專利名稱：2-嘧啶基吡唑并吡啶ErbB激酶抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及嘧啶衍生物，包含該嘧啶衍生物的組合物和藥物，以及制備和使用這種化合物、組合物和藥物的方法。這種嘧啶衍生物可用于治療與不適當(dāng)?shù)腅rbB家族激酶活性相關(guān)的疾病。

背景技術(shù)：
酶的一個重要的大家族是蛋白激酶家族。目前，約有500種不同的已知蛋白激酶。蛋白激酶用于通過將ATP-Mg2+復(fù)合物的γ-磷酸轉(zhuǎn)移到各種蛋白質(zhì)的氨基酸側(cè)鏈上而催化所述氨基酸側(cè)鏈的磷酸化。這些酶控制細(xì)胞內(nèi)的大多數(shù)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，由此通過蛋白質(zhì)中絲氨酸、蘇氨酸、和酪氨酸殘基的羥基進(jìn)行可逆磷酸化而支配細(xì)胞功能、生長、分化和破壞(細(xì)胞程序死亡)。研究表明，蛋白激酶是許多細(xì)胞功能的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑，所述細(xì)胞功能包括信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、細(xì)胞運(yùn)動性、和細(xì)胞分裂。幾種致癌基因也已經(jīng)表現(xiàn)出編碼蛋白激酶，表明激酶在腫瘤發(fā)生中起作用。這些過程被高度地調(diào)節(jié)，經(jīng)常是通過其中每種激酶本身受一種或多種激酶調(diào)節(jié)的復(fù)雜的相互配合的途徑進(jìn)行。因此，異常的或不適當(dāng)?shù)牡鞍准っ富钚钥梢杂兄谂c這種異常的激酶活性相關(guān)的疾病狀態(tài)的發(fā)生。由于蛋白激酶的生理學(xué)相關(guān)性、多樣性和遍在性，蛋白激酶已經(jīng)成為生物化學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中最重要的和最廣泛研究的酶家族之一。
一類蛋白激酶是蛋白酪氨酸激酶(PTK)。異常的PTK活性已經(jīng)牽涉各種病癥，包括銀屑病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、支氣管炎、以及癌癥。開發(fā)用于這種病癥的有效治療是醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中持久不變和正在進(jìn)行的研究對象。PTK的ErbB家族(包括c-ErbB-2、EGFR、和ErbB-4)作為治療靶是有吸引力的一組PTK。目前，特別感興趣的是ErbB家族PTK在過度增殖疾病特別是在人類惡性腫瘤中的作用。升高的EGFR活性牽涉例如非小細(xì)胞肺癌、膀胱癌、和頭頸癌。此外，增強(qiáng)的c-ErbB-2活性已經(jīng)牽涉乳癌、卵巢癌、胃癌和胰腺癌。因此，ErbB家族PTK的抑制將為以異常的ErbB家族PTK活性為特征的病癥提供治療。ErbB家族PTK的生物學(xué)作用以及它們在各種疾病狀態(tài)中的牽涉在例如美國專利5,773,476；國際專利申請WO 99/35146；M.C.Hung等，Seminars in Oncology，264，Suppl.12(8月)1999，51-59；Ullrich等，Cell，61203-212，April 20，1990；Modjtahedi等，Int′l.J.of Oncology，13335-342，1998；J.R.Woodburn，Pharmacol.Ther.，822-3，241-250，1999；Normanno，N.、Bianco，C、Strizzi，L.、Mancino，M.、Maiello，M.R.、DeLuca，A.、Caponigro，F(xiàn).、Salomon，D.S.，Current Drug Targets，2005，6，243-257；Hynes，N.E.、Lane，H.A.，Nature Reviews Cancer，2005，5，341-345；和Ben-Baruch，N.、Yarden，Y.，Progress in Oncology，2004，46-72中討論。
本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了新的嘧啶化合物，其為ErbB家族激酶活性的抑制劑。認(rèn)為這種衍生物可用于治療與不適當(dāng)?shù)腅rbB家族激酶活性相關(guān)的病癥。


發(fā)明內(nèi)容
在本發(fā)明的第一方面中，提供式(I)的化合物
其中 a為0、1、2或3； 每個R1相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、Ay、Het、-OR6、-R4OR6、-OC(O)R6、-C(O)R6、-R4C(O)R6、-C(O)NR6R7、-R4C(O)NR6R7、-CO2R6、-C(S)R6、-C(S)NR6R7、-S(O)fR6、-R4S(O)fR6、-S(O)2NR6R7、-NR6R7、-R4NR6R7、-N(R6)-R4R7、-N(R6)-R4-OR7、-N(R6)-R4-S(O)fR7、-N(R6)-R4-CN、-C(NH)NR6R7、-N(R6)C(O)R6、-N(R6)S(O)2R6、-N(R6)-C(O)-NR6R7、-N(R6)-S(O)2-NR6R7、-CN、和-NO2； f為0、1或2； Ay為任選地被選自以下的取代基取代一次、兩次或三次的芳基鹵代、C1-3烷基、C1-3烷氧基、NH2、N(H)C1-3烷基、N(C1-3烷基)2、CN和NO2； Het為5-6元雜環(huán)或雜芳基，具有1或2個選自N、O和S的雜原子并且任選地被選自以下的取代基取代1、2或3次鹵代、C1-3烷基、C1-3烷氧基、羥基、氧代、C(O)(C1-3烷基)、SO3(H)、SO2(C1-3烷基)、C1-3烷基-SO3(H)、C1-3烷基-SO2(C1-3烷基)、NH2、N(H)C1-3烷基、N(C1-3烷基)2、CN和NO2； 環(huán)A選自芳基、雜環(huán)和雜芳基； R9為C1-4亞烷基、C2-4亞烯基或C3-4亞環(huán)烷基； Y1為-C(O)-、-N(H)C(O)-、-C(S)-或-N(H)C(S)-； b和c每個相同或不同并且各自獨(dú)立地為0、1或2； 每個R2相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、-OR6、-S(O)fR6、-NR6R7、-CN和-NO2； d為0、1或2； 每個R3相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、Ay、Het、-OR6、-R4OR6、-OAy、-R4OAy、-OC(O)R6、-COR6、-R4C(O)R6、-C(O)Ay、-C(O)NR6R7、-R4C(O)NR6R7、-C(O)N(H)Ay、-C(O)N(H)Het、-CO2R6、-CO2Ay、-C(S)R6、-C(S)NR6R7、-S(O)fR6、-R4S(O)fR6、-S(O)fAy、-S(O)2NR6R7、-NR6R7、-R4NR6R7、-N(R8)Ay、-R4N(H)Ay、-N(H)Het、-N(H)R4Het、-N(R6)-R4R7、-N(R6)-R4-OR7、-N(R6)-R4-S(O)fR7、-N(R6)-R4-CN、-C(NH)NR6R7、-N(H)C(O)R6、-N(H)C(O)Ay、-N(H)SO2R6、-N(R6)-C(O)-NR6R7、-N(R6)-S(O)2-NR6R7、-CN和-NO2； 每個R4相同或不同并且獨(dú)立地為C1-4亞烷基或C3-4亞烯基； e為0或1； 環(huán)B選自芳基和雜芳基； g為0、1、2、3或4； 每個Z相同或不同并且獨(dú)立地為式ii部分 (Alk)m-(Y2)n-(Alk)p-(R5)q 其中 m、n和p相同或不同并且各自獨(dú)立地為0或1； 每個Alk相同或不同并且獨(dú)立地選自C1-4亞烷基和C3-4亞烯基； Y2為-O-、-C(O)-、-S(O)f-、-N(H)-或-N(Alk)-； q為1或2； 每個R5相同或不同并且獨(dú)立地選自H、鹵代、烷基、烯基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、Ay、Het、氧代、-OR6、-OAy、-C(O)R6、-OC(O)R6、-C(O)Ay、-OC(O)Ay、-C(O)NR6R7、-CO2R6、-CO2Ay、-S(O)fR6、-S(O)fAy、-S(O)2NR6R7、-C(S)R6、-C(S)NR6R7、-C(S)N(H)Ay、-NR6R7、-N(R8)Ay、-N(R8)Het、-N(R6)-R4R7、-N(R6)-R4-OR7、-N(R6)-R4-S(O)fR7、-N(R6)-R4-CN、-NHC(O)R6、-N(H)S(O)2R6、-C(NH)NR6R7、-N(R6)-C(O)-NR6R7、-N(R6)-S(O)2-NR6R7、-N(R6)-C(O)-R4NR6R7、-N(R6)-S(O)2-R4NR6R7、-CN和-NO2； 每個R6和R7相同或不同并且各自獨(dú)立地選自H、烷基、烯基、炔基、C3-6環(huán)烷基和C3-6環(huán)烯基；和 每個R8相同或不同并且為H或烷基， 或其可藥用的鹽或溶劑合物。
本發(fā)明的第二方面中，提供藥物組合物，其包括式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物。在一個實(shí)施方案中，藥物組合物另外包括一種或多種可藥用的載體、稀釋劑和賦形劑。
在本發(fā)明的第三方面中，提供治療哺乳動物的病況的方法，所述病況是由至少一種ErbB家族激酶的不適當(dāng)活性所介導(dǎo)的，所述方法包括對所述哺乳動物給予治療有效量的式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物。
在本發(fā)明的第四方面中，提供治療哺乳動物的病況的方法，所述病況是由至少兩種ErbB家族激酶的不適當(dāng)活性所介導(dǎo)的，所述方法包括對所述哺乳動物給予治療有效量的式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物。
在第五方面中，本發(fā)明提供治療哺乳動物的易感瘤的方法，包括對所述哺乳動物給予治療有效量的式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物。
在本發(fā)明的第六方面中，提供制備式(I)的化合物的方法。該方法包括以下步驟 a)使式(VII)的化合物
與式(VIII)的化合物或式(IX)的化合物反應(yīng)
其中LG為離去基團(tuán)和W為O或S， 以制備式(I)的化合物； b)任選地將式(I)的化合物轉(zhuǎn)化為其可藥用的鹽或溶劑合物；和 c)任選地將式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物轉(zhuǎn)化為不同的式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物。
在本發(fā)明的第七方面中，提供了用于治療的式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物。
在本發(fā)明的第八方面中，提供了式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物制備藥物的用途，所述藥物用于治療由至少一種ErbB家族激酶的不適當(dāng)活性所介導(dǎo)的病況。
在本發(fā)明的第九方面中，提供了式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物制備藥物的用途，所述藥物用于治療由至少兩種ErbB家族激酶的不適當(dāng)活性所介導(dǎo)的病況。
在本發(fā)明的另一個方面中，提供了式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物制備藥物的用途，所述藥物用于治療易感瘤。
發(fā)明詳述 如本文中使用的，術(shù)語“ErbB家族激酶”是指包括EGFR(又名ErbB-1)、ErbB-2、和ErbB-4的那些ErbB激酶。
如本文中使用的，“本發(fā)明的化合物”或“式(I)的化合物”是指式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物。類似地、對于可分離的中間體諸如例如式(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(XVI)、(XVII)、(XVIII)和(XIX)的化合物、措辭“式(數(shù)字)的化合物”是指該式的化合物及其可藥用的鹽和溶劑合物。
如本文中使用的，術(shù)語“烷基”(和“亞烷基”)是指包含1到8個碳原子的直鏈或支鏈的烴鏈，除非明確說明不同的原子數(shù)。本文中使用的“烷基”的實(shí)例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、異丁基、異丙基、和叔丁基。本文中使用的“亞烷基”的實(shí)例包括但不限于亞甲基、亞乙基、亞丙基、亞丁基、和亞異丁基?！巴榛边€包括被取代的烷基。烷基(和亞烷基)基團(tuán)可以任選地被鹵素或羥基取代一次或多次。因此，術(shù)語“烷基”包括例如三氟甲基和三氟乙基，以及其它的鹵代的烷基，和羥基甲基和其它羥基化的烷基。
如本文中使用的，術(shù)語“烯基”(和“亞烯基”)是指包含2到8個碳原子和至少一個到最多三個碳-碳雙鍵的直鏈或支鏈的烴鏈，除非明確說明不同的原子數(shù)。本文中使用的“烯基”的實(shí)例包括但不限于乙烯基和丙烯基。本文中使用的“亞烯基”的實(shí)例包括但不限于亞乙烯基、亞丙烯基和亞丁烯基?！跋┗?和“亞烯基”)還包括被取代的烯基。烯基可以任選地被鹵素或羥基取代一次或多次。
如本文中使用的，術(shù)語“炔基”是指包含2到8個碳原子和至少一個到最多三個碳-碳三鍵的直鏈或支鏈的烴鏈，除非明確說明不同的原子數(shù)。本文中使用的“炔基”的實(shí)例包括但不限于乙炔基和丙炔基?！叭不边€包括被取代的炔基。炔基可以任選地被鹵素或羥基取代一次或多次。
如本文中使用的，術(shù)語“環(huán)烷基”是指具有3到8個碳原子的飽和單環(huán)碳環(huán)，除非明確說明不同的原子數(shù)?！碍h(huán)烷基”包括例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基和環(huán)辛基。“環(huán)烷基”還包括被取代的環(huán)烷基。環(huán)烷基可以任選地在任何可用的碳上被一個或多個取代基取代，所述取代基選自鹵代、C1-3烷基(包括鹵代烷基，例如，全氟烷基)、-OH和氧代。優(yōu)選的環(huán)烷基包括C3-6環(huán)烷基和被取代的C3-6環(huán)烷基。
如本文中使用的，術(shù)語“環(huán)烯基”是指具有3到8個碳原子和最多3個碳-碳雙鍵的非芳香族的單環(huán)碳環(huán)，除非明確說明不同的原子數(shù)?！碍h(huán)烯基”包括例如環(huán)丁烯基、環(huán)戊烯基和環(huán)己烯基。“環(huán)烯基”還包括被取代的環(huán)烯基。環(huán)烯基可以任選地在任何可用的碳上被一個或多個取代基取代，所述取代基選自鹵代、C1-3烷基(包括鹵代烷基，例如，全氟烷基)、-OH和氧代。
術(shù)語“鹵代”或“鹵素”是指氟代、氯代、溴代和碘代。
本文中使用的術(shù)語“氧代”是指直接連接于烴環(huán)(即，環(huán)烯基、芳基、雜環(huán)或雜芳基環(huán))的碳原子的基團(tuán)＝O，以及-N-氧化物、砜和亞砜(其中N或S是雜環(huán)或雜芳基環(huán)的原子)。
如本文中使用的，術(shù)語“烷氧基”是指基團(tuán)-O-烷基，其中烷基如上述定義的。本文中使用的“烷氧基”的實(shí)例包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、和叔丁氧基?！巴檠趸边€包括被取代的烷氧基。烷氧基可以任選地被鹵素取代一次或多次。
術(shù)語“芳基”是指芳族單環(huán)碳環(huán)基團(tuán)和具有6到10個碳原子的并且具有至少一個芳環(huán)的稠合雙環(huán)碳環(huán)基團(tuán)，除非明確說明不同的原子數(shù)。具體的芳基的實(shí)例包括但不限于苯基、茚基和萘基。本發(fā)明的一個特定的芳基為苯基。
術(shù)語“雜環(huán)”和“雜環(huán)的”是指單環(huán)的飽和或不飽和非芳族基團(tuán)和稠合雙環(huán)的飽和或不飽和的非芳族基團(tuán)，具有5到10個環(huán)成員(除非另作說明)，包括1、2、3或4個選自N、O和S的雜原子，除非明確說明不同的雜原子數(shù)。具體的雜環(huán)基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于四氫呋喃、二氫吡喃、四氫吡喃、吡喃、硫雜環(huán)丁烷、1，4-二氧雜環(huán)己烷、1，3-二氧雜環(huán)己烷、1，3-二氧雜環(huán)戊烷、哌啶、哌嗪、吡咯烷、嗎啉、硫代嗎啉、四氫噻唑、噁唑烷、四氫噻喃、四氫噻吩等。
術(shù)語“雜芳基”是指芳香族的單環(huán)基團(tuán)和其中至少一個環(huán)為芳香環(huán)的稠合雙環(huán)基團(tuán)，具有5到10個環(huán)成員(除非另作說明)，包括1、2、3、或4個選自N、O和S的雜原子，除非明確說明不同的雜原子數(shù)。“雜芳基”還包括被氧代取代的雜芳基，例如，N-氧化物、硫氧化物、和二氧化物。特定的雜芳基的實(shí)例包括但不限于呋喃、噻吩、吡咯、咪唑、吡唑、三唑、四唑、噻唑、噁唑、異噁唑、噁二唑、噻二唑、異噻唑、吡啶、噠嗪、吡嗪、嘧啶、四氫嘧啶、三嗪、喹啉、四氫喹啉、異喹啉、四氫異喹啉、苯并呋喃、苯并噻吩、吲哚、吲唑、苯并二噁烷、苯并二氧芑、苯并二噻烷、苯并哌啶、和苯并哌嗪(benzopiperzine)。
術(shù)語“成員”(及其變體例如，“元”)在雜環(huán)基團(tuán)和雜芳基的范圍中是指形成該環(huán)的總的原子，包括碳原子和雜原子N、O和/或S。因此，6元雜環(huán)的實(shí)例為哌啶，6元雜芳基環(huán)的實(shí)例為吡啶。
本發(fā)明提供式(I)的化合物
其中a為0、1、2或3； 每個R1相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、Ay、Het、-OR6、-R4OR6、-OC(O)R6、-C(O)R6、-R4C(O)R6、-C(O)NR6R7、-R4C(O)NR6R7、-CO2R6、-C(S)R6、-C(S)NR6R7、-S(O)fR6、-R4S(O)fR6、-S(O)2NR6R7、-NR6R7、-R4NR6R7、-N(R6)-R4R7、-N(R6)-R4-OR7、-N(R6)-R4-S(O)fR7、-N(R6)-R4-CN、-C(NH)NR6R7、-N(R6)C(O)R6、-N(R6)S(O)2R6、-N(R6)-C(O)-NR6R7、-N(R6)-S(O)2-NR6R7、-CN、和-NO2； f為0、1或2； Ay為任選地被選自以下的取代基取代一次、兩次或三次的芳基鹵代、C1-3烷基、C1-3烷氧基、NH2、N(H)C1-3烷基、N(C1-3烷基)2、CN和NO2； Het為5-6元雜環(huán)或雜芳基、具有1或2個選自N、O和S的雜原子并且任選地被選自以下的取代基取代1、2或3次鹵代、C1-3烷基、C1-3烷氧基、羥基、氧代、C(O)(C1-3烷基)、SO3(H)、SO2(C1-3烷基)、C1-3烷基-SO3(H)、C1-3烷基-SO2(C1-3烷基)、NH2、N(H)C1-3烷基、N(C1-3烷基)2、CN和NO2； 環(huán)A選自芳基、雜環(huán)和雜芳基； R9為C1-4亞烷基，C2-4亞烯基或C3-4亞環(huán)烷基； Y1為-C(O)-、-N(H)C(O)-、-C(S)-或-N(H)C(S)-； b和c每個相同或不同并且各自獨(dú)立地為0、1或2； 每個R2相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、-OR6、-S(O)fR6、-NR6R7、-CN和-NO2； d為0、1或2； 每個R3相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、Ay、Het、-OR6、-R4OR6、-OAy、-R4OAy、-OC(O)R6、-COR6、-R4C(O)R6、-C(O)Ay、-C(O)NR6R7、-R4C(O)NR6R7、-C(O)N(H)Ay、-C(O)N(H)Het、-CO2R6、-CO2Ay、-C(S)R6、-C(S)NR6R7、-S(O)fR6、-R4S(O)fR6、-S(O)fAy、-S(O)2NR6R7、-NR6R7、-R4NR6R7、-N(R8)Ay、-R4N(H)Ay、-N(H)Het、-N(H)R4Het、-N(R6)-R4R7、-N(R6)-R4-OR7、-N(R6)-R4-S(O)fR7、-N(R6)-R4-CN、-C(NH)NR6R7、-N(H)C(O)R6、-N(H)C(O)Ay、-N(H)SO2R6、-N(R6)-C(O)-NR6R7、-N(R6)-S(O)2-NR6R7、-CN和-NO2； 每個R4相同或不同并且獨(dú)立地為C1-4亞烷基或C3-4亞烯基； e為0或1； 環(huán)B選自芳基和雜芳基； g為0、1、2、3或4； 每個Z相同或不同并且獨(dú)立地為式ii部分 (Alk)m-(Y2)n-(Alk)p-(R5)q 其中 m、n和p相同或不同并且各自獨(dú)立地為0或1； 每個Alk相同或不同并且獨(dú)立地選自C1-4亞烷基和C3-4亞烯基； Y2為-O-、-C(O)-、-S(O)f-、-N(H)-或-N(Alk)-； q為1或2； 每個R5相同或不同并且獨(dú)立地選自H、鹵代、烷基、烯基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、Ay、Het、氧代、-OR6、-OAy、-C(O)R6、-OC(O)R6、-C(O)Ay、-OC(O)Ay、-C(O)NR6R7、-CO2R6、-CO2Ay、-S(O)fR6、-S(O)fAy、-S(O)2NR6R7、-C(S)R6、-C(S)NR6R7、-C(S)N(H)Ay、-NR6R7、-N(R8)Ay、-N(R8)Het、-N(R6)-R4R7、-N(R6)-R4-OR7、-N(R6)-R4-S(O)fR7、-N(R6)-R4-CN、-NHC(O)R6、-N(H)S(O)2R6、-C(NH)NR6R7、-N(R6)-C(O)-NR6R7、-N(R6)-S(O)2-NR6R7、-N(R6)-C(O)-R4NR6R7、-N(R6)-S(O)2-R4NR6R7、-CN和-NO2； 每個R6和R7相同或不同并且各自獨(dú)立地選自H、烷基、烯基、炔基、C3-6環(huán)烷基和C3-6環(huán)烯基；和 每個R8相同或不同并且為H或烷基，或其可藥用的鹽或溶劑合物。
在一個實(shí)施方案中，式(I)的化合物定義為其中a為1或2。在一個具體的實(shí)施方案中，a為0。在一個具體的實(shí)施方案中，a為2。
每個R1可以通過任何適當(dāng)?shù)奶蓟螂s原子結(jié)合于環(huán)A(得到例如N-甲基或N-氧化物)。在一個實(shí)施方案中，式(I)的化合物定義為其中每個R1相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、AV、Het、-OR6、-R4OR6、-OC(O)R6、-C(O)R6、-R4C(O)R6、-C(O)NR6R7、-CO2R6、C(S)R6、C(S)NR6R7、-S(O)fR6、-R4S(O)fR6、-S(O)2NR6R7、-NR6R7、-R4NR6R7、-N(R6)C(O)R6、-N(R6)S(O)2R6、-N(R6)-C(O)-NR6R7、-N(R6)-S(O)2-NR6R7、-CN和-NO2、或其任何子集。在一個具體的實(shí)施方案中，式(I)的化合物定義為其中每個R1相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、-OR6、-R4OR6、-OC(O)R6、-C(O)R6、-R4C(O)R6、-C(O)NR6R7、-S(O)fR6、-R4S(O)fR6、-NR6R7、-R4NR6R7、-N(R6)C(O)R6、-N(R6)S(O)2R6、-CN和-NO2或其任何子集。在一個具體的實(shí)施方案中，式(I)的化合物定義為其中每個R1相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、烯基、炔基、-OR6、-C(O)NR6R7、-S(O)fR6、-S(O)2NR6R7、-NR6R7、-N(H)C(O)R6、-N(H)S(O)2R6、-CN和-NO2、或其任何子集。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，每個R1相同或不同并且獨(dú)立地選自F、C1、烷基和-OR6或其任何子集。
定義R1的基團(tuán)的具體實(shí)例包括但不限于F、C1、Br、CH3、CF3、CH2CH3、CH(CH3)2、OCH3、OCF3、OCH2CH3、NH2、N(H)烷基(例如，N(H)CH3)、N(H)C(O)烷基(例如，N(H)C(O)CH3)、CN和NO2。在一個具體的實(shí)施方案中，每個R1相同或不同并且獨(dú)立地選自F、Cl、CH3、CF3、OCH3、和OCF3。
式(I)中的

在本文中稱為“環(huán)A”。環(huán)A選自芳基、雜環(huán)和雜芳基。
環(huán)A可通過任何適當(dāng)?shù)奶蓟螂s原子結(jié)合于R4。在一個實(shí)施方案中，環(huán)A為芳基。在另一個實(shí)施方案中，環(huán)A為雜環(huán)或雜芳基。在一個實(shí)施方案中，式(I)的化合物定義為其中環(huán)A為芳基或雜芳基。在一個具體的實(shí)施方案中，環(huán)A為苯基。在另一個具體的實(shí)施方案中，環(huán)A為5-6元雜芳基，具有1或2個選自N、O和S的雜原子。
定義環(huán)A的基團(tuán)的具體實(shí)例包括但不限于呋喃、四氫呋喃、噻吩、吡咯、吡咯啉、吡咯烷、噁唑、異噁唑、噻唑、異噻唑、咪唑、咪唑烷、吡唑、吡唑啉、吡唑烷、三唑、苯基、吡喃、四氫吡喃、吡啶、哌啶、isoxane、嗎啉、硫代嗎啉、噠嗪、嘧啶、吡嗪、哌嗪、萘基、二氫萘(dihydro-naphthyline)、茚、二氫茚、苯并呋喃、苯并噻吩、吲哚、異吲哚、二氫吲哚、吲唑、苯并咪唑、喹啉、四氫喹啉、異喹啉、四氫異喹啉、喹唑啉、喹喔啉、苯并哌啶、苯并哌嗪、苯并三唑、苯并吡喃、苯并二氫吡喃、異苯并二氫吡喃、苯并二噁烷、和苯并二氧雜環(huán)戊烷、或其任何子集。在一個實(shí)施方案中，環(huán)A選自苯基、呋喃、吡咯、吡唑、噻吩、異噁唑、吡啶、苯并呋喃和苯并二噁烷、或其任何子集。在一個具體的實(shí)施方案中，環(huán)A為苯基。
在一個實(shí)施方案中，R9為C1-4亞烷基。在一個實(shí)施方案中，R9為C1-3亞烷基。在一個具體的實(shí)施方案中，R9選自亞甲基、亞乙基和亞異丙基。在一個具體的實(shí)施方案中，R9為亞甲基。
在一個實(shí)施方案中，Y1為-C(O)-或N(H)C(O)。在一個具體的實(shí)施方案中，Y1為-C(O)-。
在一個實(shí)施方案中，式(I)的化合物定義為其中b為0或1。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，b為0。
在一個實(shí)施方案中，式(I)的化合物定義為其中c為0或1。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，c為0。
在其中b和/或c為1或2的某些實(shí)施方案中，每個R2相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、-OR6、-NR6R7和-CN。在一個具體的實(shí)施方案中，每個R2相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、-OR6和-CN。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)b為1或2時，每個R2相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代和烷基；更優(yōu)選鹵代，特別是F或Cl。
在一個實(shí)施方案中，式(I)的化合物定義為其中d為0或1。在一個具體的實(shí)施方案中，d為1。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，d為0。
在其中d為1或2的本發(fā)明的具體實(shí)施方案中，每個R3相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、Ay、Het、-OR6、-R4OR6、-OC(O)R6、-COR6、-R4C(O)R6、-C(O)NR6R7、-S(O)fR6、-R4S(O)fR6、-S(O)2NR6R7、-NR6R7、-R4NR6R7、-N(R8)Ay、-R4N(H)Ay、-N(H)Het、-N(R6)-R4-OR7、-N(R6)-R4-S(O)fR7、-N(R6)-R4-CN、-N(H)C(O)R6、-N(H)SO2R6、-N(R6)-C(O)-NR6R7、-N(R6)-S(O)2-NR6R7、-CN和-NO2。在一個具體的實(shí)施方案中，式(I)的化合物定義為其中每個R3相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、環(huán)烷基、Ay、Het、-OR6、-COR6、-C(O)NR6R7、-S(O)fR6、-S(O)2NR6R7、-NR6R7、-R4NR6R7、-N(R8)Ay、-N(H)Het、-N(H)C(O)R6、-N(H)SO2R6、-CN和-NO2。在其中d為1或2的一個實(shí)施方案中，式(I)的化合物定義為其中每個R3相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、環(huán)烷基、-OR6、-COR6、-C(O)NR6R7、-S(O)fR6、-S(O)2NR6R7、-NR6R7和-CN。
在一個實(shí)施方案中，其它變量的定義中的R4為C1-4亞烷基。在一個具體的實(shí)施方案中，R4為C1-3亞烷基。在一個具體的實(shí)施方案中，R4為亞甲基。
在一個實(shí)施方案中，式(I)的化合物定義為其中e為0。在其中e為1的一個實(shí)施方案中，基團(tuán)(R4)e為C1-4亞烷基。在一個具體的實(shí)施方案中，基團(tuán)(R4)e為C1-3亞烷基。在一個實(shí)施方案中，基團(tuán)(R4)e為亞甲基。在另一個實(shí)施方案中，基團(tuán)(R4)e為-CH(CH3)-。在另一個實(shí)施方案中，基團(tuán)(R4)e為亞丙基或亞異丙基。
式(I)中的

