專利名稱：含氮查耳酮衍生物的制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于有機(jī)化合物的合成，涉及含氮查耳酮衍生物的制備方法，尤其涉及2’-羥基-3’-烷胺丙基-4’，6’-二取代查耳酮衍生物的制備方法，及其在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
查耳酮衍生物具有抗腫瘤作用。2000年X.Yi等人報道了一系列2’-氨基查耳酮衍生物，其中多數(shù)化合物表現(xiàn)出很強(qiáng)的細(xì)胞毒活性，尤其是2’-胺基-4’，5’-亞甲二氧基-3-甲氧基查耳酮，對多種腫瘤細(xì)胞(KB，HOS，HCT-8，A-549等)的IC50均小于1μM。并且對多藥耐藥性的腫瘤細(xì)胞KB-VIN、1A9也表現(xiàn)出很強(qiáng)的抑制活性。該文所提供的含氮查耳酮衍生物是結(jié)構(gòu)較為常見的，芳環(huán)上具有甲氧基、羥基、胺基等取代。作者僅對這些化合物進(jìn)行了初步的活性和構(gòu)效關(guān)系的探討，而未對其抗腫瘤作用的機(jī)制作進(jìn)一步的深入研究。X.L.Zi和A.R.Simoneau等人對從Kava(一種生長于南太平洋島國用于釀酒的灌木)的根部提取物中分離得到的Flavokawain A(2’-羥基-4’，6’-二甲氧基-4-甲氧基查耳酮)進(jìn)行抗腫瘤活性的研究，結(jié)果表明，該化合物能抑制腫瘤的生長，機(jī)制是它通過參與Bax蛋白依賴性和線粒體依賴性的細(xì)胞凋亡途徑，從而誘導(dǎo)了腫瘤細(xì)胞的凋亡。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)Flavokawain A在裸鼠異生模型中呈現(xiàn)了顯著的抑癌作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一類結(jié)構(gòu)新穎的含有氮原子的查耳酮衍生物，主要是指2’-羥基-3’-烷胺丙基-4’，6’-二取代查耳酮衍生物，本發(fā)明是改變2’-羥基查耳酮衍生物的結(jié)構(gòu)，在3’-位引入不同的烷胺丙基結(jié)構(gòu)，合成了一系列的2’-羥基-3’-烷胺丙基-4’，6’-二取代查耳酮衍生物。本發(fā)明提供的2’-羥基-3’-烷胺丙基-4’，6’-二取代查耳酮衍生物結(jié)構(gòu)通式為
其中R1為氫原子、1至4個碳原子的直鏈或支鏈烷烴；Ar為無取代、單取代、二取代或三取代的苯環(huán)，苯環(huán)上的取代基為氫原子、鹵素原子、羥基、三氟甲基、甲砜基、含1至10個碳原子的直鏈或支鏈的烷基、含1至4個碳原子的直鏈或支鏈的烷氧基；R2為環(huán)狀或開鏈的叔胺結(jié)構(gòu)NR3R4，其中R3和R4相同或不同，它們可以是甲基、乙基，含1-4個碳原子的烷基醇、烷基醚及其酯，含1-4個碳原子的羧酸及其酯，含1-4個碳原子的烷基胺，或R3、R4分別為碳、氧、及氮原子環(huán)合成的五元或六元環(huán)。
本發(fā)明的另一個目的是提供2’-羥基-3’-烷胺丙基-4’，6’-二取代查耳酮衍生物的制備方法，通過以下步驟實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的合成路線
(1)化合物I與無水乙腈在惰性溶劑中經(jīng)路易斯(Lewis)酸催化得到中間體三羥基苯乙酮亞胺鹽酸鹽，該反應(yīng)通常以乙醚、二氧六環(huán)、二氯甲烷、氯仿等為溶劑，所用的Lewis酸有氯化鐵、氯化鋅、氯化錫、三氟化硼乙醚等，反應(yīng)溫度為-15℃-25℃，反應(yīng)時間6-8小時，中間體三羥基苯乙酮亞胺鹽酸鹽再經(jīng)酸性水解得到化合物II，反應(yīng)溫度為80℃-110℃，反應(yīng)時間1-5小時，通常是回流3小時，所得產(chǎn)物II無需純化，可直接用于下一步反應(yīng)；(2)化合物II在堿性條件下經(jīng)鹵代烴的選擇性醚化可得到化合物III，經(jīng)過重結(jié)晶可得純品。