率數(shù)據(jù)計(jì)算Ki值。
下列化合物抑制Aurora-B的Ki值為＜1uM化合物1-4、14和28。
實(shí)施例2FLT-3抑制作用測定法 利用放射性濾器-結(jié)合測定法針對(duì)其抑制FLT-3活性的能力篩選化合物。本測定法監(jiān)測33P向底物poly(Glu，Tyr)4∶1(pE4Y)的結(jié)合。反應(yīng)是在含有100mM HEPES(pH 7.5)、10mM MgCl2、25mM NaCl、1mM DTT、0.01％BSA和2.5％DMSO的溶液中進(jìn)行的。測定中的最終底物濃度為90μM ATP和0.5mg/mL pE4Y(二者均來自Sigma Chemicals，St Louis，MO)。本發(fā)明化合物的最終濃度一般在0.01與5μM之間。通常，從10mM供試化合物的DMSO儲(chǔ)備溶液制備系列稀釋液，進(jìn)行12點(diǎn)滴定。反應(yīng)是在室溫下進(jìn)行的。
制備兩種測定溶液。溶液1含有100mM HEPES(pH 7.5)、10mMMgCl2、25mM NaCl、1mg/mL pE4Y和180mM ATP(每一反應(yīng)含有0.3mCi[γ-33P]ATP)。溶液2含有100mM HEPES(pH 7.5)、10mM MgCl2、25mM NaCl、2mM DTT、0.02％BSA和3nM FLT-3。在96孔平板中混合50μL溶液1和2.5mL本發(fā)明化合物。用溶液2引發(fā)反應(yīng)。在室溫下溫育20分鐘后，用含有0.4mM ATP的50μL 20％TCA終止反應(yīng)。然后借助來自TOMTEC(Hamden，CT)的Harvester 9600將全部反應(yīng)體積轉(zhuǎn)移至過濾平板，用5％TCA洗滌。借助Packard Top CountMicroplate閃爍計(jì)數(shù)器(Meriden，CT)分析向pE4Y結(jié)合的33P量。利用Prism軟件分析數(shù)據(jù)，得到IC50或Ki。
下列化合物抑制FLT-3的Ki值為＜1μM化合物1-5、8-17、20-42和44。
實(shí)施例3PDK-1抑制作用測定法 利用放射性磷酸鹽結(jié)合測定法針對(duì)其抑制PDK-1的能力篩選化合物(Pitt和Lee、J.Biomol.Screen.，(1996)1，47)。測定是在100mM HEPES(pH 7.5)、10mM MgCl2、25mM NaCl、2mM DTT的混合物中進(jìn)行的。測定中的最終底物濃度為40μM ATP(Sigma Chemicals)和65μM肽(PDKtide，Upstate，Lake Placid，NY)。在～27.5nCi/μL[γ-32P]ATP(Amersham Pharmacia Biotech，Amersham，UK)的存在下，在30℃和25nM PDK-1下進(jìn)行測定。制備測定儲(chǔ)備緩沖溶液，含有除ATP以外如上列舉的全部試劑，和有關(guān)供試化合物。將15μl儲(chǔ)備溶液置于96孔平板中，繼之以加入含有供試化合物的1μl 0.5mM DMSO儲(chǔ)備液(最終化合物濃度為25μM，最終DMSO濃度為5％)。使平板在30℃下預(yù)溫育約10分鐘，加入4μl ATP引發(fā)反應(yīng)(最終濃度為40μM)。
10分鐘后加入100μL 100mM磷酸、0.01％Tween-20終止反應(yīng)。將磷酸纖維素96孔平板(Millipore，Cat no.MAPHNOB50)用100μL100mM磷酸、0.01％Tween-20預(yù)處理，然后加入反應(yīng)混合物(100μL)。使斑點(diǎn)浸泡至少5分鐘，然后洗滌(4×200μL 100mM磷酸，0.01％Tween-20)。干燥后，向小孔加入20μL Optiphase‘SuperMix′液體閃爍雞尾酒試劑(Perkin Elmer)，然后閃爍計(jì)數(shù)(1450 Microbeta Liquid Scintillation Counter，Wallac)。
對(duì)相對(duì)于含有測定混合物和DMSO而無供試化合物的標(biāo)準(zhǔn)小孔而言顯示大于50％抑制的化合物進(jìn)行滴定，測定IC50值。
盡管我們已經(jīng)描述了本發(fā)明的大量實(shí)施方式，不過顯然可以改變我們的基本實(shí)例，以提供其他利用本發(fā)明化合物、方法和過程的實(shí)施方式。因此，將被領(lǐng)會(huì)的是，本發(fā)明的范圍受權(quán)利要求而非由上述實(shí)施例代表的具體實(shí)施方式
的限制。
權(quán)利要求
1.式(I)化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽；
