專利名稱：一種從中藥三七中提取純化總皂苷的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體而言是涉及從中藥三七中經(jīng)過提取、精制，獲得三七總皂苷。
背景技術(shù)：
目前，在全球范圍內(nèi)，中草藥都有廣闊的市場，隨著人們對健康要求認識水平的增高以及人口的老齡化，亞健康狀態(tài)化，人們更加渴望回歸自然，利用天然植物治療、預(yù)防一些化學(xué)合成藥物難以解決的疾病。從天然藥物中尋求副作用小、且物美價廉的藥物成為世界各國醫(yī)藥企業(yè)所追逐的目標(biāo)。歐共體對草藥進行了統(tǒng)一立法，加拿大和澳大利亞等國草藥地位已經(jīng)合法化，美國政府也已起草了植物藥管理辦法，開始接受天然藥物的復(fù)方混合制劑作為治療藥，這些為中藥作為治療藥物進入國際醫(yī)藥市場提供了良好的國際環(huán)境。另一方面，隨著全球經(jīng)濟一體化進程的加快，特別是我國正式加入WTO，中國醫(yī)藥市場融入國際醫(yī)藥大市場的廣度和深度將進一步加大。面臨強大跨國醫(yī)藥集團的激烈競爭以及日本、韓國、印度、泰國等亞洲國家傳統(tǒng)醫(yī)藥產(chǎn)品和德國、法國等歐洲國家植物藥的巨大沖擊，我國傳統(tǒng)中藥產(chǎn)生的眾多產(chǎn)品由于尚不能符合國際醫(yī)藥市場的標(biāo)準(zhǔn)和要求而被拒之門外。
三七為五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根。中醫(yī)認為，其味甘、微苦，性溫，歸肝、胃經(jīng)。具有散瘀止血，消腫定痛之功效，適用于治療咯血，吐血，衄血，便血，崩漏，外傷出血，胸腹刺痛，跌撲腫痛等。現(xiàn)代研究表明，三七中主要含人參皂苷(Ginsenosides)Rb1、Rd、Re、Rg1、Rg2、Rh，20-O-葡萄糖人參皂苷Rf，三七皂苷(Notoginsenoside)R1、R2、R3、R4，七葉膽皂苷(Gypeno-side)X VII，尚含人參皂苷Rb2。還含揮發(fā)油，有α-及β-愈創(chuàng)烯(α-，β-guaiene)，另外有α-古巴烯(α-copaene)、δ-愈創(chuàng)烯、花柏烯(cuparene)、α-，β-，γ-欖香烯(α-，β-，γ-elemene)、α-依蘭油烯(α-muurolene)、α-古蕓烯(α-gurjunene)、十六酸甲酯、十六酸乙酯、十七碳二烯酸甲酯、十八碳二烯酸乙酯、鄰苯二甲酸二叔丁酯(benzene-diformic acid ditert-butylate)、十八碳二烯酸、異丙苯、環(huán)十二碳酮(cy-clodode-canone)、1-甲基-4-過氧甲硫基[2，2，2]辛烷、十四烷、十六烷、十七烷、十八烷、十九烷、廿烷、廿一烷、廿二烷等。水提取液中含一種具止血活性的三七素(N-oxalo-L-α，β-diaminopro-pionic acid)。另含槲皮素、三七黃酮B、β-谷甾醇、β-谷甾醇-D-葡萄糖苷、蔗糖。三七中的皂苷類成分是目前研究最多，藥效活性最為顯著的成分，具有強心，收縮血管，縮短凝血時間及凝血酶原形成時間的作用，現(xiàn)已用于治療出血性紫癜。對血壓的影響是先升高后使之下降。大劑量能擴張血管，增加冠狀動脈血流量，減慢心率，減少心肌耗氧量，現(xiàn)已用于治療冠心病。
目前，從三七中制備總皂苷的工藝尚有一些文獻及專利報道，但總體而言，存在工藝步驟繁瑣，產(chǎn)物純度不高，質(zhì)量控制水平低下三方面不足。