反應(yīng)通常在極性溶劑如丙酮中進(jìn)行，常用的堿性物質(zhì)有氫化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈉、碳酸鉀、碳酸鈉，反應(yīng)溫度可以在0℃-50℃之間進(jìn)行，通常在室溫下進(jìn)行；(3)化合物III在堿性條件下與芳香醛縮合得到化合物IV，反應(yīng)通常在質(zhì)子性混和溶劑中進(jìn)行，如甲醇-水，乙醇-水或異丙醇-水等，常用的堿有氫氧化鉀、氫氧化鈉、碳酸鉀、碳酸鈉、氫化鈉等，反應(yīng)溫度可以在5℃-30℃之間進(jìn)行，通常在室溫下進(jìn)行，得到粗產(chǎn)物通過重結(jié)晶可得純品；(4)化合物IV在堿性條件下烯丙醚化可得到化合物V，反應(yīng)在極性溶劑如丙酮中進(jìn)行，常用的堿性物質(zhì)有甲醇鈉、乙醇鈉、氫氧化鈉、碳酸鉀、碳酸鈉，反應(yīng)溫度為30-80℃，所得產(chǎn)物可直接用于下一步反應(yīng)；(5)化合物V在高沸點(diǎn)溶劑中經(jīng)克萊森(Claisen)重排得到化合物VI，常用的高沸點(diǎn)極性溶劑有四氫萘、二苯醚、N，N-二甲基苯胺、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、三氟醋酸，反應(yīng)溫度為150-210℃，粗產(chǎn)物經(jīng)過重結(jié)晶可得到純品；
(6)化合物VI經(jīng)醋酐酰化得到化合物VII，反應(yīng)在極性溶劑如吡啶中進(jìn)行，常用的催化劑有4-二甲胺基吡啶(DMAP)，反應(yīng)溫度為10-30℃，粗產(chǎn)物經(jīng)過柱層析可得到純品；(7)化合物VII經(jīng)過酸氧化得到化合物VIII，常用的過酸有過氧苯甲酸、過鄰苯二甲酸、間氯過氧苯甲酸、過氧甲酸及過氧乙酸，反應(yīng)在極性溶劑如二氯甲烷、三氯甲烷中進(jìn)行，反應(yīng)溫度為10-30℃，粗產(chǎn)物經(jīng)過柱層析可得到純品；(8)化合物VIII與仲胺加成得到化合物IX，反應(yīng)在極性溶劑中進(jìn)行，所用的極性溶劑可以為甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈、二氧六環(huán)、丙酮、DMF、二甲基亞砜(DMSO)中任一種，反應(yīng)溫度為10-80℃，粗產(chǎn)物經(jīng)過柱層析可得到純品。
化合物I可直接購買，化合物II可按文獻(xiàn)方法(K.C.Gulai et al，Org.Synth.，Coll.Vol.II，522)制得，化合物III可按文獻(xiàn)方法(I.Kazuhiko et al，JNat.Prod.，1988，51，906-914)制得，化合物IV可按文獻(xiàn)方法(X.Y.Bu et al，Synthesis，1997，11，1246-1248)制得。
本發(fā)明的又一個目的是2’-羥基-3’-烷胺丙基-4’，5’，6’-三取代查耳酮衍生物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。初步的藥理實(shí)驗發(fā)現(xiàn)它們對多種腫瘤細(xì)胞株，包括ECA-109，A-549，HL-60，PC-3等均有較好的體外抑制增殖作用，其中IXk對白血病細(xì)胞HL-60表現(xiàn)出很強(qiáng)的抑制活性，IC50值為0.21μg/mL；IXe作用也較為突出，對ECA-109，A-549的IC50值分別為1.0μg/mL，1.5μg/mL。
本發(fā)明的特點(diǎn)是以具有活性的2’-羥基查耳酮為先導(dǎo)物，在2’-羥基查耳酮母核上，通過烯丙醚化反應(yīng)、Claisen重排、環(huán)氧化反應(yīng)、加成反應(yīng)等得到2’-羥基-3’-烷胺丙基-4’，5’，6’-三取代查耳酮衍生物。這是一類結(jié)構(gòu)全新的化合物，初步的藥理活性篩選試驗表明這些化合物均具有較好的抗腫瘤活性。
本發(fā)明所用原料不僅來源廣泛，易于制備，而且反應(yīng)條件溫和，各步收率高，操作簡便，生產(chǎn)成本較低，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明結(jié)合實(shí)施例作進(jìn)一步的說明。以下的實(shí)施例僅是說明本發(fā)明的，而不是以任何方式限制本發(fā)明。
實(shí)施例1、2-羥基-4，6-二甲氧基-苯乙酮(化合物III)參照文獻(xiàn)方法(I.Kazuhiko et al，J Nat.Prod.，1988，51，906-914)制得。
