專(zhuān)利名稱：使用il6拮抗劑與蛋白酶體抑制劑的方法
使用IL6拮抗劑與蛋白酶體抑制劑的方法 發(fā)明背景發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及蛋白酶體抑制劑與白介素-6拮抗劑的組合在提高所治 療個(gè)體對(duì)于疾病例如癌癥的治療反應(yīng)方面的應(yīng)用。本發(fā)明還涉及治療 個(gè)體中癌癥的方法，包括給個(gè)體施用有效量的蛋白酶體抑制劑與有效 量的白介素-6拮抗劑。本發(fā)明特別涉及特異性針對(duì)白介素-6 (IL-6,還 稱為干擾素卩2))蛋白的抗體，包括特異性部分或抗體。
背景技術(shù)：
細(xì)胞因子IL-6IL-6 (白介素6)是一種22-27 kDa的分泌的糖蛋白，之前稱為單核 細(xì)胞衍生的人B-細(xì)胞生長(zhǎng)因子、B-細(xì)胞刺激因子2、 BSF-2、干擾素P-2 和雜交瘤生長(zhǎng)因子，其具有生長(zhǎng)刺激和促炎活性(Hirano等人，Nature 324: 73-76, 1986)。IL-6屬于粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)和骨髓單核細(xì)胞生長(zhǎng)因子 (MGF)家族，其包括白血病抑制因子(LIF)、制瘤素M(OSM)、睫狀神 經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)、 cardiotropin-l (CT-1)、 IL國(guó)l和IL-ll。 L-6是由多 種類(lèi)型細(xì)胞產(chǎn)生的，最值得注意的是抗原呈遞細(xì)胞、T和B細(xì)胞。IL-6-型細(xì)胞因子都通過(guò)含有常見(jiàn)信號(hào)傳導(dǎo)蛋白gpl30 (之前是IL-6R(3)的受 體復(fù)合物而起作用的。然而，鑒于IL-6、 IL-ll、 CT-1和CNTF首先結(jié) 合特異性受體蛋白，所述特異性受體蛋白隨后與pgl30結(jié)合，所以LIF 和OSM直接與LIF-R和gpl30的復(fù)合物結(jié)合。特異性IL-6受體(IL-6R 或IL-6a、gp80或CD126)以膜結(jié)合形式或溶解形式(sIL-6R, —種55 kD 的形式)存在，二者都能夠激活gpl30。已知有幾種物質(zhì)能誘導(dǎo)IL隱6的表達(dá)，例如IL-1、 IL-2、 TNFa、 IL-4、 IFNa、制瘤素和LPS。 IL-6涉及多種活性，例如B和T細(xì)月包激活、血 細(xì)胞生成、破壞細(xì)胞活性、角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)、急性期蛋白合成、神 經(jīng)元生長(zhǎng)和肝細(xì)胞激活激活(Hirano等人，Int. Rev. Immunol; 16(3-4): 249-84, 1998)。雖然IL-6涉及多條途徑，但是IL-6剔除的小鼠具有正常表型，他 們是有活力和能生育的，并且針對(duì)組織損傷表現(xiàn)出T細(xì)胞數(shù)目的輕度 下降以及降低的急性期蛋白反應(yīng)(KopfM等人，Nature: 368: 339-42， 1994)。相反，過(guò)度表達(dá)腦IL-6的轉(zhuǎn)基因小鼠發(fā)展出了神經(jīng)疾病例如神 經(jīng)變性、星形細(xì)胞增生、腦血管生成，并且這些小鼠沒(méi)有發(fā)展成血腦 屏障(Campbell等人，PNAS 90: 10061-10065, 1993)。IL-6在癌癥中的作用IL-6通過(guò)多種機(jī)制參與幾種惡性疾病的病生理過(guò)程。據(jù)<艮設(shè)，IL-6 是癌癥相關(guān)發(fā)病例如虛弱/惡病質(zhì)和骨吸收的病因性因素。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)， 腫瘤誘導(dǎo)的惡病質(zhì)(Cahlin等人，(2000) Cancer Res; 60(19): 5488-9)、 骨吸收以及相關(guān)高釣血在IL-6剔除的小鼠中是減輕的(Sandhu等人， 1999)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，癌癥相關(guān)抑郁癥和繼發(fā)于腦胂瘤的腦水胂與高水平 的IL-6有關(guān)(Musselman等人，Am J Psychiatry.; 158(8): 1252-7， 2001)。由多種人癌癥的體外和體內(nèi)模型獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果已經(jīng)證實(shí)IL-6是 一個(gè)用于抑制的治療靶。IL-6可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)J包的增殖、分化和存活， 促進(jìn)細(xì)胞程序死亡(Jee等人，Oncogene 20: 198-208, 2001)以及誘導(dǎo)對(duì) 化療的抗性(Conze等人，Cancer Res 61: 8851-8858， 2001)。多發(fā)性骨髓瘤是涉及漿細(xì)胞的惡性腫瘤。已知IL-6增強(qiáng)多發(fā)性骨 髓瘤(MM)中惡性漿細(xì)胞的增殖、分化和存活，這是經(jīng)由涉及惡性細(xì)胞 的細(xì)胞程序死亡的抑制的自分泌或旁分泌機(jī)制進(jìn)行的。因此，據(jù)假定 阻斷IL-6是有效治療(Anderson等人，Hematology: 147-165, 2000)。 已經(jīng)進(jìn)行了體外實(shí)驗(yàn)(Tassone, P.等人,Int. J. Oncol. 21(4): 867-873， 2002)和臨床試驗(yàn)(Bataille等人，(1995) Blood; 86(2): 685-91 and Van Zaanen,等人，(1996) J Clin Invest 98: 1441-1448),并且結(jié)果表明， 并且結(jié)果表明，IL6阻斷對(duì)于癌細(xì)胞生長(zhǎng)有可證實(shí)的影響。作為治療粑的蛋白酶體途徑最近的實(shí)驗(yàn)證據(jù)有力地表明，蛋白酶體抑制劑實(shí)際上可能在 一 些 病變例如癌癥、哮喘、腦梗塞和自身免疫性腦脊髓炎中是有益的。在 惡性病變中，藥物可以通過(guò)抑制不同細(xì)胞周期抑制劑的降解或者通過(guò) 抑制抗細(xì)胞程序死亡轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)劑NF-kB而起作用，而在神經(jīng)保護(hù)中，5藥物可以通過(guò)抑制NF-kB的激活而起作用，在這種情況下，NF-kB的 激活會(huì)引發(fā)炎性反應(yīng)。在自身免疫性疾病中，藥物可以通過(guò)抑制"自" 肽的呈遞來(lái)起作用，但是也可以通過(guò)干擾沿著細(xì)胞免疫級(jí)聯(lián)的信號(hào)傳 導(dǎo)來(lái)起作用。硼酸二肽蛋白酶體抑制劑PS-341, bortezomib (VELCADE⑧)是第 一個(gè)被批準(zhǔn)的已知作為有效特異性蛋白酶體抑制劑起作用的治療藥 物。雖然bortezomib是骨髓瘤治療中的重要進(jìn)步，但是對(duì)于患有頑固 性或復(fù)發(fā)性疾病的患者，只有27%患者在初始II期臨床試-險(xiǎn)中具有部 分反應(yīng)或較好反應(yīng)，其得到看FDA的批準(zhǔn)(RichardsonPG等人，N Engl JMed2003, 348: 2609-17)。臨床前試驗(yàn)具有鑒定的誘導(dǎo)型藥物抗性的 重要介質(zhì)，包括抗細(xì)胞程序死亡途徑，其在暴露于蛋白酶體抑制劑時(shí) 被上調(diào)，由此減弱了其抗腫瘤效力(綜述于SalehA等人，Nat Cell Biol 2000, 2: 476-83)。對(duì)于蛋白酶體抑制劑的藥物抗性的一個(gè)機(jī)制是誘導(dǎo)HSP-70的表 達(dá)，HSP-70是細(xì)胞程序死亡的重要抑制劑。抑制蛋白酶體導(dǎo)致錯(cuò)折疊 蛋白的積聚，以及熱激蛋白家族的成員，最值得注意的是HSP-70的劇 烈上調(diào)，這是通過(guò)激活轉(zhuǎn)錄因子HSF-1.5-8來(lái)實(shí)現(xiàn)的。據(jù)假設(shè)，取消 HSP-70誘導(dǎo)的治療劑應(yīng)該能夠增強(qiáng)蛋白酶體抑制劑的活性。在其他研 究中，在其他臨床前癌癥模型中通過(guò)siRNA或反義技術(shù)下調(diào)HSP-70 表達(dá)能夠增強(qiáng)蛋白酶體抑制劑的促細(xì)胞程序死亡活性(Robertson JD等 人，Biochem J 1999, 344: 477-85; GabaiVL等人，Oncogene 2005, 24: 3328-38)。