專利名稱：維拉帕米脂質(zhì)體及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
.-
本發(fā)明涉及藥物制劑領(lǐng)域，具體涉及維拉帕米脂質(zhì)體及其制備方法。
背景技術(shù)：
維拉帕米為芳烷基胺類錦拮抗劑，通過調(diào)節(jié)心肌傳導(dǎo)細(xì)胞、心肌收縮
細(xì)胞以及動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞細(xì)胞膜上的鈣離子內(nèi)流，發(fā)揮其藥理學(xué)作用， 但不改變血清鉤濃度。維拉帕米常用于治療變異型心絞痛、不穩(wěn)定性心絞
痛、慢性穩(wěn)定性心絞痛；與地高辛合用控制慢性心房顫動(dòng)和/或心房撲動(dòng)時(shí)
的心室率；預(yù)防陣發(fā)性室上性心動(dòng)過速的反復(fù)發(fā)作；原發(fā)性高血壓。 隨著對(duì)其藥理學(xué)研究的不斷深入，維拉帕米的臨床應(yīng)用也曰趨廣泛。
如治療支氣管哮喘、肝硬化、偏頭痛、躁狂癥等。近年來，發(fā)現(xiàn)了其對(duì) 眼部的藥理作用，并逐漸受到重視，主要有
1. 抗青光眼研究證實(shí)，維拉帕米能有效降低青光眼患者眼壓。 Abelson等對(duì)15例患有青光眼而未接受任何治療的志愿者局部滴眼0. 125% 的鹽酸維拉帕米40)aL， 30min后檢查發(fā)現(xiàn)眼內(nèi)壓有了顯著的下降，進(jìn)一步 研究表明這種作用能夠持續(xù)IO小時(shí)。Goyal等的研究發(fā)現(xiàn)，三次/d,共兩 周局部滴眼的0. 125%鹽酸維拉帕米溶液能持續(xù)地降低青光眼患者的眼內(nèi) 壓，而對(duì)全身血壓的降低作用很小。
2. 抗白內(nèi)障維拉帕米作為一種Ca2+通道阻滯劑能阻止房水中Ca2+ 進(jìn)入晶狀體內(nèi)，因而可以有效減少Ca2+在晶狀體內(nèi)的堆積，阻止或延緩"2+
堆積而造成的代謝紊亂，減輕白內(nèi)障的發(fā)生和發(fā)展，可望成為治療白內(nèi)障 的新藥。EU1等研究證實(shí)，0.2%鹽酸維拉帕米滴眼液能夠有效抑制糖尿病 型白內(nèi)障的發(fā)展。Bardak等的研究表明大鼠皮下注射維拉帕米可防止輻射 導(dǎo)致的晶狀體內(nèi)鈣離子、鎂離子和鐵離子濃度升高，提示維拉帕米對(duì)輻射 導(dǎo)致的白內(nèi)障有潛在的保護(hù)作用。鐘一聲等研究了維拉帕米在半乳糖性白 內(nèi)障形成和發(fā)展過程中的作用，結(jié)果表明皮下注射維拉帕米能夠抑制晶狀 體混濁的形成，且降低了晶狀體中"2+的含量。王祥群等的研究顯示，維 拉帕米對(duì)地塞米松誘發(fā)的白內(nèi)障具有阻斷作用。
.3.其他除白內(nèi)障和青光眼外，鹽酸維拉帕米等鈣拮抗劑在防治增 生性坡璃體視網(wǎng)膜病變(proliferative vitreoretinopathy， PVR)、特發(fā)
性眼瞼痙攣、視網(wǎng)膜中央動(dòng)脈阻塞及眼部腫瘤的實(shí)驗(yàn)研究中也顯示了較廣 闊的前景，將會(huì)在眼科領(lǐng)域得到越來越多的應(yīng)用。
由于人眼的特殊生理結(jié)構(gòu)，普通滴眼液滴眼后損失很大，在淚液的沖 刷作用下迅速流失，保留時(shí)間僅幾分鐘，生物利用度很低， 一般不超過5%。 而且長期、頻繁給藥時(shí)會(huì)導(dǎo)致全身吸收的藥量增加，副作用增加。
為了改善常規(guī)局部滴眼制劑的缺陷，而興起了眼部給藥系統(tǒng)(Ocular Drug Delivery System)的研究，其重點(diǎn)在于使藥物具有緩、控釋和長效 作用，增加藥物的角膜透過性，增加生物利用度，降低副作用等。
