專利名稱：納米纖維組織工程血管及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種組織工程材料及其制備方法，特別涉及一種由絲素、明膠 和細(xì)胞外基質(zhì)蛋白共混形成納米纖維膜(血管內(nèi)層)，再與合成高聚物纖維膜 (血管外層)復(fù)合分層構(gòu)建組織工程血管的方法，屬于高分子材料生物醫(yī)學(xué)應(yīng) 用領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
血管損傷由于自修復(fù)能力差而成為困繞醫(yī)學(xué)界的難題。自1952年Voorhees 首次研制成功維綸人造血管，并于次年用于臨床取得成功以來，人們陸續(xù)開發(fā) 出各種材料、多種成型方法的人造血管?，F(xiàn)在普遍采用的移植血管主要采用滌 綸(Dacron)、尼龍(Nylon)和聚四氟乙烯(PTFE)等非降解材料編織而成，但這些 非降解材料不支持內(nèi)皮細(xì)胞的粘附和生長，血管難以充分內(nèi)皮化，對(duì)血管的長 期適應(yīng)性造成障礙。該類血管只能用作病變血管的替代品，且口徑較粗，口徑 在6mm以下的血管易造成栓塞而在臨床上無法使用。近年來組織工程血管(tissue engineered blood vessels, TEBV)的發(fā)展 為血管損傷治療開辟了另外的途徑，組織工程血管的基本原理是使用可降解材 料構(gòu)建供細(xì)胞粘附和生長的支架(scaffold),體外將內(nèi)皮細(xì)胞(endothelial cell, EC)等種子細(xì)胞種植于支架，培養(yǎng)一段時(shí)間后植入體內(nèi)，在體內(nèi)支架材 料不斷降解由宿主自身組織逐步替代，最終的結(jié)構(gòu)和功能類似于自體血管，由 此獲得理想的中遠(yuǎn)期通暢率和抗感染性能。與編織人造血管相比，組織工程血 管更具優(yōu)勢。當(dāng)前組織工程血管的研究主要選用具有良好生物性能的天然及合 成高聚物，根據(jù)細(xì)胞外基質(zhì)蛋白由50 500nm纖維構(gòu)成的特點(diǎn)，通過不同方法 構(gòu)建由納米纖維組成的血管，體外引導(dǎo)細(xì)胞增殖、擴(kuò)展和分化，體內(nèi)移植后最 終實(shí)現(xiàn)自體血管的再生。靜電紡絲法能夠直接形成所需口徑的管狀結(jié)構(gòu)，而且 能夠模仿細(xì)胞外基質(zhì)的組成和結(jié)構(gòu)，為細(xì)胞提供良好的生長環(huán)境，為自體血管 的再生和重建提供重要前提。材料的組成影響血管的力學(xué)性能和生物性能。有文獻(xiàn)報(bào)道聚乳酸(PLA)電 紡纖維膜為外層，聚己內(nèi)酯(PCL)電紡纖維膜為內(nèi)層的組織工程血管(Design of scaffolds for blood vessel tissue engineering using a multi-layering electrospinning technique, Acta Biomaterial ia [J] ， 2005， 1:575 - 582), 雖能使血管有一定的力學(xué)性能，但因?qū)僭魉圆牧喜焕诩?xì)胞生長和分化。天 然聚合物形成的納米纖維具有良好的生物性能，可以支持細(xì)胞生長，但力學(xué)性 能差，在水中易溶解，經(jīng)化學(xué)試劑處理后變脆，難以用作血管材料。血管材料包括天然生物材料與合成材料，兩者各有優(yōu)缺點(diǎn)，前者包含許多 生物信息，提供信號(hào)，有利于細(xì)胞的粘附和生長，后者力學(xué)性能好，可塑性強(qiáng)。 但是，利用兩種材料良好的互補(bǔ)性，采用天然材料與合成材料相結(jié)合，形成能 夠同時(shí)具有良好的力學(xué)和生物學(xué)性能的復(fù)合納米纖維組織工程血管及其制備方法的技術(shù)，目前未見報(bào)道。發(fā)明內(nèi)容為了克服現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明提供一種不僅具有與人體良好的組 織相容性和生物可降解性，且還具有良好的力學(xué)性能的組織工程血管及其制備 方法。