專利名稱：一種治療中晚期腦腫瘤的外用中藥的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種外用中藥，具體的是指一種治療中晚期腦腫瘤的外用中藥，本發(fā)明的商品名稱為中華拔瘤膏藥。

背景技術(shù)：
腦腫瘤的治療是當(dāng)今現(xiàn)代醫(yī)學(xué)面臨的難題。據(jù)世界衛(wèi)生組織2003年的統(tǒng)計，依照地區(qū)、種族和環(huán)境污染程度的不同，包括良性和惡性的原發(fā)性腦腫瘤的年發(fā)病率為25-35人/10萬人。其中原發(fā)性惡性腦腫瘤占60％以上。雖然神經(jīng)外科領(lǐng)域的兩大革命，即以CT問世為劃時代標(biāo)志的影像診斷技術(shù)的進(jìn)步和顯微神經(jīng)外科技術(shù)的應(yīng)用，對神經(jīng)外科的發(fā)展起到了巨大的促進(jìn)作用，但是，傳統(tǒng)西醫(yī)對惡性腦腫瘤的治療方法仍不能取得滿意的效果。如惡性晚期腦腫瘤80％多在治療后一年死亡。
目前，全世界對腦腫瘤的治療方法是經(jīng)神經(jīng)外科開顱手術(shù)，由于顱內(nèi)的生理解剖結(jié)構(gòu)給切除全部腦腫瘤帶來極大的難題，顱內(nèi)殘留的癌細(xì)胞因醫(yī)務(wù)種植會在短期內(nèi)復(fù)發(fā)與擴(kuò)散，配合神經(jīng)外科的方法只能是放療與化療。而放化療在抑制癌細(xì)胞生長的同時，又極大地?fù)p傷了人體的正常細(xì)胞，當(dāng)正常機(jī)體無法再承受放化療時，癌細(xì)胞自然復(fù)發(fā)，隨之二次開顱手術(shù)，從而加速死亡。該方法不能根治腦腫瘤(惡性)只能相對的延長患者的生命。我國中醫(yī)藥口服法治療腦腫瘤目前已進(jìn)入臨床應(yīng)用階段，但由于頭顱具有屏蔽藥物通過消化系統(tǒng)和血液系統(tǒng)進(jìn)入病灶的天然排斥機(jī)能，故療程長、在短期內(nèi)療效不顯著，且長期口服中藥由于毒性強(qiáng)會導(dǎo)致患者消化系統(tǒng)的損傷，使患者無法堅持完成全療程。
用中藥外敷的方法治療各種原發(fā)性中晚期腦腫瘤是我國中醫(yī)藥學(xué)界始終追尋的最理想治療方法。中國人民武裝警察部隊張財醫(yī)師在對中華傳統(tǒng)中醫(yī)藥經(jīng)典理論——內(nèi)病外治方法深入研究和臨床實踐的基礎(chǔ)上，通過對藥理、病理、腦腫瘤生物特性、病理解剖與動物模型實驗的科學(xué)分析與了解，掌握了應(yīng)用中醫(yī)藥外敷治療方法根治中晚期腦腫瘤的醫(yī)學(xué)機(jī)理。為中華民族的中醫(yī)藥寶庫開辟了一條通往世界醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，以中藥外敷療法率先攻克腦癌的新途徑。該療法不用開刀手術(shù)，不需放療化療，是一種既安全又經(jīng)濟(jì)的有效新療法。


發(fā)明內(nèi)容
為了克服神經(jīng)外科手術(shù)治療、放化療和中藥口服所不可愈越的難題，本發(fā)明人利用了中藥材原有的生物藥理特性，科學(xué)地調(diào)制成功一種外用中藥，即本發(fā)明提供一種治療中晚期腦腫瘤的外用中藥。
本發(fā)明是提供一種治療中晚期腦腫瘤的外用中藥，屬中醫(yī)藥學(xué)內(nèi)病外治范疇，是一種利用中藥生物特性與藥理特性，通過其滲透功能，排除腦積液功能，消除癲癇，阻斷癌細(xì)胞生存，殺滅癌細(xì)胞的靶細(xì)胞功能，將死亡癌細(xì)胞組織液排出體外等拔癰機(jī)制，同時提高機(jī)體免疫功能，最終達(dá)到治愈腦腫瘤的目的。
本發(fā)明提供的技術(shù)方案是一種治療中晚期腦腫瘤的外用中藥，它包括主藥和賦形劑，所述的主藥是由包含下述以重量為單位計的原料藥組成 全蝎 25-35川烏 16-20 草烏 16-20蛤殼(文蛤) 16-20 穿山甲15-25僵蠶 10-20 馬錢子4-8 壁虎3-7 斬龍草3-8 紅大戟3-7 甘遂 2-6 五倍子 1-3 土牛膝1-3 冰片(合成龍腦) 0.5-1.5蜣螂0.5-1.5 斑蝥0.5-1.5樟腦 0.5-1.5 麝香6-10 牛黃10-14 塞隆骨 25-35。
所述的主藥優(yōu)選由包含下述以重量為單位計的原料藥組成 全蝎30 川烏 18 草烏 18 蛤殼(文蛤) 18 穿山甲18僵蠶 15 馬錢子6 壁虎5 斬龍草5 紅大戟5甘遂 4 五倍子 2 土牛膝2 冰片(合成龍腦) 1蜣螂 1 斑蝥1 樟腦 1麝香 8 牛黃12塞隆骨30。
所述的賦形劑由下述以重量為單位計的原料藥制成 紅花3-7甘草3-7蜈蚣3-7山西老陳醋濃汁以體積為單位計485。
