專利名稱：：包括至少一種抗癌藥和至少一種聚合物的藥物組合物的制作方法包括至少一種抗癌藥和至少一種聚合物的藥物組合物本發(fā)明涉及新型的和改進(jìn)的抗癌藥組合物。本發(fā)明涉及新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其具有實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的副作用。本發(fā)明涉及新型改進(jìn)的抗癌藥組合物，包括但不限于烷化劑、抗代謝物類藥物、抗生素類抗癌藥、植物生物堿類藥物、蒽二酮類藥物(anthracenediones)、天然產(chǎn)物、激素、激素拮抗劑、其它藥物(miscellaneousagents)、放射增敏劑、鉑配位復(fù)合物、腎上腺皮質(zhì)抑制劑、免疫抑制劑、功能性治療劑、基因治療劑、反義治療劑、酪氨酸激酶抑制劑、單克隆抗體、免疫毒素、放射性免疫綴合物、癌癥疫苗、干擾素、白細(xì)胞介素、取代脲類、紫杉垸類和COX-2抑制劑。本發(fā)明涉及新型的和改進(jìn)的抗癌藥組合物，優(yōu)選紫杉烷類，例如紫杉醇和多西他賽(docetaxel)，它們的衍生物或它們的類似物，制備這些制劑的方法和使用這些組合物治療癌癥患者的方法。本發(fā)明涉及新型的和改進(jìn)的抗癌藥組合物，所述抗癌藥優(yōu)選紫杉垸類，例如紫杉醇和多西他賽，它們的衍生物或它們的類似物，制備這些組合物的方法，和將在特定粒度范圍內(nèi)的粒子分級的方法，和使用這些組合物治療癌癥患者的方法，其提供了減少的化療誘導(dǎo)的副作用，特別是減少的化療誘導(dǎo)的脫發(fā)。組合物為使得在所述組合物中實(shí)質(zhì)上不含游離的藥物。所述新型的和改進(jìn)的抗癌藥組合物，所述抗癌藥優(yōu)選紫杉垸類，例如紫杉醇和多西他賽，它們的衍生物或它們的類似物，是用于癌癥治療的膠態(tài)遞送系統(tǒng)，具有實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的脫發(fā)，在確定的粒度范圍內(nèi)被制備，在組合物中實(shí)質(zhì)上不含游離藥物。8
背景技術(shù)：
：至今己經(jīng)開發(fā)了各式各樣的抗癌劑用于治療哺乳動(dòng)物的各種癌癥，并且正在開發(fā)越來越新的藥物作為化療藥物，其中所述研究的目的在于開發(fā)腫瘤特異性抗癌劑，同時(shí)增加針對耐藥性腫瘤的效能。進(jìn)一步更新的臨床規(guī)程涉及將抗癌藥組合，以活動(dòng)增加的治療效能。這種更新的發(fā)現(xiàn)正在進(jìn)行中，但是目前，化療劑例如5-氟脲嘧啶(5FU)、多柔比星和紫杉烷類是用于患有各種癌癥的患者的主要治療手段，所述各種癌癥包括卵巢癌、乳癌、肺癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、頭頸癌、子宮頸癌、和腦癌、及其它癌癥。然而，這些和其它藥物的應(yīng)用已經(jīng)受到相關(guān)毒性的限制，所述毒性包括惡心、骨髓抑制(myelosuppression)、脫發(fā)、嘔吐和口炎以及心臟毒性。在上述^^H^^4&^毒性中，frfe療引起的脫發(fā)(或毛發(fā)喪失)是癌癥患者的最苦惱和創(chuàng)傷性的副作用之一，因?yàn)槠湓谒心挲g段的男性和女性患者中引起抑郁、自信受損、和恥辱感。由于治療相關(guān)的脫發(fā)所致的身體和情緒方面的擔(dān)心，一些患者拒絕進(jìn)行治療。毛發(fā)喪失對患者的心理狀態(tài)具有顯著影響，并且是影響患者生活質(zhì)量的重要問題。因此，迫切需要提供一種具有實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的脫發(fā)的癌癥治療。紫杉烷類是穩(wěn)定細(xì)胞微管的抗癌細(xì)胞毒素。用于本文所述組合物和方法中的紫杉烷類化合物包括紫杉醇和多西他賽，及其具有抗癌活性或抗血管生成活性的天然和合成的類似物。紫杉醇和多西他賽具有實(shí)質(zhì)的活性，并且這些藥物之一或其二者被廣泛地用作治療晚期乳癌、肺癌、和卵巢癌的組分。多西他賽是屬于紫杉醇類家族(taxoidfamily)的抗腫瘤劑。其從提取自可再生的紫杉植物的針狀生物質(zhì)的前體開始通過半合成制備。Taxotere⑧是無菌的多西他賽注射濃縮物，以包含多西他賽和聚山梨酸酯80的單劑量小瓶得到，用于在用稀釋劑例如含乙醇的水稀釋之后注射給藥，并且是用于在先前的化療無效之后治療患有局部晚期或轉(zhuǎn)移性乳癌的患者的處方藥。TAXOTERE與多柔比星和環(huán)磷酰胺組合被提出用于可手術(shù)治療的淋巴結(jié)陽性乳癌患者的輔助治療。屬于紫杉烷類化療劑的紫杉醇已經(jīng)作為靜脈內(nèi)劑型廣泛使用多年，用于治療乳癌和卵巢癌或非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)。隨著已經(jīng)表明紫杉醇作為抗腫瘤藥的巨大潛力，關(guān)于溶解度、毒性、生物利用度低和形成耐藥性的臨床問題變得十分嚴(yán)重，使得對于具有更好的治療效能和較少毒性的紫杉醇衍生物或類似物的制劑的需要顯而易見。紫杉醇(Taxol⑧)作為在由CremophorEL組成的媒介物中的用于i.v.輸注的溶液得到，CremophorEL已經(jīng)表現(xiàn)出引起毒性作用例如危及生喻的過敏性反應(yīng)。這種紫杉-膝6*乙-纟"(-CTemepher-)A乙醇制劑在用輸注液體稀釋時(shí)沉淀，并且在一些組合物中在長時(shí)間儲存過程中形成纖維狀沉淀物。關(guān)于紫杉醇的聚氧乙烯蓖麻油制劑的另外的信息可以在Agharkar等人的美國專利5，504，102中找到。最近引進(jìn)的Abmxane⑧是用于可注射懸浮液的蛋白質(zhì)結(jié)合型紫杉醇粒子。其為紫杉醇的白蛋白結(jié)合形式，在肝臟中迅速裂解釋放游離的藥物，然后在血液中循環(huán)，產(chǎn)生最初的治療應(yīng)答，然而，其也表現(xiàn)出毒性副作用，例如完全的毛發(fā)喪失、由低WBC計(jì)數(shù)所致的感染、疲勞、虛弱、和炎癥等。在使用紫杉醇的這些劑型時(shí)，幾乎總是發(fā)生完全的毛發(fā)喪失或脫發(fā)。這通常涉及眉毛、睫毛、和陰毛以及頭發(fā)的喪失。有許多美國專利針對這種產(chǎn)品Abraxane,包括美國專利5,439,686、5,498,421、5,560，933、5,665,382、6,096,331、6，506，405、6,537,579、6,749，868和6,753,006。根據(jù)在上述提及的專利中的發(fā)明，提供了可用于體內(nèi)遞送實(shí)質(zhì)上水不溶性的藥理學(xué)活性劑(例如抗癌藥紫杉醇)的組合物和方法，其中活性劑以與蛋白質(zhì)(起到穩(wěn)定劑的作用)結(jié)合或涂覆有蛋白質(zhì)的懸浮粒子形式被遞送。在這些發(fā)明中，已經(jīng)進(jìn)行了嘗試以提供臨時(shí)準(zhǔn)備的藥物蛋白質(zhì)微球體，用以在用于非腸道給藥的水懸浮液中遞送實(shí)質(zhì)上水不溶性的活性劑，而不引起由于乳化劑和增溶劑(如用于Taxol中的聚氧乙烯蓖麻油)的存在所引起的過敏性反應(yīng)。在美國專利5,439,686中，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)實(shí)質(zhì)上水不溶性的藥理學(xué)活性劑可以以在水懸浮液中的適合于非腸道給藥的微粒形式遞送。該發(fā)明的組合物包括包含在聚合物殼內(nèi)的實(shí)質(zhì)上水不溶性的活性劑(作為固體或液體)，聚合物殼為通過二硫鍵的存在交聯(lián)的生物相容性聚合物。美國專利5,560,933要求保護(hù)制備上述的其發(fā)明的組合物的方法，*^呆護(hù)"制備-用于體內(nèi)遞送的實(shí)質(zhì)上水不溶性的藥理學(xué)活性劑的方法，所述方法包括使混合物經(jīng)過聲處理?xiàng)l件達(dá)一段時(shí)間，所述混合物包括在其中分散有所述藥理學(xué)活性劑的分散劑和包含能夠通過二硫鍵交聯(lián)的生物相容性聚合物的水性介質(zhì)，所述時(shí)間足以促進(jìn)所述生物相容性聚合物通過二硫鍵交聯(lián)以產(chǎn)生在其中包含藥理學(xué)活性劑的聚合物殼"。美國專利6,506,405要求保護(hù)紫杉醇的制劑，該制劑用于治療受試者中的原發(fā)腫瘤，其實(shí)現(xiàn)了所述紫杉醇在腫瘤部位的高局部濃度，所述制劑基本上不含聚氧乙烯蓖麻油。根據(jù)6,506,405的發(fā)明人，他們的包含白蛋白并且不含聚氧乙烯蓖麻油的制劑表現(xiàn)出與市售的包含聚氧乙烯蓖麻油的Taxol組合物相比的降低的腦毒性或神經(jīng)病學(xué)毒性。美國專利6,749,868提供了藥物遞送系統(tǒng)，其中使藥理學(xué)活性劑的分子的一部分與蛋白質(zhì)(例如人血清白蛋白)結(jié)合并且因此在對哺乳動(dòng)物給予之后立即為生物可用的，而藥理學(xué)活性劑的另一部分包含在被蛋白質(zhì)涂覆的納米粒子內(nèi)。被蛋白質(zhì)涂覆的藥物納米粒子的制備如下進(jìn)行在沒有常規(guī)的表面活性劑的存在下使用高剪切力，得到直徑小于約1微米的粒子，然后將其無菌過濾，以提供可用于靜脈內(nèi)注射的無菌固體劑型。在涉及Abraxane⑧的上述專利中，提供了給予涂有蛋白質(zhì)(如白蛋白)的紫杉醇的方法，其中所述蛋白質(zhì)涂層在其內(nèi)還具有結(jié)合的游離蛋白質(zhì)，使得一部分活性劑被包含在蛋白質(zhì)涂層內(nèi)和一部分活性劑與游離蛋白質(zhì)結(jié)合以便在給予時(shí)立即為生物可用的。在所述的現(xiàn)有技術(shù)的發(fā)明中描述的所述粒子的平均直徑不大于約1微米，其中組合物包括10-200nm的粒徑范圍的粒子，特別是這些小粒徑粒子可以通過0.22微米過濾器進(jìn)行無菌過濾得到。基本上通過使用白蛋白結(jié)合型藥物粒子(白蛋白為生物相容性物質(zhì))，發(fā)明人提出，與已經(jīng)可用的包括聚氧乙烯蓖麻油并且涉及過敏性反應(yīng)和其它毒性的Taxol相比，藥理學(xué)活性劑如囔旨的毒性如骨髓抑制和/^#^#性減少。但是上述專利中沒有一個(gè)描述或提供制備紫杉醇組合物的方法，其中該組合物處在特定的窄粒度范圍并且實(shí)質(zhì)上不含游離藥物，以便提供化療誘導(dǎo)的脫發(fā)(其對于癌癥患者來說是最具創(chuàng)傷性的副作用之一)實(shí)質(zhì)上減少的癌癥治療。涉及市售產(chǎn)品Abraxane⑧的上述專利通過避免乳化劑如聚氧乙烯蓖麻油提供了避免引起過敏反應(yīng)的產(chǎn)品，并且提供了用于實(shí)質(zhì)上水不溶性的活性劑如紫杉醇的穩(wěn)定的、經(jīng)滅菌的微?