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)方案是提供一種納米纖維組織工程血管，它由內(nèi)外 兩層納米纖維形成的三維網(wǎng)狀無紡膜組成；所述的血管內(nèi)層材料為天然聚合物， 按重量計(jì)，它由40 80%的絲素、20 50%的明膠和0 20%的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白組 成，天然聚合物納米纖維直徑為40 300nrn;所述的血管外層材料由合成聚合 物組成，合成聚合物納米纖維直徑為600 1800nm。制備上述納米纖維組織工程血管的方法，先將蠶絲經(jīng)脫膠、溶解、透析、 過濾，于室溫下干燥制得純絲素蛋白，再進(jìn)行如下步驟的加工a.按重量計(jì)，將40 80%的絲素、20 50%的明膠和0 20%的細(xì)胞外基質(zhì)蛋 白共混后溶解在三氟乙醇、甲酸、六氟異丙醇和六氟丙酮中的一種或多種溶劑 中，制備質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8 25%的天然聚合物紡絲原液，采用靜電紡絲工藝，在收 集輥上形成納米纖維三維網(wǎng)狀無紡膜內(nèi)層；所述的收集輥勻速轉(zhuǎn)動(dòng)并相對(duì)于紡 絲噴嘴作軸向勻速運(yùn)動(dòng)。b.將合成高聚物溶解在六氟異丙醇、三氯甲垸、二氯甲烷、四氫呋喃、丙酮和二甲基甲酰胺中的一種或多種溶劑中，制備質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3 8%的合成高聚 物紡絲原液，采用靜電紡絲工藝，在上述收集輥的無紡膜內(nèi)層上形成納米纖維 三維網(wǎng)狀無紡膜外層；C.將收集輥上形成的內(nèi)外兩層納米纖維三維網(wǎng)狀無紡膜取下后進(jìn)行交聯(lián)處理，制得納米纖維組織工程血管。上述技術(shù)方案中，所述的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白為膠原蛋白 蛋白、纖維蛋白原和血清纖維結(jié)合蛋白中的一種或多種。所述的合成聚合物為聚己內(nèi)酯(PCL)、聚乳酸(PLA)(PLGA)和聚羥基乙酸(PGA)中的一種或多種。所述納米纖維組織工程血管的口徑為3 6mm，長度超過6cm，血管管壁厚 度為0.3 0.7mm;按重量計(jì)，內(nèi)層材料占20 50t內(nèi)層納米纖維膜的孔隙率 為60 90%，平均孔徑為0. 5 5u m。所述的收集輥經(jīng)過表面處理，其方法包括氟化處理、包覆聚四氟乙烯或涂 覆聚乙烯醇(PVA)。所述的交聯(lián)處理方法包括熱交聯(lián)處理、紫外線輻射交聯(lián)處理和化學(xué)交聯(lián)劑 處理。其中，所述的熱交聯(lián)處理方法是在50 80'C的溫度中加熱處理40 100min。所述的紫外線輻射交聯(lián)處理方法是在波長為280 320nm的紫外線下輻 射處理24 48h。所述化學(xué)交聯(lián)劑處理的方法是在交聯(lián)劑中真空浸漬30min 24h，或利用交聯(lián)劑飽和蒸氣處理30min 24h后，再真空干燥或于50°C的溫度 條件下烘干處理1 24 h;所述的交聯(lián)劑為甲醇、乙醇、戊二醛、甲醛或二乙 烯基砜。本發(fā)明技術(shù)方案中，根據(jù)不同材料具有不同降解速度的特點(diǎn)，可通過改變 材料的組成和比例的方法，從而獲得具有不同降解速度的組織工程血管，同時(shí)， 還可通過改變化學(xué)交聯(lián)方法和工藝條件，以改善分子內(nèi)部構(gòu)象，調(diào)節(jié)結(jié)晶度， 獲得具有不同降解速度的組織工程血管。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下明顯的有益效果、彈性蛋白、層粘連 、聚乳酸-羥基乙酸1. 本發(fā)明所提供的一種分層構(gòu)建的納米纖維組織工程血管，內(nèi)層由40 300nm的天然聚合物纖維組成，外層由600 1800nm的合成聚合物纖維組成，兩層纖維膜結(jié)合牢固均勻、不分離、不脫落。