其中
Q選自下組
R1是H、C1-6脂族基或C3-8環(huán)脂族基，選擇性地被0-4個(gè)取代JR；
每個(gè)R2獨(dú)立地是ZR、MR、(LR)-ZR或(XR)-MR；
每個(gè)JQ獨(dú)立地是ZQ、MQ、(LQ)-ZQ或(XQ)-MQ；
每個(gè)LR、LQ、XR和XQ獨(dú)立地是C1-6烷基，選擇性地被至多2次出現(xiàn)的-NR-、-O-、-S-、-CO2-、-OC(O)-、-C(O)CO-、-C(O)-、-C(O)NR-、-C(＝N-CN)、-C(＝N-OH)、-NRCO-、-NRC(O)O-、-SO2NR-、-NRSO2-、-NRC(O)NR-、-OC(O)NR-、-NRSO2NR-、-SO-或-SO2-中斷；
其中
每個(gè)LR獨(dú)立地和選擇性地被0-2個(gè)JLR取代；
每個(gè)LQ獨(dú)立地和選擇性地被0-2個(gè)JLQ取代；
每個(gè)XR獨(dú)立地和選擇性地被0-2個(gè)JXR取代；
每個(gè)XQ獨(dú)立地和選擇性地被0-2個(gè)JXQ取代；
每個(gè)ZR和ZQ獨(dú)立地是H；C1-6脂族基；具有0-3個(gè)獨(dú)立選自氮、氧和硫的雜原子的3-8元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)；或者具有0-5個(gè)獨(dú)立選自氮、氧和硫的雜原子的8-12元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)環(huán)系；其中
每個(gè)ZR獨(dú)立地和選擇性地被0-4個(gè)JZR取代；
每個(gè)ZQ獨(dú)立地和選擇性地被0-4個(gè)JZQ取代；
每個(gè)MR和MQ獨(dú)立地是鹵代基、CN、CF3、NO2、OR、SR或N(R)2；
每個(gè)JR獨(dú)立地是C1-6脂族基、C1-6鹵代烷基、鹵代基、OH、C1-3烷氧基、NO2或CN；
每個(gè)JLR、JLQ、JXR、JXQ、JZR和JZQ獨(dú)立地是V、M、(LV)-V、(LM)-M、C1-6鹵代烷基、鹵代基、OH、C1-3烷氧基、NO2或CN；
每個(gè)R獨(dú)立地是H、C1-6脂族基、C6-10芳基、-(C1-6脂族基)-(C6-10芳基)、C3-8環(huán)脂族基、-C(＝O)(C1-6脂族基)、-C(＝O)(C3-8環(huán)脂族基)或-C(＝O)O(C1-6脂族基)；其中每個(gè)R獨(dú)立地和選擇性地被0-2個(gè)J取代；
每個(gè)LV和LM獨(dú)立地是C1-6烷基，選擇性地被至多2次出現(xiàn)的-NR-、-O-、-S-、-CO2-、-OC(O)-、-C(O)CO-、-C(O)-、-C(O)NR-、-C(＝N-CN)、-C(＝N-OH)、-NRCO-、-NRC(O)O-、-SO2NR-、-NRSO2-、-NRC(O)NR-、-OC(O)NR-、-NRSO2NR-、-SO-或-SO2-中斷；
其中
每個(gè)LV獨(dú)立地和選擇性地被0-2個(gè)JLV取代；
每個(gè)LM獨(dú)立地和選擇性地被0-2個(gè)JLM取代；
每個(gè)V獨(dú)立地是H；C1-6脂族基；具有0-3個(gè)獨(dú)立選自氮、氧和硫的雜原子的3-8元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)；或者具有0-5個(gè)獨(dú)立選自氮、氧和硫的雜原子的8-12元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)環(huán)系；其中每個(gè)V獨(dú)立地和選擇性地被0-2個(gè)JV取代；
每個(gè)J、JLV、JLM和JV獨(dú)立地是R′、C3-6環(huán)烷基、C1-6鹵代烷基、鹵代基、NO2、CN、OH、OR′、SH、SR′、NH2、NHR′、N(R′)2、COH、COR′、CONH2、CONHR′、CON(R′)2、NHCOR′、NR′COR′、NHCONH2、NHCONHR′、NHCON(R′)2、NR′CONH2、NR′CONHR′、NR′CON(R′)2、SO2NH2、SO2NHR′、SO2N(R′)2、NHSO2R′或NR′SO2R′；
R′是未取代的C1-6脂族基；或者兩個(gè)R′基團(tuán)與它們所鍵合的原子一起構(gòu)成未取代的具有0-1個(gè)獨(dú)立選自氮、氧和硫的雜原子的3-8元飽和或部分飽和單環(huán)；
每個(gè)M獨(dú)立地是鹵代基、CN、CF3、NO2、OH、O(C1-6烷基)、SH、S(C1-6烷基)、NH2、NH(C1-6烷基)或N(C1-6烷基)2；
