專利名稱：：治療糖尿病的白背三七藥物制劑的制作方法治療糖尿病的白背三七藥物制劑
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及中醫(yī)藥領(lǐng)域，尤其說明了白背三七或含有其總黃酮、萜類、甾醇成分的提取物具有特異性的降血糖藥物作用。
背景技術(shù)：
：目前隨著生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)外環(huán)境的改變，糖尿病的發(fā)病率有逐年增高的趨勢(shì)。高血糖是糖尿病的最基本的病理特征，也是引起糖尿病一些慢性并發(fā)癥的重要原因，逆轉(zhuǎn)糖尿病的高血糖狀態(tài)和治愈它減輕患者痛苦和國(guó)家負(fù)擔(dān)一直是國(guó)內(nèi)外學(xué)者和政府所關(guān)注。由于口服降糖藥的副作用及長(zhǎng)期注射胰島引起的胰島素依賴性，使得人們迫切需要在新的領(lǐng)域，如中藥中尋找合適的降糖藥物，因此從中藥中篩選糖尿病的治療藥物是近年來廣大中醫(yī)藥工作者的熱點(diǎn)。雖然某些植物性藥物對(duì)糖尿病人有一定的治療效果，但都不能完全依靠它們來實(shí)現(xiàn)有效的控制血糖。發(fā)明人在治療糖尿病的植物性藥物方面也做了很多探究，在多種明顯有效的植物性藥物對(duì)比中發(fā)現(xiàn)菊科植物Gynuradivaricata(L.)DC.白背三七即白子菜的植物具有優(yōu)異的治療糖尿病/降血糖的藥物作用。白背三七傳統(tǒng)的功用是清熱消炎，止血祛瘀。治百日咳、肺結(jié)核、風(fēng)濕痛、骨折、創(chuàng)傷出血，癰腫瘡癤等。白背三七含有粗蛋白和氨基酸、鉀、Vc、Ve、p-胡蘿卜素和粗纖維、粗脂肪、灰份。最近報(bào)道白背三七含有亞硝酸，因此不要盲H地將白背三七作為一種普通蔬菜來食用。發(fā)明人在給出本發(fā)明之前未見有人對(duì)其進(jìn)行成分鑒定，發(fā)明人初步鑒定并作出了含有總黃酮類、花色苷、萜、甾醇類成分的白背三七提取物具有降血糖作用的藥效結(jié)論，給出了本項(xiàng)發(fā)明。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的是一種治療糖尿病及其并發(fā)癥的藥物技術(shù)方案，該藥物的特征在于；a)菊科植物白背三七Generadivaricata(L.)DC.及其莖葉完全提取物的制劑，b)含有白背三七及其莖葉中提取的總黃酮類成分的制劑，c)含有白背三七及其莖葉中提取的總黃酮、萜、甾醇類成分的制劑，d)含有白背三七及其莖葉中提取的總黃酮、花色苷、苷類和萜、留醇類成分的制劑。發(fā)明人還給出了一種含有白背三七提取物成分的復(fù)方藥物制劑，它在于下列的成分、成分比組成。白背三七其莖葉的完全提取物或從其中提取含有總黃酮、萜、甾醇、花色苷、苷類成分的混合物1-20份銀杏果1-5份，在于糖尿病藥物中用途。銀杏果既是中藥白果，屬銀杏科植物Ginkgobiloba1.的種子。白背三七中含有多個(gè)有效物質(zhì)是治療糖尿病/高血糖癥的活性成分，它具有綜合協(xié)同藥物作用，其中一個(gè)的例子是白背三七或其同科植物紅鳳菜的花色苷、苷類成分它具有改善糖尿病患者視力障礙。