現(xiàn)有技術(shù)從三七中制備總皂苷的步驟較為繁瑣或關(guān)鍵步驟技術(shù)要求較高，難以實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)或生產(chǎn)成本太高。如專利1(CN01108591.6)所公開的方法為了去除三七中的糖類、黃酮類以及色素等物質(zhì)，使用了大孔樹脂和離子交換樹脂兩種類型的樹脂，工藝復(fù)雜，經(jīng)過提取、澄清、脫色、脫糖、噴霧干燥等多道步驟；專利2(CN93105774.4)更是采用了浸泡、粉碎、浸提、精濾、濃縮、層析、脫色、過濾、濃縮、干燥等十道工序，并且先后使用了氧化鋁和活性炭兩種脫色劑，干燥則使用了丙酮干燥和真空干燥；專利3(CN02131193.5)所公開的方法使用了季胺基樹脂進行純化。工藝步驟繁多不但會導(dǎo)致產(chǎn)物損失增加、得率下降，也會影響到工業(yè)化生產(chǎn)效率，提高生產(chǎn)成本。專利4(CN200410091532.7)所公開的方法則使用了制備型高效液相色譜儀進行分離。制備液相等要求較高的生產(chǎn)條件現(xiàn)階段不可能在工業(yè)生產(chǎn)中推廣運用。本發(fā)明所公開的方法簡便，可操作性強，只需提取后經(jīng)大孔樹脂純化即可，利于大規(guī)模生產(chǎn)運用，并且能夠大幅降低生產(chǎn)成本。
此外，現(xiàn)有工藝技術(shù)制備三七總皂苷存在純度不高，產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)低等問題。中華人民共和國藥典(2005版第一部)中規(guī)定三七中總皂苷的含量測定采用的是高效液相色譜法，相對于傳統(tǒng)的紫外分光光度法，其準(zhǔn)確度和專屬性均優(yōu)，而專利1(CN01108591.6)采用傳統(tǒng)的紫外分光光度法來對總皂苷質(zhì)量進行評價，而僅用高效液相法對其中Rg1，Rb1，R1三個單體皂苷進行含量測定。專利2(CN93105774.4)和專利3(CN02131193.5)中使用高效液相色譜法測定產(chǎn)品中皂苷含量分別為88％和60％，可控成分含量不高，這必然影響三七總皂苷在臨床用藥的安全性和有效性，也不利于突破進入國際市場的技術(shù)壁壘。本發(fā)明所公開的方法在簡單工序的基礎(chǔ)上實現(xiàn)了高純度、高產(chǎn)率，使用高效液相法測定總皂苷，純度可達95％，總皂苷從藥材到產(chǎn)物中的轉(zhuǎn)移率在90％以上。尤其是在大孔樹脂純化過程中，經(jīng)過大量的實驗證明，樣品上樣后采用一定濃度的氨水溶液沖洗，能有效除去酚性成分，極大地提高了總皂苷的含量(經(jīng)實驗證明，總皂苷含量能從80％提高到95％)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，提供一種從中藥三七中提取純化總皂苷的制備方法，包括藥材用醇水溶液提取，提取液濃縮用大孔吸附樹脂柱分離的步驟。
具體通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)(1)三七藥材粉碎成過20目篩的粉末或粒徑小于1cm的顆粒，去除雜質(zhì)，烘干，用含濃度為0-95％的乙醇水溶媒滲濾，超聲，熱回流提取，溶劑用量5-20倍量，提取1-3次，每次0.5-2小時，提取液減壓濃縮富集；(2)濃縮液上D101大孔樹脂，依次以水、氨水、醇水洗脫，先用水沖洗3-6個柱體積(BV)，再用0.05％-3％氨水沖洗3-6BV，再用水沖洗至pH＝7，最后用20-80％乙醇洗脫4-8BV，收集洗脫液，濃縮，干燥，即得三七總皂苷精制物。
步驟(1)中三七藥材粉碎成粒徑1mm-10mm的顆粒狀，以含濃度為30-95％的乙醇水溶媒滲濾，溶劑用量6-15倍量，熱回流提取1-2次，每次1-2小時。
步驟(1)中，三七藥材粉碎成3mm-8mm的顆粒狀，以含濃度為65-75％的乙醇水溶液，溶劑用量10-12倍量，熱回流提取2次，每次2小時。
步驟(2)中樣品上D101大孔樹脂，先用水沖洗4-6個柱體積，再用0.05％-1％氨水沖洗4-6個柱體積，再用水沖洗至pH＝7，再用20-30％乙醇沖洗3-5個柱體積，最后用60-80％乙醇洗脫3-6個柱體積，收集洗脫液，回收溶劑得三七皂苷精制物。
步驟(2)中，樣品上樣后，先用水沖洗4-5個柱體積(BV)，再用0.05-0.1％氨水沖洗4-5BV，再用水沖洗至pH＝7，再用20-30％乙醇沖洗4-5BV，最后用60-70％乙醇洗脫5-6BV，收集洗脫液，濃縮，干燥，得三七總皂苷精制物。
