專利名稱：：扶正化瘀植物藥中蟲草菌粉原料指紋圖譜質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬蟲草菌粉原料質(zhì)量控制方法領(lǐng)域，特別是涉及一種扶正化瘀植物藥中蟲草菌粉原料指紋圖譜質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
：冬蟲夏草為麥角菌科真菌冬蟲夏草菌寄生在蝙蝠蛾科昆蟲幼蟲上的子座及幼蟲尸體的復(fù)合體，是久享盛譽的名貴中藥。它分布于中國的青海、西藏、四川等地，存在于中國西北和西南部海拔3000-4000m山區(qū)的多草的土壤中。露在土壤表面部分為真菌的子實體，長3-6cm，色黑，形如刀刃。埋在土中的蟲體部分長2.5-4m，黃色至深棕色。因其形態(tài)隨季節(jié)發(fā)獨特變化，科季為蟲形夏季呈草狀，故在我國稱之為"冬蟲夏草"。冬蟲夏草早在《本草從新》中已有記載，《本草綱目拾遺》中記載尤詳。性味甘，平，歸肺、腎經(jīng)。補肺益腎，止血，化痰。用于久咳虛喘，勞嗽咯血，陽痿遺精，腰膝酸痛。近年來，國內(nèi)報道與蟲草有關(guān)的菌種達(dá)10個屬的30多種[17][18]。例如(l)冬蟲夏草頭孢菌(C印halosporiumsinensis)從青海產(chǎn)冬蟲夏草中分離得到，屬半知菌類，叢梗孢目，叢梗孢科，頭孢霉族，頭孢霉屑。(2)蝙蝠蛾擬青霉(Paecilomycesh印iali)從青海化隆縣產(chǎn)冬蟲夏草上分離得到，屬半知菌類，叢梗孢目，叢梗孢科，曲霉族，瓶梗青霉屬。(3)蝙蝠蛾被孢霉(Mortie;rellah印iali)從四川汶川產(chǎn)冬蟲夏草上分離得到，屬藻狀菌綱，毛霉目，被孢霉科，被孢霉屑。(4)中國擬青霉(Paecilomyeessinensis)從四川康定產(chǎn)冬蟲夏草上分離得到，屬半知菌類，叢梗孢目，叢梗孢科，被孢霉屑。(5)其它還有蟲草多毛孢(Hirsutellah印iti)、中國被毛孢(Hirsutellasinensis)、蝙蝠蛾柱霉(Scytalidiumh印iale)、中國彎頸霉(Tolypocladiumsinensis)、中國金孢霉(Chrysosporiumsinensis)、葡萄穗霉屬(Stachybotry)等本發(fā)明生產(chǎn)的蟲草菌粉即是蝙蝠蛾擬青霉(Paecilomycesh印iali)Cs-4菌株深層培養(yǎng)的發(fā)酵產(chǎn)物。本品為淺棕褐色的粉末；氣香，味微味。Cs-4菌株從青海化隆縣產(chǎn)冬蟲夏草上分離得到，屬半知菌類，叢梗孢目，叢梗孢科，曲霉族，瓶梗青霉屬。關(guān)于蟲草菌粉的的制備，中國醫(yī)學(xué)科院藥物研究所楊云鵬、岳德超等最早對青海蟲草分離的蝙蝠蛾擬青霉(Paecilomycesh印iali)Cs-4菌株及其深層培養(yǎng)其進(jìn)行了研究。中國中醫(yī)研究院中藥研究所，戴如琴等后來又對從云南天然蟲草中分離出來的蝙蝠蛾擬青霉新種((PaecilomyceshepialichenetDai.sp.nov)進(jìn)行了石開究。腺苷含量是評價冬蟲夏草內(nèi)在質(zhì)量的主要指標(biāo)，目前核苷類物質(zhì)的分析方法有HPLC法、薄層色譜法、高效毛細(xì)管電泳法等。夏文娟等用HPLC法分析了13個產(chǎn)地冬蟲夏草腺苷的含量，結(jié)果13個產(chǎn)地冬蟲夏草的腺苷含量為142.5396.6ug/g，其中藏草腺苷含量高于川草，在川草中，爐草腺苷含量高于滇草，灌草最低。