專利名稱：：包括含親脂性藥物的納米膠囊的微球的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及活性劑的傳輸系統(tǒng)，其優(yōu)選地用于口月M聶入。現(xiàn)有技術(shù)以下是現(xiàn)有技術(shù)的列表，其被認(rèn)為適用于描述在本發(fā)明領(lǐng)域中的技術(shù)狀態(tài)。通過在括號指明它們在列表中的號碼，下文將不時地引述這些文獻。1.HolmR,PorterCJH,EdwardsGa,MullertzA,KristensenHG和CharmanWN.Examinationoforalabsorptionandlymphatictransportofhalofantrineinatriple-cannulatedcaninemodelafteradministrationinself-microemulsifyingdrugdeliverysystem(SMEDDS)containingstructuredtriglycerides(在含有結(jié)構(gòu)化三甘油酯的自微乳化藥物傳輸系統(tǒng)(SMEDDS)中施用后，卣泛群在三管犬模型(triple-cannulatedcaninemodel)中的口月良吸收和淋巴運l命(ymphatictransport)的》企查).Eur.J.Pharm.Sci.20:91-97(2003)。2.O'DriscollCM.Lipid-basedformulationsforintestinallymphaticdelivery(用于腸內(nèi)淋巴傳輸?shù)幕谥|(zhì)的制劑).EurJPharmSci.l5:405-15.(2002)。3.TamuraS,OhikeA,IbukiR,AmidonGL,YamashitaS.TacrolimusisaclassIIlow-solubilityhigh-permeabilitydrug:theeffectofP-glycoproteineffluxonregionalpermeabilityoftacrolimusinrats0也克莫司是II類^f氐溶解性高通透性藥物在大鼠中，P-糖蛋白外排對他克莫司區(qū)域通透性的作用).JPharaiSci.91:719-29.(2002)。4.HaussDJ,FogalSE,FicorilliJV，PriceCA,RoyT,JayarajAA,KeirnsJ丄Lipid-baseddeliverysystemsforimprovingthebioavailabilityandlymphatictransportofapoorlywater-solubleLTB4inhibitor(用于改善難溶于水的LTB4抑制劑的生物利用度和淋巴運輸?shù)幕谥|(zhì)的傳輸系統(tǒng)).丄Pharm.Sci.87:164-9(1998)。5.EP480,729,HaibungL,SoonhongY.Microencapsulationforcontrolledoraldrugdeliverysystem(用于控制型口月良藥物傳輸系統(tǒng)的樣i膠嚢化作用)。6.U.S.5,965,160,BenitaS,等人.Self隱emulsifiableformulationproducinganoil匿in-wateremulsion(可產(chǎn)生水包油乳液的可自乳化的制劑)。7.CookRO,PannuRK,KellawayIW.Novelsustainedreleasemicrospheresforpulmonarydrugdelivery(用于肺部藥物傳輸?shù)男滦统掷m(xù)釋放微球).JControlRelease.104:79-90.(2005)。8.KhooSM,Humberstone.AJ,PorterCJH,EdwardsGA,和CharmanWN.Formulationdesignandbioavailabilityassessmentoflipidicself-emulsifyingformulationsoflialofantrine(卣泛群的月旨質(zhì)的自乳化制劑的制劑設(shè)計和生物利用度評價).Int.J.Pharm.167:155-164(1998)。9.Christensen,K丄.,等人.iVe/wfratowrW，n'6/e<i^ye聽to'o似Z)少^ra_yc^z>g(可再分散的經(jīng)噴霧干燥的干燥乳液的制備).Intl.丄Pharm.212:187-194(2001)。10.HonboT,KobayashiM,HaneK,HataT,UedaY.TheoraldosageformofFK-506(FK-506的口月良劑型).Transplant.Proc.19(Suppl6):17-22(1987)。11.ShimadaT,TeradaA,YokogawaK,KanekoH,NomuraM,KajiK,KanekoS,KobayashiK,MiyamotoK.LoweredbloodconcentrationoftacrolimusanditsrecoverywithchangesinexpressionofCYP3AandP-glycoproteinafterhigh-dosesteroidtherapy(在高劑量類固醇療法后，伴隨CYP3A和P-糖蛋白表達的變化，降低的血液濃度的他克莫司及其恢復(fù)).Transplantation.74:1419-24(2002)。12.UnoT,KazuiT,SuzukiY,HashimotoH,SuzukiK,MuhammadBA.Pharmacokineticadvantagesofanewlydevelopedtacrolimusoil-in-water-typeemulsionviatheenteralroute(新近開發(fā)的他克莫司水包油型乳液經(jīng)腸內(nèi)途徑的藥代動力學(xué)優(yōu)勢).Lipids.34:249-54(1999)。