按照本發(fā)明的方法制成的三七總皂苷，可制成片劑、膠囊、注射劑等多種藥劑學(xué)上所說的劑型，也可配合其它藥物或組分一起制成制劑使用。
本發(fā)明所述方法的有益之處在于所述方法操作簡便，提取只需乙醇水溶液，分離只需使用一次大孔樹脂柱；終產(chǎn)物三七總皂苷純度高，可達95％以上；在過大孔樹脂柱時，以氨水沖洗，能有效去除三七中黃酮、酚酸類成分，提高皂苷得率(總皂苷得率從80％提高到95％以上)；對總皂苷中5個主要成分R1，Rg1，Re，Rd，Rb1以HPLC進行含量測定，同時HPLC指紋圖譜分析結(jié)果證明產(chǎn)品穩(wěn)定性和均一性良好。本發(fā)明方法設(shè)計合理，低成本、易操作、穩(wěn)定性好、質(zhì)控更嚴(yán)格、易于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。


圖1為五種三七中含量最高的單體皂苷進行定量分析。
具體實施例方式
本發(fā)明結(jié)合實施例作進一步的說明，應(yīng)該理解下述各實施例僅用于說明本發(fā)明而并非對本發(fā)明的限制。
實施例一取三七藥材粗顆粒(粒徑約1cm)500g，50℃干燥6小時，加8倍量30％乙醇微沸狀態(tài)加熱回流提取2次，每次1小時，提取液過濾，合并，減壓濃縮至0.5g/mL(生藥量)，上D101大孔樹脂。用4倍量柱體積去離子水沖洗，棄去，繼續(xù)用4BV 30％乙醇溶液沖洗，棄去，最后用5BV 70％乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮至無醇，冷凍干燥，即得三七總皂苷。經(jīng)HPLC測定，精制物中三七皂苷R12％、人參皂苷Rg115％、人參皂苷Rb19％、人參皂苷Rd 3％、人參皂苷Re 1％，總皂苷含量達30％。
實施例二取三七藥材粗顆粒(粒徑約1cm)500g，50℃干燥6小時，加15倍量40％乙醇微沸狀態(tài)加熱回流提取1次，2小時，提取液過濾，合并，減壓濃縮至0.5g/mL(生藥量)，上D101大孔樹脂。用5倍量柱體積去離子水沖洗，棄去，再用4BV 1％氨水沖洗，棄去，然后用去離子水沖洗至流出液pH＝7，最后用6BV 30％乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮至無醇，冷凍干燥，即得三七總皂苷。經(jīng)HPLC測定，精制物中三七皂苷R14％、人參皂苷Rg130％、人參皂苷Rb115％、人參皂苷Rd 5％、人參皂苷Re 3％，總皂苷含量達57％。
實施例三取三七藥材粗顆粒(粒徑約1cm)500g，50℃干燥6小時，加18倍量50％乙醇微沸狀態(tài)加熱回流提取1次，1小時，提取液過濾，合并，減壓濃縮至0.5g/mL(生藥量)，上D101大孔樹脂。用4倍量柱體積去離子水沖洗，棄去，再用4BV 0.1％氨水沖洗，棄去，然后用去離子水沖洗至流出液pH＝7，最后用5BV 60％乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮至無醇，冷凍干燥，即得三七總皂苷。經(jīng)HPLC測定，精制物中三七皂苷R14％、人參皂苷Rg126％、人參皂苷Rb116％、人參皂苷Rd 5％、人參皂苷Re 4％，總皂苷含量達55％。
實施例四取三七藥材顆粒(1mm-10mm)500g，50℃干燥6小時，加12倍量50％乙醇微沸狀態(tài)加熱回流提取2次，每次2小時，提取液過濾，合并，減壓濃縮至0.5g/mL(生藥量)，上D101大孔樹脂。用3倍量柱體積去離子水沖洗，棄去，再用3BV 0.05％氨水沖洗，棄去，然后用去離子水沖洗至流出液pH＝7，繼續(xù)用4BV 20％乙醇溶液沖洗，棄去，最后用5BV 50％乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮至無醇，冷凍干燥，即得三七總皂苷。經(jīng)HPLC外標(biāo)法測定，精制物中三七皂苷R16％、人參皂苷Rg142％、人參皂苷Rb123％、人參皂苷Rd 7％、人參皂苷Re 3％，總皂苷含量達81％。
