專利名稱：：一種治療上呼吸道感染的中藥制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種治療上呼吸道感染的中藥制劑及其制備方法，屬于中藥制藥的
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：上呼吸道感染(感冒)疾病是臨床常見、多發(fā)性疾病，四季可發(fā)，尤以冬春季多發(fā)，發(fā)病率高。且近年由于感冒病毒株的變異，以及城鄉(xiāng)空氣污染、城市化帶來的運(yùn)動缺少、工作繁忙致人體抵抗力降低等因素的影響，發(fā)病率居高不下，給患者帶來諸多不適，嚴(yán)重影響工作和生活。據(jù)統(tǒng)計(jì)，成年人每年要患感冒3～4次，兒童則多達(dá)6次以上。職工缺勤的36％、學(xué)生病假的67％均是由感冒造成的，感冒對孕婦、老人和兒童造成的危害也很大。我國每年約有75％的人至少患一次感冒，1998年門診病例的20～30％是因感冒而就醫(yī)，加上自購藥物治療者，全國估計(jì)不下10億人次。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)，每年死于感冒的人數(shù)至少在200萬以上，嚴(yán)重影響人類身體健康。因此，控制感冒的發(fā)生，減輕感冒對人類身體健康的危害，是醫(yī)藥學(xué)界十分重視的一項(xiàng)研究課題。而研制開發(fā)治療感冒疾病的藥物顯得尤為重要。另據(jù)中國非處方藥協(xié)會及上海華氏大藥房有限公司統(tǒng)計(jì)，目前我國常見病癥自我藥療比例最高的是感冒藥，為89.6％，高出第二名30個百分點(diǎn)。這種現(xiàn)象在全球普遍存在。據(jù)估計(jì)，我國每年的感冒藥銷售額約為100億元人民幣左右。上呼吸道感染(感冒)系指自鼻腔至喉部之間的感染，是最常見的感染性疾病。本病屬中醫(yī)感冒范疇?，F(xiàn)代中醫(yī)對本病病因病機(jī)的認(rèn)識基本一致主要是感受風(fēng)邪所致，或觸冒時(shí)行之氣，或風(fēng)寒暑濕等六淫之邪挾時(shí)行之氣侵入人體而發(fā)病。多發(fā)于氣候突變，寒暖失常之時(shí)。一年四季均可發(fā)病，但以冬春季節(jié)為多見。因冬春季節(jié)鼻腔咽喉部血管收縮，粘膜干燥，細(xì)胞破裂，抗體水平下降。一般先出現(xiàn)惡寒發(fā)熱等衛(wèi)表之癥，此乃衛(wèi)陽被遏，營衛(wèi)失和，正邪相爭所致。外邪犯肺，肺氣失于宣肅，則見咳嗽、鼻塞等癥；邪犯經(jīng)絡(luò)則全身酸痛；邪氣上擾則頭痛。體質(zhì)較強(qiáng)者，一般僅侵襲肺衛(wèi)，以表證為主，尚易解散；若年老體弱者，則易由表入里，使癥狀加重，或變生它病。對上呼吸道感染的治療，過去主要是按辨證分型的方法進(jìn)行治療，經(jīng)近10年的臨床研究表明，僅沿襲傳統(tǒng)的辨證分型論治方法，遠(yuǎn)遠(yuǎn)解決不了臨床上所出現(xiàn)的復(fù)雜多變的問題，只有以辨證分型為主，辨病與辨證相結(jié)合才能滿足臨床需要。目前，上呼吸道感染西醫(yī)雖有抗病毒藥物、抗生素及人體白細(xì)胞干擾素等，但尚無理想效果。中醫(yī)藥在防治感冒上確有所長，如今辨病和辨證相結(jié)合通治感冒已成為發(fā)展趨勢。另外，風(fēng)熱型和熱盛型感冒有增多的趨勢，這與近年來感冒病毒型、株變異和城鄉(xiāng)空氣污染使人體抵抗力降低以及城市化帶來的運(yùn)動缺少，工作繁忙有關(guān)，因此加強(qiáng)對其防治的研究，提供一種安全、有效、價(jià)廉的中藥，將具有重要的現(xiàn)實(shí)意義和廣泛的市場前景。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種治療上呼吸道感染的中藥制劑及其制備方法。本發(fā)明采用現(xiàn)代制劑技術(shù)，以藥效學(xué)試驗(yàn)為基礎(chǔ)對制備工藝進(jìn)行研究，羊耳菊、穿心蓮經(jīng)大孔樹脂吸附技術(shù)分離純化，有效成分得到充分富集，總固體物明顯降低，克服了成品易吸潮，日服用量大，貯藏不便，質(zhì)量不易控制，穩(wěn)定性差等缺點(diǎn)。