專(zhuān)利名稱(chēng)：：吲哚取代咪唑啉-2-酮類(lèi)衍生物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬化合物制備，主要涉及吲哚取代咪唑啉一2—酮類(lèi)衍生物的制備方法及用途。
背景技術(shù)：
：80年代初，化學(xué)研究工作者Pettit小組從非洲的植物Combretumcaffrum中分離得到了一系列的Combretastatin化合物，其中有二芳基乙烯化合物CombretastatinA-l、A-2、A國(guó)3、A-4、A-5、A畫(huà)6;二節(jié)基化合物CombretastatinB畫(huà)l、B-2、B-3、B-4;CombretastatinC-l;大環(huán)內(nèi)酯化合物CombretastatinD-l、D畫(huà)2以及Phenathrene和Dihydrophenathrene。體外的抑制腫瘤細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)表明這些化合物均具有較高的活性(ED5o=0.003~18^ig/mL)。因此，其結(jié)構(gòu)的簡(jiǎn)單性以及在抗腫瘤方面尤其是耐藥腫瘤方面的特有的活性使得它們?cè)絹?lái)越受到人們的關(guān)注。CombretastatinA-4，作為Combretastatin家族中活性最好、結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的一個(gè)化合物，最早于1982年己經(jīng)被Pettit和其合作者分離及鑒定結(jié)構(gòu)。研究表明，其抗腫瘤機(jī)制可能是通過(guò)與微管蛋白的快速結(jié)合來(lái)實(shí)現(xiàn)其抗有絲分裂的作用；另一方面，也有研究報(bào)道該化合物能靶向破壞腫瘤血管，而對(duì)正常組織的血管無(wú)破壞作用。盡管CA—4在體外具有細(xì)胞毒活性和抗微管蛋白聚合活性，但CA-4作為一種抗有絲分裂劑在體內(nèi)活性研究中僅顯示較弱的抗腫瘤活性，主要的原因是其水溶性差，順式二苯乙烯結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，易異構(gòu)化成反式構(gòu)型。鑒于這些原因，人們對(duì)其進(jìn)行了不斷的結(jié)構(gòu)修飾以期得到高效低毒的抗腫瘤試劑。其前藥磷酸鹽cA—4一p已處于臨床n以及m期研究中。構(gòu)效關(guān)系研究表明CA—4結(jié)構(gòu)中的兩個(gè)苯環(huán)處于順式構(gòu)型是保持活性的首要條件。因此人們利用四元環(huán)、五元環(huán)、六元環(huán)、稠雜環(huán)等剛性環(huán)取代乙烯橋鏈能在很大程度上保持了一定的活性。其次CA—4結(jié)構(gòu)中的3，4，5—三甲氧基苯基也是保持高度的細(xì)胞毒活性所必需的，而另一苯環(huán)3—羥基一4一甲氧基苯基可以被吲哚基，萘基等雜環(huán)取代能保持一定的活性，除此之外在該苯環(huán)上引入氨基等水溶性基團(tuán)，活性有所增加。本課題組的中國(guó)專(zhuān)利《咪唑一2—酮類(lèi)化合物及其制備方法和用途》申請(qǐng)?zhí)?00410052976.義，利用生物電子等排原理設(shè)計(jì)將咪唑啉一2_酮五元環(huán)引入。八一4結(jié)構(gòu)中，合成了一系列咪唑啉一2—酮類(lèi)CA—4類(lèi)似物，并進(jìn)行了初步的藥理學(xué)試驗(yàn)，結(jié)果表明該類(lèi)化合物具有明顯的抑制腫瘤細(xì)胞增生活性，是有前景的抗腫瘤試劑，為腫瘤的治療藥物的研究提供了新的思路。本發(fā)明的目的是提供一類(lèi)吲哚取代咪唑啉一2—酮類(lèi)衍生物，可用于制備抗腫瘤的藥物。本發(fā)明是在中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枮?00410052976.X的基礎(chǔ)上，結(jié)合CA—4構(gòu)效關(guān)系，對(duì)上述化合物作進(jìn)一步的結(jié)構(gòu)改造，設(shè)計(jì)在咪唑啉一2—酮母環(huán)上引入藥效團(tuán)吲哚環(huán)，以得到水溶性更好以及活性更佳的侯選化合物。本發(fā)明對(duì)上述咪唑啉一2—酮類(lèi)化合物分子中取代基的改變主要是，將申請(qǐng)?zhí)枮?00410052976.X提供的化合物結(jié)構(gòu)中3位的取代苯基改變?yōu)槿〈胚岘h(huán)，以及將l位氮原子上氫基、取代苯基氨甲?；淖?yōu)闅浠?、甲?；?、乙?；⑷〈倪胚峄奔柞；瑥亩玫搅艘幌盗行碌倪胚崛〈溥蜻?