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)還在于白背三七及其含有總黃酮和萜、甾醇類有效部位的混合物，它作為一種治療糖尿病的藥物，對(duì)血糖的影響具特異性；它對(duì)正常人或己處于正常范圍值的糖尿病患者的血糖不具影響，本發(fā)明的物質(zhì)克服了現(xiàn)有技術(shù)中的某些降血糖藥物患者服用后出現(xiàn)低血糖反映的弊端。從試藥對(duì)動(dòng)物模型由鏈脲佐菌素、四氧嘧啶所致的高血糖具有明顯的降糖作用，這點(diǎn)可以肯定本發(fā)明的物質(zhì)；含有總黃酮、萜、甾醇類成分的白背三七提取物對(duì)胰島一e細(xì)胞損傷/壞死性所致的高血糖/糖尿病人具有保護(hù)或修復(fù)對(duì)胰島-e細(xì)胞損傷的功能。因?yàn)?，鏈脲佐菌素為一種廣譜抗菌素，具有抗菌、抗腫瘤和致糖尿病的作用，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的胰島e細(xì)胞具有高度選擇性毒性作用，引起胰島細(xì)胞損傷。四氧嘧啶是一種特異性胰島--e細(xì)胞毒劑，可選擇性地破壞胰島一e細(xì)胞，引起細(xì)胞壞死和損傷而致糖尿病。在另一方面是；腎上腺素是促進(jìn)體內(nèi)糖元分解及糖酵解，抑制胰島素分泌；靜脈注射葡萄糖是屬于外源性增加體內(nèi)糖含量，這些都是對(duì)胰腺e細(xì)胞無直接毒害作用，而是對(duì)抗胰島素作用而引起高血糖，本發(fā)明的藥物對(duì)其僅呈弱降糖趨勢(shì)，說明該藥物是有選擇性降糖作用的。白背三七全草中提取含有總黃酮和萜、甾醇類混合物可制備為目前臨床中最常見的各個(gè)劑型，并可添加任何藥學(xué)上可接受的輔劑或載體。實(shí)施例本發(fā)明對(duì)白背三七及其莖葉可運(yùn)用多種現(xiàn)有技術(shù)手段對(duì)其進(jìn)行提取。但，本發(fā)明可以以以下的方法從白背三七及其莖葉中提取總黃酮、祐、苷、甾醇類的有效部位。以下是本發(fā)明能夠解決預(yù)期效果的實(shí)施說明實(shí)施例一白背三七及其莖葉的有效部位提取實(shí)施例二有效部位混合物的動(dòng)物藥效實(shí)驗(yàn)實(shí)施例三有效部位混合物的制備實(shí)施例四臨床治療例實(shí)施例一白背三七及其莖葉有效部位的提取。步驟l;水提醇沉淀法(水醇法)1)白背三七全草干品5公斤，粉碎。先以適量的水為溶劑并加溫對(duì)其提取，過濾藥渣，煎劑濃縮至l:1,備用。2)取上物加是其5倍量的含45%、60%、75%梯度的乙醇，靜置沉淀先后用不同濃度的乙醇交替處理除去白背三七煎劑中的無效成分；鞣質(zhì)、蛋白質(zhì)、淀粉、粘液質(zhì)、油脂、脂溶性色素、樹脂及部分糖類等雜質(zhì)，即得白背三七乙醇濾清液1/3ml。步驟2:1)取上部分乙醇濾清液1000ml加入適量濃度為1.5%的KOH和5%的NaHC03，攪拌后靜置30分鐘。2)在濾清液中加入75%乙醇冷藏、回收乙醇，再濃縮、冷藏、濾過得濾液；在濾液中調(diào)整乙醇濃度至80%，再經(jīng)冷藏、濾過得濾清液后回收乙醇得濃縮液。3)將濃縮液干燥后，得白背三七的提取物總黃酮、萜類、甾醇55g。4)運(yùn)用高壓液相色譜儀測(cè)定，色譜柱SpherisorbS100DS1(25cmX4.6cm)、流動(dòng)相甲醇/乙方烷一醋酸/0.1摩爾炭酸氫鈉(pH2.2)=62/18/22、溫度32.5°C、紫外線580nm、流速1.5ml/min，測(cè)定白背三七提取物中約含77%的黃酮、萜類、甾醇，其中總黃酮類成分約占43%。