本發(fā)明是這樣構(gòu)成的一種治療上呼吸道感染的中藥制劑，按照重量組份計(jì)算，是由羊耳菊3～5份、穿心蓮1～2份和石膏2～4份制成的。具體地說，按照重量組份計(jì)算，它是由羊耳菊4份、穿心蓮2份和石膏3份制成的。所述的中藥制劑為顆粒劑、片劑或膠囊劑。本發(fā)明所述治療上呼吸道感染的中藥制劑的制備方法為按比例稱取羊耳菊、穿心蓮和石膏，加水煎煮3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液濃縮成稠膏，加入適量淀粉，混勻，制粒，干燥，按常規(guī)方法制備成各種不同的制劑。另一種制備方法為按比例稱取羊耳菊、穿心蓮和石膏，加水煎煮3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液濃縮成浸膏，加乙醇使含醇量為50～80％，混勻，放置24小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇，濃縮成稠膏，加入適量淀粉，混勻，制粒，干燥，按常規(guī)方法制備成各種不同的制劑。再一種制備方法為按比例稱取三味藥材，將羊耳菊和穿心蓮加水煎煮3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液濃縮成浸膏，加乙醇使含醇量為50～80％，混勻，放置24小時(shí)，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮液上D101大孔吸附樹脂柱，用40～90％乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，真空干燥或微波真空干燥，粉碎，得提取物；石膏加水煎煮，濃縮，干燥，得提取物；合并兩種提取物，加入適量淀粉，混勻，制粒，干燥，按常規(guī)方法制備成各種不同的制劑。其制備方法還可以為按比例稱取三味藥材，羊耳菊、穿心蓮分別加水煎煮提取，濃縮，用乙醇沉淀處理，回收乙醇；水溶液分別上D101大孔吸附樹脂柱，棄去穿透液，用乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，干燥，粉碎，分別得羊耳菊、穿心蓮提取物；石膏加水煎煮，濃縮，干燥，得提取物；合并三種提取物，加入適量淀粉，混勻，制粒，干燥，按常規(guī)方法制備成各種不同的制劑。上述方法的具體過程為按比例稱取三味藥材，羊耳菊、穿心蓮分別加10倍量水煎煮提取3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮成浸膏，加乙醇使含醇量為50～80％，混勻，放置24小時(shí)，濾過，濾液減壓回收乙醇；水溶液分別上D101大孔吸附樹脂柱，棄去穿透液，用40～90％乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，減壓真空干燥或微波真空干燥，粉碎，分別得羊耳菊、穿心蓮提取物；石膏加水煎煮，濃縮，干燥，得提取物；合并三種提取物，加入適量淀粉，混勻，制粒，干燥，制備成顆粒劑，或壓制成片劑，或裝入膠囊制成膠囊劑。本發(fā)明處方由羊耳菊、穿心蓮和石膏三味藥組成，其中羊耳菊性辛，味微苦。散風(fēng)清熱，解毒消腫。用于感冒發(fā)熱，咽喉腫痛，風(fēng)濕疼痛，癰瘡疔毒，乳癰?！顿F州中藥資源》清熱，補(bǔ)虛，除痰定喘?！吨袊褡逅幹尽酚涊d苗族用于扁桃體炎、支氣管炎、牙齦炎、乳腺炎?，幾屐铒L(fēng)消腫、行氣止痛、散寒解表。彝族清熱瀉火。用于牙痛、泌尿道感染。壯族清熱解毒，散風(fēng)消腫。用于感冒發(fā)熱，咽喉腫痛，風(fēng)濕疼痛，癰瘡疔毒，乳癰。傣族用于小兒發(fā)燒。水煎液對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、宋氏痢疾桿菌均有較好的作用。臨床用于治療急性扁桃體炎、慢性支氣管咽、關(guān)節(jié)炎等。穿心蓮性味苦，寒。歸心、肺、大腸、膀胱經(jīng)。功能清熱解毒，涼血，消腫。用于感冒發(fā)熱，咽喉腫痛，口舌生瘡，頓咳勞嗽，泄瀉痢疾，癰腫瘡瘍，毒蛇咬傷。《泉州本草》清熱解毒，消炎退腫。治咽喉炎癥，痢疾，高熱?，F(xiàn)代藥理研究表明穿心蓮有較明顯抗菌、抗病毒作用。石膏性味辛、甘、大寒。