Li等用高效毛細(xì)管電泳法測定天然和人工冬蟲夏草中核苷成分的含量，結(jié)果顯示人工蟲草的核苷含量明顯高于天然蟲草；新采集的天然蟲草中核苷類物質(zhì)含量極低，而采集日久者核苷成分含量較高，因此腺苷在天然冬蟲夏草質(zhì)量控制中的具有應(yīng)用價值。米莉莉等建立了對冬蟲夏草一次進(jìn)樣使核苷類成分得到理想分離的HPLC定量分析方法。關(guān)于蟲草屬真菌中核苷類化學(xué)成分的研究報道較多，主要集中在冬蟲夏草、蛹蟲草及其發(fā)酵菌絲體，至今已報道從冬蟲夏草及發(fā)酵菌絲體中分離鑒定有11個核苷類化合物[13]，而對冬蟲夏草無性型菌株的發(fā)酵液中核苷類成分的研究則較少。丁婷等[12]用HPLC法對冬蟲夏草及其無性型菌株發(fā)酵液中核苷類成分進(jìn)行了定量分析。結(jié)果表明，中國被毛孢RCEF0273發(fā)酵液中含有3種核苷標(biāo)樣，分別為腺苷、尿苷、鳥苷，其含量均高于對照品冬蟲夏草生藥。姜麗霞等[14]用HPLC對四種人工培養(yǎng)冬蟲夏草發(fā)酵菌絲體中主要核苷及核酸堿基進(jìn)行了測定，著重對其中的腺苷成分作了提取溶劑比較及回收率試驗。查閱國內(nèi)文獻(xiàn)，關(guān)于報道蟲草中核苷類成分的分析很多，但是關(guān)于蟲草指紋圖譜的研究卻很少。于超等用RAPD方法對康定蟲夏、人工蟲草及蟲草發(fā)酵菌絲體進(jìn)行指紋圖譜的研究，為不同蟲草的品質(zhì)和藥效差異提供了分子依據(jù)。陳暢等首次建立了蒙山九州蟲草的標(biāo)準(zhǔn)紅外光譜圖，并與冬蟲夏草的紅外光譜進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)兩者存在高度的相似性，為蒙山九州蟲草成為冬蟲夏草的代用品提供了初步的理論依據(jù)。但是扶正化瘀植物藥制劑中用高效液相色譜對蟲草進(jìn)行指紋圖譜的分析報道卻沒有見到。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種扶正化瘀植物藥制劑中蟲草進(jìn)行指紋圖譜質(zhì)量控制方法，該方法重復(fù)性好，能充分反映蟲草菌絲粉核苷類成分的基本特性。本發(fā)明的技術(shù)方案如下-一種扶正化瘀植物藥中蟲草菌粉原料指紋圖譜質(zhì)量控制方法，包括下列步驟(O提取蟲草菌絲粉稱取0.100g蟲草菌粉，加入25ml純凈水，超聲提取20-60min，提取液用0.23-0.45um濾膜過濾，進(jìn)樣。(2)梯度洗脫流動相用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，水和乙腈為流動相進(jìn)行洗脫流動相，色譜柱為Ace水相柱；流動相A相為水，B相為乙腈;梯度洗脫0—30min，0-7%B;流速0.8-1.2ml/min;檢測波長210-280nm;柱溫20-40°C;進(jìn)樣量5-10ul。梯度洗脫條件為<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>(3)標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的建立通過對十個批次的蟲草菌粉指紋圖譜的研究，典型指紋圖譜選擇法，確立符合本發(fā)明質(zhì)量控制需要的蟲草菌粉HPLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜(圖1)。對合適樣品的HPLC指紋圖譜中所有峰進(jìn)行比較，確定了5個共有峰，并按出峰時間先后次序進(jìn)行編號(圖l)。在共有峰里選取了3個特征峰，分別為2號峰尿苷，3號峰鳥苷和4號峰腺苷，所有特征峰均經(jīng)對照品對照定性和HPLC/MS鑒定。