；蚣{米粒子遞送系統(tǒng)，但是它們沒能提供沒有副作用如脫發(fā)或毛發(fā)喪失或所述副作用減少的紫杉醇制劑。Abraxane⑧的產(chǎn)品廣告在患者須知(PATIENTINFORMATION)中提及毛發(fā)喪失是在對服用Abraxane⑧的患者的研究中觀察到的重要的副作用之一。其提及在使用Abraxane時(shí)幾乎總是發(fā)生完全的毛發(fā)喪失或脫發(fā)。由Yang等人，F(xiàn)rontBiosci.2005Sep1;10:3058-67公開了研究i侖文，是關(guān)于用于胞內(nèi)遞送紫杉醇的溫度、pH敏感性芯-殼納米粒子的研究，其描述了用溫度、PH敏感性兩性聚合物N-異丙基丙烯酰胺-丙烯酸-膽甾醇基丙烯酸酯共聚物(P(NIPAAm-Co-AA-Co-CHA))包封紫杉醇，以形成納米粒子。然而，該研究論文沒有討論或提及制備這些粒子組合物的方法和將粒子分級為特定的明確粒度范圍并且實(shí)質(zhì)上不含游離藥物使得其適合于提供在癌癥患者中具有化療誘導(dǎo)的脫發(fā)實(shí)質(zhì)上減少的組合物的方法。美國專利5,399,363涉及表面改性的抗癌納米粒子，其中粒子主要由具有表面改性劑的結(jié)晶抗癌劑組成，所述表面改性劑優(yōu)選為吸附在表面上以保持低于約1000nm的有效平均粒徑的非離子型和陰離子型表面活性劑。表面活性劑的應(yīng)用本身促進(jìn)組合物的毒性。在5，399，363發(fā)明中既沒有證明又沒有預(yù)測使用包含可生物降解聚合物的紫杉醇納米粒子組合物的粒徑的特定范圍以實(shí)現(xiàn)特定化療誘導(dǎo)的副作用減少如脫發(fā)減少。5，399，363的具體發(fā)明在于在結(jié)晶抗癌藥的表面上吸附非交聯(lián)的表面改性劑。美國專利6，136，846要求保護(hù)用于體內(nèi)遞送紫杉醇的組合物，該組合物包括紫杉醇、溶劑如乙醇或丙二醇和可與水混溶的增溶劑如酯化的d-a-生育酚酸丁二酸酯。由于在6,316，846發(fā)明之前的研究致力于使用50%聚氧乙烯蓖麻油和50%無水酒精配制不溶性藥物如紫杉醇，并且這些制劑在用輸注液體稀釋時(shí)沉淀、儲存時(shí)不穩(wěn)定并且引起不適當(dāng)?shù)挠泻Ψ磻?yīng)，因此6，316，846發(fā)明致力于使用不同于聚氧乙烯蓖麻油的可與水混溶的增溶劑提供具有改進(jìn)的長期穩(wěn)定性和安全性的制劑，從而提供改進(jìn)的紫杉醇制劑。PCT公開WO2004/084871涉及乳酸-羥基乙酸聚合物和聚乳酸(PLA)納米粒子，其包封低分子量的水溶性藥物并且將該藥物遞送到目標(biāo)位置，其中粒子在延長時(shí)間內(nèi)逐漸釋放藥物。本質(zhì)上，WO2004/084871發(fā)明涉及通過低分子量的、水溶性的和非肽類藥物與金屬13離子的相互作用而將其轉(zhuǎn)化為疏水性藥物，然后將疏水化藥物包封在PLGA或PLA納米粒子中，并且在粒子的表面上吸附表面活性劑。該專利沒有涉及或提及如紫杉醇和其它的抗癌藥，并且沒有提供化療誘導(dǎo)的副作用得以減少的組合物。由Fonseca等人，在"JournalofControlledRelease83(2002)273-286"中公布的研究涉及開發(fā)紫杉醇的聚合物藥物遞送系統(tǒng)，例如加載有紫杉醇的(乳酸-羥基乙酸)聚合物納米粒子，其用于靜脈內(nèi)給藥并且能夠改善藥物的治療指數(shù)，并且沒有由聚氧乙烯蓖麻油EL引起的副作用。在本文和前述大多數(shù)其它現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)中，得到的粒子的粒徑小于200nm。作者們沒有提供本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)的不含游離藥物并且處在特定的確定粒度范圍內(nèi)的組合物(其具有令人驚訝的優(yōu)點(diǎn))。美國申請20060041019要求保護(hù)用于抑制由抗腫瘤劑引起的毛發(fā)喪失的藥物，其中所述藥物為縮合度為3到20的環(huán)狀和/或直鏈聚乳酸的混合物。優(yōu)選地，美國申請20060041019的發(fā)明人所述的環(huán)狀和/或直鏈聚乳酸的混合物是通過在式(3)的化合物存在下使丙交酯聚合產(chǎn)生的聚乳酸混合物式(3)為Me-N(R1)(112)，其中Me表示堿金屬，R1和W各自獨(dú)立地表示脂肪族基團(tuán)或芳香族基團(tuán)。因此，可以看出，這些現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)中都沒有提供脫發(fā)相關(guān)副作用實(shí)質(zhì)上減少的抗癌藥如紫杉醇、多西他賽及其它抗癌藥的組合物和制備這種組合物的方法。盡管先前已經(jīng)進(jìn)行了各種嘗試以提供具有改善效力的抗癌組合物，但是這些組合物都沒有表現(xiàn)出低的臨床副作用，特別地，這些組合物都沒有提供減少特別令人苦惱的脫發(fā)或毛發(fā)喪失副作用的方法。因此，需要新型的和改進(jìn)的包括抗癌藥的組合物以及使用這些組合物以克服穩(wěn)定性問題和減輕目前已知上市的制劑的各種臨床副作用的治療方法，最重要的是減少治療誘導(dǎo)的脫發(fā)或毛發(fā)喪失，以及這些14組合物的制備方法。對于藥物如5-氟尿嘧啶、多柔比星、多西他賽、紫杉醇、其衍生物和/或其類似物存在有需求。發(fā)明目的本發(fā)明的目的是-1.提供新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其具有實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)。2.提供新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其包括至少一種抗癌藥和至少一種聚合物的粒子，其中由于粒子以確定的粒度范圍存在，該組合物產(chǎn)生實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)。3.提供如上所述的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中另外地，組合物實(shí)質(zhì)上不含游離藥物；藥物實(shí)質(zhì)上完全地與聚合物結(jié)合。4.提供新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，包括至少一種抗癌藥和至少一種聚合物的粒子，其中粒子的D10》80nm，D50為約200nm，D卯《450nm;組合物為使得其提供減少的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)。5.提供如上面第4項(xiàng)中所述的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中粒子的D10》120nm，D50為約200nm和D90《350nm。6.提供如上面第5項(xiàng)中所述的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中粒子的D10》140nm，D5為約200nm和D90《260nm。7.提供如上所述新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中抗癌藥選自烷化劑、抗代謝物類藥物、抗生素類抗癌藥、植物生物堿類藥物、蒽二酮類藥物、天然產(chǎn)物、激素、激素拮抗劑、其它藥物(miscdlaneoiisagent)、放射增敏劑、鉑配位復(fù)合物、腎上腺皮質(zhì)抑制劑、免疫抑制劑、功能性治療劑、基因治療劑、反義治療劑、酪氨酸激酶抑制劑、單克隆抗體、免疫毒素、放射免疫結(jié)合物、癌癥疫苗、干擾素、白細(xì)胞介素、取代脲類、紫杉烷類和COX-2抑制劑。8.提供如上面第7項(xiàng)中所述的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中抗癌藥優(yōu)選選自紫杉垸的衍生物(如紫杉醇、多西他賽)、5-氟尿嘧啶和多柔比星。9.提供如上所述的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中抗癌藥為以組合物的約0.5重量％到約99.5重量％的量存在的紫杉醇，并且包含約2.0重量％到約99.0重量％的聚合物。10.提供如上所述的新型的和改迸的癌癥治療用組合物，其中聚合物為以組合物的約2.0重量％到約99.0重量％的量存在的可生物降解的聚合物，如人血清白蛋白、d,l-乳酸-羥基乙酸共聚物等。11.另外提供上述的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其具有選自溫度和/或pH敏感性聚合物的第二聚合物，如聚N-乙?；０?、聚N-異丙基丙烯酰胺、N-異丙基丙烯酰胺-丙烯酰胺共聚物、聚乙烯醇、聚乙二醇、聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酰胺等及其衍生物。12.提供如上面第11項(xiàng)所述的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中第二聚合物是聚N-異丙基丙烯酰胺，以選自以下的量使用組合物的約0.5重量％到約99.0重量％、組合物的約1.0重量％到約95.0重量％、和組合物的約2.0重量％到約90.0重量％。13.提供如上面第11項(xiàng)所述的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中在第二聚合物的存在下，在對哺乳動(dòng)物給藥時(shí)，組合物的粒子的大小在血漿中增加到其原始大小的約兩倍，并且在腫瘤部位增加到其原始大小的約十倍，從而提供靶向和實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)。14.提供如上面第1項(xiàng)所述的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中組合物包括占組合物的約0.5重量％到約99.5重量％的紫杉醇、占組合物的約2.0%到約99.0重量％的d,l乳酸-羥基乙酸共聚物，和占組合物的約2.0重量％到約90.0重量％的任選的聚N-異丙基丙烯酰胺、和占組合物的約0.01重量％到約99.9重量％的一種或多種可藥用賦形劑、載體或其組合。15.提供如上面第l項(xiàng)所述的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中組合物包括占組合物的約0.5重量％到約99.5重量％的紫杉醇、占組合物的約2.0%到約99.0重量％的白蛋白，和任選的占組合物的約2.0重量％到約90.0重量％的聚N-異丙基丙烯酰胺、和占組合物的約0.01重量％到約99.9重量％的一種或多種可藥用賦形劑、載體或其組合。