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      克列維醇在制備抗氧化劑的應用的制作方法

      文檔序號:1128292閱讀:254來源:國知局
      專利名稱:克列維醇在制備抗氧化劑的應用的制作方法
      技術領域
      本發(fā)明涉及一種克列維醇,尤其是涉及一種來源于紅樹林內生真菌一矮棒曲霉BYY-1(A.clavatonanicus)真菌代謝產物克列維醇作為抗氧化劑在醫(yī)藥品、化妝品及食品領域的用途。
      背景技術
      生物體內會不斷產生具有很高反應活性的自由基,在正常條件下,這些自由基會不斷地被抗氧化系統(tǒng)清除,使機體內的自由基處于動態(tài)平衡之中。但是,當機體的抗氧化防御體系受到損傷,或在內源性和/或外源性的刺激而使機體代謝異常時,會導致自由基的大量產生。它們可對機體產生毒害,破壞生物大分子,影響細胞活性,主要損害細胞膜包括血管內皮細胞膜及亞微結構,并引起一系列氧化性的損傷疾病。現(xiàn)已明確人體內的自由基與許多病理生理現(xiàn)象都有密切的關系,如衰老、腫瘤、炎癥、糖尿病、動脈粥樣硬化、阿爾茨海默氏癥、帕金森病等(1、Ono K,Hamaguchi T,Naiki H,Yamada M.Anti-amyloidogenic effects ofantioxidantsimplications for the prevention and therapeutics of Alzheimer′s disease.Biochim.Biophys.Acta,2006,1762(6)575-586;2、趙先英,張濤.天然藥物中抗氧化劑的研究進展.中國醫(yī)院藥學雜志,2006,26(4)466-467;3、晏馬成,郭澄.氧化損傷性疾病和中藥的抗氧化治療.時珍國醫(yī)國藥,2000,11(8)765-766)。自由基還與食品變質密切相關,是食品氧化的主要原因。
      鑒于自由基與人體健康疾病的關系十分密切,而且又是影響食品質量的主要原因,因此尋找具有抗氧化的活性化合物已成為制藥、食品及化妝品等不同領域的研究開發(fā)熱點。
      目前,已有不少來源于化學合成和天然產物的抗氧化劑作為藥品、化妝品或食品添加劑使用。已普遍應用的抗氧化劑(非酶類)主要有維生素E、維生素C、β-胡蘿卜素、茶多酚、異黃酮、迷迭香酚和阿魏酸等。但現(xiàn)有的抗氧化劑在活性、穩(wěn)定性或安全性等多方面存在著不同程度的缺陷。例如天然抗氧化劑茶多酚自身容易被氧化,性質不夠穩(wěn)定。因此,繼續(xù)尋找活性高、安全性好、性質穩(wěn)定的抗氧化劑仍然具有十分重要的意義。
      海洋真菌種類多,分布廣,既可生活在水體和底泥中,又可棲息在紅樹植物、海綿、珊瑚、海鞘、海藻等不同的海洋動植物體上。國內外對海洋真菌的系統(tǒng)研究起步較遲,對其代謝產物化學及生物活性的研究水平遠不及陸生真菌,但近幾年來研究進展較快,目前已從這類真菌中分離并鑒定了許多活性化合物,其中有些具有很強的抗氧化活性(1、Bugni T S,Ireland C M.Marine-derived fungia chemically and biologically diverse group ofmicroorganisms.Nat.Prod.Rep.,2004,21143-163;2、Imada C,Sugimoto Y,Makimura T,kobayashi T,Hamada N, Watanabe E. Isolation and characterization of tyrosinaseinhibitorproducing microorganisms from marine environment.Fisheries science.2001,671151-1156.)。已有的研究結果表明海洋真菌代謝產物中蘊藏著許多具有生物活性的新化合物,是開發(fā)活性物質的寶貴資源。