—酮類(lèi)衍生物。本發(fā)明提供的吲哚取代咪唑啉一2—酮類(lèi)衍生物具有如下結(jié)構(gòu)通式R/為H、2or3or4-F、2or3or4畫(huà)Cl、2or3or4-Br、2or3or4-N04、2or3or4-OC2H5、2or3or4-OCH3、2or3or4-CH3、2or3or4畫(huà)0H、2or3or4-N(CH3)2、3,4-(OCH3)2、3-N02-4-OCH3、3-NH2-4-OCH3、3-NH3+Cr-4-OCH3、3-OH-4-OCH3、3-OCH3-4-OH、4-OH-3，5-(OCH3)2、3，4，5-(OCH3)3;R2為H、CHO、C0CH3、CONH-(1//-indole-5-yl)、CONH-(1-methyl-l//-indole-5-yl)、CONH-(1-benzyl-1//畫(huà)indole誦5-yl);
發(fā)明內(nèi)容R3為H、CH3、Bn。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供吲哚取代咪唑啉一2—酮類(lèi)衍生物的制備方法，通過(guò)以下步驟制得反應(yīng)式l:IVb上述反應(yīng)式是用于制備目標(biāo)化合物IVa和IVb的反應(yīng)式，其中化合物I(取代a-氨基苯乙酮鹽酸鹽)可通過(guò)相應(yīng)的a—溴代苯乙酮制得(M.C.Rebstocketal,J.A.C.S.,1995,77,24-26),化合物II(取代的5—異氰酸酯—吲哚)可通過(guò)相應(yīng)5—氨基tl引哚和固體光氣反應(yīng)制得(W.A.Gregoryetal，J.Med.Chem.,1989:32，1673-1681),化合物1與化合物ffl在氮?dú)獗Ｗo(hù)下惰性溶劑中發(fā)生環(huán)合脫水反應(yīng)得到目標(biāo)化合物IVa和目標(biāo)化合物IVb。在反應(yīng)中，所用的溶劑可為苯，甲苯，二甲苯等，反應(yīng)溫度通常為80-140'C之間，所得目標(biāo)化合物IVa和IVb經(jīng)過(guò)柱層析可得純產(chǎn)物。然后再制成鹽酸鹽，醋酸鹽，草酸鹽等生理可接受的鹽。反應(yīng)式2:R2IVc上述反應(yīng)式是用于制備目標(biāo)化合物IVc的反應(yīng)式，其中化合物I以及化合物II的制備方法同前，化合物III(取代a-乙酰氨基苯乙酮，R2=C0CH3;取代a-甲酰氨基苯乙酮，R2=CHO)可通過(guò)相應(yīng)的化合物I按文獻(xiàn)方法制得(M.A.Ghassanetal,J.HeterocyclicChem.，1987,24,297-301&A.Jacketal，J.Org.Chem.,1986,51,3374-3376)?；衔颕I與化合物m在氮?dú)獗Ｗo(hù)下在惰性溶劑中發(fā)生環(huán)合脫水反應(yīng)得到目標(biāo)化合物IVc(R2=CHO,COCH3)。在反應(yīng)中，所用的溶劑可為苯，甲苯，二甲苯等，反應(yīng)溫度通常為80-140'C之間，所得目標(biāo)化合物IVc經(jīng)過(guò)柱層析可得純產(chǎn)物。然后再制成鹽酸鹽，醋酸鹽，草酸鹽等生理可接受的鹽。本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供吲哚取代咪唑啉一2—酮類(lèi)衍生物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。初步的體外篩選發(fā)現(xiàn)它們對(duì)多種腫瘤細(xì)胞株，包括人白血病細(xì)胞K562、人胃癌SGC-7901、人肺小細(xì)胞癌A549、人前列腺癌細(xì)胞PC-3等均有抑制增殖作用，其中大部分化合物對(duì)各種腫瘤細(xì)胞株的半數(shù)抑制濃度(IC5。)均達(dá)到一級(jí)，與陽(yáng)性對(duì)照藥秋水仙堿和多烯紫杉醇相比，個(gè)別化合物顯示了更高的抑制腫瘤細(xì)胞增殖活性。本發(fā)明的特點(diǎn)是以天然產(chǎn)物CombretastatinA—4為先導(dǎo)化合物，利用咪唑啉一2—酮五元雜環(huán)代替其乙烯鏈，用吲哚環(huán)代替CA—4中苯環(huán)而得到的一系列咪唑啉酮類(lèi)衍生物。這是一類(lèi)結(jié)構(gòu)全新的化合物，初步的藥理活性篩選試驗(yàn)表明多數(shù)化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞有體外抑制增殖作用，部分化合物具有顯著的抑制增殖作用，IC5o達(dá)到pM級(jí)。本發(fā)明設(shè)計(jì)合理，制備方法簡(jiǎn)便，適于實(shí)用。