歸肺、胃經(jīng)。功能清熱瀉火，除煩止渴，收斂生肌。用于壯熱煩渴，肺熱喘咳，胃火牙痛，瘡瘍不斂。《別錄》“除時(shí)氣頭痛身熱……解肌發(fā)汗；止消渴，咽熱?！薄侗静菅芰x補(bǔ)遺》“石膏，本陽明經(jīng)藥，陽明主肌肉，其甘也，能緩脾益氣，止渴去火，其辛也，能解肌出汗，上行至頭，又入手太陰少陽，而可為三經(jīng)之主者?！薄侗静萁?jīng)疏》“石膏本解實(shí)熱，祛暑氣，散邪熱，止渴除煩之要藥。”本發(fā)明根據(jù)外感發(fā)熱，系由六淫之邪侵襲肌表，邪正相爭，營衛(wèi)失和，陽盛于外，初起邪在衛(wèi)表的病因病機(jī)，以及針對外感風(fēng)熱之實(shí)證，以疏風(fēng)解表，清熱驅(qū)邪為組方之法，以性味辛涼的羊耳菊為君，用之疏風(fēng)清熱，解毒利咽；穿心蓮性味苦寒，清熱解毒，疏散肺經(jīng)風(fēng)熱毒邪，清利咽喉，散上焦之風(fēng)熱，助君藥開皮毛而逐邪毒，用之為臣；石膏辛甘大寒，其辛可解肌出汗，其甘可緩脾益氣，止渴去火，其寒能清肺熱，而肺與皮毛相合為佐藥。諸藥配合，共奏疏風(fēng)解表，清熱解毒之效。本發(fā)明制劑的功能主治疏風(fēng)解表，清熱解毒。用于外感風(fēng)熱，癥見發(fā)熱、微惡風(fēng)寒、頭痛、咳嗽、流涕、口渴、咽痛，苔薄白或微黃，脈浮數(shù)，以及上呼吸道感染見上述癥狀者目前，治療上呼吸道感染屬外感風(fēng)熱的中藥制劑達(dá)百余種，劑型幾乎囊括現(xiàn)代常用各種劑型，如丸劑、沖劑(顆粒劑)、片劑、膠囊劑、口服液、注射液、栓劑、糖漿劑、茶劑等，多以復(fù)方制劑為主。本發(fā)明制劑與同類品種相比較，具有以下特點(diǎn)(1)與適應(yīng)癥相同的同類藥物相比，本制劑除了針對上呼吸道感染的特點(diǎn)疏風(fēng)解表外，還注重清熱解毒熱，針對實(shí)證組方，以達(dá)到標(biāo)本兼治之目的。(2)處方組成從中醫(yī)臨床實(shí)踐出發(fā)，吸取中醫(yī)傳統(tǒng)及民間用藥經(jīng)驗(yàn)，根據(jù)上呼吸道感染臨床特點(diǎn)和適應(yīng)證候擇藥組方，符合中醫(yī)理論。(3)已在民間試用，療效顯著、見效快，有較好的臨床基礎(chǔ)。為了確保本發(fā)明制劑的效果，申請人進(jìn)行了一系列的藥效學(xué)試驗(yàn)研究，具體如下1.對大鼠腹腔白細(xì)胞游走的影響取體重200±20gSD大鼠60只，隨機(jī)分為6組。給藥組按表1劑量灌胃給藥，正常對照組同法給等容積生理鹽水，陽性對照組灌胃抗病毒顆粒8.0g/kg。每日給藥一次，連續(xù)3天。末次給藥后1h，每鼠腹腔注射1％羧甲基纖維素鈉溶液4ml，3h后處死，腹腔注射生理鹽水5ml沖洗腹腔，計(jì)數(shù)洗出液中的白細(xì)胞數(shù)，結(jié)果見表1。表1對大鼠腹腔白細(xì)胞游走的影響(n＝10，x±SD)與對照組比較*p＜0.05**p＜0.01。結(jié)果表明，本發(fā)明制劑各劑量組和陽性對照組的白細(xì)胞數(shù)明顯低于對照組，與對照組比較有顯著性差異(P＜0.05、P＜0.01)。2.對角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹的影響取體重200±20gSD大鼠60只，隨機(jī)分為6組，每組10只，給藥組按表2劑量灌胃給藥，正常對照組同法給等容積生理鹽水，陽性對照組灌胃抗病毒顆粒8.0g/kg。給藥后1h，于大鼠右后足跖皮下注射1％角叉菜膠0.1ml/只，致炎后1、2、4、6小時(shí)，分別測定致炎前后不同時(shí)間的足跖容積，計(jì)算腫脹值，結(jié)果見表2。表2對角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹的影響(n＝10，x±SD)與對照組比較*p＜0.05**p＜0.01。試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明制劑各劑量組致炎后2和4小時(shí)的腫脹值明顯低于對照組，與對照組比較有顯著性差異(P＜0.05、P＜0.01)。3.對內(nèi)毒素引起家兔發(fā)熱的解熱作用取體重1.8～2.5kg健康家兔若干只，實(shí)驗(yàn)室溫度控制在25℃左右。