      紅樹植物內生真菌是海洋真菌的重要成員,這類微生物能產生許多與宿主植物相同或不同的活性代謝產物,包括一些在陸棲微生物中未曾發(fā)現(xiàn)過的生物活性物質,是發(fā)掘天然的及抗氧化劑的重要資源,但目前鮮見從這類真菌中尋找抗氧化劑乙酰膽堿酯酶抑制劑的研究開發(fā)報道。

      發(fā)明內容
      本發(fā)明的目的在于提供一種來源于紅樹林內生真菌次級代謝產物克列維醇的制備方法。
      本發(fā)明的另一目的在于提供一種來源于紅樹林內生真菌次級代謝產物克列維醇在制備抗氧化劑的應用。
      本發(fā)明所用的紅樹林內生真菌為矮棒曲霉BYY-1(Aspergillus clavatonanicus BYY-1),已于2006年7月3日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC中國武漢大學校內),保藏號為CCTCC NOM206063。
      本發(fā)明所述的克列維醇(clavatol)為2,4-Dihydroxy-3,5-dimethylacetophenone,其化學結構式如下 所述的克列維醇的制備方法為
      1)矮棒曲霉BYY-1(Aspergillus clavatonanicus BYY-1)的種子培養(yǎng)A.配制斜面培養(yǎng)基馬鈴薯去皮切塊,放入海水中,煮后過濾,濾液用海水定容,得馬鈴薯汁,然后添加葡萄糖或蔗糖及瓊脂,分裝試管,滅菌后制成斜面培養(yǎng)基。將矮棒曲霉BYY-1轉接至斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
      B.配制種子液在馬鈴薯汁中添加葡萄糖或蔗糖,分裝后滅菌,得種子培養(yǎng)基。將上述培養(yǎng)的斜面菌種接入到分裝后的種子培養(yǎng)基中,搖瓶培養(yǎng),得種子液。
      C.種子罐種子培養(yǎng)先配制種子培養(yǎng)基(配方同上),將種子培養(yǎng)基裝入種子罐,將上述培養(yǎng)的種子液接入種子罐中,培養(yǎng)后得培養(yǎng)后的種子液。
      2、克列維醇的發(fā)酵配制發(fā)酵培養(yǎng)基(配方同種子培養(yǎng)基),將發(fā)酵培養(yǎng)基裝入發(fā)酵罐,將上述培養(yǎng)后的種子液接入發(fā)酵罐中,發(fā)酵后得發(fā)酵液。
      3、克列維醇的提取將發(fā)酵液過濾除菌體,濾液減壓濃縮后用有機溶劑萃取,收集有機相并減壓濃縮成浸膏。
      4、克列維醇的精制浸膏用甲醇溶解得克列維醇甲醇溶液,在克列維醇甲醇溶液中加入硅膠拌樣,上硅膠柱進行分離,以石油醚/乙酸乙酯(石油醚/乙酸乙酯=100/0到0/100)為洗脫劑梯度洗脫,收集當石油醚/乙酸乙酯的體積比例為(50~3)∶1時的洗脫液,合并洗脫液并減壓濃縮至干,得微黃色晶體,加溶劑溶解后重結晶至少2次,得目標產物,即克列維醇。
      在步驟1)中,配制斜面培養(yǎng)基的馬鈴薯去皮切成小塊,取150~300g放入1L 20%~100%海水(海水與自來水按體積比混合)中,煮后過濾,濾液用20%~100%海水定容至1000ml,得馬鈴薯汁,然后添加葡萄糖或蔗糖10~30g,瓊脂1.5~3.0g,分裝試管,121℃滅菌30min后制成斜面培養(yǎng)基,將矮棒曲霉BYY-1(Aspergillus clavatonanicus BYY-1)轉接至斜面培養(yǎng)基上后25~32℃下培養(yǎng)3~7d;配制種子液時,在每升馬鈴薯汁(制備方法同上)中添加葡萄糖或蔗糖10~30g,分裝后滅菌(121℃,30min),得種子培養(yǎng)基,將上述培養(yǎng)的斜面菌種接入到分裝后的種子培養(yǎng)基中,25~32℃下,120~250r/min搖瓶培養(yǎng)2~5d,得種子液;種子罐種子培養(yǎng)時,將種子培養(yǎng)基裝入種子罐的裝罐量為種子罐容積的60%~70%,將上述培養(yǎng)的種子液按接種量2%~10%接入種子罐中,在溫度25~32℃、攪拌轉速120~220r/min和通氣量0.3~1.2vvm的條件下培養(yǎng)2~4d,得培養(yǎng)后的種子液。