根據(jù)LC-MS-MS的鑒定結(jié)果，蟲草菌絲粉的高效液相色譜指紋圖譜表達(dá)了核苷類組分的分布特性。選取含量較高的腺苷作為指標(biāo)成分峰。從十批樣品的HPLC指紋圖譜中按照以下原則選取一批蟲草菌粉藥材的指紋圖譜作為對照指紋圖譜。結(jié)合藥效實驗情況，優(yōu)先考慮確定療效的蟲草菌絲粉的指紋圖譜。將指紋圖譜和定量測定結(jié)果進(jìn)行對照比較，優(yōu)先考慮含量在平均值附近的樣品的指紋圖譜。選取特征峰分離較好，峰的保留時間和峰高適宜、峰型(峰的形狀和峰高比例)較典型的指紋圖譜。優(yōu)先選取基線平穩(wěn)、信噪比好的指紋圖譜。(4)指紋圖譜的質(zhì)量控制A.樣品真?zhèn)蔚蔫b別以特征峰的相對保留值作為真?zhèn)舞b定指標(biāo)，根據(jù)公式計算十批藥材指紋圖譜中各特征峰的相對保留時間RRT，結(jié)合兩個實驗室的驗證結(jié)果，確定了各特征峰的相對保留時間和范圍(如表l所示)。表1蟲草菌絲粉HPLC指紋圖譜鑒別峰相對保留時間及范圍<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>根據(jù)實驗條件對待測樣品進(jìn)行測定，得出樣品的HPLC色譜圖，計算各特征峰的相對保留時間，并與所列對照指紋圖譜和相對保留時間表進(jìn)行比較。如有特征峰不存在，或相對保留時間(RRT)不能吻合，則可判別被測樣品不是蟲草菌絲粉。B.樣品質(zhì)量評價采用中藥計算機輔助相似度評價軟件，將樣品的HPLC指紋圖譜與對照指紋圖譜(或?qū)φ掌饭灿心Ｊ街讣y圖譜)進(jìn)，亍比較。以4個共有峰計算得到的相似度應(yīng)不得小于0.9。所述步驟2色譜柱為Ace水相柱(250*4.6mra,5ura，ACT);線性梯度洗脫0—30min，0-7%B;流速1.0ml/min;檢測波長261nm;柱溫30。C;進(jìn)樣量10ul。所述步驟4在指紋圖譜測定條件確定后，通過對至少三批樣品進(jìn)行測定，計算相關(guān)參數(shù)，并在此基礎(chǔ)上提出高效液相色譜系統(tǒng)的適用參數(shù)條件。腺苷對照品溶液(100pg/rnl)的色譜峰面積重現(xiàn)性(RSD)不高于3%，保留時間重現(xiàn)性(RSD)不高于2%;色譜柱柱效以腺苷計算不少于15,000塊理論塔板數(shù)。表2兩批蟲草菌絲粉的指紋圖譜數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>*RRT(相對保留時間)=特征峰的保留時間/指標(biāo)峰的保留時間*RPA(相對峰面積)=特征峰的峰面積/指標(biāo)峰的峰面積相對誤差=^^1><100%。本發(fā)明的另一技術(shù)方案如下-一種扶正化瘀植物藥中蟲草菌粉原料的制備方法，包括下列步驟6)在種子培養(yǎng)基上接種蝙蝠蛾擬青霉菌種，在28i:的有氧條件下培養(yǎng)2-5天；7)在種子培養(yǎng)基上接種蝙蝠蛾擬青霉菌種，在28'C的有氧條件下培養(yǎng)2-5天；8)重復(fù)步驟2)使能夠得到足夠量的菌種，以開始用發(fā)酵罐進(jìn)行大規(guī)模的蟲草發(fā)酵；9)在發(fā)酵罐中用發(fā)酵培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)速150-250rpm;在28。C溶解氧濃度:20-90下培養(yǎng)2-5天，pH6.2-6.8;10)除去培養(yǎng)基，菌絲體干燥，得到產(chǎn)物蟲草菌粉.