誘導(dǎo)型藥物抗性的第二個(gè)實(shí)例是MKP-1磷酸酶，其在轉(zhuǎn)錄上被蛋 白酶體抑制劑上調(diào)(Orlowski RZ等人，J Biol Chem 2002, 277: 27864-71)。 MKP-1是應(yīng)激反應(yīng)蛋白，也是抗細(xì)胞程序死亡的，通過(guò) c-Jun-N-末端激酶的激活而起作用。已經(jīng)表明了 MKP-1的下調(diào)能夠提 高蛋白酶體抑制劑的抗腫瘤效力(Small GW等人，Mol Pharmacol 2004, 66: 1478-90)。IL-6在骨髓瘤的發(fā)病機(jī)理中起關(guān)鍵作用，這是通過(guò)其在骨髓微環(huán) 境中起骨髓瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和存活因子功能以及激活抗細(xì)胞程序死亡過(guò) 程的能力而證實(shí)的，所述抗細(xì)胞程序死亡過(guò)程降低了對(duì)于多種化療劑 的敏感性。已經(jīng)在幾個(gè)模型系統(tǒng)中顯示了 IL-6上調(diào)HSP-70的表達(dá)。其次，STAT-l, —種通過(guò)IL-6信號(hào)傳導(dǎo)而激活的重要下游轉(zhuǎn)錄因子與 HSF-1相互作用來(lái)促進(jìn)熱激反應(yīng)的成員的轉(zhuǎn)錄。因此，在尋求更有效、毒性更低以及持續(xù)更長(zhǎng)的臨床反應(yīng)過(guò)程中， 證實(shí)活性劑的組合在治療 一些癌癥和相關(guān)或不相關(guān)的肌肉消一毛以及一 些神經(jīng)或非神經(jīng)起源的炎性或自身免疫性病癥中有價(jià)值是很重要的。 IL-6抑制劑與蛋白酶體抑制劑的組合的有利作用迄今為止還沒(méi)有被證 實(shí)過(guò)。發(fā)明概述本發(fā)明涉及治療個(gè)體中疾病的方法，所述方法包括給個(gè)體施用有 效量的蛋白酶體抑制劑和有效量的白介素-6拮抗劑。本發(fā)明方法包括 將白介素-6拮抗劑與bortezomib或相關(guān)蛋白酶體抑制劑順序、連續(xù)或 同時(shí)施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，IL6拮抗劑是高親和性抗-IL6抗體。在 另一個(gè)實(shí)施方案中，IL6拮抗劑是抗-IL6R抗體。易于用本發(fā)明方法治療的疾病包括癌癥、哮喘、炎性疾病和神經(jīng) 疾病。在一個(gè)實(shí)施方案中，該疾病是癌性疾病或病癥。本發(fā)明還提供了預(yù)測(cè)至少I(mǎi)L-6拮抗劑與至少一種蛋白酶體抑制劑 的組合的用途的方法。附圖簡(jiǎn)述

圖1表明了遞增濃度的CNT0328對(duì)于處理指示時(shí)間的多發(fā)性骨髓 瘤細(xì)月包的作用。圖2 A-D是柱狀圖，其表明了與抗體、F105和相關(guān)對(duì)照Mab或 CNT0328以及指示濃度的bortezomib —起培養(yǎng)的指示細(xì)胞的相對(duì)存活 百分比A)與抗體預(yù)培養(yǎng)，然后用指示濃度的bortezomib處理的 ANBL-6多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞，B)與抗體預(yù)培養(yǎng)，然后用指示濃度的 bortezomib處理的KAS-6多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞，c) RPMI8226 IL6獨(dú)立性 骨髓瘤細(xì)胞，和D)同時(shí)用CNTO 328和bortezomib處理的ANBL-6多 發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞。圖3A-B是柱狀圖，其表明了在用抗體和bortezomib組合處理的IL6 依賴性細(xì)^^系A(chǔ)NBL-6 (A)和KAX-6 (B)中測(cè)定的細(xì)月包程序死亡的相對(duì) 增加倍數(shù)，其中F105是對(duì)照Mab。圖4是用CNT0328或?qū)φ誐ab以及遞增濃度的bortezomib處理 后，ANBL-6細(xì)胞樣本的蛋白凝膠的Western印跡，是針對(duì)HSC-70和 MKP-1探測(cè)的。圖5是柱狀圖，其表明了在與載體對(duì)照(DMSO)或兩種濃度的 bortezomib以及遞增濃度的熱激蛋白衰減劑KNK437 —起培養(yǎng)的 ANBL-6細(xì)胞中測(cè)定的細(xì)胞程序死亡的相對(duì)增加倍數(shù)。圖6是柱狀圖，其表明了在MEF細(xì)胞中測(cè)定的細(xì)胞程序死亡的相 對(duì)增加倍數(shù)，所述MEF細(xì)胞是與載體對(duì)照(DMSO)或兩種濃度的 bortezomib以及遞增濃度的熱激蛋白衰減劑KNK437 —起培養(yǎng)的HSF-缺乏(-/-)或正常(+/+)的。發(fā)明詳述縮寫(xiě)Ig免疫球蛋白，IgG免疫球蛋白G, IL白介素，IL6白介素-6, IL-6R 白介素-6受體，sIL-6R可溶性白介素-6受體，HSF-1熱激蛋白轉(zhuǎn)錄因 子，HSP熱激蛋白，MAPK促細(xì)胞分裂劑激活的蛋白激酶，MPK-1 MAPK磷酸酶，Mab單克隆抗體，STAT信號(hào)傳導(dǎo)激活。 定義術(shù)語(yǔ)"抗體"在本文中是在最廣義上使用，并且具體包括單克隆抗體 (包括全長(zhǎng)單克隆抗體)、多克隆抗體、多特異性抗體(例如雙特異性抗 體)以及抗體片段，只要他們表現(xiàn)出所希望的生物活性。"抗體片段"包 括一部分全長(zhǎng)抗體，通常是其抗原結(jié)合或可變區(qū)。抗體片段的實(shí)例包 括Fab、 Fab'、 F(ab')2和Fv片段；二抗體；線性抗體；單鏈抗體分子； 以及由抗體片段形成的多特異性抗體。"嵌合抗體"是保留來(lái)自 一個(gè)物種的顯著區(qū)域，通常是可變區(qū)的那些 抗體，其余部分來(lái)自另一物種，例如小鼠-人嵌合體。本文所用術(shù)語(yǔ)"人抗體"意欲包括具有可變區(qū)和恒定區(qū)的抗體， 所述可變區(qū)和恒定區(qū)源自人種系免疫球蛋白序列或者與人種系免疫球 蛋白序列嚴(yán)格匹配。本發(fā)明的人抗體可以包括不是被人種系免疫球蛋 白序列編碼的氨基酸殘基(例如通過(guò)隨機(jī)或位點(diǎn)特異性的體外誘變或通 過(guò)體內(nèi)體細(xì)胞突變例如在人重鏈的V、D和J片段的重組期間引入的突 變)。因此，本文所用術(shù)語(yǔ)"人抗體"是指這樣一種抗體，其中該蛋白8的基本每個(gè)部分(如CDR、構(gòu)架區(qū)、CL、 CH結(jié)構(gòu)域(如CHl、 CH2、 Ch3)、 鉸鏈區(qū)、(VL, VH))與人種系抗體基因基本相似。基于他們的氨基酸序 列相似性，人抗體已經(jīng)被劃分為幾個(gè)組，參見(jiàn)例如 http:〃people.cryst，bbk.ac.uk/~ubcg07s/。因此，使用序列相似性搜索， 具有相似線性序列的抗體可以選作模板，以產(chǎn)生人或人源化抗體。對(duì)于抗體，本文所用術(shù)語(yǔ)"高親和力"是指抗體具有l(wèi)(T8 M或更 小，更優(yōu)選10力M或更小，甚至更優(yōu)選10^M或更小的Ko值。本文 所用術(shù)語(yǔ)"Kdis"或"KD，，或"Kd"是指特定抗體-抗原相互作用的解 離速度。"KD"是解離速度(1^2)~也稱為"off-rate (k。ff)"與結(jié)合速度(k!) 或"on-rate(k。n)，，的比例。因此，KD等于k2/kl或k。ff / k。n,并且以摩爾 濃度(M)表示。這意味著，Kd越小，則結(jié)合越強(qiáng)。因此，10《M(或lmM) 意味著結(jié)合弱于IO力M(或lnM)。本文所用的"遍在蛋白-蛋白酶體系統(tǒng)"是一個(gè)多組分系統(tǒng)，其識(shí) 別并且降解不需要的蛋白。該系統(tǒng)包括由于其損傷、錯(cuò)折疊或短的活 細(xì)胞性質(zhì)而識(shí)別不需要的蛋白所需的酶，他們是涉及不需要的蛋白的 遍在蛋白化的酶，以及降解性酶，所述降解性酶包括是在細(xì)胞核以及 胞質(zhì)中存在的多亞單位復(fù)合物的蛋白酶體結(jié)構(gòu)。本文所用術(shù)語(yǔ)"蛋白酶體抑制劑"包括蛋白酶體的肽酶的抑制劑。 更具體來(lái)說(shuō)，這些蛋白酶體的肽酶的抑制劑包括，除了巰基蛋白酶和絲氨酸蛋白酶以外，胰凝乳蛋白酶樣和胰蛋白酶樣蛋白酶的抑制劑。