M.p.77～78℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)14.06(s，1H)，6.05(d，1H，J＝2.4Hz)，5.92(d，1H，J＝2.4Hz)，3.90(s，3H)，3.62(s，3H)，2.63(s，3H)。
實(shí)施例2、2’-羥基-4’，6’-二甲氧基-2-氯-查耳酮(化合物IVa)參照文獻(xiàn)方法(X.Y.Bu et al，Synthesis，1997，11，1246-1248)制得。
M.p.123～124℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)14.20(s，1H，)，8.14(d，1H，J＝15.6Hz)，7.87(d，1H，J＝15.6Hz)，7.68-7.70(m，1H)，7.42-7.44(m，1H)，7.26-7.31(m，2H)，6.11(s，1H)，5.96(s，1H)，3.90(s，3H)，3.84(s，3H)。
實(shí)施例3、3’-烯丙氧基-4’，6’-二甲氧基-2-氯-查耳酮(化合物Va)化合物IV 3.2g(10.0mmol)、無水碳酸鉀2.0g(15.0mmol)和無水丙酮30mL投入到反應(yīng)瓶，攪拌下滴加烯丙基溴10.4mL(12.0mmol)。加畢，升溫回流4小時。反應(yīng)液冷卻后析出少量固體，抽濾，濾液減壓回收后得淺黃色液體3.4g，收率95％。
1H-NMR(δ，CDCl3)7.79(d，1H，J＝16.0Hz)，7.66(m，1H)，7.39(m，1H)，7.28(m，2H)，6.93(d，1H，J＝16.0Hz)，6.16(d，1H，J＝2.0Hz)，6.14(d，1H，J＝2.0Hz)，5.95(m，1H)，5.33(dd，1H，J1＝15.8Hz，J2＝1.2Hz)，5.50(m，2H)，3.84(s，3H)，3.78(s，3H)。
實(shí)施例4、2’-羥基-3’-烯丙基-4’，6’-二甲氧基-2-氯-查耳酮(化合物VIa)化合物Va 4.0g(12.5mmol)溶于DMF(20mL)中，氮?dú)獗Ｗo(hù)下回流6h，反應(yīng)液減壓蒸除溶劑后，加水稀釋，二氯甲烷(40mL×3)提取，飽和氯化鈉溶液(40mL×3)洗滌，無水硫酸鈉干燥。過濾，濾液減壓回收，粗產(chǎn)物經(jīng)柱層析得黃色固體3.0g，收率75％。
M.p.167～168℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)13.93(s，1H)，8.08(d，1H，J＝15.6Hz)，7.80(d，1H，J＝15.6Hz)，7.65(m，1H)，7.39(m，1H)，7.26(m，2H)，5.97(s，1H)，5.94(m，1H)，4.95(m，2H)，3.91(s，3H)，3.87(s，3H)，3.31(m，2H)。
實(shí)施例5、2’-乙酰氧基-3’-烯丙基-4’，6’-二甲氧基-2-氯-查耳酮(化合物VIIa)化合物VIa 1.6g(5.0mmol)溶于無水吡啶(30mL)中，加入醋酐0.6mL(6.3mmol)，室溫攪拌10小時，TLC檢測反應(yīng)完全。減壓蒸除溶劑，加水稀釋，用2N鹽酸溶液酸化，二氯甲烷(20mL×3)提取，飽和氯化鈉溶液(20mL×3)洗滌，無水硫酸鈉干燥。過濾，濾液減壓回收，粗產(chǎn)物柱層析得黃色固體1.7g，收率85％。
M.p.106～109℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)7.89(d，1H，J＝15.6Hz)，7.65(m，1H)，7.40(m，1H)，7.30(m，2H)，7.06(d，1H，J＝15.6Hz)，5.97(s，1H)，5.90(m，1H)，4.96(m，2H)，3.91(s，3H)，3.83(s，3H)，3.32(m，2H)，2.26(s，3H)。
實(shí)施例6、2’-乙酰氧基-3’-環(huán)氧丙基-4’，6’-二甲氧基-2-氯-查耳酮(化合物VIIIa)化合物VIIa 0.6g(1.5mmol)溶于二氯甲烷20mL中，加入過氧苯甲酸0.7g(4.5mmol)，室溫攪拌48h。TLC檢測反應(yīng)完全。用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)pH 7，二氯甲烷(60mL×2)提取，飽和氯化鈉溶液(60mL×2)洗滌，無水硫酸鈉干燥。過濾，濾液減壓回收，粗產(chǎn)物柱層析得黃色固體0.40g，收率65％。