所述的賦形劑優(yōu)選下述以重量為單位計的原料藥制成 紅花5 甘草5 蜈蚣5 山西老陳醋濃汁以體積為單位計485。
所述的山西老陳醋濃汁是將山西產(chǎn)老陳醋用文火熬成濃醋汁，使其體積縮至為山西產(chǎn)老陳醋的1/2，冷卻后即得。
所述賦形劑的制備方法是將所述的紅花、甘草、蜈蚣三味藥粉碎為細(xì)粉，與所述的山西老陳醋濃汁按比例混合后用文火熬至三十分鐘，冷卻后即得。
所述的主藥與賦形劑調(diào)配后外敷，所述的主藥與所述賦形劑的用藥配比重量/體積為6-8∶2-4。
所述的主藥與賦形劑調(diào)配后外敷，所述的主藥與所述賦形劑的用藥配比重量/體積為7∶3。
所述主藥中的成分塞隆骨與虎骨功效相近，在本發(fā)明中也可以用虎骨作為塞隆骨的替代品。
塞隆骨元與虎骨氨基酸含量對比(％) 塞隆骨的氨基酸總含量為32.7％ 虎骨的氨基酸總含量為25.04％ 塞隆是藏語譯音，學(xué)名高原鼢鼠。高原鼢鼠生活在海拔2800米至4300的高寒草地上，終年在地下生活，洞穴深2米至2.5米，活動通道離地面約30厘米，專吃草的根莖，獨(dú)居生活，4月交配，9月產(chǎn)子。高原鼢鼠的生命期只有3年左右。
1990年，塞隆骨被國家正式批準(zhǔn)為“國家一類動物新藥材”，這是建國以來我國權(quán)威醫(yī)藥主管部門批準(zhǔn)認(rèn)定的第一個“一類動物藥材”。
塞隆骨性味“辛咸、微溫，歸肝、腎經(jīng)”。功能主治具有祛風(fēng)、散寒、除濕、通絡(luò)止痛、補(bǔ)益肝腎之功效，用于風(fēng)寒濕痹引起的肢體關(guān)節(jié)疼痛腫脹、屈伸不利、肌膚麻木、腰膝酸軟等癥。研究證明，塞隆骨與虎骨有類似的性味功效。其主要化學(xué)成分及藥效與虎骨極其相似。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 通用名稱 塞隆骨 漢語拼音 sai long gu 標(biāo)準(zhǔn)號 WS-207(Z-46)-90 性狀頭骨扁而寬，略呈三角形；鼻骨較長，未端呈鈍錐狀，兩鼻骨前緣連合處凹入缺刻淺；顴內(nèi)向外擴(kuò)展；兩頂脊在前方不相會合；枕脊強(qiáng)壯，枕中脊不發(fā)達(dá)；門齒孔小，前頜骨下延包圍門齒孔；上頜骨生有門齒一對，無犬齒臼齒三對。
第三臼齒常具一后伸小葉，下頜骨亦有門齒一對，較上門齒大，呈鑿狀。
功能與主治祛風(fēng)散寒除濕，通絡(luò)止痛，補(bǔ)益肝腎，且于風(fēng)寒濕痹引起的肢體關(guān)節(jié)疼痛、腫脹、屈伸不利，肌膚麻木，腰漆酸軟。
用中藥外敷的方法治療中晚期惡性腦腫瘤，它的最大優(yōu)點(diǎn)在于不用通過開刀手術(shù)，放療化療，徹底解決了中西醫(yī)傳統(tǒng)療法的各種弊端，只通過中藥外敷即可治愈腦腫瘤，治療成本低，病人無治療痛苦。
本發(fā)明的治療方法是根據(jù)西醫(yī)影像學(xué)手段(核磁和CT)確定病灶部位就近外敷施藥，療程為每天換藥一次，4-5天為一療程，共需6-7個療程可完成治療。一般1例晚期腦腫瘤治療全程需賦形劑總用量400-500毫升，所述的主藥與所述賦形劑的用藥配比為7∶3，主藥與副藥調(diào)配后外敷。
(一)外敷中藥在本療法操作時應(yīng)對照核磁和CT影像中所顯示標(biāo)明的腫瘤病灶部位，根據(jù)腫瘤性質(zhì)、病灶大小、患者體重和臨床癥狀，將患者顱外頭發(fā)剃盡進(jìn)行定量外敷施藥(糊劑膏藥外敷——手術(shù)膜蓋嚴(yán)——膠布固定)。
(二)臨床表現(xiàn)1、敷藥后1-2個小時藥力可全部滲入顱內(nèi)達(dá)病灶部位；2、可見敷藥部位表皮與真皮間因大量腦積液滲出鼓起大量水泡，其細(xì)胞組織液呈黃紅色，臨床可用牙簽在水泡下部扎一個小孔放出腦積液(注意該藥不可在與機(jī)體接觸時使用任何金屬類醫(yī)用器械，會形成感染)。3、當(dāng)大量腦積液排出顱外時，晚期重癥患者會因顱壓降低而快速蘇醒，中度患者可使因顱壓引起的復(fù)視消失，其它臨床癥狀如知覺和聽覺也逐漸恢復(fù)，癲癇消失。4、臨床可見顱外滲出大量的死亡癌細(xì)胞及組織液，經(jīng)7-10天逐漸干燥形成硬痂。由于硬痂阻隔了新藥的滲入和組織液的滲出渠道(顱骨板障和泌汗渠道)，需停止敷藥7天，待硬痂自然脫落后方可進(jìn)行第2個療程的敷藥。5、以此規(guī)律循環(huán)敷藥6-7個療程，至臨床未見死亡癌細(xì)胞與組織液滲出，即可進(jìn)行出院前影像學(xué)確診。