對(duì)于治療劑的本文所用術(shù)語(yǔ)"藥物抗性"，當(dāng)提及癌細(xì)胞時(shí)，是指 細(xì)胞已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了對(duì)于治療劑作用的藥物抗性，這通常是由于暴露于環(huán) 境水平或濃度的具有損傷或抑制增殖作用的治療劑而引起的，或者， 與接觸以相同水平或濃度的治療劑的正?；蚍撬幬锟剐约?xì)月包相比，作 為與 一定水平治療劑接觸的結(jié)果，治療劑的作用被抑制至非常低的程 度。對(duì)于治療劑的藥物抗性的性質(zhì)是高度可變的，對(duì)于在不同條件下 給予的治療劑，不同癌細(xì)胞表現(xiàn)出不同水平的"藥物抗性"。蛋白酶體抑制劑bortezomib代表多發(fā)性骨髓瘤治療中的顯著進(jìn)步， 但是其效力受到多種抗藥性機(jī)制的限制。 一個(gè)最重要的機(jī)制是熱激蛋 白(HSP)和應(yīng)激反應(yīng)途徑，該途徑經(jīng)由成員例如HSP-70和氮激活的蛋 白激酶(MAPK)磷酸酶(MKP)-1,對(duì)抗bortezomib的促細(xì)月包程序死亡活 性。因?yàn)榘捉樗?IL)-6信號(hào)傳導(dǎo)增強(qiáng)經(jīng)由信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)物和轉(zhuǎn)錄激活物(STAT)-1以及熱激轉(zhuǎn)錄因子(HSF)-1的熱激反應(yīng)，申請(qǐng)人々"殳IL-6信 號(hào)傳導(dǎo)的下調(diào)將減弱bortezomib的HSP誘導(dǎo)，由此提高其抗骨髓瘤活性。
使用bortezomib和CNTO 328—一種嵌合型單克隆IL-6中和抗體 的組合處理IL-6-依賴性多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系KAS-6和ANBL-6,與單 獨(dú)的所述任 一 藥物相比，以時(shí)間和濃度依賴性方式導(dǎo)致細(xì)月包生存能力 顯著下降。這與提高的細(xì)胞程序死亡有關(guān)，在某些情況下，細(xì)胞程序 死亡大于單獨(dú)兩種治療劑的加和，這表明存在協(xié)同作用。當(dāng)^f吏用同種 型對(duì)照抗體，并且在IL-6-獨(dú)立型RPMI 8226骨髓瘤細(xì)胞系的i式-驗(yàn)中時(shí)， 沒(méi)有看到類(lèi)似結(jié)果。當(dāng)用CNTO 328預(yù)處理然后用bortezomib處理細(xì) 月包時(shí)，或者當(dāng)用這兩種治療劑同時(shí)處理細(xì)月包時(shí)，與用bortezomib處理 然后用CNTO 328處理相比，沒(méi)有看到增加的活性。用CNTO 328處理 有效地抑制了 IL-6介導(dǎo)的下游信號(hào)傳導(dǎo)途徑，這是通過(guò)STAT-3和 p44/42 MAPK磷酸化的顯著阻斷而證實(shí)的。CNTO 328把bortezomib-介導(dǎo)的HSP70和MKP-1表達(dá)的誘導(dǎo)分別降^f氐了 45%和90%。顯著地， CNTO 328顯著降低了轉(zhuǎn)錄活性磷酸-STAT-l的水平以及降4氐了 HSF-1 的高磷酸化。抑制熱激反應(yīng)的其他策略，包括使用KNK437的藥物抑 制劑，也得到了與bortezomib的組合的抗骨髓瘤協(xié)同作用的證據(jù)。 KNK437和bortezomib的協(xié)同活性在正常小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF) 中再現(xiàn)，但是在HSF-1剔除的MEF中則不明顯。綜上所述，申請(qǐng)人已 經(jīng)證實(shí)了抑制IL-6信號(hào)傳導(dǎo)增強(qiáng)了 bortezomib的抗骨髓瘤活性。他們 還支持這樣的假設(shè)，這至少是部分地通過(guò)減弱蛋白酶體抑制劑介導(dǎo)的 熱激反應(yīng)誘導(dǎo)而發(fā)生的，而減弱該熱激反應(yīng)誘導(dǎo)是經(jīng)由轉(zhuǎn)錄活'性 STAT-1和HSF-1的下調(diào)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。本發(fā)明的該教導(dǎo)給以下方法提供了 基本原理將抗IL-6抗體與bortezomib或相關(guān)蛋白酶體抑制劑順序、 連續(xù)或同時(shí)施用來(lái)治療有此需要的個(gè)體的方法。
本發(fā)明的IL-6拮抗劑
在本發(fā)明中使用的IL-6拮抗劑可以是任何起源的，只要其阻斷通 過(guò)IL-6的信號(hào)傳導(dǎo)，并且抑制IL-6的生物活性。IL-6拮抗劑的實(shí)例包 括IL-6抗體、IL-6R抗體、gpl30抗體、IL-6突變體、IL-6R反義寡核 苦酸，以及IL-6或IL-6R的部分肽。用于本發(fā)明的IL-6突變體的實(shí)例公開(kāi)在Brakenhoff,等人，J. Biol. Chem., 269, 86-93, 1994或Savino, 等人，EMBOJ., 13, 1357-1367, 1994中。IL-6突變體多肽或其片段 不具有IL-6的信號(hào)傳導(dǎo)作用，但是保留與IL-6R結(jié)合的能力，并且通 過(guò)以取代、刪除或插入到IL-6序列內(nèi)的形式引入突變來(lái)產(chǎn)生。雖然對(duì) 于所用的動(dòng)物物種沒(méi)有任何限制，但是優(yōu)選使用來(lái)源于人的IL-6。類(lèi) 似地，任何IL-6部分肽或IL-6R部分肽可以在本發(fā)明中使用，只要他 們能夠阻止IL6或IL6R (gp80)或gpl30影響信號(hào)傳導(dǎo)，并且由此阻止 IL-6相關(guān)生物活性即可(U.S.專(zhuān)利5,210,075; EP617126有關(guān)IL-6部分 肽和IL-6R部分肽的詳細(xì)描述)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，能夠?qū)崿F(xiàn)IL6 或IL6R RNA沉默或反義機(jī)制的寡核苷酸可以用于本發(fā)明方法中 (JP5-300338有關(guān)IL-6R反義寡核苷酸的詳細(xì)描述)。本發(fā)明的抗體可用于本發(fā)明的抗體包括分離的嵌合型、人源化和/或CDR-接枝的 或人抗體，其具有至少一個(gè)能夠抑制IL6的生物功能的抗原結(jié)合區(qū)。 本發(fā)明抗體的實(shí)例包括IL-6結(jié)合抗體、IL-6R (gp80)結(jié)合抗體、gpl30 結(jié)合抗體。具有合適的抗原結(jié)合區(qū)的IL-6R抗體的實(shí)例包括PM-1抗體 (Hirata,等人，J. Immunol., 143, 2900-2906， 1989)和AUK12-20、 AUK64-7或AUK146-15抗體(W092-19759)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，抗 -IL6R抗體是公開(kāi)在US專(zhuān)利5888510和6121423中的稱為MRA的整 形抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗原結(jié)合區(qū)源自高親和力CLB-8抗-IL-6抗體。 本發(fā)明的源自CLB-6的抗體的實(shí)例是CNT0328,其描述在本申請(qǐng)人的 共同未決申請(qǐng)U.S. Ser. No. 10/280716中，該申請(qǐng)的內(nèi)容引入本文以供 參考。在另一個(gè)實(shí)施方案中，抗體是能夠以高親和力結(jié)合IL6的人抗 體，其例如描述在本申請(qǐng)人的共同未決申請(qǐng)US臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)系列號(hào) 60/677,319中。本發(fā)明的抗體以高親和力特異性地中和人IL-6?？捎糜诒景l(fā)明方法中的抗-IL-6抗體包括任何蛋白或肽分子，所述 蛋白或肽分子包含源自鼠CLB-8單克隆抗體的重鏈或輕鏈的至少一個(gè) 互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)或其配體結(jié)合部分與重鏈或輕鏈恒定區(qū)、沖匡架區(qū)或可 引入到本發(fā)明抗體內(nèi)的其任何部分。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及 抗-IL-6嵌合型抗體，所述抗體包含兩個(gè)輕鏈和兩個(gè)重鏈，每一所述鏈i包含至少一部分人恒定區(qū)和至少一部分源自對(duì)人IL-6具有特異性的鼠 c-CLB8單克隆抗體的可變區(qū)(v),所述抗體以高親和力結(jié)合人IL-6的 抑制性和/或中和性表位，例如抗體cCLB-8。