專利名稱：兩親性聚合物載藥納米粒子的制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及的一種納米技術領域的制備方法，具體是一種兩親性聚合物載藥納米粒子的制備方法。
背景技術：
納米粒子獨特的結構，使其具有許多特殊的性能，在生物醫(yī)藥、分離工程、工業(yè)催化及分子光電器件等領域有很好的應用潛能。作為藥物載體的納米粒子能夠穿過組織間隙、毛細血管，通過血腦屏障及組織內(nèi)皮細胞，將藥物在細胞或亞細胞的水平上釋放。
帶有PEG親水性鏈的兩親性嵌段或接枝共聚物自組裝納米粒子，作為疏水性藥物及生物大分子藥物的納米載體，具有制備工藝簡單、穩(wěn)定性好、載藥量大及藥物包封率高、毒副作用小、能夠有效躲避網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)捕捉等優(yōu)點。而且，這種兩親性聚合物大分子自組裝納米膠束以其所特有的柔性及較小的尺寸，為有效克服皮膚、粘膜、細胞膜等生理屏障提供了可行性。這種柔性納米藥物載體與細胞穿透蛋白的組合應用，為特定組織或細胞內(nèi)的藥物靶向性釋放的實現(xiàn)提供了很好的前景。因此，開展聚合物自組裝納米膠束型藥物載體材料及納米藥物制劑的研究是十分有意義的。對于這類藥物載體的研究，近年來引起了研究者的廣泛關注。
經(jīng)對現(xiàn)有技術文獻的檢索發(fā)現(xiàn)，Journal of Controlled Release(《控制釋放雜志》)，83期(2002年)273-286頁名稱是Paclitaxel-loaded PLGA nanoparticlespreparation，physicochemical characterization and in vitro anti-tumoralactivity.(“負載雷帕霉素的PLGA納米粒子制備，物理化學特性及其體外抗腫瘤活性”)公開了用界面沉積的方法制備了負載疏水性藥物雷帕霉素的PLGA納米粒子，并考察了不同的實驗參數(shù)對雷帕霉素包封率的影響。實驗結果表明，納米粒子對雷帕霉素的包封率受有機相制備方法及有機相/水相比例的影響最大。載藥納米粒子的體外釋放實驗表明，雷帕霉素從納米粒子中呈兩階段釋放起初的24h突釋后，呈現(xiàn)較慢的持續(xù)釋放。但是用這種方法制備的納米粒子載藥量及包封率不高，載藥納米粒子的藥物突釋量達到了70％以上。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術之不足，提供一種兩親性聚合物載藥納米粒子的制備方法，從而提高納米粒子的載藥量及包封率，控制疏水性藥物的突釋現(xiàn)象。
本發(fā)明是通過以下技術方案實現(xiàn)的，本發(fā)明包括如下步驟a將兩親性超支化聚醚和疏水性藥物分別溶解于有機溶劑中；b將含有超支化聚醚的溶液先滴加到大約1000倍的去離子水中，磁力攪拌0.5小時～3小時，再將含有藥物的溶液滴加入體系中，室溫下磁力攪拌1小時～4小時；c蒸去有機溶劑，冷凍干燥，得到兩親性聚合物載藥納米粒子。
所述的疏水性藥物，選自紫衫醇、普洛布考、雷帕霉素等抑制血管再狹窄的藥物。
所述的有機溶劑，選自無水乙醇、二氯甲烷、氯仿、丙酮、甲醇、N，N-二甲基甲酰胺的任一種。
步驟b中，所述的兩親性超支化聚醚溶液及藥物溶液的向水相中滴加的速率為10s/滴～15s/滴。
本發(fā)明采用乳化-溶劑蒸發(fā)法，即將聚合物和藥物的有機溶劑滴加到水介質中，形成微乳，蒸去有機溶劑并冷凍干燥后即得納米載藥粒子。
兩親性超支化聚醚用于負載疏水性藥物納米粒子，藥物負載于納米粒子疏水性內(nèi)核部分。這種兩親性超支化聚醚能夠在水中形成膠束或者納米粒子，其中，相對疏水性的聚3-乙基-3-丁氧雜環(huán)甲醇PEOX聚集成疏水性的核，聚乙二醇形成親水性的殼。這種聚乙二醇具有使納米粒子穩(wěn)定、有效躲避內(nèi)皮網(wǎng)狀系統(tǒng)對藥物的捕捉作用等優(yōu)點，因此，含有PEG親水性鏈的聚合物是一類優(yōu)良的藥物載體材料。