具體實(shí)施方式本發(fā)明結(jié)合實(shí)施例作進(jìn)一步的說(shuō)明。以下的實(shí)施例是說(shuō)明本發(fā)明的，而不是以任何方式限制本發(fā)明。實(shí)施例l:l一(1/f一吲哚一5—基)一5—(4一溴苯基)一4一咪唑啉一2—酮(化合物IVal)的制備將0.53g(4mmo1)5—氨基一l/f一吲哚、4mL無(wú)水甲苯加至反應(yīng)瓶中，冰鹽浴冷卻，緩慢滴入由0.79g固體光氣和6mL無(wú)水甲苯配制而成的溶液，滴畢，氮?dú)獗Ｗo(hù)下繼續(xù)攪拌反應(yīng)1小時(shí)后，撤去冰鹽浴，室溫反應(yīng)30分鐘后，慢慢加熱升溫至回流，4小時(shí)后，反應(yīng)溶液變澄清，加入4一溴一a—氨基苯乙酮鹽酸鹽0.38g(2mmo1),補(bǔ)加無(wú)水甲苯10mL，加熱回流過(guò)夜。冷卻，減壓回收溶劑，殘留物用氯仿20mLx2洗滌，合并濾液，飽和NaCl溶液洗滌，有機(jī)層用無(wú)水Na2S04干燥后，減壓回收溶劑，得褐色固體，硅膠柱層析分離(洗脫劑乙酸乙酯石油醚=1:3)，得黃色固體(化合物IVal)，收率29.5%。熔點(diǎn)170誦172。C。&NMR(S，CDC13):6.57(s，1H,indoleH)，7.21(s，1H，indoleH),7.28-7.31(dd，1H,/=1.6Hz，8.8Hz,indoleH),7.38-7.40(d,1H,/=8.8Hz,indoleH)，7.42-7.44(d,2H，/=8.8Hz，aromaticH),7.56-7.59(d,2H，《/=8.8Hz，aromaticH):7.61(s,1H，imidazolin-2-oneH)，7.89-7.90(d,1H,2.4Hz，indoleH),8.21(s,1H，imidazolin-2-oneN-H),9.86(s，1H，indoleN-H).實(shí)施例2:N，3—二(1//一吲哚—5—基)—4一(2，4一二氟苯基)一4一咪唑啉一2—酮一1一甲酰胺(化合物IVbl)的制備將0.58g(4mmo1)5—氨基一1H—吲哚、4mL無(wú)水甲苯加至反應(yīng)瓶中，冰鹽浴冷卻，緩慢滴入由0.79g固體光氣和6mL無(wú)水甲苯配制而成的溶液，滴畢，氮?dú)獗Ｗo(hù)下繼續(xù)攪拌反應(yīng)1小時(shí)后，撤去冰鹽浴，室溫反應(yīng)30分鐘后，慢慢加熱升溫至回流，4小時(shí)后，反應(yīng)溶液變澄清，加入2，4一二氟一a—氨基苯乙酮鹽酸鹽0.38g(2mmo1)，補(bǔ)加無(wú)水甲苯10mL，加熱回流過(guò)夜。冷卻，抽濾，濾餅用氯仿20mLx2洗滌，合并濾液，飽和NaCl溶液洗滌，有機(jī)層用無(wú)水Na2S04干燥后，減壓回收溶劑，得黃褐色固體，硅膠柱層析分離(洗脫劑乙酸乙酯石油醚=1:3)，得黃色固體(化合物IVbl)，收率55.5%。熔點(diǎn)115-117°C。NMR(S，CDC13):6.55(s,2H，indoleH),6.71-6.76(m，2H，indoleH)，6.99-7.07(m,3H,indoleH),7.23(s，1H，indoleH)，7.29-7.41(m,4H，indoleH,aromaticHx3),7.52(s，1H，imidazolin-2-oneH)，7.98(s，1H，indoleH),8.21(s,1H，indoleN-H),8.37(s,1H，indoleN國(guó)H).10.77(s,1H，-OC-N-H-).實(shí)施例3:N，3—二(1/f一吲哚一5—基)一4—(4—氯苯基)一4一咪唑啉一2—酮一1一甲酰胺(化合物IVb2)的制備操作過(guò)程與實(shí)施例2同，只是用4一氯一a—氨基苯乙酮鹽酸鹽代替2，4一二氟一a—氨基苯乙酮鹽酸鹽。得到淡黃色固體(化合物IVb2)，收率49.6%。熔點(diǎn)239-241。C。NMR(5，DMS0-c/6):5.57-5.59(d，1H,/=8.0Hz,indoleH),6.43-6.48(d，2H，《/=20Hz，indoleH),6.95-6.97(d,1H,/=8.4Hz，indoleH)7.15-7.20(d,2H,/=8.8Hz,aromaticH)，7.29-7.31(d,2H,/=8.8Hz，aromaticH),7.37-7.39(d,2H,/=6.0Hz,indoleH)，7.41-7.45(m，3H，indoleHx2，imidazolin-2-oneH),7.55(s，1H,indoleH),7.83(s,1H,indoleH)，10.77(s，1H,-0=C-N-H-)，11.14(s，1H，indoleN-H),11.37(s,1H,indoleN鄰.