專利名稱：：蠅蛆殼聚糖在制備調(diào)節(jié)血糖的產(chǎn)品中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及蠅蛆殼聚糖在制備調(diào)節(jié)血糖的產(chǎn)品中的應(yīng)用，屬于昆蟲(chóng)資源利用
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：糖尿病是一種具遺傳傾向的常見(jiàn)的內(nèi)分泌代謝疾病，高血糖狀態(tài)是引起糖尿病慢性并發(fā)癥的主要原因，現(xiàn)在還沒(méi)有能完全治愈的藥物。隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，食物結(jié)構(gòu)不斷改變，國(guó)內(nèi)糖尿病患者日益增多，因此尋找療效確切、毒副作用小的降血糖藥已成為各國(guó)醫(yī)藥界關(guān)注的重要課題。在自然界中，甲殼素的年生物合成量高達(dá)千億噸之多，是僅次于植物纖維素的第二大自然資源，亦是地球上蘊(yùn)藏量最豐富的含氮天然有機(jī)化合物。很多研究表明，甲殼素的脫乙酰產(chǎn)物-殼聚糖及其衍生物具有抗氧化、降血糖、抑制脂類吸收等生物活性，從而能夠通過(guò)多種途徑抑制血糖的升高，具有明顯的降血糖效果，且安全性高，不產(chǎn)生毒副作用，為治療糖尿病開(kāi)辟了又一途徑。但在市售殼聚糖中，大多數(shù)以蝦、蟹殼為原料，而以蠅蛆為原料制備殼聚糖甚少。家蠅通常稱為"蒼蠅"，它在長(zhǎng)期惡劣環(huán)境的生態(tài)壓力下，通過(guò)產(chǎn)生抗菌物質(zhì)如溶菌酶、抗菌肽、凝集素、甲殼質(zhì)等產(chǎn)生了對(duì)惡劣環(huán)境特有的抗逆能力。因此，研究利用家蠅的各種成分，開(kāi)發(fā)各種產(chǎn)品為人類及其環(huán)境服務(wù)，成為資源昆蟲(chóng)研究的重要方向之一。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供蠅蛆殼聚糖在制備調(diào)節(jié)血糖的產(chǎn)品中的應(yīng)用。本發(fā)明通過(guò)建立高血糖動(dòng)物模型，對(duì)蠅蛆殼聚糖進(jìn)行了降血糖的實(shí)驗(yàn)研究，并對(duì)不同脫乙酰度的蠅蛆殼聚糖的降糖活性進(jìn)行了研究，為蠅蛆殼聚糖更好地應(yīng)用于藥物或保健品領(lǐng)域提供了理論依據(jù)。本發(fā)明是這樣構(gòu)成的蠅蛆殼聚糖在制備調(diào)節(jié)血糖的產(chǎn)品中的應(yīng)用。蠅蛆殼聚糖在制備預(yù)防或治療糖尿病的產(chǎn)品中的應(yīng)用。以上所述的產(chǎn)品為藥物或保健品。具體的說(shuō)，將蠅蛆殼聚糖與藥用載體或賦形劑按照常規(guī)方法制備成藥物制劑。例如取蠅蛆殼聚糖，用超細(xì)粉設(shè)備加工成100200的細(xì)粉顆粒，加入乳化劑攪拌成混懸液，送入膠體磨中過(guò)濾，得到的泥狀膠質(zhì)體送入制丸機(jī)中制丸，得膠丸；將膠丸定型后進(jìn)行脫脂處理得軟膠囊，再送入干燥機(jī)中經(jīng)二次干燥得成品軟膠囊。或者將蠅蛆殼聚糖與其它藥用成分組合，加入藥用載體或賦形劑，按照常規(guī)方法制備成藥物制劑。例如取蠅蛆殼聚糖1000g、苦瓜150g和葛根200g，粉碎，過(guò)篩，加入適量輔料，混勻，烘干，滅菌，包裝，制成顆粒劑或膠囊劑。還可以將蠅蛆殼聚糖單獨(dú)或與其它物質(zhì)組合，按照常規(guī)方法制備成保健品。例如取蠅蛆殼聚糖，溶于pH為3.5的鹽酸或醋酸水溶液，形成凝膠，按常規(guī)方法制成緩釋、控釋制劑?；蛉∠壡鶜ぞ厶?000g和螺旋藻多糖200g，分別干燥、研細(xì)、過(guò)100目篩后混勻備用；用等量遞加法將前述混合物和糊精混勻，再加入淀粉和微晶纖維素充分混勻，攪拌下噴霧加入30%質(zhì)量百分比的乙醇溶液制軟材，制粒，過(guò)16目篩，6(TC干燥至水分約為5。/。，過(guò)篩、整粒，加入滑石粉，混合均勻，壓片，制成片劑。本發(fā)明所述的蠅蛆殼聚糖是以貴州琨恩生物工程有限公司提供的蠅蛆甲殼素為原料，采用酸堿化學(xué)法進(jìn)行脫乙酰反應(yīng)而制得。上述藥物制劑或保健品可根據(jù)本領(lǐng)域已知的方法制備成可作為人用的適當(dāng)?shù)氖┯眯问交騽┝啃问?