專利名稱：一種鬼臼毒素提取分離新工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種鬼臼毒素提取分離新工藝。
背景技術(shù)：
鬼臼毒素是從鬼臼類植物中分離得到的一種具有抗癌活性和殺蟲活性的
物質(zhì)，廣泛用于惡性腫瘤、皮膚增生性疾病的治療和植物源殺蟲劑的研制。 國(guó)外研究人員曾從美洲的盾葉鬼臼、印度的足葉草中提取分離鬼臼毒素。在 中國(guó)，桃兒七屬植物桃兒七、山荷葉屬植物窩兒七和八角蓮屬植物八角蓮是 常用的提取鬼臼毒素的植物資源。秦嶺太白山區(qū)的桃兒七和窩兒七植物資源 屬于名貴的太白七藥，由于其中鬼臼毒素及其它木脂素類成分含量較高，作 為藥用和殺蟲活性植物資源己引起普遍重視。
鬼臼毒素現(xiàn)行的提取分離工藝有C02超臨界萃取法、甲醇回流-水-氯仿純 化法和溶劑結(jié)晶—層析法等。其中C02超臨界萃取法選擇性好，無(wú)有機(jī)溶劑殘
留，工藝簡(jiǎn)單，產(chǎn)品質(zhì)量高，但其設(shè)備昂貴， 一次性投資大，成本高且規(guī)模 較小， 一般科研及生產(chǎn)單位沒(méi)有設(shè)備。甲醇回流-水-氯仿處理工藝中，用有 機(jī)溶劑氯仿進(jìn)行捏溶純化，氯仿劇毒且揮發(fā)性大，對(duì)操作人員危害大，溶劑 回收效率低，而且申請(qǐng)人通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，此工藝中以氯仿作為溶劑進(jìn)行甲醇 浸膏的捏溶時(shí)，氯仿對(duì)鬼臼毒素和主要雜質(zhì)黃酮的溶解度都較大，溶液顏色
深且不透明，殘留物粘度大，抽濾過(guò)程很難進(jìn)行；靜置時(shí)由于氯仿比重大， 溶液中懸浮的雜質(zhì)也很難沉淀析出。鬼臼毒素的溶劑結(jié)晶一層析法所得產(chǎn)品 純度高、質(zhì)量好，但耗時(shí)長(zhǎng)，生產(chǎn)效率低，加之中草藥成分的復(fù)雜性，使吸 附劑再生困難，再生成本高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明解決的技術(shù)問(wèn)題提供一種鬼臼毒素提取分離新工藝，不但提取 方法簡(jiǎn)單、安全、收率高，而且提取的鬼臼毒素純度高、質(zhì)量好，特別適合 工業(yè)化批量生產(chǎn)。
本發(fā)明的設(shè)計(jì)思路
1、 采用超聲輔助提取與傳統(tǒng)提取技術(shù)相結(jié)合，克服純粹傳統(tǒng)提取法中有 效成分提取不完全，提取效率低的問(wèn)題，使鬼臼類植物資源得到最大效益的 開(kāi)發(fā)利用。
2、 以醇一苯為溶劑分步提取，首先以醇為溶劑采用超聲輔助提取使植物
細(xì)胞中的鬼臼毒素盡可能完全提出，獲得鬼臼毒素的醇浸膏，再以苯為溶劑 回流提取浸膏中的鬼臼毒素，由于苯對(duì)浸膏中鬼臼毒素良好的選擇性，所以 苯為溶劑可以比較完全的提取出浸膏中的鬼臼毒素而使大量的黃酮等其它成 分留于殘余浸膏中，然后對(duì)苯提取液經(jīng)分步結(jié)晶和重結(jié)晶即可得到高純度鬼 臼毒素。
3、 采用晶體快速升溫脫溶劑反應(yīng)除去鬼臼毒素晶體中化學(xué)健合的有毒有 機(jī)溶劑殘留，得到不含結(jié)晶溶劑的鬼臼毒素產(chǎn)品。