對(duì)于青光眼和白內(nèi)障的治療，要求藥物滴眼后能夠有效透過角膜，在 房水中達(dá)到一定的治療濃度。且青光眼和白內(nèi)障的防治過程較長，需要長
期給藥。因此要求給藥系統(tǒng)具有緩釋和長效作用，盡量減少滴眼次數(shù)，減 少全身副作用和對(duì)眼部的刺激性。綜上所述，維拉帕米眼部給藥系統(tǒng)至少
應(yīng)具有以下三個(gè)特點(diǎn)1)增加藥物的角膜透過性；2)延長藥物的作用時(shí) 間，減少用藥頻率；3)無毒無刺激性。
脂質(zhì)體作為新型藥物載體，是近年來藥劑領(lǐng)域的一個(gè)研究熱點(diǎn)，具有 極強(qiáng)的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。脂質(zhì)體作為藥物載體，能夠(l)增強(qiáng)藥物的溶解性; (2)減低藥物毒性；(3)賦予藥物靶向性；(4)增加藥物的緩釋作用；(5)保 護(hù)藥物，提高藥物的穩(wěn)定性；(6)通過膜融合作用將藥物送入細(xì)胞內(nèi)部，實(shí) 現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)給藥。近年來，脂質(zhì)體作為眼用藥物的載體的研究和應(yīng)用日益受 到關(guān)注。脂質(zhì)體釋藥機(jī)制獨(dú)特，可通過融合作用使藥物透過角膜上皮細(xì)胞。 脂質(zhì)體能夠起到藥物儲(chǔ)庫的作用，實(shí)現(xiàn)緩釋和長效給藥，且脂質(zhì)體具有一 定的生物黏附性，能增加藥物與角膜的接觸時(shí)間，因此有利于藥物的角膜 透過；尤其地，脂質(zhì)體具有優(yōu)良的生物相容性和可降解性，對(duì)眼部組織無 毒無刺激性，不影響眼部的正常生理功能，是優(yōu)秀的眼部給藥系統(tǒng)。因此, 將維拉帕米制成脂質(zhì)體滴眼液，可實(shí)現(xiàn)藥物的緩釋和長效作用，減少用藥 次數(shù)，減少藥物濃度的波動(dòng)，提高藥物的生物利用度，降低藥物的毒副作 用，提高患者的順應(yīng)性。中國專利CN1206987C將非甾體抗炎藥吲噪美辛制 備成脂質(zhì)體滴眼液，大大減少了滴眼后眼部的灼燒感及刺痛感，療效優(yōu)于
普通吲哚美辛滴眼液。
殼聚糖是天然的陽離子聚多糖，具有良好的生物相容性和生物可降解 性，已有用于眼部給藥系統(tǒng)的研究。殼聚糖用于眼部給藥時(shí)，具有良好的 生物膜黏附性和滲透促進(jìn)性。使用殼聚糖對(duì)脂質(zhì)體表面進(jìn)行修飾，可結(jié)合 二者的優(yōu)勢，同時(shí)發(fā)揮殼聚糖獨(dú)特的生物黏附性、增滲性和脂質(zhì)體的膜融 合性、緩釋性與較大的載藥量的特點(diǎn)，因此，殼聚糖修飾的維拉帕米脂質(zhì) 體相對(duì)于普通脂質(zhì)體，具有更高的生物利用度，能更好地發(fā)揮藥物的眼部 治療作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種具有緩釋和長效作用的維拉帕米脂質(zhì)體及 其制備方法。
本發(fā)明的維拉帕米脂質(zhì)體，含以下組分及重量百分比
0. 01% -50. 00% 10. 00% - 99. 99% 0. 00% -65. 00% 0. 00% — 89. 99% 生物 0. 00% -89. 99%
質(zhì) 0. 00% - 89. 99%
0. 00% - 40. 00%。
本發(fā)明的維拉帕米脂質(zhì)體，其中維拉帕米可以是外消旋體(RS-)維 拉帕米、左旋(S-)維拉帕米和右旋(R-)維拉帕米中的任何一種，或其 中任何一種的鹽酸鹽、乳酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、枸櫞酸鹽、馬來酸鹽、
米 衍脂
帕醇糖t刊劑
拉脂固聚聚離氧
維轔膽殼殼陽抗 酒石酸鹽或重酒石酸鹽等。
本發(fā)明的維拉帕米脂質(zhì)體，其中磷脂可以是兩條脂肪烴鏈各含有8至