在本文中稱為“環(huán)B”。環(huán)B可通過任何適當(dāng)?shù)奶蓟螂s原子結(jié)合于R4或-N(H)-(其中e為0)。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，環(huán)B為芳基。在另一個實(shí)施方案中，環(huán)B為雜芳基。在一個具體的實(shí)施方案中，環(huán)B為苯基。在另一個具體的實(shí)施方案中，環(huán)B為5-10元雜芳基，具有1、2或3個選自N、O和S的雜原子。
定義環(huán)B的特定基團(tuán)包括但不限于呋喃、四氫呋喃、噻吩、吡咯、吡咯琳、吡咯烷、噁唑、異噁唑、噻唑、異噻唑、咪唑、咪唑烷、吡唑、吡唑啉、吡唑烷、三唑、苯基、吡喃、四氫吡喃、吡啶、哌啶、iosxane、嗎啉、硫代嗎啉、噠嗪、嘧啶、吡嗪、哌嗪、萘基、二氫萘、茚、二氫茚、苯并呋喃、苯并噻吩、吲哚、異吲哚(insoindole)、二氫吲哚、吲唑、苯并咪唑、喹啉、異喹啉、四氫異喹啉、喹唑啉、喹喔啉、苯并哌啶、苯并哌嗪、苯并三唑、苯并吡喃、苯并二氫吡喃、異苯并二氫吡喃、苯并二噁烷、和苯并二氧雜環(huán)戊烷、或其任何子集。在一個實(shí)施方案中，環(huán)B選自苯基、呋喃、吡咯、吡唑、噻吩、異噁唑、吡啶、苯并呋喃、苯并二噁烷和四氫異喹啉、或其任何子集。
表示環(huán)B上的可能的取代基Z的數(shù)目的變量g的定義應(yīng)該理解為符合環(huán)B的大小并且由環(huán)B的大小決定。取代基Z可以通過任何可用的碳或雜原子結(jié)合于環(huán)B。
類似地，部分Z應(yīng)該理解為在考慮到環(huán)B的定義的情況下限定，以便避免普通有機(jī)化學(xué)工作者認(rèn)為是明顯不能實(shí)施的實(shí)施方案。例如，在其中環(huán)B為雜環(huán)或雜芳基的那些實(shí)施方案中，g不是0，并且Z結(jié)合于環(huán)B的雜原子；則Z定義為通過適合于結(jié)合于環(huán)B的雜原子的任一個碳或雜原子結(jié)合于環(huán)B的部分。因此，當(dāng)環(huán)B為含氮雜芳基并且Z結(jié)合于環(huán)B的N時，則Z定義為能夠結(jié)合于環(huán)B的N的部分；因此，在這種實(shí)施方案中，Z不能是例如鹵代。能夠與環(huán)B的N結(jié)合的Z部分的實(shí)例包括但不限于H、烷基(例如，N-甲基)和氧代(例如，N-氧化物)。用于與環(huán)B的雜原子結(jié)合的Z的其它適當(dāng)?shù)亩x對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的。
在一個實(shí)施方案中，式(I)的化合物定義為其中g(shù)為0、1、2或3。在一個具體的實(shí)施方案中，g為0、1或2。在一個優(yōu)選實(shí)施方案中，g為1。在另一個優(yōu)選實(shí)施方案中，g為2。
在其中g(shù)為1、2、3或4的實(shí)施方案中，每個Z相同或不同并且獨(dú)立地為式ii部分 (Alk)m-(Y2)n-(Alk)p-(R5)q(ii) 其中 m、n和p相同或不同并且各自獨(dú)立地為0或1(意思是上述式(ii)中的變量Alk、Y2和Alk分別為存在或不存在)； 每個Alk相同或不同并且獨(dú)立地選自C1-4亞烷基和C3-4亞烯基； Y2為-O-、-C(O)-、-S(O)f-、-N(H)-或-N(Alk)-； q為1或2；和 每個R5相同或不同并且獨(dú)立地選自H、鹵代、烷基、烯基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、Ay、Het、氧代、-OR6、-OAy、-C(O)R6、-OC(O)R6、-C(O)Ay、-OC(O)Ay、-C(O)NR6R7、-CO2R6、-CO2Ay、-S(O)fR6、-S(O)fAy、-S(O)2NR6R7、-C(S)R6、-C(S)NR6R7、-C(S)N(H)Ay、-NR6R7、-N(R8)Ay、-N(R8)Het、-N(R6)-R4R7、-N(R6)-R4-OR7、-N(R6)-R4-S(O)fR7、-N(R6)-R4-CN、-NHC(O)R6、-N(H)S(O)2R6、-C(NH)NR6R7、-N(R6)-C(O)-NR6R7、-N(R6)-S(O)2-NR6R7、-N(R6)-C(O)-R4NR6R7、-N(R6)-S(O)2-R4NR6R7、-CN和-NO2。
在一個實(shí)施方案中，式(I)的化合物定義為其中g(shù)為1、2、3或4和m為0。在另一個實(shí)施方案中，其中m為1，基團(tuán)(Alk)m優(yōu)選為C1-3亞烷基。
在一個實(shí)施方案中，式(I)的化合物定義為其中g(shù)為1、2、3或4和n為0。在一個實(shí)施方案中，其中n為1，Y2為-O-、-C(O)-或-N(H)-。在一個具體的實(shí)施方案中，g為1、2、3或4，n為1和Y2為-O-或-C(O)-。在一個具體的實(shí)施方案中，Y2為-C(O)-。在另一個具體的實(shí)施方案中，Y2為-O-。
在一個實(shí)施方案中，式(I)的化合物定義為其中g(shù)為1、2、3或4和p為0。在另一個實(shí)施方案中，其中p為1，基團(tuán)(Alk)p優(yōu)選為C1-3亞烷基。
在一個實(shí)施方案中，式(I)的化合物定義為其中g(shù)為1、2、3或4并且q為1。
在其中g(shù)為1、2、3或4并且q為1的一個具體的實(shí)施方案中，每個R5相同或不同并且獨(dú)立地選自H、鹵代、烷基、烯基、環(huán)烷基、Ay、Het、氧代、-OR6、-OAy、-C(O)R6、-OC(O)R6、-C(O)Ay、-C(O)NR6R7、-CO2R6、-S(O)fR6、-S(O)2NR6R7、-C(S)NR6R7、-NR6R7、-N(R8)Ay、-N(R8)Het、-N(R6)-R4R7、-N(R6)-R4-OR7、-N(R6)-R4-S(O)fR7、-N(R6)-R4-CN、-NHC(O)R6、-N(H)S(O)2R6、-C(NH)NR6R7、-N(R6)-C(O)-NR6R7、-N(R6)-S(O)2-NR6R7、-N(R6)-C(O)-R4NR6R7、-CN和-NO2。在一個具體的實(shí)施方案中，每個R5相同或不同并且獨(dú)立地選自H、鹵代、烷基、環(huán)烷基、Ay、Het、-OR6、-C(O)R6、-OC(O)R6、-C(O)NR6R7、-S(O)fR6、-S(O)2NR6R7、-C(S)NR6R7、-NR6R7、-N(R8)Ay、-N(R8)Het、-N(R6)-R4-OR7、-N(R6)-R4-S(O)fR7、-N(R6)-R4-CN、-NHC(O)R6、-N(H)S(O)2R6、和-CN。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，每個R5相同或不同并且獨(dú)立地選自H、鹵代、烷基、環(huán)烷基、Ay、Het、-OR6、-C(O)R6、-C(O)NR6R7、-S(O)fR6、-S(O)2NR6R7、-NR6R7、-N(R6)-R4-CN、和-CN。
每個單獨(dú)的變量n、Y2、p、q和R5應(yīng)該理解為在考慮到構(gòu)成部分Z的其它變量的定義的情況下定義，以便避免有機(jī)化學(xué)工作者認(rèn)為明顯不能實(shí)施的實(shí)施方案。例如，在其中n為1和p為0，使得Z為部分(ii-a)的那些實(shí)施方案中， (Alk)m-(Y2)-(R5)q(ii-a) (其中所有的變量如上述定義)變量R5應(yīng)該在考慮到Y(jié)2的情況下定義，使得有機(jī)化學(xué)工作者認(rèn)為明顯不能實(shí)施的實(shí)施方案得到避免。例如，如果Y2為O和p為0，則R5不是鹵代或產(chǎn)生過氧化物的基團(tuán)、等等。因此，在一個實(shí)施方案中，其中n為1和p為0；則q為1并且R5為通過適合于與Y2結(jié)合的任一碳或雜原子結(jié)合的基團(tuán)。
在一個具體的實(shí)施方案中，如果Z定義為如下述部分 1)n為1，Y2為-O-和p為0；則q為1和R5不是鹵代、氧代、腈、硝基或通過O或S結(jié)合的基團(tuán)； 2)n為1，Y2為-C(O)-和p為0；則q為1和R5不是鹵代、氧代、腈、硝基、或通過-CO2-或-C(S)-結(jié)合的基團(tuán)； 3)n為1，Y2為-N(H)-或-N(Alk)-和p為0；則q為1和R5不是鹵代、氧代、腈、或硝基；或 4)n為1，Y2為-S(O)f-和p為0；則q為1和R5不是鹵代、氧代、腈、硝基或通過S結(jié)合的基團(tuán)。
在一個具體的實(shí)施方案中，如果Z定義為如下述部分，其中 1)n為1，Y2為-O-和p為0；則q為1和R5不是鹵代、通過雜原子結(jié)合的Het、氧代、-OR6、-OAy、-OC(O)R6、-OC(O)Ay、-NR6R7、-N(R8)Ay、-N(R8)Het、-N(R6)-R4R7、-N(R6)-R4-OR7、-N(R6)-R4-S(O)fR7、-N(R6)-R4-CN、-NHC(O)R6、-N(H)S(O)2R6、-C(NH)NR6R7、-N(R6)-C(O)-NR6R7、-N(R6)-S(O)2-NR6R7、-N(R6)-C(O)-R4NR6R7、-N(R6)-S(O)2-R4NR6R7、-CN或-NO2； 2)n為1，Y2為-C(O)-和p為0；則q為1和R5不是鹵代、氧代、-C(O)NR6R7、-CO2R6、-CO2Ay、-S(O)fR6、-S(O)fAy、-S(O)2NR6R7、-C(S)R6、-C(S)NR6R7、-C(S)N(H)Ay、-CN或-NO2； 3)n為1，Y2為-N(H)-或-N(Alk)-和p為0；則q為1和R5不是鹵代、-OC(O)R6、-OC(O)Ay、-N(R6)-C(O)-NR6R7、-N(R6)-S(O)2-NR6R7、-N(R6)-C(O)-R4NR6R7、-N(R6)-S(O)2-R4NR6R7、-CN或-NO2；或 4)n為1，Y2為-S(O)f-和p為0；則q為1和R5不是鹵代、氧代、-OR6、-OAy、-OC(O)R6、-OC(O)Ay、-S(O)fR6、-S(O)fAy、-S(O)2NR6R7、-C(S)R6、-C(S)NR6R7、-C(S)N(H)Ay、-CN或-NO2。
定義Z的基團(tuán)的具體實(shí)例包括但不限于 H(例如，g為0) 鹵代(例如，F(xiàn)或Cl) 烷基(例如，CH3、CF3) Het(例如，具有1或2個選自N、O和S的雜原子的5-6元雜環(huán)或雜芳基及其被取代的變體) OR6(例如，OH、OCH3) CN C(O)R6(例如，C(O)CH3和C(O)CF3) C(O)Ay(例如，C(O)苯基及其被取代的變體) C(O)NR6R7(例如，C(O)NH2) C(O)Het(例如，C(O)嗎啉及其被取代的變體) C(O)-Alk-Ay(例如，C(O)-CH2-苯基及其被取代的變體) SO2R6(例如，SO2CH3、SO2CH2CH3、SO2CH2CH2OH) SO2NR6R7(例如，SO2NH2、SO2N(H)CH3和SO2N(H)環(huán)丙基) Alk-NR6R7(例如，-(CH2)3-N(CH3)2) N(H)C(O)R6(例如，NHC(O)CH3) N(H)-Alk-NR6R7(例如，NH-(CH2)3-N(CH3)2) N(H)C(O)-Alk-NR6R7(例如，N(H)C(O)-CH2-NH2) N(H)-Alk-Het(例如，NH-(CH2)3-哌嗪-N-CH3) Alk-SO2R6(例如，CH2-SO2CH3、CH2-SO2CH2CH3、CH2CH3-SO2CH3和CH2CH3-SO2CH2CH3) Alk-SO2NR6R7(例如，CH2CH3-SO2NH2) Alk-Het(例如，烷基-嗎啉、烷基-哌啶、烷基-吡咯烷、及其被取代的變體) O-Alk-OR6(例如，O-CH2-OCH3、O-CH2CH3-OCH3) O-Alk-NR6R7(例如，O-(CH2)2-NH2、O-(CH2)2-N(H)CH3、O-(CH2)2-N(CH3)2、O-(CH2)2-N(CH2CH3)2、O-(CH2)3-NH2、O-(CH2)3-N(H)CH3、O-(CH2)3-N(CH3)2、O-(CH2)3-N(CH2CH3)2、O-CH2CH(CH3)-NH2、O-CH2CH(CH3)-N(H)CH3、O-CH2CH(CH2)-N(CH3)2、O-CH2CH(CH3)-N(CH2CH3)2) O-Alk-Het(例如，O-(CH2)2-嗎啉、O-CH2-吡咯烷、O-(CH2)2-吡咯烷、O-CH2-哌啶、O-(CH2)2-哌啶及其被取代的變體)。
應(yīng)該理解，本發(fā)明包括本文中上述定義的特定基團(tuán)的所有組合和子集。
本發(fā)明的化合物的特定實(shí)例包括在隨后的實(shí)施例中描述的那些及其可藥用的鹽和溶劑合物。本發(fā)明的具體化合物包括 N-[3-(3-{2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺； N-[3-(3-{2-[(3-{[2-(1-吡咯烷基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺； N-{5-[3-(2-{[2-(二甲基氨基)-2，3-二氫-1H-茚-5-基]氨基}嘧啶-4-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-甲氧基苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺； N-[2-甲氧基-5-(3-{2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-7-基)氨基]嘧啶-4-基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺； N-{3-[3-(2-{[3-(4-甲基-1，3-噁唑-5-基)苯基]氨基}嘧啶-4-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺； N-{3-[3-(2-{[2-(二甲基氨基)-2，3-二氫-1H-茚-5-基]氨基}嘧啶-4-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺； N-{2-甲基-5-[3-(2-{[3-(1-吡咯烷基甲基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺； N-[5-(3-{2-[(5-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-甲基苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺； N-[5-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-甲基苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺； N-[2-甲基-5-(3-{2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺； N-[5-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-氟苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺； N-{2-氟-5-[3-(2-{[3-(1-吡咯烷基甲基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺； N-[5-(3-{2-[(5-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-氟苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺； N-[2-氟-5-(3-{2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺； N-[5-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-(甲基氧基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺； N-[5-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-(甲基氧基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺； N-[5-(3-{2-[(5-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-(甲基氧基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺； N-{3-[6-甲基-3-(2-{[3-(1-吡咯烷基甲基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺； N-[3-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}-6-甲基吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺；和 N-{3-[3-(2-{[4-(4-乙?；?1-哌嗪基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)-6-甲基吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺， 及其可藥用的鹽和溶劑合物。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，本發(fā)明的化合物還可以以其可藥用的鹽或溶劑合物的形式使用。式(I)的化合物的可藥用鹽包括由可藥用的(即，無毒的)無機(jī)酸或有機(jī)酸或無機(jī)堿或有機(jī)堿形成的常規(guī)的鹽以及季銨鹽。代表性的鹽包括以下乙酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、碳酸氫鹽、硫酸氫鹽、酒石酸氫鹽、硼酸鹽、溴化物、乙二胺四乙酸鈣鹽、樟腦磺酸鹽、碳酸鹽、氯化物、克拉維酸鹽、檸檬酸鹽、二鹽酸鹽、乙二胺四乙酸鹽、乙二磺酸鹽、依托酸鹽、乙磺酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、谷氨酸鹽、乙醇?；鶎Π被缴樗猁}、己基間苯二酚鹽、哈胺、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、羥基萘甲酸鹽、碘化物、羥乙磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、甲基溴化物、甲基硝酸鹽、甲基硫酸鹽、馬來酸單鉀鹽、粘酸鹽、萘磺酸鹽、硝酸鹽、N-甲基葡糖胺、草酸鹽、雙羥萘酸鹽(樸酸鹽)、棕櫚酸鹽、泛酸鹽、磷酸鹽/二磷酸鹽、聚半乳糖醛酸鹽、鉀、水楊酸鹽、鈉、硬脂酸鹽、堿式乙酸鹽、琥珀酸鹽、丹寧酸鹽、酒石酸鹽、茶氯酸鹽、甲苯磺酸鹽、三乙基碘、三甲基銨和戊酸鹽。本身不是可藥用的其它的鹽例如草酸鹽，可用于制備作為在得到本發(fā)明化合物中的中間體的鹽，并且這些形成本發(fā)明的另一個方面。
本文中使用的術(shù)語“溶劑合物”是指由溶質(zhì)(式(I)的化合物)和溶劑形成的可變化學(xué)計(jì)量的復(fù)合物。用于本發(fā)明目的這種溶劑不能妨礙溶質(zhì)的生物活性。適當(dāng)?shù)娜軇┑膶?shí)例包括但不限于水、甲醇、乙醇和乙酸。優(yōu)選地，使用的溶劑為可藥用的溶劑。適當(dāng)?shù)目伤幱萌軇┑膶?shí)例包括但不限于水、乙醇和乙酸。最優(yōu)選使用的溶劑為水。
制備化合物例如式(I)的化合物的可藥用的鹽和溶劑合物的方法在本領(lǐng)域中是常規(guī)的。參見，例如，Burger′s Medicinal Chemistry And DrugDiscovery 5th Edition，Vol 1Principles And Practice。
如本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的，在如下所述制備式(I)的化合物的方法中，某些中間體可為該化合物的可藥用的鹽或溶劑合物的形式。應(yīng)用于在制備式(I)的化合物的方法使用的任何中間體的那些術(shù)語具有與上述對于式(I)的化合物所述相同的含義。制備中間體的可藥用的鹽和溶劑合物的方法為本領(lǐng)域公知的，并且與制備化合物例如式(I)的化合物的可藥用的鹽和溶劑合物的方法相似。
某些式(I)的化合物可以作為立體異構(gòu)形式存在(例如它們可以包含一個或多個不對稱碳原子或可以表現(xiàn)出順-反式異構(gòu)現(xiàn)象)。各個立體異構(gòu)體(對映體和非對映體)及其混合物被包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明還涵蓋了式(I)所示化合物的各個異構(gòu)體，以及與它的在其中一個或多個手性中心反轉(zhuǎn)的異構(gòu)體的混合物。某些式(I)的化合物可以作為區(qū)域異構(gòu)體的混合物制備得到。本發(fā)明涵蓋了區(qū)域異構(gòu)體的混合物以及各個化合物。同樣地，應(yīng)該理解，式(I)的化合物可以作為與式中所示不同的互變異構(gòu)形式存在，并且這些也被包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。
式(I)的化合物及其鹽和溶劑合物被認(rèn)為具有抗癌和抗腫瘤活性。這一作用目前被認(rèn)為是由于對一種或多種ErbB家族蛋白激酶的抑制以及這種抑制對生長依賴于ErbB家族蛋白激酶活性的細(xì)胞系的影響引起的。在文獻(xiàn)中充分記載了一種或多種ErbB家族蛋白激酶的抑制被認(rèn)為引起治療學(xué)的抗腫瘤和抗癌作用。參見，例如，Normanno，N.、Bianco，C，Strizzi，L.、Mancino，M.、Maiello，M.R.、DeLuca，A.、Caponigro，F(xiàn).、Salomon，D.S.，Current Drug Targets，2005，6，243-257；Hynes，N.E.、Lane，H.A.，Nature Reviews Cancer，2005，5，341-345；和Ben-Baruch，N.、Yarden，Y.，Progress in Oncology，2004，46-72。
本發(fā)明的化合物典型地為一種或多種ErbB家族激酶(EGFR、ErbB-2、和/或ErbB-4)的抑制劑。本發(fā)明不限于對于ErbB家族激酶抑制具有選擇性的那些式(I)的化合物；更合適地，本發(fā)明還特別地考慮了可針對不同于ErbB家族激酶的那些激酶具有活性的式(I)的化合物?！癊rbB抑制劑”是指如下的化合物，其在如下所述的ErbB抑制酶測定法中針對至少一種ErbB家族激酶表現(xiàn)出大于約6的pIC50和/或在如下所述的亞甲基藍(lán)細(xì)胞測定法中針對過度表達(dá)至少一種ErbB家族激酶的至少一種細(xì)胞系(例如，BT474或HN5)表現(xiàn)出IC50最小為約5μM的效能。在更具體的實(shí)施方案中，“ErbB抑制劑”是指如下的化合物，其在如下所述的ErbB抑制酶測定法中針對至少一種ErbB家族激酶表現(xiàn)出大于約6.5的pIC50和/或在如下所述的亞甲基藍(lán)細(xì)胞測定法中針對過度表達(dá)至少一種ErbB家族激酶的至少一種細(xì)胞系(例如，BT474或HN5)表現(xiàn)出IC50最小為1μM的效能。
本發(fā)明另外提供式(I)的化合物用于哺乳動物例如人類的醫(yī)學(xué)治療。特別地，本發(fā)明提供式(I)的化合物，用于治療哺乳動物的由至少一種ErbB家族激酶介導(dǎo)的病況，更特別地，用于治療哺乳動物的由一種或多種ErbB家族激酶的不適當(dāng)活性介導(dǎo)的病況。在一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式(I)的化合物，用于治療由至少兩種ErbB家族激酶介導(dǎo)的病況，更特別地，用于治療哺乳動物的由兩種或多種ErbB家族激酶的不適當(dāng)活性介導(dǎo)的病況。
本文中所述的不適當(dāng)?shù)腅rbB家族激酶活性為與在特定的哺乳動物受試者中期望的正常ErbB家族激酶活性不同的任何ErbB激酶活性。不適當(dāng)?shù)幕钚钥梢杂蒃GFR(ErbB-1)、ErbB-2、和ErbB-4中的一種或多種產(chǎn)生。不適當(dāng)?shù)腅rbB家族激酶活性可以為如下形式例如活性的異常增加、或ErbB家族激酶活性的時序(timing)和/或控制的偏差。然后，這種不適當(dāng)?shù)幕钚钥梢杂衫绲鞍准っ富蚺潴w的超量表達(dá)或突變引起不適當(dāng)?shù)幕虿皇芸刂频氖荏w激活而引起。此外，還應(yīng)該理解，不希望的ErbB家族激酶活性可歸于異常來源，例如惡性腫瘤。也就是說，ErbB家族活性的水平不必須是認(rèn)為不適當(dāng)?shù)漠惓?，而是來自異常來源的活性?br> 本發(fā)明還提供式(I)的化合物用于治療易感瘤。
本文中使用的“易感瘤”是指對用ErbB抑制劑的治療敏感的贅生物。已經(jīng)涉及一種或多種ErbB家族激酶的不適當(dāng)活性并且因此對用ErbB抑制劑的治療敏感的贅生物為本領(lǐng)域已知的，并且包括原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性腫瘤和癌癥。參見，Normanno，N.、Bianco，C、Strizzi，L.Mancino，M.、Maiello，M.R.、DeLuca，A.、Caponigro，F(xiàn).、Salomon，D.S.CurrentDrug Targets，2005，6，243-257；Hynes，N.E.、Lane，H.A.Nature ReviewsCancer，2005，5，341-345；和Ben-Baruch，N.、Yarden，Y.Progress inOncology，2004，46-72。例如，本發(fā)明范圍內(nèi)的易感瘤包括但不限于乳癌、結(jié)腸癌、非小細(xì)胞肺癌、前列腺癌、膀胱癌、卵巢癌、胃癌、胰腺癌、頭頸癌、食道癌、黑素瘤、和腎癌。
本發(fā)明提供治療有需要的哺乳動物的幾種病況的方法，所有方法都包括給予治療有效量的式(I)的化合物的步驟。需要用本發(fā)明的化合物治療的哺乳動物典型地為人類。
如本文中使用的，術(shù)語“治療”是指指定病況的減輕、病況癥狀的消除或減少、病況進(jìn)展的延緩或消除和在以前患病的受試者中病況復(fù)發(fā)的防止或延遲。
如本文中使用的，術(shù)語“治療有效量”是指式(I)的化合物的量，在將其給予受試者時足以引起例如研究人員或臨床醫(yī)師所尋求的細(xì)胞培養(yǎng)物、組織、系統(tǒng)、哺乳動物(包括人類)的生物學(xué)或醫(yī)學(xué)響應(yīng)。該術(shù)語還包括其有效增強(qiáng)正常生理機(jī)能的用量范圍(scope amount)。例如，用于治療由至少一種ErbB家族激酶的不適當(dāng)活性介導(dǎo)的病況的式(I)的化合物的治療有效量為足以治療受試者病況的量。類似地，用于治療易感瘤的式(I)的化合物的治療有效量為足以治療受試者的易感瘤的量。在本發(fā)明的一個實(shí)施方案中，式(I)的化合物的治療有效量為足以調(diào)節(jié)、調(diào)整、結(jié)合或抑制至少一種ErbB家族激酶的量。
本發(fā)明提供治療哺乳動物(例如，人類)的由至少一種ErbB家族激酶介導(dǎo)的病況的方法，該方法包括對哺乳動物給予治療有效量的式(I)的化合物。至少一種ErbB家族激酶介導(dǎo)的病況為本領(lǐng)域已知的，并且包括但不限于贅生物。
本發(fā)明另外的方面提供治療患有由一種或多種ErbB家族激酶的不適當(dāng)活性介導(dǎo)的病況的哺乳動物的方法，包括對該哺乳動物給予治療有效量的式(I)的化合物。在一個實(shí)施方案中，由一種或多種ErbB家族激酶的不適當(dāng)活性介導(dǎo)的病況為易感瘤。
本發(fā)明還提供治療有需要的哺乳動物(例如，人類)的易感瘤(癌癥或腫瘤)的方法，該方法包括對哺乳動物給予治療有效量的式(I)的化合物。
在一個具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療有需要的哺乳動物的乳癌的方法，包括對該哺乳動物給予治療有效量的式(I)的化合物。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療有需要的哺乳動物的結(jié)腸癌的方法，包括對該哺乳動物給予治療有效量的式(I)的化合物。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療有需要的哺乳動物的非小細(xì)胞肺癌的方法，包括對該哺乳動物給予治療有效量的式(I)的化合物。
式(I)的化合物的精確的治療有效量根據(jù)許多因素而定，所述因素包括但不限于被治療受試者的年齡和體重、需要治療的確切病況及其嚴(yán)重性、制劑的性質(zhì)、和給藥途徑，并且最終由醫(yī)生或獸醫(yī)判斷。典型地，式(I)的化合物以每天0.1到200mg/kg接受者(哺乳動物)體重的范圍給予，更通常以每天1到100mg/kg體重的范圍給予，用于治療?？山邮艿娜談┝靠蔀榧s0.1到約2000mg/天，并且優(yōu)選為約0.1到約100mg/天。因此，對于需要治療由至少一種ErbB家族激酶介導(dǎo)的病況的70kg成年人，每天的實(shí)際量通常為70到700mg，并且這個量可以以每天單一的劑量給予或更通常以每天多個(例如2、3、4、5、或6個)亞劑量給予，使得總的日劑量相同。鹽或溶劑合物的治療有效量可以確定為式(I)的化合物本身的治療有效量的某一比例?？紤]到相似的劑量將適合于治療上述的其它病況。
式(I)的化合物可單獨(dú)用于前述病況每一種的治療或可用于與某些已有的化療提供相加的或協(xié)同的作用，和/或用于增加某些已有的化療和放療的有效性。
在一個方面中，本發(fā)明提供通過給予治療有效量的式(I)的化合物調(diào)節(jié)、調(diào)整、結(jié)合或抑制至少一種ErbB家族激酶的方法，用于治療由至少一種ErbB家族激酶介導(dǎo)的病況?！罢{(diào)節(jié)、調(diào)整、結(jié)合或抑制至少一種ErbB家族激酶”是指調(diào)節(jié)、調(diào)整、結(jié)合或抑制至少一種ErbB家族激酶(例如，c-ErbB-2、EGFR、和ErbB-4)的活性，以及調(diào)節(jié)、調(diào)整、結(jié)合或抑制至少一種ErbB家族激酶的超量表達(dá)。這種病況包括與至少一種ErbB家族激酶超量表達(dá)有關(guān)的某些贅生物(包括癌癥和腫瘤)。
本發(fā)明還提供式(I)的化合物制備藥物的用途，所述藥物用于治療有需要的哺乳動物(例如，人類)的由至少一種ErbB家族激酶介導(dǎo)的病況。本發(fā)明另外提供(I)的化合物用于制備藥物的用途，所述藥物用于治療哺乳動物的易感瘤。本發(fā)明另外提供(I)的化合物用于制備藥物的用途，所述藥物用于治療哺乳動物的乳癌。本發(fā)明另外提供(I)的化合物用于制備藥物的用途，所述藥物用于治療哺乳動物的結(jié)腸癌。本發(fā)明另外提供(I)的化合物用于制備藥物的用途，所述藥物用于治療哺乳動物的非小細(xì)胞肺癌。
盡管有可能將治療有效量的式(I)的化合物作為未加工的化學(xué)品給藥用于治療，但是其典型地作為藥物組合物或制劑的活性成分存在。因此，本發(fā)明另外提供包括式(I)化合物的藥物組合物。藥物組合物可另外包括一種或多種可藥用的載體、稀釋劑和/或賦形劑。所述載體、稀釋劑和/或賦形劑在與制劑的其它組分充分相容并且對其接受者無害的意義上必須是可接受的。根據(jù)本發(fā)明的另一個方面，提供了制備藥物制劑的方法，包括將式(I)的化合物與一種或多種可藥用的載體、稀釋劑和/或賦形劑混合。
藥物制劑可作為每單位劑量包含預(yù)定量的活性成分的單位劑量形式存在。這種單位可以包含例如0.5mg到1g、優(yōu)選1mg到700mg、更優(yōu)選5mg到100mg的式(I)的化合物，根據(jù)被治療的病況、給藥途徑和患者的年齡、體重和病況而定，或者藥物制劑可作為每單位劑量包含預(yù)定量的活性成分的單位劑量形式存在。優(yōu)選的單位劑量制劑為包含本文中上述的日劑量或亞劑量、或其適當(dāng)?shù)姆謩┝?fraction)的活性成分的那些。此外，這種藥物制劑可通過藥劑學(xué)領(lǐng)域公知的任何方法制備。
藥物制劑可適合于通過任何適當(dāng)?shù)耐緩浇o藥，例如通過經(jīng)口(包括經(jīng)頰或舌下)、直腸、鼻、局部(包括經(jīng)頰、舌下或透皮)、陰道或非腸道(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)或皮內(nèi))途徑。這種制劑可通過藥劑學(xué)領(lǐng)域已知的任何方法制備，例如通過使活性成分與載體或賦形劑達(dá)到結(jié)合而制備。
適合于經(jīng)口給藥的藥物制劑可作為離散的單位存在，例如膠囊或片劑；粉劑或顆粒劑；在水或非水液體中的溶液劑或懸浮劑；食用的泡沫劑或起泡體(whips)；或水包油液體乳劑或油包水液體乳劑。
例如，對于片劑或膠囊形式的經(jīng)口給藥，可以將活性藥物組分與口服的無毒性可藥用的惰性載體例如乙醇、甘油、水等組合。如下制備粉劑通過將化合物粉碎為適當(dāng)?shù)募?xì)粒徑并且與經(jīng)過類似粉碎的藥物載體例如可食用的碳水化合物諸如例如淀粉或甘露醇混合。還可以存在有調(diào)味劑、防腐劑、分散劑和著色劑。
膠囊的制備是通過如上所述制備粉末混合物并且填充形成的明膠外殼進(jìn)行。在填充操作之前可以向粉末混合物中加入助流劑和潤滑劑，例如膠態(tài)氧化硅、滑石、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或固體聚乙二醇。還可以加入崩解劑或增溶劑例如瓊脂、碳酸鈣或碳酸鈉以改善膠囊被攝取時藥物的可利用性。
此外，在期望或需要時，也可以將適當(dāng)?shù)恼澈蟿?、潤滑劑、崩解劑、和著色劑并入混合物中。適當(dāng)?shù)恼澈蟿┌ǖ矸?、明膠、天然糖例如葡萄糖或β-乳糖、玉米甜味劑、天然和合成的樹膠例如阿拉伯膠、黃蓍膠或海藻酸鈉、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟等。用于這些劑型的潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等。崩解劑包括但不限于淀粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、黃原膠等。片劑如下制備，例如，制備粉末混合物、造粒或壓制成塊(slugging)、加入潤滑劑和崩解劑并且壓成片劑。粉末混合物如下制備，將適當(dāng)粉碎的化合物與如上所述的稀釋劑或基質(zhì)混合，并且任選地與粘合劑如羧甲基纖維素、海藻酸鹽、明膠、或聚乙烯基吡咯烷酮；溶液緩凝劑(solutionretardant)，例如石蠟；吸收促進(jìn)劑(resorption accelerator)，例如季鹽；和/或吸收劑(absorption agent)，例如膨潤土、白陶土、或磷酸氫鈣混合。粉末混合物可以通過用粘合劑例如糖漿、淀粉糊、阿拉伯膠漿或纖維素材料或聚合物材料的溶液潤濕并且強(qiáng)制過篩進(jìn)行造粒。作為造粒的替代方案，粉末混合物可以通過壓片機(jī)并且得到不完整成形的壓制塊，其破裂為顆粒。顆?？梢酝ㄟ^加入硬脂酸、硬脂酸鹽、滑石或礦物油被潤滑，以防止粘著制片用機(jī)頭。然后將經(jīng)過潤滑的混合物壓制為片劑。本發(fā)明的化合物還可以與自由流動的惰性載體合并并且直接壓制為片劑而不經(jīng)歷造?；驂褐瞥蓧K步驟。可以提供包括蟲膠密封包衣的透明或不透明的保護(hù)性包衣、糖或聚合物材料的包衣和蠟的拋光包衣?？梢韵蜻@些包衣加入染料，以使不同的單位劑量區(qū)別開來?？诜昧黧w例如溶液劑、糖漿劑和酏劑可以制備為劑量單位形式，以便給出的量包含預(yù)定量的化合物?？梢酝ㄟ^將化合物溶解在經(jīng)過適當(dāng)調(diào)味的水溶液中制備糖漿劑，而通過使用無毒的醇媒介物制備酏劑?？梢酝ㄟ^將化合物分散在無毒的媒介物中配制懸浮劑。還可以加入增溶劑和乳化劑例如乙氧基化異硬脂醇和聚氧乙烯山梨醇醚、防腐劑、調(diào)味添加劑例如胡椒薄荷油或天然的甜味劑或糖精或其他人工甜味劑等。
在適當(dāng)時，用于經(jīng)口給藥的劑量單位制劑可為微囊化的。制劑還可以制備為延長釋放或持續(xù)釋放，例如通過將顆粒物質(zhì)包衣或包埋在聚合物、蠟等中。
式(I)的化合物還可以以脂質(zhì)體遞送系統(tǒng)的形式給予，例如小單層脂質(zhì)體、大單層脂質(zhì)體和多層脂質(zhì)體。脂質(zhì)體可從各種磷脂類例如膽固醇、硬脂胺或卵磷脂形成。
式(I)的化合物還可以通過使用單克隆抗體作為化合物分子與其連接的單獨(dú)的載體遞送?；衔镞€可以與作為可靶向藥物載體的可溶性聚合物偶聯(lián)。這種聚合物可以包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羥基丙基(甲基丙烯酰胺)-苯酚、聚羥基乙基天冬酰胺-苯酚、或被棕櫚?；〈木垩趸蚁┚圪嚢彼帷４送?，化合物可與可用于實(shí)現(xiàn)藥物的受控釋放的一類可生物降解的聚合物偶聯(lián)，所述聚合物為，例如，聚乳酸、聚ε己內(nèi)酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二氫吡喃、聚氰基丙烯酸酯和交聯(lián)的或兩親性的水凝膠嵌段共聚物。
適合于透皮給藥的藥物制劑可作為預(yù)定保持與接受者的表皮接觸一段時間的離散的貼片劑存在。例如，活性成分可以通過如在Pharmaceutical Research，3(6)，318(1986)中概述的離子電滲療法從貼片劑遞送。
適合于局部給藥的藥物制劑可配制為膏劑、霜劑、懸浮液劑、洗劑、粉劑、溶液劑、糊劑、凝膠劑、噴霧劑、氣霧劑或油劑。
對于眼睛或其它外部組織例如口和皮膚的治療，制劑優(yōu)選作為局部用膏劑或霜劑被施用。在配制膏劑時，可以將活性成分與石蠟軟膏基質(zhì)或水可混溶的軟膏基質(zhì)使用?；蛘撸钚猿煞挚梢允褂盟托退獎┗|(zhì)或油包水型基質(zhì)被配制為霜劑。
適合于對眼睛局部給藥的藥物制劑還包括滴眼劑，其中將活性成分溶解于或懸浮于適當(dāng)?shù)妮d體中，特別是含水溶劑。
適合于口中局部給藥的藥物制劑包括錠劑、軟錠劑、和漱口劑。
適合于直腸給藥的藥物制劑可作為栓劑或作為灌腸劑存在。
其中載體為固體的適合于鼻給藥的藥物制劑包括粒徑為例如20到500微米的粗粉末，其以其中使用鼻吸(snuff)的方式給藥，即，通過鼻部通道從保持靠近鼻子的粉末容器迅速吸入。用于作為鼻噴霧劑或作為滴鼻劑給藥的其中載體為液體的適當(dāng)?shù)闹苿┌ɑ钚猿煞值乃曰蛴托匀芤骸?br> 適合于吸入給藥的藥物制劑包括細(xì)顆粒的粉劑或霧劑(mist)，其可以通過各種類型的計(jì)量式的劑量加壓噴霧器、霧化器或吹入器產(chǎn)生。
適合于陰道給藥的藥物制劑可作為陰道栓劑、棉塞、霜劑、凝膠劑、糊劑、泡沫劑或噴霧制劑存在。適合于非腸道給藥的藥物制劑包括含水和非水的無菌注射溶液，其可以包含抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和使制劑與預(yù)定接受者的血液等滲的溶質(zhì)；和含水和非水的無菌懸浮液，其可以包括助懸劑和增稠劑。制劑可存在于單位劑量或多次劑量容器中，例如密封的安瓿和小瓶，并且可儲存在冷凍干燥(凍干)條件下，只需在即將使用之前加入無菌的液體載體例如注射用水。當(dāng)場制備的注射溶液和懸浮液可以從無菌的粉末、顆粒和片劑制備。
應(yīng)該理解，除了上面具體提及的成分之外，在考慮到所討論的制劑類型的情況下，制劑可以包括本領(lǐng)域常規(guī)的其它試劑，例如適合于口服給藥的那些制劑可以包括調(diào)味劑。
在上述的治療和使用方法中，式(I)的化合物可單獨(dú)使用、與一種或多種其它式(I)的化合物組合、或與其它治療劑組合使用。特別地，在治療由至少一種ErbB家族激酶介導(dǎo)的病況的方法和治療易感瘤的方法中，考慮了與其它化療、激素和/或抗體藥物的組合，以及與外科手術(shù)治療和放療的組合。本文中使用的術(shù)語“化療”是指對其所給予的受試者具有治療學(xué)作用的任何化學(xué)藥物?！盎煛彼幬锇ǖ幌抻诳鼓[瘤劑、鎮(zhèn)痛藥和止吐劑。止吐劑包括但不限于5HT3拮抗劑例如昂丹司瓊、格拉司瓊等；甲氧氯普胺(metaclopromide)；地塞米松和神經(jīng)激肽-1拮抗劑。如本文中使用的，“抗腫瘤劑”包括細(xì)胞生長抑制劑和胞毒劑。因此，本發(fā)明的組合治療包括給予至少一種式(I)的化合物和使用至少一種其它治療方法。在一個實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合治療包括給予至少一種式(I)的化合物和至少一種其它化療劑。在一個具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明包括給予至少一種式(I)的化合物和至少一種抗腫瘤劑。在另外的方面中，本發(fā)明提供如上所述的治療和使用的方法，其包括給予式(I)的化合物以及至少一種化療劑。在一個具體的實(shí)施方案中，化療劑為抗腫瘤劑。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供如上所述的藥物組合物，另外包括至少一種其它化療劑，更具體地，化療劑為抗腫瘤劑。
式(I)的化合物和至少一種另外的癌癥治療可以在與這種其它抗癌治療的任何治療適當(dāng)?shù)慕M合中伴隨地或順序地組合使用。在一個實(shí)施方案中，其它抗癌治療為至少一種另外的化療治療，包括給藥至少一種抗腫瘤劑。在另一個實(shí)施方案中，其它抗癌治療為至少一種另外的化療治療，包括給藥至少一種止吐劑。式(I)的化合物與其它抗腫瘤劑的組合給予可通過本發(fā)明的組合以(1)包括兩種化合物的單元藥物組合物或(2)各自包括一種化合物的單獨(dú)的藥物組合物的形式伴隨給藥。該組合可以以順序的方式分別給藥，其中首先給予一種抗腫瘤劑，然后給予另一種，或反之亦然。這種順序給藥可以在時間上接近或遠(yuǎn)離。
在式(I)的化合物與化療劑組合使用時，每種化合物的劑量可以不同于該化合物單獨(dú)使用時的劑量。適當(dāng)?shù)膭┝靠捎杀绢I(lǐng)域技術(shù)人員容易地理解。選擇式(I)的化合物和其它治療活性劑的適當(dāng)劑量和給藥的相對時間以便實(shí)現(xiàn)期望的組合治療效果，并且其在場的臨床醫(yī)師的知識和判斷范圍內(nèi)。
可與本發(fā)明的化合物組合使用的許多化療劑之一為抗腫瘤劑。抗腫瘤劑可以以細(xì)胞周期特異性的方式誘導(dǎo)抗腫瘤作用，即，是時期特異性的并且在細(xì)胞周期的特定時相起作用；或者結(jié)合DNA和以非細(xì)胞周期特異性的方式起作用，即，非細(xì)胞周期特異性的并且通過其它機(jī)制起作用。兩種類型的抗腫瘤劑都可以與本發(fā)明的化合物組合使用。
典型地，可以使用針對所治療的易感瘤有活性的任何化療劑與式(I)的化合物組合，條件是特定的藥物與使用式(I)的化合物的治療臨床上相容?？捎糜诒景l(fā)明的典型的抗腫瘤劑包括但不限于抗微管劑，例如二萜類和長春花生物堿；鉑配位復(fù)合物；烷化劑，例如氮芥類、氧氮磷雜環(huán)己烯(oxazaphosphorin)類、烷基磺酸酯類、亞硝基脲和三嗪類；抗生素類，例如蒽環(huán)類、放線菌素和博來霉素；拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑，例如表鬼臼毒素；抗代謝物，例如嘌呤和嘧啶類似物和抗葉酸化合物；拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑，例如喜樹堿；激素和激素類似物；信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑；非受體酪氨酸激酶血管生成抑制劑；免疫治療劑；促凋亡劑；和細(xì)胞周期信號抑制劑。
抗微管劑或抗有絲分裂劑為針對細(xì)胞周期的M期或有絲分裂期過程中腫瘤細(xì)胞的微管有活性的時期特異性藥物?？刮⒐軇┑膶?shí)例包括但不限于二萜類和長春花生物堿。二萜類的實(shí)例包括但不限于紫杉醇及其類似物多西他賽。長春花生物堿的實(shí)例包括但不限于長春堿、長春新堿、和長春瑞濱。
鉑配位復(fù)合物為非時相特異性抗腫瘤劑，其與DNA相互作用。鉑復(fù)合物進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，經(jīng)歷、水合離子形式并且與DNA形成鏈內(nèi)和鏈間交聯(lián)產(chǎn)生對腫瘤不利的生物效果。鉑配位復(fù)合物的實(shí)例包括但不限于順鉑和卡鉑。
烷化劑是非時相特異性抗腫瘤劑并且是強(qiáng)親電子劑。典型地，烷化劑通過烷基化經(jīng)由DNA分子的親核部分例如磷酸根、氨基、和羥基與DNA形成共價連接。這種烷基化破壞核酸功能，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。烷化劑的實(shí)例包括但不限于氮芥類，例如環(huán)磷酰胺、美法侖、和苯丁酸氮芥；磺酸烷基酯類，例如白消安；亞硝基脲，例如卡莫司??；和三嗪類，例如達(dá)卡巴嗪。
抗生素類化療劑為非時相特異性藥物，其與DNA結(jié)合或插入DNA。典型地，這種作用產(chǎn)生穩(wěn)定的DNA復(fù)合物或斷鏈，其破壞核酸的正常功能，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。抗生素抗腫瘤劑的實(shí)例包括但不限于放線菌素，例如放線菌素D；蒽環(huán)類，例如柔紅霉素和多柔比星；和博來霉素。
拓?fù)洚悩?gòu)酶Il抑制劑包括但不限于表鬼臼毒素。
表鬼臼毒素為衍生自曼德拉植物的時相特異性抗腫瘤劑。表鬼臼毒素典型地影響處于細(xì)胞周期的S和G2相的細(xì)胞，通過與拓?fù)洚悩?gòu)酶II和DNA形成三元復(fù)合物，引起DNA斷鏈。斷鏈累積，隨后細(xì)胞死亡。表鬼臼毒素的實(shí)例包括但不限于依托泊苷和替尼泊苷。
抗代謝物抗腫瘤劑為時相特異性抗腫瘤劑，其在細(xì)胞周期的S相(DNA合成)通過抑制DNA合成或抑制嘌呤或嘧啶堿基合成并且從而限制DNA合成起作用。因此，S相沒有進(jìn)行，隨后細(xì)胞死亡?？勾x物抗腫瘤劑的實(shí)例包括但不限于氟脲嘧啶、甲氨蝶呤、阿糖胞苷、巰基嘌呤和硫鳥嘌呤。
包括喜樹堿和喜樹堿衍生物的喜樹堿類作為拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑是可獲得的或處于開發(fā)階段。喜樹堿類的細(xì)胞毒活性被認(rèn)為與其拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制活性有關(guān)。喜樹堿類的實(shí)例包括但不限于伊立替康、拓?fù)涮婵?、以?-(4-甲基哌嗪基-亞甲基)-10，11-亞乙二氧基-20-喜樹堿的各種光學(xué)形式。
激素和激素類似物是用于治療其中激素與癌生長和/或不生長之間有關(guān)系的癌癥有用化合物。被認(rèn)為可用于治療贅生物的激素和激素類似物的實(shí)例包括但不限于腎上腺皮質(zhì)激素類，例如潑尼松和潑尼松龍，可用于治療惡性淋巴瘤和兒童急性白血病；氨魯米特和其它芳香酶抑制劑例如阿那曲唑、來曲唑(letrazole)、伏氯唑(vorazole)、和依西美坦，可用于治療腎上腺皮質(zhì)癌和激素依賴性乳癌，包含雌激素受體；孕激素類(progestrins)，例如乙酸甲地孕酮，可用于治療激素依賴性乳癌和子宮內(nèi)膜癌；雌激素、雄激素、和抗雄激素類，例如氟他胺、尼魯米特、比卡魯胺、乙酸環(huán)丙孕酮和5α-還原酶例如非那雄胺和度他雄胺，可用于治療前列腺癌和良性前列腺增生；抗雌激素類，例如他莫昔芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬、和iodoxyfene，可用于治療激素依賴性乳癌；和促性腺激素釋放激素(GnRH)及其類似物，其刺激促黃體生成激素(LH)和/或促卵泡激素(FSH)的釋放，用于治療前列腺癌，例如LHRH激動劑和拮抗劑例如乙酸戈舍瑞林和luprolide。
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑是阻斷或抑制引起胞內(nèi)改變的化學(xué)過程的那些抑制劑。如本文中使用的，這種改變是細(xì)胞增殖或分化或存活?？捎糜诒景l(fā)明的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑包括受體酪氨酸激酶、非受體酪氨酸激酶、SH2/SH3結(jié)構(gòu)域阻斷劑、絲氨酸/蘇氨酸激酶、磷脂酰肌醇-3激酶、內(nèi)消旋肌醇信號、和Ras致癌基因的抑制劑。
幾種蛋白酪氨酸激酶催化牽涉調(diào)節(jié)細(xì)胞生長的各種蛋白質(zhì)中的特定酪氨酰殘基的磷酸化。這種蛋白酪氨酸激酶可以大致地被分類為受體或非受體激酶。
調(diào)節(jié)細(xì)胞生長中所牽涉的并且有時稱為生長因子受體的其它受體酪氨酸激酶也可以與本發(fā)明的化合物組合。除了表皮生長因子受體(EGFr、ErbB2和ErbB4)之外，可與式(I)的化合物組合的其他生長因子受體抑制劑包括例如血小板衍生生長因子受體(PDGFr)、血管內(nèi)皮生長因子受體(VEGFR)、具有免疫球蛋白樣和表皮生長因子同源性結(jié)構(gòu)域的酪氨酸激酶(TIE-2)、胰島素生長因子受體-1(IGFR-1)、巨噬細(xì)胞菌落刺激因子(cfms)、BTK、ckit、cmet、成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)受體、Trk受體(TrkA、TrkB、和TrkC)、ephrin(eph)受體、和RET原癌基因和Akt激酶的抑制劑。幾種生長因子受體抑制劑處于開發(fā)中，包括配體拮抗劑、抗體、酪氨酸激酶抑制劑、反義寡核苷酸和適體。抑制生長因子受體功能的生長因子受體和藥物描述在例如Kath，John C.，Exp.Opin.Ther.Patents(2000)10(6)803-818；Shawver等人DDT VoI 2，No.2February1997；和Lofts，F(xiàn).J.等人，″Growth Factor Receptors as Targets″，NewMolecular Targets for Cancer Chemotherapy，Workman，Paul和Kerr，David編輯，CRC Press 1994，London中。在一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療上述列舉的各種病況的方法，包括將式(I)的化合物與不同的ErbB抑制劑組合給予。在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，該方法包括將式(I)的化合物與拉帕替尼組合給予。
酪氨酸激酶不是生長因子受體激酶，被稱為非受體酪氨酸激酶?？捎糜诒景l(fā)明的非受體酪氨酸激酶(為抗腫瘤藥物的靶或潛在靶)包括cSrc、Lck、Fyn、Yes、Jak、cAbl、FAK(粘著斑激酶)、Brutons酪氨酸激酶和Bcr-Abl。這種非受體激酶和抑制非受體酪氨酸激酶功能的藥物描述在Sinn，S.和Corey，S.J.，(1999)Journal of Hematotherapy and StemCell Research 8(5)465-80；和Bolen，J.B.，Brugge，J.S.，(1997)AnnualReview of Immunology.15371-404中。SH2/SH3結(jié)構(gòu)域阻斷劑為破壞各種酶或銜接蛋白(包括PI3-K p85亞單位、Src家族激酶、銜接分子(Shc、Crk、Nck、Grb2)和Ras-GAP)中SH2或SH3結(jié)構(gòu)域結(jié)合的藥劑。作為抗癌藥物靶的SH2/SH3結(jié)構(gòu)域在Smithgall，T.E.(1995)，Journal ofPharmacological and Toxicological Methods.34(3)125-32中討論。
絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑，包括Polo-樣激酶(“PLK”，例如，PLK1、PLK2和PLK3)，其在調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的過程中起關(guān)鍵作用，包括進(jìn)入和離開有絲分裂；MAP激酶級聯(lián)阻斷劑，包括Raf激酶(Rafk)、有絲分裂原或胞外調(diào)節(jié)激酶(MEKs)、和胞外調(diào)節(jié)激酶(ERKs)的阻斷劑；和蛋白激酶C家族成員阻斷劑，包括PKCs(α、β、γ、ε、μ、λ、η、ζ)、IkB激酶家族(IKKa、IKKb)、PKB家族激酶、Akt激酶家族成員、和TGFβ受體激酶的亞類的阻斷劑也可以用于與本發(fā)明的化合物組合。這種絲氨酸/蘇氨酸激酶及其抑制劑描述在GlaxoSmithKline的PCT公開WO04/014899；Yamamoto，T.、Taya，S.、Kaibuchi，K.，(1999)，Journalof Biochemistry.126(5)799-803；Brodt，P、Samani，A.、和Navab，R.(2000)，Biochemical Pharmacology，60.1101-1107；Massague，J.、Weis-Garcia，F(xiàn).(1996)Cancer Surveys.2741-64；Philip，P.A.、和Harris，A.L.(1995)，Cancer Treatment and Research.783-27；Lackey，K.等人，Bioorganicand Medicinal Chemistry Letters，(10)，2000，223-226；和Martinez-lacaci，L.等人，Int.J.Cancer(2000)，88(1)，44-52中。在一個實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法包括將式(I)的化合物與PLK抑制劑，更優(yōu)選與PCT公開WO04/014899中描述的化合物組合給予。
磷脂酰肌醇-3激酶家族成員的抑制劑，包括PI3-激酶、ATM、DNA-PK、和Ku的阻斷劑，也可以用于與本發(fā)明組合。這種激酶在Abraham，R.T.(1996)，Current Opinion in Immunology.8(3)412-8；Canman，C.E.，Lim，D.S.(1998)，Oncogene 17(25)3301-3308；Jackson，S.P.(1997)，International Journal of Biochemistry and Cell Biology.29(7)935-8；和Zhong，H.等人，Cancer Res，(2000)60(6)，1541-1545中討論。
還可以用于與本發(fā)明組合的是內(nèi)消旋肌醇信號抑制劑，例如磷脂酶C阻斷劑和肌醇類似物。這種信號抑制劑描述在Powis，G.，和Kozikowski A.，(1994)New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy，Paul Workman和David Kerr編輯，CRC Press 1994，London中。
可用于與本發(fā)明組合的另一組信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑是Ras致癌基因的抑制劑。這種抑制劑包括法呢基轉(zhuǎn)移酶、香葉基-香葉基轉(zhuǎn)移酶和CAAX蛋白酶類的抑制劑，以及反義寡核苷酸、核酶和免疫治療。這種抑制劑已經(jīng)表現(xiàn)出在包含野生型突變Ras的細(xì)胞中阻斷Ras激活，由此起到抗增殖劑的作用。Ras致癌基因抑制在Scharovsky，O.G.，Rozados，V.R.，Gervasoni，S.I.Matar，P.(2000)，Journal of Biomedical Science.7(4)292-8；Ashby，M.N.(1998)，Current Opinion in Lipidology.9(2)99-102；和BioChim.Biophys.Acta，(1989)1423(3)19-30中討論。
如上所述，受體激酶配體結(jié)合的抗體有可能起到信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑的作用。這一組信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑包括對受體酪氨酸激酶的胞外配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域使用人源化抗體。例如，lmclone C225 EGFR特異性抗體(參見Green，M.C.等人，Monoclonal Antibody Therapy for Solid Tumors，Cancer Treat.Rev.，(2000)，26(4)，269-286)；赫賽汀(