本發(fā)明的技術(shù)解決方案
① 首先以醇為溶劑回流提取鬼臼類植物細(xì)胞中的鬼臼毒素，得鬼臼毒素 醇浸膏；
② 然后以苯為溶劑對(duì)鬼臼毒素醇浸膏進(jìn)行回流提取，回流液減壓濃縮后 放置過(guò)夜，析出黃色粉末狀晶體，傾出母液并繼續(xù)放置，得淡黃色針狀晶體；
③ 采用苯-乙醇對(duì)淡黃色針狀晶體進(jìn)行重結(jié)晶，得無(wú)色針狀晶體鬼臼毒素 -苯的溶劑加合物；
④ 將鬼臼毒素-苯的溶劑加合物^熱分解，發(fā)生脫溶劑反應(yīng)生成白色粉末 鬼臼毒素。
本發(fā)明的優(yōu)選技術(shù)解決方案
① 先將鬼臼類植物原料機(jī)械粉碎后加入溶劑乙醇至浸透原料，將浸透原 料超聲照射8-15分鐘，然后用乙醇回流提取三次，每次用相當(dāng)于植物原料4-6 倍量的乙醇，提取時(shí)間分別為2h、 1.5h、 lh，提取液減壓濃縮，回收溶劑后 得紅棕色鬼臼毒素醇浸膏；
② 以相當(dāng)于植物原料4-6倍量的苯為溶劑分二次對(duì)鬼臼毒素醇浸膏進(jìn)行 回流提取，每次提取lh，回流液減壓濃縮至約1/8體積后放置過(guò)夜，析出黃 色粉末狀晶體，傾出母液并繼續(xù)放置，使母液中析出淡黃色針狀晶體；_
③ 用苯與乙醇體積比為1: 1的苯-乙醇混合溶劑對(duì)淡黃色針狀晶體重結(jié)
晶1-2次，得無(wú)色針狀晶體鬼臼毒素-苯的溶劑加合物；
④將鬼臼毒素-苯的溶劑加合物加熱至為165t: — 175'C分解，發(fā)生脫溶劑 反應(yīng)生成白色粉末鬼臼毒素。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比所具有的優(yōu)點(diǎn)和效果
1、 采用超聲輔助提取法，在提取前的預(yù)處理過(guò)程中引入超聲波，由于超 聲波對(duì)植物原料的特殊作用方式一超聲空化等特性，使物質(zhì)內(nèi)部微氣核在超 聲場(chǎng)中振動(dòng)、生長(zhǎng)和破裂，從而強(qiáng)化了提取過(guò)程，與傳統(tǒng)提取法相比方法簡(jiǎn) 單、安全、收率高。
2、 以醇一苯為溶劑分步提取，不僅使植物細(xì)胞中的鬼臼毒素盡可能完全 提出，而且二次提取中比較完全的提取出浸膏中的鬼臼毒素而使大量的黃酮 等其它成分留于殘余浸膏中，'提取的鬼臼毒素純度較高。
3、 采用快速升溫脫溶劑反應(yīng)除去鬼臼毒素中的有毒的有機(jī)溶劑殘留，保 證了鬼臼毒素的純度和質(zhì)量，特別適合工業(yè)化批量生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式
① 將鬼臼類植物原料經(jīng)粉碎機(jī)機(jī)械粉碎后，置于容器中并加入溶劑乙醇 至浸透原料，將浸透后的原料置于大型超聲清洗儀中超聲處理8-15分鐘，然
后將超聲處理過(guò)的原料置于工業(yè)提取罐中回流提取三次，每次用相當(dāng)于植物 原料4-6倍量乙醇，提取時(shí)間分別為2h、 1.5h、 lh。提取液于真空濃縮鍋中 減壓濃縮，回收溶劑后得紅棕色鬼臼毒素粘稠醇浸膏。
② 將紅棕色鬼臼毒素粘稠醇浸膏趁熱傾出于玻璃反應(yīng)釜中，用相當(dāng)于植 物原料4-6倍量的苯為溶劑分兩次進(jìn)行回流提取，每次提取lh，回流液于旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中減壓濃縮至約1/8體積，傾出于合適容器中放置過(guò)夜，析出黃色 粉末狀晶體，傾出母液并繼續(xù)放置至母液中析出淡黃色針狀晶體。