實(shí)施例4:N，3—二(1一甲基一1/7—B引哚一5—基)一4一(2，4一二氟苯基)一4一咪唑啉一2—酮一1一甲酰胺(化合物IVb3)的制備操作過(guò)程與實(shí)施例2同，只是用1一甲基一5—氨基一1/Z—吲哚代替5—氨基一1H—吲哚。得到黃色固體(化合物IVb3),收率58.6%。熔點(diǎn)220-222°C。&NMR(S,CDC13):3.78-3.80(d，6H,J=6.4Hz，N-CH3x2),6.46-6.47(d，1H，/=2.8Hz,indoleH),6.68-6.78(m，2H，aromaticH，indoleH),7.02-7.05(dd,1H，《/=2.0Hz,8.8Hz，indoleH),7.05-7.06(d,1H,/=2.8Hz，indoleH)，7.10-7.11(d，2H,/=3.2Hz,indoleH),7.27-7.35(m，3H，aromaticH，indoleHx2),7.40(s，1H，imidazolin-2-oneH),7.48-7.49(d，1H，《/=1.6Hz,indoleH)，7.95-7.96(d，1H,/=2,0Hz,indoleH),10.91(s,1H,-O-C-N-H-).實(shí)施例5:N，3—二(1一甲基一1//一吲哚一5—基)一4—(4一氯苯基)一4一咪唑啉一2—酮一1一甲酰胺(化合物IVb4)的制備操作過(guò)程與實(shí)施例2同，只是用l一甲基5—氨基一1/Z—噴哚代替5—氨基一l/7—吲哚，4一氯一a—氨基苯乙酮鹽酸鹽代替2，4—二氟一a—氨基苯乙酮鹽酸鹽。得到黃色固體(化合物IVb4)，收率46.1%。熔點(diǎn)230-232°C。NMR(3，CDC13):3.78(s,3H，N-CH3),3.82(s，3H,N-CH3),6.46-6.47(d,1H,2.8Hz，indoleH),6.49-6.50(d，1H，/=2.4Hz，indoleH)，7.01-7.03(dd,1H，/=2.0Hz,8.8Hz，indoleH)，7.05-7.06(d,2H,/=2.8Hz,aromaticH),7.06-7.07(s,1H，indoleH),7.13-7.14(d,1H,/=3.2Hz,indoleH),7.17-7.19(d,2H,2.0Hz，aromaticH),7.29(s,1H，indoleH),7.31-7.32(d，1H，/=2.0Hz,indoleH)，7.34(s，IH,indoleH)，7.36(s，IH,imidazolin-2-oneH)，7.53-7.54(d，1H，/=2.0Hz，indoleH),7.94-7.95(d，1H，/=1.6Hz,indoleH)，10.88(s,IH,-OC國(guó)N-H誦).實(shí)施例6:N，3—二(1—芐基一l/f一吲哚—5—基)一4—(2，4一二氟苯基)一4一咪唑啉一2—酮一1一甲酰胺(化合物IVb5)的制備操作過(guò)程與實(shí)施例2同，只是用1一芐基一5—氨基一1/Z—吲哚代替5—氨基—吲哚。得到黃色固體(化合物IVb5)，收率63.4%。熔點(diǎn)175-177°C。!H麗R(S,CDC13):5.28(s,2H，CH2)，5.35(s,2H,CH2),6.44-6.45(d,1H,/=3.6Hz,indoleH),6,60-6,61(d,1H，《/=3.6Hz,indoleH),6.86-6.92(m,IH,aromaticH),6.96-6.99(m,2H，aromaticH)，7.05-7.08(m,3H,aromaticH),7.15-7.19(m,5H，aromaticH)，7.21-7.25(m,2H，aromaticH)，7.27-7.34(m，5H，imidazolin-2-oneH,indoleHx4),7.41-7,43(d,1H，/=8.8Hz,indoleH),7.68-7.69(d,1H，J=2.0Hz，indoleH)，7.82(s,1H,indoleH),7.95-8.01(m,1H，indoleH),10.91(s，1H,-OC-N國(guó)H國(guó)).實(shí)施例7:N，3—二(l一芐基—吲哚一5—基)一4—(4—氯苯基)一4一咪唑啉一2—酮一1一甲酰胺(化合物IVb6)的制備操作過(guò)程與實(shí)施例2同，只是用l一芐基一5—氨基一l/f—?jiǎng)傔岽?—氨基—吲哚，4一氯一a—氨基苯乙酮鹽酸鹽代替2，4_二氟一a—氨基苯乙酮鹽酸鹽。得到黃色固體(化合物IVb6)，收率65.3%。熔點(diǎn)177-179°C。&NMR(S,CDC13):5.22-5.24(d，4H，《/=7.6Hz,CH,2)，6,45-6.47(dd,2H,/=2.8Hz，6.8Hz,indoleH),6.87-6.89(d,1H，《/=8.8Hz，indoleH),6.96-7.08(m,10H，aromaticH，indoleH),7.11-7.25(m，10H,aromaticH，indoleH)，7.48(s，1H,imidazolin畫(huà)2-oneH),7.89(s，1H，indoleH),10.78(s,1H,-0=C-N-H-).