內(nèi)層能夠模仿細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)造， 為內(nèi)皮細(xì)胞提供良好的生長環(huán)境，支持細(xì)胞的粘附、增殖和分化，有利于血管 的內(nèi)皮化；外層經(jīng)交聯(lián)處理后，材料具有良好的強(qiáng)度、柔軟性和彈性，能夠滿 足作為組織工程血管的力學(xué)要求。整個(gè)血管壁纖維以無紡狀排列，具有多孔結(jié) 構(gòu)，它的微孔彎曲，存在于纖維間，能夠滿足血管內(nèi)外營養(yǎng)傳輸，防止血液滲 透，移植時(shí)不需要預(yù)凝處理。2. 本發(fā)明所提供的一種分層構(gòu)建的納米纖維組織工程血管，制備工藝能夠 控制血管的口徑、壁厚和材料組成，并且通過調(diào)節(jié)材料組成和共混比例可以改 變降解速度，能夠隨自體血管的再生而自然降解，防止栓塞。3. 本發(fā)明所提供的一種分層構(gòu)建的納米纖維組織工程血管，可通過控制交 聯(lián)工藝條件，或改變交聯(lián)方法，有效改變材料內(nèi)部分子構(gòu)象，調(diào)節(jié)材料結(jié)晶度， 從而具有可控的降解速度，體內(nèi)移植時(shí)，能夠根據(jù)自體血管組織再生速度，調(diào) 節(jié)血管材料的降解速度。


圖l是按照本發(fā)明實(shí)施例3提供的技術(shù)方案所獲得的組織工程血管，經(jīng)成 纖維細(xì)胞培養(yǎng)12天后的斷面掃描電鏡照片圖。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案及其效果作進(jìn)一步描述 實(shí)施例1:1. 將0.2kg廢桑蠶絲放入6L濃度為0.05%的碳酸鈉水溶液，煮沸0.5h,重復(fù)煮三次，脫盡蠶絲表面絲膠，室溫下晾干，得到絲素；2. 將干燥絲素用1.2L摩爾比為1:8:2的氯化鈣、水、乙醇溶液，在75±2 'C下加熱溶解成絲素蛋白溶液；3. 將步驟2制得的絲素蛋白溶液倒入纖維素透析袋中，先用自來水透析 48h，再用去離子水透析8h，除去溶液中的乙醇和氯化鈣小分子，過濾后制得純絲素蛋白溶液；4. 分別取100ml純絲素蛋白溶液倒入面積為20X20cm2的聚苯乙烯塑料 盤中，在恒溫恒濕(25°C， RH65%)下干燥成膜；5. 稱取6.58g再生絲素膜和3.49g醫(yī)用明膠，加入無水甲酸70g,在室溫 下攪拌30min，攪拌成均勻的天然聚合物紡絲原液，其質(zhì)量分?jǐn)?shù)為12.5%。將 2g PLA溶解在48g氯仿/丙酮(體積比1: 1)混合溶劑中，獲得4%的天然聚 合物紡絲原液；6. 將步驟5制得的天然聚合物紡絲原液倒入微量注射泵，由泵將紡絲液 喂入紡絲管內(nèi)。將靜電發(fā)生器的陽極與金屬噴嘴相接，陰極與金屬轉(zhuǎn)輥摩擦的 電刷連接，轉(zhuǎn)棍直徑5mm，轉(zhuǎn)棍表面包覆聚四氟乙烯，轉(zhuǎn)輥長度為8cm，收集 輥平移速度為2m/h,轉(zhuǎn)速為350rpm。調(diào)節(jié)靜電發(fā)生器的靜電壓為25kV，紡絲 距離為10cm，開啟靜電發(fā)生器和微量注射泵，調(diào)節(jié)微量注射泵使紡絲液的喂 入量為0.3ml/h，連續(xù)靜電紡絲75min，在轉(zhuǎn)輥上收集到由天然聚合物材料形成 的納米纖維三維網(wǎng)狀無紡膜內(nèi)層；7. 將步驟5所得的PLA紡絲液倒入微量注射泵，由泵將紡絲液注入紡絲 管內(nèi)。按步驟6進(jìn)行靜電紡絲，靜電紡絲電壓為26kV，紡絲距離13cm、紡絲 液喂入量0.1ml/h，收集輥平移速度為2m/h，轉(zhuǎn)速為1500rpm。在步驟6已形 成的包覆有納米纖維無紡膜內(nèi)層的轉(zhuǎn)輥上收集由PLA材料形成的納米纖維無 紡膜外層，靜電紡絲時(shí)間為45min，即可分層構(gòu)建組織工程血管；8. 將步驟7制備的組織工程血管從轉(zhuǎn)輥取下，于室溫下放入100ml無水甲 醇中真空浸漬lh，隨后取出放入真空干燥箱內(nèi)抽真空24h，用雙層塑料袋包裝 并在高頻封口機(jī)上封口，然后用Y射線輻照消毒，得到納米纖維組織工程血管。 它的內(nèi)層纖維直徑為40nm 300nm，孔徑為0. 8 u m，孔隙率為81%，血管壁厚 為0. 45mm， 口徑為5mm，長度為8mm，爆破強(qiáng)度為0. 