M.p.115～116℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)7.89(d，1H，J＝15.6Hz)，7.65(m，1H)，7.41(m，1H)，7.33(m，2H)，7.01(d，1H，J＝15.6Hz)，6.43(s，1H)，3.92(s，3H)，3.86(s，3H)，3.07(m，1H)，2.70(dd，1H，J1＝16.0Hz，J2＝4.0Hz)，2.67(dd，1H，J1＝15.6Hz，J2＝4.4Hz)，2.59(m，1H)，2.51(dd，1H，J1＝5.2Hz，J2＝2.4Hz)，2.25(s，3H)。
實(shí)施例7、3-(2-氯苯基)-1-(2-羥基-4，6-二甲氧基-3-(2-羥基-3-嗎啉-4-基丙基)苯基)丙-2-烯-1-酮(化合物IXa)化合物VIII 150.0mg(0.36mmol)、嗎啉0.2mL(1.8mmol)和乙醇2mL投入反應(yīng)瓶。室溫反應(yīng)24h，TLC檢測反應(yīng)完全。減壓回收，加水稀釋，二氯甲烷提取(15mL×2)提取，飽和氯化鈉溶液(30mL×2)洗滌，無水硫酸鈉干燥。過濾，濾液減壓回收，粗產(chǎn)物柱層析得黃色固體120.0mg，收率72％。
M.p.141～143℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)13.93(s，1H)，8.11(d，1H，J＝15.6Hz)，7.81(d，1H，J＝15.6Hz)，7.69(m，1H)，7.43(m，1H)，7.30(m，2H)，6.01(s，1H)，4.00(s，3H)，3.95(s，3H)，3.81(m，1H)，3.70(m，4H)，3.10(dd，1H，J1＝13.6Hz，J2＝7.2Hz)，2.91(dd，1H，J1＝13.2Hz，J2＝7.2Hz)，2.49(m，2H)，2.24(m，4H)。
實(shí)施例8、3-(2-氯苯基)-1-(2-羥基-4，6-二甲氧基-3-(2-羥基-3-哌啶-1-基丙基)苯基)丙-2-烯-1-酮(化合物IXb)操作過程參見實(shí)施例7，只是用哌啶替代嗎啉，得到黃色固體，收率75％。
M.p.135～136℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)8.11(d，1H，J＝15.6Hz)，7.81(d，1H，J＝15.6Hz)，7.69(m，1H)，7.43(m，1H)，7.30(m，2H)，6.01(s，1H)，3.94(s，3H)，3.91(s，3H)，3.91(m，1H)，2.87(dd，1H，J1＝13.6Hz，J2＝6.4Hz)，2.73(dd，1H，J1＝13.2Hz，J2＝6.8Hz)，2.55(m，2H)，2.32(m，4H)，1.53(m，4H)，1.41(m，2H)。
實(shí)施例9、3-(2-氯苯基)-1-(2-羥基-4，6-二甲氧基-3-(2-羥基-3-吡咯烷-1-基丙基)苯基)丙-2-烯-1-酮(化合物IXc)操作過程參見實(shí)施例7，只是用吡咯烷替代嗎啉，得到黃色固體，收率75％。
M.p.132～135℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)8.10(d，1H，J＝15.6Hz)，7.79(d，1H，J＝15.6Hz)，7.69(m，1H)，7.43(m，1H)，7.31(m，2H)，6.02(s，1H)，3.94(s，3H)，3.91(s，3H)，3.91(m，1H)，2.87(dd，1H，J1＝13.2Hz，J2＝5.6Hz)，2.79(dd，1H，J1＝13.2Hz，J2＝5.8Hz)，2.69(m，4H)，2.52(m，2H)，1.73(s，4H)。
實(shí)施例10、3-(2-氯苯基)-1-(2-羥基-4，6-二甲氧基-3-(2-羥基-3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)苯基)丙-2-烯-1-酮(化合物IXd)操作過程參見實(shí)施例7，只是用1-甲基哌嗪替代嗎啉，得到黃色固體，收率75％。
M.p.166～168℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)13.94(s，1H)，8.10(d，1H，J＝15.6Hz)，7.84(d，1H，J＝15.6Hz)，7.74(m，1H)，7.43(m，1H)，7.31(m，2H)，5.98(s，1H)，3.93(s，3H)，3.90(s，3H)，3.92(m，1H)，3.07(dd，1H，J1＝13.6Hz，J2＝7.2Hz)，2.88(dd，1H，J1＝13.6Hz，J2＝6.8Hz)，2.61(s，2H)，2.37(m，8H)，2.24(s，3H)。