26個(gè)飽和或不飽和碳原子的天然來源、人工合成、人工半合成或人工修飾
的磷脂類物質(zhì)，可以是大豆卵磷脂、氫化大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、氫化 蛋黃卵磷脂、磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油、 磷脂酰肌醇或烷基醚磷脂酰膽堿等，或其中任何一種的衍生物。衍生物可
以是聚乙二醇修飾的磷脂等，例如聚乙二醇2000-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺 (PEG2000-DSPE)。可選用上述磷脂中的一種或任意幾種的混合物來制備維 拉帕米脂質(zhì)體。
本發(fā)明的維拉帕米脂質(zhì)體，可使用殼聚糖或殼聚糖衍生物對(duì)脂質(zhì)體表 面進(jìn)行包覆或修飾。
本發(fā)明的維拉帕米脂質(zhì)體，其中陽離子脂質(zhì)可以是硬脂酰胺、十八胺、 2 ，3-二油酰氧丙基-1-溴化三甲胺(D0TMA)、 1,2-二油酰-3-三甲銨基丙烷 (DOTAP)、 二甲基雙十八烷基溴化銨(DDAB)或N， ， N， -二甲氨基乙基-3-氨 甲?；懝檀?DC-Chol)等?？蛇x用上述任意一種或任意幾種的混合物。
本發(fā)明的維拉帕米脂質(zhì)體，其中抗氧劑為氫醌、羥基香豆素、維生素 E、維生素C、檸檬酸、蘋果酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、沒食子酸烷酯、丁羥 基茴香醚(BHA)、 丁羥基甲苯(BHT)、去甲二氫愈創(chuàng)木酸、亞硫酸鈉、亞 硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉或硫代硫酸鈉等?？蛇x用上述任意一種或任意幾種 的混合物。
本發(fā)明的維拉帕米脂質(zhì)體，可進(jìn)一步加入滲透壓調(diào)節(jié)劑，滲透壓調(diào)節(jié) 劑為氯化鈉、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、甘油、玻璃酸鈉或透 明質(zhì)酸等?？蛇x用上述任意一種或任意幾種的混合物。
本發(fā)明的維拉帕米脂質(zhì)體，可進(jìn)一步制備成滴眼液或注射液，并可加 入凍干保護(hù)劑(賦形劑)進(jìn)一步制備成凍干制劑，其中凍干保護(hù)劑(賦形 劑)為蔗糖、乳糖、葡萄糖、海藻糖、麥芽糖、甘露醇、山梨醇、甘露醇 或亮氨酸等?？蛇x用上述任意一種或任意幾種的混合物。
本發(fā)明的維拉帕米脂質(zhì)體，可進(jìn)一步制備成凝膠劑，其中凝膠基質(zhì)為 卡波姆(carbomer)、泊洛沙姆(Poloxamer)、羥丙甲纖維素(HPMC)、海藻酸
鹽、乙基纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素、甘油、丙二醇、殼聚糖、 瓊脂、西黃蓍膠、明膠或淀粉等?？蛇x用上述任意一種或任意幾種的混合物。
本發(fā)明的維拉帕米脂質(zhì)體的制備方法如下
一、脂質(zhì)體的制備維拉帕米脂質(zhì)體可以通過以下四種方法制得 1.硫酸銨梯度法將處方量的磷脂、膽固醇、去氧膽酸鈉和抗氧劑 溶于少量乙醇中，緩慢注入到一定溫度、磁力攪拌下的一定濃度的硫酸銨 溶液中，保溫一定時(shí)間使乙醇揮發(fā)完全，超聲或勻質(zhì)處理，即得空白脂質(zhì) 體。將所得空白脂質(zhì)體置于透析袋中，兩端扎緊，置于一定量的水相中透 析除去脂質(zhì)體外水相中的硫酸銨。將透析好的空白脂質(zhì)體于一定溫度下、 在攪拌下加入一定量的維拉帕米水溶液，繼續(xù)保溫一定時(shí)間，調(diào)整終體積，即得。
2. 薄膜分散法取處方量的維拉帕米、磷脂、膽固醇、去氧膽酸鈉