實(shí)施例二白背三七提取物總黃酮、萜類、甾醇藥效實(shí)驗(yàn)(以下簡(jiǎn)稱總黃酮)1、總黃酮對(duì)正常動(dòng)物血糖的影響健康小鼠36只，隨機(jī)分為三組空白對(duì)照組、陽(yáng)性藥胰島素注射液100u/kg給藥組，胰島素每天靜脈注射給藥一次，總黃酮加生理鹽水60mg/kg灌胃給藥連續(xù)給藥五天。末次給藥前將小鼠饑餓12小時(shí)，末次給藥后20分鐘將小鼠斷頭處死，取血，分離血清，以血糖試劑盒測(cè)血糖含量。表1可見，胰島素注射液組對(duì)正常動(dòng)物有降糖作用，總黃酮對(duì)正常的小鼠血糖含量無明顯影響。_表1總黃翻對(duì)正常小鼠血糖的影響(7土s丁_組_5|__鼠數(shù)(只)血糖含量(mmol/L)空白對(duì)照組124.02±1.30胰島素注射液100u/kg121.02±0.29AA總黃酮60mg/kg123.88±0.57AA與模型對(duì)照組"p〈0.01，*p<0.05與空白對(duì)照組Mp〈0.01，Ap<0.05(以下各表均同)2總黃酮對(duì)鏈脲佐菌素致高血糖動(dòng)物模型的影響取健康小鼠48只，隨機(jī)取12只作為空白對(duì)照組，其余小鼠均靜脈注射鏈脲佐菌素200mg/kg，次日將這36只小鼠隨機(jī)分為三組模型對(duì)照組,陽(yáng)性藥胰島素注射液100u/kg給藥組，總黃酮給藥組灌胃，每天給藥一次，連續(xù)給藥五天。末次給藥前將小鼠饑餓12小時(shí)，末次給藥后20分鐘，將小鼠斷頭處死，取血，分離血清，以血糖試劑盒測(cè)血糖含量。表2結(jié)果可見，同空白對(duì)照組比較，鏈脲佐菌素模型組小鼠血糖明顯升高，而陽(yáng)性藥胰島素注射液及總黃酮組均能明顯降低小鼠血糖含量，說明胰島素注射液、總黃酮對(duì)鏈脲佐菌素致高血糖模型動(dòng)物有降糖作用。表2.總黃酮對(duì)鏈脲佐菌素致小鼠血糖升高的影響G±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>3總黃酮對(duì)四氧嘧啶所致的高血糖動(dòng)物模型的影響取健康小鼠48只，隨機(jī)取12只作為空白對(duì)照組，其余小鼠均靜脈注射四氧嘧啶80mg/kg，將日將這36只小鼠隨機(jī)分為三組模型對(duì)照組，陽(yáng)性藥胰島素注射液100u/kg給藥組，總黃酮給藥組。(給藥方法同上)每天給藥一次，連續(xù)給藥五天。末次給藥前將小鼠饑餓12小時(shí)，末次給藥后20分鐘，將小鼠斷頭處死，取血，分離血清，以血糖試劑盒測(cè)血糖含量。表3結(jié)果可知，同空白對(duì)照組比較，注射四氧嘧啶小鼠血糖明顯升高，而胰島素注射液及試藥總黃酮、完全提取物劑量均能明顯降低小鼠血糖含量，說明胰島素注射液、總黃酮對(duì)四氧嘧啶所致高血糖模型動(dòng)物有降糖作用。表3.總黃酮對(duì)四氧嘧啶致小鼠血糖升高的影響(3T士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>/kg121.04±0.34"總黃酮60mg/kg123.61±1.36"4總黃酮對(duì)腎上腺素所致高血糖動(dòng)物模型的影響取健康小鼠48只，空白對(duì)照組12只，余隨機(jī)分為三組模型對(duì)照組，陽(yáng)性藥胰島素注射夜100u/kg給藥組，總黃酮給藥組。(給藥方法同上)連續(xù)給藥三天，末次給藥前將小鼠饑餓12小時(shí)，末次給藥后30分鐘，除空白對(duì)照組外，其余各組動(dòng)物均腹腔注射腎上腺素注射液100ug/kg，20分鐘后將小鼠斷頭處死，取血，分離血清，用血糖試劑盒測(cè)血糖含量。