于試驗(yàn)前3日，每日測正常肛溫2次，選取體溫變動不高于0.3℃的家兔40只，按基礎(chǔ)體溫分層隨機(jī)分為5組。給藥前測定3次肛溫(每30分鐘1次)，以體溫平均值為基礎(chǔ)體溫。給藥組按表3劑量灌胃給藥，正常對照組同法給等容積生理鹽水，陽性對照組灌胃給阿司匹林片0.15g/kg。同時(shí)各組動物耳緣靜脈注射內(nèi)毒素5EU/kg。于內(nèi)毒素攻擊后1、2、3、4、5小時(shí)測定家兔肛溫，結(jié)果見表3。結(jié)果表明，各劑量組能明顯抑制內(nèi)毒素所致家兔體溫的升高，其中中、高劑量組的作用時(shí)間和強(qiáng)度明顯優(yōu)于低劑量組，與對照組比較有顯著性差異(P＜0.05、P＜0.01)。表3對內(nèi)毒素所致家兔發(fā)熱的解熱作用(n＝8，x±SD)與對照組比較*p＜0.05**P＜0.01。4.對免疫功能的影響4.1對小鼠免疫器官重量的影響取體重20±2g昆明種小鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，給藥組按表4劑量灌胃給藥，正常對照組給等容積生理鹽水。每日給藥1次，連續(xù)7天。末次給藥后24h，處死動物，取胸腺和脾臟稱重，計(jì)算胸腺和脾臟指數(shù)。結(jié)果見表4。試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明制劑中、高劑量組小鼠脾臟指數(shù)和高劑量組小鼠胸腺指數(shù)明顯高于對照組，與對照組比較有顯著性差異(P＜0.05、P＜0.01)。4.2對小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬指數(shù)k和吞噬系數(shù)α的影響取體重20±2g小鼠50只，隨機(jī)分為5組，給藥組按表4劑量灌胃給藥，正常對照組給等容積生理鹽水。每日給藥1次，連續(xù)4天。末次給藥后24h，于尾靜脈注射稀釋印度墨汁0.1ml/10g體重，注射后30秒和6分鐘分別從小鼠眼眶后靜脈叢取血25μl于0.1％碳酸鈉2ml中，比色并計(jì)算吞噬指數(shù)k和吞噬系數(shù)α。結(jié)果見表4。試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明制劑高劑量組的吞噬指數(shù)k和吞噬系數(shù)α明顯高于對照組，與對照組比較有顯著性差異(p＜0.05)。4.3對小鼠體液免疫功能的影響取體重20±2g小鼠40只，隨機(jī)分為4組，給藥組按表4劑量灌胃給藥，正常對照組給等容積生理鹽水。每日給藥1次，連續(xù)8天。給藥2天后，腹腔注射綿羊紅細(xì)胞懸液0.2ml/只，于免疫后6天，眼眶取血測定并計(jì)算半數(shù)溶血素值(HC50)。結(jié)果見表4。試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明制劑中、高劑量組的HC50明顯高于對照組，與對照組比較有顯著性差異(p＜0.05)。表4對免疫功能的影響(n＝10，x±SD)與對照組比較*p＜0.05。5.抗病毒作用5.1對流感病毒FM1致小鼠肺炎的影響取體重15.0+0.5gBalb/c小鼠60只，按表5隨機(jī)分成6組，每組10只；除正常對照組外，其余小鼠用乙醚輕度麻醉，以15倍LD50的流感病毒FM1滴鼻，每只0.05ml。給藥組按表5劑量，于感染前一天開始灌胃給藥，每天一次，連續(xù)5天，正常對照組同法給等容積生理鹽水。第6天稱體重(禁水8小時(shí))，處死動物，解剖取肺清洗，去除氣管、肺門淋巴結(jié)等組織，用濾紙吸干水分，稱重，肉眼觀察肺部病變，按以下公式逐個計(jì)算肺指數(shù)和抑制率，結(jié)果見表5。表5對流感病毒FM1致小鼠肺炎的影響(n=10)<tablesid="table5"num="005"><tablewidth="540">組別劑量(g生藥/kg)肺指數(shù)(X±SD)抑制率(％)正常對照組病毒對照組給藥組病毒唑--4.08.016.00.080.91±0.171.42±0.25###1.20±0.001.15±0.21*1.03±0.22**1.01±0.19**13.5118.9325.1226.76</table></tables>與正常對照組比較##P＜0.01、與病毒對照組比較*p＜0.05、**p＜0.01。