13.U.S.6,884,433,YamashitaK.,等人.Sustainedreleaseformulationcontainingtacrolimus(含有他克莫司的持續(xù)釋放制劑)。14.Manjunath等人,Pharmacokinetics,tissuedistributionandbioavailabilityofclozapinesolidlipidnanoparticlesafterintravenousandintraduodenaladministration(靜脈內(nèi)及十二指腸施用后，氯氮平固體脂質(zhì)納米顆粒的藥代動力學(xué)、組織分布和生物利用度)，JournalofControlledRelease107(2005)215-228。15.SwartzM.A.Thephysiologyofthelymphaticsystem('淋巴系統(tǒng)生理學(xué))，Adv.DmgDeliv.Rev.50(2001)3-20。16.Jani,P.U.,等人，Uptakeandtranslocationoflatexnanospheresandmicrospheresafteroraladministrationtorats(3十鼠口月良施用后，吝'L月交纟內(nèi)米3求和孩O求的吸收和易位)，J.Pharm.Pharmacol.41(1989)809-812。17.FlorenceD.Evaluationofnano-andmicroparticlesuptakebythegastrointestinaltract(納米顆粒和微粒經(jīng)胃腸道吸收的評估)，Adv.DrugDeliv.Rev.34(1998)221-233。18.NishiokaY.,等人，Lymphatictargetingwithnanoparticulatesystem(靶向淋巴的納米顆粒系統(tǒng))，Adv.DrugDeliv.Rev.47(2001)55-64。19.US2003/0147965,BassettM,JacobJ.和EnscoreD.Methodsandproductsusefulintheformationandisolationofmicroparticles(用于孩i斗立開j成和分離的方法及產(chǎn)品)。
背景技術(shù)：
：在藥物設(shè)計和傳輸中的新近進展(advance)已？1起數(shù)目逐漸增長的可作為腸內(nèi)淋巴運輸?shù)幕|(zhì)(substrate)的高度親脂性藥物分子的開發(fā)。然而，這些藥物展現(xiàn)了低口服生物利用度，由于低溶解度、P-糖蛋白外排或先于胃腸道吸收的CYP3A4代謝，因此限制了它們的利用度。這種藥物的適當(dāng)藥物制劑仍是一項挑戰(zhàn)，其尚未被完全解決。眾所周知，脂質(zhì)能夠加強疏水性藥物的淋巴運輸，因此可減少由于肝的首關(guān)代謝所引起的藥物清除。這改善了藥物吸收、生物利用度特性、活性和較低的毒性。商業(yè)上成功的自乳化藥物傳輸系統(tǒng)(SEDDS)制劑如Neoraf(環(huán)孢霉素A)、Norvi^(利托那韋)和Fortovase(沙奎那韋)已引起在此類有前途的在基于乳液的傳輸系統(tǒng)中改善親脂性藥物口服生物利用度的興趣(l)。相信作為精細油滴分布的SEDDS在GI道中可通過促進親脂性藥物的淋巴運輸而提高生物利用度。的確，最近證實，經(jīng)胸導(dǎo)管的淋巴運輸?shù)某潭葹獒槍σ越Y(jié)構(gòu)化三甘油酯SMEDDS給藥的動物的面范群劑量的27.4%(1)。另外，最近報導(dǎo)在某些情況下，淋巴管可以提供藥物吸收的主要途徑且導(dǎo)致在淋巴中，藥物濃度比在系統(tǒng)血漿中的濃度高5-10,000倍(2)。在藥物設(shè)計和傳輸中的新近進展，也已引起數(shù)目逐漸增長的可作為腸內(nèi)淋巴運輸基質(zhì)的高度親脂性藥物分子的開發(fā)。存在對淋巴管在確定藥物吸收和生物利用度特性、活性和毒性方面的作用的逐漸增長的興趣。例如，逐漸增長的大量證據(jù)已指出某些脂質(zhì)能夠憑借腸壁抑制系統(tǒng)前藥物代謝和p-糖蛋白介導(dǎo)(Pgp介導(dǎo))的藥物外排兩者(3)。EP480,729(4)公開了用于口服施用的分散在小油滴(oildroplet)中的藥物的微膠嚢化作用的方法。使用多糖將所述小油滴膠囊化，所述多糖具有金屬-鰲合能力且為可溶于水的聚合物。膠嚢化作用保護了藥物不在胃中釋放，同時提供在小腸中的快速釋放。既然在小油滴中的藥物優(yōu)先被淋巴吸收所吸收，那么其被保護而不被肝的首關(guān)代謝所降解。U.S.5,965,160(5)公開了含有疏水性藥物的自乳化油狀制劑(SEOF)，其包括油類成分和表面活性劑。SEOF的特征為油類成分包括油狀載體和陽離子脂質(zhì)和，任選地，親脂性油狀脂肪醇。SEOF和水溶液混合而形成的水包油乳液含有帶正電的小油滴。Cook,R.O.,等人(6)描述了針對肺部藥物傳輸?shù)漠a(chǎn)生持續(xù)釋;^文顆粒的工藝。根據(jù)此工藝，親水性、離子化的藥物硫酸特布他林的納米顆粒使用噴霧干燥方法#:包載(entrapped)在疏水性微J泉中。Khoo,SM,等人(7)公開了分散的用于口服傳輸親脂性藥物如卣范群的基于脂質(zhì)的制劑。描述了脂質(zhì)的自乳化藥物傳輸系統(tǒng)(SEDDS)和自微乳化藥物傳輸系統(tǒng)(SMEDDS)兩者。系統(tǒng)包括甘油三酯、甘油單酯/甘油二酯、非離子表面活性劑、親水相和藥物物質(zhì)。優(yōu)化的制劑為中鏈甘油三酯(MCT)SEEDS和SMEDDS,及長鏈甘油三酯(LCT)SMEDDS。Holm，R,等人(l)描述了含有具有不同中鏈脂肪酸和長鏈脂肪酸組合的甘油三酯的SMEDDS，其中在甘油骨架上的不同脂肪酸表現(xiàn)出不同的代謝結(jié)果(fate)。