針對S180型實體瘤和艾氏腹水瘤以及腦膠質(zhì)瘤3種腫瘤動物模型，經(jīng)大量動物模型驗證，該療法的顯著療效是10天解剖試驗動物觀察實體瘤變化情況，瘤體重量普遍減少30％以上(約43g)，15天瘤體重量減少40％以上(約52g左右)。MO％、GR％、T-Bil和CK均顯著高于對照組；而Crea、T-P和ALB顯著下降，具有顯著的生物統(tǒng)計學(xué)意義。經(jīng)急性毒性試驗和長期毒性試驗，全療程未見皮膚過敏和皮膚刺激性反應(yīng)，動物模型解剖未見各正常器官及組織有任何異常變化。本發(fā)明中藥外敷治療各種腦腫瘤抑制腦腫瘤的靶細(xì)胞性強(qiáng)，治療晚期腦腫瘤的作用與療效顯著。
為了進(jìn)一步證明本發(fā)明一種治療中晚期腦腫瘤的外用中藥(商品名稱中華拔瘤膏)的藥效，提供以下動物實驗。
選用S180實體瘤和腦膠質(zhì)瘤G422等2種腫瘤動物模型，觀察中華拔瘤膏對在體動物的抗腫瘤作用，并選擇荷瘤動物觀察對動物免疫系統(tǒng)的影響。拔瘤膏選用高、中、低3個濃度，以環(huán)磷酰胺作為陽性對照藥，并以生理鹽水作對空白照組，拔瘤膏采用外敷給藥，并作適當(dāng)覆蓋和固定，環(huán)磷酰胺采用腹腔注射給藥?？鼓[瘤試驗進(jìn)行三批重復(fù)試驗，結(jié)果顯示如下 1.對S180實體瘤動物模型，拔瘤膏連續(xù)外敷給藥，高濃度組對實體瘤的生長具有顯著的抑制作用(P＜0.05)，3批試驗?zāi)[瘤抑制率分別為31.6％、32.8％、30.7％，具有抗腫瘤作用。陽性對照藥環(huán)磷酰胺也具有顯著抗腫瘤作用，抑制率分別為51.2％、55.4％、46.7％。
2.對腦膠質(zhì)瘤G422動物模型，拔瘤膏連續(xù)外敷給藥，高濃度組對腦膠質(zhì)瘤G422的生長具有顯著的抑制作用(P＜0.05)，三批試驗結(jié)果顯示，腫瘤抑制率分別為31.3％、31.8％、33.6％，具有抗腫瘤作用。陽性對照藥環(huán)磷酰胺具有抗腫瘤作用，抑瘤率分別為45.4％、42.2％、41.9％。
3.對免疫系統(tǒng)的作用，選擇荷瘤S180動物，觀察對體液免疫和細(xì)胞免疫的影響，結(jié)果顯示，試藥高濃度組使遲發(fā)性免疫反應(yīng)動物的足跖腫脹顯著增加(P＜0.05)，血清溶血素HC50顯著升高(P＜0.05)，表明試藥拔瘤膏能改善荷瘤動物的免疫系統(tǒng)，提高體液免疫功能。
4.對應(yīng)激反應(yīng)的影響，中華拔瘤膏外用給藥，高劑量組可以增加小鼠的耐疲勞時間。
1材料 1.1藥物 中華拔瘤膏(以下簡稱拔瘤膏)由本藥發(fā)明人張財提供，低溫處保存?zhèn)溆?。本拔瘤膏選用的主藥原料藥是 全蝎30， 川烏18， 草烏18， 蛤殼(文蛤)18，穿山甲18，僵蠶15， 馬錢子6， 壁虎5， 斬龍草5， 紅大戟5， 甘遂4， 五倍子2， 土牛膝2， 冰片(合成龍腦)1， 蜣螂1， 斑蝥1，樟腦1，麝香8， 牛黃12， 塞隆骨30。
賦形劑原料藥是紅花5，甘草5，蜈蚣5，山西老陳醋濃汁(以體積為單位計)485； 拔瘤膏選用高、中、低3個濃度劑量組， 高劑量組所述的主藥與所述賦形劑的用藥配比為8∶2 中劑量組所述的主藥與所述賦形劑的用藥配比為7∶3 低劑量組所述的主藥與所述賦形劑的用藥配比為6∶4 環(huán)磷酰胺(CTX)中美合資山西泰盛制藥有限公司產(chǎn)品，批號050115。
1.2瘤株 S180實體瘤株接種于小鼠腋下，并生長旺盛，以上接種動物均由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤研究所提供，并于本實驗室接種傳代，每隔14天左右傳代一次，用于連續(xù)試驗。
1.3動物 清潔級ICR小鼠，體重18-22g，雌雄各半，購于維通利華試驗動物中心，許可證號SCXK(京)2002-0003，實驗動物設(shè)施許可證號SYXK(京)2004-0008。飼料均購自北京科澳協(xié)力公司，每天喂食1次。
2方法和結(jié)果 2.1中華拔瘤膏對S180瘤作用研究 2.1.1小鼠S180細(xì)胞混懸液的制備 選取已接種S180瘤，瘤大小為1cm左右腫瘤生長良好的荷瘤小鼠，頸椎脫臼處死，用碘酒、酒精消毒，摘取右腋下的腫瘤組織置于已消毒的燒杯中，剔除腫瘤外邊的組織，將腫瘤塊置于組織勻漿儀中，加1ml的生理鹽水進(jìn)行勻漿，取勻漿后腫瘤細(xì)胞以生理鹽水稀釋20倍，光學(xué)顯微鏡下計算1ml瘤液中活體瘤細(xì)胞數(shù)，以此計算瘤液的稀釋倍數(shù)，用生理鹽水稀釋成2×106個/0.2ml。置于冰水中保存，75％酒精消毒小鼠右腋皮膚，按每鼠0.2ml接種于小鼠右腋皮下。整個操作在無菌條件下60min內(nèi)完成。接種24h后稱重，隨機(jī)分為5組空白對照組、陽性對照組、高劑量組、中劑量組、低劑量組。每組10只小鼠，雌雄各半。