)ErbB2抗體(參見Tyrosine Kinase Signaling in Breast CancerErbB FamilyReceptor Tyrosine Kinases，Breast Cancer Res.，2000，2(3)，176-183)；和2CB VEGFR2特異性抗體(參見Brekken，R.A.等人，SelectiveInhibition of VEGFR2 Activity by a Monoclonal Anti-VEGF AntibodyBlocks Tumor Growth in Mice，Cancer Res.(2000)60，5117-5124)。
受體激酶血管生成抑制劑也可以用于本發(fā)明。血管生成相關(guān)的VEGFR和TIE2的抑制劑在上述關(guān)于信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑中討論(兩種受體都是受體酪氨酸激酶)。其它抑制劑可與本發(fā)明的化合物組合使用。例如，抗-VEGF抗體，其不識別VEGFR(受體酪氨酸激酶)，但是結(jié)合于該配體；整聯(lián)蛋白的小分子抑制劑(αvβ3)抑制血管生成；內(nèi)皮生長抑素和血管生長抑素(非-RTK)也可證明可用于與PLK抑制劑組合。
用于免疫療法的藥物也可與式(I)的化合物組合使用。
用于促凋亡療法的藥物(例如，bcl-2反義寡核苷酸)也可用于本發(fā)明的組合。蛋白質(zhì)的Bcl-2家族成員阻斷細(xì)胞程序死亡。因此，bcl-2的向上調(diào)節(jié)涉及耐化學(xué)品性。研究已經(jīng)表明表皮生長因子(EGF)刺激bcl-2家族的抗凋亡成員(即，mcl-1)。因此，設(shè)計(jì)用于向下調(diào)節(jié)腫瘤中bcl-2表達(dá)的策略已經(jīng)顯示臨床益處，并且現(xiàn)在處于II/III期臨床試驗(yàn)，即Genta的G3139bcl-2反義寡核苷酸。這種使用bcl-2反義寡核苷酸策略的促凋亡策略在Water JS等人，J.Clin.Oncol.181812-1823(2000)；和Kitada S等人，Antisense Res.Dev.471-79(1994)中討論。
細(xì)胞周期信號抑制劑抑制牽涉控制細(xì)胞周期的分子。細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDKs)和它們的相互作用細(xì)胞周期蛋白控制整個真核細(xì)胞周期進(jìn)展。不同的細(xì)胞周期蛋白/CDK復(fù)合物的配位激活和失活是整個細(xì)胞周期正常進(jìn)展所需要的。幾種細(xì)胞周期信號抑制劑處于開發(fā)階段。例如，細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(包括CDK2、CDK4、和CDK6)及其抑制劑的實(shí)例描述在例如Rosania等人，Exp.Opin.Ther Patents10(2)215-230(2000)中。
在一個實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法包括對哺乳動物給予式(I)的化合物與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑，特別是與埃羅替尼(

)的組合。
式(I)的化合物可使用如下所述的方法制備。在所有如下所述的方案中，應(yīng)該理解，根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的一般原理，在必要時可使用保護(hù)基，例如，參見T.W.Green和P.G.M.Wuts(1991)Protecting Groupsin Organic Synthesis，John Wiley&Sons。這些基團(tuán)可以在化合物合成的適宜階段使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法除去。所述方法以及反應(yīng)條件和它們的進(jìn)行順序的選擇應(yīng)該與式(I)化合物的制備相符。
式(I)的化合物可以方便地通過以下方案1所示的方法制備。
方案1
其中 X-為陰離子(優(yōu)選為鹵)； LG為適當(dāng)?shù)碾x去基團(tuán)； W為O或S；和 所有其它變量如上述定義。
通常，制備式(I)的化合物(所有的結(jié)構(gòu)式和所有的變量如上述定義)的方法包括以下步驟 a)使式(VII)的化合物與式(VIII)的化合物或式(IX)的化合物反應(yīng)以制備式(I)的化合物； b)任選地將式(I)的化合物轉(zhuǎn)化為其可藥用的鹽或溶劑合物；和 c)任選地將式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物轉(zhuǎn)化為不同的式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物。
更具體地，制備式(I)的化合物的方法包括以下步驟 a)使式(II)的化合物與三氟乙酸衍生物反應(yīng)以制備式(III)的化合物； b)使式(HI)的化合物與式(XIII)的化合物反應(yīng)以制備式(IV)的化合物； c)使式(IV)的化合物與式(XII)的1-氨基吡啶鎓化合物反應(yīng)以制備式(V)的化合物； d)使式(V)的化合物與式(XI)的化合物反應(yīng)以制備式(VI)的化合物； e)使式(VI)的化合物與堿反應(yīng)以制備式(VII)的化合物； f)使式(VII)的化合物與式(VIII)的化合物或式(IX)的化合物反應(yīng)以制備式(I)的化合物； g)任選地將式(I)的化合物轉(zhuǎn)化為其可藥用的鹽或溶劑合物；和 h)任選地將式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物轉(zhuǎn)化為不同的式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物。
如本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的，前述步驟的順序?qū)τ诒景l(fā)明的方法來說不是決定性的，并且該方法可以以任何適當(dāng)?shù)牟襟E次序進(jìn)行。
其中Y1為-C(O)-的式(I)的化合物(即，式(I-A)的化合物)通過使式(VII)的化合物與式(VIII)的化合物反應(yīng)制備。

其中所有變量如上述定義。
式(VIII)的化合物中的適當(dāng)?shù)碾x去基團(tuán)對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，包括例如鹵和羥基基團(tuán)。典型地，反應(yīng)在適當(dāng)?shù)娜軇├缍燃淄?DCM)或四氫呋喃中進(jìn)行。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，在LG為羥基時，反應(yīng)可以在適當(dāng)?shù)呐悸?lián)劑例如二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)或乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)的存在下進(jìn)行。式(VIII)的化合物為市售的，或者可以使用本領(lǐng)域的常規(guī)技術(shù)合成。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，可以使用常規(guī)方法將式(I-A)的化合物轉(zhuǎn)化為不同的式(I)的化合物，例如，其中Y1不是-C(O)-的式(I)的化合物。式(I-A)的化合物的代表性的轉(zhuǎn)化如下所述。
其中Y1為-N(H)C(O)-或Y1為-N(H)C(S)-的式(I)的化合物(即，式(I-B)的化合物)可以通過使式(VII)的化合物與式(IX)的適當(dāng)?shù)漠惽杷狨セ虍惲蚯杷狨シ磻?yīng)制備。

其中所有變量如上述定義。
這個反應(yīng)可使用本領(lǐng)域用于這種偶聯(lián)反應(yīng)的常規(guī)條件進(jìn)行，包括使用溶劑例如四氫呋喃、1，4-二氧雜環(huán)己烷或DCM，在環(huán)境溫度或在約40到約100℃加熱進(jìn)行。式(IX)的化合物為市售的，或者可使用本領(lǐng)域常規(guī)的方法合成。
式(VII)的化合物可以通過使式(VI)的化合物與堿反應(yīng)制備。

其中所有變量如上述定義。
適當(dāng)?shù)膲A包括氫氧化鋰和氫氧化鈉。這個反應(yīng)可以在適當(dāng)?shù)娜軇┲羞M(jìn)行。用于這個反應(yīng)的適當(dāng)?shù)娜軇┑膶?shí)例包括但不限于四氫呋喃和水。反應(yīng)可以在環(huán)境溫度或在約40到約60℃加熱下進(jìn)行。
式(VI)的化合物可以通過使式(V)的化合物與式(XI)的胺反應(yīng)制備
其中所有變量如上述定義。
反應(yīng)在適當(dāng)?shù)娜萜髦锌梢栽谌軇┲性诨亓鳁l件下進(jìn)行或者在微波裝置中在約100到約180℃的溫度下進(jìn)行。用于這個反應(yīng)的適當(dāng)?shù)娜軇┑膶?shí)例包括但不限于異丙醇、1，4-二氧雜環(huán)己烷、乙醇和N，N-二甲基甲酰胺。如有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的，對于制備某些式(VI)的化合物，期望催化這個反應(yīng)。例如，對于其中e為0和環(huán)B為芳基的式(XI)和(VI)的化合物，可能期望在催化量的酸例如鹽酸或氫溴酸的存在下進(jìn)行該反應(yīng)。又如本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的，還有可能期望在使式(V)的化合物與式(XI)的化合物反應(yīng)之前引入適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基。例如，在其中Z為包含伯胺或仲胺的基團(tuán)的實(shí)施方案中，優(yōu)選在胺需要保護(hù)時進(jìn)行保護(hù)基的加入，保護(hù)為例如其相應(yīng)的三氟乙酰胺。對于例如此項(xiàng)保護(hù)的各個反應(yīng)，適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基的選擇、引入和除去為本領(lǐng)域中慣用的。式(XI)的化合物為市售的，或者可以使用本領(lǐng)域的常規(guī)技術(shù)合成。
式(V)的化合物可以通過使式(IV)的化合物與式(XII)的1-氨基吡啶鎓化合物反應(yīng)制備。

其中所有變量如上述定義。
反應(yīng)典型地在堿的存在下在適當(dāng)?shù)娜軇┲羞M(jìn)行。適當(dāng)?shù)膲A的實(shí)例包括但不限于碳酸鉀和氫氧化鉀。適當(dāng)?shù)娜軇┑膶?shí)例包括環(huán)境溫度的二甲基亞砜、二氯甲烷、甲醇、和N，N-二甲基甲酰胺。式(XII)的化合物為市售的，或者可以使用本領(lǐng)域的常規(guī)技術(shù)合成。
式(IV)的化合物可以通過使式(III)的化合物與式(XIII)的化合物反應(yīng)制備。

其中所有變量如上述定義。
反應(yīng)典型地使用常規(guī)的Sonagashira反應(yīng)條件進(jìn)行。特別地，反應(yīng)典型地在催化劑銅(I)類物質(zhì)和堿的存在下在溶劑例如四氫呋喃中根據(jù)Sonogashira，Kenkichi“Palladium-catalyzed alkynylation，HANDBOOKOF ORGANOPALLADIUM CHEMISTRY FOR ORGANIC SYNTHESIS1，493-529，2002的方法進(jìn)行。適當(dāng)?shù)拇呋瘎┑膶?shí)例包括鈀催化劑，例如二氯雙(三苯膦)合鈀(II)。適當(dāng)?shù)膲A的實(shí)例為三乙胺。式(XIII)的化合物為市售的，或者可以使用本領(lǐng)域的常規(guī)技術(shù)合成。
式(III)的化合物可以在本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的條件下使用三氟乙酸衍生物例如三氟乙酸酐從相應(yīng)的式(II)的3-乙炔基苯胺制備。

其中所有變量如上述定義。
式(II)的化合物為市售的，或者可以使用本領(lǐng)域的常規(guī)技術(shù)合成。
如上所述，該方法的步驟次序?qū)τ趯?shí)踐本發(fā)明不是決定性的。例如，對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說顯而易見的是，可以在與式(XI)的化合物反應(yīng)之前進(jìn)行與式(VIII)的化合物反應(yīng)以引入如下部分。

這個方法可以通過使用標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件使式(XIV)的化合物與式(XI)的胺反應(yīng)進(jìn)行。

其中所有變量如上述定義。
可以方便地通過除去式(V)的化合物的三氟乙酰基并且如上所述與式(VIII)的化合物反應(yīng)制備式(XIV)的化合物。除去式(V)的化合物的三氟乙?；梢允褂帽绢I(lǐng)域中公知的用于除去這種基團(tuán)的技術(shù)實(shí)現(xiàn)。
根據(jù)本發(fā)明的另一個方法，式(I)的化合物可以如以下方案2所示制備。
方案2
其中 Me為-CH3； X-為陰離子(優(yōu)選為鹵)； LG為適當(dāng)?shù)碾x去基團(tuán)； W為O或S；和 所有其它變量如上述定義。
通常，制備式(I)的化合物(所有的結(jié)構(gòu)式和所有的變量如上述定義)的方法包括以下步驟 a)使式(XV)的化合物與式(X)的化合物反應(yīng)以制備式(XVI)的化合物； b)使式(XVI)的化合物與式(XII)的1-氨基吡啶鎓化合物反應(yīng)以制備式(XVII)的化合物； c)將式(XVII)的化合物氧化以制備式(XVIII)的化合物； d)使式(XVIII)的化合物與式(XI)的化合物反應(yīng)以制備式(XIX)的化合物； e)還原式(XIX)的化合物以制備式(VII)的化合物； f)使式(VII)的化合物與式(VIII)的化合物或式(IX)的化合物反應(yīng)以制備式(I)的化合物； g)任選地將式(I)的化合物轉(zhuǎn)化為其可藥用的鹽或溶劑合物；和 h)任選地將式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物轉(zhuǎn)化為不同的式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物。
如本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的，前述步驟次序?qū)τ诒景l(fā)明的方法來說不是決定性的，并且可以根據(jù)取代基的性質(zhì)的不同而異。該方法可以使用任何適當(dāng)?shù)牟襟E次序進(jìn)行。
使式(VII)的化合物與式(VIII)的化合物或式(IX)的化合物反應(yīng)以制備式(I)的化合物的方法如上所述。
根據(jù)方案2，式(VII)的化合物可以通過還原式(XIX)的化合物制備。

其中所有變量如上述定義。
方便地，可以采用還原硝基的標(biāo)準(zhǔn)條件還原式(XIX)的化合物的硝基，以制備式(VII)的化合物。用于這個還原的適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)條件的實(shí)例包括但不限于在乙醇中與硫化鈉非水合物反應(yīng)。
式(XIX)的化合物可以通過使式的化合物(XVIII)的化合物與式(XI)的化合物反應(yīng)制備。

其中所有變量如上述定義。
這個反應(yīng)典型地通過微波加熱式(XVIII)的化合物和式(XI)的化合物在溶劑例如乙醇中的溶液到約120到180℃的溫度進(jìn)行，使用催化量的酸例如鹽酸。
式(XVIII)的化合物可以通過使用標(biāo)準(zhǔn)試劑氧化式(XVII)的化合物制備。

其中所有變量如上述定義。
可用于這個反應(yīng)的適當(dāng)?shù)难趸噭┑膶?shí)例包括但不限于在溶劑例如DCM中的50％的間氯過氧苯甲酸(mCPBA)。
式(XVII)的化合物可以使用與上述用于制備式(V)的化合物所述相似的方法制備。
生產(chǎn)其中c為0的式(I)的化合物(即，式(I-D)的化合物)的替代方法在以下方案3中表示。
方案3
其中 每個Hal為相同或不同的鹵素；并且 所有其它變量如上定義。
通常，制備式(I)的化合物(所有的結(jié)構(gòu)式和所有的變量如上述定義)的方法包括以下步驟 a)使式(XX)的化合物與式(XXI)的化合物反應(yīng)以制備式(XXII)的化合物； b)使式(XXII)的化合物與羥胺反應(yīng)以制備式(XXIII)的化合物； c)使式(XXIII)的化合物與適合于將羥胺轉(zhuǎn)化為離去基團(tuán)的試劑在堿的存在下反應(yīng)，以制備式(XXIV)的化合物； d)加熱式(XXIV)的化合物以制備式(XXV)的化合物； e)將式(XXV)的化合物乙?；灾苽涫?XXVI)的化合物； f)使式(XXVI)的化合物與二甲基甲酰胺縮二甲醇(dimethyl acetyl)反應(yīng)以制備式(XXVII)的插烯化合物； g)使式(XXVII)的化合物與式(XXVIII)的化合物在加熱下反應(yīng)，以制備式(XXIX)的化合物； h)使式(XXIX)的化合物與式(XXX)的化合物反應(yīng)，以制備式(I-D)的化合物； i)任選地將式(I-D)的化合物轉(zhuǎn)化為其可藥用的鹽或溶劑合物；和 j)任選地將式(I-D)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物轉(zhuǎn)化為不同的式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物。
如本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的，前述步驟次序?qū)τ诒景l(fā)明的方法來說不是決定性的，并且該方法可以以任何適當(dāng)?shù)牟襟E次序進(jìn)行。例如，可以在通過方案3中所示的反應(yīng)順序形成嘧啶環(huán)之前將式(XXVI)的化合物用式(XXX)的試劑酰胺化。
更具體地，式(I)的化合物可以通過使式(XXIX)的化合物與式(XXX)的化合物反應(yīng)制備。

其中所有變量如上述定義。
反應(yīng)典型地通過在適當(dāng)?shù)拟Z催化劑例如Pd2dba3的存在下在堿例如Cs2CO3與添加劑例如Xantphos的存在下在溶劑例如1，4-二氧雜環(huán)己烷中加熱式(XXX)的化合物與式(XXIX)的化合物的混合物進(jìn)行。使用這些條件使式(XXIX)的化合物反應(yīng)變?yōu)槭?XXX)的化合物的優(yōu)選的方法為在至少150℃的溫度下在微波裝置中輻射。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，式(XXX)的化合物為酰胺衍生物，使得Y1包含結(jié)合于式(XXX)化合物的胺的CO。因此該反應(yīng)可以提供包含酰胺的式(I)的目標(biāo)化合物，使得Y1為結(jié)合于胺的羰基。
式(XXVI)的化合物可以通過二步法轉(zhuǎn)化為式(XXIX)的化合物，首先將式(XXVI)的化合物轉(zhuǎn)化為式(XXVII)的插烯酰胺，然后使插烯酰胺與式(XXVIII)的胍反應(yīng)。

其中所有變量如上述定義。
式(XXVI)的化合物到式(XXVII)插烯酰胺的轉(zhuǎn)化可以通過將式(XXVI)的化合物與試劑例如二甲基甲酰胺縮二甲醇在約100℃的溫度下加熱實(shí)現(xiàn)。實(shí)現(xiàn)這個轉(zhuǎn)化的替代試劑包括但不限于二甲基甲酰胺縮二叔丁醇。
式(XXVII)的插烯酰胺與式(XXVIII)的胍的反應(yīng)典型地在堿例如三乙胺和碳酸鉀的存在下在溶劑例如二氧雜環(huán)己烷中加熱進(jìn)行。加熱反應(yīng)的優(yōu)選方法為在至少150℃的溫度下在微波裝置中輻射該混合物。
式(XXVI)的化合物可以通過式(XXV)化合物的乙酰化制備。

其中所有變量如上述定義。
該反應(yīng)可以通過使式(XXV)的化合物與適當(dāng)?shù)囊阴；噭┰谒岽呋瘎┑拇嬖谙略诩訜嵯路磻?yīng)進(jìn)行。優(yōu)選地，將反應(yīng)加熱到約100℃的溫度。適當(dāng)?shù)囊阴；噭┑膶?shí)例包括但不限于乙酸酐。適當(dāng)?shù)乃岽呋瘎┑膶?shí)例為硫酸。
式(XXV)的化合物可以通過加熱式(XXIV)的化合物獲得。

典型地，反應(yīng)在溶劑例如1，2-二氯乙烷中在至少150℃的溫度下進(jìn)行。實(shí)現(xiàn)這種轉(zhuǎn)化的有用的加熱式(XXIV)的化合物的方法為使用微波裝置。
式(XXIV)的化合物可以通過在堿的存在下用將羥胺部分轉(zhuǎn)化為離去基團(tuán)的適合試劑處理式(XXIII)的化合物制備。

其中所有變量如上述定義。
實(shí)現(xiàn)這種轉(zhuǎn)化的適當(dāng)?shù)脑噭┌ㄔ谌軇├鏒CM中的三氟乙酸酐與堿例如三乙胺。
式(XXIII)的化合物可以通過使式(XXII)的化合物與羥胺反應(yīng)制備。

其中所有變量如上述定義。
反應(yīng)可以在溶劑例如MeOH中在堿例如氫氧化鈉(特別是10％氫氧化鈉水溶液)的存在下進(jìn)行。
式(XXII)的化合物可以通過使式(XX)的化合物與式(XXI)的吡啶化合物縮合制備。

其中所有變量如上述定義。
用于使式(XX)的化合物與式(XXI)的化合物反應(yīng)的適當(dāng)?shù)臈l件包括但不限于在溶劑例如四氫呋喃中用堿例如氫化鈉處理式(XX)的化合物并用式(XXI)的化合物處理該混合物。在式(XX)的化合物中，Hal優(yōu)選為Br或I。在式(XXI)的化合物中，Hal優(yōu)選為Cl。
在本發(fā)明另外的實(shí)施方案中，其中c為1和R2為F的式(I)的化合物(即，式(I-E)的化合物)可以根據(jù)以下方案3a中所示的方法制備。根據(jù)這個方法，式(XXVI)的化合物可以通過二步法被轉(zhuǎn)化為式(XXXII)的氟衍生物。可以使用與方案3中描述的上述那些相似的方法將式(XXXII)的氟衍生物轉(zhuǎn)化為式(I-E)的化合物。
方案3a
其中每個Hal為相同或不同的鹵素；并且所有其它變量如上定義。
通常，制備式(I)的化合物(所有的結(jié)構(gòu)式和所有的變量如上述定義)的方法包括以下步驟 a)將式(XXVI)的化合物溴化以制備式(XXXI)的化合物； b)將式(XXXI)的化合物氟化以制備式(XXXII)的化合物； c)使式(XXXII)的化合物與二甲基甲酰胺縮二叔丁醇反應(yīng)以制備式(XXXIII)的化合物； d)使式(XXXIII)的化合物與式(XXVIII)的化合物在加熱下反應(yīng)以制備式(XXXIV)的化合物； e)使式(XXXIV)的化合物與式(XXX)的化合物反應(yīng)以制備式(I-E)的化合物； f)任選地將式(I-E)的化合物轉(zhuǎn)化為其可藥用的鹽或溶劑合物；和 g)任選地將式(I-E)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物轉(zhuǎn)化為不同的式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物。
如本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的，前述步驟次序?qū)τ诒景l(fā)明的方法來說不是決定性的，并且該方法可以以任何適當(dāng)?shù)牟襟E次序進(jìn)行。
更具體地，式(I-E)的化合物可以通過使式(XXXIV)的化合物與式(XXX)的化合物以與上述方案3中式(XXIX)的化合物與式(XXX)的化合物反應(yīng)相似的方式反應(yīng)制備。
式(XXXIV)的化合物可以通過使式(XXXIII)的化合物與式(XXVIII)的化合物在加熱下以與上述方案3中式(XXVII)的插烯化合物與式(XXVIII)的化合物反應(yīng)相似的方式反應(yīng)制備。
式(XXXIII)的化合物可以通過使式(XXXII)的化合物與二甲基甲酰胺縮二叔丁醇以與上述方案3中式(XXVI)化合物的反應(yīng)以制備式(XXVII)的化合物相似的方式反應(yīng)制備。
式(XXXII)的化合物可通過將式(XXXI)的化合物氟化制備。

其中所有變量如上述定義。
這個反應(yīng)可以通過在溶劑例如二甲基乙酰胺中用氟化試劑例如氟化鉀處理式(XXXI)的溴化物化合物進(jìn)行。適當(dāng)?shù)姆噭┑膶?shí)例包括但不限于氟化鉀。
式(XXXI)的化合物可以通過在適當(dāng)?shù)娜軇┲杏眠m當(dāng)?shù)匿寤瘎⑹?XXVI)的化合物溴化制備。

其中所有變量如上述定義。
溴化劑的實(shí)例包括溴。適當(dāng)?shù)娜軇┑膶?shí)例為冰醋酸。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，用于制備特定的式(I)的化合物的反應(yīng)順序的選擇根據(jù)期望的特定的式(I)的化合物以及起始原料的可用性的不同而異。
如本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的，可使用本領(lǐng)域公知的技術(shù)將式(I)的化合物轉(zhuǎn)化為另一種式(I)的化合物。例如，將其中Y1為-C(O)-的式(I)的化合物(即，式(I-A)的化合物)轉(zhuǎn)化為另一種式(I)的化合物的一個方法包括用Lawesson試劑處理式(I-A)的化合物。