所述步驟1種子培養(yǎng):取10mL—級種子到裝有100mL二級種子培養(yǎng)基的500mL三角瓶內(nèi)，轉(zhuǎn)速150rpfli，pH6.2-6.8;所述步驟1或2或3的種子培養(yǎng)基為葡萄糖2%、蛋白胨1%、硝酸銨0.5%、硫酸鎂0.05%、磷酸氫二鉀O.1%、硫酸亞鐵0.001%、氯化鈉O.1%、麩皮5%;所述步驟4發(fā)酵培養(yǎng)基為葡萄糖2%、蛋白胨1%、硝酸銨0.5%、硫酸鎂0.05%、磷酸氫二鉀O.1%、硫酸亞鐵0.001%、氯化鈉O.1%、5%蠶蛹粉5%;所述步驟4發(fā)酵培養(yǎng)基,5%麩皮，5%蠶蛹粉，水煮30分鐘，用4層紗布過濾取濾液。本發(fā)明的有益效果如下1、考察了供試品溶液的穩(wěn)定性，結(jié)果表明，4'C冰箱存放，24小時之內(nèi)，蟲草菌粉供試品溶液保持穩(wěn)定。同時考察公司貯藏的樣品在l年內(nèi)的穩(wěn)定性，發(fā)現(xiàn)相似度大于0.9。2、將指紋圖譜與藥材蟲草菌粉的制備方法結(jié)合起來，這樣保證了指紋圖譜的實施，并真正運用于蟲草菌粉的質(zhì)量控制。經(jīng)過對十批蟲草菌粉藥材的指紋圖譜相似度進(jìn)行計算，發(fā)現(xiàn)相似度在0.9-l.O之間。說明建立的蟲草菌粉指紋圖譜質(zhì)控方法，靈敏度高，重復(fù)性好，專屬性強，操作簡便，方法可靠，可以對蟲草菌粉質(zhì)量進(jìn)行科學(xué)，有效的評價，并證實能夠運用于實際生產(chǎn)中質(zhì)量控制，滿足鑒別和質(zhì)量控制的需求。3、通過將指紋圖譜運用于生產(chǎn)中的質(zhì)量控制，也有效地控制產(chǎn)品質(zhì)量，指導(dǎo)產(chǎn)品的生產(chǎn)過程，同時驗證了產(chǎn)品制備方法的穩(wěn)定，保證扶正化瘀植物藥原料質(zhì)量的穩(wěn)定，進(jìn)而保證了藥物的療效。圖1蟲草菌粉的標(biāo)準(zhǔn)HPLC指紋圖譜。圖2蟲草菌絲粉的指紋圖譜。具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定的范圍。實施例1指紋圖譜實驗方法1.試劑與藥材純凈水(水森活，可口可樂公司)；乙腈(色譜純，Tedia，美國)；腺苷(中國藥品生物制品鑒定所，供含量測定用，批號879—200202);尿苷(中國藥品生物制品鑒定所，供鑒別用，批號887—200202);鳥苷(購自新鄉(xiāng)拓新生化科技有限公司)；蟲草菌絲粉(本發(fā)明生產(chǎn))。2實驗儀器HP1100液相色譜儀(DAD二極管陣列檢測器,美國Agilent公司)；超聲波清洗儀(昆山市超聲儀器有限公司，KQ-50E);色譜柱恒溫箱(天津市恒奧科技發(fā)展有限公司，HT-130);HPLC濾膜(江蘇漢邦科技有限公司，0.45um)3蟲草菌絲粉的提取稱取約0.100g蟲草菌粉，加入25ml純凈水，超聲提取20min，提取液用0.45um濾膜過濾，進(jìn)樣。4.HPLC分析條件色譜柱為Ace水相柱(250*4.6咖，5ura，ACT);流動相A相為水，B相為乙腈；線性梯度洗脫0—30min，0-7%B;流速1.Oml/min;檢測波長261nm;柱溫3(TC;進(jìn)樣量10ul。5.實驗結(jié)果蟲草菌粉樣品特征峰的相對保留時間與相對峰面積見表2。實施例2取10mL—級種子到裝有100mL二級種子培養(yǎng)基的500mL三角瓶內(nèi)，轉(zhuǎn)速150rpm，pH6.2-6.8;在28。C的有氧條件下培養(yǎng)2-5天；使能夠得到足夠量的菌種，以開始用發(fā)酵罐進(jìn)行大規(guī)模的蟲草發(fā)酵;發(fā)酵罐中用發(fā)酵培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)速150-250rpm;在28。