試驗(yàn)結(jié)果表明，給藥組中劑量(4g生藥/kg)和高劑量(8g/kg)組對流感病毒FM1株所致肺病變有明顯抑制作用，與病毒對照組比較有顯著性差異(P＜0.05、P＜0.01)。5.2對流感病毒感染小鼠的死亡保護(hù)作用取Balb/c小鼠240只，體重14-16g，按表6、7隨機(jī)分成12組，每組20只，除正常對照組外，其余小鼠用乙醚輕度麻醉，以30倍LD50流感病毒滴鼻，每只0.05ml。給藥組按表6劑量，于感染前一天開始灌胃給藥，每天一次，連續(xù)5天，正常對照組同法給等容積生理鹽水。從感染病毒之日起連續(xù)觀察14天，逐日記錄動物癥狀及死亡數(shù)。按以下公式計(jì)算死亡保護(hù)率(％)、延長生命率(％)，結(jié)果見表6、表7。死亡保護(hù)率(％)＝(對照組死亡率-試驗(yàn)組死亡率)×100％表6對小鼠流感病毒FM1毒株感染的死亡保護(hù)作用<tablesid="table6"num="006"><tablewidth="634">組別劑量(g/生藥/kg)動物數(shù)(只)死亡數(shù)(只)死亡率(％)平均存活天數(shù)死亡保護(hù)率(％)延長生命率(％)正常對照組病毒對照組給藥組病毒唑--4.08.016.00.082020202020200151283307560401515＞136.98.1210.26*12.11**12.84**10.036.0*52.0**56.0**16.447.23*69.17**78.21**</table></tables>與病毒對照組比較*p＜0.05**p＜0.01。表7對臨床分離流感病毒B/黔防/252/2001毒株感染的死亡保護(hù)作用與病毒對照組比較*p＜0.05**p＜0.01。試驗(yàn)結(jié)果表明，給藥組中劑量(4.0g/kg)和高劑量(8.0g/kg)組對流感病毒FM1感染小鼠具有死亡保護(hù)作用，與病毒對照組比較，中劑量組有顯著性差異(P＜0.05)，高劑量組有極顯著性差異(P＜0.01)；各劑量組藥物對臨床株流感病毒B/黔防/252/2001感染小鼠均具有死亡保護(hù)作用，與病毒對照組比較，低劑量組有顯著性差異(P＜0.05)，中、高劑量組有極顯著性差異(P＜0.01)。5.3對小鼠體內(nèi)流感病毒增殖的影響取體重14～16gBalb/c小鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，在乙醚輕度麻醉下，以1000倍LD50流感病毒FM1感染小鼠，感染前1天，用不同濃度的受試藥物和病毒唑溶液按表8劑量分別給小鼠灌胃。連續(xù)給藥3天，在感染48小時(shí)后，解剖取肺，固定，制成切片并脫蠟；用流感病毒FM1兔免疫血清37℃作用30分鐘，0.01MPBS輕洗3次，再加1∶10的羊抗兔IgG熒光抗體37℃15分鐘，0.01MPBS輕洗3次，吸干水分，熒光顯微鏡下計(jì)數(shù)各組小鼠細(xì)支氣管內(nèi)含特異性熒光抗體顆粒，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。結(jié)果見表8。表8對流感病毒增殖的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，給藥組中劑量(4.0g/kg)和高劑量(8.0g/kg)組對流感病毒FM1在小鼠體內(nèi)的增殖有明顯的抑制作用，與病毒對照組比較有顯著性差異(P＜0.01)。5.4對病毒細(xì)胞病變的抑制作用將Hep-2和Hela細(xì)胞分別接種在96孔微量培養(yǎng)板上，置37℃培養(yǎng)箱中，長成單層細(xì)胞后，然后每孔加入用維持液配制的100TCID50的各型病毒0.1ml，Hep-2接種呼吸道合胞病毒、副流感病毒，Hela接種腺病毒，吸附2小時(shí)后，傾去病毒液，用維持液清洗3次，然后分別加入不同濃度的藥液，每種濃度的藥液接種6孔。同時(shí)設(shè)病毒對照、細(xì)胞對照、藥物對照和病毒唑?qū)φ铡Ｖ肅O2培養(yǎng)箱中37℃孵育，每天在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞病變，并記錄各孔病變情況。