用于這個反應(yīng)的適當(dāng)?shù)臈l件對于有機(jī)合成領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的。
在其中環(huán)B-(Z)g部分為四氫異喹啉基團(tuán)并且其中該四氫異喹啉胺為仲胺的式(I)的化合物可以被轉(zhuǎn)化為其中胺為帶有甲基的叔胺的另一種式(I)的化合物。這個轉(zhuǎn)化可以通過還原胺化方法實(shí)現(xiàn)。還原胺化方法在文獻(xiàn)中有詳細(xì)記載，并且包括例如將帶有仲胺的化合物在適當(dāng)?shù)娜軇┲性诩兹┧芤汉腿阴Ｑ趸饸浠c和催化性酸的存在下攪拌。適當(dāng)?shù)娜軇┑膶?shí)例包括DCM或N，N-二甲基甲酰胺。適當(dāng)?shù)乃岬膶?shí)例為乙酸。
基于本公開內(nèi)容和其中包含的實(shí)施例，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以容易地將式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物轉(zhuǎn)化為不同的式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物。
本發(fā)明還提供放射性標(biāo)記的式(I)的化合物和生物素酰基化的式(I)的化合物及其固體載體結(jié)合形式。
放射性標(biāo)記的式(I)的化合物和生物素?；氖?I)的化合物可以使用常規(guī)方法制備。例如，放射性標(biāo)記的式(I)的化合物的制備可以通過使式(I)的化合物與氚氣體在適當(dāng)?shù)拇呋瘎┑拇嬖谙路磻?yīng)，以產(chǎn)生放射性標(biāo)記的式(I)的化合物，來進(jìn)行。
在一個實(shí)施方案中，式(I)的化合物為氚化的。
放射性標(biāo)記的式(I)的化合物和生物素?；氖?I)的化合物可用于以下分析法中，用于鑒定抑制至少一種ErbB家族激酶的化合物，用于鑒定治療由至少一種ErbB家族激酶介導(dǎo)的病況的化合物，用于治療易感瘤。因此，本發(fā)明提供了鑒定這種化合物的測定方法，該方法包括使放射性標(biāo)記的式(I)的化合物或生物素酰基化的式(I)的化合物特異性結(jié)合靶蛋白或細(xì)胞勻漿的步驟。更具體地，適當(dāng)?shù)臏y定方法包括競爭性結(jié)合測定法。放射性標(biāo)記的式(I)的化合物和生物素?；氖?I)的化合物及其固體載體結(jié)合形式可以根據(jù)本領(lǐng)域中常規(guī)的方法用于測定法中。
以下實(shí)施例意在僅僅用于說明而不打算以任何方式限制本發(fā)明的范圍，本發(fā)明由下述權(quán)利要求限定。
實(shí)施例 如本文中使用的，用于這些方法、方案和實(shí)施例中的符號和慣例與用于現(xiàn)代的科學(xué)文獻(xiàn)中的那些一致，例如the Journal of the AmericanChemical Society或the Journal of Biological Chemistry。標(biāo)準(zhǔn)的單字母或三字母縮寫通常用于表示氨基酸性殘基，假設(shè)其為L-構(gòu)型，除非另作說明。所有的起始原料得自商業(yè)的供應(yīng)商并且不經(jīng)純化使用，除非另作說明。具體地，以下縮寫可用于實(shí)施例和說明書全文中 g(克)； mg(毫克)； L(升)； mL(毫升)； μl(微升)； psi(磅/平方英寸)； M(體積摩爾)； mM(體積毫摩爾)； i.v.(靜脈內(nèi))；Hz(赫茲)； MHz(兆赫)； mol(摩爾)； mmol(毫摩爾)；rt(室溫)； min(分鐘)； h(小時)； mp(熔點(diǎn))；TLC(薄層色譜法)； Tr(保留時間)；RP(反相)； MeOH(甲醇)； i-PrOH(異丙醇)； TEA(三乙胺)；TFA(三氟乙酸)； TFAA(三氟乙酸酐)； THF(四氫呋喃)； DMSO(二甲基亞砜)； AcOEt(EtOAc)； DME(1，2-二甲氧基乙烷)； DCM(CH2Cl2；二氯甲烷)； DCE(二氯乙烷)； DMF(N，N-二甲基甲酰胺)； DMPU(N，N′-二甲基亞丙基脲)；CDI(1，1-羰基二咪唑)； IBCF(isobutyl CHCl3ate)；HOAc(乙酸)； HOSu(N-羥基琥珀酰亞胺)； HOBT(1-羥基苯并三唑)； mCPBA(間氯過氧苯甲酸)； KOH(氫氧化鉀)； Na2CO3(碳酸鈉)； NaHCO3(碳酸氫鈉)； LiOH·H2O(氫氧化鋰一水合物)；K2CO3(碳酸鉀)； CHCl3(氯仿)；Na2SO4(硫酸鈉)； BOC(叔丁基氧基羰基)；Ac(乙?；?； DCC(二環(huán)己基碳二亞胺)； CBZ(芐基氧基羰基)； FMOC(9-芴基甲氧基羰基)； atm(大氣壓)； TMSE(2-(三甲基甲硅烷基)乙基)； TMS(三甲基甲硅烷基)； TIPS(三異丙基甲硅烷基)； TBS(叔丁基二甲基甲硅烷基)； DMAP(4-二甲基氨基吡啶)； BSA(牛血清白蛋白)； ATP(三磷酸腺苷)；HRP(辣根過氧化酶)； Ac2O(乙酸酐)； DMA(二甲基乙酰基)； Pd2dba3(三(二亞芐基丙酮)合二鈀(0))； NaCNBH3(氰基硼氫化鈉)； TMSCI(氯三甲基甲硅烷)； DMEM(Dulbecco氏改進(jìn)的Eagle培養(yǎng)基)； HPLC(高壓液相色譜法)； BOP(雙(2-氧代-3-噁唑烷基)次磷酰氯)； TBAF(氟化四正丁基銨)； HBTU(O-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽)； HEPES(4-(2-羥基乙基)-1-哌嗪乙磺酸)； DPPA(疊磷酸二苯酯)；fHNO3(發(fā)煙HNO3)； EDC(乙基碳二亞胺鹽酸鹽)；和 EDTA(乙二胺四乙酸)。
所有稱醚時是指乙醚；鹽水是指飽和的NaCl水溶液。除非另有陳述，所有的溫度表示為℃(攝氏度)。除非另作說明，所有的反應(yīng)在惰性氣氛下在rt進(jìn)行。
1H NMR譜在Varian VXR-300、Varian Unity-300、Varian Unity-400儀器、或General Electric QE-300上記錄?；瘜W(xué)位移表示為百萬分之一(ppm，δ單位)。偶合常數(shù)的單位為赫茲(Hz)。分裂圖描述表觀的峰裂數(shù)并且指定為s(單峰)、d(雙峰)、t(三重峰)、q(四重峰)、m(多重峰)、br(寬峰)。
低分辯率質(zhì)譜(MS)在JOEL JMS-AX505HA、JOEL SX-102、或SCIEX-APIiii光譜儀上記錄；高分辨率MS使用JOEL SX-102A光譜儀獲得。所有的質(zhì)譜在電噴射離子化(ESI)、化學(xué)離子化(CI)、電子轟擊(EI)下或通過快原子轟擊(FAB)方法得到。紅外(IR)光譜在Nicolet 510 FT-IR光譜儀上使用1-mm NaCl池得到。所有的反應(yīng)都通過在0.25mm E.Merck硅膠板(60F-254)上的薄層色譜法進(jìn)行監(jiān)控，使用紫外光、5％磷鉬酸或?qū)籽趸郊兹┮掖既芤嚎梢暬?，或通過質(zhì)譜法(電噴射或AP)監(jiān)控?？焖僦V法在硅膠(230-400目，Merck)上進(jìn)行或使用自動硅膠色譜法(Isco，Inc.Sq 16x或100sg Combiflash)進(jìn)行。
報(bào)告的HPLC保留時間(Tr)在連接于在210-500nm讀數(shù)的Waters996二極管陣列檢測器的Waters 2795裝置上得到。使用的柱為SynergiMax-RP(50×2mm)#00B-4337-B0型號。溶劑梯度為在6分鐘內(nèi)從15％MeOH水到100％MeOH(0.1％甲酸)。流速為0.8mL/分鐘。注射體積為3微升。
實(shí)施例1N-{3-[3-(2-{[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟AN-(3-乙炔基-苯基)-2，2，2-三氟-乙酰胺
向冷卻到0℃的3-乙炔基苯胺(10g，86mmol)的DCM溶液加入TEA(17mL，128mmol)和TFAA(14.3ml，102mmol)。在TLC顯示反應(yīng)完成時，將溶液用DCM和水稀釋。將各層分離。有機(jī)相用水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥并且濃縮，得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體，其以粗品用于下一個反應(yīng)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ11.32(s，1H)，7.78(d，J＝1.6Hz，1H)，7.67(d，J＝8.0Hz，1H)，7.41(t，J＝8.0Hz，1H)，7.32(m，1H)，4.25(s，1H)ppm. 步驟BN-[3-(2-氯-嘧啶-4-基乙炔基)-苯基]-2，2，2-三氟-乙酰胺
向2，4-二氯嘧啶(14.5g，97.5mmol)、二氯雙(三苯膦)合鈀(II)(1.3g，2.6mmol)、和碘化亞銅(I)(25mg，0.13mmol)在脫氣的THF中的混合物加入TEA(34mL，263mmol)，并將混合物加熱到50℃。在45分鐘內(nèi)將N-(3-乙炔基-苯基)-2，2，2-三氟-乙酰胺(14g，65mmol)的THF溶液加入到混合物中。在幾小時之后，將反應(yīng)冷卻到rt并且用DCM稀釋。有機(jī)混合物用水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥并且濃縮。粗物質(zhì)通過二氧化硅純化，得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ11.43(s，1H)，8.83(d，J＝4.8Hz，1H)，8.00(s，1H)，7.80(d，J＝4.8Hz，1H)，7.76(m，1H)，7.54-7.52(m，2H). 步驟CN-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺
將N-[3-(2-氯-嘧啶-4-基乙炔基)-苯基]-2，2，2-三氟-乙酰胺(9.14g，28.1mmol)、碘化N-氨基吡啶鎓(6.24g，28.1mmol)、KOH(1.57g，28.9mmol)和K2CO3(7.76g)在DMSO(175mL)中攪拌直到通過LC/MS分析所有的起始原料都已經(jīng)消耗。將反應(yīng)傾倒在水中，得到沉淀物，將其濾出，用水充分洗滌并且干燥。粗產(chǎn)物在EtOAc中研磨并且過濾，得到7.45g的標(biāo)題化合物，Rf＝0.2(2∶1己烷/EtOAc)。
步驟D2，2，2-三氟-N-{3-[3-(2-{[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}乙酰胺鹽酸鹽
向N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(0.5g，1.2mmol)在i-PrOH(4mL)中的混合物加入5-(3-氨基苯基)噁唑(0.25g，1.56mmol)和2滴濃HCl。反應(yīng)在微波中加熱到120℃，維持40分鐘并且使其冷卻到rt。得到的固體濾出，用i-PrOH洗滌并且干燥，以98％收率得到標(biāo)題化合物，為棕黃色固體(0.68g)。ES-LC/MSm/z＝542[M+H]+。
步驟E4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]-2-嘧啶胺
將2，2，2-三氟-N{3-[3-(2-{[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}乙酰胺鹽酸鹽(0.68g，1.26mmol)和LiOH(69mg，1.64mmol)在THF(15mL)和水(5mL)中的溶液在50℃攪拌6h。反應(yīng)用DCM提取。合并的有機(jī)相用MgSO4干燥并且蒸發(fā)干，得到標(biāo)題化合物為棕黃色固體(0.55g，98％收率)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.73(s，1H)，8.82(d，J＝6.7Hz，1H)，8.60(d，J＝8.9Hz，1H)，8.42(s，1H)，8.29(d，J＝5.3Hz，1H)，8.24(s，1H)，7.76(d，J＝7.7Hz，1H)，7.61(s，1H)，7.35-7.44(m，3H)，7.10-7.19(m，2H)，6.83(s，1H)，6.69-6.73(m，2H)，6.58(d，J＝5.3Hz，1H)，5.30(bs，2H)ppm.ES-LC/MSm/z＝446[M+H]+. 步驟FN-{3-[3-(2-{[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 向攪拌的4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]-2-嘧啶胺(100mg，0.22mmol)在1ml THF中的溶液加入2-噻吩乙酰氯(40mg，0.25mmol)。在15分鐘之后，LC/MS顯示反應(yīng)完成，加入幾個當(dāng)量的PS-三胺并將混合物攪拌16h，隨后加入25mg的TEA。將混合物過濾并將樹脂用THF充分洗滌。將濾液濃縮并將粗產(chǎn)物通過HPLC(Agilent，50-90％梯度，在15分鐘內(nèi))純化，得到標(biāo)題化合物(45mg，36％收率)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.34(s，1H)，9.71(s，1H)，8.81(d，J＝6.8Hz，1H)，8.49(d，J＝8.6Hz，1H)，8.18-8.37(m，3H)，7.87(s，1H)，7.67-7.72(m，2H)，7.54(s，1H)，7.24-7.42(m，6H)，7.09(t，J＝6.9Hz，1H)，6.93-6.95(m，2H)，6.49(d，J＝5.3Hz，1H)，3.84(s，2H)ppm.ES-LC/MS m/z＝570[M+H]+ 實(shí)施例2N-[3-(3-{2-[(4-{[3-(二甲基氨基)丙基]氨基}-3-氟苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}胺
將N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(1.0g，2.4mmol)(參見實(shí)施例1步驟C)和LiOH(125mg，3.0mmol)在THF(25ml)和水(8ml)中的溶液在50℃攪拌2h。反應(yīng)用DCM提取。合并的有機(jī)相用MgSO4干燥并且蒸發(fā)干，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(0.79g，99％收率)。
1HNMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.90(d，J ＝6.7Hz，1H)，8.47(d，J＝5.3Hz，1H)，8.45(s，1H)，7.66(t，J＝7.9Hz，1H)，7.22(dt，J＝1.3，6.9Hz，1H)，7.17(d，J＝7.7Hz，1H)，7.08(d，J＝5.5Hz，1H)，6.75-6.79(m，1H)，6.71(t，J＝7.9Hz，2H)，5.32(bs，2H)ppm.ES-LC/MS m/z＝322，324[M+H]+. 步驟BN-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[15-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
向攪拌的{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}胺(200mg，0.62mmol)和TEA(64mg，0.63mmol)在THF(25mL)中的溶液滴加2-噻吩乙酰氯(118mg，0.73mmol)。在攪拌20分鐘之后，15分鐘。LC/MS分析顯示反應(yīng)完成，加入幾個當(dāng)量的PS-三胺并將混合物攪拌16h，隨后加入25mg TEA。然后將混合物過濾并將樹脂用THF充分洗滌。將濾液濃縮并將粗產(chǎn)物在水和DCM之間分配。將各層分離，并將水相用DCM提取。將有機(jī)相合并，用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮，得到標(biāo)題化合物(270mg，98％收率)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.41(s，1H)，8.92(d，J＝6.9Hz，1H)，8.48(d，J＝5.3Hz，1H)，8.43(d，J＝9.0Hz，1H)，7.91(s，1H)，7.78(d，J＝8.1Hz，1H)，7.67(t，J＝7.3Hz，1H)，7.49(t，J＝7.9Hz，1H)，7.40-7.43(m，1H)，7.31(d，J＝6.8Hz，1H)，7.24(dt，J＝1.1，6.8Hz，1H)，7.07(d，J＝5.5Hz，1H)，6.99-7.01(m，2H)，3.91(s，2H)ppm.ES-LC/MS m/z＝446，448[M+H]+. 步驟CN’-(2-氟-4-硝基苯基)-N，N-二甲基-1，3-丙二胺[3-(二甲基氨基)丙基](2-氟-4-硝基苯基)胺
向1，2-二氟-4-硝基苯(1g，6.28mmol)的THF(62ml)溶液加入TEA(1.58g，15.7mmol)，隨后加入N，N-二甲基-1，3-丙二胺(0.77g，7.54mmol)，并將得到的反應(yīng)在rt攪拌18h。反應(yīng)用EtOAc稀釋，并用飽和NaHCO3水溶液猝滅。將各層分離，并將水相用EtOAc提取。將有機(jī)相合并，用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮到硅膠上。使用ISCO色譜法(己烷∶EtOAc)純化，得到黃色固體，為期望的產(chǎn)物。ES-LC/MS m/z＝242[M+H]+。
步驟DN1-[3-(二甲基氨基)丙基]-2-氟-1，4-苯二胺
將(二甲基氨基)丙基](2-氟-4-硝基苯基)胺鹽酸鹽(8.2g，34mmol)溶解于EtOAc(100ml)中并且用Pd/C(10％，1.8g，1.7mmol)處理，置于RT的1atm的H2下。將反應(yīng)攪拌24h。反應(yīng)用硅藻土處理，并將得到的漿狀物在硅藻土上過濾。將濾液真空濃縮，得到中間體苯胺，為深紅色油狀物。將其溶解于乙醚(15mL)中并且在冰-水中冷卻，在攪拌下滴加含1M氯化氫的乙醚(34mL)。繼續(xù)攪拌20分鐘，然后將得到的白色-灰色固體濾出并用乙醚洗滌，得到標(biāo)題化合物(6.56g，78％收率)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ6.53(t，J＝9.3Hz，1H)，6.41(dd，J＝2.1，13.6Hz，1H)，6.32(d，J＝8.5Hz，1H)，3.00-3.08(m，4H)，2.68(s，6H)，1.85-1.92(m，2H)ppm.ES-LC/MSm/z＝212[M+H]+. 步驟EN-[3-(3-{2-[(4-{[3-(二甲基氨基)丙基]氨基}-3-氟苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 向N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(100mg，0.22mmoL)在i-PrOH(4mL)中的漿狀物加入N1-[3-(二甲基氨基)丙基]-2-氟-1，4-苯二胺(75mg，0.30mmol)和2滴濃HCl。將反應(yīng)在微波中加熱到120℃，維持20分鐘并且使其冷卻到rt。加入N1-[3-(二甲基氨基)丙基]-2-氟-1，4-苯二胺(75mg，0.30mmol)的第二批料并將反應(yīng)微波加熱到120℃，維持另外的1h。將反應(yīng)濃縮并將粗產(chǎn)物通過HPLC(Agilent，50-90％梯度，在15分鐘內(nèi))純化，得到標(biāo)題化合物(50mg，36％收率)，為油狀物，其固化為深綠色固體。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.33(s，1H)，9.27(s，1H)，8.79(d，J＝7.0Hz，1H)，8.42(bd，J＝6.8Hz，1H)，8.15-8.17(m，2H)，7.85(s，1H)，7.71(d，J＝8.4Hz，1H)，7.51(d，J＝14.3Hz，1H)，7.35-7.43(m，3H)，7.23(d，J＝7.5Hz，1H)，7.18(d，J＝8.6Hz，1H)，7.08(t，J＝7.8Hz，1H)，6.93-6.95(m，2H)，6.60(t，J＝9.4Hz，1H)，6.38(d，J＝5.3Hz，1H)，3.84(s，2H)，3.05(t，J＝7.0Hz，2H)，2.37(t，J＝7.0Hz，2H)，2.18(s，6H)，1.69(五重峰，J＝7.0Hz，2H)ppm.ES-LC/MS m/z＝621[M+H]+. 實(shí)施例32-苯基-N-(3-{3-[2-(苯基氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)乙酰胺
步驟A三甲基[(3-硝基苯基)乙炔基]甲硅烷
3-硝基碘苯(50g，0.201mol)和二異丙基胺(56.3ml，0.402mol)溶解于無水THF(1000mL)并使氬氣鼓泡通過溶液20分鐘。加入碘化亞銅(I)(3.83g，0.02mol)和雙(三苯膦)合二氯化鈀(7.05g，0.01mol)，然后在約30分鐘內(nèi)滴加三甲基甲硅烷基乙炔(31.2mL，0.221mol)，保持溫度為約25℃。在加入完成之后，將混合物在rt攪拌過夜。將混合物過濾并用THF洗滌。將濾液減壓濃縮。殘余物通過硅膠色譜法純化，使用己烷/EtOAc(20/1)，得到標(biāo)題化合物(43.22g)，為淺棕色固體。
步驟B1-乙炔基-3-硝基苯
在氬氣氣氛下將1-(3-硝基苯基)-2-三甲基甲硅烷基乙炔(43g，0.197mol)的乙醚(800mL)溶液冷卻到0℃。在30分鐘中內(nèi)向這個溶液中滴加TBAF溶液(1M，在THF中，217mL，0.217mol)，同時保持溫度低于10℃。將反應(yīng)混合物在0℃攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物傾倒在水中并用乙醚提取兩次。將有機(jī)層合并，用鹽水洗滌并且用Na2SO4干燥。減壓下除去溶劑。殘余物通過硅膠色譜法純化，使用己烷/EtOAc＝20/1，得到標(biāo)題化合物，為橙色油狀物(26g)。
步驟C4-碘代-2-(甲硫基)嘧啶
4-氯-2-甲硫基嘧啶(40g，249mmol)加入到氫碘酸(57％，在水中，200mL)。將懸浮液在Rt避光劇烈攪拌72h。形成亮黃色固體，通過過濾收集該固體。將固體加入到飽和NaHCO3水溶液(500mL)并且攪拌2分鐘。將其用氯仿(600mL)提取，分離水溶液并且另外用氯仿(350，然后300mL)提取2次。將有機(jī)提取液合并，用水(100mL)洗滌，用MgSO4干燥并且過濾。真空除去有機(jī)溶劑，得到無色油狀物。加入正-己烷并且除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(57.9g，230mmol，92％)。
步驟D2-(甲硫基)-4-[(3-硝基苯基)乙炔基]嘧啶
將4-碘代-2-(甲硫基)嘧啶(39.7g，0.157mol)和二異丙基胺(44.2mL，0.315mol)溶解于無水THF(720mL)并將氬氣鼓泡通過溶液20分鐘。加入碘化亞銅(I)(2.99g，14.3mmol)和雙(三苯膦)合二氯化鈀(5.51g，7.85mmol)，然后在約30分鐘內(nèi)滴加在無水THF(100mL)中的1-乙炔基-3-硝基苯(25.4g，0.173mol)，保持溫度為約25℃。在加入完成之后，混合物在rt攪拌過夜。將混合物過濾并用THF洗滌。將濾液減壓濃縮。殘余物用EtOAc/MeOH洗滌，得到淺-黃色固體(42g)。
步驟E3-[2-(甲硫基)-4-嘧啶基]-2-(3-硝基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶
向0℃的2-(甲硫基)-4-[(3-硝基苯基)乙炔基]嘧啶(4.0g，14.7mmol)和碘化N-氨基吡啶鎓(6.53g，29.4mmol)的DCM(150mL)溶液加入含氫氧化鉀(2.06g，36.8mmol)的水(50mL)。使反應(yīng)回溫到rt并且攪拌16h?；旌衔镉肈CM和水稀釋。將有機(jī)層分離并將水層用DCM提取。合并的有機(jī)層用MgSO4干燥，過濾并且濃縮，得到黑色固體。殘余物溶解于DCM并且加入MeOH，直到形成產(chǎn)物，為沉淀。產(chǎn)物通過過濾收集并且干燥，得到標(biāo)題化合物(2.02g)，為灰白色固體。
1HNMR(400MHz，d6-DMSO)δ11.36(s，1H)，8.62(d，1H，J＝9.2)，8.54(d，1H，J＝5.6)，7.94(s，1H)，7.82(d，1H，J＝8.8)，7.54(t，1H，J＝8.0)，7.46(d，1H，J＝9.2)，7.16(d，1H，J＝5.2)，2.59(s，3H). 步驟F3-[2-(甲基亞硫?；?-4-嘧啶基]-2-(3-硝基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶
通過加料漏斗向3-[2-(甲硫基)-4-嘧啶基]-2-(3-硝基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶(0.82g，2.26mmol)的DCM(22mL)溶液加入50％mCPBA(818mg，2.37mmol)的DCM(6mL)溶液。將反應(yīng)攪拌10分鐘和飽和NaHCO3水溶液，將各層分離。水層用DCM提取并將合并的有機(jī)層用MgSO4干燥，過濾并且濃縮。殘余物通過硅膠色譜法純化(50％EtOAC/己烷洗脫)，得到產(chǎn)物(567mg)，為黃色固體。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.93(d，1H，J＝6.8)，8.68(d，1H，J＝5.6)，8.57(d，1H，J＝8.8)，8.44(s，1H，8.37-8.35(m，1H，8.08(d，1H，J＝7.6)，7.78(t，1H，J＝8.0)，7.61-7.65(m，1H)，7.21-7.26(m，2H)，2.84(s，3H). 步驟G4-[2-(3-硝基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-苯基-2-嘧啶胺
將3-[2-(甲基亞硫?；?-4-嘧啶基]-2-(3-硝基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶(1.5g，3.9mmol)溶解于苯胺(5mL)。將黑色的混合物在100℃加熱5h。將混合物冷卻并且加入EtOAc(20mL)和1N HCl(10mL)。水層用EtOAc(20mL)提取并將有機(jī)提取液合并，用1N HCl(15mL)、鹽水(10mL)洗滌，用MgSO4干燥并且過濾。真空除去有機(jī)溶劑。粗物質(zhì)通過硅膠色譜法(30-50％EtOAc/己烷)純化，得到標(biāo)題產(chǎn)物(830mg，52％收率)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ6.58(d，1H，J＝5.3Hz)，6.98(m，1H)，7.05(m，1H)，7.19(brs，1H)，7.28-7.36(m，3H)，7.57-7.63(m，3H)，8.00(m，1H)，8.25-8.31(m，3H)，8.54(m，1H)，8.69(m，1H)；ES-LC/MSm/z(M+H)＝409. 步驟H4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-苯基-2-嘧啶胺
向4-[2-(3-硝基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-苯基-2-嘧啶胺(809mg，1.98mmol)的1，4-二氧雜環(huán)己烷(16mL)溶液加入含硫化鈉非水合物(1.05g，6mmol)的水(4mL)。將混合物在90℃加熱5h，使其冷卻到rt并且真空濃縮。殘余物用EtOAc和水稀釋。將有機(jī)層分離并將水層用EtOAc提取。合并的有機(jī)層用MgSO4干燥，過濾并且濃縮，得到黑色固體。粗物質(zhì)通過硅膠色譜法(己烷/EtOAc 30-50％)純化，得到標(biāo)題產(chǎn)物(462mg，62％收率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.75(brs，2H)，6.63(d，1H，J＝5.3Hz)，6.78(m，1H)，6.91(m，1H)，6.96-7.00(m，2H)，7.06(m，1H)，7.16(m，1H)，7.22-7.36(m，4H)，7.65(m，1H)，8.17(d，1H，J＝5.3Hz)，8.42(m，1H)，8.52(m，1H)；ES-LC/MSm/z＝379[M+H]+. 步驟I2-苯基-N-(3-{3-[2-(苯基氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 向4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-苯基-2-嘧啶胺(40mg，0.1mmol)的DCM(1.2mL)溶液加入苯甲酰甲基氯(0.017mL，0.11mmol)。在TLC顯示反應(yīng)完成時，溶液用DCM稀釋并用飽和NaHCO3溶液和用鹽水洗滌。有機(jī)相用MgSO4干燥并且濃縮。粗物質(zhì)通過硅膠色譜法(己烷/EtOAc30-50％)純化，得到標(biāo)題化合物，為帶棕色的固體(25mg，50％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.65(s，2H)，6.52(d，21H，J＝5.3Hz)，6.92(m，1H)，7.12(m，2H)，7.21-7.26(m，4H)，7.30-7.33(m，4H)，7.41(m，1H)，7.48(m，1H)，7.69(m，2H)，7.75(m，1H)，7.90(m，1H)，7.90(s，1H)，8.26(d，1H，J＝5.3Hz)，8.47(m，1H)，8.83(m，1H)，9.56(s，1H)，10.34(s，1H)；.ES-LC/MS m/z＝497[M+H]+. 實(shí)施例4N-(3-{3-[2-(苯基氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2-(2-噻吩基)乙酰胺
使用上述實(shí)施例3步驟I中所述的酰化條件從4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-苯基-2-嘧啶和2-噻吩乙酰氯合成標(biāo)題化合物。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.88(s，2H)，6.53(d，1H，J＝5.3Hz)，6.90-6.98(m，3H)，7.12(m，1H)，7.21-7.28(m，3H)，7.38-7.50(m，3H)，7.69-7.75(m，3H)，7.90(m，1H)，8.27(d，1H，J＝5.3Hz)，8.47(m，1H)，8.84(d，1H，J＝7.1Hz)，9.56(s，1H)，10.37(s，1H)；ES-LC/MS m/z＝503[M+H]+. 實(shí)施例52-(3-氯苯基)-N-(3-{3-[2-(苯基氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)乙酰胺
向4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-苯基-2-嘧啶(30mg，0.08mmol)(參見實(shí)施例3步驟H)的THF(3mL)溶液加入CDI(14mg，0.09mmol)。將得到混合物在rt攪拌1小時。向混合物加入(3-氯苯基)乙酸(15mg，0.09mmol)，然后在rt攪拌15h。加入甲醇(2mL)并將混合物真空濃縮。殘余物通過硅膠上的色譜法(己烷/EtOAc)純化，得到標(biāo)題化合物(25mg，60％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.68(s，2H)，6.53(d，1H，J＝5.3Hz)，6.92(m，1H)，6.92(m，1H)，7.12(m，1H)，7.21-7.50(m，9H)，7.68-7.76(m，3H)，7.89(m，1H)，8.26(d，1H，J＝5.3Hz)，8.47(m，1H)，8.83(d，1H，J＝6.8Hz)，9.56(s，1H)，10.35(s，1H).ES-LC/MS m/z＝531[M+H]+. 實(shí)施例62-(2，5-二氟苯基)-N-(-3-{3-[2-(苯基氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)乙酰胺
使用實(shí)施例5中所述的偶聯(lián)條件從4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-苯基-2-嘧啶(參見實(shí)施例3步驟H)和(2，5-二氟苯基)乙酸合成標(biāo)題化合物。
1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.76(s，2H)，6.53(d，1H，J＝5.3Hz)，6.94(m，1H)，7.10-7.27(m，7H)，7.41-7.48(m，2H)，7.69-7.76(m，3H)，7.89(m，1H)，8.27(d，1H，J＝5.3Hz)，8.48(m，1H)，8.83(m，1H)，9.56(s，1H)，10.39(s，1H).ES-LC/MS m/z＝533[M+H]+. 實(shí)施例7N-[3-(3-{2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟AN-(3-{3-[2-({3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺
使用實(shí)施例1步驟D所述的置換條件從N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(參見實(shí)施例1步驟C)和3-(二甲基氨基甲基)苯胺制備標(biāo)題化合物，以78％收率得到產(chǎn)物。ES-LC/MS m/z＝532[M+H]+。
步驟B4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}-2-嘧啶胺
使用實(shí)施例1步驟E中所述的水解條件從N-(3-{3-[2-({3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺制備標(biāo)題化合物，以定量的收率產(chǎn)生產(chǎn)物。ES-LC/MS m/z＝436[M+H]+。
步驟CN-(3-{3-[2-({3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 使用實(shí)施例1步驟F所述的?；瘲l件從4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}-2-嘧啶胺和2-噻吩乙酰氯制備標(biāo)題化合物，以88％收率產(chǎn)生產(chǎn)物。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.11(s，6H)，3.26(s，2H)，3.86(s，2H)，6.46(d，1H，J＝5.3Hz)，6.85(d，1H，J＝7.5Hz)，6.96(m，2H)，7.10-7.19(m，2H)，7.26(d，1H，J＝7.9Hz)，7.36-7.48(m，3H)，7.62(d，1H，J＝8.2Hz)，7.69(s，1H)，7.73(d，1H，J＝9.1Hz)，7.89(s，1H)，8.23(d，1H，J＝5.3Hz)，8.51(d，1H，J＝8.8Hz)，8.82(d，1H，J＝6.9Hz)，9.52(s，1H)，10.35(s，1H)；ES-LC/MS m/z＝560[M+H]+. 實(shí)施例8N-[3-(3-{2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A2-甲基-7-硝基-1，2，3，4-四氫異喹啉
將7-硝基-1，2，3，4-四氫異喹啉(4.15g，23.3mmol)與低聚甲醛(3.7g，116mmol)、HOAc(6.7mL，116mmol)、氰基硼氫化鈉(7.3g，116mmol)合并在DCE(300mL)中并且加熱回流15h。將反應(yīng)冷卻并且通過與飽和NaHCO3水溶液攪拌猝滅。有機(jī)層用MgSO4干燥。真空除去溶劑并將粗的油狀物通過硅膠快速柱色譜法(40-100％EtOAc/己烷)純化。純化得到3.0g(67％)標(biāo)題化合物，為油狀物。
1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.14(s，1H)，8.09(dd，J＝8.5，2.4Hz，1H)，7.52(d，J＝8.2Hz，1H)，4.22(s，2H)，3.29-3.23(m，2H)，3.16-3.08(m，2H)，2.67(s，3H). 步驟B2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉胺
將2-甲基-7-硝基-1，2，3，4-四氫異喹啉(3.0g，15.6mmol)溶解于EtOAc(10mL)并且在55PSI的氫氣氣氛下與10％Pd/C(0.3g)一起劇烈攪拌。將反應(yīng)在rt攪拌15h。將反應(yīng)過濾通過硅藻土并且濃縮，得到2.2g(87％)的期望的2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉胺產(chǎn)物，為白色粉末。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ6.83(d，J＝8.3Hz，1H)，6.44(d，J＝8.0Hz，1H)，6.24(s，1H)，4.97(s，2H)，3.87(m，2H)，3.11(t，J＝6.4Hz，2H)，2.85-2.68(m，2H)，2.58(s，3H). 步驟C2，2，2-三氟-N-[3-(3-{2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]乙酰胺
使用實(shí)施例1步驟D中所述的置換條件從N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(參見實(shí)施例1步驟C)和2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉胺制備標(biāo)題化合物，以72％收率產(chǎn)生產(chǎn)物。ES-LC/MS m/z＝544[M+H]+。
步驟DN-{4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-2-嘧啶基}-2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉胺
使用實(shí)施例1步驟E所述的水解條件從2，2，2-三氟-N-[3-(3-{2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]乙酰胺制備標(biāo)題化合物，以定量的收率產(chǎn)生產(chǎn)物。ES-LC/MSm/z＝448[M+H]+。
步驟EN-[3-(3-{2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物)。
使用實(shí)施例1步驟F所述的酰化條件從N-{4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-2-嘧啶基}-2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉胺和2-噻吩乙酰氯制備標(biāo)題化合物，以89％收率產(chǎn)生產(chǎn)物。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.31(s，3H)，2.57(t，2H，J＝5.7Hz)，2.74(t，2H，J＝5.6Hz)，3.38(s，2H)，3.88(s，2H)，6.47(d，1H，J＝5.3Hz)，6.97(m，3H)，7.13(t，1H，J＝6.8Hz)，7.27(d，1H，J＝7.5Hz)，7.38-7.50(m，5H)，7.75(d，1H，J＝8.1Hz)，7.90(s，1H)，8.23(d，1H，J＝5.3Hz)，8.46(d，1H，J＝8.6Hz)，8.83(d，1H，J＝7.0Hz)，9.43(s，1H)，10.36(s，1H).ES-LC/MS m/z＝572[M+H]+. 實(shí)施例9N-[3-(3-{2-[(3-氟苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A2，2，2-三氟-N-[3-(3-{2-[(3-氟苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]乙酰胺
向N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(參見實(shí)施例1步驟C)(2.27g，5.4mmol)在EtOH(60mL)中的混合物加入3-氟苯胺(0.62mL，6.48mmol)和5滴濃HCl。將反應(yīng)加熱到80℃，維持16h，使其冷卻到rt并且濃縮?；旌衔镌贒CM和飽和NaHCO3水溶液之間分配。分離的水層用DCM提取兩次并將合并的有機(jī)層用MgSO4干燥，過濾并且濃縮，在研磨殘余物之后得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體(2.15g，98％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.34(s，1H)，9.78(s，1H)，8.83(d，1H，J＝7.2)，8.43(d，1H，J＝9.2)，8.30(d，1H，J＝5.2)，7.97(s，1H)，7.79-7.72(m，2H)，7.52-7.40(m，4H)，7.22(q，1H，J＝7.6)，7.12(t，1H，J＝6.8)，6.69(m，1H)，6.56(d，1H，J＝5.2). 步驟B4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-氟苯基)-2-嘧啶胺
將2，2，2-三氟-N-(3-{3-[2-(3-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}-苯基)-乙酰胺(2.15g，4.4mmol)和LiOH(277mg，6.6mmol)在THF(44mL)和水(10mL)中的溶液攪拌16h。反應(yīng)用DCM提取。合并的有機(jī)相用MgSO4干燥并且通過硅膠純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.75(s，1H)，8.78(d，J＝6.8Hz，1H)，8.52(d，J＝9.2Hz，1H)，8.25(d，J＝5.6Hz，1H)，7.80(d，J＝12.4Hz，1H)，7.47-7.43(m，2H)，7.29-7.23(m，1H)，7.12-7.06(m，2H)，6.77(s，1H)，6.71(dt，J＝8.4和2.4Hz，1H)，6.66-6.62(m，2H)，6.54(d，J＝5.6Hz，1H)，5.21(s，2H)ppm.HRMS C23H17FN6[M+H]+計(jì)算值397.1577實(shí)測值397.1558. 步驟CN-[3-(3-{2-[(3-氟苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺 通過與實(shí)施例1步驟F相似的方法從4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-氟苯基)-2-嘧啶胺和2-噻吩基乙酰氯以67％收率制備標(biāo)題化合物。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.34(s，1H)，9.80(s，1H)，8.84(d，1H)，8.48(d，1H)，8.30(d，1H)，7.89(s，1H)，7.78(m，1H)，7.73(d，1H)，7.53-7.37(m，4H)，7.30-7.22(m，2H)，7.12(m，1H)，6.96(m，2H)，6.71(m，1H)，6.55(d，1H)，3.86(s，2H)；HRMSC29H22N6OFS(M+H)+計(jì)算值521.1560實(shí)測值521.1548. 實(shí)施例10N-[3-(3-{2-[(3-{[2-(1-吡咯烷基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A2-氯乙基3-硝基苯基醚
在85℃向3-硝基苯酚(5.0g，36mmol)和K2CO3(7.45g，54mmol)在2-丁酮中的混合物加入1-溴-2-氯乙烷(1.7mL，71.9mmol)并將反應(yīng)攪拌24h。將混合物冷卻到rt并且真空濃縮。粗產(chǎn)物用EtOAc(200mL)和水(200mL)稀釋并且進(jìn)行分離。水層用EtOAc(200mL)提取兩次，將有機(jī)物合并，用MgSO4干燥并且真空濃縮到硅膠上。通過柱色譜法進(jìn)行純化，使用梯度的EtOAc/己烷，得到黃色油狀物，其在靜置時固化，得到4.22g(58％收率)的標(biāo)題產(chǎn)物，為灰白色固體。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 7.8(m，1H)，7.7(t，J＝2.4Hz，1H)，7.6(t，J＝8.2Hz，1H)7.4(dd，J＝8.2，2.6Hz，1H)，4.4(m，2H)，4.0(m，2H). 步驟B3-[(2-氯乙基)氧基]苯胺
將2-氯乙基3-硝基苯基醚溶解于EtOAc(90mL)。向其中加入Pt w/硫化物(2.04g，0.524mmol)，然后用H2吹掃并且在1大氣壓的H2下在RT攪拌過夜。將反應(yīng)過濾通過硅藻土短柱并且真空濃縮，得到3.4g(95％收率)的標(biāo)題化合物，為無色油狀物。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 6.9(t，J＝8.0Hz，1H)，6.1(m，2H)，6.1(ddd，J＝8.1，2.4，0.8Hz，1H)，5.0(s，2H)，4.1(m，2H)，3.9(m，2H). 步驟CN-(3-{3-[2-({3-[(2-氯乙基)氧基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺
將N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(1.0g，2.75mmol)(參見實(shí)施例1步驟C)在i-PrOH(20mL)中攪拌并將3-[(2-氯乙基)氧基]苯胺(0.494g，2.89mmol)與3滴濃HCl一起加入并且加熱到85℃，維持18h。將混合物熱過濾并用i-PrOH洗滌，得到標(biāo)題產(chǎn)物，為黃色固體，為HCl鹽(1.2g，74％收率)。ES-LC/MS m/z553(M+H)。
步驟D4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[2-(1-吡咯烷基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺
N-(3-{3-[2-({3-[(2-氯乙基)氧基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺(0.5g，0.85mmol)溶解于吡咯烷中并且加熱到50℃，維持18h。反應(yīng)完成之后，將反應(yīng)冷卻并且直接吸收到硅膠上。通過柱色譜法純化，使用0-20％梯度的EtOAc/MeOH w/NH4OH得到期望的產(chǎn)物，為黃色固體，310mg，74％收率。ES-LC/MS m/z 492[M+H]+。
步驟EN-[3-(3-{2-[(3-{[2-(1-吡咯烷基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 使用實(shí)施例1步驟F所述的?；瘲l件從4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[2-(1-吡咯烷基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺和2-噻吩乙酰氯制備標(biāo)題化合物，并且通過柱色譜法純化，使用0-20％梯度的EtOAc/MeOH w/NH4OH，以44％收率產(chǎn)生產(chǎn)物。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 1.6(s，4H)2.7(s，3H)3.8(s，2H)4.0(t，J＝6.0Hz，2H)6.5(m，2H)6.9(m，2H)7.1(m，3H)7.2(m，2H)7.4(m，2H)7.4(m，1H)7.5(t，J＝2.3Hz，1H)7.7(m，1H)7.9(d，J＝1.8Hz，1H)8.2(d，J＝5.3Hz，1H)8.5(s，1H)8.8(d，J＝7.0Hz，1H)9.5(s，1H)10.3(s，1H).ES-LC/MS m/z 616[M+H]+. 實(shí)施例11N-[3-(3-{2-[(3-{[3-(4-嗎啉基)丙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A.N-(3-{3-[2-({3-[(3-氯丙基)氧基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺
如實(shí)施例10步驟C所述，該化合物從N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(參見實(shí)施例1步驟C)和3-[(2-氯丙基)氧基]苯胺合成，以81％收率得到深黃色固體。ES-LCMS m/z567[M+H]+。
步驟B.4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[3-(4-嗎啉基)丙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺
該化合物通過如實(shí)施例10步驟D中所述用嗎啉進(jìn)行氯置換從N-(3-{3-[2-({3-[(3-氯丙基)氧基]-苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺合成，以71％收率得到橙色固體。ES-LC/MS m/z 522[M+H]+。
步驟C.N-[3-(3-{2-[(3-{[3-(4-嗎啉基)丙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物)。
標(biāo)題化合物如實(shí)施例10步驟E中所述用2-噻吩基乙酰氯?；瘡?-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[3-(4-嗎啉基)丙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺合成，以37％收率得到淺棕色固體。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 1.8(d，J＝1.1Hz，2H)2.3(s，6H)3.5(d，J＝4.6Hz，4H)3.9(s，2H)3.9(m，2H)6.5(m，2H)7.0(m，2H)7.1(m，2H)7.3(dt，J＝7.6，1.4Hz，2H)7.4(m，3H)7.5(t，J＝2.1Hz，1H)7.7(d，J＝1.8Hz，1H)7.9(t，J＝1.8Hz，1H)8.2(d，J＝5.3Hz，1H)8.5(d，J＝8.6Hz，1H)8.8(m，1H)9.5(s，1H)10.3(s，1H).ES-LC/MS m/z 646[M+H]+. 實(shí)施例12N-[3-(3-{2-[(3-{[3-(二甲基氨基)丙基]氧基}苯基)-氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A.4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[3-(二甲基氨基)丙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺
該化合物通過如實(shí)施例10步驟D中所述用二甲胺進(jìn)行氯置換從N-(3-{3-[2-({3-[(3-氯丙基)氧基]-苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺(參見實(shí)施例11步驟A)合成，以87％收率得到橙色固體。ES-LC/MS m/z 480[M+H]+。
步驟B.N-[3-(3-{2-[(3-{[3-(二甲基氨基)丙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 標(biāo)題化合物如實(shí)施例10步驟E中所述用2-噻吩基乙酰氯進(jìn)行酰化從4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[3-(二甲基氨基)丙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺合成，以48％收率得到淺棕色固體。
1HNMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 1.8(s，2H)2.1(s，6H)2.3(s，2H)3.9(s，2H)3.9(d，J＝6.2Hz，2H)6.5(m，2H)7.0(m，2H)7.1(m，2H)7.3(s，2H)7.4(m，2H)7.5(m，2H)7.7(m，1H)7.9(d，J＝2.2Hz，1H)8.2(d，J＝5.3Hz，1H)8.5(s，1H)8.8(d，J＝7.0Hz，1H)9.5(s，1H)10.3(s，1H).ES-LC/MS m/z 604[M+H]+. 實(shí)施例13N-[3-(3-{2-[(3-{[3-(1-吡咯烷基)丙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A.4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[3-(1-吡咯烷基)丙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺
該化合物如實(shí)施例10步驟D中所述通過用吡咯烷進(jìn)行氯置換從N-(3-{3-[2-({3-[(3-氯丙基)氧基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺(參見實(shí)施例11步驟A)合成，以87％收率得到橙色固體。ES-LC/MS m/z 506[M+H]+。
步驟B.N-[3-(3-{2-[(3-{[3-(1-吡咯烷基)丙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 標(biāo)題化合物如實(shí)施例10步驟E中所述用2-噻吩基乙酰氯進(jìn)行?；瘡?-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[3-(1-吡咯烷基)丙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺合成，以51％收率得到淺棕色固體。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 1.6(s，4H)1.8(s，2H)2.4(s，4H)3.9(s，2H)3.9(d，J＝6.2Hz，2H)6.5(m，2H)7.0(m，2H)7.1(m，2H)7.3(ddd，J＝6.3，1.3，1.2Hz，2H)7.4(m，3H)7.5(t，J＝2.3Hz，1H)7.7(m，1H)7.9(d，J＝1.8Hz，1H)8.2(d，J＝5.1Hz，1H)8.5(s，1H)8.8(m，1H)9.5(s，1H)10.3(s，1H).ES-LC/MS m/z 630[M+H]+. 實(shí)施例14N-[3-(3-{2-[(3-{[2-(二乙基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A.4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[2-(二乙基氨基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺
標(biāo)題化合物如實(shí)施例10步驟D中所述通過用二乙胺進(jìn)行氯置換從N-(3-{3-[2-({3-[(2-氯乙基)氧基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺(參見實(shí)施例10步驟C)合成，以76％收率得到橙色固體。ES-LC/MS m/z 494[M+H]+。
步驟B.N-[3-(3-{2-[(3-{[2-(二乙基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 標(biāo)題化合物如實(shí)施例10步驟E中所述用2-噻吩基乙酰氯進(jìn)行酰化從4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[2-(二乙基氨基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺合成，以49％收率得到淺棕色固體。
1HNMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 1.2(t，J＝7.2Hz，6H)3.2(s，4H)3.5(s，2H)3.9(s，2H)4.3(s，2H)6.5(d，J＝5.3Hz，1H)6.6(s，1H)7.0(m，2H)7.1(d，J＝1.5Hz，1H)7.3(d，J＝5.1Hz，1H)7.4(m，2H)7.5(m，1H)7.6(s，1H)7.7(s，1H)7.9(s，1H)8.2(d，J＝5.3Hz，1H)8.5(s，1H)8.8(d，J＝7.0Hz，1H)9.6(s，2H)10.4(s，1H).ES-LC/MS m/z 618[M+H]+. 實(shí)施例15N-[3-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A.4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺
標(biāo)題化合物如實(shí)施例10步驟D中所述通過用二甲胺進(jìn)行氯置換從N-(3-{3-[2-({3-[(2-氯乙基)氧基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺(參見實(shí)施例10步驟C)合成，以85％收率得到橙色固體。ES-LC/MS m/z 466[M+H]+。
步驟B.N-[3-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物)。
標(biāo)題化合物如實(shí)施例10步驟E中所述使用2-噻吩基乙酰氯進(jìn)行?；瘡?-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[2-(二乙基氨基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺合成，以57％收率得到淺棕色固體。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 2.8(s，5H)3.8(d，J＝0.9Hz，3H)3.9(s，1H)4.2(s，1H)6.5(d，J＝5.3Hz，1H)6.6(s，1H)6.9(m，6H)7.1(s，3H)7.2(s，1H)7.4(m，1H)7.6(s，1H)7.7(s，1H)7.9(s，1H)8.2(d，J＝5.5Hz，1H)8.5(s，1H)8.8(m，1H)9.6(s，1H)10.4(s，1H).ES-LC/MS m/z 590[M+H]+. 實(shí)施例16N-(3-{3-[2-(1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A2，2，2-三氟-N-[2-(4-硝基苯基)乙基]乙酰胺
將TFAA(17.0g，83，4mmol)滴加到保持在0℃的[2-(4-硝基苯基)乙基]胺鹽酸鹽和TEA(35mL，252.0mmol)在DCM(500mL)中的懸浮液中。在1小時內(nèi)使反應(yīng)回溫到rt。真空除去溶劑并將殘余物在EtOAc和水之間分配。有機(jī)物用鹽水洗滌并用Na2SO4干燥。真空除去溶劑，得到21.9g(100％)的酰化的胺。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.50(m，1H)，8.16(d，J＝8.6Hz，2H)，7.49(d，J＝8.7Hz，2H)，3.47(q，J＝6.4Hz，2H)，2.94(t，J＝7.1Hz，2H). 步驟B7-硝基-2-(三氟乙酰基)-1，2，3，4-四氫異喹啉
2，2，2-三氟-N-[2-(4-硝基苯基)乙基]乙酰胺(21.9g，83,4mmol)溶解于HOAc(80mL)和硫酸(120mL)中和低聚甲醛(4.0g，125mmol)在rt加入。將溶液在rt攪拌24h。在攪拌下將反應(yīng)小心地傾倒入約1L的冰中。將得到的棕色泥漿懸浮液提取到EtOAc中。有機(jī)物用飽和NaHCO3水溶液、鹽水洗滌并且用MgSO4干燥。除去溶劑并將棕色固體與己烷一起研磨。將棕色固體真空干燥，得到15g(66％)的期望的四氫異喹啉產(chǎn)物。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.25(d，J＝27.0Hz，1H)，8.05(m，1H)，7.47(d，J＝8.5Hz，1H)，4.88(d，J＝18.1Hz，2H)，3.81(m，2H)，3.06-2.97(m，2H). 步驟C2-(三氟乙酰基)-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉胺
7-硝基-2-(三氟乙?；?-1，2，3，4-四氫異喹啉(15g，54.7mmol)與5％Pd/C(1.5g)在EtOAc(50mL)中在氫氣下(1大氣壓)劇烈攪拌15h，然后過濾通過硅藻土。將濾液真空濃縮，得到11.2g(84％)的棕黃色固體2-(三氟乙?；?-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉胺。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ6.84-6.79(m，1H)，6.46-6.40(m，1H)，6.35(m，1H)，4.95(s，2H)，4.56(s，2H)，3.76-3.68(m，2H)，2.74-2.66(m，2H). 步驟D2-(2-噻吩基)-N-{3-[3-(2-{[1-(三氟乙?；?-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}乙酰胺
該化合物如實(shí)施例2步驟E中所述(在160℃微波處理10分鐘)通過用2-(三氟乙?；?-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉胺進(jìn)行氯置換從N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并-[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(參見實(shí)施例2步驟B)合成。通過柱色譜法純化，使用0-30％梯度的EtOAc/MeOH，以31％收率得到產(chǎn)物，為淺棕黃色固體。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.38(s，1H)，9.68(s，1H)，8.84(d，1H)，8.47(m，1H)，8.24(d，1H)，7.90(s，1H)，7.74(s，2H)，7.44(m，4H)，7.29(d，1H)，7.13(m，2H)，6.97(s，2H)，6.50(d，1H)，4.69(s，2H)，3.88(s，2H)，3.38(m，2H)，2.88(m，2H).ES-LC/MS m/z＝654[M+H]+. 步驟EN-(3-{3-[2-(1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 將2-(2-噻吩基)-N-{3-[3-(2-{[1-(三氟乙酰基)-1，2，3，4-四氫-7-喹啉基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}乙酰胺(0.075g，0.11mmol)和LiOH(50mg，1.2mmol)在MeOH(10mL)中的溶液攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)干并將粗物質(zhì)承載在DCM中，并且用鹽水洗滌。通過柱色譜法純化，使用0-30％梯度的EtOAc/MeOH，以42％收率得到產(chǎn)物，為黃色固體。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.36(s，1H)，9.41(s，1H)，8.83(d，1H)，8.48(d，1H)，8.22(d，1H)，7.89(s，1H)，7.75(d，2H)，7.43(m，5H)，7.28(d，1H)，7.12(t，1H)，6.97(m，3H)，6.44(d，1H)，3.88(s，2H)，3.77(s，2H)，2.93(t，2H)，2.62(m，2H).ES-LC/MS m/z＝558[M+H]+. 實(shí)施例17N-{3-[3-(2-{[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(3-噻吩基)乙酰胺
步驟A.2，2，2-三氟-N-{3-[3-(2-{[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}乙酰胺
向N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(1.0g，0.002mol)(參見實(shí)施例1步驟C)在1，4-二氧雜環(huán)己烷(25mL)和i-PrOH(5mL)中的溶液加入3-(1，3-噁唑-5-基)苯胺(1.15g，0.007mols)隨后加入催化用12M HCl。在90℃加熱過夜之后，反應(yīng)用飽和的NaHCO3(25mL)猝滅，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，水層用DCM(25mL)提取，將有機(jī)層濃縮，并且通過柱色譜法純化(含5-50％EtOAc的己烷，然后用100％EtOAc)，得到產(chǎn)物(0.89g，69％)，為灰白色固體。ES-LC/MSm/z＝542[M+H]+。