，給藥途徑可為腸道或非腸道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮膚、腹膜或直腸等。給藥劑型例如片劑、膠囊、滴丸、氣霧劑、丸劑、粉劑、溶液劑、混懸劑、乳劑、顆粒劑、脂質(zhì)體、透皮劑、口含片、檢劑、膏劑等。可以是普通制劑、緩釋制劑、控釋制劑及各種微粒給藥系統(tǒng)。制成片劑時(shí)，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種載體例如稀釋劑與吸收劑，如淀粉、糊精、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化鈉、葡萄糖、尿素、碳酸鈣、白陶土、微晶纖維素等；濕潤(rùn)劑與粘合劑，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉漿、糊精、糖漿、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯膠漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮等；潤(rùn)滑劑，如滑石粉、玉米淀粉、硬脂酸鹽、硼酸、液體石蠟、聚乙二醇等。還可以將片劑進(jìn)一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、腸溶包衣片，或雙層片、多層片。制成丸劑時(shí)，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種載體例如稀釋劑與吸收劑，如葡萄糖、乳糖、淀粉、氮化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、滑石粉等；粘合劑如阿拉伯膠、明膠、乙醇、蜂蜜、米糊或面糊等；崩解劑，如干燥淀粉、海藻酸鹽、十二烷基磺酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維素等。此外，還可以添加常規(guī)的助溶劑、緩沖劑、PH調(diào)節(jié)劑等。如需要，也可以向藥物制劑或保健品中添加著色劑、防腐劑、香料、矯味劑、甜味劑或其它輔料。殼聚糖有膳食纖維的特性，實(shí)驗(yàn)證實(shí)，水溶性纖維較不溶性纖維降血糖效果更好，而殼聚糖又比水溶性纖維好。殼聚糖在腸內(nèi)為凝膠狀，可減少攝入食物量；增大腸液粘稠度，降低葡萄糖向腸壁的擴(kuò)散速度；抑制a-淀粉酶的活力。胰島素的絕對(duì)不足或相對(duì)不足導(dǎo)致糖尿病患者非正常代謝，使病人體液呈酸性，提高對(duì)胰島素的敏感性和利用率。服用殼聚糖后，會(huì)在胃腸道內(nèi)形成膠體，作用于胰島素受體，使其增強(qiáng)敏感性，抑制血糖升高，改善尿糖，也可以減輕對(duì)胰島素分泌的刺激和e細(xì)胞的負(fù)擔(dān)。因此，殼聚糖能夠強(qiáng)化肝臟功能，調(diào)節(jié)血糖。另外，殼聚糖對(duì)糖尿病并發(fā)癥也有一定的治療和預(yù)防作用。為了驗(yàn)證蠅蛆殼聚糖在調(diào)節(jié)血糖方面的作用效果，申請(qǐng)人進(jìn)行了動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)，具體如下1材料l.l蠅蛆甲殼素，由貴州琨恩生物工程有限公司提供。蠅蛆殼聚糖，自制。1.2試劑氫氧化鈉分析純，上海試四赫維化工有限公司產(chǎn)品，批號(hào)0501102。鹽酸分析純，遵義師范學(xué)院化工試劑廠產(chǎn)品，批號(hào)20060629;四氧嘧啶美國(guó)SIGMA公司產(chǎn)品。1.3主要儀器VERTEX70紅外掃描儀，德國(guó)BRUKER公司；雅培血糖儀，美國(guó)雅培制藥有限公司。1.4動(dòng)物昆明種小鼠，雄性，IOO只，體重1820g，由貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。2實(shí)驗(yàn)方法2.l實(shí)驗(yàn)材料的制備及鑒定2.1.l殼聚糖的制備分別稱取三份蠅蛆甲殼素5.0g，加入NaOH進(jìn)行脫乙酰反應(yīng)。反應(yīng)至預(yù)定時(shí)間后，用熱蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，烘干至恒重，即得殼聚糖。本實(shí)驗(yàn)采用酸堿法制備蠅蛆殼聚糖，通過(guò)控制不同的反應(yīng)時(shí)間得到不同脫乙酰度的殼聚糖。