和抗氧劑，以適量有機(jī)溶劑溶解，置于圓底燒瓶中，于一定條件下旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)除去有機(jī)溶劑，使之在瓶壁上形成一層均勻、干燥的薄膜，充氮?dú)猓?空干燥過夜。所得薄膜加入一定量的水相，在一定條件下充分水化，超聲 或勻質(zhì)處理，即得。
3. 乙醇注入法將處方量的維拉帕米、磷脂、膽固醇、去氧膽酸鈉 和抗氧劑溶于少量乙醇中，緩慢注入到一定溫度、磁力攪拌下的一定濃度 的硫酸銨溶液中，保溫一定時(shí)間使乙醇揮發(fā)完全，超聲或勻質(zhì)處理，即得。
4. 逆相蒸發(fā)法將處方量的磷脂、膽固醇、去氧膽酸鈉和抗氧劑溶 于適量乙醚中，將處方量的維拉帕米溶于適量水相中。將二者混合，劇烈 振搖、超聲使之形成W/0型乳劑，倒入圓底燒瓶中，于一定條件下旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)，小心控制蒸發(fā)速率，當(dāng)混合物達(dá)到粘稠的膠態(tài)時(shí)，再加入適量水相， 繼續(xù)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去殘余乙醚，超聲或勻質(zhì)處理，即得。
二、殼聚糖或其衍生物對(duì)脂質(zhì)體的包覆
將殼聚糖或其衍生物在一定條件下溶于水中，將一定量此溶液滴加至 制備好的維拉帕米脂質(zhì)體混懸液中，在攪拌下，調(diào)整體系的PH值至7.0, 繼續(xù)攪拌均勻即得。
-.本發(fā)明的維拉帕米脂質(zhì)體，制成滴眼劑時(shí)，其推薦的藥物濃度為2.5 mg/inL;制成注射劑時(shí)，其推薦的藥物濃度為5 mg/mL。
本發(fā)明使用殼聚糖或其衍生物對(duì)脂質(zhì)體表面進(jìn)行修飾，并將其應(yīng)用于 眼用制劑，能夠進(jìn)一歩增加脂質(zhì)體的角膜滯留性，顯著提高藥物的角膜透 過量，相對(duì)于普通脂質(zhì)體具有明顯的優(yōu)勢，是非常具有實(shí)用價(jià)值的眼部給 藥系統(tǒng)。
本發(fā)明所研制的維拉帕米脂質(zhì)體，其包封率可達(dá)99. 7%，粒徑分布均 勻，可達(dá)到靜脈注射或局部藥用標(biāo)準(zhǔn)。其穩(wěn)定性良好，4"C下充氮?dú)鈨?chǔ)存， 6個(gè)月內(nèi)穩(wěn)定性良好，其包封率、粒徑與外觀均無顯著變化，并且可以通 過制成凍干品進(jìn)一步提高其穩(wěn)定性。同時(shí)，本發(fā)明所采用的空白脂質(zhì)體-硫酸銨梯度載藥制備工藝非常適合工業(yè)化大生產(chǎn)，有非常廣闊的產(chǎn)業(yè)化前
景
《°動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，本發(fā)明的維拉帕米脂質(zhì)體，具有緩釋和長效 作用，能夠提高藥物的生物利用度，減少藥物濃度的波動(dòng)，因此能很好地 發(fā)揮維拉帕米的抗青光眼和抗白內(nèi)障等作用，較之普通滴眼液具有明顯的 優(yōu)勢。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)具體如下
1.家兔離體角膜透過性實(shí)驗(yàn)
目的研究眼用制劑的角膜透過性。 -動(dòng)物新西蘭白兔，體重2.5-3.0 kg,雌雄不限。
試藥維拉帕米脂質(zhì)體(實(shí)施例1)、維拉帕米殼聚糖包覆脂質(zhì)體(實(shí) 施例2)、維拉帕米生理鹽水溶液(2.5 mg/mL)。
方法釆用改進(jìn)的Franz立式擴(kuò)散池為實(shí)驗(yàn)裝置，如圖l所示，它由