本發(fā)明還包括這樣的抗體 的片段或衍生物，例如抗體鏈的一個(gè)或多個(gè)部分，例如重鏈恒定區(qū)、 連接區(qū)、多樣化區(qū)或可變區(qū)，或輕鏈恒定區(qū)、連接區(qū)或可變區(qū)。優(yōu)選的本發(fā)明抗體包括嵌合型、人源化和/或CDR-接枝的或人抗 體，所述抗體在體內(nèi)竟?fàn)幮缘匾种瓶?IL-6小鼠CLB-8、嵌合型抗-IL-6結(jié)合。y " 5 、 、 -,,一 、本發(fā)明的抗體優(yōu)選以至少l(T9 M,優(yōu)選至少1(T1Q M的親和力(Kd) 結(jié)合抗-IL6或抗-IL6R,和/或基本上中和至少一種IL-6蛋白的至少一 種活性。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，抗體以至少1 x 10-UM，優(yōu)選5 x 1(T"M 的親和力(Kd)結(jié)合IL-6,中和人IL-6。優(yōu)選地，抗體不結(jié)合其他IL-6 超家族成員，并且阻斷GP130的反式信號(hào)傳導(dǎo)(trans-signaling)。蛋白酶體抑制劑蛋白酶體是細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)，其是高度保守的多催化蛋白酶。蛋白酶 體是參與重要調(diào)控細(xì)胞過(guò)程的很多蛋白的ATP-依賴性蛋白酶解的原 因。因此，蛋白酶體是細(xì)胞生長(zhǎng)和分化中的調(diào)控元件。人細(xì)胞平均含 有大約30,000個(gè)蛋白酶體，每個(gè)蛋白酶體含有幾種蛋白消化性蛋白酶。 這些復(fù)合物是在很多細(xì)胞功能中，包括轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞周期控制、應(yīng)激反 應(yīng)、核糖體生物發(fā)生以及異常蛋白分解代謝。因此，他們?cè)谶@樣的過(guò) 程中起作用，例如免疫和炎性反應(yīng)(WO 95/25533)、病毒感染、瘤形成、 神經(jīng)和肌肉變性(U.S.專(zhuān)利5,340,736)、抗原加工(WO 94/17816)、 DNA 修復(fù)以及細(xì)胞分化。蛋白酶體活性被精確地控制以保持對(duì)于降解蛋白 的速度和特定類(lèi)型的嚴(yán)格控制。幾個(gè)步驟經(jīng)由蛋白酶體或"遍在蛋白-蛋白酶體"途徑參與蛋白降 解。最初，蛋白破壞的標(biāo)記是具有稱為遍在蛋白的小多肽鏈。遍在蛋 白化引導(dǎo)蛋白進(jìn)入蛋白酶體封閉的蛋白酶解室。對(duì)于遍在蛋白，需要 三種酶活性，El、 E2和E3。 ATP-依賴性E1酶激活遍在蛋白，并且將 其連接到遍在蛋白-綴合性酶E2上。然后，E3酶， 一種遍在蛋白連接 酶，將遍在蛋白分子與蛋白連接。該過(guò)程不斷重復(fù)直至指定的多肽拖，并且蛋白酶體最終把蛋白降解成小片段。遍在蛋白-蛋白酶體途徑是細(xì)胞中90%所有異常、錯(cuò)折疊蛋白以及 所有短壽命、調(diào)控蛋白降解的原因。其半壽期小于3小時(shí)的這些短壽 命蛋白占所有細(xì)胞蛋白的10%至20%。該途徑還分解^f艮多壽命細(xì)胞蛋 白。因此，遍在蛋白-蛋白酶體途徑是80%至90%所有細(xì)胞蛋白降解的原因。早期報(bào)道的蛋白酶體抑制劑包括肽基醛類(lèi)。這些抑制劑的初步優(yōu) 化提出了優(yōu)選在Pl位具有亮氨酸以及在P2或P3位具有大的疏水性殘 基例如萘基丙氨酸。因?yàn)殡幕╊?lèi)還表現(xiàn)出有效的巰基蛋白酶(例如4丐 蛋白酶、組織蛋白酶)抑制作用，并且由于在a-位上的質(zhì)子的酸性而在 構(gòu)型上是不穩(wěn)定的，因此研究了對(duì)醛基團(tuán)的替換。除了最初從放線菌類(lèi)分離出的抗生素類(lèi)抑制劑以外，已經(jīng)合成了 多種肽醛類(lèi)物質(zhì)，例如Siman等人，(WO91/13904)描述的胰凝乳蛋白 酶樣蛋白酶的抑制劑。已經(jīng)報(bào)道了多種蛋白酶體復(fù)合物的抑制劑，例 如Dick,等人，Biochem. 30: 2725 (1991); Goldberg,等人，Nature 357: 375 (1992); Goldberg, Eur. J. Biochem. 203: 9 (1992); Orlowski, Biochem. 29: 10289 (1989); Rivett,等人，Archs. Biochem. Biophys. 218: 1 (1989); Rivett，等人，J. Biol. Chem. 264: 12, 215 (1989); Tanaka，等人，New Biol. 4: 1 (1992)。 U.S.專(zhuān)利5,693,617中也公開(kāi)了蛋白酶體抑制劑，其 公開(kāi)內(nèi)容引入本文以供參考。優(yōu)選的蛋白酶體抑制劑是"PS-341",其成為硼酸二肽蛋白酶體抑 制劑bortezomib,(MLN-341、LDP-341和PS-341; N-(嗎啉代)羰基)-P-(l隱 萘基)-L-丙氨酸-L-亮氨酸硼酸)，以商標(biāo)名VELCADE 銷(xiāo)售 WO96/013266)。 PS-341抑制轉(zhuǎn)錄因子NF-kB的激活。PS-341還下調(diào) 幾種細(xì)胞程序死亡抑制劑的表達(dá)，誘導(dǎo)藥物抗性多發(fā)性骨髓瘤(MM)細(xì) 胞系和患者細(xì)胞的caspase依賴性細(xì)胞程序死亡，抑制劑MM細(xì)胞與骨 髓基質(zhì)細(xì)胞(BMSCs)的結(jié)合，以及在骨髓環(huán)境中抑制MM生長(zhǎng)和存活 因子的產(chǎn)生。與既抑制蛋白酶體又抑制半胱氨酸蛋白酶的肽醛類(lèi)不同， bortezomib是蛋白酶體的效力更強(qiáng)的選擇性抑制劑。相對(duì)于其他絲氨酸 蛋白酶，包括人白細(xì)胞彈性蛋白酶、組織蛋白酶G、胰凝乳蛋白酶和 凝血酶，其對(duì)于蛋白酶體具有非常高的選擇性(>500倍)。Bortezomib最近被批準(zhǔn)用于治療復(fù)發(fā)性和頑固性多發(fā)性骨髓瘤。在多種腫瘤培養(yǎng)模型中，bortezomib對(duì)于胂瘤細(xì)胞蛋白酶體活性的抑制與誘導(dǎo)細(xì)胞程序 死亡有關(guān)。通過(guò)與蛋白酶體中活性位點(diǎn)蘇氨酸相互作用的藥效基團(tuán)，具體蛋 白酶抑制劑分為5類(lèi)肽醛類(lèi)例如CEP1612和MG132,肽硼酸酯類(lèi)例 如bortezomib,肽乙烯基砜類(lèi)，肽環(huán)氧酮類(lèi)以及卩-內(nèi)酯抑制劑例如 lactocystin。下列化合物或其類(lèi)似物也在本發(fā)明中用作蛋白酶體抑制劑 PS—519 (lR-[lS,4R,5S]]-l-(l-羥基-2-曱基丙基)-4-丙基-6-氧雜-2-氮雜 二環(huán)[3.2丄]庚烷-3,7-二酮)；clasto-lactacystin卩國(guó)內(nèi)酉旨；lactacystin、 epoxomicin、 CVT634 (-5-曱氧基-l-茚滿酮-3-乙?；?亮氨?；?D-亮氨 ?；?l —茚滿基酰胺)、TMC96 ((3-甲基丁?；?L-蘇氨酸N-(l-(2-(羥基曱 基)-環(huán)氧乙烷-2-基羰基)-3-曱基丁_3-烯基)酰胺)、MG-115、 CEP1W2和 MG132。除了蛋白酶體蛋白酶抑制劑以外，遍在蛋白-蛋白酶體途徑還可以 通過(guò)促進(jìn)酶遍在蛋白-激活酶(El)、遍在蛋白-綴合酶@2)和遍在蛋白-連接酶(E3酶)來(lái)阻斷。已經(jīng)鑒定了 El抑制劑例如himeic acid A (Tsukamoto,等人，2005, Bioorgan Med Chem Lett 15(1): 191-194)。 本領(lǐng)域已知的其他方法例如RNA沉默也可用于降低或消除特定遍在蛋 白化相關(guān)酶的活性。監(jiān)測(cè)蛋白酶體抑制活性US專(zhuān)利6613541中教導(dǎo)了在哺乳動(dòng)物中監(jiān)測(cè)蛋白酶體抑制劑的藥 效學(xué)藥物作用的方法，本發(fā)明者們已驚奇地發(fā)現(xiàn)，在生物樣本中，蛋 白酶體活性而不是藥物濃度的體外分析提供了監(jiān)測(cè)蛋白酶體抑制劑的 藥效學(xué)藥物作用的有用方法，并且該數(shù)據(jù)給選擇將來(lái)預(yù)施用的蛋白酶 體抑制劑的將來(lái)劑量以及給藥頻率提供了指導(dǎo)。所述方法包括給哺乳動(dòng)物施用蛋白酶體抑制劑；在施用蛋白酶體 抑制劑之后的一個(gè)或多個(gè)具體時(shí)間從哺乳動(dòng)物獲得一個(gè)或多個(gè)測(cè)試生 物樣本；測(cè)定在測(cè)試生物樣本中的蛋白酶體活性；確定測(cè)試生物樣本 中蛋白酶體活性的量；以及比較測(cè)試生物樣本中的蛋白酶體活性的量 與參照生物樣本中的蛋白酶體活性的量，所述參照生物樣本是從沒(méi)有 施用蛋白酶體抑制劑的哺乳動(dòng)物中獲得的。