專利名稱：檢測慢性蕁麻疹的自身血漿皮膚實驗方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及一種用于診斷病因檢測方法，特別涉及一種檢測慢性蕁麻疹的自身血漿皮膚實驗方法。

背景技術(shù)：
在醫(yī)療領(lǐng)域中，常用一些快捷的檢測方法對患者進行診病，以助于醫(yī)生確定其病因，選擇治療措施和判斷預(yù)后。在臨床檢測如肝功和免疫球蛋白的檢測中均采用的血清，其原因是血漿中含有纖維蛋白原，因此采用血清進行有關(guān)的檢測實驗，可以避免纖維蛋白原對檢測結(jié)果的影響。慢性蕁麻疹的實驗，是檢測患者的抗高親和力IgE受體自身抗體是否呈陽性。目前檢測慢性蕁麻疹的自身抗體有三種方法自身血清皮膚實驗、嗜堿粒細胞組胺釋放實驗和免疫印跡實驗，其中嗜堿粒細胞組胺釋放實驗和免疫印跡實驗多用于科學(xué)研究，而自身血清皮膚實驗是用于臨床的檢測抗高親和力IgE受體自身抗體的常規(guī)方法，是診斷慢性蕁麻疹的主要依據(jù)。
自身血清皮膚實驗的操作步驟如下(一)抽取患者外周血2毫升，加入到空白無菌試管中；(二)靜置1-3小時待血液凝集；(三)離心分離血清；(四)吸取50微升血清注射于同一患者皮內(nèi)，50微升生理鹽水注射于對側(cè)做對照；(五)30分鐘后觀察結(jié)果。這種方法由于需要血液凝固血清析出，才能分離血清進行皮內(nèi)實驗，實驗時間長，通常需要大約一個工作日才能得到使用結(jié)果，若患者下午抽血，則需要第二天才能得到實驗結(jié)果，因此患者就醫(yī)等待時間長。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種檢測慢性蕁麻疹的自身血漿皮膚實驗方法，它大大縮短患者等待結(jié)果的時間，檢測結(jié)果準(zhǔn)確，可以用于臨床代替自身血清皮膚實驗進行特異性抗高親和力IgE受體自身抗體的檢測。
本發(fā)明所述檢測慢性蕁麻疹的自身血漿皮膚實驗方法有以下步驟 (1)按照通常皮膚實驗允許的劑量抽取患者外周血，加入盛有血液抗凝劑的試管中； (2)離心分離血漿； (3)吸取二十分之一離心分離的血漿注射于同一患者前臂屈側(cè)皮膚內(nèi)，取相同體積的生理鹽水注射于同一患者前臂屈側(cè)位置的對側(cè)皮膚做對照； (4)30分鐘后觀察檢測結(jié)果。
慢性蕁麻疹的實驗，是檢測患者的抗高親和力IgE受體自身抗體，檢測的是血液中的自身抗體，而自身抗體本身存在于血液中，對血清和血漿中的自身抗體活性沒有影響。由于自身血清皮膚實驗、自身血漿皮膚實驗均為定性實驗，只需要檢測其特異自身抗體有或者沒有，不需要定量，盡管血漿有纖維蛋白原，也不會影響本發(fā)明所述慢性蕁麻疹的自身血漿皮膚實驗的結(jié)果，臨床實驗結(jié)果也表明，本檢測方法檢測結(jié)果準(zhǔn)確，可以用于臨床代替自身血清皮膚實驗進行特異性抗高親和力IgE受體自身抗體的檢測，即完全可以取代慢性蕁麻疹的自身血清皮膚實驗。
本發(fā)明由于是直接采用血漿做實驗，不需要等待血液凝固析出血清，而直接離心沉淀血細胞，縮短了實驗時間，因此可以大大減少患者等待結(jié)果的時間，基本可以做到上午就診上午得到結(jié)果，下午就診下午得到結(jié)果，整個實驗比自身血清皮膚實驗節(jié)省了約3個小時，利于醫(yī)生盡早的診病和確診，可以大大減少患者的痛苦，同時還減少了檢測人員的工作時間，提高了檢測效率。
本發(fā)明申請人通過以下臨床試驗 對63例慢性特發(fā)性蕁麻疹病人進行自身血漿皮膚實驗，有19例為陽性，其中19例的陽性患者中的11例進行自身血清皮膚實驗，結(jié)果是11例均為陽性。
對32例自身血漿皮膚實驗陰性的病例進行自身血清皮膚實驗，其結(jié)果均為陰性。
另外，對19例自身血漿皮膚實驗陽性的病例用免疫印跡的方法檢測抗高親和力IgE受體自身抗體，其結(jié)果均為陽性。
因此，本發(fā)明的檢測結(jié)果可靠。