步驟B.4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]-2-嘧啶胺的制備
將2，2，2-三氟-N-{3-[3-(2-{[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}乙酰胺(0.89g，0.002mols)和1M LiOH(8.22mL，0.008mols)在10∶1 THP∶水(20mL)中的溶液在60℃加熱5h。反應(yīng)用鹽水(25mL)洗滌，分離有機(jī)層，水層用EtOAc(25mL)提取，將有機(jī)層合并，過濾通過棉塞，并通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑。粗產(chǎn)物通過柱色譜法純化(含5％-75％EtOAc的己烷，然后用100％EtOAc)，得到苯胺(0.70g，96％)，為淺黃色泡沫狀物。ES-LC/MS m/z＝446[M+H]+。
步驟C.N-{3-[3-(2-{[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(3-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物)的制備 向4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]-2-嘧啶胺(50mg，0.112mmol)在5∶1 THF∶DMA(2mL)中的溶液加入HOBT(46mg，0.34mmol)、0.28g聚苯乙烯結(jié)合的碳二亞胺樹脂(280mg，0.34mmol)，和3-噻吩基乙酸(48mg，0.34mmol)。在rt攪拌48h之后，加入過量的Dowex 550A OH陰離子交換樹脂并使得到的混合物攪拌過夜。然后通過真空過濾濾出固體并且用THF(25mL)和MeOH(25mL)漂洗。將濾液減壓濃縮并且通過質(zhì)譜指導(dǎo)的(mass-guided prep LC)制備性LC(C18，15％H2O(含0.1％甲酸)/CH3OH到100％CH3OH梯度)純化，得到標(biāo)題化合物(30mg，47％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.65(s，2H)，6.51(d，1H，J＝5.37Hz)，7.07-7.12(m，2H)，7.23-7.48(m，7H)，7.55(s，1H)，7.68-7.76(m，2H)，7.89(s，1H)，8.20(s，1H)，8.27(d，1H，J＝5.37Hz)，8.38(s，1H)，8.50-8.51(m，1H)，8.81(d，1H，J＝6.84Hz)，9.73(s，1H)，10.28(s，1H).ES-LC/MS m/z＝570[M+H]+.. 實(shí)施例182-(1H-吲哚-3-基)-N-{3-[3-(2-{[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]氨基)-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}乙酰胺
向4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]-2-嘧啶胺(50mg，0.112mmol)(參見實(shí)施例17步驟B)在5∶1THF∶DMA(2mL)中的溶液加入HOBT(46mg，0.34mmol)、0.28g聚苯乙烯結(jié)合的碳二亞胺樹脂(280mg，0.34mmol)、和1H-吲哚-3-基乙酸(59mg，0.34mmol)。在rt攪拌48h之后，加入過量的Dowex 550A OH陰離子交換樹脂并使得到的混合物攪拌過夜。然后通過真空過濾濾出固體并且用THF(25mL)和MeOH(25mL)漂洗。將濾液減壓濃縮并且通過質(zhì)量導(dǎo)向的制備型LC(mass-guided prep LC)(C18，15％H2O(含0.1％甲酸)/CH3OH到100％CH3OH梯度)純化，得到標(biāo)題化合物(34.5mg，51％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.72(s，2H)，6.50(d，1H，J＝5.37Hz)，6.95-6.98(m，1H)，7.04-7.11(m，2H)，7.22-7.41(m，5H)，7.55(s，1H)，7.59(d，1H，J＝7.81Hz)，7.68-7.69(m，1H)，7.74-7.76(m，1H)，7.90(s，1H)，8.19(s，1H)，8.25(d，1H，J＝5.37Hz)，8.38(s，1H)，8.49-8.51(m，1H)，8.81(d，1H，J＝6.84Hz)，9.72(s，1H)，10.26(s，1H)，10.90(s，1H).ES-LC/MS m/z＝603[M+H]+.. 實(shí)施例192-(3-甲基-5-異噁唑基)-N-{3-[3-(2-{[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]氨基)-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}乙酰胺
向4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]-2-嘧啶胺(50mg，0.112mmol)(參見實(shí)施例17步驟B)在5∶1THF∶DMA(2mL)中的溶液加入HOBT(46mg，0.34mmol)、0.28g聚苯乙烯結(jié)合的碳二亞胺樹脂(280mg，0.34mmol)、和(3-甲基-5-異噁唑基)乙酸(48mg，0.34mmol)。在rt攪拌48h之后，加入過量的Dowex 550AOH陰離子交換樹脂并將得到的混合物攪拌過夜。然后通過真空過濾濾出固體并且用THF(25mL)和MeOH(25mL)漂洗。將濾液減壓濃縮并且通過質(zhì)量導(dǎo)向的制備型LC(C18，15％H2O(含0.1％甲酸)/CH3OH-100％CH3OH梯度)純化，得到標(biāo)題化合物(39mg，61％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.19(s，3H)，3.88(s，2H)，6.25(s，1H)，6.50(d，1H，J＝5.37Hz)，7.09-7.12(m，1H)，7.29-7.45(m，5H)，7.55(s，1H)，7.69-7.73(m，2H)，7.87(s，1H)，8.19(s，1H)，8.27(d，1H，J＝5.37Hz)，8.38(s，1H)，8.50-8.51(m，1H)，8.81(d，1H，J＝7.32Hz)，9.73(s，1H)，10.44(s，1H).ES-LC/MS m/z＝569[M+H]+. 實(shí)施例202-(2，6-二氟苯基)-N-{3-[3-(2-{[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}乙酰胺
向4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]-2-嘧啶胺(50mg，0.112mmol)(參見實(shí)施例17步驟B)在5∶1THF∶DMA(2mL)中的溶液加入HOBT(46mg，0.34mmol)、0.28g聚苯乙烯結(jié)合的碳二亞胺樹脂(280mg，0.34mmol)、和(2，6-二氟苯基)乙酸(58mg，0.34mmol)。在rt攪拌48h之后，加入過量的Dowex 550A OH陰離子交換樹脂并將得到的混合物攪拌過夜。然后通過真空過濾濾出固體并且用THF(25mL)和MeOH(25mL)漂洗。將濾液減壓濃縮并且通過質(zhì)量導(dǎo)向的制備型LC(C18，15％H2O(含0.1％甲酸)/CH3OH到100％CH3OH梯度)純化，得到標(biāo)題化合物(44.5mg，66％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.77(s，2H)，6.51(d，1H，J＝5.37Hz)，7.07-7.11(m，3H)，7.26-7.43(m，6H)，7.56(s，1H)，7.69-7.74(m，2H)，7.87(s，1H)，8.20(s，1H)，8.27(d，1H，J＝5.37Hz)，8.38(s，1H)，8.51-8.53(m，1H)，8.81(d，1H，J＝6.84Hz)，9.73(s，1H)，10.44(s，1H).ES-LC/MS m/z＝600[M+H]+. 實(shí)施例21N-{3-[3-(2-{[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(3-吡啶基)乙酰胺
向4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]-2-嘧啶胺(50mg，0.112mmol)(參見實(shí)施例17步驟B)在5∶1THF∶DMA(2mL)中的溶液加入HOBT(46mg，0.34mmol)、0.28g聚苯乙烯結(jié)合的碳二亞胺樹脂(280mg，0.34mmol)、和3-吡啶基乙酸(46mg，0.34mmol)。在rt攪拌48h之后，加入過量的Dowex 550A OH陰離子交換樹脂并將得到的混合物攪拌過夜。然后通過真空過濾濾出固體并且用THF(25mL)和MeOH(25mL)漂洗。將濾液減壓濃縮并且通過質(zhì)量導(dǎo)向的制備型LC(C18，15％H2O(含0.1％甲酸)/CH3OH到100％CH3OH梯度)純化，得到標(biāo)題化合物(27.8mg，44％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.70(s，2H)，6.50(d，1H，J＝5.37Hz)，7.09-7.11(m，1H)，7.26(d，1H，J＝7.32Hz)，7.30-7.43(m，5H)，7.55(s，1H)，7.69-7.74(m，3H)，7.88(s，1H)，8.19(s，1H)，8.27(d，1H，J＝5.37Hz)，8.38(s，1H)，8.43-8.44(m，1H)，8.51(s，2H)，8.81(d，1H，J＝6.84Hz)，9.73(s，1H)，10.39(s，1H).ES-LC/MS m/z＝565[M+H]+. 實(shí)施例22N-{3-[3-(2-{[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(4-吡啶基)乙酰胺
向4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]-2-嘧啶胺(50mg，0.112mmol)(參見實(shí)施例17步驟B)在5∶1THF∶DMA(2mL)中的溶液加入HOBT(46mg，0.34mmol)、0.28g聚苯乙烯結(jié)合的碳二亞胺樹脂(280mg，0.34mmol)、和4-吡啶基乙酸(46mg，0.34mmol)。在rt攪拌48h之后，加入過量的Dowex 550A OH陰離子交換樹脂并將得到的混合物攪拌過夜。然后通過真空過濾濾出固體并且用THF(25mL)和MeOH(25mL)漂洗。將濾液減壓濃縮并且通過質(zhì)量導(dǎo)向的制備型LC(C18，15％水(含0.1％甲酸)/CH3OH到100％CH3OH梯度)純化，得到標(biāo)題化合物(36.3mg，57％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.70(s，2H)，6.51(d，1H，J＝5.37Hz)，7.09-7.11(m，1H)，7.27-7.43(m，7H)，7.55(s，1H)，7.68-7.73(m，2H)，7.89(s，1H)，8.19(s，1H)，8.27(d，1H，J＝5.37Hz)，8.38(s，1H)，8.48-8.51(m，3H)，8.81(d，1H，J＝6.84Hz)，9.73(s，1H)，10.40(s，1H).ES-LC/MSm/z＝565[M+H]+. 實(shí)施例23N-{3-[3-(2-{[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-吡啶基)乙酰胺
向4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-[3-(1，3-噁唑-5-基)苯基]-2-嘧啶胺(50mg，0.112mmol)(參見實(shí)施例17步驟B)在5∶1THF∶DMA(2mL)中的溶液加入HOBT(46mg，0.34mmol)、0.28g聚苯乙烯結(jié)合的碳二亞胺樹脂(280mg，0.34mmol)、和2-吡啶基乙酸(46mg，0.34mmol)。在rt攪拌48h之后，加入過量的Dowex 550A OH陰離子交換樹脂并將得到的混合物攪拌過夜。然后通過真空過濾濾出固體并且用THF(25mL)和MeOH(25mL)漂洗。將濾液減壓濃縮并且通過質(zhì)量導(dǎo)向的制備型LC(C18，15％水(含0.1％甲酸)/CH3OH到100％CH3OH梯度)純化，得到標(biāo)題化合物(20.7mg，33％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.84(s，2H)，6.51(d，1H，J＝5.37Hz)，7.10(t，1H，J＝6.84Hz)，7.24-7.43(m，7H)，7.56(s，1H)，7.69-7.76(m，3H)，7.91(s，1H)，8.20(s，1H)，8.27(d，1H，J＝4.88Hz)，8.38(s，1H)，8.48-8.53(m，2H)，8.81(d，1H，J＝6.84Hz)，9.73(s，1H)，10.40(s，1H).ES-LC/MS m/z＝565[M+H]+. 實(shí)施例24N-(3-{3-[2-({3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}-氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2-(3-噻吩基)乙酰胺
步驟A.4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}-2-嘧啶胺
向N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(3.0g，0.007mols)(參見實(shí)施例1步驟C)在1，4-二氧雜環(huán)己烷(60mL)和i-PrOH(60mL)中的溶液加入3-[(二甲基氨基)甲基]苯胺(1.61g，0.011mol)，隨后加入催化用12M HCl。在90℃加熱四天之后，反應(yīng)用飽和的NaHCO3(100mL)猝滅，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，水層用DCM提取(3×200mL)，將有機(jī)層濃縮，并且通過柱色譜法純化(0-100％9∶1∶0.1DCM∶MeOH∶NH4OH)，得到產(chǎn)物(1.25g，40％)為棕黃色泡沫狀物。ES-LC/MS m/z＝436[M+H]+。
步驟B.N-(3-{3-[2-({3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2-(3-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 向4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}-2-嘧啶胺(50mg，0.115mmol)在5∶1THF∶DMA(2mL)中的溶液加入HOBT(46mg，0.34mmol)、0.28g聚苯乙烯結(jié)合的碳二亞胺樹脂(280mg，0.34mmol)、和3-噻吩基乙酸(48mg，0.34mmol)。在rt攪拌48h之后，加入過量的Dowex 550A OH陰離子交換樹脂并將得到的混合物攪拌過夜。然后通過真空過濾濾出固體并且用THF(25mL)和MeOH(25mL)漂洗。將濾液減壓濃縮并且通過柱色譜法純化(0-100％9∶1∶0.1DCM∶MeOH∶NH4OH)，得到標(biāo)題化合物(32mg，50％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.27(s，6H)，3.46(s，2H)，3.78(s，2H)，6.54(d，1H，J＝5.31Hz)，6.90(dd，1H，J＝1.47，6.96Hz)，6.99-7.00(m，1H)，7.06(dd，1H，J＝1.28，4.94Hz)，7.22-7.38(m，8H)，7.53-7.56(m，2H)，7.61-7.63(m，1H)，7.77-7.80(m，1H)，8.16(d，1H，J＝5.31Hz)，8.32-8.35(m，1H)，8.46-8.48(m，1H).ES-LC/MS m/z＝560[M+H]+. 實(shí)施例252-(2，6-二氟苯基)-N-(3-{3-[2-({3-[(二甲基氨基)甲基]-苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)乙酰胺
向4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}-2-嘧啶胺(50mg，0.115mmol)(參見實(shí)施例24步驟A)在5∶1THF∶DMA(2mL)中的溶液加入HOBT(46mg，0.34mmol)、0.28g聚苯乙烯結(jié)合的碳二亞胺樹脂(280mg，0.34mmol)、和(2，6-二氟苯基)乙酸(59mg，0.34mmol)。在rt攪拌48h之后，加入過量的Dowex 550A OH陰離子交換樹脂并將得到的混合物攪拌過夜。然后通過真空過濾濾出固體并且用THF(25mL)和MeOH(25mL)漂洗。將濾液減壓濃縮并且通過柱色譜法純化(DCM0-100％90∶9∶1DCM∶MeOH∶NH4OH)(aq)，得到標(biāo)題化合物(37.7mg，56％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.11(s，6H)，3.31(s，2H)，3.76(s，2H)，6.45(d，1H，J＝5.31Hz)，6.84(d，1H，J＝7.33Hz)，7.04-7.19(m，4H)，7.24(d，1H，J＝7.87Hz)，7.31-7.46(m，3H)，7.61(d，1H，J＝7.14Hz)，7.68(s，1H)，7.70-7.73(m，1H)，7.85-7.86(m，1H)，8.22(d，1H，J＝5.31Hz)，8.49-8.51(m，1H)，8.79(d，1H，J＝6.96Hz)，9.51(s，1H)，10.42(s，1H).ES-LC/MS m/z＝590[M+H]+. 實(shí)施例26N-(3-{3-[2-({3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2-(3-吡啶基)乙酰胺
向4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}-2-嘧啶胺(50mg，0-115mmol)(參見實(shí)施例24步驟A)在5∶1THF∶DMA(2mL)中的溶液加入HOBT(46mg，0.34mmol)、0.28g聚苯乙烯結(jié)合的碳二亞胺樹脂(280mg，0.34mmol)、和3-吡啶基乙酸(47mg，0.34mmol)。在rt攪拌48h之后，加入過量的Dowex 550A OH陰離子交換樹脂并將得到的混合物攪拌過夜。然后通過真空過濾濾出固體并且用THF(25mL)和MeOH(25mL)漂洗。將濾液減壓濃縮并且通過柱色譜法純化(DCM0-100％90∶9∶1DCM∶MeOH∶NH4OH(aq))，得到標(biāo)題化合物(43.8mg，69％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.12(s，6H)，3.34(s，2H)，3.68(s，2H)，6.45(d，1H，J＝5.31Hz)，6.85(d，1H，J＝7.51Hz)，7.10(dd，1H，J＝1.28，6.78Hz)，7.14-7.18(m，1H)，7.23-7.25(m，1H)，7.30-7.34(m，1H)，7.37-7.46(m，2H)，7.61-7.62(m，1H)，7.68-7.74(m，3H)，7.86-7.87(m，1H)，8.22(d，1H，J＝5.31Hz)，8.42-8.43(m，1H)，8.48-8.50(m，2H)，8.80(d，1H，J＝6.96Hz)，9.52(s，1H)，10.37(s，1H).ES-LC/MS m/z＝555[M+H]+. 實(shí)施例27N-(3-{3-[2-({3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2-(2-吡啶基)乙酰胺
向4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}-2-嘧啶胺(50mg，0.115mmol)(參見實(shí)施例24步驟A)在5∶1THF∶DMA(2mL)中的溶液加入HOBT(46mg，0.34mmol)、0.28g聚苯乙烯結(jié)合的碳二亞胺樹脂(280mg，0.34mmol)、和2-吡啶基乙酸(47mg，0.34mmol)。在rt攪拌48h之后，加入過量的Dowex 550A OH陰離子交換樹脂并將得到的混合物攪拌過夜。然后通過真空過濾濾出固體并且用THF(25mL)和MeOH(25mL)漂洗。將濾液減壓濃縮并且通過柱色譜法純化(DCM0-100％90∶9∶1DCM∶MeOH∶NH4OH(aq))，得到標(biāo)題化合物(35.2mg，55％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.13(s，6H)，3.34(s，2H)，3.84(s，2H)，6.46(d，1H，J＝5.31Hz)，6.86(d，1H，J＝6.95Hz)，7.10(dd，1H，J＝1.28，6.77Hz)，7.16-7.20(m，1H)，7.24-7.27(m，2H)，7.37-7.48(m，3H)，7.62-7.64(m，1H)，7.70-7.77(m，3H)，7.90-7.91(m，1H)，8.22(d，1H，J＝5.31Hz)，8.47-8.53(m，2H)，8.81(d，1H，J＝6.95Hz)，9.53(s，1H)，10.39(s，1H).ES-LC/MS m/z＝555[M+H]+. 實(shí)施例28N-(3-{3-[2-({3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2-(3-甲基-5-異噁唑基)乙酰胺
向4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}-2-嘧啶胺(50mg，0.115mmol)(參見實(shí)施例24步驟A)在5∶1THF∶DMA(2mL)中的溶液加入HOBT(46mg，0.34mmol)、0.28g聚苯乙烯結(jié)合的碳二亞胺樹脂(280mg，0.34mmol)、和(3-甲基-5-異噁唑基)乙酸(49mg，0.34mmol)。在rt攪拌48h之后，加入過量的Dowex 550A OH陰離子交換樹脂并將得到的混合物攪拌過夜。然后通過真空過濾濾出固體并且用THF(25mL)和MeOH(25mL)漂洗。將濾液減壓濃縮并且通過柱色譜法純化(DCM0-100％90∶9∶1DCM∶MeOH∶NH4OH(aq))，得到標(biāo)題化合物(43.5mg，68％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.13(s，6H)，2.19(s，3H)，3.34(s，2H)，3.88(s，2H)，6.25(s，1H)，6.47(d，1H，J＝5.31Hz)，6.87(d，1H，J＝7.32Hz)，7.10-7.20(m，2H)，7.28-7.30(m，1H)，7.41-7.48(m，2H)，7.62-7.64(m，1H)，7.69-7.74(m，2H)，7.86-7.87(m，1H)，8.24(d，1H，J＝5.31Hz)，8.50-8.52(m，1H)，8.82(d，1H，J＝6.77Hz)9.53(s，1H)，10.43(s，1H).ES-LC/MS m/z＝559[M+H]+. 實(shí)施例29N-(3-{3-[2-({3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2-(5-甲基-2-苯基-1，3-噻唑-4-基)乙酰胺
向4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}-2-嘧啶胺(50mg，0.115mmol)(參見實(shí)施例24步驟A)在5∶1THF∶DMA(2mL)中的溶液加入HOBT(46mg，0.34mmol)、0.28g聚苯乙烯結(jié)合的碳二亞胺樹脂(280mg，0.34mmol)、和(5-甲基-2-苯基-1，3-噻唑-4-基)乙酸(80mg，0.34mmol)。在rt攪拌48h之后，加入過量的Dowex550A OH陰離子交換樹脂并將得到的混合物攪拌過夜。然后通過真空過濾濾出固體并且用THF(25mL)和MeOH(25mL)漂洗。將濾液減壓濃縮并且通過柱色譜法純化(DCM0-100％90∶9∶1DCM∶MeOH∶NH4OH(aq))，得到標(biāo)題化合物(50.1mg，67％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.11(s，6H)，2.43(s，3H)，3.31(s，2H)，3.81(s，2H)，6.45(d，1H，J＝5.31Hz)，6.84(d，1H，J＝6.96Hz)，7.08-7.11(m，1H)，7.14-7.18(m，1H)，7.23-7.25(m，1H)，7.38-7.46(m，5H)，7.59-7.62(m，1H)，7.68(s，1H)，7.75-7.81(m，3H)，7.89(s，1H)，8.21(d，1H，J＝5.49Hz)，8.48-8.51(m，1H)，8.79(d，1H，J＝6.96Hz)9.50(s，1H)，10.35(s，1H).ES-LC/MS m/z＝651[M+H]+. 實(shí)施例30N-[3-(4-氟-3-{2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A1-氨基-3-氟吡啶鎓硝酸鹽
向氧化鋇(7.1g)和硝酸鋇(8.1g)的水(50mL)溶液加入3-氟吡啶(8.0g)。在5分鐘內(nèi)向溶液滴加含硫酸羥胺(8.2g)的水(20mL)。將反應(yīng)加熱到90℃，維持12h。過濾除去沉淀物并將濾液濃縮，得到粗的棕色粘性固體(7.0g，77％收率)。將粗的1-氨基-3-氟吡啶鎓硝酸鹽不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步。
步驟BN-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-4-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺和N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺
向N-[3-(2-氯-嘧啶-4-基乙炔基)-苯基]-2，2，2-三氟-乙酰胺(參見實(shí)施例1步驟B)(5.0g)在DMF(40mL)中的溶液加入1-氨基-3-氟吡啶鎓硝酸鹽(5.4g)和K2CO3(6.0g)。將反應(yīng)保持在RT攪拌1.5h。將DMF溶液傾倒在5％LiCl溶液(60mL)中并且用EtOAc提取(2×30mL)。合并的有機(jī)相干燥(Na2SO4)并且濃縮。粗產(chǎn)物通過硅膠柱色譜法分離，得到兩種產(chǎn)物。首先洗脫的是N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(2.0g，30％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.08(d，1H，J＝5.49Hz)，7.45(d，1H，J＝7.68Hz)，7.55(t，1H，J＝7.96Hz)，7.73-7.79(m，1H)，7.83(d，1H，J＝0.91Hz)，7.95(t，1H，J＝1.74Hz)，8.41(dd，1H，J＝9.97，5.76Hz)，8.49(d，1H，J＝5.49Hz)，9.27(dd，1H，J＝4.30，2.29Hz).ES-LC/MS m/z＝436[M+H]+. 隨后洗脫的是N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-4-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(2.67g，40％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.09-7.15(m，1H)，7.32-7.41(m，2H)，7.45(t，1H，J＝7.96Hz)，7.55(dd，1H，J＝5.12，2.56Hz)，7.68-7.74(m，1H)，7.92(t，1H，J＝1.83Hz)，8.72(d，1H，J＝5.12Hz)，8.78(d，1H，J＝6.77Hz)，11.31(s，1H).ES-LC/MS m/z＝436[M+H]+. 步驟C3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-4-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯胺
向N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-4-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(0.40g)在THF(27mL)和水(3mL)中的溶液加入5％LiOH溶液(2.3mL)。將反應(yīng)保持在RT攪拌15h并且用飽和NaHCO3溶液(20mL)處理并且用EtOAc(2×20mL)提取。將有機(jī)相干燥(Na2SO4)并且濃縮，得到粗的3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-4-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯胺(0.30g，95％收率)，為黃色固體。ES-LC/MS m/z＝340[M+H]+。
步驟DN-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-4-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
向3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-4-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯胺(0.28g)在THF(15mL)中的溶液加入2-噻吩基乙酰氯(0.16g)。將反應(yīng)保持在RT攪拌0.5h并且用飽和NaHCO3溶液(8mL)處理。在用EtOAc(2×10mL)提取、用Na2SO4干燥并且濃縮之后，粗的混合物通過硅膠柱色譜法純化，得到N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-4-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺，為黃色固體(0.36g，95％)。ES-LC/MS m/z＝464[M+H]+。
步驟EN-[3-(4-氟-3-{2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 向N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-4-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(0.080g)在i-PrOH(5mL)中的溶液加入2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉胺(0.041g)和2滴濃鹽酸。將反應(yīng)在密封管中在180℃微波處理10min。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去i-PrOH并將殘余物用飽和NaHCO3(5mL)處理，用EtOAc(2×5mL)提取，并且干燥(Na2SO4)。濃縮并且用柱色譜法純化得到標(biāo)題化合物，為白色固體(0.060g，60％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.25(s，3H)，2.63(s，2H)，3.17(s，2H)，3.84(s，2H)，6.80(s，1H)，6.89(dd，1H，J＝4.94，3.11Hz)，6.95(d，2H，J＝3.66Hz)，6.99-7.05(m，1H)，7.08(d，1H，J＝7.68Hz)，7.18(s，1H)，7.24-7.30(m，2H)，7.35-7.37(m，1H)，7.58(d，1H，J＝1.10Hz)，8.05(t，1H，J＝1.83Hz)，8.44(d，1H，J＝5.12Hz)，8.72(d，1H，J＝6.95Hz)，9.39(s，1H)，10.32(s，1H).ES-LC/MS m/z＝590[M+H]+. 實(shí)施例31N-[3-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}-4-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
標(biāo)題化合物使用實(shí)施例30步驟E中所述的方法從N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-4-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(參見實(shí)施例30步驟D)(0.080g)和3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯胺(0.062g)合成。標(biāo)題化合物作為白色固體分離得到(0.056g，55％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.13(s，6H)，2.52(t，2H，J＝6.13Hz)，3.83(s，2H)，3.87(t，2H，J＝6.13Hz)，6.42(d，1H，J＝8.17Hz)，6.85(dd，1H，J＝4.74，2.26Hz)，6.95(m，2H)，7.01(m，3H)，7.12(m，1H)，7.28(m，2H)，7.35(m，1H)，7.40(s，1H)，7.56(m，1H)，7.98(s，1H)，8.45(d，1H，J＝4.94Hz)，8.72(d，1H，J＝6.95Hz)，9.55(s，1H)，10.29(s，1H).ES-LC/MS m/z＝608[M+H]+. 實(shí)施例32N-[3-(4-氟-3-{2-[(3-氟苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
標(biāo)題化合物使用實(shí)施例30步驟E中所述的方法從N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-4-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(參見實(shí)施例30步驟D)(0.080g)和3-氟苯胺(0.041g)合成。標(biāo)題化合物作為白色固體分離得到(0.059g，65％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.83(s，2H)，6.60(m，1H)，6.94(m，2H)，7.01-7.12(m，3H)，7.21-7.31(m，3H)，7.49-7.58(m，2H)，7.97(s，1H)，8.50(d，1H，J＝5.03Hz)，8.73(d，1H，J＝6.70Hz)，9.78(s，1H)，10.27(s，1H).ES-LC/MS m/z ＝539[M+H]+. 實(shí)施例33N-[3-(6-氟-3-{2-[(3-氟苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯胺
標(biāo)題化合物使用實(shí)施例30步驟C中所述的方法從N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(參見實(shí)施例30步驟B)(0.32g)合成。粗的3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯胺作為黃色固體分離得到(0.24g，96％收率)。ES-LC/MSm/z＝340[M+H]+。
步驟BN-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
標(biāo)題化合物使用實(shí)施例30步驟D中所述的方法從3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯胺(0.20g)合成，為黃色固體(0.26g，96％收率)。ES-LC/MS m/z＝464[M+H]+。
步驟CN-[3-(6-氟-3-{2-[(3-氟苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 標(biāo)題化合物使用實(shí)施例30步驟E中所述的方法從N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(0.070g)和3-氟苯胺(0.033g)合成。標(biāo)題化合物作為白色固體分離得到(0.048g，66％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.84(s，2H)，6.54(d，1H，J＝5.52Hz)，6.70(m，1H)，6.94(m，2H)，7.24(m，2H)，7.34-7.45(m，3H)，7.60(m，1H)，7.68-7.77(m，2H)，7.87(s，1H)，8.29(d，1H，J＝5.52Hz)，8.51(m，1H)，9.16(m，1H)，9.81(s，1H)，10.32(s，1H).ES-LC/MS m/z＝539[M+H]+. 實(shí)施例34N-[3-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}-6-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
標(biāo)題化合物使用實(shí)施例30步驟E中所述的方法從N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(實(shí)施例33步驟B)(0.070g)和3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯胺(0.057g)合成。標(biāo)題化合物作為白色固體分離得到(0.050g，55％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.15(s，6H)，2.56(t，2H，J ＝6.08Hz)，3.84(s，2H)，3.95(t，2H，J＝6.08Hz)，6.46(d，1H，J＝5.69Hz)，6.51(m，1H)，6.95(m，1H)，7.12(t，1H，J＝8.85Hz)，7.23(m，2H)，7.35(m，1H)，7.40(t，1H，J＝7.90Hz)，7.50(s，1H)，7.59(m，1H)，7.71(m，1H)，7.86(s，1H)，8.24(d，1H，J＝5.69Hz)，8.53(m，1H)，9.15(m，1H)，9.56(s，1H)，10.32(s，1H).ES-LC/MS m/z＝608[M+H]+. 實(shí)施例35N-[3-(6-氟-3-{2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
標(biāo)題化合物使用實(shí)施例30步驟E中所述的方法從N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(實(shí)施例33步驟B)(0.070g)和2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉胺(0.036g)合成。標(biāo)題化合物作為白色固體分離得到(0.048g，55％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.28(s，3H)，2.55(m，2H)，2.71(m，2H)，3.11(m，1H)，3.35(s，1H)，3.84(s，2H)，6.18(s，1H)，6.31(m，1H)，6.44(d，1H，J＝5.50Hz)，6.94(m，2H)，7.23(m，1H)，7.34-7.45(m，2H)，7.55(m，1H)，7.71(d，1H，J＝8.79Hz)，7.87(s，1H)，8.21(d，1H，J＝5.41Hz)，8.48(s，1H)，9.14(m，1H)，9.43(s，1H)，10.34(s，1H).ES-LC/MS m/z＝590[M+H]+. 實(shí)施例36N-(5-{3-[2-({3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}-2-氟苯基)-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟AN-(5-溴-2-氟苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺
向4-氟-3-硝基溴苯(5.0g，23mmol)在無水EtOH(500mL)中的溶液加入SnCl2二水合物(31g，136mmol)并將得到的混合物rt攪拌過夜。減壓除去溶劑，并將殘余物懸浮于EtOAc中，用1N NaOH洗滌，并且過濾通過硅藻土墊。有機(jī)層通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，并且溶解于DCM(500mL)。向這個溶液中加入TEA(26mL，184mmol)和TFAA(6.5mL，46mmol)。在攪拌過夜之后，反應(yīng)用1N HCl洗滌，用Na2SO4干燥，濃縮并且通過柱色譜法純化，得到標(biāo)題化合物(5.6g，87％)，為白色固體。ES-LC/MS m/z＝287[M+H]+。
步驟B2，2，2-三氟-N-{2-氟-5-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]苯基}乙酰胺
在N2下向烘干的燒瓶中加入N-(5-溴-2-氟苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺(5.6g，20mmol)、脫氣的無水THF(200mL)、二氯雙(三苯膦)合鈀(II)(1.7g，2.5mmol)，碘化亞銅(I)(0.28g，1，5mmol)、和三甲基甲硅烷基乙炔(7.0mL，50mmol)。然后，滴加TEA(27mL，197mmol)并將得到的混合物在60℃加熱過夜。粗的反應(yīng)混合物吸附到硅膠上并且通過柱色譜法純化，得到期望的產(chǎn)物(5.3g，89％)，為灰白色固體。ES-LC/MS m/z＝302[M-H]-。
步驟CN-(5-乙炔基-2-氟苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺
2，2，2-三氟-N-{2-氟-5-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]苯基}乙酰胺(5.3g，17mmol)在THF(400mL)中的溶液冷卻到0℃，并且滴加1.0M的TBAF的THF溶液(17mL，17mmol)。將得到的混合物在0℃攪拌10min。將反應(yīng)用水(150mL)猝滅，減壓濃縮，并且用DCM提取。將合并的有機(jī)層減壓濃縮并將粗的固體不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一個反應(yīng)。ES-LC/MSm/z＝230[M-H]-。
步驟DN-{5-[(2-氯-4-嘧啶基)乙炔基]-2-氟苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺
在N2下向烘干的燒瓶中加入2，4-二氯嘧啶(5.1g，34mmol)、脫氣的無水THF(250mL)、二氯雙(三苯膦)合鈀(II)(595mg，0.85mmol)、碘化亞銅(I)(97mg，0.5mmol)、和TEA(9.5mL，68mmol)，并將得到的懸浮液加熱到60℃。滴加N-(5-乙炔基-2-氟苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺(3.9g，17mmol)的THF(100mL)溶液并將得到的混合物在60℃攪拌過夜。在16h之后，粗的反應(yīng)混合物過濾通過硅藻土，吸附在硅膠上，并且通過柱色譜法純化，得到期望的產(chǎn)物(4.6g，78％)，為灰白色固體。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.65(d，J＝5.1Hz，1H)，8.58(d，J＝7.3Hz，1H)，7.49(m，1H)，7.41(d，J＝5.0Hz，1H)，7.24(m，1H).ES-LC/MS m/z＝344[M+H]+. 步驟EN-{5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-氟苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺
向N-{5-[(2-氯-4-嘧啶基)乙炔基]-2-氟苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(4.6g，13mmol)在DMF(100mL)中的溶液加入碘化氨基吡啶鎓(5.9g，27mmol)和K2CO3(5.5g，40mmol)。在rt攪拌2h之后，反應(yīng)混合物用乙醚(250mL)和EtOAc(250mL)稀釋，并且用水洗滌。將有機(jī)層吸附在硅膠上并且通過柱色譜法純化，得到期望的產(chǎn)物(3.2g，55％)，為棕黃色固體。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.57(m，2H)，8.31(d，J＝5.5Hz，1H)，8.14(s，1H)，7.47(m，2H)，7.31(t，J＝9.4Hz，1H)，7.04(t，J＝6.8Hz)，6.99(d，J＝5.3Hz，1H).ES-LC/MS m/z＝436[M+H]+. 步驟FN-(5-{3-[2-({3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}-2-氟苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺
將N-{5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-氟苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(0.20g，0.46mmol)和3-[(二甲基氨基)甲基]苯胺(86mg，0.57mmol)在i-PrOH(6mL)和12N HCl(6滴)中的懸浮液在微波中在180℃加熱20分鐘。將反應(yīng)混合物用DCM(50mL)稀釋并用5％Na2CO3水溶液洗滌。水層用20％MeOH/DCM提取，并將合并的有機(jī)相用MgSO4干燥并且濃縮。粗產(chǎn)物通過柱色譜法純化，得到標(biāo)題化合物(0.16g，65％收率)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.8(bs，1H)，9.57(s，1H)，8.84(d，J＝6.8Hz，1H)，8.50(d，J＝9.0Hz，1H)，8.29(d，J＝5.3Hz，1H)，7.82(dd，J＝7.3，2.0Hz，1H)，7.70(s，1H)，7.65(d，J＝8.0Hz，1H)，7.57-7.59(m，1H)，7.44-7.51(m，2H)，7.20(t，J＝7.9Hz，1H)，7.15(t，J＝6.9Hz，1H)，6.88(d，J＝7.5Hz，1H)，6.51(d，J＝5.3Hz，1H)，3.99(s，2H)，2.15(s，6H).ES-LC/MS m/z＝550[M+H]+. 步驟G4-[2-(3-氨基-4-氟苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}-2-嘧啶胺
N-(5-{3-[2-({3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}-2-氟苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺(0.16g，0.3mmol)和LiOH(25mg，0.6mmol)在THF(8mL)和水(1mL)中的溶液在60℃攪拌3h。將反應(yīng)混合物用EtOAc(50mL)稀釋并用1N NaOH和鹽水洗滌。有機(jī)相用MgSO4干燥并且通過柱色譜法純化，得到標(biāo)題化合物(0.12g，85％收率)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.51(s，1H)，8.80(d，J＝7.0Hz，1H)，8.54(d，J＝8.9Hz，1H)，8.25(d，J＝5.4Hz，1H)，7.71(s，1H)，7.67(d，J＝8.1Hz，1H)，7.45(t，J＝7.7Hz，1H)，7.21(t，J＝7.8Hz，1H)，7.07-7.12(m，2H)，7.02(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，6.88(d，J＝7.5Hz，1H)，6.69-6.73(m，1H)，6.50(d，J＝5.3Hz，1H)，5.31(s，2H)，3.36(s，2H)，2.14(s，6H).ES-LC/MS m/z＝454[M+H]+. 步驟HN-(5-{3-[2-({3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}-2-氟苯基)-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 向攪拌的4-[2-(3-氨基-4-氟苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}-2-嘧啶胺(58mg，0.13mmol)的THF(3mL)溶液加入TEA(27μL，0.19mmol)和2-噻吩乙酰氯(17(μL，0.13mmol)。在20h之后，反應(yīng)混合物用EtOAc(20mL)稀釋，吸附在硅膠上，并且通過柱色譜法純化，得到標(biāo)題化合物(58mg，77％收率)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.15(s，1H)，9.54(s，1H)，8.83(d，J＝7.0Hz，1H)，8.48(d，J＝8.8Hz，1H)，8.26-8.29(m，2H)，7.69(s，1H)，7.63(d，J＝8.2Hz，1H)，7.47(t，J＝7.9Hz，1H)，7.36-7.39(m，2H)，7.18(t，J＝7.8Hz，1H)，7.13(t，J＝6.9Hz)，6.96-6.98(m，2H)，6.87(d，J＝7.1Hz，1H)，6.52(d，J＝5.3Hz，1H)，3.99(s，2H)，3.32(s，2H)，2.15(s，6H).ES-LC/MS m/z＝578[M+H]+. 實(shí)施例37N-{5-[3-(2-{[2-(二甲基氨基)-2，3-二氫-1H-茚-5-基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-氟苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟AN-{5-[3-(2-{[2-(二甲基氨基)-2，3-二氫-1H-茚-5-基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-氟苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺
標(biāo)題化合物使用實(shí)施例36步驟F所述的置換條件從N-{5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-氟苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(參見實(shí)施例36步驟E)和N2，N2-二甲基-2，3-二氫-1H-茚-2，5-二胺(參見實(shí)施例53步驟B)制備，以83％收率產(chǎn)生標(biāo)題化合物。ES-LC/MS m/z＝576[M+H]+。
步驟B{4-[2-(3-氨基-4-氟苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-2-嘧啶基}[2-(二甲基氨基)-2，3-二氫-1H-茚-5-基]胺
標(biāo)題化合物使用實(shí)施例36步驟G中所述的水解條件從N-{5-[3-(2-{[2-(二甲基氨基)-2，3-二氫-1H-茚-5-基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-氟苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺和LiOH制備，以88％收率產(chǎn)生期望的產(chǎn)物。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.40(s，1H)，8.79(d，J＝7.0Hz，1H)，8.48(d，J＝9.0Hz，1H)，8.23(d，J＝5.4Hz，1H)，7.66(s，1H)，7.39-7.46(m，2H)，7.01-7.11(m，4H)，6.70-6.72(m，1H)，6.48(d，J＝5.4Hz，1H)，5.31(s，2H)，2.91-2.98(m，3H)，2.68-2.72(m，2H)，2.20(s，6H).ES-LC/MS m/z＝480[M+H]+. 步驟CN-{5-[3-(2-{[2-(二甲基氨基)-2，3-二氫-1H-茚-5-基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-氟苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 標(biāo)題化合物使用實(shí)施例36步驟H中所述的?；瘲l件從{4-[2-(3-氨基-4-氟苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-2-嘧啶基}[2-(二甲基氨基)-2，3-二氫-1N-茚-5-基]胺和2-噻吩乙酰氯制備，以76％收率產(chǎn)生期望的產(chǎn)物。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.14(s，1H)，9.42(s，1H)，8.83(d，J＝6.9Hz，1H)，8.42(d，J＝8.7Hz，1H)，8.29(d，J＝6.6Hz，1H)，8.25(d，J＝5.4Hz，1H)，7.61(s，1H)，7.35-7.47(m，5H)，7.03-7.13(m，4H)，6.52(d，J＝5.4Hz，1H)，3.99(s，2H)，2.87-2.99(m，3H)，2.66-2.72(m，2H)，2.21(s，6H).ES-LC/MS m/z＝604[M+H]+. 實(shí)施例38N-[5-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基}氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-氟苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟AN-[5-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-氟苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺
標(biāo)題化合物使用實(shí)施例36步驟F中所述的置換條件從N-{5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-氟苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(參見實(shí)施例36步驟E)和3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯胺制備，以77％收率產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ11.3(bs，1H)，9.58(s，1H)，8.84(d，J＝6.9Hz，1H)，8.49(d，J＝9.0Hz，1H)，8.30(d，J＝5.3Hz，1H)，7.82(dd，J＝7.3，2.2Hz，1H)，7.44-7.52(m，4H)，7.28(d，J＝8.9Hz，1H)，7.14(t，J＝7.9Hz，1H)，6.52-6.55(m，2H)，4.00(t，J＝5.7Hz，2H)，2.63(t，J＝5.7Hz，2H)，2.21(s，6H).ES-LC/MS m/z＝580[M+H]+. 步驟B4-[2-(3-氨基-4-氟苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺
標(biāo)題化合物使用實(shí)施例36步驟G中所述的水解條件從N-[5-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-氟苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺和LiOH制備，以97％收率產(chǎn)生期望的產(chǎn)物。
1HNMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.53(s，1H)，8.80(d，J＝6.9Hz，1H)，8.52(d，J＝9.2Hz，1H)，8.27(d，J＝5.3Hz，1H)，7.53(s，1H)，7.46(t，J＝7.9Hz，1H)，7.29(d，J＝9.1Hz，1H)，7.07-7.18(m，3H)，7.02(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，6.70-6.72(m，1H)，6.54(dd，J＝8.1，2.4Hz，1H)，6.50(d，J＝5.3Hz，1H)，5.31(s，2H)，4.02(t，J＝5.9Hz，2H)，2.61(t，J＝5.9Hz，2H)，2.22(s，6H).ES-LC/MS m/z＝484[M+H]+. 步驟CN-[5-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-氟苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 標(biāo)題化合物使用實(shí)施例36步驟H中所述的酰化條件從4-[2-(3-氨基-4-氟苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺和2-噻吩乙酰氯制備，在HPLC純化之后，以37％收率產(chǎn)生期望的產(chǎn)物，為TFA鹽。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.15(s，1H)，9.62(s，1H)，8.85(d，J＝6.8Hz，1H)，8.49(d，J＝8.7Hz，1H)，8.27(d，J＝5.5Hz，2H)，7.61(s，1H)，7.49(t，J＝7.9Hz，1H)，7.30-7.39(m，3H)，7.19(t，J＝8.0Hz，2H)，7.13(t，J＝6.9Hz，2H)，6.96-6.98(m，1H)，6.60(d，J＝6.1Hz，1H)，6.55(d，J＝5.3Hz，1H)，4.25-4.26(m，2H)，3.99(s，2H)，3.50(m，2H)，2.85(s，6H).ES-LC/MS m/z＝608[M+H]+. 實(shí)施例39N-[3-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(3-噻吩基)乙酰胺
步驟AN-[3-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺
向N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(150mg，0.36mmol)(參見實(shí)施例1步驟C)在i-PrOH(4mL)中的懸浮液加入3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯胺(80mg，0.45mmol)和12N HCl(3滴)。將反應(yīng)在80℃攪拌過夜。粗的反應(yīng)混合物用DCM稀釋并且用飽和NaHCO3水溶液提取。有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾，并且通過柱色譜法純化，以84％收率產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ11.4(bs，1H)，9.58(s，1H)，8.85(d，J＝7.0Hz，1H)，8.50(d，J＝9.0Hz，1H)，8.28(d，J＝5.3Hz，1H)，8.00(s，1H)，7.83(d，J＝8.5Hz，1H)，7.45-7.57(m，4H)，7.28(d，J＝9.4Hz，1H)，7.10-7.15(m，2H)，6.51-6.56(m，2H)，4.00(t，J＝5.7Hz，2H)，2.7(bs，2H)，2.35(s，6H).ES-LC/MS m/z＝562[M+H]+. 步驟B4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺
該化合物使用實(shí)施例36步驟G中所述的水解條件從N-[3-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺和LiOH制備，以定量收率產(chǎn)生期望的產(chǎn)物。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.51(s，1H)，8.80(d，J＝7.1Hz，1H)，8.56(d，J＝8.8Hz，1H)，8.24(d，J＝5.3Hz，1H)，7.54(s，1H)，7.46(t，J＝7.8Hz，1H)，7.30(d，J＝8.1Hz，1H)，7.08-7.18(m，3H)，6.80(s，1H)，6.68(t，J＝7.9Hz，2H)，6.51-6.55(m，2H)，5.24(s，2H)，3.99(t，J＝5.8Hz，2H)，2.59(t，J＝5.9Hz，2H)，2.18(s，6H).ES-LC/MS m/z＝466[M+H]+. 步驟CN-[3-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(3-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 向4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺(140mg，0.3mmol)的THF溶液加入3-噻吩基乙酸(51mg，0.36mmol)、TEA(125μL，0.9mmol)、和O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(136mg，0.36mmol)。將反應(yīng)在rt攪拌過夜，之后將反應(yīng)混合物用DCM稀釋，用5％Na2CO3水溶液洗滌，用Na2SO4干燥，并且吸附在硅膠上。粗產(chǎn)物通過柱色譜法純化并且凍干，以72％收率產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.27(s，1H)，9.55(s，1H)，8.83(d，J＝6.7Hz，1H)，8.51(d，J＝8.8Hz，1H)，8.26(d，J＝5.1Hz，1H)，7.89(s，1H)，7.76(d，J＝8.1Hz，1H)，7.40-7.53(m，4H)，7.26-7.31(m，3H)，7.08-7.18(m，3H)，6.53(d，J＝8.2Hz，1H)，6.48(d，J＝5.3Hz，1H)，3.99(t，J＝5.7Hz，2H)，3.66(s，2H)，2.58(t，J＝5.9Hz，2H)，2.18(s，6H).ES-LC/MS m/z＝588[M+H]+. 實(shí)施例40N-{3-[3-(2-{[3-({[2-(二甲基氨基)乙基]氨基}甲基)苯基]-氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A[2-(二甲基氨基)乙基][(3-硝基苯基)甲基]胺
3-硝基苯甲醛(127mg，0.84mmol)、N，N-二甲基乙二胺(184μL，1.7mmol)、和HOAc(5滴)在DCM(10mL)中的溶液在rt攪拌6h，然后加熱到40℃，維持1小時。將反應(yīng)冷卻到0℃，并且一次性加入氰基硼氫化鈉(360mg，1.7mmol)。將反應(yīng)在rt攪拌過夜。在16h之后，反應(yīng)混合物用4N NaOH洗滌，用Na2SO4干燥，并且濃縮。粗產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一個反應(yīng)。ES-LC/MS m/z＝224[M+H]+。
步驟BN-[2-(二甲基氨基)乙基]-2，2，2-三氟-N-[(3-硝基苯基)甲基]-乙酰胺
向[2-(二甲基氨基)乙基][(3-硝基苯基)甲基]胺(180mg，0.8mmol)在DCM中的溶液加入TEA(167μL，1.2mmol)和TFAA(135μL，0.96mmol)。在rt 3h之后，反應(yīng)混合物用DCM稀釋，用2N NaOH洗滌，用Na2SO4干燥，并且吸附在硅膠上。產(chǎn)物通過柱色譜法純化，以兩個步驟76％的收率產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.18(s，1H)，8.12(d，J＝8.2Hz，1H)，7.74(d，J＝7.5Hz，1H)，7.52(t，J＝7.9Hz，1H)，4.70(s，2H)，3.13(t，J＝6.0Hz，2H)，3.00(t，J＝5.9Hz，2H)，2.78(s，6H).ES-LC/MS m/z＝320[M+H]+. 步驟CN-[(3-氨基苯基)甲基]-N-[2-(二甲基氨基)乙基]-2，2，2-三氟乙酰胺