實(shí)施例11、3-(2-氯苯基)-1-(2-羥基-4，6-二甲氧基-3-(2-羥基-3-二乙胺基丙基)苯基)丙-2-烯-1-酮(化合物IXe)操作過程參見實(shí)施例7，只是用二乙胺替代嗎啉，得到黃色固體，收率75％。
M.p.114～116℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)13.94(s，1H)，8.10(d，1H，J＝15.6Hz)，7.84(d，1H，J＝15.6Hz)，7.74(m，1H)，7.43(m，1H)，7.31(m，2H)，5.98(s，1H)，3.97(s，3H)，3.90(s，3H)，3.92(m，1H)，3.03(dd，1H，J1＝13.6Hz，J2＝7.2Hz)，2.84(dd，1H，J1＝13.6Hz，J2＝6.8Hz)，2.39(m，6H)，0.94(t，6H)。
實(shí)施例12、3-(2-氯苯基)-1-(2-羥基-4，6-二甲氧基-3-(2-羥基-3-甲乙胺基丙基)苯基)丙-2-烯-1-酮(化合物IXf)操作過程參見實(shí)施例7，只是用甲乙胺替代嗎啉，得到黃色固體，收率75％。
M.p.115～116℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)8.12(d，1H，J＝15.6Hz)，7.82(d，1H，J＝15.6Hz)，7.70(m，1H)，7.44(m，1H)，7.30(m，2H)，6.02(s，1H)，3.95(s，3H)，3.92(s，3H)，3.92(m，1H)，2.88(dd，1H，J1＝13.2Hz，J2＝5.2Hz)，2.74(dd，1H，J1＝13.6Hz，J2＝4.8Hz)，2.41(m，4H)，2.24(s，3H)，1.04(t，3H)。
實(shí)施例12、3-(2-氯苯基)-1-(2-羥基-4，6-二甲氧基-3-(2-羥基-3-二甲胺基丙基)苯基)丙-2-烯-1-酮(化合物IXg)操作過程參見實(shí)施例7，只是用二甲胺替代嗎啉，得到黃色固體，收率75％。
M.p.127～129℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)14.03(s，1H)，8.12(d，1H，J＝15.6Hz)，7.82(d，1H，J＝15.6Hz)，7.69(m，1H)，7.43(m，1H)，7.30(m，2H)，6.02(s，1H)，3.95(s，3H)，3.92(s，3H)，3.92(m，1H)，2.87(dd，1H，J1＝13.6Hz，J2＝7.2Hz)，2.75(dd，1H，J1＝13.6Hz，J2＝6.8Hz)，2.44(dd，1H，J1＝13.6Hz，J2＝6.2Hz)，2.26(s，6H)，2.21(dd，1H，J1＝13.6Hz，J2＝6.8Hz)。
實(shí)施例13、2’-羥基-4’，6’-二甲氧基-4-三氟甲基-查耳酮(化合物IVb)操作過程參見實(shí)施例2，只是用對三氟甲基苯甲醛替代鄰氯苯甲醛，得到亮黃色固體，收率65％。
M.p.149～152℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)14.14(s，H)，7.79(d，1H，J＝15.2Hz)，7.75(d，1H，J＝15.2Hz)，7.68(m，4H)，6.11(s，1H)，5.97(s，1H)，3.92(s，3H)，3.85(s，3H)。
實(shí)施例14、3’-烯丙氧基-4’，6’-二甲氧基-4-三氟甲基-查耳酮(化合物Vb)操作過程參見實(shí)施例3，只是用IVb替代IVa，得到淡黃色液體，收率96％。
1H-NMR(δ，CDCl3)7.62(d，1H，J＝16.0Hz)，7.59(m，4H)，7.44(d，1H，J＝16.0Hz)，6.17(d，1H，J＝2.0Hz)，6.15(d，1H，J＝2.0Hz)，5.96(m，1H)，5.35(dd，1H，J1＝16.8Hz，J2＝1.2Hz)，5.30(m，2H)，3.84(s，3H)，3.78(s，3H)。
實(shí)施例15、2’-羥基-3’-烯丙基-4’，6’-二甲氧基-4-三氟甲基-查耳酮(化合物VIb)操作過程參見實(shí)施例4，只是用Vb替代Va，得到黃色固體，收率96％。