16.提供制備如上所述的新型的和改進(jìn)的組合物的方法，包括以下步驟(i)在溶劑中將至少一種抗癌藥與至少一種聚合物混合，(ii)任選地在一種或多種可藥用載體的存在下進(jìn)行步驟(i)，(iii)通過除去溶劑得到納米粒子，和(iii)使納米粒子經(jīng)過粒子篩分，(iv)從組合物除去任何游離藥物；該組合物為使得其提供實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)。17.提供治療哺乳動(dòng)物癌癥的方法，包括對該哺乳動(dòng)物給予治療有效量的所述新型的和改進(jìn)的組合物的步驟，所述組合物包括至少一種抗癌藥和至少一種聚合物的粒子，其中粒子的D10》80nm，D50為約200nm和D90《450nm，并且該組合物為使得其實(shí)質(zhì)上不含游離藥物并且提供實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)。18.提供在經(jīng)歷用抗癌藥治療的哺乳動(dòng)物中減少癌癥治療的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)的方法，所述方法包括給予治療有效量的所述新型的和改進(jìn)的組合物，所述組合物包括至少一種抗癌藥和至少一種聚17合物的粒子，其中粒子的D10》80nm，D50為約200nm和D90《450rnn，并且該組合物為使得其實(shí)質(zhì)上不含游離藥物。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明涉及新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其具有實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的副作用。本發(fā)明涉及新型的和改進(jìn)的抗癌藥組合物，抗癌藥優(yōu)選是溶解性差的抗癌藥，所述組合物的制備方法和使用這些組合物治療癌癥患者的方法，所述組合物具有減少的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)。本發(fā)明的重要方面致力于提供抗癌藥如紫杉烷類(例如紫杉醇或多西他賽)和至少一種可生物降解的聚合物的膠態(tài)遞送系統(tǒng)如納米粒子組合物，使得該組合物具有確定的粒度范圍，其中粒子的D10大于或等于80nm，D50為約200nm和D90小于或等于450nm。這種確定的特定有效粒度范圍提供這樣的組合物，在將該組合物給予患者用于治療癌癥時(shí)，具有實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)。該組合物優(yōu)選為使得其實(shí)質(zhì)上不含游離藥物；藥物實(shí)質(zhì)上完全地與聚合物結(jié)合。本發(fā)明的另一個(gè)方面致力于提供這樣的納米粒子組合物，該納米粒子組合物另外包括溫度和pH敏感性的第二聚合物，和任選的其它可藥用載體以及任何其它期望的賦形劑。這種組合物提供這樣的粒子，在對哺乳動(dòng)物給予該粒子時(shí)，粒子的大小在血漿中增加到其原始大小的約兩倍，并且在腫瘤部位增加到其原始大小的約十倍，從而提供腫瘤部位的靶向和實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)。本發(fā)明另外公開了制備這種納米粒子組合物的方法，包括以下步驟在溶劑的存在下將至少一種抗癌藥與至少一種聚合物混合，所述溶劑任選地具有一種或多種可藥用載體以及任何期望的賦形劑，除去溶劑并且經(jīng)過粒子篩分以得到確定粒度的粒子，如D10》80nm、D50為約200nm和D90《450nm。如此得到的具有確定粒度范圍的納米粒子進(jìn)一步經(jīng)過除去任何游離藥物。在給予患者時(shí)，這種組合物提供實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)。因此，本發(fā)明涉及提供治療方法，包括對有需要的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的本發(fā)明的納米粒子組合物，該組合物提供實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)。本發(fā)明提供通過給予所述治療有效的本發(fā)明的納米粒子組合物在經(jīng)歷用抗癌藥治療的哺乳動(dòng)物中減少癌癥治療的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)的方法。前述的一般說明和以下的詳細(xì)說明只是示例性的和說明性的，并且意在對要求保護(hù)的本發(fā)明提供進(jìn)一步說明。通過以下的發(fā)明的詳細(xì)說明，其它的目的、優(yōu)點(diǎn)和新穎的特征對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的。發(fā)明的詳細(xì)說明本發(fā)明提供新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物。正在開發(fā)許多更新的抗癌劑用于治療哺乳動(dòng)物的腫瘤，但是抗癌劑或抗腫瘤藥的主要缺點(diǎn)在于它們不能特異性和選擇性地影響腫瘤細(xì)胞；它們也影響正常細(xì)胞并且由此產(chǎn)生副作用。在藥物遞送領(lǐng)域中正在進(jìn)行努力以使越來越多的這些抗癌藥靶向作用部位以改善效力，并且正在進(jìn)行努力以提供多藥物療法以提高抗癌藥的有效性。然而，副作用的問題仍是主要的憂慮，其還沒有被完全解決，化療的這些主要副作用之一是脫發(fā)或毛發(fā)喪失。毛發(fā)喪失或脫發(fā)對于進(jìn)行化療的個(gè)體來說是令人苦惱的副作用。化療患者中大多數(shù)經(jīng)歷了很大程度的脫發(fā)?；熤蟮拿l(fā)再生需要3到6個(gè)月，并且有一定百分?jǐn)?shù)的患者沒能完全恢復(fù)?；熣T導(dǎo)的脫發(fā)具有特別的破壞性，因?yàn)樗且云渌绞诫[藏的疾病的外在標(biāo)志，導(dǎo)致一些患者拒絕全身化療。因此，根據(jù)本發(fā)明最優(yōu)選的方面，提供具有實(shí)質(zhì)上減少的副作用的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物。所述副作用優(yōu)選是化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)。本發(fā)明的組合物包括至少一種抗癌藥和至少一種聚合物?？稍诒景l(fā)明中使用的癌癥治療用抗癌藥選自烷化劑、抗代謝物類藥物、抗生素類抗癌藥、植物生物堿類藥物、蒽二酮類藥物、天然產(chǎn)物、激素、激素拮抗劑、其它藥物、放射增敏劑、鉑配位復(fù)合物、腎上腺皮質(zhì)抑制劑、免疫抑制劑、功能性治療劑、基因治療劑、反義治療劑、酪氨酸激酶抑制劑、單克隆抗體、免疫毒素、放射免疫結(jié)合物、癌癥疫苗、干擾素、白細(xì)胞介素、取代脲類、紫杉烷類和COX-2抑制劑。上組包括垸化劑，包括烷基磺酸酯類例如白消安，乙撐亞胺衍生物例如塞替派，氮芥類例如苯丁酸氮芥、環(huán)磷酰胺、雌莫司汀、異環(huán)磷酰胺、氮芥、美法侖和烏拉莫司汀，亞硝基脲類例如卡莫司汀、洛莫司汀、和鏈佐星，三嗪類例如達(dá)卡巴嗪、丙卡巴肼、和替莫唑胺，和鉑化合物例如順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、賽特鉑、和(SP-4-3)-(順式)-胺二氯-[2-甲基吡啶]鉑(II);抗代謝物類藥物，包括抗葉酸物例如甲氨蝶呤、permetrexed、雷替曲塞和三甲曲沙，嘌呤類似物例如克拉屈濱、氯脫氧腺苷、克羅拉濱、氟達(dá)拉濱、巰嘌呤、噴司他丁、和硫鳥嘌呤，嘧啶類似物例如阿扎胞苷、卡培他濱、阿糖胞苷、依達(dá)曲沙、氮尿苷、氟尿嘧啶、吉西他濱、和曲沙他濱；天然產(chǎn)物，包括抗腫瘤抗生素例如博來霉素、放線菌素D、光輝霉素、絲裂霉素、米托蒽醌、泊非霉素，和蒽環(huán)類例如柔紅霉素(包括脂質(zhì)體柔紅霉素)、多柔比星(包括脂質(zhì)體多柔比星)、表柔比星、伊達(dá)比星和戊柔比星，酶類例如L-天冬酰胺酶和PEG-L-天冬酰胺酶，微管聚合物穩(wěn)定劑例如紫杉烷類、20紫杉醇和多西他賽，有絲分裂抑制劑例如長春花生物堿長春堿、長春新堿、長春地辛、和長春瑞濱，拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑例如喜樹堿、伊立替康和拓?fù)涮婵?，和拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑例如安吖啶、依托泊苷和替尼泊苷；激素和激素拮抗劑，包括雄激素例如氟甲睪酮和睪內(nèi)酪，抗雄激素例如比卡魯胺、環(huán)丙孕酮、氟他胺、和尼魯米特，芳香酶抑制劑例如氨魯米特、阿那曲唑、依西美坦、福美坦、和來曲唑，皮質(zhì)類固醇類例如地塞米松和潑尼松，雌激素例如己烯雌酚，抗雌激素藥例如氟維司群、雷洛昔芬、他莫昔芬、和托瑞米芬，LHRH激動(dòng)劑和拮抗劑例如布舍瑞林、戈舍瑞林、亮內(nèi)瑞林、和曲普瑞林，孕酮類例如醋酸甲羥孕酮和醋酸甲地孕酮，和甲狀腺激素例如左甲狀腺素和碘塞羅寧；和其它藥物，包括六甲蜜胺、三氧化二砷、硝酸鎵、羥基脲、左旋咪唑、米托坦、奧曲肽、丙卡巴肼、蘇拉明、沙利度胺、光動(dòng)力學(xué)化合物例如甲氧沙林和卟吩姆鈉，和蛋白酶體抑制劑例如硼替佐米。分子耙向治療劑包括功能性治療劑，包括基因治療劑、反義治療劑，酪氨酸激酶抑制劑例如鹽酸埃羅替尼、吉非替尼、甲磺酸伊馬替尼、和司馬沙尼(semaxanib)，和基因表達(dá)調(diào)節(jié)劑例如維A酸類和視黃素類(rexinoids)，例如阿達(dá)帕林、蓓薩羅丁、反式維甲酸、9-順式維甲酸、和N-(4-羥苯基)維甲酰胺；表位引導(dǎo)的治療劑，包括單克隆抗體例如阿來組單抗(alemtuzumab)、貝伐單抗、西妥昔單抗、替伊莫單抗(ibritumomnabtiuxetan)、利妥西單抗、和曲妥珠單抗，免疫毒素例如吉妥珠單抗奧唑米星，放射免疫結(jié)合物例如1311-吉妥珠單抗奧唑米星，和癌癥疫苗。生物學(xué)治療劑包括干擾素例如千擾素-a2a和干擾素-Ct2b，和白介素例如阿地白介素、白喉毒素/IL-2基因重組融合蛋白(denileukindiftitox)、和奧普瑞白介素(oprelvekin)。除了針對癌細(xì)胞起作用的這些藥物之外，癌癥治療包括利用保護(hù)性或輔助性藥物，包括細(xì)胞保護(hù)劑例如氨磷汀、右雷佐生(dexrazonxane)、和美司鈉，膦酸酯類例如帕米膦酸鹽和唑來膦酸，和刺激因子例如依泊汀、達(dá)貝汀(darbeopetin)、非格司亭、PEG-非格司亭、和沙格司亭。優(yōu)選地，抗癌藥是溶解性差的抗癌藥。21用于本發(fā)明的抗癌藥是紫杉烷類及其衍生物(例如，紫杉醇、多西他賽、及其衍生物等)，但是不排除其他抗癌藥如(例如多柔比星、甲氨蝶吟、順鉑、柔紅霉素、多柔比星、環(huán)磷酰胺、放線菌素、博來霉素、表柔比星、絲裂霉素、甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、卡鉑、卡莫司汀(BCNU)、甲基-CCNU、順鉑、依托泊苷、干擾素、喜樹堿、苯乙酸氮芥、他莫昔芬、哌泊舒凡、及其衍生物等)。優(yōu)選的抗癌劑是選自紫杉垸類、5-氟尿嘧啶和多柔比星的藥物，最優(yōu)選為紫杉烷類。本文中使用的術(shù)語"紫杉烷類"包括化療劑Taxol(通用名紫杉醇；化學(xué)名稱5卩，20-環(huán)氧-l,2a,4,7(3,10,13a-六氫紫杉-ll-烯-9-酮，4,10-二乙酸酯2-苯甲酸13-酯與(2R，3S)-N-苯甲?；?3-苯基絲氨酸)和Taxotere(通用名多西他賽)、第二代紫杉烷類如Ortataxel和紫杉烷類的其它半合成衍生物。紫杉酚，在