供給池和接受池組成，內(nèi)徑0.90 cm,有效擴(kuò)散面積0. 70 cm2,接受池7. 8 mL。將家兔耳緣靜脈注射空氣處死，立即分離角膜，置于擴(kuò)散池的供給池 與接受池之間，接受池中裝滿谷胱甘肽-碳酸氫鈉林格溶液作為擴(kuò)散介質(zhì)， 供給池中加入供試品2mL,置于34X:恒溫磁力攪拌器中，于不同時(shí)間點(diǎn)取 樣，樣品經(jīng)0.22 nm微孔濾膜過濾后，HPLC測定，計(jì)算累計(jì)透過量。
結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖2。在6小時(shí)內(nèi)維拉帕米的角膜透過量為殼聚糖 包覆脂質(zhì)體>脂質(zhì)體〉滴眼液，證明本發(fā)明的脂質(zhì)體能夠有效促進(jìn)維拉帕 米的角膜透過性，使更多的藥物透過角膜到達(dá)房水，提高藥物在房水中的 濃度，從而更好地發(fā)揮藥效。
2. 家兔在體角膜滯留性實(shí)驗(yàn)
目的研究眼用制劑對(duì)角膜的黏附性。
動(dòng)物新西蘭白兔，體重2. 5-3. 0 kg，雌雄不限。
試藥維拉帕米脂質(zhì)體(實(shí)施例1 )、維拉帕米殼聚糖包覆脂質(zhì)體(實(shí) 施例2)、維拉帕米生理鹽水溶液(2.5 mg/mL)。
方法給藥時(shí)，將家兔固定，輕輕拉開眼瞼使與眼球成袋狀，分別用 微量加樣器滴入脂質(zhì)體或滴眼液150 mL，再輕輕放開下眼瞼，使藥物不 會(huì)溢出。給藥后，于不同時(shí)間點(diǎn)，用已稱重的定量濾紙條(5 mmx2 mm), 置于家兔眼結(jié)膜囊下穹窿處粘取淚液，取出后立即稱重(淚液體積由濾紙 條釆樣前后的重量差求得)。濾紙條置離心管中，加入甲醇0.5mL,超聲 提取15 min,離心，取上清液，0.22 u m微孔濾膜過濾后HPLC測定，計(jì)
算不同時(shí)間點(diǎn)淚液中的藥物濃度。
結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖3。結(jié)果表明，3小時(shí)內(nèi)，藥物的角膜滯留性的
大小順序?yàn)闅ぞ厶前仓|(zhì)體 > 脂質(zhì)體 > 滴眼液，證明了脂質(zhì)體和殼聚糖 對(duì)角膜具有黏附作用。這種黏附作用能夠減少制劑在眼部由于淚液沖刷造 成的損失，從而提髙生物利用度，并發(fā)揮長效和緩釋作用。
3. 微滲析法測定清醒家兔房水中藥物濃度 目的研究眼用制劑對(duì)角膜的黏附性。
動(dòng)物新西蘭白兔，體重2.5-1 Okg，雌雄不限。 試藥維拉帕米脂質(zhì)體(實(shí)施例1)、維拉帕米殼聚糖包覆脂質(zhì)體(實(shí)施例 2)、維拉帕米生理鹽水溶液(2.5 mg/mL)。
方法將微滲析探針經(jīng)手術(shù)植入兔眼前房中，經(jīng)2天恢復(fù)期，即開始 進(jìn)行藥動(dòng)學(xué)實(shí)驗(yàn)。以生理鹽水為灌注液，流速3. 0 jLiL.min—、沖洗O. 5h 后，在結(jié)膜囊內(nèi)滴入150 jaL制劑，最初的40 inin每10 min收集樣品， 之后每20 min收集樣品，樣品進(jìn)行HPLC測定，計(jì)算不同時(shí)間段內(nèi)房水中 的平均藥物濃度。
結(jié)果結(jié)果見表1。在6小時(shí)內(nèi)，脂質(zhì)體與殼聚糖包覆脂質(zhì)體的峰濃度(C) 分別為滴眼液的1.22倍與1.55倍，曲線下面積(AUC)分別為滴眼液的 1.47倍與2.08倍，藥物的達(dá)峰時(shí)間(rmax)長于滴眼液。脂質(zhì)體與殼聚糖 包覆脂質(zhì)體的相對(duì)生物利用度分別為146. 7 %與207. 7 %，并具有緩釋和長 效作用。
表l微滲析法測定維拉帕米在清醒家兔房水中藥動(dòng)學(xué)參數(shù)
(n=6， mean土SD)
樣品dx/ n g . ml/1乙x/min蕭/jU g m1/1 min相對(duì) 生物利用度
滴眼液0. 317 ± 0. 04343. 33 ±8. 1660. 78 ± 11. 42■—