Christensen,K丄.,等人(9)描述了能夠通過在水中重配(reconstitution)而重新組成初始o(jì)Av乳液的穩(wěn)定的干燥乳液的制備。千燥乳液含有可溶于水的聚合物如羥丙基甲基纖維素(HPMC)、甲基纖維素或聚維酮作為固體載體，和分餾的椰子油。液體o/w乳液在實驗室噴霧千燥器中被噴霧干燥。重配的乳液的液滴尺寸近似為1nm。他克莫司(Progra產(chǎn))是大環(huán)內(nèi)酯類免疫抑制劑(MW為804)，其衍生于真菌筑波山土壤鏈霉菌(^"印fow;/cesteMhZ)ae"^)，且已被指出在移植(graft)排斥預(yù)防和在急性移植排斥和類固醇或環(huán)孢霉素抵抗的移植排斥的處理中有效。他克莫司被考慮為環(huán)孢霉素免疫抑制的替代物且被指出比環(huán)孢霉素多10-100倍效力。1994年4月，他克莫司被FDA證實可預(yù)防肝移植排斥。類似于環(huán)孢霉素，他克莫司的藥代動力學(xué)參數(shù)顯示高度的個體內(nèi)和個體間差異性且兩種藥物皆有窄治療指數(shù)，要求療法進行全血藥物監(jiān)測以優(yōu)化治療。他克莫司的吸收和口服生物利用度(10%到25%)低，在食物存在下吸收的速度和程度減少。他克莫司在胃腸道中被快速吸收，雖然并不完全。在口服施用后近似于1到2小時達到他克莫司在全血中峰濃度(Cmax)。由于低水溶性，他克莫司在口服或腸胃外療法之后的組織分布是廣泛的(10)。他克莫司主要結(jié)合白蛋白和a!酸糖蛋白。紅細胞結(jié)合75%到80%藥物，導(dǎo)致全血濃度比血漿濃度高10到30倍(10)。他克莫司在消除之前幾乎被完全代謝。代謝通過在肝中的細胞色素P450(CYP)3A4同工酶完成，且在較小程度上，通過腸翁膜中的CYP3A4同工酶和P-糖蛋白完成。他克莫司在肝移植患者中的消除半衰期為約12小時。小于1%的劑量未經(jīng)改變地在尿中被排泄。他克莫司從腸細胞中回到腸內(nèi)腔中的P-糖蛋白外排使在吸收之前被CYP3A4代謝，這樣限制了他克莫司的利用度(ll)。當(dāng)他克莫司與CYP3A4和P-糖蛋白兩者的抑制劑(即地爾硫罩、紅霉素或酮康唑)一起^皮施用時，觀察到口服生物利用度加強。存在通過藥物傳輸加強他克莫司口服生物利用度的需要。Uno,T等人(12)描述了基于油酸的藥物他克莫司的水包油(o/w)乳液。oAv乳液液滴的平均直徑為0.47pm。公開的制劑展現(xiàn)了乳液作為他克莫司腸途徑載體，與標(biāo)準(zhǔn)的市場化制劑相比的生物利用度、藥代動力學(xué)優(yōu)勢和潛在有效性。US6,884,433(13)描述了含有他克莫司及其它大環(huán)內(nèi)酯類化合物的持續(xù)釋放制劑。其中公開的持續(xù)釋放制劑包括他克莫司或其水合物在包含可溶于水的聚合物(如羥丙基甲基纖維素)和不溶于水的聚合物(如乙基纖維素)及賦形劑(如乳糖)的混合物中的固體分散體。在此分散體中，顆粒尺寸等于或小于250pm。為了克服首關(guān)代謝及因此的低口服生物利用度，因此可釆用(exploite)藥物的腸內(nèi)淋巴運輸。如先前所提到的，高度親脂性化合物經(jīng)過淋巴達到系統(tǒng)循環(huán)。發(fā)現(xiàn)具有14及以上鏈長度的大多數(shù)(majority)脂肪酸在胸淋巴中被重新獲得(14)。另外，尺寸為淋巴吸收的多個重要決定因素中的一種。發(fā)現(xiàn)淋巴吸收的優(yōu)化尺寸在10nm和100nm之間(15)。然而，伴隨顆粒尺寸增加，吸收更有選擇性并更慢。較大顆?？稍谂梢翣柫馨图Y(jié)中保留較長時期，而較小顆粒被運輸至胸導(dǎo)管(16)。口服施用的聚合物納米顆粒和微粒通過腸的派伊爾淋巴集結(jié)的M細胞被淋巴系統(tǒng)吸收是明顯的且在文獻中被證實(17)。用疏水性聚合物包衣的納米顆粒傾向于易于在體內(nèi)^皮淋巴細胞捕獲(18)。用于將藥物膠嚢化作用為微粒的另一種方法被Bassett等人描述(19)。此方法涉及相轉(zhuǎn)化，其通過將藥物和第一聚合物溶解在溶劑中且向如此形成的混合物中添加溶解在"非溶劑"中的第二聚合物，其導(dǎo)致聚合物包衣的《鼓?；蚣{米顆粒的自發(fā)形成。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明一個目的為提供用于傳輸多種活性劑的系統(tǒng)，所述活性劑的特征為在活體中為非親水性。因此，在本發(fā)明一方面，提供了微球，所述微球包括容納(accommodate)在凝膠形成聚合物中的多個納米膠嚢，所述納米膠嚢包括攜帶非親水性活性劑的油核心和聚合物包衣外殼。本發(fā)明還提供了微球的制備方法，所述微球包括容納在凝膠形成聚合物中的多個納米膠嚢，所述納米膠嚢包括攜帶非親水性活性劑的油核心和聚合物包衣外殼，所述方法包括(a)提供有機相，其包括油、與水混溶的有機溶劑、溶解在該溶劑中的非親水性活性劑和用于包衣所述油核心的聚合物或聚合物組合；(b)向所述有機相中緩緩加入水以獲得乳液；(c)向乳液中繼續(xù)加入水以引發(fā)所述乳液的相轉(zhuǎn)化，從而獲得水包油(oAv)乳液；(d)將所述o/w乳液與凝膠形成聚合物或凝膠形成聚合物的組合混合；(e)除去所述有機溶劑和水以獲得所述微球。本發(fā)明還提供藥物組合物，其包括作為活性成分的微球，所述微球包括容納在凝膠形成聚合物中的多個納米膠囊，所述納米膠囊包括攜帶非親水性活性劑的油核心和聚合物包衣外殼。本發(fā)明進一步提供提高活性劑在人類受治療者體內(nèi)的生物利用度的方法，所述方法包括向所述受治療者施用微球，所述微球包括容納在凝膠形成聚合物中的多個納米膠囊，所迷納米膠嚢包括攜帶非親水性活性劑的油核心和聚合物包衣外殼。本發(fā)明更進一步提供針對病理疾患治療需要有效血液量的活性劑的所述治療的受治療者的方法，所述方法包括向所述受治療者施用^f欽球，所述微球包括容納在凝膠形成聚合物中的多個納米膠嚢，所述納米膠嚢包括攜帶非親水性活性劑的油核心和聚合物包衣外殼。