US專(zhuān)利6613541還提供了確定蛋白酶體的給藥方案每的方法，確 定哺乳動(dòng)物，包括人中基準(zhǔn)蛋白酶體活性的方法，并且提供了測(cè)定哺 乳動(dòng)物生物樣本中蛋白酶體活性的試劑盒。U.S.專(zhuān)利6,613,541的方法 可以在選自血樣、尿樣和組織活組織檢查樣本的生物樣本上實(shí)施。測(cè)定IL6IL6可以在采用IL6反應(yīng)性細(xì)胞系的生物測(cè)定中4企測(cè)(參見(jiàn)7TD1; B9; CESS, KPMM2, KT畫(huà)3; Ml, MH60-BSF-2, M07E; Mono Mac 6; NFS-60; PIL-6; SKW6-C14; T1165; XG-1)。 IL6還可以通過(guò)其作為雜 交瘤生長(zhǎng)因子的活性來(lái)測(cè)定(參見(jiàn)HGF)。也可以采用敏感免疫測(cè)定和 比色測(cè)定。另一檢測(cè)方法是細(xì)胞因子的RT-PCR定量測(cè)定。還有用于檢 測(cè)受體相關(guān)gpl30蛋白的ELISA測(cè)定(這樣的試劑可得自例如R&D Systems)。為了檢測(cè)IL6與CNT0328的結(jié)合，可以使用在本申請(qǐng)人的共同未 決申請(qǐng)U.S.系列號(hào)10/280716中公開(kāi)的抗-ID (抗可變區(qū)抗體)來(lái)在任何 標(biāo)準(zhǔn)免疫測(cè)定才各式例如ELISA-型測(cè)定中進(jìn)4亍片企測(cè)。可通過(guò)本發(fā)明方法治療的疾病IL6的失控表達(dá)可能是參與多種疾病的發(fā)病機(jī)理的重要因素之一。 已經(jīng)在多種病癥中觀察到了 IL6 (以及其他B-細(xì)胞分化因子)的過(guò)度產(chǎn) 生，所述病癥是例如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，多發(fā)性骨髓瘤，Lennert綜合征(組 織細(xì)胞淋巴瘤)，Castleman's病(具有大量漿細(xì)胞滲入的淋巴結(jié)病、高丫-球蛋白血、貧血以及增高的急性期蛋白濃度)、心臟粘液瘤和肝硬化。 已經(jīng)觀察到了成膠質(zhì)細(xì)胞瘤的IL6的組成型合成以及IL6分泌到腦脊液 中。對(duì)于免疫介導(dǎo)的炎性疾病(IMID)， IL6參與慢性多發(fā)性關(guān)節(jié)炎的發(fā) 病機(jī)理(與IL1和IL8—起)，因?yàn)樵诨褐邪l(fā)現(xiàn)了高濃度的IL6。在炎 性腸病中，增高的IL6血漿水平可以是疾病狀態(tài)的指標(biāo)。在膜增生性 腎小球腎炎中，增高的IL6尿水平也是疾病狀態(tài)的指標(biāo)。IL6可以在I 型和II型糖尿病的免疫介導(dǎo)的發(fā)病機(jī)理中起重要作用。因此，本發(fā)明提供了調(diào)節(jié)或治療細(xì)胞、組織、器官、動(dòng)物或患者 中至少一種本領(lǐng)域已知的或本文所述的IL-6相關(guān)疾病的方法，所述方15法使用至少一種本發(fā)明的IL-6抗體，例如給細(xì)胞、組織、器官、動(dòng)物 或患者施用或者讓其接觸治療有效量的IL-6抗體，并且聯(lián)合施用蛋白 酶體抑制劑。本發(fā)明還提供了調(diào)節(jié)或治療細(xì)胞、組織、器官、動(dòng)物或 患者中至少一種IL-6相關(guān)疾病的方法，所述疾病包括但不限于至少一 種以下疾病肥胖、免疫相關(guān)疾病、心血管疾病、感染疾病、惡性疾 病或一申經(jīng)疾病。本發(fā)明還提供了調(diào)節(jié)或治療細(xì)胞、組織、器官、動(dòng)物或患者中至 少一種IL-6相關(guān)免疫有關(guān)疾病的方法，所述疾病包括但不限于至少一 種以下疾病類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、青少年類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、全身發(fā)作的 青少年類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊推炎、胃潰瘍、 血清反應(yīng)陰性關(guān)節(jié)病、骨關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)溶解、外科埋植劑的無(wú)菌松弛、 炎性腸病、潰瘍性結(jié)腸炎、全身性紅斑狼瘡、抗磷脂綜合征、虹膜睫 狀體炎/葡萄膜炎/視神經(jīng)炎、特發(fā)性肺纖維變性、系統(tǒng)性血管炎/韋格內(nèi) 氏肉芽腫癥、肉樣瘤病、睪丸炎/輸精管切除術(shù)逆轉(zhuǎn)過(guò)程、變應(yīng)性/特應(yīng) 性疾病、哞喘、過(guò)敏性鼻炎、濕滲、過(guò)敏性接觸性皮炎、變應(yīng)性結(jié)膜 炎、過(guò)敏性肺炎、移植物、器官移植排斥、移植物抗宿主病、全身炎 性反應(yīng)綜合征、膿毒病綜合征、革蘭氏陽(yáng)性膿毒癥、革蘭氏陰性膿毒 癥、培養(yǎng)物陰性膿毒癥、真菌膿毒癥、中性白細(xì)胞減少癥發(fā)熱、尿膿 毒癥、腦膜炎球菌血癥、創(chuàng)傷/出血、燒傷、電離輻射暴露、急性胰腺 炎、成人呼吸窘迫綜合征、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、酒精誘導(dǎo)的肝炎、慢性 炎癥性病變、肉樣瘤病、Crohn's病、鐮狀細(xì)胞性貧血、糖尿病、腎病、 特應(yīng)性疾病、過(guò)敏反應(yīng)、變應(yīng)性鼻炎、花粉熱、常年性鼻炎、結(jié)膜炎、 子宮內(nèi)膜異位、哮喘、風(fēng)瘆、全身過(guò)敏、皮炎、惡性貧血、溶血性疾 病、血小板減少癥、任何器官或組織的移植物排斥、腎移植排斥、心 臟移植排斥、肝移植排斥、胰腺移植排斥、肺移植排斥、骨髓移植(BMT) 排斥、皮膚同種移植物排異反應(yīng)、軟骨移植排斥、骨移植物排斥、小 腸移植排斥、胎兒胸腺植入排斥、甲狀旁腺移植排斥、任何器官或組 織的異種移植物排斥、同種異體移植物排斥、抗受體過(guò)敏反應(yīng)、格雷 夫斯病、雷諾氏病、B型力夷島素纟氏抗性糖尿病、嗜喘、重癥力幾無(wú)力、抗 體介導(dǎo)的細(xì)胞毒性、III型過(guò)敏反應(yīng)、POEMS綜合征(多發(fā)性神經(jīng)病、 器官巨大癥、內(nèi)分泌病、單克隆丙種球蛋白病和皮膚變化綜合征)、多 發(fā)性神經(jīng)病、器官巨大癥、內(nèi)分泌病、單克隆丙種球蛋白病、皮膚變化綜合征、抗磷脂綜合征、天皰瘡、硬皮癥、混合性結(jié)締組織病、原 發(fā)性阿狄森氏病、糖尿病、慢性活動(dòng)性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、白斑病、血管炎、MI后心切開(kāi)術(shù)綜合征、IV型過(guò)敏癥、接觸性皮炎、過(guò)敏性肺炎、同種異體移植物排斥、由于細(xì)胞內(nèi)生物體的肉芽腫、藥物過(guò)敏、代謝病/自發(fā)病、威爾遜氏病、血色素沉著癥、a-l-抗胰蛋白 酶缺乏、糖尿病性視網(wǎng)膜病、橋本甲狀腺炎、骨質(zhì)疏松癥、下丘腦-垂 體-腎上腺軸評(píng)估、原發(fā)性膽汁性肝硬化、曱狀腺炎、腦脊髓炎、惡病 質(zhì)、纖維嚢泡癥、新生兒慢性肺病、慢性阻塞性肺病(COPD)、家族性 p蓋血細(xì)胞淋巴組織細(xì)胞增多病(familial hematophagocytic lymphohistiocytosis)、皮膚病癥、牛皮癬、禿頂、腎病綜合征、腎炎、 腎小球腎炎、急性腎功能衰竭、血液透析、尿毒癥、中毒、先兆子癇、 okt3療法、抗cd3療法、細(xì)胞因子療法、化學(xué)療法、放射療法(如包括 但不限于乏力、貧血、惡病質(zhì)等)、慢性水楊酸鹽中毒等。參見(jiàn)例如the Merck Manual, 12th-17th Editions, Merck & Company, Rah way, NJ (1972, 1977, 1982, 1987, 1992, 1999), Pharmacotherapy Handbook, Wells等人，eds., Second Edition, Appleton and Lange, Stamford, Conn. (1998, 2000),其全文引入本文以供參考。