脂質(zhì)體0. 388 ± 0. 065*63. 33 ±8. 1689. 16 ± 14. 72**146. 7 %
殼聚糖包 覆脂質(zhì)體0. 490 ± 0. 081**90. 00 ± 10. 95126. 22 ± 18. 30**207. 7 %
*,<0. 05, **，尸<0. 01，與滴眼液組比較
上述實(shí)驗(yàn)表明，將維拉帕米制成脂質(zhì)體，并以殼聚糖對(duì)其進(jìn)行包覆， 能夠有效促進(jìn)維拉帕米的角膜透過性，提高藥物在房水中的濃度，與此同 時(shí)，脂質(zhì)體和殼聚糖對(duì)角膜的黏附作用能夠減少制劑在眼部由于淚液沖刷
造成的損失，從而提高生物利用度，并發(fā)揮長效和緩釋作用。因此能夠減 少用藥次數(shù)，減少藥物濃度的波動(dòng)，提高藥效。且殼聚糖包覆脂質(zhì)體相對(duì) 于未包覆的脂質(zhì)體具有顯著的優(yōu)勢。
本發(fā)明的維拉帕米脂質(zhì)體可用于眼用、靜脈注射和透皮給藥等途徑， 尤其是眼用時(shí)，能夠提高藥物的角膜透過量，提高藥物的生物利用度，降 低藥物的毒副作用，實(shí)現(xiàn)緩釋和長效作用，減少用藥次數(shù)，減少藥物濃度 的波動(dòng)，因此能更好地發(fā)揮維拉帕米的抗青光眼和抗白內(nèi)障等作用。
本發(fā)明的脂質(zhì)體不僅對(duì)維拉帕米適用，作為理想的眼部藥物載體，對(duì) 于其他抗青光眼藥物和抗白內(nèi)障藥物，也可適用，或作為有價(jià)值的參考。
本發(fā)明首次將維拉帕米制成脂質(zhì)體，目前，在國內(nèi)外均未見維拉帕米 脂質(zhì)體的報(bào)道，更沒有相關(guān)制劑的上巿，因此本發(fā)明具有令人矚目的實(shí)際 應(yīng)用前景與潛在經(jīng)濟(jì)價(jià)值。


圖1為改進(jìn)的Franz立式擴(kuò)散池示意圖。圖中1為供給池，2 為角膜，3為接受池，4為攪拌子，5為取樣口。
圖2為維拉帕米脂質(zhì)體(2. 5 mg/mL )家兔離體角膜滲透曲線，以滴眼 液為對(duì)照(n=3 )。
圖孑為維拉i白米脂質(zhì)體(2.5mg/mL)家兔在體角膜滯留性曲線，以滴 眼液為對(duì)照U-3)。
圖4為微滲析法測定維拉帕米在清醒家兔房水中藥物濃度-時(shí)間曲線 (n=6 )。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1
鹽酸維拉帕米 25 mg _磷脂酰膽堿 120 mg
十八胺 5 mg
膽固醇 50 mg
制備方法將處方量的磷脂、膽固醇和十八胺溶于4 mL乙醇中，緩 慢注入到50°C、磁力攪拌下的8 mL 0.125 mol/L硫酸銨溶液中，5(TC保溫?cái)嚢鑜 h使乙醇彈發(fā)完全，置冰浴中探頭超聲5 ruin,即得空白脂質(zhì)體。 將所得空白脂質(zhì)體置于透析袋中，兩端扎緊，置1000 mL 0.9% NaCl溶液 中透析24h,除去脂質(zhì)體外水相中的硫酸銨。將透析好的空白脂質(zhì)體于60 。C下保溫，在攪拌下緩慢加入lmL含25mg鹽酸維拉帕米的水溶液，繼續(xù) 保溫20 min，以0. 9% NaCl溶液調(diào)節(jié)終體積至10 mL，即得鹽酸維拉帕米
脂質(zhì)體。
實(shí)施例2
鹽酸維拉帕米 25 mg
磷脂酰膽堿 120 mg
十八胺 5 mg
膽固醇 50 mg
殼聚糖 10 mg
制備方法將處方量的磷脂、膽固醇和十八胺溶于4 mL乙醇中，緩 慢注入到50°C、磁力攪拌下的8 fflL 0.125 inol/L硫酸銨溶液中，5(TC保 溫?cái)嚢鑜 h使乙醇揮發(fā)完全，置冰浴中探頭超聲5 niin，即得空白脂質(zhì)體。 將所得空白脂質(zhì)體置于透析袋中，兩端扎緊，置1000 mL 0.9% NaCl溶液 中透析24h，除去脂質(zhì)體外水相中的硫酸銨。將透析好的空白脂質(zhì)體于60 。C下保溫，在攪拌下緩慢加入lmL含25rag鹽酸維拉帕米的水溶液，繼續(xù) 保溫20 min,即得鹽酸維拉帕米脂質(zhì)體。殼聚糖溶于l mL pH 6. 0醋酸溶