為理解本發(fā)明且為了解其如何在實踐中被執(zhí)行，現(xiàn)在將通過僅為非限制性例子的方式描述優(yōu)選的實施方式，參考附圖，其中圖1A-1B是29號納米膠嚢制劑在添加羥丙基曱基纖維素溶液之前的TEM顯微照片。丙酮溶液與水溶液的體積比為100:75。條表示100nm尺寸。圖1B是圖1A的放大。圖2A-2B是29號納米膠囊制劑添加羥丙基甲基纖維素溶液后的TEM顯微照片。丙酮溶液與水溶液的體積比為100:275。條在(圖2A)中表示1000nm及在(圖2B)中表示100nm。圖3A-3B是30號納米膠嚢制劑不添加羥丙基甲基纖維素溶液的TEM顯微照片。丙酮溶液與水溶液的體積比為100:75。條表示1000nm，其中圖3B是圖3A的放大。圖4指出在29號制劑噴霧干燥之前的顆粒尺寸分布。圖5A-5B是29號納米膠嚢制劑在添加鞋丙基甲基纖維素溶液之前的SEM顯微照片(條表示10.0pm圖5A;2.0pm圖5B)。圖6A-6B是29號納米膠囊制劑噴霧干燥之后添加羥丙基甲基纖維素溶液的SEM顯微照片(條表示20.0pm圖6A;10.0〖im圖6B)。圖7A-7B是29號納米膠嚢制劑在添加羥丙基曱基纖維素溶液后且溶解3小時之后的SEM顯微照片(條表示20.0pm圖7A;10.0jim圖7B)。圖8A-8D是30號納米膠嚢制劑在添加羥丙基甲基纖維素溶液之后且噴霧干燥之后的SEM顯微照片(條表示50.0pm圖8A;20.0pm圖8B;10.0pm圖8C;5.0pm圖8D)。圖9A-9B是30號納米膠嚢制劑在添加鞋丙基甲基纖維素溶液之后且噴霧干燥之后且溶解3小時之后SEM顯微照片(條表示10.0pm圖9A;5.0拜圖9B)。所述微球包括具有不同Eudragit混合物包衣的納米膠嚢。圖11是顯示DXPL從微膠嚢化的裝載DXPL的Eudragit納米膠嚢和微膠嚢化的裝載DXPL的水包油乳液中的釋放性質(zhì)的圖表。圖12是顯示在對大鼠P.O.施用不同制劑之后的他克莫司系統(tǒng)血液濃度的圖表(平均值士SD，n=6)。圖13是顯示對大鼠P.O.施用不同制劑之后的他克莫司系統(tǒng)血液濃度的圖表(平均^直iSD，n=6)。圖14是顯示在口服吸收多種制劑中的0.7mg/kg他克莫司劑量后的他克莫司血液水平的圖表(他克莫司被配制為Prograf⑧膠嚢商業(yè)產(chǎn)品懸浮劑(Comm.Prod.)、乳液(Emuls.)、包埋在不含Eudragit但含有羥丙基曱基纖維素的微球中的乳液(DryEmuls.)、包埋在不含羥丙基甲基纖維素但含有Eudragit的納米膠嚢及作為噴霧干燥劑的乳糖的微球中的乳液(NoMethocel))。圖15是顯示對大鼠P.O.施用兩批相同制劑29后，他克莫司系統(tǒng)血液濃度的圖表(對于第I批平均值士SD，n=6，及對于第II批平均值土SD，n=3)，評估批次重現(xiàn)性。圖16是顯示對大鼠在靜脈內(nèi)以160貼/kg劑量施用濃縮在注射安瓿中的商業(yè)Prograf⑧后，他克莫司血液水平的圖表(平均值士SD,n=5)。圖17是顯示大鼠在口服吸收不同制劑中的0.7mg/kg他克莫司劑量之后的他克莫司血液水平的圖表(平均值士SD,n=3-6，p>0.05)。圖18是在口灌29號制劑30分鐘后，大鼠十二指腸組織切片的熒光顯微照片，所述29號制劑裝載有香豆素-6作為標(biāo)記物(marker)。圖19A-19D是干燥的(圖19A)或浸漬的(圖19B-19D)以EudragitL:RS(75:25)納米膠嚢包衣和羥丙基甲基纖維素基質(zhì)包衣制備的空納米膠嚢的顯微照片。圖20是顯示對小型豬口服施用在商業(yè)制劑(Prograf)中或在29號制劑中的lmg他克莫司劑量后，他克莫司血液水平的圖表(平均值士SD，n=4)。發(fā)明詳述本發(fā)明基于發(fā)現(xiàn)微球的形成可顯著地提高溶解在油核心中的親脂性藥物的血液水平，所述微球包括多個以聚合物混合物包衣的微小的小油滴，多個以聚合物包衣的小油滴進一步被容納在凝膠形成聚合物中。這些"雙重包衣的油滴"已導(dǎo)致認(rèn)識到容納多個納米膠囊的微球可作為多種本質(zhì)上為非親水性的活性劑的傳輸載體。這樣，根據(jù)一個實施方式，提供了微球，所述微球包括容納在凝膠形成聚合物中的多個納米膠嚢，所述納米膠嚢包括攜帶非親水性活性劑的油核心和聚合物包衣外殼?？膳c術(shù)語"邀f在"交換地使用的術(shù)語"^^承'"廣泛地定義了通常地主要由固體或半固體材料組成的且能夠攜帶并釋放封閉(enclose)在其中的擁有藥物或任何其它活性劑的納米膠嚢的微米級或亞微米級顆粒。根據(jù)本發(fā)明的微球或多或少是包括加入(如包埋、膠嚢化、包載)了活性劑的納米膠嚢聚集體的球形結(jié)構(gòu)。通常地，被理解為經(jīng)激光衍射測定的重均直徑的本發(fā)明微球的平均直徑，其范圍從近似于10pm到近似于500^m。更優(yōu)選地，平均微球直徑在約10jim到約20(im之間。如本文使用的術(shù)語"^^e魔發(fā)"指包括以聚合物包衣形成包衣的小油滴(精細油滴)的鈉米級或亞鈉米級結(jié)構(gòu)。聚合物包衣形成包裝油核心的硬外殼。納米膠嚢有在約100nm到約1000nm之間的平均直徑，優(yōu)選地在約100nm到900nm之間及更優(yōu)選地在約100-300nm到約300-500nm之間。此外，微球中納米膠嚢的尺寸必須與具有1微米以下直徑的約99%的小油滴一致。如本文使用的術(shù)語"納米膠嚢，，應(yīng)^皮理解為任何聚合物包衣的小油滴或具有聚合物包衣的小油滴的同義詞。如本文使用的術(shù)語"-個射術(shù)魔發(fā)"指兩個或更多個此類容納在凝膠形成聚合物中的納米膠嚢。活性劑被包裝在納米膠嚢中。作為結(jié)果，在活性劑與形成微球的凝膠形成聚合物之間不存在直接接觸。事實上，當(dāng)變濕且溶脹時，微球在GI道中釋放納米膠嚢本身但不釋放"棵"活性劑，其是指，活性劑(如藥)自身的顆粒形式或在其分子水平上的劑(agent)。如本文使用的術(shù)語"#者水'勝承'絲》/，指至少在某些程度上被認(rèn)作為是阻水的任何化合物。