其條件是
當(dāng)Q是
時(shí)，R2不是在苯并咪唑環(huán)5或6位的
當(dāng)Q是
或
且R2是在苯并咪唑環(huán)5或6位的H、F、Cl、CH3、CF3、OCH3或OCH2CH3時(shí)，JQ不是-O-(C1-3脂族基)；
當(dāng)Q是
或
時(shí)，JQ不是選擇性地被甲基取代的
當(dāng)R1和R2是H時(shí)，Q不是
當(dāng)Q是
時(shí)，JQ不是Cl、NH2、
或NR”-Ar，其中Ar是選擇性地被取代的基團(tuán)，選自苯基、胡椒基和吡啶基；而R”是H或選擇性地被取代的C1-6脂族基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是H。
3.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的化合物，其中Q是
4.權(quán)利要求3的化合物，其中Q是
5.權(quán)利要求4的化合物，其中Q是
6.權(quán)利要求1-4任意一項(xiàng)的化合物，其中JQ是(LQ)-ZQ或(XQ)-MQ。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中LQ是C1-6烷基，選擇性地被至多2次出現(xiàn)的-NR-、-O-、-S-、-C(O)-、-C(O)NR-、-NRCO-、-SO2NR-或-NRSO2-中斷。
8.權(quán)利要求7的化合物，其中LQ是C1-6烷基，選擇性地被至多1次出現(xiàn)的-NR-中斷。
9.權(quán)利要求8的化合物，其中1次出現(xiàn)的-NR-直接連接于環(huán)Q。
10.權(quán)利要求1-4任意一項(xiàng)的化合物，其中JQ是ZQ或MQ。
11.權(quán)利要求6-10任意一項(xiàng)的化合物，其中ZQ是H或者選自如下的選擇性地被取代的基團(tuán)C1-6脂族基、C3-8環(huán)脂族基、苯基、5-8元雜芳基和5-8元雜環(huán)基。
12.權(quán)利要求6-11任意一項(xiàng)的化合物，其中XQ是C1-6烷基，選擇性地被至多2次出現(xiàn)的-NR-、-O-、-S-、-C(O)-、-C(O)NR-、-NRCO-、-SO2NR-或-NRSO2-中斷。
13.權(quán)利要求12的化合物，其中XQ是C1-6烷基，選擇性地被至多1次出現(xiàn)的-NR-中斷。
14.權(quán)利要求6-13任意一項(xiàng)的化合物，其中環(huán)Q被2次出現(xiàn)的JQ取代，其中一個(gè)JQ是(LQ)-ZQ或(XQ)-MQ，另一個(gè)JQ是ZQ或MQ。
15.權(quán)利要求1-14任意一項(xiàng)的化合物，其中每個(gè)R2選自ZR或MR。
16.權(quán)利要求1-15任意一項(xiàng)的化合物，如式III所示被取代
式III。
17.權(quán)利要求16的化合物，其中至少一個(gè)R2不是H。
18.權(quán)利要求1的化合物，選自如下
19.權(quán)利要求1的化合物，選自如下
20.組合物，包含權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)的化合物和藥學(xué)上可接受的載體、助劑或介質(zhì)。
21.在患者中抑制Aurora蛋白激酶活性的方法，包括對(duì)所述患者給予
a)權(quán)利要求20的組合物；或者
b)權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)的化合物。
22.在生物樣品中抑制Aurora蛋白激酶活性的方法，包括使所述生物樣品與
a)權(quán)利要求20的組合物；或者
b)權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)的化合物接觸。
23.在患者中抑制FLT-3蛋白激酶活性的方法，包括對(duì)所述患者給予
a)權(quán)利要求20的組合物；或者
b)權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)的化合物。
24.在生物樣品中抑制FLT-3蛋白激酶活性的方法，包括使所述生物樣品與
a)權(quán)利要求20的組合物；或者
b)權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)的化合物接觸。
25.在患者中抑制PDK1蛋白激酶活性的方法，包括對(duì)所述患者給予
a)權(quán)利要求20的組合物；或者
b)權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)的化合物。