液中，在磁力攪拌下，將此溶液加入到鹽酸維拉帕米脂質(zhì)體中，并用0.1M NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至7. 0,即得殼聚糖包覆的鹽酸維拉帕米脂質(zhì)體。
實(shí)施例3
鹽酸維拉帕米50 mg 磷脂酰膽堿 300 mg
PEG2000-DSPE 10 mg 膽固醇 100 mg
制備方法取處方量的鹽酸維拉帕米、磷脂、PEG2000-DSPE和膽固醇 以5 mL乙醇溶解，緩緩注入到50°C、磁力攪拌下的10 mL 0. 9 % NaCl溶 液中，5(TC保溫?cái)嚢?0 min使乙醇揮發(fā)完全，置冰浴中探頭超聲5 min，
即得。 實(shí)施例4
"鹽酸維拉帕米50 mg
磷脂酰膽堿 300 mg
去氧膽酸鈉 100 mg
維生素E 10 mg
制備方法將處方量的磷脂、去氧膽酸鈉和維生素E溶于10mL乙醚 中；將處方量的鹽酸維拉帕米溶于5mLpH7.4磷酸鹽緩沖液中，得內(nèi)水相。 將二者混合，劇烈振搖、超聲使之形成W/0型乳劑，倒入50 niL圓底燒瓶 中，于30。C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，當(dāng)混合物達(dá)到粘稠的膠態(tài)時(shí)，再加入5mLpH7.4 碟酸鹽緩沖液，繼續(xù)在3(TC下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)30min,置冰洛中探頭超聲5 min,即得。
實(shí)施例5
鹽酸維拉帕米
二棕櫚酰磷脂酰膽堿
膽固醇
維生素E
殼聚糖
制備方法 20 mL乙醇溶解 在瓶壁上形成-瓶中加入9 mL
75 mg 400 mg 20 mg 10 mg
10 rag
取處方量的鹽酸維拉帕米、磷脂、膽固醇和維生素E,以 ，置于100 mL圓底燒瓶中，45。C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇，使之 -層均勻、干燥的薄膜，充氮?dú)?，真空干燥過夜。在圓底燒 瓶甲刀口入，niL 0.9% NaCl溶液，在CC下水化 4 h，使薄膜充分脫落、 浸泡，置冰浴中探頭超聲5 rnin。殼聚糖溶于1 fflL pH 6.0醋酸溶液中， 在磁力攪拌下，將此溶液加入到上述脂質(zhì)體中，并用0. 1M NaOH溶液調(diào)節(jié) pH至7. 0,即得。
權(quán)利要求
1、維拉帕米脂質(zhì)體，其特征在于其組分及重量百分比如下維拉帕米0.01％-50.00％磷脂10.00％-99.99％膽固醇 0.00％-65.00％殼聚糖 0.00％-89.99％殼聚糖衍生物0.00％-89.99％陽離子脂質(zhì) 0.00％-89.99％抗氧劑 0.00％-40.00％。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的維拉帕米脂質(zhì)體，其特征在于所述的維 拉帕米為外消旋體維拉帕米、左旋維拉帕米和右旋維拉帕米中的任何一 種，或其中任何一種的鹽酸鹽、乳酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、枸櫞酸鹽、馬 來酸鹽、酒石酸鹽和重酒石酸鹽。