以病毒對照孔細(xì)胞出現(xiàn)明顯病變，細(xì)胞對照孔細(xì)胞無明顯退變時(shí)，判斷結(jié)果，結(jié)果見表9。表9對病毒致細(xì)胞病變的抑制作用注細(xì)胞病變程度按以下標(biāo)準(zhǔn)記錄-細(xì)胞生長正常，無病變出現(xiàn)；±細(xì)胞病變少于細(xì)胞單層的10％；+細(xì)胞病變約占細(xì)胞單層的25％；++細(xì)胞病變約占細(xì)胞單層的50％；+++細(xì)胞病變約占細(xì)胞單層的75％；++++細(xì)胞病變占細(xì)胞單層的100％。結(jié)果表明，在感染100TCID50病毒的情況下，5mg/ml濃度對各種病毒致細(xì)胞病變均有不同的抑制作用。6.抗菌作用6.1體外抗菌試驗(yàn)栆禾逑∈頭取小試管11支，1～9分別加入上述各濃度藥物液體培養(yǎng)基1ml，再加入10-3稀釋的新鮮菌液0.1ml；同法制備試藥對照(不加菌液)和菌株對照(加不含藥物的液體培養(yǎng)基)。置37℃溫箱培養(yǎng)24小時(shí)，觀察細(xì)菌生長情況，以不顯示混濁，完全無菌生長的試藥濃度為藥物對該菌株的最低抑菌濃度(MIC)；選出MIC試驗(yàn)中無菌生長的培養(yǎng)基管，用接種環(huán)取一環(huán)接種于不含試藥的瓊脂培養(yǎng)基上，置37℃溫箱培養(yǎng)18小時(shí)，觀察細(xì)菌生長情況，完全無菌生長的試藥濃度為藥物對該菌株的最低殺菌濃度(MBC)，結(jié)果見表10、11。試驗(yàn)結(jié)果表明，對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、肺炎雙球菌、乙型鏈球菌、腦膜炎雙球菌、流感嗜血桿菌和金黃色葡萄球菌臨床分離菌株、甲型鏈球菌臨床分離菌株均有不同程度的抑制作用和殺菌作用，其中對大腸桿菌的作用較弱。表10抑菌試驗(yàn)(MIC)結(jié)果表11抑菌試驗(yàn)(MBC)結(jié)果6.2體內(nèi)抗菌作用-對細(xì)菌感染所致小鼠死亡的保護(hù)作用取體重17～19gBalb/c小鼠150只，雌雄各半，隨機(jī)分成10組，每組15只，按表12劑量分組，灌胃給藥，對照組給等容積生理鹽水。給藥3天后，于第4天腹腔注射感染小鼠的MLD0.5ml(金黃色葡萄球菌5x107菌/只、金黃色葡萄球菌臨床株7x107菌/只)，再繼續(xù)給藥3天。觀察記錄感染后一周內(nèi)各組小鼠的死亡數(shù)，計(jì)算死亡率，按Biliss法計(jì)算半數(shù)有效量和95％可信限，結(jié)果見表12。表12對金黃色葡萄球菌感染所致小鼠死亡的保護(hù)作用與病毒對照組比較*p＜0.05**p＜0.01。試驗(yàn)結(jié)果表明，各劑量組對金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)株和臨床株感染小鼠致死均有不同程度的保護(hù)作用。7.結(jié)論本發(fā)明制劑能抑制大鼠腹腔白細(xì)胞的游走和角叉菜膠所致的足跖腫脹；對內(nèi)毒素所致的家兔發(fā)熱有明顯的解熱作用；可增加小鼠免疫器官的重量，提高小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬指數(shù)和吞噬系數(shù)，增加小鼠溶血素抗體的生成；對流感病毒FM1致小鼠肺病變有明顯抑制作用，對流感病毒鼠FM1和流感病毒B/黔防/252/2001感染小鼠死亡具有顯著的保護(hù)作用，能明顯抑制小鼠體內(nèi)流感病毒FM1的增殖；對金黃色葡萄球菌(標(biāo)準(zhǔn)株和臨床株)、流感嗜血桿菌、大腸桿菌、肺炎雙球菌、甲型鏈球菌(臨床株)、乙型鏈球菌、腦膜炎雙球菌等具有明顯的體外抑菌和殺菌作用，對致病菌感染小鼠死亡具有不同程度的保護(hù)作用。結(jié)果表明本發(fā)明制劑具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗過敏、解熱以及增強(qiáng)免疫功能的作用。