本發(fā)明還提供了調(diào)節(jié)或治療細(xì)胞、組織、器官、動(dòng)物或患者中至 少 一種心血管疾病的方法，所述疾病包括但不限于至少 一種以下疾病心臟暈眩綜合征(cardiac stun syndrome)、心肌梗塞、充血性心力衰竭、 中風(fēng)、缺血性中風(fēng)、出血、動(dòng)脈硬化、動(dòng)脈粥樣硬化、再狹窄、糖尿 病性粥樣硬化病(diabetic aterosclerotic disease)、高血壓、動(dòng)月永性高血壓、 腎血管性高血壓、暈厥、休克、心血管系統(tǒng)梅毒、心力衰竭、肺原性 心臟病、原發(fā)性肺動(dòng)脈高壓、心律失常、心房異位性博動(dòng)、心房樸動(dòng)、 心房顫動(dòng)(持續(xù)性或突發(fā)性)、灌注后綜合征、心肺分流術(shù)炎癥反應(yīng)、紊 亂性或多源性房性心動(dòng)過(guò)速、規(guī)律性窄QRS心動(dòng)過(guò)速、特殊心律失常、 心室顫動(dòng)、希氏束心律失常(His bundle arrythmias)、房室性傳導(dǎo)阻滯、 束支傳導(dǎo)阻滯、心月幾局部缺血性病癥、冠狀動(dòng)脈疾病、心絞痛、心肌 梗塞、心肌病、擴(kuò)張性充血性心"幾病、限制性心肌病、心臟瓣膜疾病、 心內(nèi)膜炎、心包疾病、心臟腫瘤、主動(dòng)脈和周?chē)詣?dòng)脈瘤、主動(dòng)脈壁 夾層形成、主動(dòng)脈炎癥、腹主動(dòng)脈及其分支閉塞、外周血管病癥、閉 塞性動(dòng)脈病癥、周?chē)鷦?dòng)脈粥樣石更化疾病(peripheral atherloscleroticdisease)、血栓閉塞性脈管炎、機(jī)能性周?chē)鷦?dòng)脈病癥、雷諾氏現(xiàn)象和疾 病、手足發(fā)紺、紅斑性肢痛、靜脈疾病、血栓靜脈炎、曲張l爭(zhēng)脈、動(dòng) 靜脈瘺、淋巴水腫、脂肪水腫、不穩(wěn)定心絞痛、再灌注損傷、泵后綜 合4正(post pump syndrome)、擊夾血-再灌注損傷等。這才羊的方法可4壬選i也 包括施用有效量的包含至少一種抗IL-6抗體的組合物或藥物組合物于 需要這樣的調(diào)節(jié)、處理或治療的細(xì)胞、組織、器官、動(dòng)物或患者。本發(fā)明還提供了調(diào)節(jié)或治療細(xì)胞、組織、器官、動(dòng)物或患者中至 少一種IL-6相關(guān)感染疾病的方法，所述疾病包括]旦不限于至少一種以 下疾病急性或慢性細(xì)菌感染，急性或慢性寄生或傳染過(guò)程，包括細(xì) 菌、病毒和真菌感染，HTV感染/HIV神經(jīng)病變、腦膜炎、肝炎(如曱 型、乙型或丙型等)、膿毒性關(guān)節(jié)炎、腹膜炎、肺炎、會(huì)厭炎、大腸桿 菌0157:h7、溶血性尿毒癥綜合征/溶栓性血小板減少性紫癜、疾疾、登 革出血熱、利什曼病、麻風(fēng)病、中毒性休克綜合征、鏈球菌肌炎、氣 性壞疽、結(jié)核分支桿菌、鳥(niǎo)分枝桿菌胞內(nèi)寄生菌、卡氏肺嚢蟲(chóng)性肺炎、 盆腔炎癥性疾病、睪丸炎/附睪炎、軍團(tuán)桿菌、萊姆病、曱型流感、EB 病毒、病毒相關(guān)的噬血細(xì)胞綜合征、病毒性腦炎/無(wú)菌腦膜炎等。本發(fā)明還提供了調(diào)節(jié)或治療細(xì)胞、組織、器官、動(dòng)物或患者中至 少一種IL-6相關(guān)惡性疾病的方法，所述疾病包括但不限于至少一種以 下疾病白血病、急性白血病、急性成'淋巴細(xì)胞性白血病(ALL)、急性 淋巴細(xì)胞性白血病、B-細(xì)胞、T-細(xì)胞或FAB ALL、急性骨髓性白血病 (AML)、急性髓性白血病、慢性髓細(xì)胞性白血病(CML)、慢性淋巴細(xì)胞 性白血病(CLL)、毛細(xì)胞白血病、骨髓增生異常綜合征(MDS)、淋巴瘤、 何杰金氏病、惡性淋巴瘤、非何杰金氏'淋巴瘤、伯基特(Burkitt，s)淋 巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、卡波濟(jì)氏肉瘤、結(jié)腸直腸癌、胰腺癌、鼻咽癌、 惡性組織細(xì)胞增多癥、副腫瘤性綜合征/惡性高釣血癥、實(shí)體瘤、膀胱 癌、乳腺癌、結(jié)腸直腸癌、子宮內(nèi)膜癌、頭癌、頸癌、遺傳性非息肉 癌、何杰金氏淋巴瘤、肝癌、肺癌、非小細(xì)胞肺癌、卵巢癌、胰腺癌、 前列腺癌、腎細(xì)胞癌、睪丸癌、腺癌、肉瘤、惡性黑色素瘤、血管瘤、 腫瘤轉(zhuǎn)移性疾病、癌有關(guān)的骨吸收、癌有關(guān)的骨痛等。本發(fā)明還提供了調(diào)節(jié)或治療細(xì)胞、組織、器官、動(dòng)物或患者中至 少一種IL-6相關(guān)神經(jīng)疾病的方法，所述疾病包括但不限于至少一種以 下疾病神經(jīng)變性疾病、多發(fā)性硬化癥、偏頭痛、AIDS癡呆綜合征、脫髓鞘性病，例如多發(fā)性硬化和急性橫貫性脊髓炎；錐體束外和小腦病癥，例如皮質(zhì)脊髓系統(tǒng)損害；基底神經(jīng)節(jié)病癥；運(yùn)動(dòng)機(jī)能亢進(jìn)的運(yùn) 動(dòng)障礙，例如亨廷頓氏舞蹈病和老年性舞蹈病；藥物誘發(fā)的運(yùn)動(dòng)障礙， 例如為阻斷CNS多巴胺受體的藥物所誘發(fā)的那些病癥；運(yùn)動(dòng)機(jī)能減退 的運(yùn)動(dòng)障礙，例如帕金森??；進(jìn)行性前核麻痹(Progressive supranucleo Palsy);小腦結(jié)構(gòu)損害；脊髓小腦變性，例如脊髓性共濟(jì)失調(diào)，弗里德 賴希氏共濟(jì)失調(diào)，小腦皮質(zhì)變性，多系統(tǒng)變性病(Mencel , Dejerine-Thomas, Shi-Drager和Machado-Joseph); 全身性病癥(雷弗素 姆氏病， 一種(3-脂蛋白血癥，共濟(jì)失調(diào)，毛細(xì)血管擴(kuò)張和線粒體多系統(tǒng) 病癥)；脫髓鞘核病癥(demyelinating core disorders),例如多發(fā)性硬化， 急性橫貫性脊髓炎；以及運(yùn)動(dòng)單元病癥例如神經(jīng)性肌萎縮(前角細(xì)胞變 性，例如肌萎縮性(脊髓)側(cè)索硬化、嬰兒型脊髓性肌萎縮和青少年脊髓 性肌萎縮)；阿爾茨海默氏??；中年人中的唐氏綜合征；彌漫性雷維小 體?。焕拙S小體型老年性癡呆；韋尼克-科爾薩科夫綜合征；慢性酒精 中毒；克羅伊茨費(fèi)爾特-雅各布病；亞急性硬化性全腦炎、 Hallerrorden-Spatz病；拳擊員癡呆；神經(jīng)外傷(如脊髓損傷、腦損傷、 腦震蕩、重復(fù)性腦震蕩)；疼痛；炎性痛；孤獨(dú)癥；抑郁癥；中風(fēng)；認(rèn) 知障礙；癲癇等。這樣的方法可任選地包括施用有效量的包含至少一 種TNF抗體或特定部分或變體的組合物或藥物組合物于需要這樣的調(diào) 節(jié)、處理或治療的細(xì)胞、組織、器官、動(dòng)物或患者。參見(jiàn)如the Merck Manual,第16版，Merck & Company, Rah way, NJ (1992)。纟合藥方法本發(fā)明方法包括施用有效量的包含至少一種抗IL-6抗體的組合物 或藥物組合物于需要這樣的調(diào)節(jié)、處理或治療的細(xì)胞、組織、器官、 動(dòng)物或患者，并且聯(lián)合給予包括施用蛋白酶體抑制劑的治療聯(lián)合。本 發(fā)明方法包括治療這樣的疾病或病癥，其中使用所述至少一種IL-6拮 抗劑。本發(fā)明方法還包括將IL-6拮抗劑與蛋白酶體抑制劑聯(lián)合給藥， 其中蛋白酶體抑制劑在IL-6拮抗劑施用之前、同時(shí)和/或之后施用。在 一個(gè)具體實(shí)施方案中，所述IL6拮抗劑是阻止或抑制IL6的生物功能的 抗體，例如中和性IL6抗體或抗-IL6R抗體，并且所述蛋白酶體抑制劑 選自PS-314 (bortezomib)、PS—519; clasto-lactacystin (3-內(nèi)酉旨；lactacystin、epoxomicin、 CVT634、 TMC96、 MG-115、 CEP1612和MG132。典型地，通過(guò)施用有效量或劑量的至少一種抗IL-6抗體組合物進(jìn) 行病理病癥的治療，取決于組合物中所含有的活性劑的比活性，有效 量或劑量合計(jì)平均至少約0.01 -500毫克至少 一種抗IL-6抗體/公斤患者 /劑量，以及優(yōu)選地，至少約0.1-100毫克抗體/公斤患者/劑量或多次施 用?；蛘撸行У难鍧舛瓤砂?-5000 pg/ml血清濃度/單次或多次 施用。適合的劑量為醫(yī)學(xué)從業(yè)者所知，且當(dāng)然應(yīng)取決于具體的疾病狀 況、施用的組合物的比活性以及患者所經(jīng)歷的具體治療。在某些情況 下，為達(dá)到期望的治療量，可能需要提供重復(fù)施用，即重復(fù)具體監(jiān)測(cè) 或計(jì)量的劑量的單獨(dú)施用，其中重復(fù)單獨(dú)施用直至達(dá)到期望的日劑量 或效果為止。