表4結(jié)果可見，同空白對(duì)照組比，注射腎上腺素液組小鼠血糖明顯升高，胰島素注射液能明顯降低小鼠血糖含量，總黃酮組對(duì)小鼠血糖含量影響不大，說明胰島素注射液與總黃酮對(duì)不同的高血糖模型動(dòng)物降糖作用不一致。表4總黃酮對(duì)腎上腺素致小鼠血糖升高的影響(JT土s)組另u鼠數(shù)(只)血糖含量(mmol/L)空白對(duì)照組123.66土1.29模型組128.96土2.06厶a胰島素注射液100u/kg121.65±0.28**總黃酮60mg/kg126.78±1.47"5總黃酮對(duì)外源性葡萄糖升高血糖動(dòng)物模型的影響取健康小鼠48只，隨機(jī)分為四組空白對(duì)照組，模型對(duì)照組，陽(yáng)性藥胰島素注射液100u/kg給藥組，試藥總黃酮給藥組。每天靜脈注射給藥一次，(給藥方法同上)連續(xù)給藥五天。末次給藥前將小鼠饑餓12小時(shí)，末次給藥后30分鐘，除空白對(duì)照組外，其余各組動(dòng)物均靜脈注射葡萄糖2g/kg(10ml/kg)，20分鐘后將小鼠斷頭處死，取血，分離血清，以血糖試劑盒測(cè)血糖含量。表5結(jié)果可知，同空白對(duì)照組，外源性注射葡萄糖可使小鼠血糖明顯升高，而陽(yáng)性藥胰島素注射液能明顯降低小鼠血糖含量，說明胰島素注射液與總黃酮對(duì)外源性葡萄糖致高血糖模型動(dòng)物的降糖作用同表4。表5總黃酮外源性葡萄糖小鼠血糖升高的影響(x土s)—<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>6總黃酮對(duì)鏈脲佐菌素糖尿病小鼠肝糖元的影響取健康小鼠48只，隨機(jī)取12只作為空白對(duì)照組，其余小鼠均靜脈注射鏈脲佐菌素200mg/kg(10ml/kg)次日將這36只小鼠隨機(jī)分為三組模型對(duì)照組，陽(yáng)性藥胰島素注射液115u/kg給藥組，總黃酮三個(gè)給藥組。分別按組別靜脈注射給藥，每天組藥一次，連續(xù)給藥五天。末次給藥前將小鼠饑餓12小時(shí)，末次給藥后30分鐘，將小鼠斷頭處死，取肝臟，用肝糖元試劑盒測(cè)小鼠肝糖元含量。表6總黃靦對(duì)鏈脲佐菌素致高血糖小鼠肝糖元含量的影響(3T土s)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>試驗(yàn)結(jié)果白背三七提取物總黃酮試藥對(duì)小鼠正常的血糖無明顯影響。對(duì)外源性葡萄糖和由腎上腺素所致小鼠血糖的升高也呈弱降低趨勢(shì)；對(duì)四氧嘧啶和鏈脲佐菌素所致的糖尿病小鼠高血糖有顯著得降低作用；有使實(shí)驗(yàn)性糖尿病小鼠肝糖元升高的趨勢(shì)；實(shí)驗(yàn)說明含有白背三七提取物總黃酮和萜類、甾醇的試藥對(duì)鏈脲佐菌素和四氧嘧啶對(duì)選擇性地破壞胰島一e細(xì)胞引起細(xì)胞壞死/損傷而致高血糖/糖尿病具有保護(hù)胰島一P細(xì)胞的降糖作用。實(shí)施例三白背三七提取物總黃酮、萜類、甾醇膠囊的制備取用實(shí)施例一方法提取的充分干燥后粉碎的白背三七提取物總黃酮、萜類、甾醇60克，加適量淀粉，裝入2S膠囊，每顆約含白背三七提取物總黃酮、萜類、甾醇75土5mg，服法；日/3次，次/l顆，飯前后溫水送服。實(shí)施例四臨床治療實(shí)例發(fā)明人以本發(fā)明藥物共試治19位患者，男性7位，女性12位，年齡40-50歲8位，50歲以上11位。