實(shí)施例8:N，3_二(1一芐基一1//—吲哚一5—基)一4一(4一溴苯基)一4一咪唑啉一2—酮一1—甲酰胺(化合物IVb7)的制備操作過(guò)程與實(shí)施例2同，只是用l一芐基一5—氨基一17/—吲哚代替5—氨基一Lf/一吲哚，4一溴一a—氨基苯乙酮鹽酸鹽代替2，4一二氟一a—氨基苯乙酮鹽酸鹽。得到黃色固體(化合物IVb7)，收率59.8%。熔點(diǎn)197-199°C。!HNMR(S,CDC13):5.30-5.33(d,4H，《/=8.8Hz,CH2x2),6.53-6.56(dd,2H,/=3.2Hz，8.8Hz，indoleH),6.95-7.00(m,3H，aromaticH),7.08-7.14(m，3H,aromaticH)，7.19-7.20(d,1H，■/=3.6Hz，indoleH),7.23-7.25(m,2H,aromaticH):7.26-7.27(m，3H，aromaticH)，7.29-7.34(m，8H,aromaticH,indoleH),7.35(s,1H，imidazolin-2-oneH)，7.54-7.55(d,1H，J=1.6Hz,indoleH),7.96-7.97(d，1H，/=1.6Hz，indoleH),10.85(s，1H,畫(huà)OON-H-).實(shí)施例9:1—乙酰基一3—(li/—吲哚一5-基)一4—(2，4—二氟苯基)一4一咪唑啉一2—酮(化合物IVcl)的制備操作過(guò)程與實(shí)施例2同，只是用2，4一二氟一a—乙酰氨基苯乙酮代替2，4一二氟一a—氨基苯乙酮鹽酸鹽。得到黃色固體(化合物IVcl)，收率53.2%。熔點(diǎn)198-200。C。NMR(5,CDC13):2.75(s，3H,0=C-CH3),6.48-6.49(s,1H，indoleH),6.65-6.77(m,2H,aromaticH),6.91-6.94(dd,1H,/=2.0Hz,8.0Hz,indoleH),6.98-7.04(m,1H,indoleH)，7.19-7.21(m，1H,indoleH),7.25-7.26(m,1H，indoleH),7.28(s,1H，imidazolineH),7.44-7,45(d，1H，《/=1.2Hz，aromaticH)，8.41(s，1H，indoleN-H).實(shí)施例10:l—乙?；?—(1/f一吲哚一5—基)一4_(4—氯苯基)一4一咪唑啉一2—酮(化合物IVc2)的制備操作過(guò)程與實(shí)施例2同，只是用4一氯一a—乙酰氨基苯乙酮代替2，4一二氟一a—氨基苯乙酮鹽酸鹽。得到黃色固體(化合物IVc2)，收率43.2%。熔點(diǎn)222國(guó)224。C。^NMR(S，CDC13):2.74(s，3H，OC-CH3)，6.50(s，1H，indoleH),6.89-6.卯(d,1H,/=1.6Hz，indoleH),7.02-7.04(d,2H,/=8.0Hz,aromaticH),7.13-7.15(d,2H，《/=8.0Hz,aromaticH)，7.21(s,2H，indoleH),7.27-7.29(d，1H,/=8.8Hz:indoleH),7.49(s，1H，imidazolin-2國(guó)oneH),8.46(s,1H，indoleN國(guó)H).實(shí)施例ll:1—乙?；?—(1//一卩引哚一5—基)一4一(4一溴苯基)一4一咪唑啉一2—酮(化合物IVc3)的制備操作過(guò)程與實(shí)施例2同，只是用4一溴一a—乙酰氨基苯乙酮代替2，4一二氟一a—氨基苯乙酮鹽酸鹽。得到黃色固體(化合物Wc3)，收率48.2%。熔點(diǎn)188畫(huà)190。C。&NMR(5，CDC13):2.73(s，3H,OC-CH3)，6.53(s,1H,indoleH),6.91-6.94(dd,1H，/=2.0Hz,8.4Hz,indoleH)，6.96-6.98(d，2H,/=8.8Hz,aromaticH)，7.22(s,2H,indoleH)，7.29-7.32(d,2H，《/=8.8Hz，aromaticH),7.32(s,1H，indoleH),7.50(s，1H,imidazolin-2-oneH)，8.38(s,1H,indoleN國(guó)H).實(shí)施例12:1—乙?；?—(1//—吲哚一5—基)一4一(3，4—二甲氧基苯基)一4一咪唑啉一2—酮(化合物IVc4)的制備操作過(guò)程與實(shí)施例2同，只是用3，4一二甲氧基一a—乙酰氨基苯乙酮代替2，4一二氟一a—氨基苯乙酮鹽酸鹽。得到黃色固體(化合物IVc4),收率51.2%。熔點(diǎn)117-119°C。