背景技術(shù)：
中也有所描述的抗癌藥，通用名為"紫杉醇(paclitaxel)"，由Bristol-MyersSquibbCompany登記的商品名"Taxol"，是起初從太平洋紫杉樹(短葉紫杉)的樹皮分離的復(fù)雜的多氧代的雙萜(complexpolyoxygenatedditerpene)。其由FDA批準(zhǔn)用于治療乳癌、卵巢癌、和肺癌以及AIDS相關(guān)的卡波西肉瘤。Taxotere⑧(多西他賽)與紫杉醇相似，也是得自紫杉樹針葉的物質(zhì)，由FDA批準(zhǔn)用于治療對其它抗癌藥沒有應(yīng)答的晚期乳癌和非小細(xì)胞肺癌。紫杉醇和多西他賽靜脈內(nèi)給藥。但是紫杉醇和多西他賽二者都具有比較嚴(yán)重的副作用。紫杉醇不溶于水，使用作為賦形劑的CremophorEL(聚乙氧基蓖麻油)和乙醇將紫杉醇配制為Taxol;其引起嚴(yán)重的副作用。報(bào)道了在使用Taxol時(shí)的過敏反應(yīng)和其它超敏反應(yīng)的高發(fā)生率。最近，提出了新的蛋白質(zhì)結(jié)合型納米粒子紫杉醇注射懸浮液，商標(biāo)名稱為Abraxane㊣，其避免使用了聚氧乙烯蓖麻油并且不含溶劑，因此沒有與聚氧乙烯蓖麻油和溶劑相關(guān)的副作用。但是即使這種組合物，也表現(xiàn)出另一種化療誘導(dǎo)的副作用，其中之一是最具創(chuàng)傷性的副作用脫發(fā)或毛發(fā)喪失。因此，盡管紫杉醇具有良好的臨床效力并且其出現(xiàn)是腫瘤學(xué)藥物領(lǐng)域最大的進(jìn)步，但是對于提供具有在患者中的更好的安全性和藥代動(dòng)力學(xué)特征、避免最具創(chuàng)傷性的副作用如脫發(fā)的紫杉醇組合物仍有越來越大的需要。選擇用于本研究的最優(yōu)選的紫杉烷類是紫杉醇，但是應(yīng)該理解，這種研究也可以擴(kuò)展至其它抗癌藥，其細(xì)節(jié)在本文中提供，紫杉醇以組合物的約0.5重量％到約99.5重量。/。的量存在于本發(fā)明的組合物中，優(yōu)選為約2.0重量％到約95.0重量％的量，最優(yōu)選為約5.0重量％到約90.0重量％?？拱﹦┛蓡为?dú)使用，或者與本發(fā)明的一種或多種其它藥物組合使用。它們可為無定形的、結(jié)晶、或其混合物，優(yōu)選藥物為實(shí)質(zhì)上無定形的。如此處所述的并且貫穿本申請，本文中使用幾個(gè)定義描述本發(fā)明。如本文中使用的"可藥用的"是指那些化合物、材料、組合物和/或劑型，它們在合理的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)適合接觸人類和動(dòng)物的組織而沒有過多的毒性、刺激性、變態(tài)反應(yīng)、或其它問題或并發(fā)癥，與合理的利益/風(fēng)險(xiǎn)比相稱。"治療有效量"是指有效實(shí)現(xiàn)期望的治療結(jié)果的量。如本文中使用的術(shù)語"聚合物"是指包含多個(gè)共價(jià)連接的單體單元的分子，包括支鏈、樹枝狀、和星形聚合物以及直鏈聚合物。該術(shù)語還包括均聚物和共聚物，例如，無規(guī)共聚物、嵌段共聚物和接枝共聚物，以及未交聯(lián)的聚合物和稍微交聯(lián)到適度交聯(lián)到顯著交聯(lián)的聚合物。術(shù)語"可生物降解的聚合物"是指該聚合物通過身體各過程降解為可容易被身體處理并且不會在身體內(nèi)累積的產(chǎn)物，而術(shù)語"生物相容的"描述了該物質(zhì)不以任何不利的方式可感知地改變或影'響其中引入所述物質(zhì)的生物系統(tǒng)。如本文中使用的，"溶解性差"是指活性劑在室溫下在水中具有低于約10mg/ml的溶解度，并且優(yōu)選地低于1mg/ml。如本文中使用的，"粒度"用于表示組合物中粒子的大小，其通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的常規(guī)的粒度分析器測量，例如沉降場流分級法、光子相關(guān)光譜法、激光散射或動(dòng)力學(xué)光散射技術(shù)和通過使用透射電子顯微鏡(TEM)或掃描電子顯微鏡(SEM)測量。方便的自動(dòng)光散射技術(shù)采用HoribaLA激光散射粒度分析器或類似的裝置。這種分析典型地提供粒子的離散大小的體積分?jǐn)?shù)(頻率歸一化)，包括一級粒子、團(tuán)聚體(aggregates)和聚集物。在本說明書中，粒度特征經(jīng)常是指Dn型的表示法，其中n為l到99的數(shù)字；這種表示法表示粒度的累積分布，即11%(以體積計(jì))的粒子小于或等于所述大小。典型地，粒度表示為以nm為單位的DIO、D50(中值)和D90值。D卯/D10的比值是鑒定粒度分布曲線寬度的適宜特征。在本發(fā)明的各個(gè)方面中，粒度分布窄，優(yōu)選D90/D10的比值小于4，更優(yōu)選小于3，甚至更優(yōu)選小于2.0。如本文中使用的，術(shù)語"nm"是指納米，比l微米更小的單位，微米是千分之一毫米的測量單位。如本文中使用的，"約"應(yīng)該是本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解的，其在某種程度上隨其使用的環(huán)境改變。如果有該術(shù)語的使用使本領(lǐng)域技術(shù)人員在已知其使用環(huán)境的情況下仍不清除的情況，則"約"意味著特定術(shù)語加上和減去最多10%。這個(gè)含義適用于將術(shù)語"約"用于本申請中描述抗癌藥、載體、賦形劑和除了本發(fā)明粒子粒度之外的其它情況中的百分?jǐn)?shù)或量的情況中，在描述本發(fā)明粒子粒度時(shí)，詞語"約"表示特定術(shù)語加上或減去最多25%的值。這意味著D50為約200nm是指150nm到250nm的粒度范圍。24如文本中使用的術(shù)語"化療誘導(dǎo)的副作用"是指由于給予抗癌藥在哺乳動(dòng)物中產(chǎn)生的不利癥狀。其實(shí)例包括毛發(fā)喪失、骨髓抑制、嘔吐、消化道病癥、肝毒性、腎毒性、腦毒性、心臟毒性、肺毒性、口炎、皮膚病和神經(jīng)毒性。優(yōu)選提供本發(fā)明的新型的和改進(jìn)的組合物用于抑制或減少上述副作用之一的毛發(fā)喪失(或脫發(fā))。"脫發(fā)"或毛發(fā)喪失在本文中是指優(yōu)選與藥物誘發(fā)的脫發(fā)有關(guān)，其損壞身體的毛囊。應(yīng)該理解，頭上的毛囊具有最快的生長速率并且其生長期長，由于與在身體中其它位置的毛發(fā)器官相比在頭皮上的毛發(fā)器官具有更高的生物活性，頭皮上的毛發(fā)器官更容易受到抗癌藥的影響，導(dǎo)致對毛囊中毛基質(zhì)細(xì)胞的損害。因此，毛發(fā)基質(zhì)細(xì)胞功能的生長受到影響或毛發(fā)器官迅速發(fā)展到靜止期并且毛發(fā)以萎縮性毛發(fā)的形式脫落。用于抑制化療引起的毛發(fā)喪失的先前的努力包括將抗癌藥與拮抗劑組合給予、阻斷血流向頭皮、動(dòng)脈內(nèi)給予和其它方式，但是這些工作至今都沒有提供任何顯著的效果。本發(fā)明中已經(jīng)進(jìn)行了嘗試，通過安全的、有效的、簡單的和新型的技術(shù)實(shí)現(xiàn)這個(gè)任務(wù)。對于各種包括抗癌藥和至少一種聚合物的粒子形式的組合物的系統(tǒng)的和詳細(xì)的研究揭示了令人驚訝的和非常有用的發(fā)現(xiàn)，物理化學(xué)因素如粒子的幾何結(jié)構(gòu)在提供具有減少的副作用如脫發(fā)的癌癥治療用組合物方面起到非常重要的作用。所述因素包括粒度、形狀、質(zhì)地、表面特征如表面電荷、表面疏水性、重量、分子量、體積、級分、任何形態(tài)學(xué)等，其中作為最重要的因素之一的以直徑表示的粒度已經(jīng)在本發(fā)明中進(jìn)行了詳細(xì)研究。當(dāng)給予包括具有確定粒度范圍的粒子的組合物作為治療哺乳動(dòng)物的癌癥治療方法時(shí)，所述組合物經(jīng)歷選擇性的生物分布，使其提供了更加靶向于作用部位并且實(shí)質(zhì)上減少副作用如脫發(fā)。據(jù)報(bào)道納米粒度范圍的粒子在給予時(shí)在血液中循環(huán)并且由于滲漏的脈管系統(tǒng)到達(dá)腫瘤細(xì)胞而在腫瘤上皮細(xì)胞中保持，但是文獻(xiàn)中還報(bào)道大于200nm直徑的粒子優(yōu)先被細(xì)胞的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)識別并且由此耙向于器官如肝、肺、脾、淋巴循環(huán)等，并且從血液循環(huán)中離開。靜脈內(nèi)注入的納米系統(tǒng)的大部分(90%)通常在血流中存在的蛋白質(zhì)的調(diào)理作用之后損失到網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)，主要是肝和脾中的固定巨噬細(xì)胞中。因此，調(diào)理作用或通過單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)(MPS，又稱為網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES))從身體除去納米粒子藥物載體被認(rèn)為是藥物靶向的主要障礙。在一篇論文(CurrentNanoscience，2005，1,47-64)中，提及具有親水性表面的《100nm的粒子發(fā)生相對較少的調(diào)理作用和通過RES攝取的清除。因此，制備更好的和有效抗癌組合物的前述努力大多數(shù)集中在使組合物的粒子小于1微米，優(yōu)選小于200rnn或100nm，以保持粒子處在循環(huán)中，避免被RES吸收并且靶向腫瘤部位。