3MPa，縫合強(qiáng)度為1. 2N/ 針，內(nèi)層纖維膜能夠支持成纖維細(xì)胞、人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞增殖、 粘附和擴(kuò)展，外層能夠提供良好力學(xué)性能的組織工程血管的方法。本實(shí)施例中所述的組織工程血管的降解速度隨外層PLA含量和內(nèi)層明膠含 量的增加而加快，甲醇處理時(shí)間增長，降解速度變慢。實(shí)施例二1. 將O.lkg下腳蠶絲放入3L濃度為0.05%的碳酸鈉水溶液中，煮沸0.5h,重復(fù)處理三次，脫盡蠶絲外圍的絲膠，得到絲素；2. 將步驟1所得的干燥絲素用0.6L摩爾比為1:8:2的氯化鈣、水、乙醇 溶液，在78土2'C下加熱溶解成絲素蛋白溶液；3. 將上述絲素蛋白溶液倒入纖維素透析袋中，先用自來水透析，再用去 離子水透析，以除去溶液中的乙醇和氯化鈣小分子，再用多層脫脂紗布過濾， 制得純絲素蛋白溶液；4. 分別取100ml純絲素蛋白溶液倒入面積為20X20cm2的不銹鋼盤中， 在-20。C下冷凍8h，再置于冷凍干燥機(jī)內(nèi)真空干燥20h,制得海綿狀再生絲素 膜；5. 稱取7.3g再生絲素膜、2g明膠和lg彈性蛋白、0.42g層粘連蛋白，加 入69.5g三氟乙醇中，在室溫下攪拌30分鐘，紡絲液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為13.4°/。。稱取 2.4gPLGA溶解在56.9g三氯甲烷中，獲得4%的紡絲液；6. 將步驟5制得的絲素-彈性蛋白紡絲液倒入微量注射泵。由泵將紡絲液 注入紡絲管內(nèi)。將靜電發(fā)生器的陽極與金屬噴嘴相接，陰極與金屬轉(zhuǎn)輥摩擦的 電刷連接，調(diào)節(jié)靜電發(fā)生器的靜電壓為28kV，紡絲距離為13cm，開啟靜電發(fā) 生器和微量注射泵，調(diào)節(jié)微量注射泵使紡絲液的喂入量為0.3ml/h，轉(zhuǎn)輥直徑 為4rnm,長度為8cm，表面經(jīng)氟化處理，收集輥平移速度為3m/h，轉(zhuǎn)速為 350rpm，連續(xù)靜電紡絲60min，在轉(zhuǎn)輥上收集到絲素-明膠共混納米纖維膜；7. 將步驟5所得的PLGA紡絲液倒入微量注射泵，由泵將紡絲液注入紡 絲管內(nèi)。按步驟6進(jìn)行靜電紡絲，靜電紡絲電壓為26kV，紡絲距離13cm、紡 絲液喂入量0.15ml/h，收集輥平移速度為4m/h，轉(zhuǎn)速為1000rpm。在步驟6 已形成的包覆有絲素-彈性蛋白納米纖維膜的轉(zhuǎn)輥上收集PLGA纖維膜，靜電 紡絲時(shí)間為38min,即可分層構(gòu)建組織工程用血管；8. 將步驟7制備的組織工程血管從轉(zhuǎn)輥取下，于7(TC下加熱60min，在波 長為280nm的紫外線下輻射36h，用雙層塑料袋包裝并在高頻封口機(jī)上封口 ， 然后用y射線輻照消毒，得到納米纖維組織工程血管，其內(nèi)層纖維直徑在 40nm 300nm之間，孔徑為0.8fim，孔隙率為84%，血管壁厚為0.49mm, 口徑為4mm，長度為8mm,爆破強(qiáng)度為0.25MPa，縫合強(qiáng)度為0.9N/針。本實(shí)施例中所述的組織工程血管的降解速度隨外層PLGA含量和內(nèi)層明膠 蛋白含量的增加而加快，加熱及在紫外線下輻射時(shí)間增長，降解速度變慢。實(shí)施例三1. 將0.15kg下腳蠶絲放入4.5L濃度為0.05%的碳酸鈉水溶液中，煮沸 0.5h,重復(fù)處理三次，得到絲素；2. 將步驟1所得的干燥絲素用0.9L摩爾比為1:8:2的氯化鈣、水、乙醇 溶液，在75土2'C下加熱溶解成絲素蛋白溶液；3. 將上述絲素蛋白溶液倒入纖維素透析袋中，先用自來水透析，再用去 離子水透析，以除去溶液中的乙醇和氯化鈣小分子，再用多層脫脂紗布過濾， 制得純絲素蛋白溶液；4. 分別取100ml純絲素蛋白溶液倒入面積為20X20cii^的ABS盤中，室 溫干燥得再生絲素膜；5. 稱取6.7g再生絲素膜、1.3g明膠和0.7g彈性蛋白，加入70.5g六氟異 丙醇中，在室溫下攪拌30分鐘，紡絲液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為12%。