向N-[2-(二甲基氨基)乙基]-2，2，2-三氟-N-[(3-硝基苯基)甲基]乙酰胺(204mg，0.64mmol)在i-PrOH中的溶液加入10％Pd/C(20mg，0.02mmol)。安裝充H2的氣球，并將反應(yīng)在氫氣氛下在rt攪拌。在17h之后，將反應(yīng)混合物過濾通過硅藻土并且吸附到硅膠上。粗產(chǎn)物通過柱色譜法純化，以62％收率產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.10(t，J＝7.9Hz，1H)，6.69-6.70(m，2H)，6.58(d，J＝7.9Hz，1H)，3.76(s，2H)，2.75(t，J＝6.0Hz，2H)，2.49(t，J＝6.0Hz，2H)，2.24(s，6H).ES-LC/MS m/z＝290[M+H]+. 步驟DN-{3-[3-(2-{[3-({[2-(二甲基氨基)乙基]氨基}甲基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 將N-[(3-氨基苯基)甲基]-N-[2-(二甲基氨基)乙基]-2，2，2-三氟乙酰胺(61mg，0.21mmol)和N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(75mg；0.17mmol)(參見實(shí)施例2步驟B)在i-PrOH(3mL)中的懸浮液用3滴12N HCl酸化并且在微波中在180℃加熱25分鐘。然后將反應(yīng)混合物用DCM稀釋，用2N NaOH洗滌，用Na2SO4干燥，并且吸附在硅膠上。粗產(chǎn)物通過柱色譜法純化，以66％收率產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.47(d，J＝6.8Hz，1H)，8.36(d，J＝8.8Hz，1H)，8.16(d，J＝5.1Hz，1H)，7.80(d，J＝7.2Hz，1H)，7.73(s，1H)，7.53-7.61(m，3H)，7.32-7.45(m，4H)，7.01(s，2H)，6.90(t，J＝6.6Hz，1H)，6.55(d，J＝5.1Hz，1H)，3.94(s，2H)，3.79(s，2H)，2.70(t，J＝5.8Hz，2H)，2.42(t，J＝5.9Hz，2H)，2.18(s，6H).ES-LC/MS m/z＝603[M+H]+. 實(shí)施例41N-{3-[3-(2-{[3-({[2-(甲基磺?；?乙基]氨基}甲基)苯基]-氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A[2-(甲基磺?；?乙基][(3-硝基苯基)甲基]胺
通過用2N NaOH處理將3-硝基芐基胺鹽酸鹽(1.0g，5.3mmol)的DCM溶液轉(zhuǎn)化為游離堿。分離有機(jī)層并且濃縮，并將殘余物再溶解于MeOH。向這個溶液中加入甲基乙烯基砜(232μL，2.6mmol)，并將反應(yīng)在rt攪拌。在5小時之后，粗的反應(yīng)混合物吸附到硅膠上并且通過柱色譜法純化，以定量收率產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.21(s，1H)，8.13(d，J＝8.2Hz，1H)，7.67(d，J＝7.5Hz，1H)，7.51(t，J ＝7.9Hz，1H)，3.93(s，2H)，3.16-3.24(m，4H)，3.01(s，3H).ES-LC/MS m/z＝259[M+H]+. 步驟B2，2，2-三氟-N-[2-(甲基磺酰基)乙基]-N-[(3-硝基苯基)甲基]-乙酰胺
向[2-(甲基磺?；?乙基][(3-硝基苯基)甲基]胺(0.70g，2.7mmol)的DCM(25mL)溶液加入二異丙基乙基胺(0.71mL，4.0mmol)和TFAA(0.42mL，3.0mmol)。在rt下1小時之后，反應(yīng)混合物用DCM稀釋并且用飽和NaHCO3水溶液提取。有機(jī)層用Na2SO4干燥，吸附在硅膠上，并且通過柱色譜法純化，產(chǎn)生標(biāo)題化合物，為澄清的油狀物(0.88g，92％收率)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.24(d，J＝8.8Hz，1H)，8.11(s，1H)，7.58-7.63(m，2H)，4.91(s，2H)，3.78(t，J＝6.4Hz，2H)，3.36(t，J＝6.3Hz，2H)，2.99(s，3H).ES-LC/MS m/z＝355[M+H]+. 步驟CN-[(3-氨基苯基)甲基]-2，2，2-三氟-N-[2-(甲基磺?；?乙基]-乙酰胺
向2，2，2-三氟-N-[2-(甲基磺?；?乙基]-N-[(3-硝基苯基)甲基]乙酰胺(0.88g，2.5mmol)在i-PrOH中的懸浮液加入10％Pd/C(80mg，0.08mmol)。安裝充氫氣的氣球并將反應(yīng)在rt下劇烈攪拌。在64小時之后，將反應(yīng)混合物過濾通過硅藻土，吸附在硅膠上，并且通過柱色譜法純化，以93％收率產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.17(t，J＝7.5Hz，1H)，6.60-6.67(m，2H)，6.53(s，1H)，4.62(s，2H)，3.73(t，J＝6.9Hz，2H)，3.18(t，J＝6.8Hz，2H)，2.92(s，3H).ES-LC/MS m/z＝324[M+H]+. 步驟D2，2，2-三氟-N-[2-(甲基磺酰基)乙基]-N-[(3-{[4-(2-{3-[(2-噻吩基乙?；?氨基]苯基}吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基)-2-嘧啶基]氨基}苯基)甲基]乙酰胺
將N-[(3-氨基苯基)甲基]-2，2，2-三氟-N-[2-(甲基磺?；?乙基]乙酰胺(68mg，0.21mmol)和N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(75mg，0.17mmol)(參見實(shí)施例2步驟B)在i-PrOH(3mL)中的懸浮液用2滴12N HCl酸化并且并且在微波中在180℃加熱15分鐘。然后將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO3水溶液洗滌，用Na2SO4干燥，并且吸附在硅膠上。粗產(chǎn)物通過柱色譜法純化，以63％收率產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.51(d，J＝6.8Hz，1H)，8.31(d，J＝8.6Hz，1H)，8.22(d，J＝5.3Hz，1H)，7.67-7.80(m，2H)，7.56(d，J＝8.0Hz，1H)，7.26-7.39(m，4H)，7.17(t，J＝7.7Hz，1H)，7.05(s，1H)，6.94(t，J＝6.9Hz，1H)，6.88(d，J＝8.4Hz，1H)，6.62-6.64(m，2H)，6.53(s，1H)，4.68(s，2H)，3.96(s，2H)，3.72-3.75(m，2H)，3.16-3.24(m，2H)，2.90(s，3H).ES-LC/MS m/z＝734[M+H]+. 步驟EN-{3-[3-(2-{[3-({[2-(甲基磺?；?乙基]氨基}甲基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 向2，2，2-三氟-N-[2-(甲基磺?；?乙基]-N-[(3-{[4-(2-{3-[(2-噻吩基乙?；?氨基]苯基}吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基)-2-嘧啶基]氨基}苯基)甲基]乙酰胺(79mg，0.11mmol)的THF(3mL)溶液加入含LiOH水合物(10mg，0.21mmol)的水(0.5mL)。將溶液加熱到50℃，維持2h，然后用EtOAc稀釋，用1N Na2CO3洗滌，用Na2SO4干燥，并且濃縮，以62％收率產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.36(s，1H)，9.55(s，1H)，8.84(d，J＝6.8Hz，1H)，8.52(d，J＝8.9Hz，1H)，8.24(d，J＝5.4Hz，1H)，7.90(s，1H)，7.74-7.76(m，2H)，7.59(d，J＝8.1Hz，1H)，7.38-7.50(m，2H)，7.28(d，J＝7.7Hz，1H)，7.20(t，J＝7.8Hz，1H)，7.13(t，J＝6.8Hz，1H)，6.92-6.98(m，3H)，6.44-6.51(m，2H)，3.88(s，2H)，3.66(s，2H)，3.23(t，J＝6.3Hz，2H)，3.01(s，3H)，2.91(t，J＝6.1Hz).ES-LC/MS m/z＝638[M+H]+. 實(shí)施例42N-{3-[3-(2-{[3-(氨基甲基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A2，2，2-三氟-N-[(3-硝基苯基)甲基]乙酰胺
向3-硝基芐基胺鹽酸鹽(10.2g，54mmol)在DCM中的懸浮液加入TEA(37.6mL，270mmol)。在5分鐘之后，溶液變?yōu)槌吻?，?0分鐘內(nèi)滴加TFAA(11.4mL，81mmol)并將反應(yīng)在rt攪拌。在16h之后，粗的反應(yīng)混合物用1N HCl洗滌，用Na2SO4干燥，吸附到硅膠上并且通過柱色譜法純化，以92％收率產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15-8.19(m，2H)，7.65(d，J＝7.7Hz，1H)，7.56(t，J＝7.9Hz，1H)，6.7(bs，1H)，4.64(s，2H). 步驟BN-[(3-氨基苯基)甲基]-2，2，2-三氟乙酰胺
向2，2，2-三氟-N-[(3-硝基苯基)甲基]乙酰胺(0.5g，2.0mmol)的i-PrOH溶液加入10％Pd/C(40mg，0.04mmol)。安裝充氫氣的氣球并將反應(yīng)在rt下劇烈攪拌。在15之后，將反應(yīng)混合物過濾通過硅藻土，吸附在硅膠上，并且通過柱色譜法純化，以85％收率產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.14-7.27(m，1H)，6.59-6.68(m，3H)，4.43(s，2H)，3.74(s，2H).ES-LC/MS m/z＝219[M+H]+. 步驟C2，2，2-三氟-N-[(3-{[4-(2-{3-[(2-噻吩基乙?；?氨基]苯基}-吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基)-2-嘧啶基]氨基}苯基)甲基]乙酰胺
將N-[(3-氨基苯基)甲基]-2，2，2-三氟乙酰胺(46mg，0.21mmol)和N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(75mg，0.17mmol)(參見實(shí)施例2步驟B)在i-PrOH(3mL)中的懸浮液用2滴12N HCl酸化并且在微波中在180℃加熱15分鐘。然后將反應(yīng)混合物用DCM稀釋，用飽和NaHCO3水溶液洗滌，用Na2SO4干燥，并且吸附在硅膠上。粗產(chǎn)物通過柱色譜法純化，以67％收率產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.51(d，J＝6.8Hz，1H)，8.31(d，J＝9.1Hz，1H)，8.22(d，J＝5.2Hz，1H)，7.72-7.75(m，2H)，7.63(s，1H)，7.46(d，J＝8.3Hz，1H)，7.26-7.38(m，7H)，7.04(s，1H)，6.94(m，1H)，6.63(d，J＝5.4Hz，1H)，4.48(d，J＝5.7Hz，2H)，3.96(s，2H).ES-LC/MS m/z＝628[M+H]+. 步驟DN-{3-[3-(2-{[3-(氨基甲基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 向2，2，2-三氟-N-[(3-{[4-(2-{3-[(2-噻吩基乙?；?氨基]苯基}-吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基)-2-嘧啶基]氨基}苯基)甲基]乙酰胺(71mg，0.11mmol)的THF(3mL)溶液加入含LiOH水合物(10mg，0.21mmol)的水(0.5mL)，將溶液加熱到50℃，維持2h，然后用DCM稀釋，用1N Na2CO3洗滌，用Na2SO4干燥，并且濃縮，以94％收率產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.37(s，1H)，9.51(s，1H)，8.83(d，J＝6.8Hz，1H)，8.53(d，J＝8.8Hz，1H)，8.24(d，J＝5.4Hz，1H)，7.90(s，1H)，7.74-7.76(m，2H)，7.55(d，J＝8.1Hz，1H)，7.38-7.50(m，3H)，7.28(d，J＝7.5Hz，1H)，7.19(t，J＝7.8Hz，1H)，7.12(t，J＝6.8Hz，1H)，6.94-6.98(m，3H)，6.46(d，J＝5.3Hz，1H)，3.88(s，2H)，3.67(s，2H).ES-LC/MS m/z＝532[M+H]+. 實(shí)施例43N-{3-[3-(2-{[3-(氨基甲基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(3-噻吩基)乙酰胺
步驟AN-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(3-噻吩基)乙酰胺
向{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}胺(125mg，0.4mmol)(參見實(shí)施例2步驟A)的THF(5mL)溶液加入3-噻吩基乙酸(67mg，0.47mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(90mg，0.47mmol)、N-羥基苯并三唑(63mg，0.47mmol)、和二異丙基乙基胺(200μL，1.2mmol)。在室溫20小時之后，反應(yīng)混合物用DCM稀釋，用水洗滌，用Na2SO4干燥，過濾，并且吸附在硅膠上。粗產(chǎn)物通過柱色譜法純化，以69％收率產(chǎn)生標(biāo)題化合物。ES-LC/MS m/z＝446[M+H]+。
步驟B2，2，2-三氟-N-[(3-{[4-(2-{3-[(3-噻吩基乙?；?氨基]苯基}吡唑并-[1，5-a]吡啶-3-基)-2-嘧啶基]氨基}苯基)甲基]乙酰胺
將N-[(3-氨基苯基)甲基]-2，2，2-三氟乙酰胺(73mg，0.34mmol)和N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(3-噻吩基)乙酰胺(120mg，0.27mmol)在i-PrOH(4mL)中的懸浮液用3滴12N HCl酸化并且在80℃攪拌過夜。在16h之后，反應(yīng)混合物用DCM稀釋，用飽和NaHCO3水溶液洗滌，用Na2SO4干燥，并且吸附在硅膠上。粗產(chǎn)物通過柱色譜法純化，以53％收率產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.28(s，1H)，9.98(t，1H)，9.63(s，1H)，8.83(d，J＝6.9Hz，1H)，8.52(d，J＝9.0Hz，1H)，8.24(d，J＝5.1Hz，1H)，7.90(s，1H)，7.63(s，1H)，7.75(d，J＝9.0Hz，1H)，7.71(s，1H)，7.67(d，J＝8.2Hz，1H)，7.47-7.49(m，2H)，7.42(t，J＝7.9Hz，1H)，7.32(d，J＝2.2Hz，1H)，7.26(d，J＝9.1Hz，1H)，7.22(d，J＝7.9Hz，1H)，7.08-7.13(m，2H)，6.85(d，J＝7.7Hz，1H)，6.51(d，J＝5.1Hz，1H)，4.35(d，J＝5.9Hz，2H)，3.66(s，2H).ES-LC/MS m/z＝628[M+H]+. 步驟DN-{3-[3-(2-{[3-(氨基甲基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(3-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 向2，2，2-三氟-N-[(3-{[4-(2-{3-[(3-噻吩基乙?；?氨基]苯基}-吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基)-2-嘧啶基]氨基}苯基)甲基]乙酰胺(87mg，0.14mmol)的THF(2mL)溶液加入含LiOH水合物(12mg，0.28mmol)的水(0.5mL)。將溶液加熱到50℃，維持1.5h，然后用DCM稀釋，用1N Na2CO3洗滌，用Na2SO4干燥，并且濃縮，以83％收率產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.29(s，1H)，9.50(s，1H)，8.83(d，J＝6.8Hz，1H)，8.53(d，J＝8.8Hz，1H)，8.24(d，J＝5.2Hz，1H)，7.89(s，1H)，7.74-7.77(m，2H)，7.40-7.56(m，4H)，7.08-7.32(m，5H)，6.95(d，J＝7.5Hz，1H)，6.46(d，J＝5.1Hz，1H)，3.67(s，2H)，3.66(s，2H).ES-LC/MS m/z＝532[M+H]+. 實(shí)施例44N-[3-(3-{2-[(4-氯-3-{[2-(1-吡咯烷基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A1-氯-2-[(2-氯乙基)氧基]-4-硝基苯
該化合物根據(jù)實(shí)施例10步驟A中所述的方法從2-氯-5-硝基苯酚合成，以53％收率得到產(chǎn)物，為油狀物。ES-LC/MS m/z 235(M+H)。
步驟B4-氯-3-[(2-氯乙基)氧基]苯胺
該化合物根據(jù)實(shí)施例10步驟B中所述的方法從1-氯-2-[(2-氯乙基)氧基]-4-硝基苯合成，以61％收率得到產(chǎn)物，為黑色油狀物。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 3.9(m，2H)4.2(t，J＝5.2Hz，2H)5.2(s，2H)6.1(dd，J＝8.4，2.4Hz，1H)6.3(d，J＝2.2Hz，1H)7.0(d，J＝8.6Hz，1H).ES-LC/MS m/z 206(M+H). 步驟CN-(3-{3-[2-({4-氯-3-[(2-氯乙基)氧基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺
該化合物如實(shí)施例10步驟C中所述從N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(參見實(shí)施例1步驟C)和1-氯-2-[(2-氯乙基)氧基]-4-硝基苯合成，以34％收率得到深黃色固體。ES-LC/MS m/z 587[M+H]+。
步驟D4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(4-氯-3-{[2-(1-吡咯烷基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺
該化合物使用實(shí)施例10步驟D中所示的方法從N-(3-{3-[2-({4-氯-3-[(2-氯乙基)氧基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺和吡咯烷合成，以50％收率得到固體。ES-LC/MSm/z 526[M+H]+。
步驟EN-[3-(3-{2-[(4-氯-3-{[2-(1-吡咯烷基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 標(biāo)題化合物使用實(shí)施例1步驟F中所述的酰化條件從4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(4-氯-3-{[2-(1-吡咯烷基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺和2-噻吩乙酰氯制備，并且通過柱色譜法純化，使用0-20％梯度的EtOAc/MeOH w/NH4OH，以71％收率產(chǎn)生產(chǎn)物。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 1.7(s，4H)3.8(s，3H)4.0(s，3H)6.5(s，1H)6.9(d，J＝4.4Hz，2H)7.1(t，J＝6.9Hz，2H)7.2(t，J＝9.0Hz，2H)7.4(m，3H)7.5(m，2H)7.7(s，2H)7.9(s，1H)8.2(d，J＝0.9Hz，1H)8.4(s，1H)8.8(d，J＝1.3Hz，1H)9.7(s，1H)10.3(s，1H).ES-LC/MS m/z 650[M+H]+. 實(shí)施例45N-[3-(3-{2-[(4-氯-3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(4-氯-3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺
該化合物通過如實(shí)施例10步驟D中所述用二甲胺進(jìn)行氯置換從N-(3-{3-[2-({4-氯-3-[(2-氯乙基)氧基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺(參見實(shí)施例44步驟C)合成，以78％收率得到固體。ES-LC/MS m/z 500[M+H]+。
步驟BN-[3-(3-{2-[(4-氯-3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 標(biāo)題化合物如實(shí)施例10步驟E中所述使用2-噻吩基乙酰氯從4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(4-氯-3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺合成，以70％收率得到黃色固體。
1H NMR(300MHz，DMSO-D6)δppm 2.2(s，6H)2.6(t，J＝5.8Hz，2H)3.9(s，2H)4.0(t，J＝6.0Hz，2H)6.6(d，J＝5.2Hz，1H)7.0(d，J＝4.2Hz，2H)7.2(m，1H)7.3(m，1H)7.4(m，2H)7.5(s，1H)7.6(s，1H)7.8(m，2H)7.9(s，1H)8.3(d，J＝5.2Hz，1H)8.5(d，J＝9.7Hz，1H)8.9(d，J＝6.7Hz，2H)9.7(s，1H)10.4(s，1H).ES-LC/MS m/z 624[M+H]+. 實(shí)施例46N-{3-[3-(2-{[4-氯-3-({2-[甲基(1-甲基-3-吡咯烷基)氨基]乙基}氧基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-[4-氯-3-({2-[甲基(1-甲基-3-吡咯烷基)氨基]乙基}氧基)苯基]-2-嘧啶胺
該化合物通過如實(shí)施例10步驟D中所述用N，1-二甲基-3-吡咯烷胺進(jìn)行氯置換從N-(3-{3-[2-({4-氯-3-[(2-氯乙基)氧基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺(參見實(shí)施例44步驟C)合成，以62％收率得到固體。ES-LC/MS m/z 569[M+H]+。
步驟BN-{3-[3-(2-{[4-氯-3-({2-[甲基(1-甲基-3-吡咯烷基)氨基]乙基}-氧基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 標(biāo)題化合物如實(shí)施例10步驟E中所述使用2-噻吩基乙酰氯從4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-[4-氯-3-({2-[甲基(1-甲基-3-吡咯烷基)氨基]乙基}氧基)苯基]-2-嘧啶胺合成，以55％收率得到棕色固體。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm2.7(s，2H)2.8(m，5H)3.0(d，J＝14.5Hz，4H)3.1(s，2H)3.8(s，1H)3.9(s，1H)3.9(s，2H)4.0(s，1H)6.5(d，J＝5.3Hz，1H)6.9(s，2H)6.9(s，3H)7.1(m，2H)7.2(m，3H)7.4(m，2H)7.5(d，J＝8.6Hz，1H)7.7(d，J＝20.0Hz，1H)7.9(s，1H)8.3(d，J＝5.1Hz，1H)8.8(d，J＝6.4Hz，1H)9.7(s，1H)10.4(s，1H).ES-LC/MS m/z 693[M+H]+. 實(shí)施例47N-[3-(3-{2-[(4-(甲氧基)-3-{4-[2-(甲基磺酰基)乙基]-1-哌嗪基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基)-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A1-[2-(甲氧基)-5-硝基苯基]哌嗪
向1-[2-(甲氧基)苯基]哌嗪(11.0g，50.7mmol)滴加濃H2SO4(60mL)并且在0℃攪拌4h。然后加入KNO3(7.2g，71.2mmol)并將混合物攪拌過夜同時讓其回溫至rt。反應(yīng)然后用冰猝滅，然后加入2N NaOH(100mL)并且用EtOAc提取三次。合并的有機(jī)相用MgSO4干燥并且直接加載到硅膠上。通過硅膠色譜法純化，使用含0-20％MeOH/NH4OH的EtOAc。得到5.7g橙色固體，42％收率。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 2.8(m，4H)2.9(m，4H)3.1(m，1H)3.9(s，3H)7.1(d，J＝9.1Hz，1H)7.6(d，J＝2.7Hz，1H)7.9(dd，J＝9.0，2.7Hz，1H). 步驟B1-[2-(甲氧基)-5-硝基苯基]-4-[2-(甲基磺?；?乙基]哌嗪
該化合物通過將1-[2-(甲氧基)-5-硝基苯基]哌嗪(0.5g，2.11mmol)和甲基乙烯基砜(0.336g，3.16mmol)的iPrOH(25mL)溶液加熱到回流過夜合成。將反應(yīng)冷卻到rt并且直接干燥到硅膠上。通過硅膠色譜法純化，使用含0-20％MeOH/NH4OH的EtOAc，得到0.5g(69％收率)的期望化合物，為固體。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 2.6(m，4H)2.7(t，J＝6.8Hz，2H)3.0(m，8H)3.9(s，3H)7.1(d，J＝9.0Hz，1H)7.6(d，J＝2.7Hz，1H)7.9(dd，J＝9.1，2.8Hz，1H). 步驟C4-(甲氧基)-3-{4-[2-(甲基磺酰基)乙基]-1-哌嗪基}苯胺
向0.5g 1-[2-(甲氧基)-5-硝基苯基]-4-[2-(甲基磺?；?乙基]哌嗪(0.5g，1.46mmol)的EtOH(15mL)溶液加入10％Pd/C(0.05g)并將反應(yīng)在H2下攪拌18h。然后將反應(yīng)過濾通過硅藻土并且真空除去溶劑，得到期望的產(chǎn)物，為黃色油狀物，0.36g(55％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 2.5(m，3H)2.7(t，J＝6.4Hz，3H)2.9(d，J＝1.8Hz，2H)2.9(d，J＝11.4Hz，2H)3.0(s，4H)3.3(d，J＝6.4Hz，3H)3.6(s，3H)6.1(dd，J＝8.3，2.5Hz，1H)6.2(d，J＝2.4Hz，1H)6.6(d，J＝8.8Hz，1H). 步驟D2，2，2-三氟-N-[3-(3-{2-[(4-(甲氧基)-3-{4-[2-(甲基磺?；?乙基]-1-哌嗪基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]乙酰胺
該化合物從N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(參見實(shí)施例1步驟C)和4-(甲氧基)-3-{4-[2-(甲基磺?；?乙基]-1-哌嗪基}苯胺合成，以42％收率得到黃色固體。ES-LC/MSm/z 695[M+H]+。
步驟E4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(4-(甲氧基)-3-{4-[2-(甲基磺?；?乙基]-1-哌嗪基}苯基)-2-嘧啶胺
該化合物從2，2，2-三氟-N-[3-(3-{2-[(4-(甲氧基)-3-{4-[2-(甲基磺?；?乙基]-1-哌嗪基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]乙酰胺如實(shí)施例1步驟E中所述合成，以98％收率得到棕黃色固體。ES-LC/MS m/z 599[M+H]+。
步驟FN-[3-(3-{2-[(4-(甲氧基)-3-{4-[2-(甲基磺?；?乙基]-1-哌嗪基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 標(biāo)題化合物如實(shí)施例10步驟E中所述使用2-噻吩基乙酰氯從4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(4-(甲氧基)-3-{4-[2-(甲基磺?；?乙基]-1-哌嗪基}苯基)-2-嘧啶胺合成，以47％收率得到淺棕色固體。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 2.5(m，4H)2.7(m，3H)2.9(m，4H)3.0(s，3H)3.7(s，3H)3.9(s，2H)6.4(d，J＝5.1Hz，1H)6.8(d，J＝9.1Hz，1H)7.0(d，J＝4.6Hz，2H)7.1(t，J＝6.6Hz，1H)7.3(m，3H)7.4(d，J＝10.4Hz，1H)7.4(m，2H)7.7(d，J＝8.1Hz，1H)7.9(s，1H)8.2(d，J＝5.5Hz，1H)8.8(d，J＝7.0Hz，1H)9.3(s，1H)10.3(s，1H).ES-LC/MS m/z 723[M+H]+. 實(shí)施例48N-{5-[3-(2-{[2-(二甲基氨基)-2，3-二氫-1H-茚-5-基]氨基}嘧啶-4-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-甲氧基苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟AN-[5-溴-2-(甲氧基)苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺
向4-溴-2-硝基苯甲醚(2.0g，0.009mol)的無水EtOH(100mL)溶液加入SnCl2.2H2O(11.68g，0.051mol)并將得到的混合物在Rt攪拌過夜。減壓除去溶劑，并將殘余物懸浮于EtOAc(100mL)，用1M NaOH(100mL)洗滌并且過濾通過硅藻土墊。除去有機(jī)層，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，并且在高真空下干燥。然后將得到的殘余物溶解于DCM(150mL)，隨后加入TEA(5.19g，0.051mol)和TFAA(4.52g，0.022mol)。在攪拌過夜之后，反應(yīng)用1M HCl(50mL)洗滌，將有機(jī)層濃縮并且通過柱色譜法純化(含1-10％梯度的EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(1.53g，60％)，為白色固體。ES-LC/MS m/z＝297[M-H]+。
步驟B2，2，2-三氟-N-{2-(甲氧基)-5-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]苯基}-乙酰胺
在N2下向烘干的燒瓶中加入N-[5-溴-2-(甲氧基)苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺(153g，0.005mol)、脫氣的無水THF(100mL)、二氯雙(三苯膦)合鈀(II)(0.45mg，0.6mmol)、碘化亞銅(I)(73mg，0.38mmol)、和三甲基甲硅烷基乙炔(1.26g，0.013mol)。然后，滴加TEA(5.19g，0.05mol)并將得到的混合物在60℃加熱過夜。將粗的反應(yīng)混合物吸附在硅膠上并且通過柱色譜法純化(含0-10％EtOAc的己烷)，得到期望的產(chǎn)物(0.68g，42％)，為灰白色固體。ES-LC/MS m/z＝314[M-H]+。
步驟CN-[5-乙炔基-2-(甲氧基)苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺
向2，2，2-三氟-N-{2-(甲氧基)-5-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]苯基}-乙酰胺(680mg，2.16mmol)的THF(50mL)溶液滴加含1.0M TBAF的THF溶液(2.59mL，2.59mmol)并將得到的混合物在Rt攪拌30mm。將反應(yīng)用水(50mL)猝滅，減壓濃縮并將水層用DCM(2×50mL)提取。將有機(jī)層合并，減壓下除去溶劑，并且通過柱色譜法純化(含5-25％EtOAc的己烷)，得到標(biāo)題化合物(500mg，96％)，為灰白色固體。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.00(s，1H)，3.93(s，3H)，6.86(d，1H，J＝8.42Hz)，7.31(dd，1H，J＝8.42Hz，2.01Hz)，8.46(d，1H，J＝2.01Hz). 步驟DN-[5-[(2-氯-4-嘧啶基)乙炔基]-2-(甲氧基)苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺
在N2下向烘干的燒瓶中加入2，4-二氯嘧啶(860mg，5.76mmol)、脫氣的無水THF(100mL)、二氯雙(三苯膦)合鈀(II)(81mg，0.12mmol)、碘化亞銅(I)(13mg，0.07mmol)、和TEA(1.26g，0.013mol)。在將反應(yīng)在60℃加熱30min之后，滴加N-[5-乙炔基-2-(甲氧基)苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺(560mg，2.30mmol)，為在THF(10mL)中的溶液，將得到的混合物加熱過夜。粗的反應(yīng)混合物吸附在硅膠上并且通過柱色譜法純化(含0-10％EtOAc的己烷)，得到期望的產(chǎn)物(0.68g，42％)，為灰白色固體。ES-LC/MS m/z＝356[M+H]+。
步驟EN-[5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-(甲氧基)苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺
將N-[5-[(2-氯-4-嘧啶基)乙炔基]-2-(甲氧基)苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺(534mg，1.50mmol)、碘化氨基吡啶鎓(670mg，3.01mmol)、和K2CO3(620mg，4.51mmol)的DMF(10mL)溶液在Rt攪拌3h。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑并將殘余物再溶解于DCM(50mL)中，用水(50mL)洗滌。有機(jī)層吸附到硅膠上并且通過柱色譜法純化(含5-50％EtOAc的己烷)，得到吡唑并吡啶(370mg，55％)，為棕黃色固體。ES-LC/MS m/z＝448[M+H]+。
步驟FN-{5-[3-(2-氯嘧啶-4-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-甲氧基苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
將N-[5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-(甲氧基)苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺(250mg，0.56mmol)和1M LiOH(1.30mL，1.39mmol)在10∶1THF∶H2O(5mL)中的溶液在50℃加熱過夜。在通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去THF之后，將反應(yīng)混合物再溶解于EtOAc并用水(25mL)和鹽水(25mL)洗滌。有機(jī)層用MgSO4干燥。在過濾之后，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑。在高真空除去殘余溶劑之后，粗的混合物溶解于THF(5mL)并且向其中加入噻吩-2-乙酰氯(0.10mL，0.84mmol)。在攪拌過夜之后，加入水(0.5mL)并且通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去THF。將反應(yīng)混合物再溶解于DCM(25mL)，用飽和的NaHCO3(10mL)、水(10mL)和鹽水(10mL)洗滌。有機(jī)物用MgSO4干燥，過濾并將濾液減壓濃縮，得到期望的酰胺(210mg，79％)，為灰白色固體。ES-LC/MS m/z＝476[M+H]+。
步驟HN-{5-[3-(2-{[2-(二甲基氨基)-2，3-二氫-1H-茚-5-基]氨基}嘧啶-4-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-甲氧基苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 向N-{5-[3-(2-氯嘧啶-4-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-甲氧基苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(90mg，0.19mmol)在無水i-PrOH(3mL)中的溶液加入N2，N2-二甲基茚滿-2，5-二胺(37mg，0.21mmol)，隨后加入催化用12M HCl。在微波中在180℃加熱10min之后，反應(yīng)用飽和的NaHCO3(25mL)猝滅并且通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑。水層用DCM(25mL)提取，將有機(jī)層濃縮，并且通過柱色譜法純化(含1-10％MeOH的DCM)，得到產(chǎn)物(27mg，24％)，為黃色固體。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.18(s，6H)，2.65-2.71(m，2H)，2.88-2.97(m，2H)，3.89(s，3H)，3.98(s，2H)，6.51(d，1H，J＝5.3Hz)，6.94-6.96(m，2H)，7.02-7.14(m，3H)，7.26-7.28(m，1H)，7.35-7.43(m，3H)，7.63(s，1H)，8.20(d，1H，J＝5.3Hz)，8.31(s，1H)，8.43(d，1H，J＝8.9Hz)，8.79(d，1H，J＝7.0Hz)9.38(s，1H)，9.45(s，1H)ppm.ES-LC/MS m/z＝616[M+H]+. 實(shí)施例49N-[2-甲氧基-5-(3-{2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-7-基)氨基]嘧啶-4-基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
向N-{5-[3-(2-氯嘧啶-4-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-甲氧基苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(110mg，0.23mmol)(參見實(shí)施例48步驟F)的無水i-PrOH(3mL)溶液加入2-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-7-胺(39mg，0.24mmol)，隨后加入催化用12M HCl。在微波中在180℃加熱10min之后，反應(yīng)用飽和的NaHCO3(25mL)猝滅，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，并將水層用DCM(25mL)提取。將有機(jī)層濃縮并且通過柱色譜法純化(含1-10％MeOH的DCM)，得到產(chǎn)物(74mg，53％)，為黃色固體。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.28(s，3H)，2.53-2.55(m，2H)，2.70-2.72(m，2H)，3.36(s，2H)，3.87(s，3H)，3.97(s，2H)，6.49(d，1H，J＝5.1Hz)，6.94-6.95(m，2H)，7.05-7.13(m，2H)，7.25-7.27(d，1H，J＝8.1Hz)，7.35-7.43(m，3H)，7.48(s，1H)，8.19(d，1H，J＝5.3Hz)，8.31(s，1H)，8.43(d，1H，J＝8.6Hz)，8.78(d，1H，J＝6.8Hz)9.38(s，1H)，9.45(s，1H)ppm.ES-LC/MS m/z＝602[M+H]+. 實(shí)施例50N-[4-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-苯基乙酰胺
向攪拌的4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(4-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺(50mg，0.11mmol)(參見實(shí)施例15步驟A)的DCM(5mL)溶液加入苯基乙酰氯(20mg，0.12mmol)。在1.5h小時之后，LC/MS顯示反應(yīng)完成。將溶液用飽和的NaHCO3溶液(20mL)洗滌，分離有機(jī)層并且通過LC純化(0％-20％MeOH/DCM)，得到標(biāo)題化合物(30mg，48％)，為白色固體。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.31(s，1H)，9.54(s，1H)，8.80-8.82(m，1H)，8.49(d，J＝8.78Hz，1H)，8.25(d，J＝5.31Hz，1H)，7.87-7.88(m，1H)，7.73-7.76(m，1H)，7.38-7.52(m，3H)，7.20-7.31(m，7H)，7.09-7.14(m，2H)，6.49-6.52(m，1H)，6.45(d，J ＝5.31Hz，1H)，3.96(t，J＝5.85Hz，2H)，3.63(s，2H)，2.57(t，J＝5.85Hz，2H)，2.16(s，1H)ppm.ES-LC/MS m/z＝584[M+H]+. 實(shí)施例512，6-二氟-N-[3-(3-{5-氟-2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]苯甲酰胺
步驟AN-{3-[(2-氯-5-氟-4-嘧啶基)乙炔基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺
在N2下向烘干的燒瓶中加入2，4-二氯-5-氟嘧啶(1.56g，9.4mmol)、脫氣的無水THF(100mL)、二氯雙(三苯膦)合鈀(II)(62mg，0.09mmol)、碘化亞銅(I)(10mg，0.05mmol)、和TEA(0.164g，0.23mmol)。在60℃加熱反應(yīng)30分鐘之后，滴加N-(3-乙炔基苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺(1.0，4.69mmol)，為THF溶液(25mL)，將得到的混合物加熱過夜。粗的反應(yīng)混合物吸附到硅膠上并且通過柱色譜法純化(含2-10％EtOAc的己烷)，得到期望的產(chǎn)物(1.25g，78％)，為灰白色固體。ES-LC/MS m/z＝344[M+H]+。
步驟BN N-{3-[3-(2-氯-5-氟-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺
將N-{3-[(2-氯-5-氟-4-嘧啶基)乙炔基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(1.25g，3.64mmol)、碘化氨基吡啶鎓(1.63g，7.34mmol)、和K2CO3(1,52g，11mmol)的DMF(50mL)溶液在rt攪拌2h，隨后除去溶劑。將殘余物懸浮于水(50mL)中并且用EtOAc(100mL)提取兩次。將有機(jī)層吸附到硅膠上并且通過柱色譜法純化(含10-50％EtOAc的己烷)，得到吡唑并吡啶(1.34g，85％)，為灰白色固體。ES-LC/MS m/z＝436[M+H]+。
步驟C2，2，2-三氟-N-[3-(3-{5-氟-2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]乙酰胺
將已經(jīng)預(yù)先用氮?dú)饷摎獾腘，N-{3-[3-(2-氯-5-氟-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(20mg，0.05mmol)、Pd2(dba)3(8.4mg，0.009mmol)、xantphos(8.0mg，0.013mmol)、碳酸銫(67mg，0.21mmol)、和2-甲基-1，2，3，4-四氫-6-異喹啉胺(22.3mg，0.14mmol)在無水1，4-二氧雜環(huán)己烷中的溶液在100℃加熱48h。這時，將粗反應(yīng)物吸附到硅膠上并且通過LC純化(DCM到10％MeOH/DCM)，得到產(chǎn)物(13mg，50％)，為棕黃色固體。ES-LC/MS m/z＝562[M+H]+。
步驟DN-{4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-5-氟-2-嘧啶基}-2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉胺
向2，2，2-三氟-N-[3-(3-{5-氟-2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]乙酰胺(13mg，0.023mmol)在5∶1THF∶H2O(6mL)中的溶液加入1M LiOH(0.14mL，0.14mmol)并將反應(yīng)混合物在rt攪拌過夜。將反應(yīng)用鹽水(10mL)洗滌，分離有機(jī)層并且吸附到硅膠上，通過柱色譜法純化(0-10％MeOH/DCM+1％NH4OH)，得到標(biāo)題化合物(8.6mg，80％)，為灰白色固體。ES-LC/MS m/z＝466[M+H]+。
步驟E2，6-二氟-N-[3-(3-{5-氟-2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]苯甲酰胺(標(biāo)題化合物) 向N-{4-[2-(3-氨基苯基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-5-氟-2-嘧啶基}-2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉胺(50mg，0.11mmol)的THF(5mL)溶液加入2，6-二氟苯甲酰氯(20mg，0.11mmol)并將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?0min。將反應(yīng)用MeOH稀釋，吸附在硅膠上，并且通過柱色譜法純化(0-10％MeOH/DCM+1％NH4OH)，得到標(biāo)題化合物(15.4mg，24％)，為淺黃色固體。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.86(s，1H)，9.52(s，1H)，8.86(d，J＝7.69Hz，1H)，8.45-8.46(m，1H)，8.06(s，1H)，7.89(d，J＝8.61Hz，1H)，7.71-7.73(m，1H)，7.54-7.58(m，1H)，7.30-7.47(m，4H)，7.20-7.24(m，3H)，7.08-7.12(m，1H)，6.86(d，J＝8.42Hz，1H)，3.26(s，2H)，2.66-2.69(m，2H)，2.49-2.51(m，2H)，2.26(s，3H).ES-LC/MS m/z＝606[M+H]+. 實(shí)施例52N-{3-[3-(2-{[3-(4-甲基-1，3-噁唑-5-基)苯基]氨基}嘧啶-4-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A{1-[(3-氨基苯基)磺?；鵠乙基}甲酰胺
將攪拌的無水乙腈(500mL)和無水甲苯(500mL)的混合物冷卻到-30℃，隨后在氮?dú)鈿夥障略?30℃加入甲酰胺(50.7g，1.1mol)、乙醛(37g，0.85mol)和TMS-Cl(106.4g，0.98mol)。將反應(yīng)混合物在rt攪拌1h并且回溫到55℃，然后加入對甲苯磺酸并將反應(yīng)混合物在這個溫度攪拌過夜。將反應(yīng)混合物冷卻到0℃，隨后加入叔丁基醚(300mL)并且攪拌1h。形成的白色沉淀濾出并且干燥。粗產(chǎn)物(110g)不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
步驟B3-{[1-(異氰基乙基)乙基]磺?；鶀苯胺
向冷卻(0℃)的{1-[(3-氨基苯基)磺?；鵠乙基}甲酰胺(11g，0.484mol)的無水THF(1L)溶液緩慢加入磷酰氯(148.4g，0.968mol)并將反應(yīng)攪拌30分鐘。然后在30分鐘內(nèi)滴加TEA(293.8g，2.9mol)并將反應(yīng)進(jìn)一步在0℃攪拌2h。在通過TLC觀察到?jīng)]有起始原料之后，將反應(yīng)混合物用水猝滅并且用EtOAc提取(3×350mL)。合并的有機(jī)層用鹽水、水洗滌，用無水Na2SO4干燥并且濃縮。粗產(chǎn)物(60g)不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一步驟。
步驟C4-甲基-5-(3-硝基苯基)-1，3-噁唑
向冷卻(0℃)的3-{[1-(異氰基乙基)乙基]磺?；鶀苯胺(60g，0.287mol)的無水MeOH(800mL)溶液加入干粉狀K2CO3并且在室溫?cái)嚢?h。將反應(yīng)混合物再冷卻到0℃并且加入3-硝基苯甲醛(43g，0.287mol)。使反應(yīng)混合物回溫到室溫，然后在攪拌下在55℃加熱過夜。減壓除去過量的溶劑，將殘余物溶解于水(100mL)并且用EtOAc(3×350mL)提取。合并的有機(jī)層用鹽水、水洗滌，用無水Na2SO4干燥并且濃縮。粗產(chǎn)物通過硅膠(60-120目)柱色譜法純化，使用含15％EtOAc的石油醚，得到產(chǎn)物，為黃色固體。產(chǎn)量50g(86％)。
步驟D3-(4-甲基-1，3-噁唑-5-基)苯胺
將Pd/C(5g)小心地轉(zhuǎn)移到在Parr-振蕩瓶中的4-甲基-5-(3-硝基苯基)-1，3-噁唑(50g)的MeOH(600mL)溶液中并且在3.5kg壓力下氫化20h。將反應(yīng)混合物過濾通過硅藻土床層并將濾液濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜法純化，使用含40％EtOAc的石油醚，得到黃色固體。產(chǎn)量18g(42％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.23(s，1H)，7.08(t，J＝8.0Hz，1H)，6.82(s，1H)，6.71(d，J＝7.9Hz，1H)，6.52(d，J＝8.2Hz，1H)，5.24(s，2H)，2.29(s，3H). 步驟EN-{3-[3-(2-{[3-(4-甲基-1，3-噁唑-5-基)苯基]氨基}嘧啶-4-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 標(biāo)題化合物根據(jù)實(shí)施例2步驟E中所述方法從N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(參見實(shí)施例2步驟B)和3-(4-甲基-1，3-噁唑-5-基)苯胺合成。反應(yīng)在冷卻到rt時形成懸浮液。將懸浮液過濾，以81％收率得到標(biāo)題化合物。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.37(s，1H)，9.85(s，1H)，8.83(d，J＝6.9Hz，1H)，8.47(d，J＝9.0Hz，1H)，8.28(s，1H)，8.26(d，J＝5.3Hz，1H)，8.13(m，1H)，7.90(m，1H)，7.72(m，2H)，7.44-7.35(m，4H)，7.27(d，J＝7.6Hz，1H)，7.21(d，J＝7.8Hz，1H)，7.11(m，1H)，6.96(s，1H)，6.95(t，J＝3.3Hz，1H)，6.52(d，J＝5.4Hz，1H)，3.87(s，2H)，2.32(s，3H).ES-LC/MS m/z＝585[M+H]+. 實(shí)施例53N-{3-[3-(2-{[2-(二甲基氨基)-2，3-二氫-1H-茚-5-基]氨基}嘧啶-4-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟AN，N-二甲基-5-硝基-2，3-二氫-1H-茚-2-胺
將(5-硝基-2，3-二氫-1H-茚-2-基)胺鹽酸鹽(5.52g，26mmol)、低聚甲醛(4.1g，128mmol)、氰基硼氫化鈉(8.1g，128mmol)、和HOAc(7.4mL，128mmol)合并在DCE(200mL)中并將懸浮液加熱到回流，維持15h。將反應(yīng)冷卻并且用飽和NaHCO3水溶液猝滅。分離有機(jī)層，用鹽水洗滌并用MgSO4干燥并且濃縮為油狀物。粗物質(zhì)通過硅膠快速柱色譜法純化(0-100％(90％DCM/9％MeOH/1％NH4OH)/DCM)，得到2.7g(52％)的黃色油狀物，在將其儲存在實(shí)驗(yàn)臺頂部時發(fā)生結(jié)晶。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.07(m，2H)，7.36(d，J＝8.1Hz，1H)，4.13(m，1H)，3.34(m，4H)，2.74(s，6H). 步驟B(5-氨基-2，3-二氫-1H-茚-2-基)二甲胺
二甲基(5-硝基-2，3-二氫-1H-茚-2-基)胺(1.5g，7.3mmol))溶解于MeOH并且與5％Pd/C(250mg)在55PSI氫氣壓力下劇烈攪拌15h。將反應(yīng)過濾通過硅藻土并且真空除去溶劑。反應(yīng)產(chǎn)生1.2g(94％)白色粉末(5-氨基-2，3-二氫-1H-茚-2-基)二甲胺。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ6.84(d，J＝8.2Hz，1H)，6.41(s，1H)，6.38-6.36(m，1H)，4.88(s，2H)，3.86(quint，J＝8.8Hz，1H)，3.16-2.88(m，4H)，2.60(s，6H). 步驟CN-{3-[3-(2-{[2-(二甲基氨基)-2，3-二氫-1H-茚-5-基]氨基}嘧啶-4-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 標(biāo)題化合物如下合成將N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(147mg，0.33mmol)(參見實(shí)施例2步驟B)和(5-氨基-2，3-二氫-1H-茚-2-基)二甲胺(70mg，0.40mmol)合并在i-PrOH(2mL)中并且加入含1M鹽酸的乙醚(33uL，0.03mmol)。將反應(yīng)重復(fù)地在微波中加熱到180℃，20min，直到反應(yīng)混合物的LC/MS分析表明起始原料耗盡。將反應(yīng)產(chǎn)物濃縮為殘余物，在氯仿和飽和NaHCO3水溶液之間分配并將有機(jī)物級分用鹽水洗滌。將粗的有機(jī)溶液用Na2SO4干燥并且濃縮。粗產(chǎn)物通過硅膠快速柱色譜法純化(DCM0-100％90∶9∶1DCM∶MeOH∶NH4OH(aq))。純化得到43mg(22％)棕色粉末。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.34(s，1H)，9.41(s，1H)，8.81(d，J＝6.9Hz，1H)，8.46(m，1H)，8.21(dd，J＝5.2，4.1Hz，1H)，7.90-7.87(m，1H)，7.73(d，J＝8.0Hz，1H)，7.64(d，J＝15.4Hz，1H)，7.48-7.35(m，4H)，7.25(d，J＝7.7Hz，1H)，7.11(t，J＝7.0Hz，1H)，7.06-7.02(m，1H)，6.97-6.94(m，1H)，6.45(dd，J＝8.6，5.4Hz，1H)，3.86(s，2H)，3.30(s，6H)，3.02-2.86(m，2H)，2.70-2.63(m，1H)，2.17(s，2H).ES-LC/MS m/z＝586[M+H]+. 實(shí)施例54N-[3-(3-{2-[(2-氨基-2，3-二氫-1H-茚-5-基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A2，2，2-三氟-N-(5-硝基-2，3-二氫-1H-茚-2-基)乙酰胺 將TFAA(361μL，2.6mmol)滴加到在0℃攪拌的(5-硝基-2，3-二氫-1H-茚-2-基)胺鹽酸鹽(500mg，2.3mmol)、TEA(327uL，2.3mmol)和DCM(20mL)的溶液中。使冰浴回溫并將反應(yīng)在rt攪拌15h。將反應(yīng)在分液漏斗中用飽和NaHCO3水溶液洗滌，隨后用鹽水洗滌，然后用Na2SO4干燥。真空除去溶劑并將殘余物通過硅膠快速柱色譜法純化(DCM0-100％90∶9∶1DCM∶MeOH∶NH4OH(aq))。純化得到476mg(84％)產(chǎn)物，為白色粉末。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.75(d，J＝6.8Hz，1H)，8.10(s，1H)，8.06(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.49(d，J＝8.2Hz，1H)，4.67-4.58(m，1H)，3.35(dd，J＝16.8，8.1Hz，2H)，3.01(dd，J＝16.5，5.7Hz，2H). 步驟BN-(5-氨基-2，3-二氫-1H-茚-2-基)-2，2，2-三氟乙酰胺
將2，2，2-三氟-N-(5-硝基-2，3-二氫-1H-茚-2-基)乙酰胺(245mg，0.89mmol)溶解于EtOAc并且在氫氣氣氛(1atm)下與5％Pd/C(70mg)劇烈攪拌15h。將反應(yīng)過濾通過硅藻土并且真空除去溶劑。過濾得到214mg(98％)的期望的胺，為棕色粉末。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.60(d，J＝7.1Hz，1H)，6.81(d，J＝8.0Hz，1H)，6.39(s，1H)，6.34(d，J＝8.1Hz，1H)，4.83(s，2H)，4.43(m，1H)，3.01(m，2H)，2.71(m，2H)；ES-LC/MS(M+H)+＝245.11. 步驟C2，2，2-三氟-N-(5-{[4-(2-{3-[(2-噻吩基乙?；?氨基]苯基}吡唑并-[1，5-a]吡啶-3-基)-2-嘧啶基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-2-基)乙酰胺
將N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(109mg，0.25mmol)(參見實(shí)施例2步驟B)和N-(5-氨基-2，3-二氫-1H-茚-2-基)-2，2，2-三氟乙酰胺(72mg，0.30mmol)合并在i-PrOH(2mL)和含1M鹽酸的乙醚(25μL，0.025mmol)中并且在微波反應(yīng)器中在180℃加熱20min。將反應(yīng)產(chǎn)物濃縮并且通過硅膠快速柱色譜法直接純化(含30-100％EtOAc的己烷)。純化得到61mg(38％)的棕色油狀物。ES-LC/MS m/z＝654[M+H]+。
步驟DN-[3-(3-{2-[(2-氨基-2，3-二氫-1H-茚-5-基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 2，2，2-三氟-N-(5-{[4-(2-{3-[(2-噻吩基乙酰基)氨基]苯基}吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基)-2-嘧啶基]氨基}-2，3-二氫-1H-茚-2-基)乙酰胺(61mg，0.09mmol)在rt與含LiOH(20mg，0.47mmol)的MeOH(5mL)一起攪拌。在24h之后，加入另外的LiOH(20mg，0.47mmol)并攪拌反應(yīng)直到通過LC/MS分析顯示完全轉(zhuǎn)化。真空除去MeOH并將殘余物在EtOAc和水之間分配。有機(jī)物用鹽水洗滌并用MgSO4干燥。除去溶劑并將粗產(chǎn)物通過硅膠快速柱色譜法純化(DCM0-100％90∶9∶1DCM∶MeOH∶NH4OH(aq))，得到40mg(77％)的標(biāo)題化合物。
1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.32(s，1H)，9.37(s，1H)，8.79(d，J＝7.0Hz，1H)，8.45(d，J＝8.6Hz，1H)，8.19(d，J＝5.3Hz，1H)，7.86(s，1H)，7.72(d，J＝8.1Hz，1H)，7.62(s，1H)，7.46-7.32(m，4H)，7.24(d，J＝7.6Hz，1H)，7.09(t，J＝6.9Hz，1H)，7.01(d，J＝8.0Hz，1H)，6.95(m，1H)，6.42(d，J＝5.3Hz，1H)，3.85(s，2H)，3.65(m，1H)，2.94(dd，J＝15.5，6.8Hz，2H)，2.47(m，2H)，1.83(s，2H).ES-LC/MS m/z＝558[M+H]+. 實(shí)施例55N-[3-(3-{2-[(7-氨基-5，6，7，8-四氫-2-萘基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟A7-硝基-1，2，3，4-四氫-1-萘酚
7-硝基-3，4-二氫-1(2H)-萘酮(5.0g，26.1mmol)與含2M硼烷-二甲基硫醚的THF(14.4mL，28.8mmol)一起在THF(200mL)中在rt攪拌15h。將反應(yīng)冷卻到0℃并用MeOH猝滅。真空除去溶劑和反應(yīng)副產(chǎn)物，得到5.0g(99％)的期望的醇，為棕色粉末。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.25(d，J＝2.6Hz，1H)，7.98(dd，J＝8.5，2.6Hz，1H)，7.34(d，J＝8.5Hz，1H)，5.55(d，J＝5.7Hz，1H)，4.63(m，1H)，2.87-2.73(m，2H)，2.00-1.83(m，2H)，1.75-1.60(m，2H). 步驟B6-硝基-1a，2，3，7b-四氫萘并[1，2-b]環(huán)氧乙烯
將7-硝基-1，2，3，4-四氫-1-萘酚(4.0g，20.9mmol)用Amberlyst-15(5.0g)在甲苯(100mL)中在100℃處理15h。將反應(yīng)冷卻并且通過過濾除去Amberlyst。將濾液真空濃縮，得到3.33g(92％)的期望的烯，為棕色油狀物。將6-硝基-1，2-二氫萘(3.3g，18.9mmol)與3-氯過氧苯甲酸(5.1g，22.6mmol)在氯仿(60mL)中合并并且加熱到回流15h。將反應(yīng)冷卻，用EtOAc稀釋并用5％K2CO3水溶液洗滌三次。有機(jī)物用Na2SO4干燥，濃縮為殘余物并且通過硅膠快速柱色譜法純化(含0-50％EtOAc的己烷)。純化得到1.3g(36％)的環(huán)氧化物，為白色固體。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.44(d，J＝2.6Hz，1H)，8.12(dd，J＝8.1，2.4Hz，1H)，7.41(d，J＝8.5Hz，1H)，4.16(d，J＝4.4Hz，1H)，3.78(m，1H)，2.75-2.55(m，2H)，2.39-2.33(m，1H)，1.75-1.67(m，1H). 步驟C7-硝基-3，4-二氫-2(1H)-萘酮
將6-硝基-1a，2，3，7b-四氫萘并[1，2-b]環(huán)氧乙烯(1.3g，6.8mmol)與無水碘化鋅粉末(1.0g，3.1mmol)在苯中合并并且在無光照色容器中在氮?dú)庀聄t攪拌15h。將反應(yīng)混合物過濾并將濾液真空濃縮。粗的殘余物通過硅膠快速柱色譜法純化(10-50％EtOAc/己烷)，得到750mg(58％)的期望的酮，為黃色粉末。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.09(d，J＝2.1Hz，1H)，8.06(dd，J＝8.2，2.4Hz，1H)，7.55(d，J＝8.3Hz，1H)，3.75(s，2H)，3.15(t，J＝6.7Hz，2H)，2.50-2.43(m，4H). 步驟D7-硝基-1，2，3，4-四氫-2-萘胺
7-硝基-3，4-二氫-2(1H)-萘酮(200mg，1.1mmol)與乙酸銨(807mg，10.5mmol)、氰基硼氫化鈉(86mg，1.4mmol)和MeOH(5mL)合并并且加熱到50℃，維持15h。將反應(yīng)冷卻并且真空濃縮，并將殘余物在EtOAc和水之間分配。有機(jī)層用5％K2CO3水溶液、鹽水洗滌并且用Na2SO4干燥。將粗產(chǎn)物真空濃縮并且通過硅膠快速柱色譜法純化(0-100％(90％DCM/9％MeOH/1％NH4OH)/DCM)。純化得到130mg(65％)的期望的胺，為棕色油狀物。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.90-7.89(m，2H)，7.31(d，J＝8.5Hz，1H)，3.06-2.88(m，3H)，2.84-2.72(m，1H)，2.54-2.44(m，2H)，1.81(d，J＝35.2Hz，2H)，1.51-1.42(m，1H). 步驟EN-(7-氨基-1，2，3，4-四氫-2-萘基)-2，2，2-三氟乙酰胺