但是這些現(xiàn)有技術(shù)的組合物中大多數(shù)保持為低于1微米的任何大小，優(yōu)選低于200nm直徑，其可能還包括直徑低于約70nm的粒子。在這些先前努力中任何一個(gè)都沒有認(rèn)識到小于約70nm的粒子通過正常血液毛細(xì)管滲透到皮膚和毛根，并且因此包含粒子的這種抗癌藥在用于治療哺乳動(dòng)物時(shí)會引起化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)。腫瘤微脈管系統(tǒng)是不連續(xù)的并且具有高度滲透性，并且平均來說，腫瘤的內(nèi)皮孔的內(nèi)徑為108土32nm，因此在大小上明顯地大于內(nèi)徑為58±9nm的毛細(xì)管凹陷并且更加不均勻。因此，大于70nm的粒子不能通過正常微血管滲透并且會實(shí)質(zhì)上減少毛發(fā)喪失。在本發(fā)明中，已經(jīng)成功地進(jìn)行了嘗試，以提供新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其包括至少一種抗癌藥和至少一種聚合物的粒子；其中粒子的直徑小于l微米。優(yōu)選地，粒子的D10》80nm、D50為約200nm和D90《450nm，S卩，粒子處在這樣的粒度范圍，使得90%的粒子粒度小于450nm并且只有10%的粒子粒度小于80nm和更小，50%的粒子為約200nm大小。更優(yōu)選地，粒子的DIO》120nm、D50為約200nm和D90《350nm，并且最優(yōu)選地，粒子的D10》140nm、D5026為約200nm和D90《260nm。意外地觀察到最大為約220nm的粒子不被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吸收并且用于循環(huán)以靶向腫瘤部位，粒子不處于低于70nm的大小，從而防止它們滲透進(jìn)入毛囊，產(chǎn)生實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)。意外地發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的粒子以顯著更大的水平在不同于包含RES的組織中積聚，所述組織例如前列腺、胰腺、睪丸、乳房、細(xì)精管、骨等，并且提供脫發(fā)減少，因此表明在如皮膚和毛囊部位的積聚減少。應(yīng)該理解，每個(gè)毛囊連續(xù)地經(jīng)過三個(gè)階段毛發(fā)生長初期(生長)、毛發(fā)生長中期(衰退)、和毛發(fā)生長終期(靜止)。毛發(fā)生長初期繼之以毛發(fā)生長中期并且最終當(dāng)毛干成熟為杵狀毛時(shí)毛囊進(jìn)入毛發(fā)生長終期階段，最終從毛囊脫落。在任何給定的時(shí)間點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)毛囊的大多數(shù)處于毛發(fā)生長初期階段，只有較小百分比處于毛發(fā)生長終期階段并且只有少數(shù)處于毛發(fā)生長中期階段?？拱┧幤茐拿l(fā)生長初期階段過程中的這種迅速增殖的球狀基質(zhì)細(xì)胞。結(jié)果，毛發(fā)產(chǎn)生停止并且毛干變得更細(xì)，并且隨后毛發(fā)斷開并且脫落。在本發(fā)明中，抗癌藥組合物為使得藥物被阻止?jié)B透進(jìn)入毛囊，由此防止毛發(fā)喪失。在本發(fā)明的優(yōu)選方面，包括抗癌藥和至少一種聚合物的組合物為膠態(tài)遞送系統(tǒng)，該體系包括脂質(zhì)體、微乳劑、膠束、聚合物-藥物綴合物、納米膠囊、納米球體、微粒和納米粒子、固體-脂質(zhì)納米粒子。這些遞送系統(tǒng)提供以下優(yōu)點(diǎn)靶向的、分布調(diào)節(jié)、和靈活的制劑并且具有聚合物結(jié)構(gòu)，其可以以適于期望目的的方式被設(shè)計(jì)和生產(chǎn)。組合物可以通過本文中所述的任何給藥途徑遞送，如口服、靜脈內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)、鞘內(nèi)、肌內(nèi)、顱內(nèi)、吸入、局部、透皮、直腸、陰道、粘膜內(nèi)等，并且可以立即釋放藥物或通過各種已知的方法通過調(diào)節(jié)、維持、脈沖、延遲或控制藥物從遞送系統(tǒng)釋放而在一段時(shí)間內(nèi)釋放藥物，其都被包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。膠態(tài)遞送系統(tǒng)可為整體的，其中聚合物與藥物一起被分散，或者其可為涂層的，其中聚合物涂覆在藥物上或聚合物包封藥物。優(yōu)選的系統(tǒng)是包括納米粒子的納米系統(tǒng)，以及正在開27發(fā)的較新的納米系統(tǒng)，包括納米籠(nanocages)、納米凝膠(nanogels)、納米纖維(nanofibers)、納米殼(nanoshells)、納米棒(nanorods)、納米容器(nanocontainers)等。抗癌藥的優(yōu)選的遞送系統(tǒng)是納米粒子組合物，其可以提供許多優(yōu)點(diǎn)，包括適合于非腸道給藥、可以配制為容易再分散的干燥形式，為存在于納米粒子組合物中的活性劑粒子提供高的再分散性，改善在作用部位的靶向、增加生物利用度、降低給藥劑量、改善藥代動(dòng)力學(xué)特性和減少副作用。優(yōu)選的納米粒子是包封在聚合物基質(zhì)內(nèi)或吸附或綴合到表面上的抗癌藥的亞微米大小的聚合物膠體粒子，其還允許通過適當(dāng)?shù)剡x擇聚合物材料控制藥物的釋放特征和長時(shí)間維持藥物水平。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，提供了改進(jìn)的抗癌藥組合物，其中組合物為抗癌藥和聚合物的納米粒子組合物，為具有如本文中限定的特定粒度范圍的膠態(tài)遞送系統(tǒng)，該粒子可用于治療原發(fā)瘤和轉(zhuǎn)移瘤，包括前列腺、睪丸、乳房、肺、腎、胰腺、骨、脾、肝、腦等的癌癥以及其它癌癥，具有實(shí)質(zhì)上減少的副作用，特別是化療誘導(dǎo)的脫發(fā)。優(yōu)選地，組合物包括占組合物的約0.5重量％到約99.5重量％的至少一種抗癌藥和占組合物的約2.0重量％到約99.0重量％的至少一種聚合物。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，抗癌藥為紫杉醇，其作為包括占組合物的約2.0重量％到約99.0重量°/。的至少一種聚合物的納米粒子組合物形式被提供。用于本發(fā)明的可生物降解的聚合物包括天然的、合成的和半合成的材料。天然聚合物的實(shí)例包括蛋白質(zhì)、肽、多肽、寡肽、聚核酸、聚糖(例如，淀粉、纖維素、右旋糖酐、藻酸鹽、脫乙酰殼多糖、果膠、透明質(zhì)酸等)、脂肪酸、脂肪酸酯、甘油酯、脂肪、脂質(zhì)、磷脂、蛋白多糖、脂蛋白等，和它們的變體。蛋白質(zhì)包括白蛋白、免疫球蛋白、酪蛋白、胰島素、血色素、溶菌酶、a-2-巨球蛋白、粘連蛋白、玻連蛋白、纖維蛋白原、脂肪酶等。如果需要，蛋白質(zhì)、肽、酶、抗體及其組合還可以在本發(fā)明中用作穩(wěn)定劑，以改善穩(wěn)定性。優(yōu)選的蛋白質(zhì)是白蛋白，優(yōu)選以組合物的約2.0重量％到99.0重量％的量使用，更優(yōu)選組合物的5.0重量％到95.0重量％，并且最優(yōu)選組合物的約10.0重量％到約90.0重量％。合成的聚合物包括聚氨基酸如明膠、聚乙烯醇、聚丙烯酸、聚乙酸乙烯酯、聚酯、聚丙烯酸酯、聚乙烯基吡咯烷酮、polyethoxyzoline、聚丙烯酰胺、聚乙烯吡咯烷酮、聚亞烷基二醇、聚交酯、聚乙交酯、聚己酸內(nèi)酯、或其共聚物等，和任何兩種或多種的適當(dāng)?shù)慕M合，特別是oc-羥基羧酸、聚羥乙基甲基丙烯酸酯、聚s-己內(nèi)酯、聚(3-氰基丁酸酯、聚羥基戊酸酯和(3-羥基丁酸酯-羥基戊酸酯共聚物、聚蘋果酸、聚乳酸、聚羥基乙酸、d，l-乳酸-羥基乙酸共聚物、聚乳酸-聚氧化乙烯的兩性嵌段聚合物、聚亞烷基二醇、聚氧化乙烯、聚氧化乙烯-聚氧化丙烯的嵌段共聚物、聚酸酐、聚原酸酯、聚磷腈、普魯蘭支鏈淀粉(pullulan)。優(yōu)選地，本發(fā)明的遞送系統(tǒng)使用可生物降解的/生物相容的聚合物包封抗癌藥。這些可生物降解的第一聚合物可為在給予時(shí)立即釋放抗癌活性劑的那些或延遲抗癌活性劑的釋放并且保持納米粒子組合物在目標(biāo)位置更長時(shí)間以利于療效的那些。優(yōu)選的第一聚合物為d,l-乳酸-羥基乙酸共聚物或PLGA，其為可生物降解的聚合物，被允許用于配制改變釋放的蓋侖制劑。PLGA是疏水性共聚物，其由水解反應(yīng)引起的降解產(chǎn)生兩種通常的生物學(xué)底物，乳酸和羥基乙酸，二者在有氧糖酵解結(jié)束時(shí)代謝為C02和H20。PLGA的生物降解速度取決于乳酸和羥基乙酸各自的比，50:50的比是優(yōu)選的。PLGA具有完全的生物相容性并且引起中度的異物反應(yīng)。用于本發(fā)明的PLGA優(yōu)選占組合物的約2.0重量％到99.0重量％的量，更優(yōu)選占組合物的5.0重量％到95.0重量％，并且最優(yōu)選占組合物的約10.0重量％到約卯.0重量％。29根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，其包括通過各種技術(shù)使抗癌藥耙向于作用部位，這包括將靶向配體與藥物或包含藥物的納米粒子組合物綴合以引導(dǎo)它們到它們的目標(biāo)位置，或者用溫度和/或pH敏感性聚合物涂覆/組合物或與其結(jié)合，以及其它技術(shù)。根據(jù)這個(gè)上述的方面，為了實(shí)現(xiàn)活性成分在腫瘤部位的耙向釋放，通過對包封抗癌藥如紫杉醇的納米粒子施加對溫度敏感的共聚物配合物制備溫度敏感的和外表面經(jīng)改性的納米粒子，所述對溫度敏感的共聚物配合物能夠在水溶液中表現(xiàn)出熱應(yīng)答，如聚N-乙?；０?、聚N-異丙基丙烯酰胺、N-異丙基丙烯酰胺-丙烯酰胺共聚物、聚乙烯醇、聚乙二醇、聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酰胺。這種具有親水性表面的納米粒子會在血液中循環(huán)達(dá)更長的時(shí)間并且由于粒子的熱敏性(即，在水溶液中表現(xiàn)出上限臨界溶解溫度(UCST)或下限臨界溶解溫度(LCST))，在37t:體內(nèi)注射時(shí)，粒度增加；由于腫瘤微環(huán)境中生理情況的差異粒子累積在腫瘤中時(shí)，粒度進(jìn)一步增加幾倍并且包封的活性藥物在腫瘤部位釋放?？墒褂玫腜H敏感性聚合物包括聚丙烯酸酯、醋酞纖維素等。