M.p.154～156℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)13.95(s，1H)，7.93(d，1H，J＝15.2Hz)，7.74(d，1H，J＝15.2Hz)，7.72(m，4H)，6.03(s，1H)，6.00(m，1H)，5.00(m，2H)，3.93(s，3H)，3.78(s，3H)，3.37(m，2H)。
實(shí)施例16、2’-乙酰氧基-3’-烯丙基-4’，6’-二甲氧基-4-三氟甲基-查耳酮(化合物VIIb)操作過程參見實(shí)施例5，只是用VIb替代VIa，得到黃色固體，收率82％。
M.p.105～106℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)7.89(d，1H，J＝15.2Hz)，7.40(m，4H)，7.21(d，1H，J＝15.2Hz)，6.03(s，1H)，6.00(m，1H)，5.00(m，2H)，3.93(s，3H)，3.73(s，3H)，3.47(m，2H)，2.26(s，3H)。
實(shí)施例17、2’-乙酰氧基-3’-環(huán)氧丙基-4’，6’-二甲氧基-2-氯-查耳酮(化合物VIIIb)
操作過程參見實(shí)施例6，只是用VIIb替代VIIa，得到黃色固體，收率67％。
m.p.113～114℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)7.90(d，1H，J＝15.2Hz)，7.42(m，4H)，7.34(d，1H，J＝15.2Hz)，6.03(s，1H)，6.00(m，1H)，5.00(m，2H)，3.93(s，3H)，3.73(s，3H)，3.00(dd，1H，J1＝16.0Hz，J2＝4.0Hz)，2.97(dd，1H，J1＝15.6Hz，J2＝4.4Hz)，2.76(m，1H)，2.49(m，1H)，2.40(dd，1H，J1＝5.2Hz，J2＝2.4Hz)，2.25(s，3H)。
實(shí)施例18、3-(4-三氟甲基苯基)-1-(2-羥基-4，6-二甲氧基-3-(2-羥基-3-哌啶-1-基丙基)苯基)丙-2-烯-1-酮(化合物IXh)化合物VIIIb 120.0mg(0.3mmol)、哌啶0.2mL(1.3mmol)和乙醇2mL投入反應(yīng)瓶。室溫反應(yīng)24h，TLC檢測反應(yīng)完全。減壓回收反應(yīng)液，加水稀釋，二氯甲烷提取(15mL×2)提取，飽和氯化鈉溶液(30mL×2)洗滌，無水硫酸鈉干燥。過濾，濾液減壓回收，粗產(chǎn)物柱層析得黃色固體108.0mg，收率72％。
M.p.114～116℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)13.86(s，1H)，7.87(d，1H，J＝15.2Hz)，7.72(d，1H，J＝15.2Hz)，7.66(m，4H)，6.03(s，1H)，3.96(s，3H)，3.92(s，3H)，3.92(m，1H)，2.87(dd，1H，J1＝13.6Hz，J2＝7.2Hz)，2.70(dd，1H，J1＝13.2Hz，J2＝6.8Hz)，2.54(m，2H)，2.33(m，4H)，1.54(m，4H)，1.42(m，2H)。
實(shí)施例19、3-(4-三氟甲基苯基)-1-(2-羥基-4，6-二甲氧基-3-(2-羥基-3-二乙胺基丙基)苯基)丙-2-烯-1-酮(化合物IXi)操作過程參見實(shí)施例18，只是用二乙胺替代哌啶，得到黃色固體，收率65％。
Mp.125～127℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)13.95(s，1H)，7.86(d，1H，J＝15.2Hz)，7.74(d，1H，J＝15.2Hz)，7.66(m，4H)，6.00(s，1H)，3.96(s，3H)，3.92(s，3H)，3.92(m，1H)，2.76(dd，1H，J1＝13.6Hz，J2＝5.2Hz)，2.71(dd，1H，J1＝13.2Hz，J2＝4.8Hz)，2.54(m，2H)，2.40(m，6H)，0.94(t，6H)。
實(shí)施例20、3-(4-三氟甲基苯基)-1-(2-羥基-4，6-二甲氧基-3-(2-羥基-3-甲乙胺基丙基)苯基)丙-2-烯-1-酮(化合物IXj)
操作過程參見實(shí)施例18，只是用甲乙胺替代哌啶，得到黃色固體，收率76％。
