專利名稱：：新的2,3,3a,4-四氫硫色烯并[4,3-c]吡唑類抗炎、抗真菌化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明專利涉及含氮硫的雜環(huán)化合物，特別是涉及一類2,3,3M"四氫硫色烯并二氫吡唑系列抗炎、抗真菌合成藥物。
背景技術(shù)：
：'真菌是一種與宿主細(xì)胞有相似結(jié)構(gòu)和生理代謝過程的真核細(xì)胞生物,按照真菌引起的感染部位不同，分為淺部菌感染和深部菌感染。淺部真菌感染主要是由各種癬菌引起，如手足癬、頭癬、體癬等，目前常以灰霉菌素、制霉菌素、酮康唑等作為治療藥物。深部真菌感染危害大，甚至危機(jī)生命，他主要由致病真菌引起，它包括白色念珠菌、新型隱球菌、曲霉菌、毛霉菌等，這些真菌屬于正常機(jī)體內(nèi)菌群成員，正常情況下不引起疾病，但是，長期大量使用廣譜抗生素、激素和兔疫抑制劑等可以導(dǎo)致發(fā)病。近年來，深部真菌感染的發(fā)病率有逐年上升的趨勢。由于真菌的生物特性，一般抗真菌藥物往往在破壞真菌細(xì)胞同時(shí)，又織傷宿主細(xì)胞,再加上耐藥菌株的不斷出現(xiàn),使得真菌感染疾病的治療陷于兩難之境。截至目前，可應(yīng)用于臨床的療效好、毒副作用小、安全系數(shù)(safetyIndex,LDs/ED95)高的藥物寥寥無幾。兩性霉素B和三唑類氣康唑類藥物也因其毒副作用大而在應(yīng)用方面受限。因此，開發(fā)和探求一種高效低毒、具有治療預(yù)防雙重功效的廣譜和窄譜抗真菌活性的新化合物，成為當(dāng)前一項(xiàng)具有重要i義的研究工作。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于彌補(bǔ)上述現(xiàn)有技術(shù)中的不足之處，而提供合成方法簡單、效果好的2，3,3M-四鲺硫色烯并[4,3-c〗吡唑系列抗真菌合成藥物。本發(fā)明目標(biāo)物可以通過如下措施來達(dá)到:抗真菌2,3，3M-四氫硫色烯并4，3《]吡啤類化合物，其特征在于用通式(I)、(H沐示化合物-<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中當(dāng)R,、R2、R3中有一個(gè)或兩個(gè)為H時(shí)，另外兩個(gè)或一個(gè)分別為-R產(chǎn)X(鹵素取代基)、-OH、-OMe、-OEt、-Me、-EtR2=X(鹵素取代基)、Me、-OMe、-OEt、-CF3R3=X(鹵素取代基)、Me、-OMeR4=H、-MeRs=-COCH3、-COCH2CH3當(dāng)&、R7、Rs中有一個(gè)或兩個(gè)為H時(shí)，另外兩個(gè)或一個(gè)分別為:R=H、X(鹵素取代基)、-OMe、-OEt、-Me、-扱、-NMeaR產(chǎn)H、X(離素取代基)、-OMe、-OEt、-Me、-Et、-NMeaR晷-H、X(鹵素取代基)、-Me鹵素取代基是指氟、氯、溴、碘。2，3,3a^-四氯硫色烯并[4,3-c〗吡喃系列藥物的合成方法是(詳見附表1)在苯磺酰氯(或取代苯磺酰氯)中加入金屬鋅，然后向其中滴加4MH2S04，邊滴加邊攪拌,分離純化得到苯硫酚(或取代苯硫酚),再將該產(chǎn)物溶于2MNaOH溶液中(可和入適量的乙醇)。另將t氯丙酸(或其甲基酯、乙基酯)溶于計(jì)算量的Na2C03溶液中，然后與上述溶液混合超聲，回流6—8小時(shí)，除盡醇后抽濾，濾液用4MHaS04酸化，減壓蒸餾，抽濾，水洗干燥，得p—(取代苯硫)一丙酸，再用聚磷酸(或濃硫酸)縮合，分離純化得到取代塞克爾曼酮(Thiochromano加)粗品。在芳香醛(取代芳香醛)的乙醇和10%NaOH混合溶液中室溫下滴加上述得到的取代塞克爾曼酮，加完后保持溫度反應(yīng)1小時(shí)，冷卻抽濾，水洗，得取代亞甲基取代塞克爾曼酮。得到的產(chǎn)品與水合肼在冰醋酸中加熱回流15小時(shí)，然后倒入冰水中抽濾的粗品。粗品柱分離得到產(chǎn)物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(ni)、<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(IV)、<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(V)、<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(￥1)。R,、R2、R3、R4、Rs、Rfi、R7、R定義同上。