本發(fā)明的包封藥物的納米粒子是經(jīng)過設(shè)計(jì)的，使得在體外條件下在室溫下粒子的D10》80nm、D50為約200nm和D90《450nm，優(yōu)選D0》120nm、D50為約200nm和D90《350nm,更優(yōu)選D10》140nm、D50為約200nm和D90《260nm，但是有趣的是，由于粒子的溫度敏感性，當(dāng)這些粒子注入體內(nèi)時(shí)，粒度在血漿中增加到其原始大小的兩倍。因此，即使在規(guī)模擴(kuò)大和工業(yè)生產(chǎn)過程中，包括藥物和聚合物的組合物粒子中沒有幾個(gè)不能落入限定的粒度范圍，在體內(nèi)，粒子總是處在粒度范圍內(nèi)，其防止從正常血液毛細(xì)管滲透到皮膚，并且由此滲透到毛根，而是長時(shí)間保持在血液循環(huán)中，最終靶向于作用部位。當(dāng)這些粒子到達(dá)腫瘤時(shí)，它們在腫瘤部位增加到其原始大小的約十倍并且還滲透通過滲漏性和高度滲透性的腫瘤微脈管系統(tǒng)，在其中粒子被保持(即，提高滲透性和滯留效應(yīng))并且釋放藥物。在給予這種組合物治療各種癌癥時(shí)這最終導(dǎo)致脫發(fā)減少。組合物在其中幾乎沒有游離藥物，其在減少脫發(fā)相關(guān)副作用方面具有增加的優(yōu)點(diǎn)。用于本發(fā)明的組合物的優(yōu)選的第二聚合物為溫度和/或pH敏感的聚合物如聚N-異丙基丙烯酰胺，以所述組合物的約0.5重量％到約99.0重量％使用、優(yōu)選約1.0重量％到約95.0重量％，最優(yōu)選約2.0重量％到約90.0重量％。因此，根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，提供了制備這種溫度敏感的和外表面經(jīng)改性的納米粒子的方法，所述納米粒子包封抗癌藥如紫杉醇，用于在腫瘤部位立即遞送或控制遞送和部位特異性遞送，從而提供藥物的最大治療效果，在更低劑量下的活性成分產(chǎn)生最小副作用。本發(fā)明的抗癌藥的藥物組合物包括上面描述的納米粒子組合物，其包括藥物及其可藥用載體。適合的可藥用載體是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。這些包括無毒的生理學(xué)可接受的載體、賦形劑或助劑或媒介物，用于非腸道注射、以固體或液體形式用于口服給藥、用于直腸給藥、經(jīng)鼻給藥、肌肉內(nèi)給藥、皮下給藥等。優(yōu)選地，組合物是作為靜脈內(nèi)快速濃注或通過皮下或肌肉內(nèi)途徑給藥的非腸道注射組合物。適合于非腸道注射的組合物可包括生理學(xué)可接受的無菌的水性或非水性分散體、懸浮液、或乳劑和用于重構(gòu)為無菌可注射分散體或懸浮液的無菌粉劑。適當(dāng)?shù)乃院头撬暂d體、稀釋劑、溶劑或媒介物的實(shí)例包括水；脂肪族或芳香族醇如無水乙醇、辛醇；垸基鹵化物或芳基鹵化物如二氯甲垸；酮如丙酮；脂肪族、環(huán)脂族或芳香族烴如己烷、環(huán)己烷、甲苯、苯；和多元醇(丙二醇、聚乙二醇、甘油等)；N-羥基琥珀酰亞胺、碳二亞胺、其適合的混合物、植物油(例如大豆油、礦物油、玉米油、菜籽油、椰子油、橄欖油、紅花油、棉子油等)和可注射的有機(jī)酯例如油酸乙酯；烷基、芳基或環(huán)狀的醚如乙醚、四氫呋喃；乙腈和含水的緩沖溶液、氯仿等?？梢酝ㄟ^例如使用涂層例如卵磷脂、通過保持分散體或懸浮液中的期望的粒度、和通過利用表面活性劑保持適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)性。納米粒子藥物組合物除活性劑和溶劑之外還可以包含賦形劑或助劑，例如防腐劑、潤濕劑、乳化劑、表面穩(wěn)定劑、表面活性劑和分散劑，所有的實(shí)例為本領(lǐng)域已知的并且包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。在任何適合的情況下可以通過各種抗菌劑和抗真菌藥防止微生物生長，例如對羥基苯甲酸酯類、三氯叔丁醇、苯酚、山梨酸等。還可能希望包括等滲劑，如糖、氯化鈉等，緩沖劑如磷酸鹽、苯二酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、硼酸鹽等。本發(fā)明的納米粒子組合物可以在制備的每個(gè)階段經(jīng)過無菌過濾或在無菌條件下制備。這避免了對熱力滅菌法的需要，所述熱力滅菌法可損害或降解活性劑，以及導(dǎo)致活性劑的晶體生長和粒子聚集。作為膠態(tài)遞送系統(tǒng)的組合物最后作為凍千粉末或懸浮在生物相容性水性液體中的懸浮液形式被提供。生物相容性液體可選自水，緩沖的含水介質(zhì)，鹽水，緩沖鹽水，氨基酸、蛋白質(zhì)、糖、碳水化合物、維生素或合成聚合物的緩沖溶液，脂質(zhì)乳液等。在本發(fā)明的一個(gè)重要方面中，提供了包封抗癌藥如紫杉醇、其衍生物或其類似物的納米粒子，以及制備包封抗癌藥如紫杉醇、其衍生物或其類似物的納米粒子以實(shí)現(xiàn)最大包封效率的方法，使得納米粒子組合物在其中實(shí)質(zhì)上不含游離藥物。因此，本發(fā)明的目的是提供將包封紫杉醇、其衍生物或類似物的納米粒子分級為特定的限定粒度范圍的方法和提供使納米粒子經(jīng)過除去組合物中的任何游離藥物的過程的方法，幾乎所有藥物與聚合物結(jié)合，使得組合物在給予哺乳動(dòng)物用于治療時(shí)產(chǎn)生實(shí)質(zhì)上減少的副作用如脫發(fā)或毛發(fā)喪失。本發(fā)明的組合物(其包括微粒、脂質(zhì)體、納米膠囊、納米球體、和納米粒子和前述的其它組合物)通過本領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)常規(guī)方法生產(chǎn)，但是具有根據(jù)需要將粒子分級為限定粒度范圍和使粒子經(jīng)過處理以除去全部未被聚合物包封或與聚合物結(jié)合的游離藥物的另外的步驟，其已經(jīng)在本文中所述的實(shí)施方案中詳細(xì)舉例說明。用于制備本發(fā)明的納米粒子藥物組合物的方法包括制備微粒/納米粒子組合物的所有技術(shù)。在本發(fā)明的優(yōu)選方面中，該方法包括以下步驟將藥物和聚合物溶解和/或分散在含水溶液和/或溶劑或溶劑混合物中，在攪拌下將兩種溶液混合以形成乳液或沉淀，任選地在另外的可藥用載體或賦形劑的存在下混合，在低壓或高壓下將其均化以得到具有期望粒度的納米粒子，通過任何技術(shù)除去溶劑，所述技術(shù)之一是利用減壓，如果需要，使納米粒子通過粒子篩分以得到本發(fā)明的限定粒度范圍，將納米懸浮液超濾通過30千道爾頓膜以除去所有的游離藥物，并且最后在小瓶中凍干并且儲存，直到進(jìn)一步研究。本發(fā)明的治療哺乳動(dòng)物的方法包括對需要治療的哺乳動(dòng)物給予有效量的所述新型的和改進(jìn)的上述抗癌藥和聚合物的組合物，該組合物提供實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的脫發(fā)。因此，根據(jù)本發(fā)明的特別優(yōu)選的方面，提供了在經(jīng)歷用抗癌劑治療癌癥治療的哺乳動(dòng)物中減少化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)的方法，所述方法包括給予治療有效量的所述新型的和改進(jìn)的組合物，該組合物包括本文中所述的至少一種抗癌藥和至少一種聚合物的粒子。組合物為使得其具有處在本文所述的限定粒度范圍內(nèi)的粒子，并且其中實(shí)質(zhì)上不含游離藥物。實(shí)施例實(shí)施例l:包封紫杉醇的PLGA納米粒子的合成通過w/o/w雙重乳化使用雙重乳化過程從d,l-乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)合成納米粒子。在典型的實(shí)驗(yàn)中，將100mg的PLGA溶解于2mL二氯甲垸并且將10mg紫杉醇溶解于1.0mL的無水乙醇。在攪拌下將兩種溶液緩慢混合在一起。通過將500nL磷酸鹽緩沖液鹽水在上述溶液中乳化制備第一油包水(w/o)乳化液。然后將第一油包水乳化液進(jìn)一步在聚N-乙?；０啡芤褐腥榛孕纬伤桶?w/o/w乳33化液)。將如此制備的w/o/w乳化液均化，在蒸發(fā)溶劑之后形成加載了紫杉醇的納米粒子。然后將溶液離心并選擇性地分離處在期望粒度范圍內(nèi)的納米粒子。然后將納米粒子分散在無菌水中并且立即凍干以備將來之用。實(shí)施例2:PLGA共價(jià)結(jié)合于普魯蘭支鏈淀粉膠束納米團(tuán)聚體和紫杉醇的加載通過用N-羥基琥珀酰亞胺活化PLGA將PLGA共價(jià)結(jié)合于普魯蘭支鏈淀粉。普魯蘭支鏈淀粉-PLGA復(fù)合物通過凝膠過濾進(jìn)行純化并且通過FTIR、H-NMR和質(zhì)譜進(jìn)行表征。將經(jīng)疏水處理的普魯蘭支鏈淀粉溶液凍干并且保持為深冷凍以備將來之用。將100mg的疏水化普魯蘭支鏈淀粉溶解于lOmL水并將溶液渦旋以形成膠束。將在乙醇中制備的紫杉醇溶液緩慢加入到膠束溶液中并且溶解，直到溶液澄清，表明藥物包封在膠束制劑中。優(yōu)先分離處在期望范圍內(nèi)的加載了藥物的粒子并將溶液凍干。使用HPLC通過標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)測定包封效率或加載能力和紫杉醇從納米粒子的釋放行為并且使用常規(guī)的粒度分析器測定粒度。用熱敏性聚合物涂覆納米粒子將加載了藥物的納米粒子懸浮在含水緩沖液(pH4-5)中。向該溶液中加入碳二亞胺的溶液并將得到的溶液渦旋并且在室溫下連續(xù)攪拌4小時(shí)。然后通過離心(或通過過濾或透析)分離納米粒子。向納米粒子懸浮液滴加聚合物聚N-乙?；０返乃芤翰⒒旌衔餃u旋。然后將溶液進(jìn)一步攪拌，將粒子純化并且凍干以備將來之用。處在特定粒度范圍內(nèi)的納米粒子的分級在聲處理的幫助下將10.0mg的加載了紫杉醇的納米粒子的凍干粉末懸浮在含水緩沖液中。將溶液過濾通過0.2|imMillipore過濾單元并使用生產(chǎn)商的用于使用這種技術(shù)對粒子分級的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)程使濾液經(jīng)過不對稱流場-流動(dòng)分級。收集不同級分并且使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)進(jìn)行粒度分析，以測定粒度和粒度分布。實(shí)施例3:紫杉醇-人血清白蛋白納米粒子的制備將1800mg人血清白蛋白溶解于無菌注射用水。將200mg紫杉醇單獨(dú)地溶解于乙醇。在高速攪拌下將醇溶液緩慢加入到人血清白蛋白的水溶液中。使形成的乳液通過高壓勻漿器，其時(shí)間足以得到期望的納米粒子大小。從納米粒子減壓除去乙醇，其后將其經(jīng)過粒子篩分，首先通過0.2微米過濾器，隨后通過0.1微米過濾器。將分級后的納米粒子無菌過濾通過0.2微米過濾器、超濾，并且在小瓶中凍干。測量粒子的各種參數(shù)。