      在步驟2)中,配制發(fā)酵培養(yǎng)基時,將發(fā)酵培養(yǎng)基裝入發(fā)酵罐的裝罐量為發(fā)酵罐容積的60%~70%,將上述培養(yǎng)后的種子液按接種量5%~10%接入發(fā)酵罐中,在溫度25~32℃、攪拌轉速120~200r/min和通氣量0.3~1.5vvm的條件下發(fā)酵4~7d,得發(fā)酵液。
      在步驟3)中,將發(fā)酵液過濾除菌體,濾液減壓濃縮至發(fā)酵液體積的35%~20%后用有機溶劑萃取至少2次,收集有機相并減壓濃縮成浸膏,有機溶劑選自乙酸乙酯、氯仿、四氯化碳、甲苯中的一種。
      在步驟4)中,在克列維醇甲醇溶液中加入質量為浸膏5~10倍的硅膠拌樣,收集當石油醚/乙酸乙酯的體積比例為(50~3)/1時的洗脫液。溶劑選自甲醇、乙酸乙酯和丙酮中的一種。
      所得的化合物無色針狀晶體,mp180~182℃,ESIMSm/z(rel.int.)179.0[M-H]-;1H-NMR和13C-NMR(500MHz,DMSO,ppm)數(shù)據見表1。經譜圖綜合解析結果證實該化合物為克列維醇。
      表1.克列維醇的NMR數(shù)據

      經藥理實驗證實該化合物具有顯著的抗氧化作用,可用于制備抗氧化劑,并應用于醫(yī)藥品、化妝品及食品的制備中。由于本發(fā)明所述的來源于紅樹林內生真菌次級代謝產物克列維醇不僅可通過發(fā)酵制得,無原材料之憂,而且提取精制方法簡單,適合規(guī)模化生產。


      圖1為本發(fā)明所述的來源于紅樹林內生真菌次級代謝產物克列維醇對H2O2的清除活性。在圖1中,橫坐標為Clavstol(μg/ml),縱坐標為Inhibitror(%)。
      具體實施例方式
      下面結合具體實例進一步闡述本發(fā)明。
      實施例1A.培養(yǎng)基配方斜面培養(yǎng)基配方每升馬鈴薯汁(馬鈴薯去皮切成小塊,取200g放入1L 50%海水中,煮30min,過濾,濾液用50%海水(海水與自來水按體積比混合)定容至1000ml)中添加葡萄糖20g,瓊脂2.0g。種子培養(yǎng)基配方每升馬鈴薯汁(制法同上)中添加葡萄糖20g。發(fā)酵培養(yǎng)基配方同種子培養(yǎng)基。
      B.發(fā)酵工藝斜面培養(yǎng)按上述斜面培養(yǎng)基配方配制培養(yǎng)基,分裝試管,121℃滅菌30min后制斜面。將保存的紅樹植物內生真菌一矮棒曲霉CCTCC NOM206063菌種轉接至斜面培養(yǎng)基上,25℃下培養(yǎng)7d。搖瓶培養(yǎng)按種子培養(yǎng)基配方配制培養(yǎng)基,分裝500錐型瓶(80ml/瓶),滅菌(121℃,30min)后將培養(yǎng)的斜面菌種接入,28℃下,140r/min搖瓶培養(yǎng)3d。種子罐培養(yǎng)按種子培養(yǎng)基配方配制培養(yǎng)基,20L種子罐培養(yǎng)基裝量為12L,121℃滅菌30min,冷卻后將培養(yǎng)的搖瓶種子按接種量2%接入種子罐中,在溫度28℃、攪拌轉速120r/min和通氣量0.5vvm的條件下培養(yǎng)3d。發(fā)酵罐培養(yǎng)按發(fā)酵培養(yǎng)基配方配制培養(yǎng)基,200L發(fā)酵罐培養(yǎng)基裝量為120L,121℃滅菌30min,待冷卻至28℃后將上述種子罐已培養(yǎng)好的種子按接種量10%接入罐中,在溫度28℃、攪拌轉速120r/min和通氣量0.3vvm的條件下培養(yǎng)7d。
      C.克列維醇的提取發(fā)酵結束后,發(fā)酵液過濾除菌體,濾液減壓濃縮至原液體積的25%后用乙酸乙酯萃取3次,收集有機相并減壓濃縮成浸膏。
      D.克列維醇的精制浸膏用少量的甲醇溶解后加入適量硅膠拌樣,上硅膠柱進行分離,以石油醚-乙酸乙酯=50∶1(v/v)為洗脫劑洗脫,收集洗脫液并減壓濃縮至干,得微黃色晶體,加適量的乙酸乙酯溶解,于室溫下重結晶,同法再重結晶4次。