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明制劑疏風(fēng)解表，清熱解毒，療效顯著、見效快，可達(dá)到標(biāo)本兼治之目的；采用大孔樹脂吸附分離純化等先進(jìn)技術(shù)富集有效成分，具有組方精簡，工藝先進(jìn)，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可控，臨床使用安全、有效等特點(diǎn)。為治療上呼吸道感染提供了一種有效、安全、價(jià)廉的中成藥，具有重要的現(xiàn)實(shí)意義和廣泛的市場前景。具體實(shí)施例方式本發(fā)明的實(shí)施例1羊耳菊20g、穿心蓮10g、石膏15g稱取羊耳菊、穿心蓮和石膏，加水煎煮3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液濃縮成稠膏，加入適量淀粉，混勻，制粒，干燥，制備成顆粒劑。該制劑口服，每日3次，一次5g本發(fā)明的實(shí)施例2羊耳菊30g、穿心蓮10g、石膏20g稱取羊耳菊、穿心蓮和石膏，加水煎煮3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液濃縮成浸膏，加乙醇使含醇量為60％，混勻，放置24小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇，濃縮成稠膏，加入適量淀粉，混勻，制粒，干燥，壓制成片劑。該制劑口服，每日3次，一次3片。本發(fā)明的實(shí)施例3羊耳菊50g、穿心蓮20g、石膏40g稱取三味藥材，將羊耳菊和穿心蓮加水煎煮3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液濃縮成浸膏，加乙醇使含醇量為70％，混勻，放置24小時(shí)，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮液上D101大孔吸附樹脂柱，用40％乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，真空干燥或微波真空干燥，粉碎，得提取物；石膏加水煎煮，濃縮，干燥，得提取物；合并兩種提取物，加入適量淀粉，混勻，制粒，干燥，裝入膠囊制成膠囊劑。該制劑口服，每日3次，一次3粒。本發(fā)明的實(shí)施例4羊耳菊45g、穿心蓮15g、石膏25g稱取三味藥材，羊耳菊、穿心蓮分別加10倍量水煎煮提取3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮成浸膏，加乙醇使含醇量為50％，混勻，放置24小時(shí)，濾過，濾液減壓回收乙醇；水溶液分別上D101大孔吸附樹脂柱，棄去穿透液，用60％乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，減壓真空干燥，粉碎，分別得羊耳菊、穿心蓮提取物；石膏加水煎煮，濃縮，干燥，得提取物；合并三種提取物，加入適量淀粉，混勻，制粒，干燥，制備成顆粒劑，或壓制成片劑，或裝入膠囊制成膠囊劑。本發(fā)明的實(shí)施例5羊耳菊35g、穿心蓮10g、石膏35g稱取三味藥材，羊耳菊、穿心蓮分別加10倍量水煎煮提取3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮成浸膏，加乙醇使含醇量為80％，混勻，放置24小時(shí)，濾過，濾液減壓回收乙醇；水溶液分別上D101大孔吸附樹脂柱，棄去穿透液，用90％乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，微波真空干燥，粉碎，分別得羊耳菊、穿心蓮提取物；石膏加水煎煮，濃縮，干燥，得提取物；合并三種提取物，加入適量淀粉，混勻，制粒，干燥，制備成顆粒劑，或壓制成片劑，或裝入膠囊制成膠囊劑。權(quán)利要求1.一種治療上呼吸道感染的中藥制劑，其特征在于按照重量組份計(jì)算，它是由羊耳菊3～5份、穿心蓮1～2份和石膏2～4份制成的。2.按照權(quán)利要求1所述治療上呼吸道感染的中藥制劑，其特征在于按照重量組份計(jì)算，它是由羊耳菊4份、穿心蓮2份和石膏3份制成的。3.按照權(quán)利要求1或2所述治療上呼吸道感染的中藥制劑，其特征在于所述的中藥制劑為顆粒劑、片劑或膠囊劑。4.