這種納米粒子呈均勻的球形，粒徑在10nm～100nm可控，且制備方法簡單易行，重現(xiàn)性好。而且，對疏水性藥物有較高的載藥量及包封率，可用于各類不同形式的給藥。納米粒子的載藥量是指納米粒子中藥物占納米粒子及藥物總重的比例；藥物的包封率是指納米粒子所包封的藥物占加入藥物總量的比例。利用本發(fā)明所制備的納米粒子實現(xiàn)了較高的載藥量及包封率。載藥量為20％～40％，包封率為65％～90％。
圖1本發(fā)明兩親性超支化聚醚空白納米粒子粒徑分布圖。
圖2本發(fā)明中兩親性超支化聚醚載藥納米粒子粒徑分布圖。
圖3本發(fā)明中兩親性超支化聚醚載藥納米粒子體外釋放曲線。
具體實施例方式
下面對本發(fā)明的實施例作詳細說明本實施例在以本發(fā)明技術方案為前提下進行實施，給出了詳細的實施方式和過程，但本發(fā)明的保護范圍不限于下述的實施例。
實施例1本實施例1是在以下實施條件和技術要求條件下實施的首先，不載藥的空白兩親性超支化聚醚納米粒子的制備a稱取500mg兩親性超支化聚醚溶解于10ml的二氯甲烷中。
b在磁力攪拌0.5h，以10s/滴的速率逐滴加入到1000ml蒸餾水中，繼續(xù)攪拌2h。
c在40℃下，用旋轉蒸發(fā)儀緩慢蒸去有機溶劑二氯甲烷，待無明顯的二氯甲烷蒸出后，升高溫度，繼續(xù)蒸去大部分水。將樣品冷凍干燥，即得不載藥的空白兩親性超支化聚醚納米粒子。參見圖1，不載藥的空白納米粒子的粒徑為25nm，粒度分布為0.201，具有較小的粒徑及粒度分布。
以下是，相同條件下兩親性聚合物載藥納米粒子的制備其他步驟同上。將2mg普洛布考溶解于10ml的二氯甲烷中，以10s/滴的速率滴加到a步驟的反應體系中，繼續(xù)攪拌2h。
步驟c，在40℃下，用旋轉蒸發(fā)儀緩慢蒸去有機溶劑二氯甲烷，待無明顯的有機溶劑蒸出后，升高溫度，繼續(xù)蒸去大部分水。將樣品冷凍干燥，即得載藥的兩親性超支化聚醚納米粒子。參見圖2，測得兩親性超支化聚醚載藥的納米粒子的粒徑為46nm，粒度分布為0.285。納米粒子的載藥量為35.34％，對藥物的包封率為89.05％。所以具有較高的載藥量及包封率。
稱取冷凍干燥后的載藥納米粒子5mg，置于盛有5ml磷酸鹽緩沖溶液(PBS，pH7.4)的試管中。在37℃恒溫下磁力攪拌，每隔一定時間將試管中的懸浮液在室溫下超速離心30min，取出3ml上層清液，同時補充3ml新鮮溶液。在藥物最大吸收波長處測定吸光度，代入標準曲線方程，計算各時間點的藥物濃度，繪制出藥物體外累積釋放曲線。參見圖3所示，結果表明本發(fā)明的載藥納米粒子藥物突釋量小，并對藥物有很好的控釋作用。
本實施例采用透射電子顯微鏡法(TEM)測定納米粒子的粒徑，采用動態(tài)光散射法(DLS Malvern Instruments，U.K.)測定納米粒子的粒度分布。凍干樣品用高效液相色譜測定其載藥量及包封率。下述各實施例同。
實施例2本實施例2是在以下實施條件和技術要求條件下實施的首先，不載藥的空白兩親性超支化聚醚納米粒子的制備a稱取5g兩親性超支化聚醚溶解于10ml的無水乙醇中。
b磁力攪拌3h，以15s/滴的速率逐滴加入到1000ml蒸餾水中，繼續(xù)攪拌3h。
c在40℃下，用旋轉蒸發(fā)儀緩慢蒸去有機溶劑無水乙醇，待無明顯的無水乙醇蒸出后，升高溫度，繼續(xù)蒸去大部分水。將樣品冷凍干燥，即得不載藥的空白兩親性超支化聚醚納米粒子。不載藥的空白納米粒子的粒徑為10nm，粒度分布為0.145。
以下是，相同條件下兩親性聚合物載藥納米粒子的制備其他步驟同上。將2mg雷帕霉素溶解于10ml的無水乙醇中，以15s/滴的速率滴加到a步的反應體系中，繼續(xù)攪拌3h。
步驟c，在40℃下，用旋轉蒸發(fā)儀緩慢蒸去有機溶劑，待無明顯的有機溶劑蒸出后，升高溫度，繼續(xù)蒸去大部分水。將樣品冷凍干燥，即得載藥的兩親性超支化聚醚納米粒子。測得兩親性超支化聚醚載藥的納米粒子的粒徑為48nm粒度分布為0.288。納米粒子的載藥量為33.22％，對藥物的包封率為87.71％。所以具有較高的載藥量及包封率。