換句話說，任何展現(xiàn)低度、中度或高度疏水性或親脂性的劑可纟皮認(rèn)作為非親水性劑。非親水性劑可一皮表征該劑(作為溶質(zhì))在兩相之間的分配/分布系數(shù)的參H所定義，所述兩相例如有才幾溶劑和水(最常使用的系統(tǒng)為辛醇-水)。通常地，分配系數(shù)(logP)描述中性化合物的疏水性，而分布系數(shù)(logD，為pKa和logP的組合)是劑的pH依賴的疏水性的量度標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)本發(fā)明的非親水性活性劑是具有1ogP〉1.5的任何化合物。納米膠嚢的油核心可包括單一油類型或油類的組合且可選自廣泛范圍的從極性油類到非極性油類的通?？捎玫挠皖?，只要它們不與水相混合且總體是液體即可。根據(jù)一個實施方式，小油滴包括選自長鏈植物油類、酯油類、較高級液體醇類、較高級液體脂肪酸類、天然脂肪類和油類及硅油類的油。纟艮據(jù)優(yōu)選的實施方式，油核心包括天然油如玉米油、花生油、椰子油、蓖麻油、芝麻油、豆油、紫蘇油、葵花油、摩洛哥堅果油和胡桃油。小油滴各自包裝在聚合物包衣中以形成包括油核心和包裏油核心的聚合物外殼的納米膠囊。聚合物包衣提供包裹油核心的外殼結(jié)構(gòu)。在本發(fā)明上下文中的術(shù)語",A^"指任何包裝小油滴的固體或半固體聚合物結(jié)構(gòu)。外殼可包括單一聚合物或兩種或更多種聚合物的組合或混合，其將在下文中被進一步討論。當(dāng)聚合物包衣包括聚合物混合物時，優(yōu)選至少一種聚合物在pH大于5.0時可溶，或至少一種聚合物可溶于水(非pH依賴型)。根據(jù)一個實施方式，至少兩種聚合物的組合包括聚合物混合物，該混合物包括可溶于水(非pH依賴型)或在pH大于5.0時可溶的第一聚合物(聚合物組)及為不溶于水的聚合物的第二聚合物(第二聚合物組)。術(shù)語"T溶f^種,合浙，指任何聚合物，其在25t:下被引入到水相中時，在質(zhì)量濃度等于1%時，可能獲得宏觀上均勻且透明的溶液，即有最小透光系數(shù)值的溶液，所述值在波長為500nm時，透過0.1cm厚的樣品測得，為至少80%且優(yōu)選為至少90%。術(shù)語"^/7及義f5.0繆^溶好菜合銀，指任何在5.0以下的pH時且在25。C下，通過溶解在介質(zhì)中，不失去多于10%的其千重，而在同樣溫度下，在pH大于5.0的水介質(zhì)中，其形成水凝膠或溶解以形成宏觀均勻且透明的溶液的聚合物。不時以術(shù)語"濕^,合浙，提及此類聚合物。許多可溶于水的聚合物在本領(lǐng)域內(nèi)已知。在本發(fā)明上下文中適合的聚合物包括，但不限于多元醇和多糖。示例性可溶于水的聚合物包括羥化的纖維素，如，例如，羥丙基甲基纖維素和羥甲基纖維素。其它適合的可溶于水的聚合物包括聚乙二醇。兩種或更多種可溶于水的聚合物的組合也尋皮涵蓋。同樣，許多只在pH大于5.0時可溶的聚合物在本領(lǐng)域內(nèi)已知。對于本發(fā)明適用的腸內(nèi)聚合物的非限制性例子包括，從鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素酯(HP55)、乙酸鄰苯二曱酸纖維素酯、鄰苯二甲酸羧甲基纖維素酯及其它任何鄰苯二曱酸纖維素酯衍生物、蟲膠、EudragitL100-55、玉米蛋白。優(yōu)選的腸內(nèi)聚合物是EudragitL100-55。術(shù)語"不溶f^矽,^^4護，指任何通過溶解在水介質(zhì)中不失去多于10%其干重的聚合物，與介質(zhì)的pH無關(guān)。不溶于水的聚合物的非限制性例子包括纖維素酯類，如二?；锖腿；?，其包括混合的酯類如，例如，乙酸纖維素酯、二乙酸纖維素酯、三乙酸纖維素酯、丙酸纖維素酯、乙酸丁酸纖維素酯、乙酸丙酸纖維素酯、三丙酸纖維素酯；纖維素醚類如乙基纖維素；尼龍；聚碳酸酯；聚(二烷基硅氧烷類)；聚(曱基丙烯酸)酯類；聚(丙烯S吏)酯類；聚苯醚；聚(乙烯醇)；芳香族含氮聚合物；聚環(huán)氧化物；再生纖維素；在反滲透或透析應(yīng)用中適用的成膜材料；瓊脂乙酸酯(agaracetate);三乙酸直鏈淀粉酯；乙酸P-葡聚糖酯；乙醛二甲基乙酸酯(acetaldehydedimethylacetate);乙酸甲基氬基甲酸纖維素酯；乙酸琥珀酸纖維素酯；乙酸二甲氨基乙酸纖維素酯；乙酸乙基碳酸纖維素酯；乙酸氯乙酸纖維素酯；乙酸乙基草酸纖維素酯；乙酸丙酸纖維素酯；聚(乙烯基甲基醚)共聚物；乙酸丁基磺酸纖維素酯；乙酸辛酸纖維素酯；乙酸十二酸纖維素酯；乙酸對甲苯磺酸纖維素酯；刺槐豆膠(locustgumbean)的三乙酸酯；羥基化乙烯-醋酸乙烯酯；乙酸丁酸纖維素酯；蠟或類似蠟的物質(zhì)；月旨肪醇類；氫化植物油類；聚酯類；均聚物和共聚物，如聚乳酸或PLAGA及類似物；及其組合。優(yōu)選的根據(jù)本發(fā)明的不溶于水的聚合物是EudrgitRS或EudragitRL或其組合。當(dāng)納米膠囊包括至少兩種聚合物時，第一聚合物是不溶于水的聚合物和第二聚合物在PH大于約5.0時可溶。根據(jù)優(yōu)選的實施方式，第一聚合物(即不溶于水的聚合物或聚合物組)與第二組聚合物(即在pH大于約5.0時可溶的聚合物或此類聚合物組)之間的重量/重量比率，優(yōu)選的范圍在5:95和50:50之間。不被理論所束縛，相信在不溶于水的聚合物和在pH大于約5.0時可溶的聚合物("非不溶"聚合物)之間的比例對于活性劑從納米膠嚢中控制釋放是重要的。在納米膠嚢暴露于水或具有pH大于5.0的水介質(zhì)之后，具有不溶于水的第一聚合物和在水中可溶或在pH大于5.0時在水中可溶的第二聚合物使聚合物緩慢溶解，同時基本上保持不溶聚合物的一般排列。換句話說，"非不溶"聚合物的緩慢溶解導(dǎo)致在從不溶于水的聚合物形成的聚合物"骨架"中形成類似于渠道的通道，活性劑可通過該通道脫離納米膠嚢。