如權(quán)利要求1或2所述治療上呼吸道感染的中藥制劑的制備方法，其特征在于按比例稱取羊耳菊、穿心蓮和石膏，加水煎煮3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液濃縮成稠膏，加入適量淀粉，混勻，制粒，干燥，按常規(guī)方法制備成各種不同的制劑。5.如權(quán)利要求1或2所述治療上呼吸道感染的中藥制劑的制備方法，其特征在于按比例稱取羊耳菊、穿心蓮和石膏，加水煎煮3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液濃縮成浸膏，加乙醇使含醇量為50～80％，混勻，放置24小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇，濃縮成稠膏，加入適量淀粉，混勻，制粒，干燥，按常規(guī)方法制備成各種不同的制劑。6.如權(quán)利要求1或2所述治療上呼吸道感染的中藥制劑的制備方法，其特征在于按比例稱取三味藥材，將羊耳菊和穿心蓮加水煎煮3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液濃縮成浸膏，加乙醇使含醇量為50～80％，混勻，放置24小時(shí)，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮液上D101大孔吸附樹脂柱，用40～90％乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，真空干燥或微波真空干燥，粉碎，得提取物；石膏加水煎煮，濃縮，干燥，得提取物；合并兩種提取物，加入適量淀粉，混勻，制粒，干燥，按常規(guī)方法制備成各種不同的制劑。7.如權(quán)利要求1或2所述治療上呼吸道感染的中藥制劑的制備方法，其特征在于按比例稱取三味藥材，羊耳菊、穿心蓮分別加水煎煮提取，濃縮，用乙醇沉淀處理，回收乙醇；水溶液分別上D101大孔吸附樹脂柱，棄去穿透液，用40～90％乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，減壓真空干燥或微波真空干燥，粉碎，分別得羊耳菊、穿心蓮提取物；石膏加水煎煮，濃縮，干燥，得提取物；合并三種提取物，加入適量淀粉，混勻，制粒，干燥，按常規(guī)方法制備成各種不同的制劑。8.按照權(quán)利要求7所述治療上呼吸道感染的中藥制劑的制備方法，其特征在于按比例稱取三味藥材，羊耳菊、穿心蓮分別加10倍量水煎煮提取3次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮成浸膏，加乙醇使含醇量為50～80％，混勻，放置24小時(shí)，濾過，濾液減壓回收乙醇；水溶液分別上D101大孔吸附樹脂柱，棄去穿透液，用40～90％乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，減壓真空干燥或微波真空干燥，粉碎，分別得羊耳菊、穿心蓮提取物；石膏加水煎煮，濃縮，干燥，得提取物；合并三種提取物，加入適量淀粉，混勻，制粒，干燥，制備成顆粒劑，或壓制成片劑，或裝入膠囊制成膠囊劑。全文摘要本發(fā)明公開了一種治療上呼吸道感染的中藥制劑及其制備方法，按照重量組份計(jì)算，它是由羊耳菊3～5份、穿心蓮1～2份和石膏2～4份制成的。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明制劑疏風(fēng)解表，清熱解毒，療效顯著、見效快，可達(dá)到標(biāo)本兼治之目的；采用大孔樹脂吸附分離純化等先進(jìn)技術(shù)富集有效成分，具有組方精簡，工藝先進(jìn)，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可控，臨床使用安全、有效等特點(diǎn)。為治療上呼吸道感染提供了一種有效、安全、價(jià)廉的中成藥，具有重要的現(xiàn)實(shí)意義和廣泛的市場前景。文檔編號A61K9/48GK101023971SQ20071020041公開日2007年8月29日申請日期2007年4月6日優(yōu)先權(quán)日2007年4月6日發(fā)明者王永林,王愛民,蘭燕宇,李勇軍,何迅申請人:貴陽醫(yī)學(xué)院