將7-硝基-1，2，3，4-四氫-2-萘胺如實(shí)施例54步驟A中所述用TFAA?；?，90％收率，隨后如實(shí)施例54步驟B中所述還原為相應(yīng)的苯胺，99％收率。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.39(d，J＝7.7Hz，1H)，6.70(d，J＝7.8Hz，1H)，6.33(dd，J＝8.1，2.4Hz，1H)，6.23(s，1H)，4.78(s，2H)，3.97-3.87(m，1H)，2.79-2.58(m，4H)，1.91-1.84(m，1H)，1.69-1.59(m，1H).ES-LC/MS m/z＝259[M+H]+. 步驟F2，2，2-三氟-N-(7-{[4-(2-{3-[(2-噻吩基乙?；?氨基]苯基}吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基)-2-嘧啶基]氨基}-1，2，3，4-四氫-2-萘基)乙酰胺
使N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(99mg，0.22mmol)(參見實(shí)施例2步驟B)和N-(7-氨基-1，2，3，4-四氫-2-萘基)-2，2，2-三氟乙酰胺(69mg，0.26mmol)遵循實(shí)施例54步驟C中所示的方案。純化得到60mg(41％)偶聯(lián)加合物，為油狀物。ES-LC/MSm/z＝668[M+H]+。
步驟GN-[3-(3-{2-[(7-氨基-5，6，7，8-四氫-2-萘基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 標(biāo)題化合物如下制備如實(shí)施例54步驟D中所述用LiOH的在MeOH中處理2，2，2-三氟-N-(7-{[4-(2-{3-[(2-噻吩基乙?；?氨基]苯基}吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基)-2-嘧啶基]氨基}-1，2，3，4-四氫-2-萘基)乙酰胺(60mg，0.09mmol)。純化得到50mg(51％)期望的胺。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.32(s，1H)，9.34(s，1H)，8.80(d，J＝6.8Hz，1H)，8.46(d，J＝8.8Hz，1H)，8.18(d，J＝5.4Hz，1H)，7.86(s，1H)，7.72(d，J＝8.1Hz，1H)，7.48-7.34(m，4H)，7.24(d，J＝7.6Hz，1H)，7.09(t，J＝6.7Hz，1H)，6.95-6.89(m，3H)，6.41(d，J＝5.2Hz，1H)，3.85(s，2H)，2.96(m，1H)，2.79-2.60(m，3H)，2.41-2.31(m，1H)，1.90-1.74(m，3H)，1.46-1.33(m，1H).ES-LC/MS m/z＝572[M+H]+. 實(shí)施例56N-{2-甲基-5-[3-(2-{[3-(1-吡咯烷基甲基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟AN-(5-溴-2-甲基苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺
向5-溴-2-甲基苯胺(10g，54mmol)的DCM(500mL)溶液加入TEA(11mL，81mmol)和TFAA(9mL，65mmol)。在1小時之后，反應(yīng)用水稀釋。有機(jī)相用水洗滌兩次，用MgSO4干燥并且濃縮，得到期望的產(chǎn)物(15g，99％)，為淺黃色固體。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ11.02(s，1H)，7.49(d，J＝2.0Hz，1H)，7.43(dd，J＝8.0和2.0Hz，1H)，7.26(d，J＝8.0Hz，1H)，2.13(s，3H)ppm. 步驟B2，2，2-三氟-N-{2-甲基-5-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]苯基}乙酰胺
向N-(5-溴-2-甲基苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺(15g，54mmol)的THF(300mL)溶液加入Pd(PPh3)2Cl2(3.79g，5.4mmol)、CuI(513mg，2.7mmol)和TEA(23mL，162mmol)。將溶液加熱到60℃。在約60分鐘內(nèi)通過加料漏斗滴加三甲基甲硅烷基乙炔(11.5mL，81mmol)的THF(200mL)溶液。在16h之后，反應(yīng)濃縮到硅膠上并且通過柱色譜法純化，得到期望的產(chǎn)物(10.92g，67％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.97(s，1H)，7.35-7.30(m，3H)，2.18(S，3H)，0.21(s，9H)ppm. 步驟CN-(5-乙炔基-2-甲基苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺
向冷卻到0℃的2，2，2-三氟-N-{2-甲基-5-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]苯基}-乙酰胺(10.9g，36mmol)的THF(350mL)溶液加入1M氟化四丁基銨的THF溶液(40mmol，40mL)。將反應(yīng)用水稀釋并且用EtOAc提取兩次。合并的有機(jī)提取液用水洗滌，用MgSO4干燥并且濃縮到硅膠上。粗物質(zhì)通過柱色譜法純化，得到期望的產(chǎn)物(6.4g，78％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ11.00(s，1H)，7.36-7.30(m，3H)，4.19(s，1H)，2.17(s，3H)ppm. 步驟DN-{5-[(2-氯-4-嘧啶基)乙炔基]-2-甲基苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺
向2，4-二氯嘧啶(3.8g，25.5mmol)的THF(175mL)溶液加入Pd(PPh3)2Cl2(1.8g，2.6mmol)、CuI(247mg，1.3mmol)、和TEA(10.7mL，76.5mmol)并將混合物加熱到60℃。在60分鐘內(nèi)通過加料漏斗加入N-(5-乙炔基-2-甲基苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺(6.4g，28mmol)的THF(75mL)溶液。在16h之后，將黑色的反應(yīng)濃縮到硅膠上并且通過柱色譜法純化。將包含產(chǎn)物的級分濃縮并將不純物與DCM研磨。殘余的液體再次通過柱色譜法純化，得到期望的產(chǎn)物(2.7g，31％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ11.09(s，1H)，8.83(d，J＝4.8Hz，1H)，7.77(d，J＝5.2Hz，1H)，7.62(s，1H)，7.58(dd，J＝8.0和1.6Hz，1H)，7.45(d，J＝8.0Hz，1H)，2.24(s，3H)ppm. 步驟EN-{5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-甲基苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺
向N-{5-[(2-氯-4-嘧啶基)乙炔基]-2-甲基苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(2.7g，8mmol)的DMF(50mL)溶液加入碘化N-氨基吡啶鎓(3.6g，16mmol)和K2CO3(3.3g，24mmol)。在3小時之后，反應(yīng)用水稀釋并且用DCM提取。合并的有機(jī)溶液用MgSO4干燥并且濃縮到硅膠上。粗物質(zhì)通過柱色譜法純化。將包含產(chǎn)物的級分濃縮并將固體與DCM和己烷一起研磨，得到1.92g的期望的產(chǎn)物(56％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ11.07(s，1H)，8.89(d，J＝6.8Hz，1H)，8.45(d，J＝6.8Hz，1H)，8.40(d，J＝8.8Hz，1H)，7.65-7.61(m，1H)，7.55(s，1H)，7.52-7.49(m，1H)，7.45(d，J＝8.0Hz，1H)，7.22-7.19(m，1H)，7.08(d，J＝5.6Hz，1H)，2.27(s，3H)ppm. 步驟F5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-甲基苯胺
將N-{5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-甲基苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(1.92g，4.45mmol)和1M氫氧化鋰水溶液在THF(36mL)和水(4mL)中的溶液在50℃攪拌。在起始原料耗盡時，反應(yīng)用水稀釋。將得到的固體過濾并且干燥，得到標(biāo)題化合物(2.1g，100％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.83(d，J＝7.2Hz，1H)，8.42-8.38(m，2H)，7.59(t，J＝8.0Hz，1H)，7.15(m，1H)，7.05-7.02(m，2H)，6.80(d，J＝1.2Hz，1H)，6.63-6.61(m，1H)，5.03(s，2H)，2.10(s，3H)ppm. 步驟GN-{5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-甲基苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
向5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-甲基苯胺(856mg，2.55mmol)的THF(25mL)溶液加入噻吩-2-乙酰氯(0.33mL，2.68mmol)。在TLC顯示反應(yīng)完成時，加入PS-三胺。在16h之后，加入TEA并將混合物過濾。濾液用DCM稀釋并用水洗滌。有機(jī)相用MgSO4干燥并且濃縮到硅膠上。粗物質(zhì)通過柱色譜法純化，得到期望的產(chǎn)物(1.13g，97％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.63(s，1H)，8.87(d，J＝7.2Hz，1H)，8.43-8.39(m，2H)，7.70(s，1H)，7.62(t，J＝8.0Hz，1H)，7.38-7.30(m，3H)，7.20(m，1H)，7.18(d，J＝6.8Hz，1H)，7.09-6.95(m，2H)，3.91(s，2H)，2.28(s，3H)ppm. 步驟HN-{2-甲基-5-[3-(2-{[3-(1-吡咯烷基甲基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 將在iPrOH(4mL)中的N-{5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-甲基苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(100mg，0.22mmol)、3-(1-吡咯烷基甲基)苯胺(78mg，0.44mmol)和催化用濃HCl在微波中在180℃加熱10min。將反應(yīng)濃縮并將殘余物溶解于DCM。有機(jī)溶液用飽和的NaHCO3(aq)和水洗滌，用MgSO4干燥并且濃縮到硅膠上。粗物質(zhì)通過柱色譜法純化。將包含純的產(chǎn)物的級分濃縮，承載在MeOH中并且用MP-碳酸鹽中和。將混合物過濾并將濾液濃縮并與DCM和己烷一起研磨，得到標(biāo)題化合物(28mg，21％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.62(s，1H)，9.50(s，1H)，8.80(d，J＝6.8Hz，1H)，8.50(d，J＝9.2Hz，1H)，8.21(d，J＝5.6Hz，1H)，7.73(s，1H)，7.68(s，1H)，7.63(d，J＝8.4Hz，1H)，7.45-7.41(m，1H)，7.36(m，1H)，7.32-7.28(m，2H)，7.16(t，J＝7.8Hz，1H)，7.11-7.07(m，1H)，6.98-6.95(m，2H)，6.87(d，J＝7.2Hz，1H)，6.50(d，J＝5.6Hz，1H)，3.91(s，2H)，3.50(s，2H)，2.39(m，4H)，2.26(s，3H)，1.65-1.64(m，4H)ppm.ES-LC/MS m/z＝600[M+H]+. 實(shí)施例57N-[5-(3-{2-[(5-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}2-甲基苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-甲基苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟H的方法使N-{5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-甲基苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(100mg，0.22mmol)和5-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯胺鹽酸鹽(102mg，0.44mmol)偶聯(lián)，得到標(biāo)題化合物(45mg，33％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.61(s，1H)，8.74(d，J＝6.8Hz，1H)，8.66(s，1H)，8.25(d，J＝9.2Hz，1H)，8.08(d，J＝5.2Hz，1H)，7.67(s，1H)，7.35(d，J＝4.8Hz，1H)，7.32-7.25(m，3H)，7.16(d，J＝2.8Hz，1H)，7.12(d，J＝8.8Hz，1H)，7.05-7.01(m，1H)，6.96-6.93(m，2H)，6.68(dd，J＝8.4and 2.4Hz，1H)，6.38(d，J＝5.6Hz，1H)，3.96(m，2H)，3.89(s，2H)，2.56(m，2H)，2.15(s，3H)，2.14(s，6H)ppm.ES-LC/MS m/z＝618[M+H]+. 實(shí)施例58N-[5-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-甲基苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟H的方法使N-{5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-甲基苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(100mg，0.22mmol)和3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-苯胺二鹽酸鹽(112mg，0.44mmol)偶聯(lián)，得到25mg的標(biāo)題化合物(19％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.63(s，1H)，9.53(s，1H)，8.81(d，J＝7.2Hz，1H)，8.49(d，J＝9.2Hz，1H)，8.23(d，J＝5.6Hz，1H)，7.72(s，1H)，7.52(s，1H)，7.47-7.43(m，1H)，7.36(d，J＝4.8Hz，1H)，7.30-7.25(m，3H)，7.14-7.08(m，2H)，6.97-6.95(m，2H)，6.52-6.50(m，2H)，3.97(m，2H)，3.90(s，2H)，2.58(t，J＝5.6Hz，2H)，2.26(s，3H)，2.17(s，6H)ppm.ES-LC/MS m/z＝604[M+H]+. 實(shí)施例59N-[2-甲基-5-(3-{2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟H的方法使N-{5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-甲基苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(100mg，0.22mmol)和2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉胺(72mg，0.44mmol)偶聯(lián)，得到31mg的標(biāo)題化合物(24％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.63(s，1H)，9.41(s，1H)，8.80(d，J＝6.8Hz，1H)，8.45(d，J＝8.8Hz，1H)，8.20(d，J＝5.2Hz，1H)，7.73(s，1H)，7.50-7.49(m，1H)，7.45-7.36(m，3H)，7.32-7.27(m，2H)，7.11-7.07(m，1H)，6.97-6.96(m，3H)，6.48(d，J＝5.2Hz，1H)，3.90(s，2H)，3.37(s，2H)，2.75-2.72(m，2H)，2.57-2.54(m，2H)，2.29(s，3H)，2.26(s，3H)ppm.ES-LC/MS m/z＝586[M+H]+. 實(shí)施例60N-[5-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-氟苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟AN-(5-溴-2-氟苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺
向4-溴-1-氟-2-硝基苯(10g，45mmol)的EtOH(400mL)溶液加入二氯化錫(II)(34g，180mmol)并將反應(yīng)加熱到60℃。在16h之后，將反應(yīng)冷卻并且用NaOH(aq)中和。加入乙酸乙酯并將液體從固體傾析掉若干次。合并的有機(jī)物用MgSO4干燥并且濃縮為橙色殘余物。將殘余物溶解于DCM(400mL)。加入三乙胺(12.5mL，90mmol)和TFAA(7.5mL，54mmol)。在30min之后，將反應(yīng)直接濃縮到硅膠上。粗物質(zhì)通過柱色譜法純化并將產(chǎn)物與己烷一起研磨，得到期望的產(chǎn)物(8.04g，62％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ11.39(s，1H)，7.76-7.73(m，1H)，7.59-7.55(m，1H)，7.38-7.33(m，1H)ppm. 步驟B2，2，2-三氟-N-{2-氟-5-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]苯基}乙酰胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟B的方法使N-(5-溴-2-氟苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺(8.04g，28mmol)和(三甲基甲硅烷基)乙炔(6mL，42mmol)偶聯(lián)，得到期望的產(chǎn)物(6.66g，78％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ11.32(s，1H)，7.62-7.60(m，1H)，7.47-7.44(m，1H)，7.39-7.33(m，1H)，0.21(s，9H)ppm. 步驟CN-(5-乙炔基-2-氟苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟C的方法將2，2，2-三氟-N-{2-氟-5-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]苯基}乙酰胺(6.66g，22mmol)脫甲硅烷基，得到期望的產(chǎn)物(5.32g，100％)。產(chǎn)物不經(jīng)純化直接使用。ES-LC/MS m/z＝230[M-H]-。
步驟DN-{5-[(2-氯-4-嘧啶基)乙炔基]-2-氟苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟D的方法使N-(5-乙炔基-2-氟苯基)-2，2，2-三氟乙酰胺(5.32g，22mmol)和1，4-二氯嘧啶(3.13g，0.21mmol)偶聯(lián)，得到期望的產(chǎn)物(2.06g，29％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ11.47(s，1H)，8.84(d，J＝5.2Hz，1H)，7.88(dd，J＝7.2和2.0Hz，1H)，7.79(d，J＝5.2Hz，1H)，7.75-7.71(m，1H)，7.54-7.50(m，1H)ppm. 步驟EN-{5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-氟苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟E的方法使N-{5-[(2-氯-4-嘧啶基)乙炔基]-2-氟苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(2.06g，6mmol)進(jìn)行環(huán)化，得到期望的產(chǎn)物(1.78g，68％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ11.41(s，1H)，8.89(d，J＝6.8Hz，1H)，8.49(d，J＝5.2Hz，1H)，8.38(d，J＝9.2Hz，1H)，7.79(dd，J＝7.2和2.0Hz，1H)，7.66-7.61(m，2H)，7.53-7.48(m，1H)，7.23-7.20(m，1H)，7.10(d，J＝5.6Hz，1H)ppm. 步驟F5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-氟苯胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟F的方法使N-{5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-氟苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(1.78g)脫保護(hù)，得到期望的產(chǎn)物(1,34g，97％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.84(d，J＝6.8Hz，1H)，8.44(d，J＝5.2Hz，1H)，8.38(d，J＝8.8Hz，1H)，7.60(t，J＝7.8Hz，1H)，7.17(t，J＝6.8Hz，1H)，7.12-7.07(m，1H)，7.02(d，J＝5.6Hz，1H)，6.95(dd，J＝8.8和2.0Hz，1H)，6.69-6.65(m，1H)，5.34(s，2H)ppm. 步驟GN-{5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-氟苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟G的方法使5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-氟苯胺(690mg，2.0mmol)和噻吩-2-乙酰氯(0.26mL，2.1mmol)偶聯(lián)，得到期望的產(chǎn)物(858mg，92％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.21(s，1H)，8.93(d，J＝9.2Hz，1H)，8.49(d，J＝7.6Hz，1H)，8.44(d，J＝12.0Hz，1H)，8.29-8.27(m，1H)，7.70-7.65(m，1H)，7.49-7.41(m，3H)，7.27-7.22(m，1H)，7.13(d，J＝7.2Hz，1H)，7.02-6.98(m，2H)，4.02(s，2H)ppm. 步驟HN-[5-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-氟苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 根據(jù)實(shí)施例56步驟H的方法使N-{5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-氟苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(100mg，0.22mmol)和3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯胺鹽酸鹽(102mg，0.44mmol)偶聯(lián)，得到標(biāo)題化合物(31mg，23％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.14(s，1H)，8.80(s，1H)，8.75(d，J＝6.8Hz，1H)，8.20-8.15(m，2H)，8.10(d，J＝5.2Hz，1H)，7.39-7.25(m，4H)，7.13-6.94(m，5H)，6.81(d，J＝8.4Hz，1.H)，6.36(d，J＝5.2Hz，1H)，4.06(t，J＝5.6Hz，2H)，3.97(s，2H)，2.65(t，J＝5.6Hz，2H)，2.21(s，6H)，2.04(s，3H)ppm.ES-LC/MS m/z＝622[M+H]+， 實(shí)施例61N-{2-氟-5-[3-(2-{[3-(1-吡咯烷基甲基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟H的方法使N-{5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-氟苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(100mg，0.22mmol)和3-(1-吡咯烷基甲基)苯胺(78mg，0.44mmol)偶聯(lián)，得到標(biāo)題化合物(35mg，26％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.11(s，1H)，9.49(s，1H)，8.80(d，J＝6.8Hz，1H)，8.44(d，J＝8.8Hz，1H)，8.26-8.22(m，2H)，7.64(s，1H)，7.59(d，J＝8.0Hz，1H)，7.43(t，J＝7.8Hz，1H)，7.37-7.32(m，3H)，7.16-7.07(m，2H)，6.95-6.93(m，2H)，6.85(d，J＝7.2Hz，1H)，6.49(d，J＝4.8Hz，1H)，3.96(s，2H)，3.48(br s，2H)，2.38(m，4H)，1.64(m，4H)ppm.ES-LC/MS m/z＝604[M+H]+. 實(shí)施例62N-[5-(3-{2-[(5-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-氟苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟H的方法使N-{5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-氟苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(100mg，0.22mmol)和5-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯胺鹽酸鹽(102mg，0.44mmol)偶聯(lián)，得到標(biāo)題化合物(38mg，28％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.13(s，1H)，8.76(d，J＝6.8Hz，1H)，8.67(s，1H)，8.26-8.19(m，2H)，8.12(d，J ＝5.2Hz，1H)，7.39-7.28(m，4H)，7.16-7.11(m，2H)，7.07-7.04(m，1H)，7＝6.96-6.94(m，2H)，6.68(dd，J＝8.4和2.8Hz，1H)，6.37(d，J＝5.2Hz，1H)，3.97(m，4H)，2.56(m，2H)，2.16(s，3H)，2.15(s，6H)ppm.ES-LC/MS m/z＝622[M+H]+. 實(shí)施例63N-[2-氟-5-(3-{2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟H的方法使N-{5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-氟苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(100mg，0.22mnmol)和2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉胺(72mg，0.44mmol)偶聯(lián)，得到標(biāo)題化合物(42mg，32％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.12(s，1H)，9.39(s，1H)，8.80(d，J＝7.2Hz，1H)，8.39(d，J＝8.8Hz，1H)，8.26(d，J＝8.0Hz，1H)，8.22(d，J＝5.2Hz，1H)，7.45-7.41(m，2H)，7.37-7.32(m，4H)，7.09(t，J＝6.8Hz，1H)，6.95-6.92(m，3H)，6.48(d，J＝5.2Hz，1H)，3.95(s，2H)，3.34(s，2H)，2.72-2.70(m，2H)，2.54-2.51(m，2H)，2.27(s，3H)ppm.ES-LC/MSm/z＝590[M+H]+. 實(shí)施例64N-[5-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-(甲氧基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟AN-[5-溴-2-(甲氧基)苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺
根據(jù)實(shí)施例60步驟A的方法將4-溴-2-硝基苯甲醚(10g，43mmol)還原并且保護(hù)，得到期望的產(chǎn)物(5.79g，45％)。ES-LC/MS m/z＝296[M-H]-。
步驟B2，2，2-三氟-N-{2-(甲氧基)-5-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]苯基}-乙酰胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟B的方法使N-[5-溴-2-(甲氧基)苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺(5.79g，19.4mmol)和(三甲基甲硅烷基)乙炔(4.1mL，29.1mmol)偶聯(lián)，得到期望的產(chǎn)物(2.32g，38％)。ES-LC/MS m/z＝314[M-H]-。
步驟CN-[5-乙炔基-2-(甲氧基)苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟C的方法使2，2，2-三氟-N-{2-(甲氧基)-5-[(三甲基甲硅烷基)乙炔基]苯基}-乙酰胺脫保護(hù)，得到期望的產(chǎn)物(1.80g，99％)。ES-LC/MS m/z＝242[M-H]-。
步驟DN-[5-[(2-氯-4-嘧啶基)乙炔基]-2-(甲氧基)苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟D的方法使多個批料N-[5-乙炔基-2-(甲氧基)苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺(2.01g，8.3mmol)與2，4-二氯嘧啶(3.1g，20.8mmol)偶聯(lián)，得到標(biāo)題化合物(1.7g，58％)。ES-LC/MS m/z＝356[M+H]+。
步驟EN-[5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-(甲氧基)苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟E的方法使N-[5-[(2-氯-4-嘧啶基)乙炔基]-2-(甲氧基)苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺(1.7g，4.8mmol)進(jìn)行與碘化N-氨基吡啶鎓(2.1g，9.6mmol)的環(huán)化，得到期望的產(chǎn)物(1.15g，53％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.82(s，1H)，8.88(d，J＝6.8Hz，1H)，8.45(d，J＝5.6Hz，1H)，8.39(d，J＝8.4Hz，1H)，7.70(d，J＝2.0Hz，1H)，7.64-7.60(m，1H)，7.57(dd，J＝8.6和1.8Hz，1H)，7.28(d，J＝8.4Hz，1H)，7.21-7.18(m，1H)，7.11(d，J＝5.6Hz，1H)，3.90(s，3H)ppm. 步驟F5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-(甲氧基)苯胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟F的方法使N-[5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-(甲氧基)苯基]-2，2，2-三氟乙酰胺(1.15g，2.6mmol)脫保護(hù)，得到期望的產(chǎn)物(898mg，98％)。
1HNMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.84(s，J＝7.2Hz，1H)，8.44-8.39(m，2H)，7.62-7.58(m，1H)，7.16(dt，J＝6.8和1.2Hz，1H)，7.07(d，J＝5.6Hz，1H)，6.90(d，J＝8.0Hz，1H)，6.84(d，J＝2.0Hz，1H)，6.72(dd，J＝8.2和2.2Hz，1H)，4.92(s，2H)，3.82(s，3H)ppm. 步驟GN-[5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-(甲氧基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟G的方法使5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-(甲氧基)苯胺(400mg，1.14mmol)和噻吩-2-乙酰氯(148mL，1.50mmol)偶聯(lián)，得到期望的產(chǎn)物(454mg，84％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.51(s，1H)，8.87(D，J＝7.2Hz，1H)，8.42-8.38(m，2H)，8.27(s，1H)，7.61(d，J＝8.0Hz，1H)，7.37-7.36(m，1H)，7.30(dd，J＝8.4和2.0Hz，1H)，7.19-7.16(m，2H)，7.09(d，J＝5.6Hz，1H)，6.96-6.94(m，2H)，3.98(s，2H)，3.91(s，3H)ppm. 步驟HN-[5-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-(甲氧基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物) 根據(jù)實(shí)施例56步驟H的方法使N-[5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-(甲氧基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(119mg，0.25mmol)和3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯胺鹽酸鹽(115mg，0.50mmol)偶聯(lián)，得到標(biāo)題化合物(32mg，20％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.70(s，1H)，8.44(d，J＝6.8Hz，1H)，8.26(d，J＝8.8Hz，1H)，8.09(d，J＝5.6Hz，1H)，8.01(s，1H)，7.55(d，J＝8.4Hz，1H)，7.29-7.24(m，2H)，7.20-7.13(m，2H)，7.04-7.03(m，2H)，6.88-6.82(m，3H)，6.69(d，J＝8.4Hz，1H)，6.55(d，J＝5.6Hz，1H)，4.16-4.13(m，2H)，3.94(s，2H)，3.82(s，3H)，2.83(m，2H)，2.40(s，6H)，2.22(s，3H)ppm.ES-LC/MS m/z＝634[M+H]+. 實(shí)施例65N-[5-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-(甲氧基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟H的方法使N-[5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-(甲氧基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(119mg，0.25mmol)和3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-苯胺二鹽酸鹽(127mg，0.50mmol)偶聯(lián)，得到標(biāo)題化合物(46mg，30％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.80(s，1H)，8.48(d，J＝7.2Hz，1H)，8.35(d，J＝9.2Hz，1H)，8.16(d，J＝5.2Hz，1H)，8.01(s，1H)，7.49(s，1H)，7.28-7.24(m，4H)，7.22-7.18(m，1H)，7.12(d，J＝8.4Hz，1H)，7.04-7.03(m，2H)，6.89-6.86(m，2H)，6.61-6.59(m，2H)，4.09(m，2H)，3.95(s，2H)，3.81(s，3H)，2.76(m，2H)，2.35(s，6H)ppm.ES-LC/MS m/z ＝620[M+H]+. 實(shí)施例66N-[5-(3-{2-[(5-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-(甲氧基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
根據(jù)實(shí)施例56步驟H的方法使N-[5-[3-(2-氯-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-(甲氧基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺(119mg，0.25mmol)和5-{[2-(二甲基氨基)乙基]-氧基}-2-甲基苯胺鹽酸鹽(116mg，0.50mmol)偶聯(lián)，得到標(biāo)題化合物(45mg，28％)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.70(d，J＝1.6Hz，1H)，8.46(d，J＝7.2Hz，1H)，8.33(d，J＝8.8Hz，1H)，8.11(d，J＝5.6Hz，1H)，8.01(s，1H)，7.80(d，J＝2.4Hz，1H)，7.30-7.20(m，3H)，7.11(d，J＝8.4Hz，1H)，7.04-7.03(m，2H)，6.89-6.84(m，3H)，6.63(dd，J＝8.4和2.4Hz，1H)，6.56(d，J＝5.2Hz，1H)，4.06(m，2H)，3.94(s，2H)，3.82(s，3H)，2.74(m，2H)，2.33(s，6H)，2.28(s，3H)ppm.ES-LC/MS m/z＝634[M+H]+. 實(shí)施例67N-{3-[3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}-6-(甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-1-苯基環(huán)丙烷甲酰胺
步驟AN-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-(甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺
N-[3-(2-氯-嘧啶-4-基乙炔基)-苯基]-2，2，2-三氟-乙酰胺(參見實(shí)施例1步驟B)(2.0g，6.1mmol)、2，4，6-三甲基苯磺酸1-氨基-3-(甲氧基)吡啶鎓(2.3g，12.3mmol)、和K2CO3(2.4g，18.4mmol)在DMF(60mL)中rt攪拌16h。然后將反應(yīng)混合物傾倒在水(300mL)中并且過濾，得到粗產(chǎn)物，將其通過硅膠色譜法純化，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(0.264g，9.5％)。ES-LC/MS m/z＝448[M+H]+。另外，分離得到低Rf值化合物N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-4-(甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(1.10g，40％)。ES-LC/MS m/z＝448[M+H]+。
步驟B4-[2-(3-氨基苯基)-6-(甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺
將N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-(甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(0.26g，0.58mmol)和{2-[(3-氨基苯基)氧基]乙基}二甲胺二鹽酸鹽(0.18g，0.70mmol)合并在i-PrOH(4mL)中并且在160℃微波處理15分鐘。將反應(yīng)混合物濃縮到干燥，得到N-{3-[3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}-6-(甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺，為棕色固體。將固體溶解于THF(5mL)和水(0.5mL)中并且用1N NaOH(3mL)處理并且rt攪拌16h，在所述時間之后，LC/MS顯示反應(yīng)未完成。加入1N NaOH(1mL)并將混合物在40℃加熱2h，然后冷卻到rt并且用DCM和水稀釋。有機(jī)層用鹽水洗滌，用MgSO4干燥并且濃縮，得到標(biāo)題化合物，為粗的黃色固體(320mg，＞100％)，將其直接用于步驟C。ES-LC/MS m/z＝496[M+H]+。
步驟CN-{3-[3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}-6-(甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-1-苯基環(huán)丙烷甲酰胺(標(biāo)題化合物) 將4-[2-(3-氨基苯基)-6-(甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺(100mg，0.21mmol)、1-苯基環(huán)丙烷甲酸(41mg，0.25mmol)、和二異丙基乙基胺(0.10mL，1.0mmol)合并在DMF(1mL)中，隨后加入HATU[O-(7-氮雜苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基鏻六氟磷酸鹽](78mg，0.21mmol)。將混合物在rt攪拌2h，在所述時間之后，加入另外的HATU(80mg，0.21mmol)、1-苯基環(huán)丙烷甲酸(40mg，0.25mmol)、和二異丙基乙基胺(0.10mL，1.0mmol)。將混合物攪拌16h，在所述時間之后，將混合物傾倒在水中，用DCM提取，并將有機(jī)相濃縮并且通過硅膠色譜法純化，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(55mg，41％)。
1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.53(s，1H)，9.24(s，1H)，8.53(d，J＝2.1Hz，1H)，8.43(d，J＝10.4Hz，1H)，8.20(d，J＝5.2Hz，1H)，7.85(br s，1H)，7.66(d，J＝8.3Hz，1H)，7.52(br s，1H)，7.39-7.31(m，5H)，7.28-7，20(m，4H)，7.13(t，J＝8.1Hz，1H)，6.51(dd，J＝7.9，2.3Hz，1H)，6.43(d，J＝5.2Hz，1H)，3.97(t，J＝6.5Hz，2H)，3.86(s，3H)，2.65-2.60(m，2H)，2.20(s，6H)，1.42(m，2H)，1.09(m，2H).ES-LC/MS m/z＝640[M+H]+. 實(shí)施例68(2E)-N-{3-[3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}-6-(甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-3-苯基-丙烯酰胺
將4-[2-(3-氨基苯基)-6-(甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺(97mg，0.20mmol)和(2E)-3-苯基-2-丙烯酰氯(40mg，0.24mmol)合并在THF(2mL)中并且攪拌1小時?；旌衔镉肈CM和TEA(2滴)稀釋，吸收到硅膠上，并且通過硅膠色譜法純化，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(56mg，45％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.34(s，1H)，9.55(s，1H)，8.57(d，J＝2.0Hz，1H)，8.45(d，J＝9.3Hz，1H)，8.23(d，J＝5.6Hz，1H)，7.97(br s，1H)，7.82(d，J＝7.9Hz，1H)，7.62-7.59(m，3H)，7.55-7.53(m，1H)，7.47-7.39(m，4H)，7.30-7.26(m，3H)，7.14(m，1H)，6.81(d，J＝15.6Hz，1H)，6.52(dd，J＝8.2，2.5Hz，1H)，6.48(d，J＝5.3Hz，1H)，3.99(t，J＝6.0Hz，3H)，3.87(s，3H)，2.68-2.64(m，2H)，2.23(s，6H).ES-LC/MS m/z＝626[M+H]+. 實(shí)施例69N-{3-[3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}-6-(甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-N-[(1R)-1-苯基乙基]脲
將4-[2-(3-氨基苯基)-6-(甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺(61mg，0.12mmol)和[(1R)-1-異氰酸基乙基]苯(34mg，0.23mmol)合并在THF(2mL)中并且攪拌2h，在所述時間之后，分批加入另外的[(1R)-1-異氰酸基乙基]苯(10mg，0.068mmol)，直到通過LC/MS證明反應(yīng)完成。將混合物吸收到硅膠上并且通過硅膠色譜法純化，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(34mg，44％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.50(s，1H)，8.53(d，J＝5.9Hz，2H)，8.45(d，J＝9.9Hz，1H)，8.20(d，J＝5.5Hz，1H)，7.64(s，1H)，7.51(s，1H)，7.44(d，J＝7.4Hz，1H)，7.32-7.19(m，7H)，7.15-7.04(m，3H)，6.61(d，J＝8.5Hz，1H)，6.51(d，J＝8.1Hz，1H)，6.44(d，J＝5.2Hz，1H)，4.78(t，J＝7.4Hz，1H)，3.96(t，J＝5.5Hz，2H)，3.85(s，3H)，2.56(t，J＝5.7Hz，2H)，2.16(s，6H)，1.36(d，J＝7.1Hz，3H).ES-LC/MS m/z＝643[M+H]+. 實(shí)施例70N-{3-[3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}-6-(甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-N-[(4-氟苯基)甲基]脲
標(biāo)題化合物以與實(shí)施例69相似的方法從4-[2-(3-氨基苯基)-6-(甲氧基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基]-N-(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)-2-嘧啶胺(57mg，0.12mmol)和1-氟-4-(異氰酸基甲基)苯(46mg，0.30mmol)制備。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.50(s，1H)，8.70(s，1H)，8.53(s，1H)，8.44(d，J＝10.0Hz，1H)，8.20(d，J＝5.1Hz，1H)，7.66(s，1H)，7.50-7.47(m，2H)，7.33-7.23(m，5H)，7.14-7.04(m，4H)，6.61(t，J＝6.1Hz，1H)，6.51-6.49(m，1H)，6.44(d，J＝6.2Hz，1H)，4.23(d，J＝6.5Hz，2H)，3.95(t，J＝5.8Hz，2H)，3.85(s，3H)，2.55(t，J＝5.9Hz，2H)，2.14(s，6H).ES-LC/MS m/z＝647[M+H]+. 實(shí)施例71N-{3-[6-甲基-3-(2-{[3-(1-吡咯烷基甲基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
步驟AN-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-甲基吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺
以與實(shí)施例67步驟A相似的方法將N-[3-(2-氯-嘧啶-4-基乙炔基)-苯基]-2，2，2-三氟-乙酰胺(5.00g，1845mmol)和1-氨基-3-甲基吡啶鎓硝酸鹽(6.19g，3690mmol)合并，得到1.80g的粗物質(zhì)，將其通過HPLC分離純化，得到N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-甲基吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(1.70g，21％)。
1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.37(s，1H)，8.73(s，1H)，8.43(d，J＝5.6Hz，1H)，8.28(d，J＝9.2Hz，1H)，7.92(s，1H)，7.83(d，J＝8.4Hz，1H)，7.56-7.49(m，2H)，7.45-7.40(m，1H)，7.03(d，J＝5.6Hz，1H)，2.37(s，3H). 步驟B{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-甲基吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}胺
將N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-甲基吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙酰胺(1.70g，3.94mmol)和LiOH(0.50g，11.8mmol)合并在THF(30mL)和水(5mL)中并且在40℃攪拌3h。將混合物冷卻，濃縮，以除去THF，并且用DCM提取。將有機(jī)相濃縮，得到{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-甲基吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}胺，將粗產(chǎn)物直接用于步驟C。ES-LC/MS m/z＝336[M+H]+。
步驟CN-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-甲基吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
將{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-甲基吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}胺(0.57g，1.68mmol)和2-噻吩基乙酰氯(0.25mL，2.00mmol)在THF(30mL)中攪拌并且攪拌16h。加入另外的2-噻吩基乙酰氯，直到LC/MS分析反應(yīng)完成。將混合物濃縮到干并且在NaHCO3水溶液(飽和的)和DCM之間分配。將有機(jī)層濃縮并且通過柱色譜法純化，得到N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-甲基吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺，為黃色固體(0.69g，89％)。ES-LC/MS m/z＝460[M+H]+。
步驟DN-{3-[6-甲基-3-(2-{[3-(1-吡咯烷基甲基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(標(biāo)題化合物)。
以與實(shí)施例67步驟B相似的方法將N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-甲基吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(100mg，0.22mml)、[3-(1-吡咯烷基甲基)苯基]胺(46mg，0.26mmol)、和含4N HCl的二氧雜環(huán)己烷(0.10mL)合并在i-PrOH(3mL)中，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(70mg，53％)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.40(s，1H)，9.55(s，1H)，8.71(s，1H)，8.47(d，J＝9.8Hz，1H)，8.26(d，J＝5.3Hz，1H)，7.91(s，1H)，7.78(d，J＝7.7Hz，1H)，7.72-7.67(m，2H)，7.48-7.36(m，3H)，7.31-7.19(m，2H)，7.00-7.01(m，2H)，6.92(d，J＝7.5Hz，1H)，6.50(d，J＝5.6Hz，1H)，3.91(s，2H)，3.57(s，2H)，2.52-2.45(m，4H)，2.41(s，3H)，1.74-1.69(m，4H).ES-LC/MS m/z＝600[M+H]+. 實(shí)施例72N-[3-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}-6-甲基吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺
以與實(shí)施例67步驟B相似的方法將N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-甲基吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(100mg，0.22mml)和{2-[(3-氨基苯基)氧基]乙基}二甲胺二鹽酸鹽(66mg，0.26mmol)合并在i-PrOH(3mL)中，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(84mg，63％)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.39(s，1H)，9.57(s，1H)，8.71(s，1H)，8.47(d，J＝9.4Hz，1H)，8.27(d，J＝5.2Hz，1H)，7.90(s，1H)，7.78(d，J＝8.2Hz，1H)，7.57(t，J＝2.1Hz，1H)，7.48-7.37(m，3H)，7.32-7.27(m，2H)，7.20-7.15(m，1H)，7.02-6.99(m，3H)，6.50(d，J＝5.6Hz，1H)，4.02(t，J＝5.7Hz，2H)，3.91(s，2H)，2.63(t，J＝5.1Hz，2H)，2.41(s，3H)，2.22(s，6H).ES-LC/MS m/z＝604[M+H]+. 實(shí)施例73N-{3-[3-(2-{[4-(4-乙酰基-1-哌嗪基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)-6-甲基吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺
將N-{3-[3-(2-氯-4-嘧啶基)-6-甲基吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺(60mg，0.13mmol)、[4-(4-乙?；?1-哌嗪基)苯基]胺(35mg，0.16mmol)、和含4N HCl的二氧雜環(huán)己烷(0.04mL)合并在i-PrOH(3mL)中并且在180℃微波處理10分鐘，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(42mg，50％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.31(s，1H)，9.27(s，1H)，8.63(s，1H)，8.15(d，J＝5.1Hz，1H)，7.83(s，1H)，7.71(d，J＝7.6Hz，1H)，7.50(d，J＝9.0Hz，2H)，7.40-7.35(m，2H)，7.30(d，J＝9.8Hz，1H)，7.21(d，J＝7.7Hz，1H)，6.95-6.93(m，2H)，6.84(d，J＝8.7Hz，2H)，6.41(d，J＝5.0Hz，2H)，3.84(s，2H)，3.56-3.52(m，4H)，3.03(t，J＝4.6Hz，2H)，2.96(t，J＝4.7Hz，2H)，2.34(s，3H)，2.01(s，3H).ES-LC/MS m/z＝643[M+H]+. 生物學(xué)實(shí)施例 在底物磷酸化測定法和細(xì)胞增殖測定法中檢驗(yàn)本發(fā)明的化合物的ErbB家族蛋白酪氨酸激酶抑制活性。
A.酶測定法 使用從桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)純化的酶在底物磷酸化測定法中檢驗(yàn)本發(fā)明的化合物的EGFR、ErbB-2、和ErbB-4蛋白酪氨酸激酶抑制活性。試劑生產(chǎn)基本上如Brignola，P.S.等，(2002)J.Biol.Chem.277(2)1576-1585中所述進(jìn)行。
該方法測量分離的酶催化γ-磷酸從ATP轉(zhuǎn)移到Brignola，P.S.等，(2002)J.Biol.Chem，277(2)1576-1585中的被稱作“肽C(Peptide C)”的生物素?；暮铣呻牡睦野彼釟埢系哪芰?。酪氨酸磷酸化的程度使用抗磷酸酪氨酸抗體測量，并且通過均相時間分辨熒光(HTRF)定量。
反應(yīng)在黑色384孔聚苯乙烯平底板中以20μl的最終體積進(jìn)行。測定通過加入10μl的以下每種溶液、底物混合物和酶混合物進(jìn)行底物混合物包含100mM 3-[N-嗎啉代]丙磺酸(MOPS)(pH 7.5)、2mM MnCl2、20μM ATP、0.01％Tween-20、0.1mg/mL(BSA)、0.8uM肽底物、和1mM二硫蘇糖醇。酶混合物包含100mM MOPS(pH7.5)、0.01％Tween-20、0.1mg/mL BSA，和或者0.8nM EGFR、10nM ErbB2、或1nM ErbB4。
在這些研究過程中，使用兩種獨(dú)立的方法測量化合物的效能。在方法A中，首先將底物混合物加入到化合物板，然后通過加入酶混合物啟動反應(yīng)。在方法B中，將酶混合物加入到混合板，并將板在20℃培養(yǎng)1小時。然后通過加入底物混合物啟動反應(yīng)。
在用上述任一種方法引發(fā)反應(yīng)之后，使反應(yīng)在20℃進(jìn)行90分鐘。然后通過向每個孔加入20μl的100mM EDTA終止反應(yīng)。向測定板加入40μl/孔的HTRF檢測混合物。檢測試劑的最終濃度為100mMHEPES(pH7.5)、0.1mg/mL BSA、15nM鏈霉抗生物素蛋白標(biāo)記的別藻藍(lán)蛋白(PerkinElmer)、和1nM銪標(biāo)記的抗磷酸酪氨酸抗體(PerkinElmer)。保持測定板未被密封，并且在Wallac Multilabel Counter1420(PerkinElmer)中計(jì)數(shù)。
將被分析的化合物溶解于Me2SO中達(dá)到1.0mM并且通過十二次稀釋用Me2SO順序地稀釋1到3倍。將1μl的各濃度轉(zhuǎn)移到測定板的相應(yīng)孔中。這樣產(chǎn)生0.00027到47.6μM的最終化合物濃度。
將劑量反應(yīng)的數(shù)據(jù)，以使用數(shù)據(jù)換算式100*(1-(U1-C2)/(C1-C2))計(jì)算的抑制％-化合物濃度，繪圖，其中U為未知值，C1為得自4.76％DMSO的平均對照值，和C2為得自0.035M EDTA的平均對照值。將數(shù)據(jù)與以下所描述的曲線擬合 y＝((Vmax*x)/(K+x))+Y2 其中Vmax為上漸進(jìn)線，Y2為Y軸截距，和K為IC50。將每個化合物的結(jié)果記錄為pIC50，按如下計(jì)算 pIC50＝-Log10(K) 許多舉例說明的化合物，實(shí)施例1-73，在所述測定法中進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果報(bào)告在以下表1中。在以下表中 “+”表示針對ErbB2或EGFR沒有plC50測量值大于6； “++”表示針對ErbB2或EGFR有至少一個pIC50測量值大于6，但是沒有pIC50測量值大于7；和 “+++”表示針對ErbB2或EGFR的至少一個pIC50測量值大于7。
表1. B.細(xì)胞測定法 方法A亞甲基藍(lán)生長抑制測定 將人乳房(BT474)和頭和頸(HN5)細(xì)胞在包含10％胎牛血清(FBS)的低葡萄糖DMEM(Life Technologies 12320-032)中培養(yǎng)。將人結(jié)腸腫瘤細(xì)胞(Colo205)在包含10％FBS的DMEM(Invitrogen，10564)中培養(yǎng)。將SV40轉(zhuǎn)化的人乳房上皮細(xì)胞系HB4a用人H-ras cDNA(HB4a r4.2)或人c-ErbB2cDNA(HB4a c5.2)轉(zhuǎn)染。將HB4a克隆在補(bǔ)充有選擇劑潮霉素B(50g/mL)的包含10％FBS、胰島素(5g/mL)、氫化可的松(5g/mL)的RPMI中培養(yǎng)。使所有的細(xì)胞系在加濕的培養(yǎng)箱中在37℃、95％空氣、5％CO2中生長。使用胰蛋白酶/EDTA收獲細(xì)胞，使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)，并且以以下密度在96孔組織培養(yǎng)板(Falcon 3075)中在100微升適當(dāng)培養(yǎng)基中鋪板BT474 10,000個細(xì)胞/孔，HN5 3,000個細(xì)胞/孔。第二天，將化合物從10mM DMSO儲備溶液以兩次至最終所需濃度在包含100mg/mL慶大霉素的DMEM中稀釋。將這些稀釋物以100微升/孔加入到目前在細(xì)胞板上的100微升培養(yǎng)基中。向?qū)φ湛准尤氚?.6％DMSO的培養(yǎng)基。向所有的細(xì)胞系中加入在DMEM中稀釋的化合物。在所有孔中DMSO的最終濃度為0.3％。使細(xì)胞返回到培養(yǎng)箱(37℃，10％CO2)3天。然后通過吸出除去培養(yǎng)基。通過用每孔90微升的亞甲基藍(lán)(SigmaM9140，0.5％，在1∶1乙醇∶水中)染色細(xì)胞并且將其在rt培養(yǎng)至少30分鐘評價細(xì)胞生物。除去染色劑并將板通過浸漬在去離子水中漂洗并且風(fēng)干。為了從細(xì)胞釋放染色劑，加入100微升的增溶溶液(1％N-月桂?；“彼徕c鹽，Sigma L5125，在PBS中)并將板溫和地?fù)u動約30分鐘。在微板讀出器上測量620nM的光密度。相對于用媒介物處理的對照孔計(jì)算細(xì)胞生長的抑制百分比。使用非線性回歸(Levenberg-Marquardt)和以下方程內(nèi)插計(jì)算抑制對照細(xì)胞生長50％的化合物濃度(IC50) y＝Vmax*(1-(x/(K+x)))+Y2 其中“K”等于IC50。
方法BCelltiter