^NMR(5,CDC13):2.74(s，3H，0=C-CH3)，3.47(s,3H，0CH3)，3.80(s,3H，0CH3)，6.51-6.53(dd,2H,J=2.0Hz，6.0Hz，indoleH),6.67-6.75(m,2H，6.99(dd，1H,/=2.0Hz，8.8Hz,indoleH)，7.16(s，1H，aromaticH)，7.23-7.24(m,1H，indoleH),7.34-7.35(d,1H,/=8.8Hz,indoleH)，7.52(s,1H,imidazolin-2畫(huà)oneH)，8.35(s，1H，indoleN隱H).實(shí)施例13:1—乙酰基一3—(1/f一吲哚一5—基)_4一(4一甲氧基苯基)—4一咪唑啉一2—酮(化合物IVc5)的制備操作過(guò)程與實(shí)施例2同，只是用4一甲氧基一a—乙酰氨基苯乙酮代替2，4—二氟一a—氨基苯乙酮鹽酸鹽。得到黃色固體(化合物IVc5)，收率43.2%。熔點(diǎn)155-157。C。^NMR(5，CDC13):2.73(s，3H，OC-CH3),3.80(s，3H，OCH3)，6.51(s，1H，indoleH),6.69-6.71(d,2H，J=8.8Hz，aromaticH),6.92-6.96(m，2H，indoleH)，7.02-7.05(d,2H,/=8.8Hz，aromaticH),7.13(s,1H,indoleH)，7.22-7.23(m，1H,indoleH),7.51(s,1H,imidazolin國(guó)2-oneH),8.38(s,1H,indoleN-H).實(shí)施例14:l一乙?；?_(1—甲基一l/f一n引哚一5—基)_4一(4—氯苯基)_4—咪唑啉_2—酮(化合物IVc6)的制備操作過(guò)程與實(shí)施例2同，只是用l一甲基5—氨基一l/f一吲哚代替5—氨基—1//—吲哚，4一氯一a—乙酰氨基苯乙酮代替2，4一二氟一a—氨基苯乙酮鹽酸鹽。得到黃色固體(化合物IVc6)，收率51.4%。熔點(diǎn)159-161°C。&NMR(5,CDC13):2.73(s,3H,0=C-CH3),3.81(s，3H，N-CH3),6.46-6.47(d,1H，J=2.8Hz，indoleH),6.47-6.96(dd，1H,/=2.0Hz，8.0Hz,indoleH)，6.96-6.98(d，2H，/=8.8Hz，aromaticH)，7.04-7.05(d，1H,/=2.4Hz,indoleH)，7.13-7.15(d，2H,/=8.8Hz，aromaticH),7.21(s，1H，imidazolin-2畫(huà)oneH)，7.28-7.30(d,1H,■/=8.0Hz,indoleH),7.38-7.39(d,1H,/=1.6Hz，indoleH).實(shí)施例15:1—乙酰基一3—(1—甲基一lif—B引哚一5—基)一4—(4—溴苯基)一4一咪唑啉一2—酮(化合物IVc7)的制備操作過(guò)程與實(shí)施例2同，只是用1—甲基5-氨基—^I引哚代替5-氨基一l//一吲哚，4一溴一a—乙酰氨基苯乙酮代替2，4—二氟一a—氨基苯乙酮鹽酸鹽。得到黃色固體(化合物IVc7)，收率49.5%。熔點(diǎn)192-194°C。JHNMR(S,CDC13):2.73(s,3H，0=C-CH3),3.80(s,3H，N-CH3),6.46-6.47(d，1H，J=2.8Hz,indoleH),6.96-6.98(m,3H,aromaticH，indoleH)，7.10-7.11(d1H，J=2.8Hz,indoleH)，7.21(s，1H,indoleH),7.29-7.31(m，3H,aromaticH，imidazolin曙2-oneH),7.47-7.48(d,1H,/=8.8Hz,indoleH).實(shí)施例16:1—乙酰基一3—(1—甲基一1//一噴哚一5—基)一4—(3，4一二甲氧基苯基)一4一咪唑啉一2—酮(化合物IVc8)的制備操作過(guò)程與實(shí)施例2同，只是用1—甲基5—氨基一li/一吲哚代替5—氨基一1W—吲哚，3，4一二甲氧基一a—乙酰氨基苯乙酮代替2，4一二氟一a—氨基苯乙酮鹽酸鹽。得到黃色固體(化合物IVc8)，收率45.6X。熔點(diǎn)135-137。C。^NMR(S,CDC13):2.75(s,3H,0=C-CH3)，3.51(s，3H，OCH3),3.81(s，6H,OCH3,N-CH3),6.45-6.46(d，1H,/=2.0Hz,indoleH),6.58(s，1H，indoleH)，6.67-6.71(m，2H,aromaticH),7.01-7.03(d,1H,/=8.8Hz,indoleH)，7.10-7.11(d1H，/=2.8Hz,indoleH),7.17(s，1H，aromaticH),7.29-7.32(d，1H，《/=8.8Hz,indoleH),7.52(s,1H，imidazolin曙2-oneH).