確診時(shí)間4-ll年不等，患者前后曾到過多家醫(yī)院求治使用過多種藥物如甲苯磺丁脲、胰島素、優(yōu)降糖、達(dá)美康、胰島素、苯乙雙胍及中草藥，始終效果不理想，部分患者服藥后出現(xiàn)低糖反映。現(xiàn)見部分患者存在視力障礙、體表潰瘍等并發(fā)癥。發(fā)明人用上述藥物對(duì)19位患者進(jìn)行給藥治療，每位患者服藥至每一星期進(jìn)行血糖測(cè)量。結(jié)果示患者在服藥前最低血糖值146mg/dl，最高220mg/dl，平均186mg/dl?，F(xiàn)與用藥前比較降幅在7-10mg/dl的6位，ll-15mg/dl的10位、15mg/dl以上的3位，平均由原來的186mg/dl降至163mg/dl。第二周由原平均血糖值163mg/dl，現(xiàn)127mg/dl。第三周由原平均血糖值127mg/dl，現(xiàn)113mg/dl，處于正常血糖值120mg/dl以下的患者12位，高于正常血糖值(120mg/dl)，5-10mg/dl的7位，但無或輕微的癥狀表現(xiàn)。第四周；19位患者中15患者的血糖處于89-117mg/dl的正常值，四大典型癥狀消失或基本消失及并發(fā)癥明顯減輕，其余4位患者最低血糖值是122mg/dl，最高血糖值130mg/dl，四大典型癥狀不明顯，并發(fā)癥明顯減輕。第四周-八周后；19位患者最低血掛直82mg/dl，最高血糖值103mg/dl，四大典型癥狀及并發(fā)癥消失，且進(jìn)食正常人的日常食物后對(duì)血糖值不影響。權(quán)利要求1、一種在于糖尿病及其并發(fā)癥藥物中應(yīng)用的物質(zhì)，該藥物的特征在于；a)菊科植物白背三七Generadivaricata(L.)DC.及其莖葉提取物的制劑，b)含有白背三七及其莖葉中提取的總黃酮類成分的制劑，c)含有白背三七及其莖葉中提取的總黃酮、萜、甾醇類成分的制劑，d)含有白背三七及其莖葉中提取的總黃酮、花色苷、苷類和萜、甾醇類成分的制劑。2、白背三七及其莖葉提取物在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。3、一種含有白背三七及其提取物成分的復(fù)方藥物制劑，它在于下列的成分、成分比組成；白背三七及其莖葉的完全提取物或是含有總黃酮、萜、甾醇類成分的混合物1-20份，銀杏果1-5份的制劑在治療糖尿病藥物方面的用途。全文摘要本發(fā)明給出的是治療糖尿病的白背三七藥物制劑，該藥物主要是以菊科植物白背三七Generadivaricata(L.)DC.及其莖葉提取物的制劑，也可以是含有總黃酮、花色苷、苷類和萜、甾醇類成分的白背三七及其莖葉提取的混合物。它對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的胰島-β細(xì)胞損傷/壞死性所致的高血糖具有降血糖作用，但對(duì)正常的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或臨床中已處于正常范圍血糖值的糖尿病患者的血糖不具影響，本發(fā)明不但效果顯著而且克服了某些藥物存在的患者藥前高血糖藥后低血糖的弊端。文檔編號(hào)A61K36/28GK101147749SQ20071008453公開日2008年3月26日申請(qǐng)日期2007年2月15日優(yōu)先權(quán)日2006年2月21日發(fā)明者鄭樂建申請(qǐng)人:鄭樂建