C溶解氧濃度:20-90下培養(yǎng)2-5天，pH6.2-6.8;除去培養(yǎng)基，菌絲體干燥，得到產(chǎn)物蟲草菌粉.種子培養(yǎng)基為葡萄糖2%、蛋白胨1%、硝酸銨0.5%、硫酸鎂0.05%、磷酸氫二鉀0.1%、硫酸亞鐵0.001%、氯化鈉O.1%、麩皮5%;發(fā)酵培養(yǎng)基為葡萄糖2%、蛋白胨1%、硝酸銨0.5%、硫酸鎂0.05%、磷酸氫二鉀0.1%、硫酸亞鐵0.001%、氯化鈉O.1%、5%蠶蛹粉5%;發(fā)酵培養(yǎng)基,5%麩皮，5%蠶蛹粉，水煮30分鐘，用4層紗布過濾取濾液。權(quán)利要求1.一種扶正化瘀植物藥中蟲草菌粉原料指紋圖譜質(zhì)量控制方法，包括下列步驟(1)提取蟲草菌絲粉稱取0.100g蟲草菌粉，加入25ml純凈水，超聲提取20-60min，提取液用0.23-0.45um濾膜過濾，進(jìn)樣；(2)梯度洗脫流動相用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，水和乙腈為流動相進(jìn)行洗脫流動相，色譜柱為Ace水相柱；流動相A相為水，B相為乙腈；梯度洗脫0-30min，100-93％A、0-7％B，速度0.8-1.2ml/min，檢測波長210-280nm，溫度20-40℃，樣量5-10ul；(3)標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的建立確立蟲草菌粉HPLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，比較樣品指紋圖譜中所有峰，確定4個共有峰，選取3個特征峰，分別為2號峰尿苷，3號峰鳥苷和4號峰腺苷，均經(jīng)對照品對照定性和HPLC/MS鑒定，選取含量較高的腺苷作為指標(biāo)成分峰。從十批樣品的HPLC指紋圖譜中按照以下原則選取一批蟲草菌粉藥材的指紋圖譜作為對照指紋圖譜，結(jié)合藥效實驗情況，優(yōu)先考慮確定療效的蟲草菌絲粉的指紋圖譜，將指紋圖譜和定量測定結(jié)果進(jìn)行對照比較，優(yōu)先考慮含量在平均值附近的樣品的指紋圖譜，選取特征峰分離較好，峰的保留時間和峰高適宜、峰型較典型的指紋圖譜，優(yōu)先選取基線平穩(wěn)、信噪比好的指紋圖譜；(4)指紋圖譜的質(zhì)量控制a.樣品真?zhèn)蔚蔫b別3個特征峰相對保留時間，2號峰尿苷0.44±0.03、3號峰鳥苷0.68±0.03、4號峰腺苷1.00；b.樣品質(zhì)量評價將樣品的HPLC指紋圖譜與對照指紋圖譜進(jìn)行比較，4個共有峰計算得到的相似度應(yīng)不得小于0.9。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的扶正化瘀植物藥中蟲草菌粉原料指紋圖譜質(zhì)量控制方法，其特征在于所述步驟2色譜柱為Ace水相柱250*4.6mm,5um，ACT;線性梯度洗脫流速l.Oml/min;檢測波長261nm;柱溫30。C;進(jìn)樣量10ul。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的扶正化瘀植物藥中蟲草菌粉原料指紋圖譜質(zhì)量控制方法，其特征在于所述步驟4在指紋圖譜測定條件確定后，通過對至少三批樣品進(jìn)行測定，計算相關(guān)參數(shù)，提出高效液相色譜系統(tǒng)的適用參數(shù)條件，腺苷對照品溶液(100嗎/ml)的色譜峰面積重現(xiàn)性(RSD)不高于3%，保留時間重現(xiàn)性(RSD)不高于2%;色譜柱柱效以腺苷計算不少于15，000塊理論塔板數(shù)。