表1:<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>實(shí)施例4:紫杉醇-人血清白蛋白納米粒子的制備將675mg人血清白蛋白溶解于無菌注射用水。將75mg紫杉醇單獨(dú)地溶解于乙醇。在攪拌下將醇溶液緩慢加入到人血清白蛋白的水溶液中。使形成的乳液以低壓力通過勻漿器，其時(shí)間足以得到期望的納米粒子大小。從納米粒子減壓除去乙醇，其后將其經(jīng)過30千道爾頓膜超濾以除去游離藥物，然后在小瓶中凍干。測量得到的粒子的各種參數(shù)。表2:<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>實(shí)施例5:具有LCST聚合物的紫杉醇-人血清白蛋白納米粒子的制備將1800mg人血清白蛋白和200mg聚N-異丙基丙烯酰胺(LCST聚合物)溶解于無菌注射用水。將200mg紫杉醇單獨(dú)地溶解于乙醇。隨后的進(jìn)一步的步驟與上述實(shí)施例3中給出的相似。在使用LCST聚合物的實(shí)驗(yàn)中得到的粒子經(jīng)過分級，以得到在期望范圍內(nèi)的粒子。在一個(gè)這種實(shí)驗(yàn)中，研究得到的粒子在各種溫度條件下的粒度改變，其結(jié)果在以下表3中給出，將其作為證明粒度隨著溫度的增加而增加的實(shí)例。表3:<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>結(jié)果表明，在第二聚合物如LCST聚合物的存在下，包括紫杉醇和白蛋白的粒子在經(jīng)歷各種溫度條件時(shí)表現(xiàn)出粒度增加，在37。C(例如血漿溫度)，粒子增加到其原始大小的約兩倍，在38"(例如腫瘤溫度)，粒子增加到其原始大小的約十倍。實(shí)施例6:PLGA-紫杉醇-LCST聚合物納米粒子的制備將紫杉醇和d,l-乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)溶解于丙酮。將聚N-異丙基丙烯酰胺溶解于注射用水，隨后向該水相加入聚乙烯醇。在攪拌下將紫杉醇-PLGA溶液緩慢加入到水相中。從該乳液減壓除去丙酮。如此得到的納米粒子經(jīng)過粒子篩分，分別地進(jìn)行除去游離藥物的處理和冷凍干燥。實(shí)施例7:紫杉醇-PLGA-人血清白蛋白納米粒子的制備將900mg人血清白蛋白溶解于無菌注射用水。將給自為100mg的紫杉醇和PLGA單獨(dú)地溶解于氯仿。在高速混合攪拌下將紫杉醇-PLGA溶液加入到人血清白蛋白水溶液中，以形成水包油(0/W)乳化液。使形成的乳液以低壓力通過勻漿器，其時(shí)間足以得到期望的納米粒子大小。從納米粒子減壓除去殘余的乙醇，其后將其經(jīng)過30千道爾頓膜超濾以除去游離藥物，并且凍千。測量得到的粒子的各種參數(shù)。表2:試驗(yàn)編號試驗(yàn)項(xiàng)目結(jié)果1紫杉醇含量1mg/10mg的凍干粉末2懸浮液的pH6.9游離藥物含量無4納米粒子的累積體積分布D10-176.6nmD50-233.8雄D90-318.4nm實(shí)施例8:化療對小鼠毛發(fā)生長模式的影響將用于研究的七周齡的雄性BALB/c小鼠養(yǎng)在籠中并且允許自由進(jìn)食和進(jìn)水。將它們保持在標(biāo)準(zhǔn)條件(25。C室溫，12小時(shí)照明和12小時(shí)黑暗循環(huán))下。注射用于研究的樣品為參考樣(市售的白蛋白結(jié)合型紫杉醇可注射懸浮液)，試驗(yàn)樣(得自實(shí)施例3的樣品)，和對照樣鹽水(媒介37物)。形成鼠模型以研究化療誘導(dǎo)的脫發(fā)。在麻醉下，通過使毛發(fā)生長終期毛干脫毛將已經(jīng)經(jīng)歷幾次出生后毛發(fā)周期的毛發(fā)生長終期小鼠誘導(dǎo)進(jìn)入毛發(fā)生長初期。這是通過使用電動(dòng)理發(fā)推子隨后將市售的脫毛乳劑施用于背部皮膚進(jìn)行。通過使用這種技術(shù)，所有被脫毛的毛發(fā)生長終期毛囊立即開始轉(zhuǎn)變?yōu)槊l(fā)生長初期毛囊(階段I到VI)(參考Paus等人，AmericanJournalofPathology,144，719-734(1994)。進(jìn)行上述步驟是用于在小鼠中誘導(dǎo)與自發(fā)的毛發(fā)生長初期發(fā)育階段相比為高度同步的毛發(fā)生長初期發(fā)育階段。毛發(fā)生長初期VI階段(脫毛之后的第9天)，對每組四只小鼠的三個(gè)組靜脈內(nèi)給予試驗(yàn)樣和參考樣(20mg/kg)和等量的對照樣，進(jìn)行研究。在處理之后，視覺觀察所有動(dòng)物的毛發(fā)生長和脫發(fā)的跡象并且進(jìn)行數(shù)碼拍攝記錄。在化療和媒介物處理之后的不同時(shí)間間隔，如下所述，基于毛發(fā)生長指數(shù)進(jìn)行毛發(fā)生長模式的得分毛發(fā)生長指數(shù)得分0=沒有毛發(fā)生長1=適度的毛發(fā)生長，伴有嚴(yán)重的脫發(fā)2=中等的毛發(fā)生長，伴有稀疏的脫發(fā)3=良好和均勻的毛發(fā)生長，沒有脫發(fā)跡象每個(gè)處理組的毛發(fā)生長得分指數(shù)在以下表4中給出。表4:<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>更高的毛發(fā)生長得分指數(shù)表示更好的毛發(fā)生長。上述數(shù)據(jù)顯示，用試驗(yàn)樣處理的小鼠表現(xiàn)出比參考樣更好的毛發(fā)生長并且具有更接近對照樣的數(shù)值。實(shí)施例9:化療對小鼠毛發(fā)生長模式的影響使用得自實(shí)施例4的另一個(gè)試驗(yàn)樣品進(jìn)行與上述相同的研究。注射用于研究的樣品為參考樣(市售的白蛋白結(jié)合型紫杉醇可注射懸浮液)，試驗(yàn)樣(得自實(shí)施例4的樣品)，和對照樣鹽水(媒介物)。在這個(gè)研究中得到的每個(gè)處理組的毛發(fā)生長得分指數(shù)在以下表5中給出。表5:<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>上述數(shù)據(jù)顯示，用試驗(yàn)樣處理的小鼠表現(xiàn)出比參考樣好得多的毛發(fā)生長，并且具有更加接近對照樣的得分，用參考樣處理的小鼠具有最低的毛發(fā)生長得分指數(shù)。在對照組和參考組的毛發(fā)生長指數(shù)得分之間有統(tǒng)計(jì)顯著差異(p《0.05;t=1.964，df=6,n=4)。這個(gè)數(shù)據(jù)進(jìn)一步表明試驗(yàn)樣表現(xiàn)出減少的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)。實(shí)施例10:在帶有腫瘤的小鼠中的研究200680039204.X用于研究的樣品為(a)參考樣(市售的白蛋白結(jié)合型紫杉醇可注射懸浮液)，(b)試驗(yàn)樣I:(得自實(shí)施例4的樣品)，和(C)試驗(yàn)樣II:(得自實(shí)施例5的樣品)。這個(gè)實(shí)驗(yàn)的目的是研究與參考樣相比本發(fā)明的納米粒子(試驗(yàn)樣)的腫瘤保持力(retentiveness)和泄漏(leakiness)行為。取帶有腫瘤的ICRC小鼠(帶有自發(fā)性乳房腫瘤)，基于平均腫瘤大小將小鼠分成三組(n=5)并且通過腫瘤內(nèi)路徑用參考樣和試驗(yàn)樣劑量給藥(0.06mg/100mm3)。在8小時(shí)的固定時(shí)間間隔之后，將小鼠處死，收獲腫瘤和血漿并且分析紫杉醇。計(jì)算試驗(yàn)樣和參考樣中紫杉醇的腫瘤血漿比，發(fā)現(xiàn)實(shí)施例4為71.61，實(shí)施例5為355.7，參考樣為19.96。這個(gè)數(shù)據(jù)顯示，與參考樣相比，實(shí)施例4的試驗(yàn)樣保持的紫杉醇為3.58倍，實(shí)施例5的試驗(yàn)樣保持的紫杉醇為17.80倍。這進(jìn)一步顯示試驗(yàn)樣與參考樣相比發(fā)生更少的泄漏并且有助于減少副作用如脫發(fā)，如實(shí)施例4的試驗(yàn)樣所示。由于粒子膨脹到本發(fā)明限定的粒度并且由此具有少得多的泄漏，如實(shí)施例5中舉例說明的在組合物中試驗(yàn)樣與另外的溫度敏感性聚合物提供了好得多的保持力，其可以產(chǎn)生實(shí)質(zhì)上減少的副作用如脫發(fā)。40權(quán)利要求1.具有實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物。2.權(quán)利要求1的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，包括至少一種抗癌藥和至少一種聚合物的粒子。3.權(quán)利要求2的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中粒子以限定的粒度范圍存在，組合物為使得其產(chǎn)生實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)。4.權(quán)利要求2的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中粒子的D10》80nm,D50為約200nm和D90《450mn。5.權(quán)利要求2的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中粒子的D10》120nm，D50為約200nm和D90《350nm。6.權(quán)利要求2的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中粒子的D10》140nm，D50為約200nm和D90《260nm。7.權(quán)利要求2的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中所述組合物實(shí)質(zhì)上不含游離藥物，并且其中所述藥物實(shí)質(zhì)上完全地與聚合物^口口。8.權(quán)利要求2的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中所述粒子的粒度分布比D卯/D10小于4.0。9.權(quán)利要求2的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中所述粒子的粒度分布比D卯/D10小于3.0。10.權(quán)利要求2的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中所述粒子的粒度分布比D90/D10小于2.0。11.