2.1.2實驗步驟、結(jié)果 于分組當(dāng)天用5％Na2S脫毛劑，除去小鼠右腋下皮膚表面的毛，用清水洗去殘留的脫毛劑。中華拔瘤膏高、中、低劑量組開始右腋下皮膚涂抹給藥，并作適當(dāng)固定保持藥物充分接觸皮膚不易揮發(fā)，陽性對照藥(CTX 100mg/kg)、生理鹽水對照組腹腔注射給藥。中華拔瘤膏組、生理鹽水組連續(xù)給藥，陽性對照藥組給藥7天。第11天，處死小鼠并稱體重，隨機(jī)嚴(yán)格剝離干凈皮下腫瘤組織，使用電子秤稱量(精確到0.01g)，計算各組瘤體平均重量及腫瘤抑制率。
腫瘤抑制率＝(空白對照組瘤重-給藥組瘤重)/空白對照組瘤重×100％ 結(jié)果本實驗進(jìn)行了三批重復(fù)實驗，結(jié)果見表1，表2，表3，表中結(jié)果顯示，對S180實體瘤動物模型，拔瘤膏連續(xù)外敷給藥10d，高濃度組對實體瘤的生長具有顯著的抑制作用(P＜0.05)，3批試驗?zāi)[瘤抑制率分別為31.6％、32.8％、30.7％，具有抗腫瘤作用。陽性對照藥環(huán)磷酰胺也具有顯著抗腫瘤作用，抑制率分別為46.7％、51.2％、55.4％。
表1中華拔瘤膏對小鼠S180實體瘤生長的影響(第一次實驗) 注*為與對照組相比P＜0.05；**為P＜0.01 表2中華拔瘤膏對小鼠S180實體瘤生長的影響(第二次實驗) 表3中華拔瘤膏對小鼠S180實體瘤生長的影響(第三次實驗) 2.2對腦膠質(zhì)瘤的作用 2.2.1小鼠G422細(xì)胞混懸液的制備 選取接種G422瘤，瘤大小為1cm左右腫瘤生長良好的荷瘤小鼠，頸椎脫臼處死，用碘酒、酒精消毒，摘取右腋下的腫瘤組織置于已消毒的燒杯中，剔除外邊的組織，將腫瘤塊置于組織勻漿儀中，加1ml的生理鹽水進(jìn)行勻漿，取勻漿后腫瘤細(xì)胞以生理鹽水稀釋20倍，光學(xué)顯微鏡下計算1ml瘤液中活體瘤細(xì)胞數(shù)，以此計算瘤液的稀釋倍數(shù)，用生理鹽水稀釋成2×106個/0.2ml.置于冰水中保存，75％酒精消毒小鼠右腋皮膚，按每鼠0.2ml接種于小鼠右腋皮下.整個操作在無菌條件下60min內(nèi)完成。接種24h后稱重，隨機(jī)分為5組空白對照組、陽性藥對照組、高劑量組、中劑量組、低劑量組。每組10只小鼠，雌雄各半。
2.2.2實驗步驟 于分組當(dāng)天用5％Na2S脫毛劑，除去小鼠右腋下皮膚表面的毛，用清水洗去殘留的脫毛劑。中華拔瘤膏高、中、低劑量組右腋下皮膚涂抹給藥，給藥量為0.5ml。陽性藥對照組、空白對照組開始腹腔注射給藥，中華拔瘤膏組、空白對照組連續(xù)給藥14天，陽性對照藥組連續(xù)給藥7天。給藥前、給藥期間用游標(biāo)卡尺測量小鼠的右前肢直徑進(jìn)行記錄，以腫瘤大小的變化和給藥時間t(d)作圖，繪制移植瘤生長速度曲線。并在給藥期間觀察各給藥組小鼠的體重變化。藥后第15天，處死小鼠并稱體重，隨機(jī)嚴(yán)格剝離干凈皮下腫瘤組織，使用電子秤稱量(精確到0.01g)，計算各組瘤體平均重量及腫瘤抑制率。本實驗進(jìn)行了三批重復(fù)實驗。
腫瘤抑制率＝(空白對照組瘤重-給藥組瘤重)/空白對照組瘤重×100％ 2.2.3實驗結(jié)果 本實驗進(jìn)行了三批重復(fù)實驗，結(jié)果顯示，對鼠腦膠質(zhì)瘤G422動物模型，拔瘤膏連續(xù)外敷給藥14d，給藥期間小鼠腦膠質(zhì)瘤G422體瘤生長明顯減小，體重變化不十分明顯，結(jié)果見表4，表5和

圖1，圖2。對3批試驗?zāi)[瘤重進(jìn)行考察，高濃度組對實體瘤的重量均具有顯著的抑制作用(P＜0.05，P＜0.01)，3批試驗?zāi)[瘤抑制率均在30％以上，因此可以認(rèn)為具有抗腫瘤作用。陽性對照藥CTX也具有顯著抗腫瘤作用(P＜0.01)，腫瘤抑制率為30％以上，結(jié)果見表6，表7，表8。
表4給藥期間小鼠腦膠質(zhì)瘤G422大小(第15天為處死日) 圖1是G422瘤生長曲線圖。
表5中華拔瘤膏對接種腦膠質(zhì)瘤G422小鼠體重的影響(第15天為處死日) 圖2是接種G422瘤小鼠體重變化圖。
表6中華拔瘤膏對小鼠腦膠質(zhì)瘤G422生長的影響(第一次實驗) 表7中華拔瘤膏對小鼠腦膠質(zhì)瘤G422生長的影響(第二次實驗) 表8中華拔瘤膏對小鼠腦膠質(zhì)瘤G422生長的影響(第三次實驗) 討論 中華拔瘤膏臨床主要針對各種晚期腦瘤，尤其對較普遍發(fā)生的膠質(zhì)性晚期腫瘤療效更為顯著。藥效實驗結(jié)果表明中華拔瘤膏作用于S180實體瘤、腦膠質(zhì)瘤G422動物模型，其中對S180實體瘤的生長具有顯著的抑制作用，對腦膠質(zhì)瘤的有明顯抑制作用。同時中華拔瘤膏作為一中成藥的外用藥，毒副作用小，作用直接，用藥方便，值得開發(fā)研究。