      實施例2A.培養(yǎng)基配方斜面培養(yǎng)基配方每升馬鈴薯汁(馬鈴薯去皮切成小塊,取300g放入1L 100%海水中,煮30min,過濾,濾液用100%海水定容至1000ml)中添加葡萄糖30g,瓊脂3.0g。種子培養(yǎng)基配方每升馬鈴薯汁(制法同上)中添加蔗糖30g。發(fā)酵培養(yǎng)基配方同種子培養(yǎng)基。
      B.發(fā)酵工藝斜面培養(yǎng)按上述斜面培養(yǎng)基配方配制培養(yǎng)基,分裝試管,121℃滅菌30min后制斜面。將保存的紅樹植物內生真菌一矮棒曲霉CCTCC NOM206063菌種轉接至斜面培養(yǎng)基上,28℃下培養(yǎng)5d。搖瓶培養(yǎng)按上述種子培養(yǎng)基配方配制培養(yǎng)基,分裝錐型瓶(100ml/瓶),滅菌(121℃,30min)后將上述培養(yǎng)的斜面菌種接入,28℃下,220r/min搖瓶培養(yǎng)3d。種子罐培養(yǎng)按上述種子培養(yǎng)基配方配制培養(yǎng)基,20L種子罐培養(yǎng)基裝量為12L,121℃滅菌30min,冷卻后將上述培養(yǎng)的搖瓶種子按接種量5%接入種子罐中,在溫度25℃、攪拌轉速220r/min和通氣量0.5vvm的條件下培養(yǎng)3d。發(fā)酵罐培養(yǎng)按上述發(fā)酵培養(yǎng)基配方配制培養(yǎng)基,200L發(fā)酵罐培養(yǎng)基裝量為120L,121℃滅菌30min,待冷卻至25℃后將上述種子罐已培養(yǎng)好的種子按接種量5%接入罐中,在溫度25℃、攪拌轉速220r/min和通氣量0.5vvm的條件下培養(yǎng)3d。
      C.克列維醇的提取發(fā)酵結束后,發(fā)酵液過濾除菌體,濾液減壓濃縮至原液體積的20%后用乙酸乙酯萃取5次,收集有機相并減壓濃縮成浸膏。
      D.克列維醇的精制浸膏用少量的甲醇溶解后加入適量硅膠拌樣,上硅膠柱進行分離,以石油醚-乙酸乙酯=20∶1(v/v)為洗脫劑洗脫,收集洗脫液并減壓濃縮至干,得微黃色晶體,加適量的甲醇溶解,于室溫下重結晶,同法再重結晶2次。
      實施例3A.培養(yǎng)基配方斜面培養(yǎng)基配方每升馬鈴薯汁(馬鈴薯去皮切成小塊,取150g放入1L 20%海水中,煮30min,過濾,濾液用20%海水(海水與自來水按體積比混合)定容至1000ml)中添加葡萄糖15g,瓊脂1.5g。種子培養(yǎng)基配方每升馬鈴薯汁(制法同上)中添加葡萄糖15g。發(fā)酵培養(yǎng)基配方同種子培養(yǎng)基。
      B.發(fā)酵工藝斜面培養(yǎng)按上述斜面培養(yǎng)基配方配制培養(yǎng)基,分裝試管,121℃滅菌30min后制斜面。將保存的紅樹植物內生真菌一矮棒曲霉CCTCC NOM206063菌種轉接至斜面培養(yǎng)基上,32℃下培養(yǎng)5d。搖瓶培養(yǎng)按上述種子培養(yǎng)基配方配制培養(yǎng)基,分裝500錐型瓶(120ml/瓶),滅菌(121℃,30min)后將上述培養(yǎng)的斜面菌種接入,32℃下,180r/min搖瓶培養(yǎng)5d。種子罐培養(yǎng)按上述種子培養(yǎng)基配方配制培養(yǎng)基,50L種子罐培養(yǎng)基裝量為30L,121℃滅菌30min,冷卻后將上述培養(yǎng)的搖瓶種子按接種量5%接入種子罐中,在溫度32℃、攪拌轉速180r/min和通氣量1.2vvm的條件下培養(yǎng)5d。發(fā)酵罐培養(yǎng)按上述發(fā)酵培養(yǎng)基配方配制培養(yǎng)基,500L發(fā)酵罐培養(yǎng)基裝量為120L,121℃滅菌30min,待冷卻至32℃后將上述種子罐已培養(yǎng)好的種子按接種量10%接入罐中,在溫度32℃、攪拌轉速180r/min和通氣量1.2vvm的條件下培養(yǎng)5d。
      C.克列維醇的提取發(fā)酵結束后,發(fā)酵液過濾除菌體,濾液減壓濃縮至原液體積的35%后用乙酸乙酯萃取3次,收集有機相并減壓濃縮成浸膏。