③ 對(duì)淡黃色針狀晶體用苯與乙醇體積比為1: 1的苯-乙醇混合溶劑重結(jié) 晶1-2次，得無(wú)色針狀晶體鬼臼毒素-苯的溶劑加合物。
④ 將鬼臼毒素-苯的溶劑加合物以薄層形式平鋪于不銹鋼盤中，置于溫度 165 °C — 175 °C左右的烘箱中分解，發(fā)生脫溶劑反應(yīng)生成白色粉末鬼臼毒素。
權(quán)利要求
1、一種鬼臼毒素提取分離新工藝，其特征是①首先以醇為溶劑回流提取鬼臼類植物細(xì)胞中的鬼臼毒素，得鬼臼毒素醇浸膏；②然后以苯為溶劑對(duì)鬼臼毒素醇浸膏進(jìn)行回流提取，回流液減壓濃縮后放置過(guò)夜，析出黃色粉末狀晶體，傾出母液并繼續(xù)放置，得淡黃色針狀晶體；③采用苯-乙醇對(duì)淡黃色針狀晶體進(jìn)行重結(jié)晶，得無(wú)色針狀晶體鬼臼毒素-苯的溶劑加合物；④將鬼臼毒素-苯的溶劑加合物加熱分解，發(fā)生脫溶劑反應(yīng)生成白色粉末鬼臼毒素。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種鬼臼毒素提取分離新工藝，其特征是① 先將鬼臼類植物原料機(jī)械粉碎后加入溶劑乙醇至浸透原料，將浸透后 的原料超聲照射8-15分鐘，然后用乙醇回流提取三次，每次用相當(dāng)于植物原' 料4-6倍量的乙醇，提取時(shí)間分別為2h、 1.5h、 lh，提取液減壓濃縮，回收 溶劑后得紅棕色鬼臼毒素醇浸膏；② 以相當(dāng)于植物原料4-6倍量的苯為溶劑分二次對(duì)鬼臼毒素醇浸膏進(jìn)行 回流提取，每次提取lh，回流液減壓濃縮至約1/8體積后放置過(guò)夜，析出黃 色粉末狀晶體，傾出母液并繼續(xù)放置，使母液中析出淡黃色針狀晶體；③ 用苯與乙醇體積比為1: 1的苯-乙醇混合溶劑對(duì)淡黃色針狀晶體重結(jié) 晶1-2次，得無(wú)色針狀晶體鬼臼毒,-苯的溶劑加合物；④ 將鬼臼毒素-苯的溶劑加合物加熱至為165t: — 175'C分解，發(fā)生脫溶劑 反應(yīng)生成白色粉末鬼臼毒素。
全文摘要
一種鬼臼毒素提取分離新工藝。第一步，首先以醇為溶劑回流提取鬼臼毒素植物細(xì)胞中的鬼臼毒素，得鬼臼毒素醇浸膏；第二步，然后以苯為溶劑對(duì)鬼臼毒素醇浸膏進(jìn)行回流提取，回流液減壓濃縮后放置過(guò)夜，析出黃色粉末狀晶體，傾出母液并繼續(xù)放置，得淡黃色針狀晶體；第三步，采用苯-乙醇對(duì)淡黃色針狀晶體進(jìn)行重結(jié)晶，得無(wú)色針狀晶體鬼臼毒素-苯的溶劑加合物；第四步，將鬼臼毒素-苯的溶劑加合物加熱分解，發(fā)生脫溶劑反應(yīng)生成白色粉末鬼臼毒素。本發(fā)明不但提取方法簡(jiǎn)單、安全、收率高，而且提取的鬼臼毒素純度高、質(zhì)量好，特別適合工業(yè)化批量生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61K36/185GK101108852SQ20071001847
公開(kāi)日2008年1月23日 申請(qǐng)日期2007年7月28日 優(yōu)先權(quán)日2007年7月28日
發(fā)明者王曉玲 申請(qǐng)人:王曉玲