實施例五取三七藥材顆粒(1mm-10mm)500g，50℃干燥6小時，加15倍量60％乙醇微沸狀態(tài)加熱回流提取1次，1小時，提取液過濾，合并，減壓濃縮至0.5g/mL(生藥量)，上D101大孔樹脂。用3倍量柱體積去離子水沖洗，棄去，再用5BV 0.5％氨水沖洗，棄去，然后用去離子水沖洗至流出液pH＝7，繼續(xù)用4BV 20％乙醇溶液沖洗，棄去，最后用6BV 40％乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮至無醇，冷凍干燥，即得三七總皂苷。經(jīng)HPLC外標(biāo)法測定，精制物中三七皂苷R17％、人參皂苷Rg138％、人參皂苷Rb120％、人參皂苷Rd 8％、人參皂苷Re 3％，總皂苷含量達76％。
實施例六取三七藥材顆粒(3mm-8mm)500g，50℃干燥6小時，加12倍量50％乙醇微沸狀態(tài)加熱回流提取3次，每次0.5小時，提取液過濾，合并，減壓濃縮至0.5g/mL(生藥量)，上D101大孔樹脂。用3倍量柱體積去離子水沖洗，棄去，再用3BV 2％氨水沖洗，棄去，然后用去離子水沖洗至流出液pH＝7，繼續(xù)用4BV 30％乙醇溶液沖洗，棄去，最后用6BV 50％乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮至無醇，冷凍干燥，即得三七總皂苷。經(jīng)HPLC外標(biāo)法測定，精制物中三七皂苷R17％、人參皂苷Rg135％、人參皂苷Rb122％、人參皂苷Rd 6％、人參皂苷Re 3％，總皂苷含量達73％。
實施例七取三七藥材顆粒(3mm-8mm)500g，50℃干燥6小時，加10倍量70％乙醇微沸狀態(tài)加熱回流提取2次，每次2小時，提取液過濾，合并，減壓濃縮至0.5g/mL(生藥量)，上D101大孔樹脂。用4倍量柱體積去離子水沖洗，棄去，再用4BV 0.05％氨水沖洗，棄去，然后用去離子水沖洗至流出液pH＝7，繼續(xù)用4BV 30％乙醇溶液沖洗，棄去，最后用5BV 70％乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮至無醇，冷凍干燥，即得三七總皂苷。經(jīng)HPLC外標(biāo)法測定，精制物中三七皂苷R18％、人參皂苷Rg144％、人參皂苷Rb128％、人參皂苷Rd 10％、人參皂苷Re 5％，總皂苷含量達95％以上。
實施例八三七總皂苷的含量測定色譜條件 色譜柱Agilent Extend-C18柱(4.6mm×250mm，5μm)；采用梯度洗脫，流動相A相為水，流動相B相為乙腈，洗脫梯度0min，20％B；30min，20％B；55min，46％B；65min，55％B；70min，55％B；72min，95％B；80min，95％B。流速1.0mL·min-1；檢測波長203nm；柱溫15℃；進樣量5μL。
供試品溶液的制備 稱取本品，用甲醇溶液溶解在容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，即得。
測定方法 精密吸取供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得。
實施例九滴丸的制備取實施例七的三七總皂苷0.5g與10.5g聚乙二醇-6000混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸滴灌中，藥液滴至6～8℃液體石蠟中，除油，制得滴丸300粒。
實施例十凍干粉針劑的制備取降香油1.5g，加入到13ml飽和的羥丙基β-環(huán)糊精中，攪拌溶解，濾過，濾液低溫干燥得降香油和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。除上述降香油合羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末外，再取實施例七的三七總皂苷0.5g、甘露醇5.5g、依地酸鈣鈉0.9g和蒸餾水2ml，上述組分混勻后，冷凍干燥，分裝350支，即得。