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的扶正化瘀植物藥中蟲草菌粉原料指紋圖譜質(zhì)量控制方法，其特征在于所述的扶正化瘀植物藥中蟲草菌粉原料制備，包括下列步驟-1)在種子培養(yǎng)基上接種蝙蝠蛾擬青霉菌種，在28'C的有氧條件下培養(yǎng)2-5天；2)在種子培養(yǎng)基上接種蝙蝠蛾擬青霉菌種，在28t:的有氧條件下培養(yǎng)2-5天；3)重復(fù)步驟2)使能夠得到足夠量的菌種，以開始用發(fā)酵罐進(jìn)行大規(guī)模的蟲草發(fā)酵；4)在發(fā)酵罐中用發(fā)酵培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)速150-250rpm;在28'C溶解氧濃度:20-90下培養(yǎng)2-5天，pH6.2-6.8;5)除去培養(yǎng)基，菌絲體干燥，得到產(chǎn)物蟲草菌粉。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種扶正化瘀植物藥中蟲草菌粉原料指紋圖譜質(zhì)量控制方法，其特征在于所述步驟1種子培養(yǎng):取10mL—級種子到裝有100mL二級種子培養(yǎng)基的500mL三角瓶內(nèi)，轉(zhuǎn)速150rpm，pH6.2-6.8。6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種扶正化瘀植物藥中蟲草菌粉原料指紋圖譜質(zhì)量控制方法，其特征在于所述步驟l種子培養(yǎng)基為葡萄糖2%、蛋白胨1%、硝酸銨0.5%、硫酸鎂0.05%、磷酸氫二鉀O.1%、硫酸亞鐵0.001%、氯化鈉O.1%、麩皮5%。7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種扶正化瘀植物藥中蟲草菌粉原料指紋圖譜質(zhì)量控制方法，其特征在于所述步驟4發(fā)酵培養(yǎng)基為葡萄糖2%、蛋白胨1%、硝酸銨0.5%、硫酸鎂0.05%、磷酸氫二鉀O.1%、硫酸亞鐵0.001%、氯化鈉O.1%、5%蠶蛹粉5%。全文摘要本發(fā)明涉及扶正化瘀植物藥中蟲草菌粉原料指紋圖譜質(zhì)量控制方法，包括步驟(1)提取蟲草菌絲粉取0.100g蟲草菌粉，加入純凈水，超聲提取，過濾進(jìn)樣；(2)梯度洗脫流動相用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，水和乙腈為流動相梯度洗脫0-30min，0-7％B；(3)標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的建立確立蟲草菌粉HPLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，選取3個特征峰；(4)指紋圖譜的質(zhì)量控制相對保留時間，2號峰尿苷0.44±0.03、3號峰鳥苷0.68±0.03、4號峰腺苷1.00；將樣品的HPLC指紋圖譜與對照指紋圖譜進(jìn)行比較。以5個共有峰計算得到的相似度應(yīng)不得小于0.9，(5)蟲草菌粉原料的制備本發(fā)明重復(fù)性好，能充分反映蟲草菌絲粉核苷類成分的基本特性。文檔編號A61P15/00GK101293002SQ20071004013公開日2008年10月29日申請日期2007年4月27日優(yōu)先權(quán)日2007年4月27日發(fā)明者潘一峰,坪胡申請人:上?，F(xiàn)代中醫(yī)藥技術(shù)發(fā)展有限公司