      D.克列維醇的精制浸膏用少量的甲醇溶解后加入適量硅膠拌樣,上硅膠柱進行分離,以石油醚-乙酸乙酯=10∶1(v/v)為洗脫劑洗脫,收集洗脫液并減壓濃縮至干,得微黃色晶體,加適量的丙酮溶解,于室溫下重結晶,同法再重結晶3次。
      實施例4采用魯米諾化學發(fā)光法測定克列維醇對H2O2的清除能力。
      在96孔板孔內依次分別加入pH7.4的PBS緩沖液90μl,不同濃度(5%DMSO配制)的待測樣品50μL(以5%DMSO作空白對照),30mmol/L的H2O220μl,25℃放置5min,冰浴3min,隨后加入2.5×10-5mol/L Luminol 40μL啟動化學發(fā)光反應,記錄2min內發(fā)光強度的峰值(CL)。按下式計算抑制率發(fā)光抑制率(%)=[(空白對照CL-樣品CL)/空白對照CL]×100%用發(fā)光抑制率大小來衡量樣品對H2O2清除能力。
      測定結果(參見圖1)表明,克列維醇清除H2O2的IC50(抑制發(fā)光50%時所需的清除劑濃度)為6.25μg/ml,顯示該化合物對H2O2具有較強的清除能力。
      實施例5采用DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)法測定克列維醇清除有機自由基能力。
      在96孔板孔內依次分別加入不同濃度的待測樣品溶液(甲醇配制)或甲醇(空白)50μL,50μmol/L的DPPH(甲醇配制)150μl,25℃下靜置20min后用分光光度計測定吸光度(OD517)。按下式汁算樣品對DPPH自由基的清除率清除率=1-[(A-A0)/(B-B0)]×100%式中A0,A為加樣反應前后的吸光度,B0,B為空白孔反應前后的吸光度。
      測定結果表明,當克列維醇的濃度為6.25μg/ml、12.5μg/ml、25μg/ml時,對DPPH自由基的清除率分別可達到44.65%、89.82%、93.33%。
      權利要求
      1.克列維醇的制備方法,所述的克列維醇來源于紅樹林內生真菌次級代謝產物,紅樹林內生真菌為矮棒曲霉BYY-1(Aspergillus clavatonanicus BYY-1),已于2006年7月3日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心,保藏號為CCTCC NOM206063,所述的克列維醇為2,4-Dihydroxy-3,5-dimethylacetophenone,其化學結構式如下 其特征在于包括以下步驟1)矮棒曲霉BYY-1(Aspergillus clavatonanicus BYY-1)的種子培養(yǎng)A.配制斜面培養(yǎng)基馬鈴薯去皮切塊,放入海水中,煮后過濾,濾液用海水定容,得馬鈴薯汁,然后添加葡萄糖或蔗糖及瓊脂,分裝試管,滅菌后制成斜面培養(yǎng)基,將矮棒曲霉BYY-1轉接至斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng);B.配制種子液在馬鈴薯汁中添加葡萄糖或蔗糖,分裝后滅菌,得種子培養(yǎng)基,將培養(yǎng)的斜面菌種接入到分裝后的種子培養(yǎng)基中,搖瓶培養(yǎng),得種子液;C.種子罐種子培養(yǎng)先配制種子培養(yǎng)基,將種子培養(yǎng)基裝入種子罐,將培養(yǎng)的種子液接入種子罐中,培養(yǎng)后得培養(yǎng)后的種子液;2)克列維醇的發(fā)酵配制發(fā)酵培養(yǎng)基,將發(fā)酵培養(yǎng)基裝入發(fā)酵罐,將培養(yǎng)后的種子液接入發(fā)酵罐中,發(fā)酵后得發(fā)酵液;3)克列維醇的提取將發(fā)酵液過濾除菌體,濾液減壓濃縮后用有機溶劑萃取,收集有機相并減壓濃縮成浸膏;4)克列維醇的精制浸膏用甲醇溶解得克列維醇甲醇溶液,在克列維醇甲醇溶液中加入硅膠拌樣,上硅膠柱進行分離,以石油醚/乙酸乙酯為洗脫劑梯度洗脫,收集當石油醚/乙酸乙酯的體積比例為50~3∶1時的洗脫液,合并洗脫液并減壓濃縮至干,得微黃色晶體,加溶劑溶解后重結晶至少2次,得目標產物,即克列維醇,石油醚/乙酸乙酯=100/0到0/100。