稱取1.2g PLA和 1.3gPCL溶解在58.3g三氯甲烷/丙酮(體積比2:1)中，獲得4.11%的紡絲液；6. 將步驟5制得的絲素-彈性蛋白-膠原紡絲液倒入微量注射泵。由泵將紡 絲液注入紡絲管內(nèi)。將靜電發(fā)生器的陽極與金屬噴嘴相接，陰極與金屬轉(zhuǎn)輥摩 擦的電刷連接，調(diào)節(jié)靜電發(fā)生器的靜電壓為26kV，紡絲距離為15cm，開啟靜 電發(fā)生器和微量注射泵，調(diào)節(jié)微量注射泵使紡絲液的喂入量為0.2ml/h，轉(zhuǎn)輥 直徑為4mm，長度為8cm，表面涂覆PVA，收集輥平移速度為3m/h，轉(zhuǎn)速為 500rpm，連續(xù)靜電紡絲40min，在轉(zhuǎn)輥上收集到絲素-彈性蛋白-膠原共混納米 纖維膜；7. 將步驟5所得的PLA-PCL紡絲液倒入微量注射泵，由泵將紡絲液注入 紡絲管內(nèi)。按步驟6進(jìn)行靜電紡絲，靜電紡絲電壓為30kV，紡絲距離15cm、 紡絲液喂入量0.25ml/h，收集輥平移速度為4m/h,轉(zhuǎn)速為1800rpm。在步驟6 已形成的包覆有絲素-彈性蛋白-膠原納米纖維膜的轉(zhuǎn)輥上收集PLA-PCL纖維 膜，靜電紡絲時(shí)間為40min，即可分層構(gòu)建組織工程用血管；8.將步驟7制備的組織工程血管從轉(zhuǎn)輥取下，放入甲醛飽和蒸氣中處理 lh,隨后取出放入真空干燥箱內(nèi)抽真空24h，用雙層塑料袋包裝并在高頻封口 機(jī)上封口，然后用Y射線輻照消毒，得到納米纖維組織工程血管，內(nèi)層纖維直 徑在60nm 300nm之間，孔隙率為79%，孔徑為1.8fim，血管壁厚為0.47mm， 口徑為4mm，長度為8mm，爆破強(qiáng)度為0.4MPa，縫合強(qiáng)度為1.5N/針。本實(shí)施例中所述的組織工程血管的降解速度隨外層PLA和內(nèi)層明膠蛋白 含量的增加而提高，在飽和蒸汽中處理時(shí)間提高，降解速度變慢。將成纖維細(xì)胞植入內(nèi)層納米纖維膜內(nèi)生長、增殖。參見附圖1，成纖維細(xì)胞經(jīng)12天的培養(yǎng)后，由斷面掃描電鏡照片圖可以看到細(xì)胞粘附在共混層纖維 表面，細(xì)胞呈紡錘形并以單層細(xì)胞排列在纖維表面，細(xì)胞連為整體，表明納米 纖維能夠支持細(xì)胞的粘附和增殖。
權(quán)利要求
1.一種納米纖維組織工程血管，其特征在于它由內(nèi)外兩層納米纖維形成的三維網(wǎng)狀無紡膜組成；所述的血管內(nèi)層材料為天然聚合物，按重量計(jì)，它由40～80％的絲素、10～50％的明膠和0～20％的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白組成，內(nèi)層納米纖維直徑為40～300nm；所述的血管外層材料由合成聚合物組成，外層納米纖維直徑為600～1800nm。
2. —種制備納米纖維組織工程血管的制備方法，先將蠶絲經(jīng)脫膠、溶解、 透析、過濾，于室溫下干燥制得純絲素蛋白，其特征在于再進(jìn)行如下步驟的加 工a. 按重量計(jì)，40 80%的絲素、20 50%的明膠和0 20%的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白 共混后溶解在三氟乙醇、甲酸、六氟異丙醇和六氟丙酮中的一種或多種溶劑中， 制備質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8 25%的天然聚合物紡絲原液，采用靜電紡絲工藝，在收集輥 上形成納米纖維三維網(wǎng)狀無紡膜內(nèi)層；所述的收集輥勻速轉(zhuǎn)動(dòng)并相對(duì)于紡絲噴 嘴作軸向勻速運(yùn)動(dòng)。b. 將合成高聚物溶解在六氟異丙醇、三氯甲烷、二氯甲烷、四氫呋喃、丙 酮和二甲基甲酰胺中的一種或多種溶劑中，制備質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3 8%的合成高聚物 紡絲原液，采用靜電紡絲工藝，在上述收集輥的無紡膜內(nèi)層上形成納米纖維三 維網(wǎng)狀無紡膜外層；C.將收集輥上形成的內(nèi)外兩層納米纖維三維網(wǎng)狀無紡膜取下后進(jìn)行交聯(lián)處理，制得納米纖維組織工程血管。