實施例3本實施例3是在以下實施條件和技術要求條件下實施的首先，不載藥的空白兩親性超支化聚醚納米粒子的制備a稱取1.5g兩親性超支化聚醚溶解于10ml的丙酮中。
b磁力攪拌1.5h，以12s/滴的速率逐滴加入到1000ml蒸餾水中，繼續(xù)攪拌2h。
c在40℃下，用旋轉蒸發(fā)儀緩慢蒸去有機溶劑丙酮，待無明顯的丙酮蒸出后，升高溫度，繼續(xù)蒸去大部分水。將樣品冷凍干燥，即得不載藥的空白兩親性超支化聚醚納米粒子。不載藥的空白納米粒子的粒徑為35nm，粒度分布為0.243。
以下是，相同條件下兩親性聚合物載藥納米粒子的制備其他步驟同上。將2mg普洛布考溶解于10ml的丙酮中，以12s/滴的速率滴加到a步的反應體系中，繼續(xù)攪拌1h。
步驟c，在40℃下，用旋轉蒸發(fā)儀緩慢蒸去有機溶劑，待無明顯的有機溶劑蒸出后，升高溫度，繼續(xù)蒸去大部分水。將樣品冷凍干燥，即得載藥的兩親性超支化聚醚納米粒子。測得兩親性超支化聚醚載藥的納米粒子的粒徑為44nm粒度分布為0.289。納米粒子的載藥量為35.34％，對藥物的包封率為89.05％。具有較小的粒徑及粒度分布。具有較高的載藥量及包封率。
實施例4本實施例4是在以下實施條件和技術要求條件下實施的首先，不載藥的空白兩親性超支化聚醚納米粒子的制備a稱取2.5g兩親性超支化聚醚溶解于10ml的氯仿中。
b磁力攪拌2h，以13s/滴的速率逐滴加入到1000ml蒸餾水中，繼續(xù)攪拌4h。
c在40℃下，用旋轉蒸發(fā)儀緩慢蒸去有機溶劑氯仿，待無明顯的氯仿蒸出后，升高溫度，繼續(xù)蒸去大部分水。將樣品冷凍干燥，即得不載藥的空白兩親性超支化聚醚納米粒子。不載藥的空白納米粒子的粒徑為38nm，粒度分布為0.245。
以下是，相同條件下兩親性聚合物載藥納米粒子的制備其他步驟同上，將2mg自紫衫醇溶解于10ml的氯仿中，以13s/滴的速率滴加到a步的反應體系中，繼續(xù)攪拌4h。
步驟c，在40℃下，用旋轉蒸發(fā)儀緩慢蒸去有機溶劑，待無明顯的有機溶劑蒸出后，升高溫度，繼續(xù)蒸去大部分水。將樣品冷凍干燥，即得載藥的兩親性超支化聚醚納米粒子。測得兩親性超支化聚醚載藥的納米粒子的粒徑為44nm粒度分布為0.289。納米粒子的載藥量為28.39％，對藥物的包封率為87.1％。具有較高的載藥量及包封率。
權利要求
1.一種兩親性聚合物載藥納米粒子的制備方法，其特征在于，包括如下步驟a將兩親性超支化聚醚和疏水性藥物分別溶解于有機溶劑中；b將含有超支化聚醚的溶液先滴加到去離子水中，磁力攪拌0.5小時～3小時，再將含有藥物的溶液滴加入體系中，室溫下磁力攪拌1小時～4小時；c蒸去有機溶劑，冷凍干燥，得到兩親性聚合物載藥納米粒子。
2.如權利要求1所述的兩親性聚合物載藥納米粒子的制備方法，其特征是，所述的疏水性藥物，是指紫衫醇、普洛布考、雷帕霉素任一種。
3.如權利要求1所述的兩親性聚合物載藥納米粒子的制備方法，其特征是，所述的有機溶劑，是指無水乙醇、二氯甲烷、氯仿、丙酮、甲醇、N，N-二甲基甲酰胺的任一種。
4.如權利要求1所述的兩親性聚合物載藥納米粒子的制備方法，其特征是，步驟b中，所述兩親性超支化聚醚的溶液及藥物溶液的向水相中滴加的速率為10s/滴～15s/滴。
全文摘要
本發(fā)明涉及的是納米藥物制劑技術領域的兩親性聚合物載藥納米粒子的制備方法，包括如下步驟將兩親性超支化聚醚和疏水性藥物分別溶解于有機溶劑中；將含有超支化聚醚的溶液先滴加到大約1000倍的去離子水中，磁力攪拌0.5小時～3小時，再將含有藥物的溶液滴加入體系中，室溫下磁力攪拌1小時～4小時；蒸去有機溶劑，冷凍干燥，得到兩親性聚合物載藥納米粒子。本發(fā)明制備工藝簡單，所得納米粒子粒徑均勻，粒度分布較窄，對疏水性藥物有較高的載藥量和包封率。提高了納米粒子的載藥量及包封率，控制了疏水性藥物的突釋現(xiàn)象。
文檔編號A61P3/00GK101040848SQ20071003962
公開日2007年9月26日 申請日期2007年4月19日 優(yōu)先權日2007年4月19日
發(fā)明者萬錒俊, 寇玉霞, 鄭一寧 申請人:上海交通大學