實施例十一片劑的制備取實施例七中三七總皂苷適量與微晶纖維素混合均勻，加3％聚維酮乙醇溶液制軟材，過18目篩制顆粒，60℃干燥1小時，整粒，加入滑石粉適量，混勻，壓片，即得。
實施例十二膠囊的制備取實施例七中三七總皂苷與花生油按2∶18的比例水溶式不銹鋼攪拌灌中，同時加入適量明膠和甘油混合，放出再用膠體磨磨漿，磨出的混合液攪拌，制成藥液；將甘油與蒸餾水在40-50℃溫度下攪拌混溶，再將甘油液溫至80-90℃，取明膠加入其中混合攪拌，直至全部溶化成膠液，然后在60℃溫度下使膠液靜置4小時，用制板機制成膠板供制丸工序使用；將上述制成的藥液和膠板送入壓丸機制丸，然后在22-25℃溫度下吹風(fēng)4小時作滾筒定型，又在25-30℃溫度下吹風(fēng)干燥16-20小時，檢選合格膠丸，用95％乙醇清洗，在25-30℃下吹風(fēng)干燥4小時，即得。
實施例十三注射液的制備取實施例七中三七總皂苷適量用40℃注射用水溶解，加入適量藥用載體等滲劑，調(diào)節(jié)溶液的pH值為7.0-8.0，加注射用水至全量，用超濾器超濾除熱源，測定pH值后，用膜過濾，分裝后，高壓滅菌，檢驗、包裝，即得。
實施例十四三七總皂苷對大鼠急性心肌缺血的影響1、實驗材料1.1藥品與試劑三七總皂苷，按實施例七方法制備。
鹽酸維拉帕米注射液，上海禾豐制藥有限公司，批號6E12001。
鹽酸利多卡因注射液，浙江誠意藥業(yè)有限公司，批號20060422。
水合氯醛，分析純，國藥集團化學(xué)試劑有限公司，批號T20060922TTC，Sigma公司CK檢測試劑盒，寧波亞太生物技術(shù)有限責(zé)任公司，批號06090102。
LDH檢測試劑盒，寧波亞太生物技術(shù)有限責(zé)任公司，批號06060101。
1.2實驗器材大鼠灌胃針，2ml注射器，手術(shù)器械，小動物呼吸機，恒溫水浴鍋，電子天平，酶標(biāo)儀1.3實驗動物SD大鼠，160-180g，雄性，浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院，許可證SCXK(浙)2003-0001。
2、實驗方法2.1分組給藥160-180g雄性SD大鼠，隨機分作四組假手術(shù)組，模型組，陽性藥組，三七組。陽性藥組，腹腔注射給予維拉帕米0.5mg/kg；三七組，灌胃給予三七總皂苷50mg/kg；假手術(shù)組和模型組灌胃給予等體積生理鹽水。各組連續(xù)給藥7天。
2.2模型復(fù)制第7次給藥后，各組動物腹腔注射300mg/kg水合氯醛麻醉。仰臥位固定于手術(shù)板上。后肢肌肉注射利多卡因10mg/kg。胸部正中切開皮膚，3、4肋間開胸，擠出心臟，結(jié)扎冠狀動脈前降支(假手術(shù)組穿線而不結(jié)扎)。結(jié)扎點定位于肺動脈圓錐和左心耳交界下2mm處。
2.3樣品采集造模后24h，腹腔注射300mg/kg水合氯醛麻醉。下腔靜脈抽血，供制備血清。開胸，取出心臟，生理鹽水洗滌，除去血液，剪掉心房以及與心室相連的血管。心室切成等厚的五片，置于1％TTC中，37℃水浴5min染色，正常心肌組織染成磚紅色，壞死組織不染色，呈灰白色。取出心臟切片，生理鹽水洗掉多余TTC，10％甲醛溶液固定過夜。
2.4藥物作用評價檢測血清CK、LDH，按試劑盒說明書操作。甲醛固定過夜的心臟切片，分離呈磚紅色的正常組織和不染色的壞死組織。壞死組織，以及整個心室稱重，計算梗死率(％)梗死率％＝壞死心肌重mg/心室總重mg×100％3、實驗結(jié)果結(jié)果顯示，模型組血清CK、LDH含量，較假手術(shù)組明顯升高，梗死率為20.9±3.5％。陽性藥維拉帕米能有效降低梗死率，以及血清CK、LDH含量。提示模型復(fù)制成功。
受試藥物三七總皂苷能顯著降低心肌梗死率(15.0±3.1％)，與模型組比較差異有顯著意義(P＜0.01)。同時三七組血清CK、LDH含量較模型組明顯降低，差異有顯著性意義(P＜0.05，P＜0.01)。具體數(shù)據(jù)見表1。
表1三七總皂苷(A2)對大鼠急性心肌缺血損傷的影響(X±SD)