實(shí)施例17:1—乙?；?—(1—芐基一n引哚一5—基)一4一(2，4一二氟苯基)一4一咪唑啉—2—酮(化合物IVc9)的制備操作過(guò)程與實(shí)施例2同，只是用l一芐基一5—氨基一l/7—吲哚代替5—氨基一17/—吲哚。得到黃色固體(化合物IVc9)，收率38.6%。熔點(diǎn)192-194°C。&NMR(S，CDC13):2.72(s，3H，0=C-CH3),5.28(s,2H,CH2)，6.49-6.50(d，1H,/=2.8Hz,indoleH)，6.91-6.92(dd，1H,/=2.4Hz,8,8Hz,indoleH)，6.99-7.03(m,1H，indoleH)，7.09-7.10(m,3H，aromaticH),7.14-7.15(d,1H，《/=3.2Hz，indoleH),7.20-7.24(m，3H，aromaticH),7.27-7.29(m,3H，aromaticHx2,imidazolin-2國(guó)oneH)，7.45-7.46(d，1H，《/=2.0Hz，indoleH).實(shí)施例18:1—乙酰基一3—(l—芐基一l/7—吲哚一5—基)一4一(4—氯苯基)—4一咪唑啉一2—酮(化合物IVc10)的制備操作過(guò)程與實(shí)施例2同，只是用1一芐基一5—氨基一l/f一吲哚代替5—氨基一1//一吲哚，4一氯一a—乙酰氨基苯乙酮代替2，4—二氟一a—氨基苯乙酮鹽酸鹽。得到黃色固體(化合物IVc10)，收率45.2%。熔點(diǎn)163-165°C。NMR(5，CDC13):2.72(s，3H,0=C-CH3),5.31(s，2H,CH2)，6.52-6.53(d，1H，/=2.8Hz，indoleH),6.90-6.92(dd，1H,/=2.4Hz,8.0Hz，indoleH)，7.02-7.04(m,2H,aromaticH)，7.09-7.24(m，7H，aromaticHx5,indoleHx2),7.29-7.33(m，3H,aromaticHx2，imidazolin畫(huà)2-oneH)，7.49-7.50(d,1H，《/=8.8Hz，indoleH).實(shí)施例19:吲哚取代咪唑啉一2—酮類(lèi)衍生物對(duì)不同腫瘤細(xì)胞的體外抑制作用1.實(shí)驗(yàn)材料細(xì)胞株人白血病細(xì)胞K562、人胃癌SGC-7901、人肺小細(xì)胞癌A549、人前列腺癌細(xì)胞PC-3。培養(yǎng)基RPMI1640培養(yǎng)基，含10%小牛血清。藥物及配制藥物為上述所合成化合物IV，藥物溶于DMSO。2.實(shí)驗(yàn)方法將上述處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的腫瘤細(xì)胞，以2xl(^個(gè)/ml接種于96孔培養(yǎng)板中，每孔加細(xì)胞懸液200nl，在培養(yǎng)24h后，分別加入5種濃度的吲哚取代咪唑啉—2—酮類(lèi)化合物(0.08-50pg/ml)2^1，每個(gè)濃度設(shè)3個(gè)復(fù)孔。細(xì)胞在37°〇，5%C02培養(yǎng)箱中孵育72小時(shí)后，加入濃度為5mg/ml的MTT溶液10pl，繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)。吸去上清液，加入100DMSO搖勻，用酶標(biāo)儀于570nm波長(zhǎng)下測(cè)定各孔的OD值，細(xì)胞抑制率的計(jì)算公式為細(xì)胞抑制率％=(對(duì)照組OD值一用藥組OD值)/對(duì)照細(xì)胞OD值xl00。/。用Bliss法求出IC50。3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果吲哚取代咪唑啉一2—酮類(lèi)衍生物作用48小時(shí)后，分別測(cè)定IQo值。結(jié)果表明，多數(shù)化合物對(duì)各種腫瘤細(xì)胞均有不同程度的體外抑制作用，其中IC5()值小于10nM有化合物IVcl、1Vc2、IVc3、IVc7對(duì)K562人白血病細(xì)胞；化合物IVc2對(duì)A549非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；化合物IVc2對(duì)SGC-7901人胃癌；化合物IVcl、IVc2對(duì)人前列腺癌細(xì)胞PC-3。其中化合物IVa、IVc2、IVc3、IVc7對(duì)SGC-7901人胃癌作用的ICso值小于陽(yáng)性對(duì)照藥物秋水仙堿和多烯紫杉醇；化合物IVcl、IVc2對(duì)人前列腺癌細(xì)胞PC-3作用的ICso值小于陽(yáng)性對(duì)照藥物秋水仙堿。