2.1.2殼聚糖脫乙酰度的測(cè)定采用堿量法測(cè)定蠅蛆殼聚糖的脫乙酰度。準(zhǔn)確稱取105。C烘干至恒重的樣品0.2g殼聚糖，置于250ml三角瓶中，加入O.lmol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液30ml，在20。C25。C攪拌至溶解完全(若粘度太大可加適量蒸餾水稀釋)，加入23滴混合指示劑(1%)甲基橙+(1%)苯胺藍(lán)(1:2)，用0.lmol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定游離鹽酸。計(jì)算方法D.D%=[(C!V!-C2V2)XO.016X100]/(GX9.94)式中Cl一鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(mol/L)Vl—加入的鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的體積(ml)C2—?dú)溲趸c標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(mol/L)V2—滴定時(shí)消耗的氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積(ml)G—-樣品重量(g)0.016—與lmllmol/L鹽酸溶液相當(dāng)?shù)陌妨?g)2.1.3不同脫乙酰度殼聚糖的紅外鑒定將殼聚糖干燥至恒重，與KBr混合研磨、壓片，在400-4000CM-1測(cè)紅外光譜圖。2.2造模及分組正常小鼠禁食14h(過(guò)夜)后，靜脈注射l。/。四氧嘧啶(50mg/kg生理鹽水溶液)，注射后72h眼眶靜脈叢采血，測(cè)定空腹血糖(取血前禁食8h)。血糖高于llmmol/L的為高血糖小鼠;根據(jù)血糖將高血糖小鼠隨機(jī)分為5組，每組14只，分別為模型對(duì)照組、3個(gè)殼聚糖組200mg/kg(脫乙酰度分別為50%、70%、90%)、陽(yáng)性對(duì)照組(消渴丸1000mg/kg)。另取14只同批正常小鼠作為正常對(duì)照組，給等體積蒸餾水。灌胃給藥，連續(xù)給藥14天。2.3檢測(cè)指標(biāo)2.3.l空腹血糖給藥14天后，禁食8小時(shí)，血糖儀測(cè)定空腹血糖。2.3.2糖耐量給藥14天在測(cè)定各組小鼠的空腹血糖值后，15天測(cè)定糖耐量。動(dòng)物禁食7小時(shí)后給藥，藥后l小時(shí)腹腔注射給予葡萄糖溶液2g/kg。于給予葡萄糖后0，0.5，2h分別測(cè)定各組小鼠的血糖值。觀察模型對(duì)照組與殼聚糖各劑量組在給予葡萄糖后各時(shí)間點(diǎn)血糖曲線下面積的變化。血糖曲線下面積=0.25X(0h血糖值+4X0.5h血糖值+3X2h血糖值)2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有數(shù)據(jù)均以X士S形式表示，采用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。3實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.l蠅蛆殼聚糖對(duì)小鼠血糖的影響，見(jiàn)表l:表l蠅蛆殼聚糖對(duì)小鼠血糖的影響(x士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>表1顯示，各劑量組小鼠服用蠅蛆殼聚糖14天后，四氧嘧啶所致糖尿病小鼠的血糖值均低于模型對(duì)照組(P〈0.01)，表明蠅蛆殼聚糖有降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的空腹血糖作用。3.2蠅蛆殼聚糖對(duì)小鼠糖耐量的影響，見(jiàn)表2:表2蠅蛆殼聚糖對(duì)小鼠糖耐量的影響(x士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>表2顯示，各劑量蠅蛆殼聚糖組血糖曲線下面積均明顯低于模型對(duì)照組(P〈0.01)，表明蠅蛆殼聚糖具有不同程度地增強(qiáng)糖尿病小鼠的糖耐量作用。