附表12A3M-四氨硫色烯并43"CP比唑類化合物的合成方法<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>R2、Rs、R4、Rs、Re、R7、R定義同上-本發(fā)明相比現(xiàn)有技術(shù)具有如下優(yōu)點(diǎn)-2，3,3M-四氫硫色烯并4,3-c]吡唑類系列化合物是含有氮硫原子的雜環(huán)化合物，具有廣泛生物活性。它不但對常見淺表真菌感染具有較好的抑制活性，而且對深部真菌具有良好的殺菌活性。本發(fā)明原料常見易得、合成方法簡單、收率較高，有很好的研究價(jià)值和應(yīng)用前景。具#雄力《下面列舉制備例和實(shí)施例，結(jié)合附表2對本發(fā)明加以進(jìn)一歩說明。制備例1附表2中化合物l苯硫酚的制備取0.2mol苯磺酰氯置于三頸瓶中，另稱取27g金屬鋅粉加入，攪拌均勻，OX)冰水浴滴加4MH2S04，邊滴加邊攪拌，反應(yīng)6—8小時(shí)后，過濾分離，洗滌，干燥，重結(jié)晶純化。產(chǎn)率為89.8—92.1%,熔點(diǎn)為70.71C。若合成取代苯硫酚，可用取代苯磺酰氯合成，方法與上述步驟基本相同；例如鹵代苯磺酰氯收率一般在77%—89%之間。制備例2附表》中化合物2[6—氟一塞克爾曼酮〗的制備將上述制得的氟代苯硫酚50mmo1溶于2MNaOH溶液中(可加入適量的乙醇)。另將8.2gp—氯丙酸(或10g其甲基酯)溶于計(jì)算量的Na2C03溶液中，然后與上述溶液混合，超聲，回流6—8小時(shí)，除盡醇后抽濾，濾液用4MH2S04.酸化攪拌1—2小時(shí)后抽濾，水洗干燥，得P—(取代苯硫)一丙酸，再用聚磷酸(或濃硫酸)縮合24小時(shí)，分離純化得到6—氟一塞克爾曼酮。產(chǎn)率70—75%，熔點(diǎn)92_93t!。測得的理化常數(shù)見附表2。制備例3附表2化合物3f3-次芐基-6-氟-硫色滿酮]在38mmo110%KOH溶液和7.4ml無水乙醇中，攪拌下加入30mmd6—氟一硫色滿酮(3),溫度控制在22-301C,加入30咖o1苯甲醛，保持反應(yīng)溫度反應(yīng)3.5h。反應(yīng)液在冰箱中放置10h，.冷至0C抽濾水洗至中性。用乙醇/水重結(jié)晶干燥得淺黃色3-次芐基-6-氟-硫色滿酮，產(chǎn)率85-92%。測得的理化常數(shù)見附表2。實(shí)施例！lOOmmol對氟苯硫酚，120rnmo13—氯丙酸，加入250mmol20%NaOH溶液,.充分?jǐn)嚢?，覽于500ml的錐形瓶中，混合均勻，微波輻射45min，得到白色粘稠液體，鹽酸調(diào)pH^1，有大量淺黃色沉淀產(chǎn)生，抽濾，干燥，以95%乙醇/水重結(jié)晶.得到白色固體3-(4-氟-苯巰基)-丙酸，產(chǎn)率65-75%。取制備的3-(4-氟-苯巰基)-丙酸(2)13mmol溶解在20ml濃硫酸在室溫下放置18h。反應(yīng)液冰解，過濾，濾餅用5-10MN必CO3溶液洗滌，洗至中性，抽濾干燥，得淺黃色固體6—氟一硫色滿酮，產(chǎn)率80-85%。在38mmd10%KOH溶液和7.4ml無水乙醇中，攪拌下加入30mmol6—氟一硫色滿酮(3),溫度控制在22-30C加入30咖ol苯甲醛，保持反應(yīng)溫度反應(yīng)3.5h。反應(yīng)液在冰箱中放置10h,冷至01C,抽濾水洗至中性。用乙醇/水重結(jié)晶干燥得淺黃色3-次芐基-6-氟-硫色滿翻，產(chǎn)率85-92%。18mmo13—次節(jié)基一6—氟-硫色滿酮和和72mmo180%水合肼在75ml冰醋酸中加熱回流4.5h,將反應(yīng)液倒入冰水中，抽濾干燥，硅膠(300-400目)柱分離純化，洗脫劑使用二氯甲烷&酸乙酯(120:1),得到白色畫體4和5。其它化合物的制備同4和5。<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>抑菌試驗(yàn)本發(fā)明2,3,3a,4-四氫硫色烯并[4，3《]吡唑系列藥物通過對10屬、18種18株真菌，采用二倍濃度稀釋法進(jìn)行體外抑菌實(shí)驗(yàn)，結(jié)果參見附表3。供試菌株白色念珠菌(C.albkas)、熱帶念珠菌(C.tropicalis)、啤酒酵母菌(C.cecerisiae)、新生隱球菌(C.neofoimans)、絮狀表皮癬菌(E.floccosum)、石裔樣毛癬菌(T.gypscnmi)、紅色毛癬菌(T.vubrum)、斷發(fā)毛癬菌(T.tonsurans)、石裔樣小孢子菌(M.epseum)、木霉菌(trichoderum)、黑曲霉菌(A.niger)、灰綠曲菌(A.glaucus)、普通青霉菌(P.commime)、裴氏瓶霉菌(P.pedrosoi)、卡氏枝孢霉菌(C.carionii》、緊密瓶霉菌(P.comaitum)、疣狀瓶霉菌(P.veircosa)和申克孢子絲菌(S,sc^enekn)。