為了胃腸外給藥，抗體或蛋白酶體抑制劑可與藥學(xué)上可接受的胃 腸外載體結(jié)合或單獨(dú)提供配制為溶液、懸浮液、乳劑、顆粒劑、粉劑 或凍干粉末。這樣的載體的例子是水、鹽水、林格溶液、葡萄糖溶液 和1-10%人血清白蛋白。還可使用脂質(zhì)體和非水載體例如固定油類(lèi)。載 體或凍干粉末可含有保持等滲性(如氯化鈉、甘露糖醇)和化學(xué)穩(wěn)定性 (如緩沖劑和防腐劑)的添加劑。通過(guò)已知或適合的技術(shù)滅菌制劑。適合的藥物載體描述于最近 一 版的該領(lǐng)域標(biāo)準(zhǔn)參考教科書(shū) Remington's Pharmaceutical Sciences, A. Osol中。給藥根據(jù)本發(fā)明，可使用多種已知和開(kāi)發(fā)的方式施用藥學(xué)有效量的根 據(jù)本發(fā)明的IL-6拮抗劑和蛋白酶體抑制劑。雖然胃腸外給藥是典型的， 但是可使用根據(jù)本發(fā)明具有適合結(jié)果的其他給藥方式。利用適合于吸 入給藥或在本文中描述的或本領(lǐng)域已知的其他給藥方式的多種裝置和 方法的任何一種，本發(fā)明組合物可處于載體中，作為溶液、乳劑、膠 體或懸浮液液或作為干粉遞送。其他給藥方式包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、支氣管內(nèi)、腹 內(nèi)、嚢內(nèi)、軟骨內(nèi)、腔內(nèi)、體腔內(nèi)、小腦內(nèi)、腦室內(nèi)、結(jié)腸內(nèi)、子宮 頸內(nèi)、胃內(nèi)、肝內(nèi)、心肌內(nèi)、骨內(nèi)、骨盆內(nèi)、心包內(nèi)、腹膜內(nèi)、胸膜 內(nèi)、前列腺內(nèi)、肺內(nèi)、直腸內(nèi)、腎內(nèi)、— 見(jiàn)網(wǎng)膜內(nèi)、脊柱內(nèi)、滑膜內(nèi)、 胸腔內(nèi)、子宮內(nèi)、膀胱內(nèi)、損害部位內(nèi)、快速濃注、陰道、直腸、頰、舌下、鼻內(nèi)或經(jīng)皮裝置。實(shí)施例1:抗-IL抗體與蛋白酶體抑制劑的組合的活性基于假設(shè)，嵌合型單克隆IL-6中和性抗體CNTO 328的IL-6抑制 將通過(guò)減弱bortezomib介導(dǎo)的HSP-70的上調(diào)而增強(qiáng)蛋白酶體抑制劑 bortezomib的抗骨髓瘤活性，設(shè)計(jì)和實(shí)施以下試馬全。A. 用單克隆抗體CNTO 328抑制IL-6信號(hào)傳導(dǎo)降低了 IL-6-依賴性多 發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系A(chǔ)NBL-6和KAS-6的細(xì)胞存活力。將ANBL-6和KAS-6細(xì)月包(Dr. Diane Jelinek, Mayo Clinic, Rochester, MN)與遞增濃度的CNTO 328或同種型對(duì)照抗體F105 —起 培養(yǎng)24和48小時(shí)。對(duì)于最后4小時(shí)，將細(xì)胞在WST-l (Roche Applied Science, Indianapolis, IN)存在下培養(yǎng)。使用ELISA平板讀數(shù)器在450 nM吸收度測(cè)定WST-l 一皮活細(xì)胞還原成水溶性曱臘鹽。測(cè)定的存活力以 相對(duì)于未處理細(xì)胞的存活百分比表示。所有細(xì)胞都是在含有10% FBS 和1 ng/mL IL-6的RPMI 1640培養(yǎng)基中處理。結(jié)果在圖1中顯示(值是一式五份培養(yǎng)物的平均值；條形圖，SEM)。 用CNTO 328處理ANBL-6和KAS-6細(xì)胞導(dǎo)致細(xì)胞存活力的劑量和時(shí) 間依賴性降低。KAS-6細(xì)胞對(duì)IL-6抑制作用的反應(yīng)比ANBL-6細(xì)胞敏 感得多。B. CNTO 328增強(qiáng)bortezomib在IL-6-依賴性骨髓瘤細(xì)胞中的抗骨髓 瘤活性將ANBL-6 、 KAS-6或IL-6-依賴性RPMI 8226骨髓瘤細(xì)胞系與0.1 mcg/ml (KAS-6)或10 mcg/ml (ANBL-6和RPMI 8226)對(duì)照抗體F105或 CNTO 328預(yù)培養(yǎng)24小時(shí)，然后與DMSO對(duì)照或遞增濃度的bortezomib 在F105或CNTO 328的繼續(xù)存在下一起再培養(yǎng)24小時(shí)。對(duì)于測(cè)序?qū)?驗(yàn)，將ANBL-6細(xì)胞l)用F105或CNTO 328處理24小時(shí)，然后用 F105或CNTO 328和bortezomib 5 nM再處理24小時(shí)(抗體— bortezomib); 2)用F105或CNTO 328與bortezomib 5 nM同時(shí)處理24 小時(shí)(抗體+ bortezomib),或者用bortezomib 5 nM處理12小時(shí)，然后 用F105或CNTO 328處理24小時(shí)(bortezomib —抗體)。如上所述測(cè)定21細(xì)胞存活力，并且測(cè)定相對(duì)于未處理細(xì)胞的存活百分比。所有細(xì)胞都是在含有10% FBS和1 ng/mL IL-6的RPMI 1640培養(yǎng)基中處理。柱狀 圖， 一式五份培養(yǎng)物的平均值；條形圖，SEM。ANBL-6和KAS-6細(xì)胞與CNTO 328預(yù)培養(yǎng)增強(qiáng)了 bortezomib的 細(xì)胞毒性，這是由相對(duì)于用對(duì)照抗體F105預(yù)處理的細(xì)胞，細(xì)胞存活力 的顯著降低而證實(shí)的(圖12 A和B)。 CNTO 328沒(méi)有增強(qiáng)IL-6-獨(dú)立性 骨髓瘤細(xì)胞系中bortezomib的活性，RPMI 8226 (組C)。 CNTO 328增 強(qiáng)了 bortezomib的細(xì)胞毒性，當(dāng)ANBL-6細(xì)胞用CNTO 328預(yù)處理， 然后用bortezomib處理，或者同時(shí)用CNTO 328和bortezomib處理時(shí) 增強(qiáng)的程度最大。相反，當(dāng)細(xì)胞用bortezomib處理時(shí)，CNTO 328具有 很小的另外作用(組D)。C. 用CNTO 328抑制IL-6信號(hào)傳導(dǎo)增強(qiáng)了 IL-6-依賴性多發(fā)性骨髓瘤 細(xì)胞系A(chǔ)NBL-6和KAS-6的bortezomib介導(dǎo)的細(xì)胞程序死亡將ANBL-6和KAS-6細(xì)胞用10 mcg/ml (ANBL國(guó)6)或1 mcg/ml (KAS-6) CNTO 328或?qū)φ湛贵wF105培養(yǎng)8 (ANBL國(guó)6)至12 (KAS-6)小 時(shí)。使用基于ELISA的分析來(lái)測(cè)定細(xì)胞程序死亡，該分析是測(cè)定單和 寡核小體的存在(Roche Applied Science, Indianapolis, IN), 并且以相 對(duì)于DMSO和F150處理對(duì)照的細(xì)胞程序死亡增加倍數(shù)來(lái)表示。細(xì)胞是 在含有10% FBS和1 ng/mL IL-6的RPMI 1640培養(yǎng)基中處理(圖3 A和 B,柱高度代表一式三份培養(yǎng)物的平均值，條形圖，SEM)。用CNTO 328和bortezomib處理ANBL-6和KAS-6細(xì)胞4吏得與用 單獨(dú)所述任一藥物處理的細(xì)胞細(xì)胞，細(xì)胞程序死亡的誘導(dǎo)增強(qiáng)。CNTO 328不能增強(qiáng)IL-6-獨(dú)立性骨髓瘤細(xì)胞系RPMI 8226中的細(xì)胞程序死亡 (數(shù)據(jù)未顯示)。D. CNTO 328下調(diào)白介素-6信號(hào)傳導(dǎo)并且減弱ANBL-6細(xì)胞中 bortezomib介導(dǎo)的抗細(xì)胞程序死亡的MKP-1和HSP-70的誘導(dǎo)。將ANBL-6細(xì)胞和10 mcg/ml CNTO 328或?qū)φ湛贵wF105，以及與 或不與遞增濃度的bortezomib—起培養(yǎng)8小時(shí)。制備細(xì)胞溶胞物，并 且進(jìn)行免疫印跡分析。提取印跡，并且探測(cè)HSC-70以保證每條道有相 等的蛋白載量。在HSP-70和MKP-1免疫印跡上進(jìn)行光密度測(cè)定。用CNTO 328處理ANBL-6細(xì)胞導(dǎo)致IL-6信號(hào)傳導(dǎo)的下游介質(zhì)顯 著減少，這是由磷酸-p42/44 MAPK和磷酸-STAT-3的水平降低所證實(shí) 的(圖4)。