4結(jié)論本實(shí)驗(yàn)表明蠅蛆殼聚糖具有降血糖和提高糖耐量的作用，又不影響正常糖代謝；有研究顯示殼聚糖具有顯著降低高血脂大鼠的血清總膽固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白膽固醇的作用和提高血清高密度脂蛋白膽固醇的作用；殼聚糖又具有無(wú)免疫原性、可在生物體內(nèi)降解等特點(diǎn)。這些天然特殊的藥用價(jià)值，在防治糖尿病方面將具有一定的應(yīng)用前景。申請(qǐng)人還對(duì)蠅蛆殼聚糖進(jìn)行了急性毒性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，給藥劑量按每天給予每公斤大鼠1200mg蠅蛆殼聚糖，結(jié)果顯示蠅蛆殼聚糖無(wú)毒性，具有臨床應(yīng)用意義。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明所用蠅蛆殼聚糖由蠅蛆甲殼素制備而得，蛆皮中的甲殼素含量高于蝦蟹殼，而碳酸鹽和重金屬含量低、色素少，質(zhì)量遠(yuǎn)優(yōu)于蝦蟹殼中的甲殼素；而且蠅蛆殼聚糖具有降血糖和提高糖耐量的作用，又不影響正常糖代謝；還具有無(wú)免疫原性、可在生物體內(nèi)降解及無(wú)毒性，不產(chǎn)生變態(tài)反應(yīng)，對(duì)機(jī)體非常溫和的免疫刺激影響，便于制備等特點(diǎn)。因此蠅蛆殼聚糖在作為調(diào)節(jié)血糖、防治糖尿病的藥物或保健品方面具有良好的應(yīng)用前景。具體實(shí)施例方式本發(fā)明的實(shí)施例l:取蠅蛆殼聚糖1000g，用超細(xì)粉設(shè)備加工成100200的細(xì)粉顆粒，加入乳化劑攪拌成混懸液，送入膠體磨中過(guò)濾，得到的泥狀膠質(zhì)體送入制丸機(jī)中制丸，得膠丸;將膠丸定型后進(jìn)行脫脂處理得軟膠囊，再送入干燥機(jī)中經(jīng)二次干燥得成品軟膠囊。該制劑口服，4g/次，2次/日，具有調(diào)節(jié)血糖的作用，可用于治療糖尿病。本發(fā)明的實(shí)施例2:取蠅蛆殼聚糖1000g、苦瓜150g和葛根200g，粉碎，過(guò)篩，加入適量輔料，混勻，烘干，滅菌，包裝，制成顆粒劑或膠囊劑。該制劑口服，6g/次，2次/日；具有雙向免疫調(diào)節(jié)功能，有降血糖和降血脂、強(qiáng)化肝臟功能及抗疲勞作用。本發(fā)明的實(shí)施例3:取蠅蛆殼聚糖1000g，溶于pH為3.5的鹽酸或醋酸水溶液，形成凝膠，按常規(guī)方法制成緩釋、控釋劑型。該制劑口服，2g/次，2次/日，用于預(yù)防糖尿病的產(chǎn)生，對(duì)糖尿病易感人群有積極防治作用。本發(fā)明的實(shí)施例4:取蠅蛆殼聚糖1000g和螺旋藻多糖200g，分別干燥、研細(xì)、過(guò)100目篩后混勻備用；用等量遞加法將前述混合物和糊精混勻，再加入淀粉和微晶纖維素充分混勻，攪拌下噴霧加入30%質(zhì)量百分比的乙醇溶液制軟材，制粒，過(guò)16目篩，6(TC干燥至水分約為5%，過(guò)篩、整粒，加入滑石粉，混合均勻，壓片，制成片劑。該制劑口服，6片/次，2次/日，用于糖尿病的防治。權(quán)利要求1.蠅蛆殼聚糖在制備調(diào)節(jié)血糖的產(chǎn)品中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了蠅蛆殼聚糖在制備調(diào)節(jié)血糖的產(chǎn)品中的應(yīng)用，具體是在制備預(yù)防或治療糖尿病的藥物或保健品中的應(yīng)用。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明所用蠅蛆殼聚糖由蠅蛆甲殼素制備而得，蛆皮中的甲殼素含量高于蝦蟹殼，而碳酸鹽和重金屬含量低、色素少，質(zhì)量遠(yuǎn)優(yōu)于蝦蟹殼中的甲殼素；而且蠅蛆殼聚糖具有降血糖和提高糖耐量的作用，又不影響正常糖代謝；還具有無(wú)免疫原性、可在生物體內(nèi)降解及無(wú)毒性，不產(chǎn)生變態(tài)反應(yīng)，對(duì)機(jī)體非常溫和的免疫刺激影響，便于制備等特點(diǎn)。因此蠅蛆殼聚糖在作為調(diào)節(jié)血糖、防治糖尿病的藥物或保健品方面具有良好的應(yīng)用前景。文檔編號(hào)A61P3/10GK101103995SQ20071020103公開(kāi)日2008年1月16日申請(qǐng)日期2007年7月10日優(yōu)先權(quán)日2007年7月10日發(fā)明者萍付,吳建偉,果國(guó),覃容貴申請(qǐng)人:貴州博康生物工程有限公司