2.4中華拔瘤膏對荷瘤動物免疫系統(tǒng)的影響 2.4.1試驗?zāi)康? 通過設(shè)計一系列給藥劑量(濃度)觀察試藥對荷瘤動物免疫系統(tǒng)的影響。
2.4.2試驗材料 2.4.2.1藥物與試劑 拔瘤膏同上。用于皮膚外用涂抹。
北京人參蜂王漿市售，北京三九藥業(yè)有限公司產(chǎn)品，口服液，主要原料蜂蜜、人參、蜂王漿、五味子。規(guī)格10支×10ml，每100ml中含總皂甙60mg～85mg，10-羥基-α-癸烯酸14mg～18mg，用于免疫調(diào)節(jié)、延緩衰老。生產(chǎn)批號20040707，保質(zhì)期至2007年6月。臨用時直接應(yīng)用，用于口服給藥。
Alsever‘s液葡萄糖2.000g、檸檬酸鈉0.800g、檸檬酸0.055g、氯化鈉0.420g、加蒸餾水100ml混勻，10磅10min滅菌。
都氏試劑 氰化鉀0.025g 高鐵氰化鉀0.100g 碳酸氫鈉 0.500g 蒸餾水1000ml 無水碳酸鈉西安化學(xué)試劑廠產(chǎn)品，批號030812，配制成0.1％Na2CO3溶液，用于稀釋血液。
2.4.2.2儀器設(shè)備 150mm鍍鉻游標(biāo)卡尺北京量具刃具廠生產(chǎn)，精度0.02mm； 顯微鏡OLYMPUS CH.2顯微鏡，日本OLYMPUS公司產(chǎn)品； HD型單列恒溫水浴鍋，遼陽市恒溫儀器廠制造。
UV-1601PC型可見紫外分光光度計，日本Shimadzu公司產(chǎn)品。
2.4.2.3動物 清潔級ICR小鼠，體重18～22g，雌雄各半，購于維通利華試驗動物中心，許可證號SCXK(京)2002-0003，實驗動物設(shè)施許可證號SYXK(京)2004-0008。飼料均購自北京科澳協(xié)力公司，每天喂食1次。
豚鼠3只，體重460～500g，雄性，用于取血分離血清。由北京通利實驗動物養(yǎng)殖場提供，許可證號SCXK(京)2000-0018。
健康雄性綿羊，家養(yǎng)，用于取血提供綿羊紅細(xì)胞。
2.4.3試驗方法 2.4.3.1對小鼠的遲發(fā)性免疫作用 綿羊紅細(xì)胞懸液的制備無菌條件下，由健康的成年綿羊外頸靜脈取血，至于有玻璃珠的三角燒瓶中，振動10min，以除去纖維蛋白，加入相當(dāng)于羊血2倍的Alsever`s液，搖勻，置于4度冰箱中保存?zhèn)溆?。臨用時取出，用生理鹽水洗滌3次，每次2000rpm離心10min，棄上清液配成所需濃度。
植瘤于超凈工作臺中，先取S180瘤液0.1ml，以生理鹽水20倍稀釋，光學(xué)顯微鏡下計算瘤液中活體瘤細(xì)胞數(shù)，以此計算1ml瘤液的稀釋倍數(shù)，用生理鹽水稀釋成2×106個/0.2ml，置于冰水中，每只小鼠前肢腋下皮下注射后的瘤液0.2ml。
給藥小鼠(己植瘤)50只，雌雄各半，按體重隨機(jī)分成5組，每組10只(雌雄各半)，分別為空白對照組，陽性對照組和試藥高、中、低三個劑量組，連續(xù)給藥10天，第4天尾靜脈注射羊紅細(xì)胞約5×106個/只致敏，第10天用20％羊紅細(xì)胞0.02ml分別注入小鼠后肢左腳掌皮下，右后肢腳掌皮下注射0.02ml的生理鹽水，24h后，用游標(biāo)卡尺測量足跖腫脹度(FPR)，以兩足厚度差值作為遲發(fā)性免疫反應(yīng)(DTH)指標(biāo)。
數(shù)據(jù)統(tǒng)計學(xué)處理計算各組足K值、α值

對各組間進(jìn)行Student’t檢驗，采用孫瑞元、陳志揚(yáng)、鄭青山教授等主編的DAS軟件對上述結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，判定顯著性差異。
2.4.3.2對小鼠體液免疫的影響 羊紅細(xì)胞懸液的制備(方法同上)。
臨用時取上述所保存的羊紅細(xì)胞，用生理鹽水洗滌3次，每次2000rpm離心5min，棄去上清液，用生理鹽水以3∶5(v∶v)稀釋，使紅血球濃度為每毫升約20億個。
豚鼠血清制各在無菌條件下，從健康豚鼠心臟取血，放置約1h后，用長針將凝固血于管壁玻璃，使血清充分滲出，2000rpm離心5min，取血清-20℃保存，臨用時用生理鹽水1∶10稀釋。
免疫與給藥小鼠(植瘤方法同前)50只，雌雄各半，按體重隨機(jī)分成5組，每組10只(雌雄各半)，分別為空白對照組，陽性對照組和試藥高、中、低三個劑量組，連續(xù)給藥10天，給藥第3天，每只小鼠ip3∶5棉羊紅細(xì)胞稀釋液0.2ml，第10天給藥后20min眼眶取血進(jìn)行溶血素測定。
血清凝集素測定眼眶取血于離心管內(nèi)，放置約1h后，使血清充分分離出，2000rpm離心10min，取血清，生理鹽水稀釋200倍按下表進(jìn)行試驗。