顯著地，增加劑量的bortezomib還降低了磷酸-STAT-3和磷 酸-p42/44 MAPK的水平。這些數(shù)據(jù)表明bortezomib干擾IL-6信號(hào)傳導(dǎo) (還報(bào)道于Hideshima T等人，Oncogene 2003, 22: 8386-93)。此外， CNTO 328干擾bortezomib-介導(dǎo)的HSP-70和MKP-1的諸導(dǎo)，分別干 擾了 45%和卯％，這與轉(zhuǎn)錄活性磷酸-STAT-l和高磷酸化HSF-1的水 平下降有關(guān)。E. KNK437增強(qiáng)了 bortezomib介導(dǎo)的ANBL-6和HSF-1 +/+ MEF細(xì) 月包的細(xì)月包,呈序死亡。將ANBL-6或MEF細(xì)胞(對(duì)照和HSF-W-)與DMSO對(duì)照或遞增濃 度的bortezomib和KNK437培養(yǎng)12 (ANBL-6)至24小時(shí)(MEF)。如上 所述測(cè)定細(xì)J包程序死亡，并且以相對(duì)于DMSO處理的對(duì)照的增加倍數(shù) 來(lái)表示。將ANBL-6細(xì)胞在含有10% FBS和1 ng/mL IL-6的RPMI 1640 培養(yǎng)基中處理(圖5， 一式三份培養(yǎng)物的平均值，條形圖，SEM)。用KNK437處理ANBL-6細(xì)胞導(dǎo)致與對(duì)照處理的細(xì)胞相比， bortezomib介導(dǎo)的細(xì)胞程序死亡顯著增強(qiáng)。bortezomib介導(dǎo)的細(xì)胞程序 死亡在HSF-1-/-MEF中相對(duì)于MEF則不明顯(圖6)，這意p未著該組合 的提高的活性是由于熱激蛋白反應(yīng)的下調(diào)所致。CNT0328與Bortezomib的組合的結(jié)果的概述IL-6中和性抗體CNTO 328以劑量和時(shí)間依賴性方式降低了多發(fā) 性骨髓瘤細(xì)胞系A(chǔ)NBL-6和KAS-6的存活力。用CNTO 328處理ANBL-6和KAS-6細(xì)胞增強(qiáng)了 bortezomib的抗 骨髓瘤活性，這是通過(guò)與對(duì)照抗體和bortezomib相比，細(xì)胞存活力的 降4氐以及細(xì)胞程序死亡的增強(qiáng)而證實(shí)的。當(dāng)4巴細(xì)月包先后用bortezomib 和CNTO 328處理而不是以相反順序處理時(shí)，CNTO 328的抗骨髓瘤活 性降低了 ，這也許是由于bortezomib能夠下調(diào)IL-6信號(hào)傳導(dǎo)的重要下 游介質(zhì)，或者是由于較早上調(diào)熱激蛋白反應(yīng)的成員。用CNTO 328處理ANBL-6和KAS-6細(xì)胞導(dǎo)致IL-6信號(hào)傳導(dǎo)的下 調(diào)，這是由磷酸-STAT-3和磷酸-p42/44 MAPK水平的顯著下降而顯示的。Bortezomib還以濃度依賴性方式下調(diào)磷酸-STAT-3和磷酸-p42/44 MAPK水平。CNTO 328和bortezomib的組合的提高的活性與降低的bortezomib 介導(dǎo)的抗細(xì)胞程序死亡的HSP-70和MKP-1的積聚有關(guān)。降4氐的 HSP-70誘導(dǎo)與磷酸-STAT-l和高磷酸化HSF-1的降低的水平有關(guān)。用KNK437處理ANBL-6和KAS-6細(xì)胞提高了 bortezomib的細(xì)胞 程序死亡活性，這部分是由于其能夠干擾熱激蛋白反應(yīng)的誘導(dǎo)，由以 下事實(shí)證實(shí)在HSF-1-陰性小鼠胚胎成纖維細(xì)胞中，該提高的細(xì)胞程 序死亡作用非常不明顯。綜上所述，上面的數(shù)據(jù)給將bortezomib/CNTO 328組合擴(kuò)展到臨床 試-驗(yàn)，并且設(shè)計(jì)目標(biāo)是下調(diào)對(duì)bortezomib抗性的其他新策略(例如 HSP-70、 MKP-1的抑制劑)提供了原理。
權(quán)利要求
1.治療需要治療的哺乳動(dòng)物中癌性疾病或病癥的方法，所述方法包括聯(lián)合施用蛋白酶體抑制劑和IL-6拮抗劑。
2. 權(quán)利要求l的方法，其中所述IL-6拮抗劑是抗體或其片段。
3. 權(quán)利要求2的方法，其中所述抗體是單克隆抗體。
4. 權(quán)利要求2的方法，其中所述抗體或片段結(jié)合IL6。
5. 權(quán)利要求2的方法，其中所述抗體或片段結(jié)合IL-6受體。
6. 權(quán)利要求3或4的方法，其中所述抗體片l殳是Fab、 Fab'或 F(ab')2片段或其衍生物。
7. 權(quán)利要求3的方法，其中所述單克隆抗體與單克隆抗體cCLB8 竟?fàn)帉?duì)人IL6的結(jié)合。
8. 權(quán)利要求3的方法，其中所述單克隆抗體是靜脈內(nèi)給藥。
9. 權(quán)利要求3的方法，其中所述單克隆抗體以0.01 mg/kg至12.0 mg/kg體重的量給藥。
10. 權(quán)利要求3的方法，其中所述單克隆抗體以快速濃注劑量給 藥，然后輸注所述抗體。
11. 權(quán)利要求l的方法，其中所述哺乳動(dòng)物是人患者。
12. 權(quán)利要求1的方法，其中所述蛋白酶體抑制劑選自硼酸二肽蛋 白酶體抑制劑bortezomib、 PS-519 (1R-[lS,4R,5S]]-l-(l-羥基-2-甲基丙 基)_4-丙基-6-氧雜-2-氮雜二環(huán)[3.2.1.]庚烷-3,7-二酮)；clasto-lactacystin 卩-內(nèi)酯；lactacystin、 epoxomicin、 CVT634 (-5-曱氧基-l-茚滿酮-3-乙酰 基-亮氨酰基-D-亮氨?；?l-茚滿基酰胺)、TMC96((3-曱基丁酰基-L-蘇 氨酸N-(l-(2-(羥基曱基)-環(huán)氧乙烷-2-基羰基)-3-曱基丁-3-烯基)酰胺)、 MG畫(huà)115、 CEP1612和MG132。
13. 權(quán)利要求1的方法，其中所述蛋白酶體抑制劑是硼酸二肽蛋白 酶體#卩制劑bortezomib 。
14. 權(quán)利要求1的方法，其中所述癌性疾病或病癥是至少一種選自 以下的疾病白血病、急性白血病、急性成淋巴細(xì)胞性白血病(ALL)、 B-細(xì)胞、T-細(xì)胞或FAB ALL、急性骨髓性白血病(AML)、慢性髓細(xì)胞 性白血病(CML)、慢性淋巴細(xì)胞性白血病(CLL)、毛細(xì)胞白血病、骨髓 增生異常綜合征(MDS)、淋巴瘤、何杰金氏病、惡性淋巴瘤、非何杰金 氏淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、卡波濟(jì)氏肉瘤、結(jié)腸直腸癌、胰腺癌、腎細(xì)胞癌、前列腺細(xì)胞癌、鼻咽癌、惡性組織細(xì)胞增多 癥、副腫瘤性綜合征/惡性高釣血癥、實(shí)體瘤、腺癌、肉瘤和惡性黑色素瘤。
15. 權(quán)利要求1的方法，其中所述抗-IL6拮抗劑與蛋白酶體抑制劑 順序、連續(xù)或同時(shí)施用。
16. 抑制有此需要的哺乳動(dòng)物中腫瘤生長(zhǎng)的方法，所述方法包括給 所述哺乳動(dòng)物聯(lián)合施用能有效抑制所述腫瘤生長(zhǎng)的量的蛋白酶體抑制 劑與單克隆抗體或其片段，所述單克隆抗體或其片段能夠阻止IL6經(jīng) 由膜結(jié)合受體的信號(hào)傳導(dǎo)激活。
17. 預(yù)防哺乳動(dòng)物中肺瘤轉(zhuǎn)移的方法，所述方法包括給所述哺乳動(dòng) 物聯(lián)合施用能有效預(yù)防所述哺乳動(dòng)物中腫瘤轉(zhuǎn)移的量的蛋白酶體抑制 劑與單克隆抗體或其片段，所述單克隆抗體或其片段能夠阻止IL6經(jīng) 由膜結(jié)合受體的信號(hào)傳導(dǎo)激活。
18. 權(quán)利要求3、 16或17任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體是cCLB8 或其片段。
19. 治療需要治療的哺乳動(dòng)物中IL-6相關(guān)疾病或病癥的方法，所 述方法包括聯(lián)合施用蛋白酶體抑制劑和IL-6拮抗劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及治療需要治療的哺乳動(dòng)物中癌性疾病或病癥或IL-6相關(guān)疾病或病癥的方法，所述方法包括聯(lián)合施用蛋白酶體抑制劑和IL-6拮抗劑。
文檔編號(hào)A61K38/00GK101325969SQ200680045921
公開(kāi)日2008年12月17日 申請(qǐng)日期2006年12月8日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月9日
發(fā)明者J·內(nèi)梅思, M·扎基, R·奧爾洛夫斯基 申請(qǐng)人:森托科爾公司