權(quán)利要求2的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中抗癌藥選自烷化劑、抗代謝物類藥物、抗生素類抗癌藥、植物生物堿類藥物、蒽二酮類藥物、天然產(chǎn)物、激素、激素拮抗劑、其它藥物、放射增敏劑、鉑配位復(fù)合物、腎上腺皮質(zhì)抑制劑、免疫抑制劑、功能性治療劑、基因治療劑、反義治療劑、酪氨酸激酶抑制劑、單克隆抗體、免疫毒素、放射免疫結(jié)合物、癌癥疫苗、干擾素、白細(xì)胞介素、取代脲類、紫杉烷類和COX-2抑制劑。12.權(quán)利要求11的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中抗癌藥為以下的一種或多種氮芥(chlormethine)、苯丁酸氮芥(chlorambucile)、白消安、塞替派、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、環(huán)磷酰胺、雌莫司汀、異環(huán)磷酰胺、氮芥(mechlorethamine)、美法侖、烏拉莫司汀、卡莫司汀、洛莫司汀、鏈佐星、達(dá)卡巴嗪、丙卡巴肼、替莫唑胺、順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、賽特鉑、(SP-4-3)-(順式)-胺二氯-[2-甲基吡啶]-鉑(II)、甲氨蝶呤、permetrexed、雷替曲塞、三甲曲沙、克拉屈濱、氯脫氧腺苷、克羅拉濱、氟達(dá)拉濱、巰嘌呤、噴司他丁、硫鳥嘌呤、阿扎胞苷、卡培他濱、阿糖胞苷、依達(dá)曲沙、氮尿苷、5-氟尿嘧啶、吉西他濱、曲沙他濱、博來霉素、放線菌素D、多柔比星、放線菌素C、普卡霉素、絲裂霉素、米托蒽醌、泊非霉素、柔紅霉素、多柔比星、脂質(zhì)體多柔比星、表柔比星、伊達(dá)比星、戊柔比星、phenesterine、他莫昔芬、哌泊舒凡、camptothesin、L-天冬酰胺酶、PEG-L-天冬酰胺酶、紫杉醇、多西他賽、泰素帝、長春堿、長春新堿、長春地辛、長春瑞濱、伊立替康、拓?fù)涮婵?、安吖啶、依托泊苷、替尼泊苷、氟甲睪酮、睪內(nèi)酪、比卡魯胺、環(huán)丙孕酮、氟他胺、尼魯米特、氨魯米特、阿那曲唑、依西美坦、福美坦、來曲唑、地塞米松、潑尼松、己烯雌酚、氟維司群、雷洛昔芬、他莫昔芬、托瑞米芬、布舍瑞林、戈舍瑞林、亮內(nèi)瑞林、曲普瑞林、乙酸甲羥孕酮、乙酸甲地孕酮、左甲狀腺素、碘塞羅寧、六甲蜜胺、三氧化二砷、硝酸鎵、羥基脲、左旋咪唑、米托坦、奧曲肽、丙卡巴肼、蘇拉明、沙利度胺、甲氧沙林、卟吩姆鈉、硼替佐米、鹽酸埃羅替尼、吉非替尼、甲磺酸伊馬替尼、司馬沙尼、阿達(dá)帕林、蓓薩羅丁、反式維甲酸、9-順式維甲酸、和N-(4-羥基苯基)維甲酰胺、阿來組單抗、貝伐單抗、西妥昔單抗、替伊莫單抗、利妥西單抗、曲妥珠單抗、吉妥珠單抗奧唑米星、干擾素-cc2a、干擾素-a2b、阿地白介素、白喉毒素/IL-2基因重組融合蛋白、和奧普瑞白介素及其衍生物等。13.權(quán)利要求12的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中抗癌藥選自紫杉垸類、多柔比星、和5-氟尿嘧啶。14.權(quán)利要求13的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中抗癌藥是紫杉烷類及其衍生物。15.權(quán)利要求14的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中抗癌藥選自紫杉醇和多西他賽。16.權(quán)利要求2的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中聚合物是可生物降解的聚合物。17.權(quán)利要求16的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中可生物降解的聚合物選自蛋白質(zhì)、肽、脂肪酸、脂質(zhì)、磷脂、聚核酸、多糖、蛋白多糖、脂蛋白、oc-羥基羧酸、聚s-己內(nèi)酯、聚(3-羥基丁酸酯、聚羥基戊酸酯、和(3-羥基丁酸酯-羥基戊酸酯共聚物、聚蘋果酸、聚乳酸、聚羥基乙酸、d，l-乳酸-羥基乙酸共聚物、聚乳酸-聚氧化乙烯的兩性嵌段聚合物、聚亞烷基二醇、聚氧化乙烯、聚氧化乙烯-聚氧化丙烯的嵌段共聚物、聚酸酐、聚原酸酯、聚磷腈、普魯蘭支鏈淀粉、聚N-乙烯基卩比咯烷酮、聚乙烯醇、聚乙酸乙烯酯、聚酯、聚氨基酸、聚丙烯酸酯、聚乙烯基吡咯垸酮、polyethoxyzoline和其它合成的和天然的聚合物或其共聚物等，及其衍生物和混合物。18.權(quán)利要求17的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中所述蛋白質(zhì)是白蛋白。19.權(quán)利要求2的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中所述組合物包括約0.5重量％到約99.5重量％的所述抗癌藥和約2.0重量％到約99.0重量％的所述聚合物。20.權(quán)利要求2的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中抗癌藥是紫杉醇并且聚合物是d,l-乳酸-羥基乙酸共聚物。21.權(quán)利要求2的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中抗癌藥是紫杉醇并且聚合物是白蛋白。22.權(quán)利要求2的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，另外包括第二聚合物。23.權(quán)利要求22的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中第二聚合物選自溫度和pH敏感性聚合物。24.權(quán)利要求23的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中溫度和/或pH敏感性聚合物選自聚N-乙酰基丙烯酰胺、聚N-異丙基丙烯酰胺、N-異丙基丙烯酰胺-丙烯酰胺共聚物、聚乙烯醇、聚乙二醇、聚丙烯酰胺、聚甲基丙烯酰胺等及其衍生物。25.權(quán)利要求24的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中所述溫度和/或pH敏感性聚合物是聚N-異丙基丙烯酰胺。26.權(quán)利要求19的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，另外包括第二聚合物，其量占所述組合物的約0.5重量％到99.0重量％,優(yōu)選占所述組合物的1.0重量％到95.0重量％，并且最優(yōu)選占所述組合物的約2.0重量。/o到約90.0重量％。27.權(quán)利要求22的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中在第二聚合物的存在下，在對哺乳動(dòng)物給藥時(shí)，組合物的粒子的大小在血槳中增加到其原始大小的約兩倍，并且在腫瘤部位增加到其原始大小的約十倍，從而提供靶向和實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)。28.權(quán)利要求2的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中所述組合物為膠態(tài)遞送系統(tǒng)。29.權(quán)利要求28的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中膠態(tài)遞送系統(tǒng)為凍干形式。30.權(quán)利要求28的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中膠態(tài)遞送系統(tǒng)為使得粒子懸浮在生物相容性水性液體中。31.權(quán)利要求1的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中組合物包括占組合物的約0.5重量％到約99.5重量％的紫杉醇、占組合物的約2.0%到約99.0重量％的d，l-乳酸-羥基乙酸共聚物，和任選的占組合物的約2.0重量％到約90.0重量％的聚N-異丙基丙烯酰胺、和占組合物的約0.01重量％到約99.9重量％的一種或多種可藥用的賦形劑、載體或其組合。32.權(quán)利要求1的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物，其中組合物包括占組合物的約0.5重量％到約99.5重量％的紫杉醇、占組合物的約2.0%到約99.0重量％的白蛋白，和任選的占組合物的約2.0重量％到約90.0重量％的聚N-異丙基丙烯酰胺、和占組合物的約0.01重量％到約99.9重量％的一種或多種可藥用的賦形劑、載體或其組合。33.制備權(quán)利要求1的新型的和改進(jìn)的癌癥治療用組合物的方法，包括以下步驟(i)在溶劑中將至少一種抗癌藥與至少一種聚合物混合，(ii)任選地在一種或多種可藥用載體的存在下進(jìn)行步驟(i)，(iii)通過除去溶劑得到納米粒子，和(iii)使納米粒子經(jīng)過粒子篩分，使得所得粒子的D10》80nm、D50為約200nm和D卯《450nm并且實(shí)質(zhì)上不含游離藥物；組合物為使得其提供實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)。34.治療哺乳動(dòng)物的癌癥治療方法，包括對所述哺乳動(dòng)物給予治療有效量的所述新型的和改進(jìn)的組合物的步驟，所述組合物包括至少一種抗癌藥和至少一種聚合物的粒子，其中所述粒子的D10》80nm，D50為約200nm和D90《450nm，并且該組合物為使得其實(shí)質(zhì)上不含游離藥物并且提供實(shí)質(zhì)上減少的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)。35.在經(jīng)歷用抗癌藥治療的哺乳動(dòng)物中減少癌癥治療的化療誘導(dǎo)的副作用如脫發(fā)的方法，所述方法包括給予治療有效量的所述新型的和改進(jìn)的組合物，所述組合物包括至少一種抗癌藥和至少一種聚合物的粒子，其中所述粒子的D10》80nm，D50為約200nm和D90《450mn，并且該組合物為使得其實(shí)質(zhì)上不含游離藥物。全文摘要本發(fā)明涉及新型的和改進(jìn)的抗癌藥組合物，優(yōu)選紫杉烷類，例如紫杉醇和多西他賽，它們的衍生物或它們的類似物，制備這些組合物的方法和將粒子分級為處在特定的粒度范圍內(nèi)的方法，和使用這些組合物治療癌癥患者的方法，其提供了減少的化療誘導(dǎo)的副作用，特別是減少的化療誘導(dǎo)的脫發(fā)。組合物為使得在所述組合物中實(shí)質(zhì)上不含游離的藥物。文檔編號A61K45/08GK101495148SQ200680039204公開日2009年7月29日申請日期2006年10月19日優(yōu)先權(quán)日2005年10月21日發(fā)明者塞爾伯吉特·辛格,曼格史·M·庫爾卡尼,阿賈·K·古普塔,阿馬爾吉特·辛格申請人:萬能藥生物有限公司