生長抑制測定法 將人乳腫瘤細(xì)胞(BT474)在包含10％胎牛血清(FBS)的RPMI(Invitrogen，22400)中培養(yǎng)。將人頭頸腫瘤細(xì)胞(HN5)在包含10％FBS的低葡萄糖DMEM(Invitrogen，12320)中培養(yǎng)。將人結(jié)腸腫瘤細(xì)胞(Colo205)在包含10％FBS的DMEM(Invitrogen，10564)中培養(yǎng)。所有的細(xì)胞系保持在加濕的5％CO2、95％空氣的37℃培養(yǎng)箱中。使用胰蛋白酶/EDTA收獲細(xì)胞，使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)，并且以以下密度，在halfarea、黑色壁的96孔組織培養(yǎng)板(Corning 3882)中在30微升適當(dāng)培養(yǎng)基中鋪板BT474 3,000個細(xì)胞/孔，HN5 500個細(xì)胞/孔和Colo205細(xì)胞3,000個細(xì)胞/孔。第二天，將化合物從10mM DMSO儲備溶液稀釋到包含100mg/mL慶大霉素的DMEM中。將這些稀釋物的30微升/孔加入到目前在細(xì)胞板上的30微升/孔培養(yǎng)基中。向?qū)φ湛准尤氚?.6％DMSO的培養(yǎng)基。在所有孔中DMSO的最終濃度為0.3％。將細(xì)胞在37℃5％CO2下培養(yǎng)3天。使用Celltiter Glo(Promega G7571)評價細(xì)胞生物質(zhì)。簡而言之，將板從培養(yǎng)箱取出，并且使其平衡到室溫30分鐘。向處理的細(xì)胞的每個孔加入60微升的Celltiter GIo試劑并將板在軌道板振蕩器上搖動2分鐘。將板在沒有搖動下培養(yǎng)30分鐘并且在光度計(jì)中以每孔0.5秒的積分時間讀數(shù)。相對于媒介物處理的對照孔計(jì)算細(xì)胞生長的抑制百分比。使用非線性回歸(Levenberg-Marquardt)和以下方程內(nèi)插計(jì)算抑制媒介物對照細(xì)胞生長50％的化合物濃度(IC50) y＝Vmax*(1-(x/(K+x)))+Y2 其中“K”等于IC50。
在所述測定法中試驗(yàn)選擇的實(shí)施例的化合物并且結(jié)果在以下表2中報(bào)告。在以下表中 “+”表示該化合物在BT474和HN5腫瘤細(xì)胞系中都表現(xiàn)出＞1μM的活性； “++”表示該化合物在BT474和HN5腫瘤細(xì)胞系的至少一種中表現(xiàn)出100nM到1μM的活性；和 “+++”表示該化合物在BT474和HN5腫瘤細(xì)胞系的至少一種中表現(xiàn)出低于100nM的活性。
表2 使用Colo205細(xì)胞系在所述測定法中試驗(yàn)選擇實(shí)施例的化合物，結(jié)果報(bào)告在以下表3中。在以下表中 “+”表示該化合物在Colo205腫瘤細(xì)胞系中表現(xiàn)出＞1μM的活性； “++”表示該化合物在Colo205腫瘤細(xì)胞系中表現(xiàn)出100nM到1μM的活性；和 “+++”表示該化合物在Colo205腫瘤細(xì)胞系中表現(xiàn)出低于100nM的活性。
表3.
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物
其中
a為0、1、2或3；
每個R1相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、Ay、Het、-OR6、-R4OR6、-OC(O)R6、-C(O)R6、-R4C(O)R6、-C(O)NR6R7、-R4C(O)NR6R7、-CO2R6、-C(S)R6、-C(S)NR6R7、-S(O)fR6、-R4S(O)fR6、-S(O)2NR6R7、-NR6R7、-R4NR6R7、-N(R6)-R4R7、-N(R6)-R4-OR7、-N(R6)-R4-S(O)fR7、-N(R6)-R4-CN、-C(NH)NR6R7、-N(R6)C(O)R6、-N(R6)S(O)2R6、-N(R6)-C(O)-NR6R7、-N(R6)-S(O)2-NR6R7、-CN、和-NO2；
f為0、1或2；
Ay為任選地被選自以下的取代基取代一次、兩次或三次的芳基鹵代、C1-3烷基、C1-3烷氧基、NH2、N(H)C1-3烷基、N(C1-3烷基)2、CN和NO2；
Het為5-6元雜環(huán)或雜芳基，具有1或2個選自N、O和S的雜原子并且任選地被選自以下的取代基取代1、2或3次鹵代、C1-3烷基、C1-3烷氧基、羥基、氧代、C(O)(C1-3烷基)、SO3(H)、SO2(C1-3烷基)、C1-3烷基-SO3(H)、C1-3烷基-SO2(C1-3烷基)、NH2、N(H)C1-3烷基、N(C1-3烷基)2、CN和NO2；
環(huán)A選自芳基、雜環(huán)和雜芳基；
R9為C1-4亞烷基、C2-4亞烯基或C3-4亞環(huán)烷基；
Y1為-C(O)-、-N(H)C(O)-、-C(S)-或-N(H)C(S)-；
b和c每個相同或不同并且各自獨(dú)立地為0、1或2；
每個R2相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、-OR6、-S(O)fR6、-NR6R7、-CN和-NO2；
d為0、1或2；
每個R3相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、Ay、Het、-OR6、-R4OR6、-OAy、-R4OAy、-OC(O)R6、-COR6、-R4C(O)R6、-C(O)Ay、-C(O)NR6R7、-R4C(O)NR6R7、-C(O)N(H)Ay、-C(O)N(H)Het、-CO2R6、-CO2Ay、-C(S)R6、-C(S)NR6R7、-S(O)fR6、-R4S(O)fR6、-S(O)fAy、-S(O)2NR6R7、-NR6R7、-R4NR6R7、-N(R8)Ay、-R4N(H)Ay、-N(H)Het、-N(H)R4Het、-N(R6)-R4R7、-N(R6)-R4-OR7、-N(R6)-R4-S(O)fR7、-N(R6)-R4-CN、-C(NH)NR6R7、-N(H)C(O)R6、-N(H)C(O)Ay、-N(H)SO2R6、-N(R6)-C(O)-NR6R7、-N(R6)-S(O)2-NR6R7、-CN和-NO2；
每個R4相同或不同并且獨(dú)立地為C1-4亞烷基或C3-4亞烯基；
e為0或1；
環(huán)B選自芳基和雜芳基；
g為0、1、2、3或4；
每個Z相同或不同并且獨(dú)立地為式ii部分
(Alk)m-(Y2)n-(Alk)p-(R5)q
其中
m、n和p相同或不同并且各自獨(dú)立地為0或1；
每個Alk相同或不同并且獨(dú)立地選自C1-4亞烷基和C3-4亞烯基；
Y2為-O-、-C(O)-、-S(O)f-、-N(H)-或-N(Alk)-；
q為1或2；
每個R5相同或不同并且獨(dú)立地選自H、鹵代、烷基、烯基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、Ay、Het、氧代、-OR6、-OAy、-C(O)R6、-OC(O)R6、-C(O)Ay、-OC(O)Ay、-C(O)NR6R7、-CO2R6、-CO2Ay、-S(O)fR6、-S(O)fAy、-S(O)2NR6R7、-C(S)R6、-C(S)NR6R7、-C(S)N(H)Ay、-NR6R7、-N(R8)Ay、-N(R8)Het、-N(R6)-R4R7、-N(R6)-R4-OR7、-N(R6)-R4-S(O)fR7、-N(R6)-R4-CN、-NHC(O)R6、-N(H)S(O)2R6、-C(NH)NR6R7、-N(R6)-C(O)-NR6R7、-N(R6)-S(O)2-NR6R7、-N(R6)-C(O)-R4NR6R7、-N(R6)-S(O)2-R4NR6R7、-CN和-NO2；
每個R6和R7相同或不同并且各自獨(dú)立地選自H、烷基、烯基、炔基、C3-6環(huán)烷基和C3-6環(huán)烯基；和
每個R8相同或不同并且為H或烷基，或其可藥用的鹽或溶劑合物。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中a為1或2。
3.權(quán)利要求1或2的化合物，其中每個R1相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、Ay、Het、-OR6、-R4OR6、-OC(O)R6、-C(O)R6、-R4C(O)R6、-C(O)NR6R7、-CO2R6、C(S)R6、C(S)NR6R7、-S(O)fR6、-R4S(O)fR6、-S(O)2NR6R7、-NR6R7、-R4NR6R7、-N(R6)C(O)R6、-N(R6)S(O)2R6、-N(R6)-C(O)-NR6R7、-N(R6)-S(O)2-NR6R7、-CN和-NO2。
4.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的化合物，其中環(huán)A為芳基或雜芳基。
5.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的化合物，，其中Y1為-C(O)-或-N(H)C(O)-。
6.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的化合物，其中每個R2相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、-OR6、-NR6R7和-CN。
7.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的化合物，其中b為0。
8.權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的化合物，其中c為0。
9.權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)的化合物，其中d為0或1。
10.權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的化合物，其中每個R3相同或不同并且獨(dú)立地選自鹵代、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、Ay、Het、-OR6、-R4OR6、-OC(O)R6、-COR6、-R4C(O)R6、-C(O)NR6R7、-S(O)fR6、-R4S(O)fR6、-S(O)2NR6R7、-NR6R7、-R4NR6R7、-N(R8)Ay、-R4N(H)Ay、-N(H)Het、-N(R6)-R4-OR7、-N(R6)-R4-S(O)fR7、-N(R6)-R4-CN、-N(H)C(O)R6、-N(H)SO2R6、-N(R6)-C(O)-NR6R7、-N(R6)-S(O)2-NR6R7、-CN和-NO2。
11.權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)的化合物，其中(R4)e為C1-4亞烷基。
12.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的化合物，其中e為0。
13.權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物，其中環(huán)B為芳基。
14.權(quán)利要求1-13中任一項(xiàng)的化合物，其中g(shù)為0、1、2或3。
15.權(quán)利要求1-14中任一項(xiàng)的化合物，其中每個Alk相同或不同并且獨(dú)立地為C1-3亞烷基。
16.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的化合物，其中n為1。
17.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的化合物，其中n為0。
18.權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)的化合物，其中Y2為-O-、-C(O)-或-N(H)-。
19.權(quán)利要求1-17中任一項(xiàng)的化合物，其中q為1。
20.權(quán)利要求1-19中任一項(xiàng)的化合物，其中每個R5相同或不同并且獨(dú)立地選自H、鹵代、烷基、烯基、環(huán)烷基、Ay、Het、氧代、-OR6、-OAy、-C(O)R6、-OC(O)R6、-C(O)Ay、-C(O)NR6R7、-CO2R6、-S(O)fR6、-S(O)2NR6R7、-C(S)NR6R7、-NR6R7、-N(R8)Ay、-N(R8)Het、-N(R6)-R4R7、-N(R6)-R4-OR7、-N(R6)-R4-S(O)fR7、-N(R6)-R4-CN、-NHC(O)R6、-N(H)S(O)2R6、-C(NH)NR6R7、-N(R6)-C(O)-NR6R7、-N(R6)-S(O)2-NR6R7、-N(R6)-C(O)-R4NR6R7、-CN和-NO2。
21.選自以下的化合物
N-[3-(3-{2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺；
N-[3-(3-{2-[(3-{[2-(1-吡咯烷基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺；
N-{5-[3-(2-{[2-(二甲基氨基)-2，3-二氫-1H-茚-5-基]氨基}嘧啶-4-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]-2-甲氧基苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺；
N-[2-甲氧基-5-(3-{2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉-7-基)氨基]嘧啶-4-基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺；
N-{3-[3-(2-{[3-(4-甲基-1，3-噁唑-5-基)苯基]氨基}嘧啶-4-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺；
N-{3-[3-(2-{[2-(二甲基氨基)-2，3-二氫-1H-茚-5-基]氨基}嘧啶-4-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺；
N-{2-甲基-5-[3-(2-{[3-(1-吡咯烷基甲基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺；
N-[5-(3-{2-[(5-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-甲基苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺；
N-[5-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-甲基苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺；
N-[2-甲基-5-(3-{2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺；
N-[5-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-氟苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺；
N-{2-氟-5-[3-(2-{[3-(1-吡咯烷基甲基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺；
N-[5-(3-{2-[(5-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-氟苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺；
N-[2-氟-5-(3-{2-[(2-甲基-1，2，3，4-四氫-7-異喹啉基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺；
N-[5-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-(甲基氧基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺；
N-[5-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-(甲基氧基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺；
N-[5-(3-{2-[(5-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}-2-甲基苯基)氨基]-4-嘧啶基}吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-2-(甲基氧基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺；
N-{3-[6-甲基-3-(2-{[3-(1-吡咯烷基甲基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺；
N-[3-(3-{2-[(3-{[2-(二甲基氨基)乙基]氧基}苯基)氨基]-4-嘧啶基}-6-甲基吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基)苯基]-2-(2-噻吩基)乙酰胺；和
N-{3-[3-(2-{[4-(4-乙?；?1-哌嗪基)苯基]氨基}-4-嘧啶基)-6-甲基吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基]苯基}-2-(2-噻吩基)乙酰胺，
及其可藥用的鹽和溶劑合物。
22.一種藥物組合物，包含權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)的化合物。
23.權(quán)利要求22的藥物組合物，另外包括可藥用的載體、稀釋劑或賦形劑。
24.權(quán)利要求22或23的藥物組合物，另外包括化療劑。
25.一種治療有需要的哺乳動物的由至少一種ErbB家族激酶的不適當(dāng)活性介導(dǎo)的病況的方法，所述方法包括對該哺乳動物給予治療有效量的權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)的化合物。
26.權(quán)利要求25的方法，其中所述病況由至少兩種ErbB家族激酶的不適當(dāng)活性介導(dǎo)。
27.一種治療有需要的哺乳動物的易感瘤的方法，所述方法包括對該哺乳動物給予治療有效量的權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)的化合物。
28.權(quán)利要求27的方法，其中所述易感瘤選自乳癌、結(jié)腸癌、非小細(xì)胞肺癌、前列腺癌、膀胱癌、卵巢癌、胃癌、胰腺癌、頭頸癌、食道癌、黑素瘤、和腎癌。
29.一種治療有需要的哺乳動物的乳癌的方法，所述方法包括對該哺乳動物給予治療有效量的權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)的化合物。
30.一種制備權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)的化合物的方法，所述方法包括以下步驟
a)使式(VII)的化合物
與式(VIII)的化合物或式(IX)的化合物反應(yīng)
其中LG為離去基團(tuán)和W為O或S，
以制備式(I)的化合物；
b)任選地將式(I)的化合物轉(zhuǎn)化為其可藥用的鹽或溶劑合物；和
c)任選地將式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物轉(zhuǎn)化為不同的式(I)的化合物或其可藥用的鹽或溶劑合物。
31.權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)的化合物，其用于治療。
32.權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)的化合物，其用于治療哺乳動物的由至少一種ErbB家族激酶的不適當(dāng)活性介導(dǎo)的病況。
33.權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)的化合物，其用于治療哺乳動物的易感瘤。
34.權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)的化合物，其用于治療哺乳動物的乳癌。
35.權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)的化合物用于制備治療哺乳動物的由至少一種ErbB家族激酶的不適當(dāng)活性介導(dǎo)的病況的藥物的用途。
36.權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)的化合物用于制備治療哺乳動物的易感瘤的藥物的用途。
37.權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)的化合物用于制備治療哺乳動物的乳癌的藥物的用途。
38.包括權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)的化合物的藥物組合物，其用于治療哺乳動物的易感瘤。
全文摘要
本發(fā)明提供2-嘧啶基吡唑并吡啶化合物，包含所述化合物的組合物，以及它們的制備方法和它們用作藥物的用途。
文檔編號A61P35/00GK101326182SQ200680045859
公開日2008年12月17日 申請日期2006年12月4日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月5日
發(fā)明者D·E·厄林, R·D·哈巴德, A·G·沃特森, K·彼得羅夫, N·小比富爾科, J·W·威爾遜, J·G·巴迪昂, 玫 張, M·亞馬貝 申請人:史密絲克萊恩比徹姆公司