然后于37℃水浴中保溫10min，冰浴終止反應(yīng)后2000rpm離心10min，取上清液1.0ml，都氏液3.0ml于試管內(nèi)。
用空白對照管于540nm波長處調(diào)零待測個管吸收度值。
綿羊紅細(xì)胞半數(shù)溶血值測定管取10％綿羊紅細(xì)胞稀釋液0.25ml，都氏試劑4.0ml于另一試管內(nèi)用于測定綿羊紅細(xì)胞半數(shù)溶血值。
計算 按下列公式計算每只小鼠樣品的半數(shù)溶血值HC50 樣品HC50＝(樣品吸收度值÷羊紅細(xì)胞半數(shù)溶血時吸收度值)×稀釋倍數(shù) 數(shù)據(jù)統(tǒng)計學(xué)處理計算各組HC50值

對各組間進(jìn)行Student’t檢驗，采用孫瑞元、陳志揚(yáng)、鄭青山教授等主編的DAS軟件對上述結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，判定顯著性差異。
2.4.4結(jié)果 2.4.4.1拔瘤膏對小鼠細(xì)胞免疫功能的影響 從表9實驗數(shù)據(jù)表明，所選用的中華拔瘤膏高、中、低三個劑量外敷給藥，對S180荷瘤小鼠DTH的影響，與空白對照組比較，DTH有增加的趨勢，但未見有顯著性差異(P＞0.05)，表明中華拔瘤膏對荷瘤動物的細(xì)胞免疫功能有一定的改善作用。同樣試驗條件下，陽性對照藥人參蜂王漿有顯著性增加DTH(P＜0.05)，表明可以顯著提高荷瘤動物的細(xì)胞免疫功能。
表9中華拔瘤膏對荷瘤S180鼠遲發(fā)性免疫反應(yīng)的影響 注*為與對照組相比P＜0.05；**為P＜0.01 2.4.4.2拔瘤膏對小鼠體液免疫功能的影響 表10實驗數(shù)據(jù)表明，所選用的中華拔瘤膏高劑量組外敷給藥，對S180荷瘤小鼠血清凝集素(HC50)的影響，與空白對照組比較，HC50顯著升高(P＜0.05)，表明中華拔瘤膏可以顯著提高荷瘤動物的體液免疫功能。同樣試驗條件下，陽性對照藥人參蜂王漿顯著增加HC50(P＜0.01)，表明可以顯著提高荷瘤動物的體液免疫功能。
表10中華拔瘤膏對荷瘤S180鼠血清凝集素的影響 2.4.5結(jié)論 中華拔瘤膏能改善荷瘤S180動物的細(xì)胞免疫功能，顯著提高機(jī)體的體液免疫功能。2.5中華拔瘤膏對動物應(yīng)激能力的影響 2.5.1試驗材料 2.5.1.1藥物與試劑 中華拔瘤膏同上。
S180瘤株北京腫瘤醫(yī)院傳代培養(yǎng)提供。
0.9％氯化鈉注射液山東齊都藥業(yè)有限公司。批號04120903 人參蜂王漿北京三九藥業(yè)有限公司。批號20040707 堿石灰北票礦務(wù)局氫氧化鈣廠。批號930708 2.5.1.2動物 清潔級ICR小鼠，體重18～22g，雌雄各半，購于維通利華試驗動物中心，許可證號SCXK(京)2002-0003，實驗動物設(shè)施許可證號SYXK(京)2004-0008。飼料均購自北京科澳協(xié)力公司，每天喂食1次。
2.5.2方法 2.5.2.1試驗分組與給藥方法 每次試驗取二級性成熟清潔級ICR小鼠60只，雌雄各半。隨機(jī)分為6組。中華拔瘤膏高劑量組、中華拔瘤膏中劑量組、中華拔瘤膏低劑量組、模型對照組，空白對照組。中華拔瘤膏外用給藥0.5ml/只，人參蜂王漿口服給藥20ml/kg，模型組給予等體積溶媒。
2.5.2.2試驗方法 取接種7d，處于指數(shù)生長期且荷瘤狀況較好的種鼠，處死。無菌操作，抽取腹腔積液，用0.9％氯化鈉注射液將S180瘤株稀釋至2.0×106個/0.2ml，以每只0.2ml的細(xì)胞量接種于小鼠腋下。24h后開始給藥，連續(xù)給藥10d。
2.5.2.2.1耐缺氧試驗 取接種小鼠60只隨機(jī)分6組，皮膚外用給藥每日一次，連續(xù)10天。末次給藥后0.5小時，將各組小鼠放入盛有5克鈉石灰的250ml磨口廣口瓶內(nèi)，密封瓶口，記錄自封瓶口至小鼠死亡時間，結(jié)果見表11。
2.5.2.2.2耐疲勞試驗 取接種小鼠60只隨機(jī)分6組，外用給藥每日一次，連續(xù)10天。末次給藥后0.5小時，于小鼠尾部負(fù)重(體重的10％)后投入24℃溫水槽中游泳，觀察并記錄小鼠自投入水中至頭部沉入水中7秒中不能游出水面的時間，作為游泳耗竭時間，結(jié)果見表12。
表11中華拔瘤膏抗缺氧實驗數(shù)據(jù) 表12中華拔瘤膏耐疲勞實驗數(shù)據(jù) 2.5.3結(jié)果 通過抗缺氧試驗可以看出，中華拔瘤膏外用給藥，沒有增強(qiáng)小鼠的耐缺氧性，而同樣條件下，陽性對照藥與模型組比較顯著性增強(qiáng)了小鼠的耐缺氧能力。
通過耐疲勞實驗可以看出，中華拔瘤膏外用給藥，高劑量組連續(xù)給藥十天與空白組比較可以增強(qiáng)小鼠的耐疲勞能力，而中劑量、低劑量與對照組比較沒有明顯作用。
