專利名稱：超臨界CO₂萃取鹿茸中天然性激素的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種超臨界C02萃取鹿茸中天然性激素的方法，屬于提取天然性激素的技術。
背景技術：
鹿茸是名貴動物藥材，為雄性梅花鹿或馬鹿頭上密生茸毛尚未骨化的幼角。鹿茸中含 有磷脂、天然性激素、脂肪酸、氨基酸、多糖類、多肽類、蛋白質和無機鹽等成分，具有 溫腎壯陽、益精補血、強筋健骨等功效?，F(xiàn)代研究證明，鹿茸中含有雌二醇、孕酮等多種天然性激素。現(xiàn)有文獻中關于鹿茸中 性激素提取工藝一般采用甲醇、乙醚或丙酮為提取溶劑的熱回流和振蕩提取方法。例如，凌云等采用甲醇作為提取劑，通過加入60ml/g的甲醇進行l(wèi)h的熱回流提取澳鹿茸和梅花 鹿茸中的雌二醇。楊若明等加入20ml/g80n/。的甲醇溶液，通過振蕩提取lh，再用超聲波處 理30min，再經(jīng)過離心，6(TC加熱15min除蛋白，減壓濃縮，最后加入甲醇和己烷進行液液 萃取，并氮氣吹干得到麋鹿茸中的性激素成分。李春旺等采用乙醚作為提取劑，通過振蕩、 離心、減壓干燥等步驟提取鹿茸中的雌二醇。國內(nèi)關于性激素提取方面的專利也有報道， 主要是公開號CN 1526721A "結合態(tài)雌性激素的提取方法"，公開號CN 1278432A "從孕 尿液中提取雌性激素的新方法"公開了以孕馬尿為原料，利用膜分離技術、離子交換技術 和含亞砜基的極性吸附樹脂進行其中結合雌激素的分離。這些方法均具有提取周期長，所 用溶劑有一定的毒性且用量大，要求溫度高而使鹿茸大多活性物質降解或變性的眾多缺點， 而且最終的目標產(chǎn)品提取率和回收率很低。 發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種超臨界C02萃取鹿茸中天然性激素的方法，該方法過程簡 單，萃取速度快、提取率高。本發(fā)明是通過下述技術方案實現(xiàn)的， 一種超臨界C02萃取鹿茸中天然性激素的方法， 其特征在于包括以下步驟(1) 取冷凍鮮鹿茸，將其切成5-6mm的薄片后，在-60'C ， 0.4MPa條fKf冷凍干燥12-17h， 使鹿茸中含水量低于3%，然后在-4-(TC低溫粉碎成40-300目粒度的粉末，冷藏保存。(2) 將步驟(1)的鹿茸粉末溶于質量濃度為25%-100%乙醇溶液中后加入到萃取釜中， 然后在萃取溫度為35-80°C，萃取壓力為10-40MPa， 二氧化碳流速為0.5-2.0L/min條件下直
接靜態(tài)維持30-120min后，再打開出口閥，維持0.5-2.0L/min 二氧化碳流速進行動態(tài)萃取 30-120min;或者在萃取溫度為35-80。C，萃取壓力為10-40MPa， 二氧化碳流速為0.5-2.0L/min 條件下直接靜態(tài)維持30-120min后，再以0.5-2.5ml/min的流速向萃取釜連續(xù)加入質量濃度 為25%-100%乙醇溶液，并打開出口闊，維持0.5-2.5ml/min的乙醇溶液流速，在萃取溫度 為35-80'C，萃取壓力為10-40MPa, 二氧化碳流速為0.5-2.0L/min條件下繼續(xù)進行動態(tài)萃取 30-90min。(3) 對步驟(2)得到的萃取液在操作溫度為35-50'C和操作壓力為6-10MPa條件下，在 萃取釜中進行分離除去二氧化碳，得到含有性激素成分的萃取物溶液。(4) 將步驟(3)得到的萃取物溶液在50-60'C, O.OlMPa下經(jīng)過減壓蒸發(fā)和真空干燥， 得到含有雌二醇、孕酮、磷脂、生物堿基成分和對羥基苯甲醛的黃褐色膏狀物質。本發(fā)明的優(yōu)點在于采用超臨界C02萃取技術提取鹿茸天然性激素成分，工藝條件簡單， 安全無毒，操作時間短，與現(xiàn)有的傳統(tǒng)熱回流和振蕩提取方法相比提取率和回收率較高， 得到的提取物可以用于預防和治療女性更年期綜合癥的保健品或藥品。