為了促進活性劑從納米膠嚢的控制釋放，已設(shè)想在第一聚合物，即不溶于水的聚合物與所謂的在pH大于約5.0時利于聚合物可溶的"非不溶"聚合物之間的優(yōu)選比率(如利于非不可溶于水的聚合物的重量重量比率為75:25)。根據(jù)一個實施方式，聚合物的組合包括選自EudragitRL或EudragitRS或其組合的第一聚合物或聚合物組(不可溶聚合物)與選自EudragitL100-55和鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素酯(HPMPC)或其組合的第二聚合物或聚合物組(可溶于水的或在pH大于5.0時可溶的聚合物)的混合物。根據(jù)本發(fā)明的聚合物組合的特殊選擇包括以重量/重量比率為從約25:75到約50:50的EudragitRS和EudragitLl00-55。多個納米膠嚢#:容納在凝膠形成聚合物中。如本文使用的術(shù)語"凝應(yīng)多4',合浙'指任何親水性聚合物，其在被濕化時，形成溶脹的聚合物網(wǎng)狀物或凝膠。凝膠形成聚合物有時也被稱為水凝膠形成聚合物。凝膠形成聚合物可為天然蛋白質(zhì)或合成的聚合物。根據(jù)本發(fā)明一個優(yōu)選的實施方式，凝膠形成聚合物是當(dāng)濕化時，變"粘"的聚合物，即能夠增強濕化的微球和包含在其中的納米膠嚢對腸上皮細胞的粘合力。如本文使用的術(shù)語指用凝膠形成聚合物包裝、包衣、包埋、包裹(surroundmg)、封閉、包載或任何其他方式地整合納米膠嚢以致于提供包裝排列的具有第二層保護的含有活性劑的多個納米膠嚢。天然凝膠形成聚合物的非限制性例子包括蛋白質(zhì)如明膠或膠原質(zhì)和多糖如瓊脂、角叉膠、葡甘露聚糖、硬葡聚糖、裂褶多糖、結(jié)冷膠(gellangum)、褐藻酸、凝膠多糖、果膠、透明質(zhì)酸或瓜爾膠。合成的凝膠形成聚合物的非限制性例子包括聚丙烯酸、改性的纖維素、曱基纖維素、曱基丙基纖維素、羧曱基纖維素、陽離子化的纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素、羧乙烯基聚合物、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯基乙縮醛二乙氨基乙酸酯、聚乙烯醇、羧甲基纖維素鈉、2-曱基-5-乙烯基吡啶、卡波姆(carbomer)及類似聚合物。本發(fā)明一個方面涉及微球作為活性劑經(jīng)由GI道的傳輸系統(tǒng)的用途，即用于口服施用。4艮據(jù)本發(fā)明此方面的一個優(yōu)選的實施方式涉及為P-即外排泵基質(zhì)的活性劑的傳輸。替代地，微球可被設(shè)計為經(jīng)注射施用。如本文使用的，可與術(shù)語"P-砂差f交換使用的術(shù)語j^r，指任何活性物質(zhì)(用于治療、化妝品或診斷目的)，其經(jīng)歷活性運輸、經(jīng)p-即膜連接轉(zhuǎn)運子"外排"到細胞外。p-gp沿著腸的全長被表達且也在肝、腎、血腦屏障和胎盤中被表達。在此背景下，本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)物質(zhì)，其經(jīng)歷通過定位在上皮細胞的頂端細胞膜上的腸p-gp的活性運輸。利用ATP水解所產(chǎn)生的能量，P-gp驅(qū)使各種基質(zhì)逆著濃度梯度外排且因此減少它們的細胞內(nèi)濃度且在活性物質(zhì)的情況下，減少它們的口服生物利用度。因此，根據(jù)本發(fā)明一個優(yōu)選的實施方式，活性劑是任何醫(yī)用的、化妝品的或診斷的物質(zhì)，其在口服施用之后，作為P-gp外排機制的結(jié)果，它的血液生物利用度被減低或抑制了。P-gp基質(zhì)可根據(jù)它們的溶解性及代謝水平被歸類。根據(jù)此分類的P-gp基質(zhì)的非限制性列表包括《;^庫'勝及資/t'炎阿米替林、秋水仙堿、地塞米松、地爾硫革、炔雄醇；效遂:庫^及獲/t;;^阿伐他汀、阿奇霉素、卡馬西平、環(huán)孢素、格列本脲、氟哌啶醇、伊曲康唑、他克莫司、西羅莫司、利托那韋、沙套那韋、洛伐他汀。庫溶脊^及裔/t'歎氨氯吡咪(amiloide)、阿莫西林、氯奮、環(huán)丙沙星、雙氯西林、紅霉素、非索芬那定、左旋多巴、咪達唑侖、嗎啡、硝苯地平、伯氨喹、丙嗪、異丙嗪、奎尼丁、奎寧；及效遂:庫^及廚/七漆-環(huán)丙沙星和他林洛爾。在本發(fā)明上下文中，非親水性活性劑是親脂性或兩親化合物或包含此類化合物的復(fù)合物或混合物。非親水性活性劑也包括已經(jīng)被改性的親水性化合物，如通過連接親脂性部分以提高劑的親脂性。在本文，不時用術(shù)語提及這些改性的化合物?；钚詣┛蔀橛坞x酸形式、游離堿形式或鹽形式且可使用活性劑混合物。根據(jù)一個實施方式，活性劑是親脂性劑。本文使用術(shù)語"親靡'^浙，指具有大于2.0-3.0的1ogP(辛醇/水)及具有超過10mg/mL的甘油三酯(TG)溶解度的任何化合物，所述溶解度如，例如，通過在豆油或類似油類中的溶解度所測量。此定義包括中度親脂性藥物即具有在3.0到6之間的logP及高度親脂性藥物，其具有大于6的logP。根據(jù)本發(fā)明適于包載在納米膠嚢中的中度親脂性治療活性劑的例子包括以下乂痛浙和戎^^:阿洛普令、金諾芬、阿扎丙宗、樸炎痛、二氟尼柳、依托度酸、芬布芬、非諾洛芬鈣(fenoprofencalcim)、氟吡洛芬、布洛芬、吲哚美辛、酮洛芬、甲氯芬那酸、甲滅酸、萘丁美酮、萘普生、坦特利爾、苯基保泰松、吡羅昔康、舒林酸。,乂浙阿苯達、羥萘千芬寧、坎苯達唑、雙氯酚、伊維菌素、甲苯達唑、奧沙尼壹、奧芬達峻、奧克太爾、p比奮酮、雙羥萘酸漆嘧咬、瘞苯p達哇。在心/#關(guān)#謝胺碘酮、丙吡胺、乙酸氟卡尼、石克酸奎尼丁。苯明青霉素、西諾沙星、環(huán)丙沙星、克拉霉素、氯法齊明、氯唑西林、地美環(huán)素、多西環(huán)素、紅霉素、硫異煙胺、亞胺培南、萘咬酸、呋喃妥因、利福平、螺旋霉素、苯?