具體實施例方式 慢性蕁麻疹病人符合如下條件可以進行自身血漿皮膚實驗①皮膚粘膜表面復(fù)發(fā)性風(fēng)團，持續(xù)時間不超過24h；②每周發(fā)作不少于2次；③病程超過2個月；④排除了食物、藥物為過敏原；⑤非物理性蕁麻疹(寒冷性蕁麻疹，膽堿能性蕁麻疹和人工蕁麻疹)及蕁麻疹性血管炎患者；⑥1周內(nèi)未使用抗組胺藥物、類固醇激素藥物及免疫抑制藥物；⑦同意進行自身血清皮膚試驗；⑧非特應(yīng)性體質(zhì)者。整個實驗過程均需要無菌操作。
具體實驗過程為 (一)抽取患者外周血2毫升，加入到盛有0.2毫升3.8％的枸櫞酸鈉溶液抗凝劑的試管中； (二)立即離心分離血漿，5000轉(zhuǎn)/分鐘條件下分離5分鐘； (三)吸取50微升血漿注射于同一患者前臂屈側(cè)皮膚內(nèi)，50微升生理鹽水注射于同一患者前臂屈側(cè)皮膚對側(cè)做對照； (四)30分鐘后觀察結(jié)果，注射血漿側(cè)皮膚起紅斑或者風(fēng)團直徑大于對側(cè)1.5毫米者為陽性。
本發(fā)明所述枸櫞酸鈉溶液為市售產(chǎn)品。
申請人:對63例慢性特發(fā)性蕁麻疹病人進行自身血漿皮膚實驗的臨床試驗 患者平均年齡為38歲(23～59歲)，其中男性29例，女性34例。病程從3個月到16年不等。
整個實驗過程嚴格無菌操作，皮膚實驗血漿和對照生理鹽水均為50微升。
對63例慢性特發(fā)性蕁麻疹病人進行自身血漿皮膚實驗，有19例為陽性，在19例自身血漿皮膚實驗陽性病例中，6例為風(fēng)團反應(yīng)；4例為紅斑或者紅暈反應(yīng)；其余9例為風(fēng)團和紅斑混合反應(yīng)，其反應(yīng)最快者8分鐘，持續(xù)時間為3-10個小時不等，起風(fēng)團或者紅斑時間無頭暈乏力煩躁等系統(tǒng)癥狀，所以一般不必象青霉素皮試那樣準(zhǔn)備搶救措施，偶有局部瘙癢者可以不必處理，可自行消退。
雖然本發(fā)明已以較佳實施例披露如上，然其并非用以限定本發(fā)明，任何所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明之精神和范圍內(nèi)，當(dāng)可作些許之變動與改進，因此本發(fā)明之保護范圍當(dāng)視權(quán)利要求所界定者為準(zhǔn)。
權(quán)利要求
1.一種檢測慢性蕁麻疹的自身血漿皮膚實驗方法，其特征在于有以下步驟
(1)按照通常皮膚實驗允許的劑量抽取患者外周血，加入盛有血液抗凝劑的試管中；
(2)離心分離血漿；
(3)吸取二十分之一離心分離的血漿注射于同一患者的前臂屈側(cè)皮膚內(nèi)，取相同體積的生理鹽水注射于同一患者前臂屈側(cè)的對側(cè)，做對照實驗；
(4)30分鐘后觀察檢測結(jié)果。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測慢性蕁麻疹的自身血漿皮膚實驗方法，其特征在于所述血液抗凝劑為枸鹽酸鈉溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測慢性蕁麻疹的自身血漿皮膚實驗方法，其特征在于枸鹽酸鈉溶液的重量百分比濃度為3.8％。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種檢測慢性蕁麻疹的自身血漿皮膚實驗方法，有以下步驟(1)按照通常皮膚實驗允許的劑量抽取患者外周血，加入盛有血液抗凝劑的試管中；(2)離心分離血漿；(3)吸取二十分之一離心分離的血漿注射于同一患者的前臂屈側(cè)皮膚內(nèi)，取相同體積的生理鹽水注射于同一患者前臂屈側(cè)的對側(cè)，做對照實驗；(4)30分鐘后觀察檢測結(jié)果。本發(fā)明大大縮短患者等待結(jié)果的時間，檢測結(jié)果準(zhǔn)確，可以用于臨床代替自身血清皮膚實驗進行特異性抗高親和力IgE受體自身抗體的檢測。
文檔編號A61B10/00GK101209212SQ200710093199
公開日2008年7月2日 申請日期2007年12月24日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月24日
發(fā)明者孫仁山, 劉榮卿, 陳曉紅, 程天民, 伍津津, 葉慶佾, 刁慶春, 黃秀英, 楊亞東, 紅 鮑 申請人:中國人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)野戰(zhàn)外科研究所