菌液配制將充分發(fā)育的供試菌種移至5ml無菌生理鹽水內(nèi)，搗碎后超聲充分震蕩，去除塊狀不溶物質(zhì)，混勻，作為原菌液，測試時(shí)調(diào)整其濃度為106個(gè)細(xì)胞/ml后使用。實(shí)驗(yàn)方法供試化合物用適量二甲亞砜溶解，再用無菌蒸餾水稀釋，加入滅過菌的m(熱)的葡萄糖蛋白陳瓊脂培養(yǎng)基中，樣品濃度為200,100,50,25,12.5,6.25,3.12,L60mg/mL,接種供試菌以后，置恒溫烘箱培養(yǎng)5-7日以無真菌生長的最高稀釋濃度為最小抑菌濃度虹C。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，2,3,3a,4-四氫硫色烯并[4，3-c]吡唑系列化合物對真菌都有不同程度的抑制活性，其中一些化合物的抗真菌活性與對照品克霉哇相當(dāng)；有些甚至優(yōu)于克霉哇的抗真菌活性?？傊?，本發(fā)明涉及到的藥物，都是以苯磺酰氯(或取代苯磺酰氯)作為原料合成出來的，合成反應(yīng)過程中用到的各種化學(xué)試劑都是常見和簡單易得的，反應(yīng)的收率也比較理想。通過藥理毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)，表明系列化合物對真菌都有不向程度的抑制活性。本發(fā)明化合物廣泛應(yīng)用于抗真菌領(lǐng)域，有廣闊的研究價(jià)值和應(yīng)用前景。附表3體外抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果表MC(m^L)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>權(quán)利要求1.具有抗炎、抗真菌活性的2，3，3a，4-四氫硫色烯并[4，3-c]吡唑類化合物。2.根據(jù)權(quán)利要求l,2,3,3a,4-四氛硫色烯并[4,3《p比唑類化合物，其特征在于用通式(I)、(I!)表示化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>(I)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>(I!)其中當(dāng)R1、R2、R3中有一個(gè)或兩個(gè)為H時(shí)，另外兩個(gè)或一個(gè)分別為:R產(chǎn)X(鹵素取代基)、-OH、-OMe、-OEt、-Me、歸EtR2=X(齒素取代基)、Me、-OMe、-OEt、-CF3R3=X(卣素取代基)、Me、-OMeR4=H、-Me、-EtRs=-COCH3、-COCH2CH3當(dāng)Re、R7、Ri中有一個(gè)或兩個(gè)為H時(shí)，另外兩個(gè)或一個(gè)分別為Re-H、X(鹵素取代基)、-OMe、《0扱、-Me、-Et、-NMeaR產(chǎn)H、X(鹵素取代基)、-OMe、-OEt、-Me、-Et、-NMeiRs-H、X(鹵素取代基)、-Me鹵素取代基是指氟、氯、溴、碘。3.根據(jù)權(quán)利要求1,2,3,3a,4-四氫硫色烯并[4,3-e吡唑類化合物的特征在于具有抗炎、抗真菌活性，可作為抗炎、抗真菌藥物。全文摘要本發(fā)明公開了新的具有抗炎、抗真菌活性的含氮硫的并三環(huán)雜環(huán)化合物2，3，3a，4-四氫硫色烯并二氫吡唑類化合物。針對現(xiàn)有技術(shù)中抗真菌藥物少，毒性大的研發(fā)現(xiàn)狀，本發(fā)明進(jìn)行了新的2，3，3a，4-四氫硫色烯并二氫吡唑類化合物的設(shè)計(jì)合成，并進(jìn)行了真菌實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明這一類化合物具有好的抗真菌活性。本發(fā)明化合物合成方法簡單，原料易得，合成方法詳見說明書。本發(fā)明產(chǎn)品可用于抗炎抗真菌藥物。文檔編號A61P31/10GK101353351SQ20071012973公開日2009年1月28日申請日期2007年7月25日優(yōu)先權(quán)日2007年7月25日發(fā)明者楊更亮,祝士國,馬正月申請人:楊更亮