；前?sulphabenzamide)、磺胺多辛、磺胺二甲基嘧啶(sulphamerazine)、磺胺乙酰、磺胺嘧咬、磺胺異噁唑、磺胺曱噁唑、磺胺吡啶、四環(huán)素、甲氧千啶。在凝^/:雙香豆素、雙嘧達莫、醋硝香豆素、苯茚二酮。我《^A秀阿莫沙平、馬普替林、米安色林、去甲替林、曲唑酮、馬來酸曲米帕明。我潛#病秀醋磺己脲、氯磺丙脲、格列本脲、格列齊特、格列吡。秦、妥拉磺脲、曱苯磺丁脲。戎膚癤糸貝克拉胺、卡馬西平、氯硝西泮、乙苯妥英、甲妥英、甲琥胺、甲基苯巴比妥、奧卡西平、曱乙雙酮、苯乙酰脲、苯巴比妥、苯妥英、苯琥胺、樸米酮、硫瘞溱、丙戊酸。兩性霉素、硝酸布康唑、克霉唑、硝酸益康唑、氟康唑、氟胞嘧啶、灰黃霉素、伊曲康唑、酮康唑、咪康唑、納他霉素、制霉菌素、硝酸硫康唑、特比萘芬、特康唑、噻康唑、十一烯酸。在虞X^:別噤醇、丙磺舒、苯磺唑酮。我漆j^在W:氨氯地平、貝尼地平、達羅地平、地爾硫革、二氮。秦、非洛地平、乙酸胍那千、依拉地平、米諾地爾、尼卡地平、尼非地平、尼莫地平、朌千明、，派唑a秦、利血平、特拉唑，秦。我^秀阿莫地喹、氯喹、氯丙胍、卣泛群、甲氟喹、氯胍、乙胺嘧啶、-克酸奎寧。在諒關(guān)虞游甲磺酸雙氫麥角胺、酒石酸麥角胺、馬來酸美西麥角、馬來酸苯p塞啶、琥珀酸舒馬曲坦。我#，^減浙阿托品、苯海索、比p底立登、普羅吩胺、莨菪堿、溴美噴酯、羥苯利明(oxyphencylcimine)、托，，比卡胺。在々9t教;^義iC^^:氨魯米特、安吖啶、硫唑噪呤、白消安、苯丁酸氮芥、環(huán)孢菌素、達卡巴嗪、雌莫司汀、依托泊甙、洛莫司汀、美法侖、巰基。票呤、曱氨蝶呤、絲裂霉素、米托坦、米托蒽醌、甲基千肼、檸檬酸他莫昔芬、睪內(nèi)酯、他克莫司、西羅莫司。戎^^動游浙倍他唑、氯碘羥奮、地考p奎酯、二碘羥p奎啉、糠酸二氯尼特、二硝托胺、吹喃哇酮、甲硝哇、硝嗎乙哇、呔喃西林、奧硝哇、替硝唾。在f炎v^浙曱亢平、丙基硫尿嘧啶。在;C^秀0to^/,c)、鎮(zhèn)靜謝、安瓶秀和在;#^^#^,阿普唑侖、異戊巴比妥、巴比妥、苯他西泮、溴西泮、渙哌利多、溴替唑侖、丁巴比妥、卡溴脲、氯氮卓、氯美噻唑、氯丙溱、氯巴占、氯瘞西泮、氯氮平、安定、氟口底利多、炔己蟻胺、氟阿尼酮(flunanisone)、氟硝西泮、三氟丙。秦、三氟噻噸癸酸酯、氟奮乃靜癸酸酯、氟西泮、氟哌啶醇(baloperidol)、勞拉西泮、氯甲西泮、美達西泮、曱丙氨酯、曱喹酮、咪達唑侖、硝西泮、奧沙西泮、戊巴比妥、奮乃靜、匹莫齊特、丙氯拉嗪、舒必利、替馬西泮、硫利達溱、三唑侖、佐匹克隆。醋丁洛爾、阿普洛爾、阿替洛爾、拉貝洛爾、美托洛爾、納多洛爾、氧烯洛爾、吲哚洛爾、普萘洛爾。心返f力*(Carafe/"ofra;icGgem):氨力農(nóng)、洋地黃毒香、地高辛、依諾昔酮、毛花苷C、甲地高辛。倍氯米松、倍他米松、布地奈德、乙酸可的松、去氧米松、地塞米松、乙酸氟氫可的松、氟尼縮松、氟可龍、丙酸氟替卡松、氳化可的松、甲基潑尼松龍、潑尼松龍、潑尼松、曲安西龍。w尿浙乙酰唑胺、氨氯吡咪、千氟噻。秦、布美他尼、氯噻溱、氯噻酮、依他尼酸、呋塞米、美托拉宗、螺內(nèi)酯、三氨蝶呤。^tC^i,身甲磺酸溴隱亭、馬來酸麥角乙脲(lysuridemaleate)。fl*:比沙可啶、西咪替丁、西沙必利、地芬諾酯、多潘立酮、法莫替丁、洛哌丁胺、美沙拉嗪、尼扎替丁、奧美拉唑、奧丹西隆、雷尼替丁、柳氮磺吡啶。邀麼H，-^謬者在謝阿伐斯汀、阿司咪唑、桂利溱、賽克力溱、賽庚啶、茶苯海明、氟桂利溱、氯雷他定、美可洛。秦、奧沙米特、特非那丁。A^f諷，浙苯扎貝特、氯貝特、非諾貝特、吉非羅齊、普羅布考。^T凝J^和^它我心設(shè)4^:硝酸戊酯、三硝酸甘油酯、二硝酸異山梨酯、單硝酸異山梨酯、季戊四醇四硝酸酯。卩胡蘿卜素、維生素A、維生素B2、維生素D、維生素E、維生素K。///^蛋冷躇#*,.奈非那韋，/^",ji:虞謝可待因、丙氧匹林(dextropropyoxyphene)、海洛因、雙氫可待因、美普他酚、美沙酮、嗎啡、納布啡、噴他佐辛。檸檬酸克羅米酚、達那唑、炔雌醇、乙酸甲羥孕酮、美雌醇、甲基睪酮、炔諾酮、炔諾孕酮、雌二醇、軛合雌激素、孕酮、羥甲烯龍、己烯雌酚、睪酮、替勃龍。冉濃浙苯丙胺、右苯丙胺、右芬氟拉明、芬氟拉明、馬吲咮。另外，不—皮限制地，根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選藥物包括他克莫司、西羅莫司、鹵泛群、利托那韋、洛匹那韋(l叩rinavir)、安普那韋、沙奎那韋、骨化三醇(calcitrol)、屈大麻酚、異維A酸、維A酸、利培酮堿、丙戊酸，同時優(yōu)選的前藥包括地塞米松棕櫚酸酯、紫杉醇棕櫚酸酯、多西紫杉醇棕櫚酸酯。一些可被加入到本發(fā)明傳輸系統(tǒng)中的親脂性藥物及它們的醫(yī)學(xué)應(yīng)用的非限制性例子^皮RobertG.Strickley[StrickleyR.G.PharmaceuticalResearch,21(2):201-230;(2004)]和KopparamManjunath等人[ManjunathK.等人，JournalofControlledRelease107:215-228;(2005)]所描述。根據(jù)另一個實施方式，活性劑是兩親劑。本文使用的術(shù)語是指具有在1.5-2.5之間的bgP值的任何化合物且具有甘油三酯(TG)溶解性，如所測定的，通過在豆油或類似物中的溶解性，超過10mg/mL?？杀槐景l(fā)明系統(tǒng)傳輸?shù)膬捎H活性劑的例子包括，但不限于水楊酸毒扁豆素(pysostigminesalicylate)、氯丙。秦、氟奮乃靜、三氟拉，秦和利多卡因、布比卡因、兩性霉素B、依托泊甙、替尼泊甙和抗真菌劑棘白菌素類和唑類，如克霉唑和伊曲康唑(itaconazole)。另一個適于包載在根據(jù)本發(fā)明的納米膠嚢中的治療的非親水性活性劑的例子包括，但不限于氯氮平。氯氮平是應(yīng)用在難治性精神分裂癥中的有效的非典型的抗精神病藥。氯氮平可被快速地口服吸收，其生物利用度為27%。氯氮平是被肝微粒體酶(CYP1A2和CYP3A4)強代謝的且形成N-去甲基和N-氧化物代謝物。