它們對(duì)腫瘤細(xì)胞的體外抑制實(shí)驗(yàn)結(jié)果(為三次測(cè)試的平均值)參見(jiàn)表1。綜合測(cè)試此類(lèi)化合物對(duì)不同腫瘤細(xì)胞的體外抑制作用，化合物IVcl和IVc2對(duì)各種腫瘤細(xì)胞株的抑制作用較顯著，抗瘤譜較廣。<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>"-"表示未測(cè)定IC50值。權(quán)利要求1.吲哚取代咪唑啉-2-酮類(lèi)衍生物，其特征是具有以下結(jié)構(gòu)通式其中R1為H、2or3or4-F、2or3or4-Cl、2or3or4-Br、2or3or4-NO4、2or3or4-OC2H5、2or3or4-OCH3、2or3or4-CH3、2or3or4-OH、2or3or4-N(CH3)2、3，4-(OCH3)2、3-NO2-4-OCH3、3-NH2-4-OCH3、3-NH3+Cl--4-OCH3、3-OH-4-OCH3、3-OCH3-4-OH、4-OH-3，5-(OCH3)2或3，4，5-(OCH3)3；R2為H、CHO、COCH3、CONH-(1H-indole-5-yl)、CONH-(1-methyl-1H-indole-5-yl)或CONH-(1-benzyl-1H-indole-5-yl)；R3為H、CH3或Bn。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的吲哚取代咪唑啉一2—酮類(lèi)衍生物制備方法，其特征是化合物I與化合物n在氮?dú)獗Ｗo(hù)下惰性溶劑中發(fā)生環(huán)合脫水反應(yīng)得到目標(biāo)化合物IVa和目標(biāo)化合物IVb，所用溶劑為苯，甲苯或二甲苯，反應(yīng)溫度通常為80-140。C之間，所得目標(biāo)化合物IVa和IVb經(jīng)過(guò)柱層析得純產(chǎn)物。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的吲哚取代咪唑啉一2—酮類(lèi)衍生物制備方法，其特征是所得目標(biāo)化合物IVa和IVb制成生理接受的鹽。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的吲哚取代咪唑啉一2—酮類(lèi)衍生物制備方法，其特征是化合物n與化合物m在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，在惰性溶劑中發(fā)生環(huán)合脫水反應(yīng)得到目標(biāo)化合物IVc，所用溶劑為苯，甲苯或二甲苯，反應(yīng)溫度通常為80-140°C之間，所得目標(biāo)化合物IVc經(jīng)過(guò)柱層析得純產(chǎn)物。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的吲哚取代咪唑啉一2—酮類(lèi)衍生物制備方法，其特征是所得目標(biāo)化合物IVc制成生理接受的鹽。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的吲哚取代咪唑啉一2—酮類(lèi)衍生物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的吲哚取代咪唑啉一2—酮類(lèi)衍生物的生理接受的鹽在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明提供一類(lèi)吲哚取代咪唑啉-2-酮類(lèi)衍生物，以天然產(chǎn)物CombretastatinA-4為先導(dǎo)化合物，利用咪唑啉-2-酮五元雜環(huán)代替其乙烯鏈，用吲哚環(huán)代替CA-4中苯環(huán)而得到的一系列咪唑啉酮類(lèi)衍生物。本發(fā)明提供的衍生物及其鹽可在制備抗腫瘤藥物中應(yīng)用。本發(fā)明是一類(lèi)結(jié)構(gòu)全新的化合物，初步的藥理活性篩選試驗(yàn)表明多數(shù)化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞有體外抑制增殖作用，部分化合物具有顯著的抑制增殖作用，IC₅₀達(dá)到μM級(jí)。本發(fā)明設(shè)計(jì)合理，制備方法簡(jiǎn)便，適于實(shí)用。文檔編號(hào)A61P35/00GK101130539SQ20071007143公開(kāi)日2008年2月27日申請(qǐng)日期2007年9月26日優(yōu)先權(quán)日2007年9月26日發(fā)明者何俏軍,波楊,楊曉春,胡永洲,娜薛申請(qǐng)人:浙江大學(xué)