M.p.113～116℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)13.85(s，1H)，7.87(d，1H，J＝15.2Hz)，7.74(d，1H，J＝15.2Hz)，7.66(m，4H)，6.03(s，1H)，3.96(s，3H)，3.93(s，3H)，3.93(m，1H)，2.76(dd，1H，J1＝13.6Hz，J2＝5.2Hz)，2.71(dd，1H，J1＝13.2Hz，J2＝4.8Hz)，2.41(m，4H)，2.24(s，3H)，1.04(t，3H)。
實(shí)施例21、3-(4-三氟甲基苯基)-1-(2-羥基-4，6-二甲氧基-3-(2-羥基-3-嗎啉-4-基丙基)苯基)丙-2-烯-1-酮(化合物IXk)操作過程參見實(shí)施例18，只是用嗎啉替代哌啶，得到黃色固體，收率76％。
M.p.166～168℃。
1H-NMR(δ，CDCl3)14.01(s，1H)，7.90(d，1H，J＝15.2Hz)，7.74(d，1H，J＝15.2Hz)，7.68(m，4H)，6.03(s，1H)，3.98(s，3H)，3.93(s，3H)，3.92(m，1H)，3.70(m，4H)，3.10(dd，1H，J1＝13.6Hz，J2＝7.2Hz)，2.91(dd，1H，J1＝13.2Hz，J2＝7.2Hz)，2.49(m，2H)，2.24(m，4H)。
實(shí)施例22、抗腫瘤生物活性測試方法腫瘤細(xì)胞離體培養(yǎng)選取腫瘤細(xì)胞ECA-109，A-549，HL-60，PC-3，于37℃、5％CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育，待細(xì)胞密度長到70-90％時傳代(貼壁細(xì)胞用Puck’s EDTA消化后傳代)，用于以后實(shí)驗所需。
MTT法測定化合物對腫瘤細(xì)胞的體外抑制作用將處于對數(shù)生長期的腫瘤細(xì)胞(ECA-109，A-549，HL-60，PC-3)稀釋成4×104個細(xì)胞/mL，在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中每孔加入0.1mL，然后加入濃度為12.0mg/L、6.0mg/L、3.0mg/L、1.5mg/L的待測化合物，每組3復(fù)孔，置37℃、5％CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育72小時，實(shí)驗終止前4小時每孔加入濃度為5mg/mL的MTT溶液5μL，繼續(xù)培養(yǎng)4小時后棄去上清液，每孔加入DMSO 200μL，用酶標(biāo)定儀測定各孔的吸光度值(A570nm)，所得數(shù)據(jù)用于計算IC50值。所得結(jié)果見表1
表1所合成的11個化合物對不同腫瘤細(xì)胞株的IC50(μg/mL)值

從上表可以看出，1)所有的11個化合物對2種腫瘤細(xì)胞株均有一定的抑制活性；2)3’-位取代氨基為哌啶環(huán)及其開環(huán)類似物二乙胺基的化合物IXb和IXe對腫瘤細(xì)胞株有較高的抑制活性；3)化合物IXk對HL-60細(xì)胞株具有較高的抑制活性，顯示其具有選擇性；4)相對于鄰氯苯基取代基，對三氟甲基苯基取代的化合物對腫瘤細(xì)胞株的抑制活性要弱一些；5)總而言之，該類化合物有一定的抗腫瘤應(yīng)用前景。
權(quán)利要求
1.一種2’-羥基-3’-烷胺丙基-4’，6’-二取代查耳酮衍生物，結(jié)構(gòu)通式為 其中R1為氫原子、1至4個碳原子的直鏈或支鏈烷烴；Ar為無取代、單取代、二取代或三取代的苯環(huán)，苯環(huán)上的取代基為氫原子、鹵素原子、羥基、三氟甲基、甲砜基、含1至10個碳原子的直鏈或支鏈的烷基、含1至4個碳原子的直鏈或支鏈的烷氧基；R2為環(huán)狀或開鏈的叔胺結(jié)構(gòu)NR3R4，其中R3和R4相同或不同，它們可以是甲基、乙基，含1-4個碳原子的烷基醇、烷基醚及其酯，含1-4個碳原子的羧酸及其酯，含1-4個碳原子的烷基胺，或R3、R4分別為碳、氧、及氮原子環(huán)合成的五元或六元環(huán)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的2’-羥基-3’-烷胺丙基-4’，6’-二取代查耳酮衍生物的制備方法，其特征是通過以下步驟實(shí)現(xiàn)(1)化合物I與無水乙腈在惰性溶劑中經(jīng)路易斯酸催化得到中間體三羥基苯乙酮亞胺鹽酸鹽，反應(yīng)溫度為-15℃-25℃，反應(yīng)時間為6-8小時，中間體三羥基苯乙酮亞