3、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的維拉帕米脂質(zhì)體，其特征在于所述的磷 脂為兩條脂肪烴鏈各含有8至26個(gè)飽和或不飽和碳原子的天然來源、人 工合成、人工半合成或人工修飾的磷脂類物質(zhì)，選自大豆卵磷脂、氫化大 豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、氫化蛋黃卵磷脂、磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、 磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇、烷基醚磷脂酰膽堿中的一種或 幾種，或其中任何一種的衍生物的一種或幾種。
4、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的維拉帕米脂質(zhì)體，其特征在于使用殼聚 糖或殼聚糖衍生物對(duì)脂質(zhì)體表面進(jìn)行包覆或修飾。
5、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的維拉帕米脂質(zhì)體，其特征在于所述的陽 離子脂質(zhì)為硬脂酰胺、十八胺、2，3-二油酰氧丙基-1-溴化三甲胺、1,2-二油酰-3-三甲銨基丙烷、二甲基雙十八烷基溴化銨、N， ，N， -二甲氨基 乙基-3-氨甲酰基膽固醇中的一種或幾種。
6、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的維拉帕米脂質(zhì)體，其特征在于所述的抗 氧劑為氫醌、羥基香豆素、維生素E、維生素C、檸檬酸、蘋果酸、抗壞 血酸棕櫚酸酯、沒食子酸烷酯、丁羥基茴香醚、丁羥基甲苯、去甲二氫愈 創(chuàng)木酸、亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉中的一種或幾種。
7、根據(jù)權(quán)利要求l所述的維拉帕米脂質(zhì)體，其特征在于還可加入 滲透壓調(diào)節(jié)劑，滲透壓調(diào)節(jié)劑為氯化鈉、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、木 糖醇、甘油、玻璃酸鈉、透明質(zhì)酸中的一種或幾種。
8、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的維拉帕米脂質(zhì)體，其特征在于該脂質(zhì)體 可進(jìn)一步制成滴眼液或注射液，或加入凝膠基質(zhì)制成凝膠劑，或?qū)⑶皟烧?加入凍干保護(hù)劑制成凍干制品。
9、 一種如權(quán)利要求l所述的維拉帕米脂質(zhì)體的制備方法，其特征在 于方法為硫酸銨梯度法、薄膜分散法、乙醇注入法和逆相蒸發(fā)法。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體公開了維拉帕米脂質(zhì)體及其制備方法。本發(fā)明中維拉帕米脂質(zhì)體由維拉帕米、磷脂、膽固醇、殼聚糖、陽離子脂質(zhì)和抗氧劑等按一定重量百分比組成，采用硫酸銨梯度法、薄膜分散法、乙醇注入法和逆相蒸發(fā)法制備。本發(fā)明使用殼聚糖或其衍生物對(duì)脂質(zhì)體表面進(jìn)行修飾，并將其應(yīng)用于眼用制劑，能夠進(jìn)一步增加脂質(zhì)體的角膜滯留性，顯著提高藥物的角膜透過量，相對(duì)于普通脂質(zhì)體具有明顯的優(yōu)勢。本發(fā)明的制備的脂質(zhì)體包封率高，穩(wěn)定性好，具有優(yōu)良的生物相容性、生物黏附性和生物可降解性，可實(shí)現(xiàn)緩釋和長效給藥，特別適合于眼部給藥，能更好地發(fā)揮維拉帕米的抗青光眼和抗白內(nèi)障等眼部作用。
文檔編號(hào)A61K31/277GK101199505SQ20071015906
公開日2008年6月18日 申請日期2007年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月20日
發(fā)明者津 關(guān), 莊春陽, 寧 李, 想 李, 潘衛(wèi)三 申請人:沈陽藥科大學(xué)