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種納米纖維組織工程血管，其特征在于所述 的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白為膠原蛋白、彈性蛋白、層粘連蛋白、纖維蛋白原和血清纖 維結(jié)合蛋白中的一種或多種。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種納米纖維組織工程血管，其特征在于所述 的合成聚合物為聚己內(nèi)酯、聚乳酸、聚乳酸-羥基乙酸和聚羥基乙酸中的一種或多種。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種納米纖維組織工程血管，其特征在于它的口徑為3 6mm，長度超過6cm,血管管壁厚度為0. 3 0. 7mm;按重量計(jì)，內(nèi)層 材料占20 50%;內(nèi)層納米纖維膜的孔隙率為60 90%，平均孔徑為0. 5 5u m。
6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種納米纖維組織工程血管的制備方法，其特征在于所述的收集輥經(jīng)過表面處理，其方法包括氟化處理、包覆聚四氟乙烯或涂覆PVA。
7. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種納米纖維組織工程血管的制備方法，其特征在于所述的交聯(lián)處理方法包括熱交聯(lián)處理、紫外線輻射交聯(lián)處理和化學(xué)交聯(lián)劑處理。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種納米纖維組織工程血管的制備方法，其特征 在于所述的熱交聯(lián)處理方法是在50 80'C的溫度中加熱處理40 100min。
9. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種納米纖維組織工程血管的制備方法，其特征 在于所述的紫外線輻射交聯(lián)處理方法是在波長為280 320nm的紫外線下輻射 處理24 48h。
10. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種納米纖維組織工程血管的制備方法，其特征在于所述化學(xué)交聯(lián)劑處理的方法是在交聯(lián)劑中真空浸漬30min 24h,或利 用交聯(lián)劑飽和蒸氣處理30min 24h后，再真空干燥或于50'C的溫度條件下烘干 處理1 24 h;所述的交聯(lián)劑為甲醇、乙醇、戊二醛、甲醛或二乙烯基砜。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種組織工程材料及其制備方法，特別涉及一種納米纖維組織工程血管及其制備方法。它由內(nèi)外兩層納米纖維形成的三維網(wǎng)狀無紡膜組成；血管內(nèi)層材料為天然聚合物，按重量計(jì)，其中40～80％為絲素，20～50％為明膠，0～20％為細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，血管外層材料為合成聚合物。其制備方法是將天然聚合物溶解在三氟乙醇等溶劑中，合成高聚物溶解在六氟異丙醇等溶劑中，分別制成紡絲原液，采用靜電紡絲工藝，在收集輥上先后形成內(nèi)層和外層，取下后進(jìn)行交聯(lián)處理，制得納米纖維組織工程血管。它的內(nèi)層能夠模仿細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)造，為內(nèi)皮細(xì)胞提供良好的生長環(huán)境，支持細(xì)胞的粘附、增殖和分化，有利于血管的內(nèi)皮化，外層具有良好的力學(xué)性能。
文檔編號(hào)A61L27/00GK101214393SQ200710192030
公開日2008年7月9日 申請(qǐng)日期2007年12月28日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月28日
發(fā)明者吳佳林, 尹桂波, 張幼珠, 施德兵, 王曙東, 王立新, 王紅衛(wèi), 符偉國, 董智慧 申請(qǐng)人:蘇州大學(xué)