      2.如權利要求1所述的克列維醇的制備方法,其特征在于在步驟1)中,配制斜面培養(yǎng)基的馬鈴薯去皮切成小塊,取150~300g放入1L 20%~100%海水中,煮后過濾,濾液用20%~100%海水定容至1000ml,得馬鈴薯汁。
      3.如權利要求1所述的克列維醇的制備方法,其特征在于在步驟1)中,添加葡萄糖或蔗糖的量為10~30g,瓊脂1.5~3.0g,分裝試管,121℃滅菌30min后制成斜面培養(yǎng)基,將矮棒曲霉BYY-1轉接至斜面培養(yǎng)基上后25~32℃下培養(yǎng)3~7d。
      4.如權利要求1所述的克列維醇的制備方法,其特征在于在步驟1)中,配制種子液時,在每升馬鈴薯汁中添加葡萄糖或蔗糖10~30g,分裝后121℃滅菌30min,得種子培養(yǎng)基,將培養(yǎng)的斜面菌種接入到分裝后的種子培養(yǎng)基中,25~32℃下,120~250r/min搖瓶培養(yǎng)2~5d,得種子液。
      5.如權利要求1所述的克列維醇的制備方法,其特征在于在步驟1)中,種子罐種子培養(yǎng)時,將種子培養(yǎng)基裝入種子罐的裝罐量為種子罐容積的60%~70%,將培養(yǎng)的種子液按接種量2%~10%接入種子罐中,在溫度25~32℃、攪拌轉速120~220r/min和通氣量0.3~1.2vvm的條件下培養(yǎng)2~4d,得培養(yǎng)后的種子液。
      6.如權利要求1所述的克列維醇的制備方法,其特征在于在步驟2)中,配制發(fā)酵培養(yǎng)基時,將發(fā)酵培養(yǎng)基裝入發(fā)酵罐的裝罐量為發(fā)酵罐容積的60%~70%,將培養(yǎng)后的種子液按接種量5%~10%接入發(fā)酵罐中,在溫度25~32℃、攪拌轉速120~200 r/min和通氣量0.3~1.5vvm的條件下發(fā)酵4~7d,得發(fā)酵液。
      7.如權利要求1所述的克列維醇的制備方法,其特征在于在步驟3)中,將發(fā)酵液過濾除菌體,濾液減壓濃縮至發(fā)酵液體積的35%~20%后用有機溶劑萃取至少2次,收集有機相并減壓濃縮成浸膏。
      8.如權利要求1所述的克列維醇的制備方法,其特征在于在步驟3)中,有機溶劑選自乙酸乙酯、氯仿、四氯化碳、甲苯中的一種。
      9.如權利要求1所述的克列維醇的制備方法,其特征在于在步驟4)中,在克列維醇甲醇溶液中加入質量為浸膏5~10倍的硅膠拌樣,收集當石油醚/乙酸乙酯的體積比例為(50~3)/1時的洗脫液,溶劑選自甲醇、乙酸乙酯和丙酮中的一種。
      10.如權利要求1所述的克列維醇在制備抗氧化劑中的應用。
      全文摘要
      克列維醇在制備抗氧化劑的應用,涉及一種克列維醇。提供一種來源于紅樹林內生真菌次級代謝產物克列維醇的制備方法及其在制備抗氧化劑中的應用。制備方法為矮棒曲霉BYY-1種子培養(yǎng);液體深層發(fā)酵;發(fā)酵液過濾除菌體;濾液減壓濃縮后用有機溶劑多次萃取,收集有機相并減壓濃縮獲得粗提物;粗提物經硅膠柱色譜及重結晶精制后制得克列維醇。經藥理實驗證實該化合物具有顯著的抗氧化作用,可用于制備抗氧化劑,并應用于醫(yī)藥品、化妝品及食品的制備中。由于本發(fā)明所述的來源于紅樹林內生真菌次級代謝產物克列維醇不僅可通過發(fā)酵制得,無原材料之憂,而且提取精制方法簡單,適合規(guī)?;a。
      文檔編號A61P39/06GK101070551SQ200710008929
      公開日2007年11月14日 申請日期2007年4月29日 優(yōu)先權日2007年4月29日
      發(fā)明者鄭忠輝, 黃珊珊, 沈月毛, 黃耀堅, 宋思揚, 杜希萍 申請人:廈門大學
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