2.5.4結(jié)論 中華拔瘤膏外用給藥，高劑量組可以增加小鼠的耐疲勞時間。
皮膚過敏試驗觀察中華拔瘤膏、賦型劑和陽性致敏物(2，4-二硝基氯苯)對豚鼠皮膚的致敏作用。結(jié)果顯示，中華拔瘤膏對皮膚反應(yīng)平均值0，無致敏性，對照組為0，無致敏性，陽性致敏物(2，4-二硝基氯苯)組為4.0，致敏率最高為83％，為高度致敏性。
皮膚刺激試驗將中華拔瘤膏一次給藥在家兔完整和破損皮膚上，觀察每次去掉受試物后1h內(nèi)以及末次給藥后的72h內(nèi)對皮膚的刺激性。結(jié)果顯示，中華拔瘤膏和賦型劑的刺激反應(yīng)分值均為0，表明中華拔瘤膏單次給藥對家兔完整皮膚和破損皮膚均無刺激性。
急性毒性實驗觀察了拔瘤膏對大鼠完整皮膚和破損皮膚短時期一次性接觸所產(chǎn)生的毒性反應(yīng)。將全部大鼠背部脫毛3×3cm2，分完整皮膚和破損皮膚，分別給予賦形劑和拔瘤膏四個濃度(高、2中、低濃度)，給藥后24h觀察動物的行為活動、皮毛光澤、飲食、體重和死亡情況，連續(xù)觀察14天。全部大鼠在給藥后觀察期14天內(nèi)，未見明顯的毒性反應(yīng)，動物的外部特征、排泄物、及行為表現(xiàn)均無異常。體重增長情況與空白對照組比較無顯著性差異。

具體實施例方式 實施例1 選擇如下以重量為單位計的原料藥制備主藥 全蝎30， 川烏18， 草烏18， 蛤殼(文蛤)18， 穿山甲18， 僵蠶15， 馬錢子6， 壁虎5， 斬龍草5， 紅大戟5， 甘遂4， 五倍子2， 土牛膝2， 冰片(合成龍腦)1， 蜣螂1， 斑蝥1，樟腦1，麝香8， 牛黃12，塞隆骨30， 將上述二十味藥，粉碎成細(xì)粉，過篩，混均，即得。
選擇如下以重量為單位計的原料藥制備賦形劑紅花5，甘草5，蜈蚣5，山西老陳醋濃汁(以體積為單位計)485；當(dāng)重量單位選擇克時，體積單位就對應(yīng)選擇毫升；選用山西產(chǎn)地的老陳醋用瓦鍋用文火熬成山西老陳醋濃汁(以體積為單位計)485(即由山西老陳醋970體積單位熬制成)，老陳醋濃汁的體積已經(jīng)縮至為原山西老陳醋體積的1/2，濃度為原山西老陳醋濃度的200％，冷卻后備用；將所述的紅花5，甘草5，蜈蚣5三味藥粉碎為細(xì)粉，再與山西老陳醋濃汁混合后用文火熬制三十分鐘，冷卻，即得。
所述的主藥與賦形劑調(diào)配后外敷，所述的主藥與所述賦形劑的用藥配比重量/體積為7(克)∶3(毫升)。
實施例2 選擇如下以重量為單位計的原料藥為主藥 全蝎30， 川烏20， 草烏20， 蛤殼(文蛤)20， 穿山甲25， 僵蠶20， 馬錢子8， 壁虎7，斬龍草8， 紅大戟7， 甘遂6， 五倍子3， 土牛膝3， 冰片(合成龍腦)1.5， 蜣螂1.5， 斑蝥1.5， 樟腦1.5， 麝香6， 牛黃10，塞隆骨30。
選擇如下以重量為單位計的原料藥制備賦形劑紅花3，甘草3，蜈蚣5，山西老陳醋濃汁(以體積為單位計)485； 所述主藥與賦形劑的制備方法同實施例1； 所述的主藥與賦形劑調(diào)配后外敷，所述的主藥與所述賦形劑的用藥配比為6∶2。
實施例3 選擇如下以重量為單位計的原料藥為主藥 全蝎35， 川烏18， 草烏16， 蛤殼(文蛤)16， 穿山甲15， 僵蠶10， 馬錢子4， 壁虎3，斬龍草3， 紅大戟3， 甘遂2，五倍子1， 土牛膝1， 冰片(合成龍腦)0.5， 蜣螂0.5， 斑蝥0.5， 樟腦0.5， 麝香6，牛黃14，塞隆骨35。
選擇如下以重量為單位計的原料藥制備賦形劑紅花7，甘草7，蜈蚣6，山西老陳醋濃汁(以體積為單位計)485； 所述主藥與賦形劑的制備方法同實施例1； 所述的主藥與賦形劑調(diào)配后外敷，所述的主藥與所述賦形劑的用藥配比為6∶4。
實施例4 選擇如下以重量為單位計的原料藥為主藥 全蝎28， 川烏16， 草烏18， 蛤殼(文蛤)16， 穿山甲15， 僵蠶10， 馬錢子4， 壁虎3，斬龍草3， 紅大戟3， 甘遂2，五倍子1， 土牛膝1， 冰片(合成龍腦)0.5， 蜣螂0.5， 斑蝥0.5， 樟腦0.5， 麝香7，牛黃10，塞隆骨28。
將上述十八味藥，粉碎成細(xì)粉，過篩，混均，即得。
選擇如下以重量為單位計的原料藥制備賦形劑紅花3，甘草4，蜈蚣3，山西老陳醋濃汁(以體積為單位計)485；當(dāng)重量單位選擇克時，體積單位就對應(yīng)選擇毫升；賦形劑的制備方法同實施例1，選用山西產(chǎn)地的老陳醋用瓦鍋用文火熬成山西老陳醋濃汁(以體積為單位計)485，濃度為原老陳醋濃度的200％，冷卻后備用；將所述的紅花3，甘草4，蜈蚣3三味粉碎為細(xì)粉，再與山西老陳醋濃汁混合后用文火熬制三十分鐘，冷卻，即得。
所述的主藥與賦形劑調(diào)配后外敷，所述的主藥與所述賦形劑的用藥配比為8∶2。