具體實施方式
實施例1將冷凍干燥至恒重并粉碎粒度為40-80目的鹿茸粉末100g加入100ml質量濃度為85% 乙醇溶液后投入到萃取釜內(nèi)，在萃取溫度為35"，萃取壓力40MPa， C02流速2.0L/min條 件下進行90分鐘靜態(tài)萃取，之后CO2以2.0L/min流速進入萃取釜中，在萃取溫度為35°C， 萃取壓力40MPa下進行動態(tài)萃取60min。萃取物在操作溫度為35'C和操作壓力為lOMPa 條件下在萃取釜中進行分離除去二氧化碳。分離后得到的萃取物溶液在5(TC, O.OlMPa經(jīng) 過減壓蒸發(fā)干燥得到含有雌二醇、孕酮的黃色膏狀物，總提取率達到3.79%，用放射免疫法 測得其中雌二醇和孕酮在鹿茸粉末中的提取率分別達到27.89pg/g， 19.94ng/g，浸膏中含雌 二醇和孕酮的含量分別達到735.91pg/g， 526.18ng/g。實施例2將冷凍干燥至恒重并粉碎粒度為100-120目的鹿茸粉末100g加入100ml質量濃度為 100%乙醇后投入到萃取釜內(nèi)，在萃取溫度為80°C，萃取壓力30MPa， C02流速2.0L/min 條件下進行90分鐘靜態(tài)萃取。之后以流速為1.5m/min連續(xù)動態(tài)加入100%乙醇，并打開出 口閥，維持1.5ml/min的乙醇流速，在萃取溫度為80°C，萃取壓力為30MPa， 二氧化碳流 速為2.0L/min條件下進行動態(tài)萃取60min。萃取物在操作溫度為35"C和操作壓力為6MPa 條件下在萃取釜中進行分離除去二氧化碳。分離后得到的萃取物溶液在5(TC， O.OlMPa經(jīng) 過減壓蒸發(fā)干燥得到含有雌二醇、孕酮的黃褐色膏狀物，總提取率達到7.27%,用放射免疫
法測得其中雌二醇和孕酮在鹿茸粉末中的提取率分別達到87.67pg/g， 25.66ng/g，浸膏中含 雌二醇和孕酮的含量分別達到1205.91pg/g， 352.99ng/g。此時性激素回收率達到卯％以上。 實施例3將冷凍干燥至恒重并粉碎粒度為200-300目的鹿茸粉末100g加入100ml質量濃度為 50%乙醇后投入到萃取釜內(nèi)，在萃取溫度為6(TC，萃取壓力30MPa， C02流速2.0L/min條 件進行90分鐘靜態(tài)萃取。之后以流速為0.5ml/min連續(xù)動態(tài)加入50%乙醇，并打開出口閥， 維持0.5ml/min的乙醇溶液流速，在萃取溫度為60°C，萃取壓力為30MPa， 二氧化碳流速 為2.0L/min條件下進行動態(tài)萃取60min，萃取物在操作溫度為50'C和操作壓力為8MPa條 件下在萃取釜中進行分離除去二氧化碳。分離后得到的萃取物溶液在60°C， O.OlMPa經(jīng)過 減壓蒸發(fā)干燥得到含有雌二醇、孕酮的黃褐色膏狀物，總提取率達到5.38%，用放射免疫法 測得其中雌二醇和孕酮在鹿茸粉末中的提取率分別達到21.80pg/g， 17.37ng/g，浸膏中含雌 二醇和孕酮的含量分別達到402.87pg/g， 323.29ng/g。此時性激素回收率達到60%以上。
權利要求