胺鹽酸鹽再經(jīng)酸性水解得到化合物II，反應(yīng)溫度為80℃-110℃，反應(yīng)為時間1-5小時；(2)化合物II在堿性條件下經(jīng)鹵代烴的選擇性醚化得到化合物III，經(jīng)過重結(jié)晶得到純品，反應(yīng)在極性溶劑中進(jìn)行，反應(yīng)溫度為0-50℃；(3)化合物III在堿性條件下與芳香醛縮合得到化合物IV，反應(yīng)在質(zhì)子性混和溶劑中進(jìn)行，反應(yīng)溫度為5-30℃，粗產(chǎn)物經(jīng)過重結(jié)晶得到純品；(4)化合物IV在堿性條件下烯丙醚化得到化合物V，反應(yīng)在極性溶劑中進(jìn)行，反應(yīng)溫度為30-80℃，所得產(chǎn)物直接用于下一步反應(yīng)；(5)化合物V在高沸點(diǎn)溶劑中經(jīng)克萊森重排得到化合物VI，反應(yīng)溫度為150-210℃，粗產(chǎn)物經(jīng)過重結(jié)晶得到純品；(6)化合物VI與醋酐酰化得到化合物VII，反應(yīng)在極性溶劑中進(jìn)行，反應(yīng)溫度為10-30℃，粗產(chǎn)物經(jīng)過柱層析得到純品；(7)化合物VII經(jīng)過酸氧化得到化合物VIII，反應(yīng)在極性溶劑中進(jìn)行，反應(yīng)溫度為10-30℃，粗產(chǎn)物經(jīng)過柱層析得到純品；(8)化合物VIII與仲胺加成得到化合物IX，反應(yīng)在極性溶劑中進(jìn)行，反應(yīng)溫度為10-80℃，粗產(chǎn)物經(jīng)過柱層析得到純品；反應(yīng)式為
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的2’-羥基-3’-取代胺基丙基-4’，6’-二取代查耳酮衍生物的制備方法，其特征是步驟(3)中質(zhì)子性混和溶劑選用甲醇-水，乙醇-水或異丙醇-水中任一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的2’-羥基-3’-烷胺丙基-4’，6’-二取代查耳酮衍生物的制備方法，其特征是步驟(5)中高沸點(diǎn)溶劑選用四氫萘、二苯醚、N，N-二甲基苯胺、N，N-二甲基甲酰胺或三氟醋酸中任一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的2’-羥基-3’-烷胺丙基-4’，6’-二取代查耳酮衍生物的制備方法，其特征是步驟(7)中過酸選用過氧苯甲酸、過氧鄰苯二甲酸、間氯過氧苯甲酸、過甲酸或過乙酸中任一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的2’-羥基-3’-烷胺丙基-4’，6’-二取代查耳酮衍生物的制備方法，其特征是步驟(8)中極性溶劑選用甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈、二氧六環(huán)、丙酮、N，N-二甲基甲酰胺或二甲基亞砜中任一種。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的2’-羥基-3’-烷胺丙基-4’，6’-二取代查耳酮衍生物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
一種2’－羥基－3’－烷胺丙基－4’，6’－二取代查耳酮衍生物，是以具有活性的2’－羥基查耳酮為先導(dǎo)物，在2’－羥基查耳酮母核上，通過烯丙醚化反應(yīng)、Claisen重排、環(huán)氧化反應(yīng)、加成反應(yīng)等得到2’－羥基－3’－烷胺丙基－4’，5’，6’－三取代查耳酮衍生物。藥理實(shí)驗發(fā)現(xiàn)對多種腫瘤細(xì)胞株有較好的體外抑制增殖作用，可在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明所用原料不僅來源廣泛，易于制備，而且反應(yīng)條件溫和，各步收率高，操作簡便，生產(chǎn)成本較低，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號A61K31/495GK101041646SQ20071006844
公開日2007年9月26日 申請日期2007年4月30日 優(yōu)先權(quán)日2007年4月30日
發(fā)明者劉滔, 徐仲淼, 胡永洲, 何俏軍, 楊波, 楊曉春 申請人:浙江大學(xué)