實施例5 選擇如下以重量為單位計的原料藥為主藥 全蝎30， 川烏20， 草烏20， 蛤殼(文蛤)20，穿山甲25， 僵蠶20， 馬錢子8， 壁虎7，斬龍草3， 紅大戟5， 甘遂4， 五倍子3， 土牛膝2， 冰片(合成龍腦)1， 蜣螂1.5， 斑蝥1，樟腦1，麝香9， 牛黃12， 塞隆骨25。
選擇如下以重量為單位計的原料藥制備賦形劑紅花7，甘草7，蜈蚣7，山西老陳醋濃汁(以體積為單位計)485； 所述主藥與賦形劑的制備方法同實施例4； 所述的主藥與賦形劑調(diào)配后外敷，所述的主藥與所述賦形劑的用藥配比為6∶4。
實施例6 選擇如下以重量為單位計的原料藥制備主藥 全蝎25， 川烏18， 草烏18， 蛤殼(文蛤)18， 穿山甲18， 僵蠶15， 馬錢子6， 壁虎5， 斬龍草5， 紅大戟5， 甘遂4， 五倍子2， 土牛膝2， 冰片(合成龍腦)1， 蜣螂1， 斑蝥1，樟腦1，麝香8， 牛黃14， 塞隆骨30。
選擇如下以重量為單位計的原料藥制備賦形劑紅花5，甘草4，蜈蚣6，山西老陳醋濃汁(以體積為單位計)485； 所述主藥與賦形劑的制備方法同實施例4； 所述的主藥與賦形劑調(diào)配后外敷，所述的主藥與所述賦形劑的用藥配比為7∶3。
權(quán)利要求
1.一種治療中晚期腦腫瘤的外用中藥，其特征在于它包括主藥和賦形劑，所述的主藥是由包含下述以重量為單位計的原料藥組成
全蝎25-35川烏16-20 草烏16-20蛤殼(文蛤)16-20
穿山甲15-25 僵蠶10-20 馬錢子4-8壁虎3-7
斬龍草3-8紅大戟3-7 甘遂2-6 五倍子1-3
土牛膝1-3冰片(合成龍腦) 0.5-1.5 蜣螂0.5-1.5
斑蝥0.5-1.5 樟腦0.5-1.5麝香6-10 牛黃10-14塞隆骨25-35。
2.如權(quán)利要求1所述的一種治療中晚期腦腫瘤的外用中藥，其特征在于所述的主藥優(yōu)選由包含下述以重量為單位計的原料藥組成
全蝎30 川烏18 草烏18 蛤殼(文蛤)18
穿山甲18 僵蠶15 馬錢子6壁虎5
斬龍草5紅大戟5甘遂4 五倍子2
土牛膝2冰片(合成龍腦)1 蜣螂1
斑蝥1 樟腦1 麝香8 牛黃12塞隆骨30。
3.如權(quán)利要求1、2所述的一種治療中晚期腦腫瘤的外用中藥，其特征在于所述的賦形劑由下述以重量為單位計的原料藥制成
紅花3-7甘草3-7蜈蚣3-7山西老陳醋濃汁以體積為單位計485。
4.如權(quán)利要求3所述的一種治療中晚期腦腫瘤的外用中藥，其特征在于所述的賦形劑優(yōu)選下述以重量為單位計的原料藥制成
紅花5甘草5蜈蚣5山西老陳醋濃汁以體積為單位計485。
5.如權(quán)利要求3所述的一種治療中晚期腦腫瘤的外用中藥，其特征在于所述的山西老陳醋濃汁是將山西產(chǎn)老陳醋用文火熬成濃醋汁，使其體積縮至為山西產(chǎn)老陳醋的1/2，冷卻后即得。
6.如權(quán)利要求3所述的一種治療中晚期腦腫瘤的外用中藥，其特征在于所述賦形劑的制備方法是將所述的紅花、甘草、蜈蚣三味粉碎為細(xì)粉，與所述的山西老陳醋濃汁按比例混合后用文火熬至三十分鐘，冷卻后即得。
7.如權(quán)利要求3所述的一種治療中晚期腦腫瘤的外用中藥，其特征在于所述的主藥與賦形劑調(diào)配后外敷，所述的主藥與所述賦形劑的用藥配比重量/體積為6-8∶2-4。
8.如權(quán)利要求7所述的一種治療中晚期腦腫瘤的外用中藥，其特征在于所述的主藥與賦形劑調(diào)配后外敷，所述的主藥與所述賦形劑的用藥配比重量/體積為7∶3。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療中晚期腦腫瘤的外用中藥，它包括主藥和賦形劑，所述的主藥是由下述以重量為單位計的原料藥組成全蝎25-35，川烏16-20，草烏16-20，蛤殼(文蛤)16-20，穿山甲15-25，僵蠶10-20，馬錢子4-8，壁虎3-7，斬龍草3-8，紅大戟3-7，甘遂2-6，五倍子1-3，土牛膝1-3，冰片(合成龍腦)0.5-1.5，蜣螂0.5-1.5，斑蝥0.5-1.5，樟腦0.5-1.5，麝香6-10，牛黃10-14，塞隆骨25-35；所述的賦形劑由下述以重量為單位計的原料藥制成紅花3-7，甘草3-7，蜈蚣3-7，山西老陳醋濃汁(以體積為單位計)485；所述的主藥與賦形劑調(diào)配后外敷，通過其滲透功能，排除腦積液功能，消除癲癇，阻斷癌細(xì)胞生存，殺滅癌細(xì)胞的靶細(xì)胞功能，將死亡癌細(xì)胞組織液排出體外等拔癰機(jī)制，同時提高機(jī)體免疫功能，最終達(dá)到治愈腦腫瘤的目的。
文檔編號A61K31/125GK101099781SQ200710123558
公開日2008年1月9日 申請日期2007年7月3日 優(yōu)先權(quán)日2006年10月11日
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