1.一種超臨界CO2萃取鹿茸中性激素的方法，包括以下步驟(1)取冷凍鮮鹿茸，將其切成5-6mm的薄片后，在-60℃，0.4MPa條件下冷凍干燥12-17h，使鹿茸中含水量低于3％，然后在-4-0℃低溫粉碎成40-300目粒度的粉末，冷藏保存；(2)將步驟(1)的鹿茸粉末溶于質量濃度為25％-100％乙醇溶液中后加入到萃取釜中，然后在萃取溫度為35-80℃，萃取壓力為10-40MPa，二氧化碳流速為0.5-2.0L/min條件下直接靜態(tài)維持30-120min后，再打開出口閥，維持0.5-2.0L/min二氧化碳流速進行動態(tài)萃取30-120min；或者在萃取溫度為35-80℃，萃取壓力為10-40MPa，二氧化碳流速為0.5-2.0L/min條件下直接靜態(tài)維持30-120min后，再以0.5-2.5ml/min的流速向萃取釜連續(xù)加入質量濃度為25％-100％乙醇溶液，并打開出口閥，維持0.5-2.5ml/min的乙醇溶液流速，在萃取溫度為35-80℃，萃取壓力為10-40MPa，二氧化碳流速為0.5-2.0L/min條件下繼續(xù)進行動態(tài)萃取30-90min；(3)對步驟(2)得到的萃取液在操作溫度為35-50℃和操作壓力為6-10MPa條件下，在萃取釜中進行分離除去二氧化碳，得到含有性激素成分的萃取物溶液；(4)將步驟(3)得到的萃取物溶液在溫度為50-60℃，0.01MPa下經(jīng)過減壓蒸發(fā)和真空干燥，得到含有雌二醇、孕酮、磷脂、生物堿基成分和對羥基苯甲醛的黃褐色膏狀物質。
2.0L/min條件下直 接靜態(tài)維持30-120min后，再打開出口閥，維持0.5-2.0L/min 二氧化碳流速進行動態(tài)萃取 30-120min;或者在萃取溫度為35-80°C，萃取壓力為10-40MPa， 二氧化碳流速為0.5-2.0L/min 條件下直接靜態(tài)維持30-120min后，再以0.5-2.5ml/min的流速向萃取釜連續(xù)加入質量濃度為 25%-100%乙醇溶液，并打開出口闊，維持0.5-2.5ml/min的乙醇溶液流速，在萃取溫度為35-80 °C，萃取壓力為10-40MPa, 二氧化碳流速為0.5-2.0L/min條件下繼續(xù)進行動態(tài)萃取30-90min;(3) 對步驟(2)得到的萃取液在操作溫度為35-5(TC和操作壓力為6-10MPa條件下，在 萃取釜中進行分離除去二氧化碳，得到含有性激素成分的萃取物溶液；(4) 將步驟(3)得到的萃取物溶液在溫度為50-6(TC， O.OlMPa下經(jīng)過減壓蒸發(fā)和真空干 燥，得到含有雌二醇、孕酮、磷脂、生物堿基成分和對羥基苯甲醛的黃褐色膏狀物質。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種超臨界CO₂萃取鹿茸中天然性激素的方法。該方法包括將粉碎的冷凍干燥鹿茸加入乙醇溶液后加入萃取釜中，在萃取溫度為35-80℃，萃取壓力為10-40MPa，二氧化碳流速為0.5-2.0L/min進行靜態(tài)萃取，然后維持相同的二氧化碳流速進行動態(tài)萃取，或者靜態(tài)萃取后向萃取釜連續(xù)加入乙醇溶液進行動態(tài)萃取，萃取物經(jīng)過分離、減壓蒸發(fā)和真空干燥得到含有雌二醇、孕酮、磷脂、生物堿基成分和對羥基苯甲醛的黃褐色膏狀物質。該方法過程簡單，萃取速度快，回收率高，得到的提取物可以用于預防和治療女性更年期綜合癥的保健品或藥品。
文檔編號A61K35/32GK101209261SQ200710060128
公開日2008年7月2日 申請日期2007年12月24日 優(yōu)先權日2007年12月24日
發(fā)明者冉 周, 張大成, 徐志紅, 李淑芬, 田松江 申請人:天津大學