26.在生物樣品中抑制PDK1蛋白激酶活性的方法，包括使所述生物樣品與
a)權(quán)利要求20的組合物；或者
b)權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)的化合物接觸。
27.在患者中治療增殖疾患的方法，包括對(duì)所述患者給予
a)權(quán)利要求20的組合物；或者
b)權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)的化合物。
28.根據(jù)權(quán)利要求27的方法，包括對(duì)所述患者給予附加治療劑，與所述組合物一起作為單一劑型，或者與所述組合物分開作為多重劑型的一部分。
29.在有此需要的患者中治療黑素瘤、骨髓瘤、白血病、淋巴瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤或者選自如下的癌癥的方法結(jié)腸、乳腺、胃、卵巢、宮頸、肺、中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)、腎、前列腺、膀胱、胰腺、腦(神經(jīng)膠質(zhì)瘤)、頭頸、腎、肝、黑素瘤、肉瘤或甲狀腺癌，其中所述方法包括對(duì)所述患者給予
a)權(quán)利要求20的組合物；或者
b)權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)的化合物。
30.在有此需要的患者中治療癌癥的方法，包括通過用
a)權(quán)利要求20的組合物；或者
b)權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)的化合物
抑制Aurora來破壞癌細(xì)胞有絲分裂的步驟。
31.在有此需要的患者中治療癌癥的方法，包括通過用
a)權(quán)利要求20的組合物；或者
b)權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)的化合物
抑制FLT-3來破壞癌細(xì)胞有絲分裂的步驟。
32.制備式I化合物的方法
其中R1、R2和JQ如本文所定義；
環(huán)Q是
或
包括使式a化合物
其中R1和R2是按照權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)所定義的；
與式b化合物
其中環(huán)Q是
或
且JQ是按照權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)所定義的；
在適合的代硼酸或代硼酸酯偶聯(lián)條件下反應(yīng)。
33.制備式I化合物的方法
其中R1、R2和JQ是按照權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)所定義的；
環(huán)Q是
包括使式a化合物
其中R1和R2是按照權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)所定義的；
與式c化合物
其中JQ是按照權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)所定義的；
環(huán)Q是
在適合的置換條件下反應(yīng)。
34.制備式I化合物的方法
其中R2、R2、環(huán)Q和JQ是按照權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)所定義的；
包括使式7化合物
其中R2和環(huán)Q是按照權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)所定義的；
與CN-Br在適合的環(huán)化條件下環(huán)化。
35.制備式2化合物的方法
包括在適合的置換條件下加熱式1化合物與NH2-JJ，生成式2化合物。
36.權(quán)利要求35的方法，包括使式a化合物
其中R1和R2是按照權(quán)利要求1-19任意一項(xiàng)所定義的；
與
在適合的置換條件下反應(yīng)，生成式1化合物
全文摘要
本發(fā)明涉及可用作Aurora、FLT-3或PDK1蛋白激酶抑制劑的化合物。本發(fā)明也提供包含所述化合物的藥學(xué)上可接受的組合物和使用這些組合物治療各種疾病、病癥或疾患的方法。本發(fā)明也提供制備本發(fā)明化合物的方法。
文檔編號(hào)A61P35/00GK101291927SQ200680034302
公開日2008年10月22日 申請日期2006年7月21日 優(yōu)先權(quán)日2005年7月26日
發(fā)明者H·賓奇, M·莫蒂默爾, D·羅賓森, D·斯塔默斯, S·艾弗里特 申請人:沃泰克斯藥物股份有限公司