注與假手術(shù)組比較##P＜0.01；與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01
4、結(jié)論按本發(fā)明方法制備的三七總皂苷對大鼠急性心肌缺血損傷具有明顯的保護作用，能顯著降低心肌梗死率。
實施例十五本發(fā)明所公開的方法與現(xiàn)有技術(shù)相比的另一個優(yōu)勢在于能對三七總皂苷進行較好的質(zhì)量控制。本發(fā)明建立了高效液相色譜的分析方法，對R1、Rg1、Re、Rb1、Rd這五種三七中含量最高的單體皂苷進行定量分析，樣品分離度較好(參見附圖1)，滿足定量要求。同時，本工藝穩(wěn)定性和重現(xiàn)性好，用本發(fā)明所述方法進行六次重復(fù)實驗，制得六批三七總皂苷，進行液相分析，結(jié)果以上五種單體皂苷含量RSD均在5％以內(nèi)。
綜合以上所述，用本發(fā)明所述方法制備三七總皂苷具有工藝簡單，得率較高，重現(xiàn)性好的優(yōu)點，同時，依據(jù)本發(fā)明所建立的分析方法能對三七總皂苷進行質(zhì)量控制。表2為本發(fā)明所述方法與現(xiàn)有技術(shù)之間在工藝步驟、總皂苷測定方法及含量等幾方面的對比。
表2本發(fā)明所述方法與現(xiàn)有技術(shù)的對比

權(quán)利要求
1.一種從中藥三七中提取純化總皂苷的制備方法，其特征通過以下步驟實現(xiàn)(1)三七藥材粉碎成過20目篩的粉末或粒徑小于1cm的顆粒，去除雜質(zhì)，烘干，用含濃度為0-95％的乙醇水溶媒滲濾，超聲，熱回流提取，溶劑用量5-20倍量，提取1-3次，每次0.5-2小時，提取液減壓濃縮富集；(2)濃縮液上D101大孔樹脂，依次以水、氨水、醇水洗脫，先用水沖洗3-6個柱體積，再用0.05％-3％氨水沖洗3-6個柱體積，再用水沖洗至pH＝7，最后用20-80％乙醇洗脫4-8個柱體積，收集洗脫液，濃縮，干燥，即得三七總皂苷精制物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從中藥三七中提取純化總皂苷制備方法，其特征是步驟(1)中三七藥材粉碎成粒徑1mm-10mm的顆粒狀，以含濃度為30-95％的乙醇水溶媒滲濾，溶劑用量6-15倍量，熱回流提取1-2次，每次1-2小時。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從中藥三七中提取純化總皂苷制備方法，其特征是步驟(1)中三七藥材粉碎成粒徑3mm-8mm的顆粒狀，以含濃度為65-75％的乙醇水溶液，溶劑用量10-12倍量，熱回流提取2次，每次2小時。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從中藥三七中提取純化總皂苷制備方法，其特征是步驟(2)中樣品上D101大孔樹脂，先用水沖洗4-6個柱體積，再用0.05％-1％氨水沖洗4-6個柱體積，再用水沖洗至pH＝7，再用20-30％乙醇沖洗3-5個柱體積，最后用60-80％醇洗脫3-6個柱體積，收集洗脫液，回收溶劑得三七皂苷精制物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從中藥三七中提取純化總皂苷制備方法，其特征是步驟(2)中樣品上D101大孔樹脂，先用水沖洗4-5個柱體積，再用0.05％-0.1％氨水沖洗4-5個柱體積，再用水沖洗至pH＝7，再用20-30％乙醇沖洗4-5個柱體積，最后用60-70％乙醇洗脫5-6個柱體積，收集洗脫液，回收溶劑得三七皂苷精制物。
全文摘要
一種從中藥三七中提取純化總皂苷的制備方法，通過將三七藥材粉碎成過粉末或顆粒，去除雜質(zhì)，烘干，用含濃度為0－95％的乙醇水溶媒滲濾，熱回流提取，提取液減壓濃縮富集，將濃縮液上D
文檔編號A61P9/00GK101049331SQ20071006849
公開日2007年10月10日 申請日期2007年5月11日 優(yōu)先權(quán)日2007年5月11日
發(fā)明者賀慶, 劉靂, 程翼宇, 瞿海濱, 水文波, 竇靜, 霍楊, 葛志偉 申請人:浙江大學(xué)