因此，氯氮平是被本發(fā)明系統(tǒng)傳輸?shù)牧己煤蜻x劑。本發(fā)明還提供容納多個根據(jù)本發(fā)明的納米膠嚢的微球的制備方法，所述方法包括(a)提供有機相，其包括油、與水混溶的有機溶劑、溶解在溶劑中的非親水性活性劑和用于包衣所述油核心的聚合物或聚合物組合；(b)向所述有機相中緩緩加入水以獲得油包水乳液；(c)向油包水乳液中繼續(xù)加入，優(yōu)選逐滴地加入水以引發(fā)所述乳液的相轉(zhuǎn)化，從而獲得水包油(o/w)乳液；(d)將所述o/w乳液與凝膠形成聚合物或凝膠形成聚合物的組合混合;(e)除去所述有機溶劑和水以獲得所述容納多個納米膠嚢的微球。有必要注意納米膠嚢包括油核心，活性劑溶解或分散在其中并注意此油核心被聚合物外殼所包裝。多個外殼包衣的油核心容納在凝膠形成聚合物中，以致于劑與凝膠形成聚合物之間不存在直接接觸。有接近或低于水沸點的沸點。此類有機溶劑的非限制性列表包括乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、異丙醇(沸點108。C，盡管如此在本發(fā)明背景中被認(rèn)為是揮發(fā)性的)。油和有機溶劑的組合的使用使各種劑能夠在納米膠嚢中被膠嚢化，所述劑必須本質(zhì)上為非親水性。油核心也可包括一種或多種非親水性賦形劑(如親脂性賦形劑)。出于此原因，本發(fā)明方法也可包括在有機相中添加一種或多種賦形劑。賦形劑優(yōu)選任何在油相中具有至少1%溶解度的賦形劑。根據(jù)一個實施例，賦形劑是親脂性表面活性劑如labrafilM1944CS、聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20。向含有油的有機相中，緩緩地加入水，必要地，為逐滴地。在開始時，形成水包油乳液，即水滴分散在有機相中。然而，向介質(zhì)中繼續(xù)緩慢滴加水最終產(chǎn)生相反的現(xiàn)象，其中連續(xù)和不連續(xù)是"轉(zhuǎn)換的"以致于用聚合物包衣來包衣的小油滴分散在水中。本文使用的術(shù)語"/乙濕"指具有至少兩種液相的系統(tǒng)，其中一種液相分散在另一種液相中。分散的相也被稱為內(nèi)相、不連續(xù)相、不連貫相(分散的滴)而外相也被稱為連貫相或連續(xù)相。乳液可包括多于兩種的相。例如，它們可包括三種液相(即三重乳液)，或兩種液相及一種固相。所有乳液的共同之處為它們的外相是液體狀態(tài)。如果存在第三相，如液相或固相，其通常分散在分散相中，所述分散相分散在外相中。乳化劑可以存在或也可以不存在。不同類型的乳液可被定義，通過參考形成外相的液體類型對形成分散相的液體類型。就此而論，當(dāng)油相分散在水相中時，乳液釆用術(shù)語"水包油乳液，，或"正相乳液"。然而，也可能形成"反相或油包水(w/o)乳液"。在反相乳液中，水滴被分散在油的連續(xù)相中。當(dāng)形成納米"交嚢時，最初，形成油包水乳液且此w/o乳液通過向油/有機相中添加水被轉(zhuǎn)化為0/W乳液。不被理論所束綽，認(rèn)為作為結(jié)果，系統(tǒng)中的聚合物在油水分界面沉積，其包載所有內(nèi)部小油滴且將它們與連續(xù)的水相隔離。產(chǎn)生的包括以包衣聚合物包衣的小油滴的乳液隨后與凝膠形成聚合物的溶液混合。一旦形成水包油乳液并添加凝膠形成聚合物，有必要除去溶劑(或溶劑混合物)和水。存在若千可用于從乳液中除去溶劑(或溶劑組合)的技術(shù)，如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的技術(shù)，其包括加熱和溶劑蒸發(fā)、揮發(fā)溶劑蒸發(fā)隨后凍千等。根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選地用噴霧干燥法除去溶劑，所提供的活性劑不是熱敏的。在活性劑是熱敏的情況下，可使用從乳液中除去溶劑的其它方法，如本領(lǐng)域才支術(shù)人員已知和i^可的方法。噴霧千燥是在20世紀(jì)30年代發(fā)展的機械的微膠嚢化方法。因此，乳液可通過將漿從旋轉(zhuǎn)盤中泵到噴霧千燥器的熱室中被自動化為液滴噴霧。在熱室中，乳液中的溶劑和水被蒸發(fā)以獲得干燥微球。可根據(jù)任何預(yù)期應(yīng)用將所產(chǎn)生的干燥微球進行配制。此類微膠囊化的材料存在幾乎無限的應(yīng)用。除其他因素之外，取決于所用活性劑，微球可應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、藥物、食品、化妝品和香水、紡織品、紙、顏料、涂料(coating)和粘合劑、印刷應(yīng)用及許多其它行業(yè)中。根據(jù)優(yōu)選的實施方式，微球可用于醫(yī)藥、化妝品或診斷中。更優(yōu)選地，干燥微球被配制為藥物組合物，優(yōu)選地用于口服施用。出于此原因，干燥微球可被包括在腸內(nèi)媒介中，如腸內(nèi)膠嚢。腸內(nèi)膠囊的非限制性例子包括本領(lǐng)域已知的腸溶包衣的軟膠嚢或硬膠嚢。應(yīng)注意到，當(dāng)通過使用此類腸內(nèi)々某介可保護干燥微球免受胃液侵蝕時，小油滴(在納米膠嚢中)不需要以在pH大于5.0時可溶的聚合物包衣。換句話說，可溶于水的聚合物和不溶于水的聚合物的組合是可應(yīng)用的。另一方面，使用包括只在pH大于5.0時可溶的聚合物的聚合物混合物，微球的其它傳輸形式是可能的，如以小藥囊(sachet)形式。因此，應(yīng)理解取決于具體的制劑類型，藥劑師或任何其它配方師可確定根據(jù)本發(fā)明使用的具體的聚合物組合。針對口服傳輸，可使用片劑、丸劑、粉劑、錠劑、小藥嚢、扁膠劑、酏劑、懸浮劑、氣溶膠(作為固體或在液體介質(zhì)中)及滅菌包裝粉劑及其他傳輸形式。本發(fā)明微球被指出與商業(yè)產(chǎn)品或乳液制劑(在結(jié)果部分命名的油)相比，可提供示例性活性劑升高的血液水平。根據(jù)一個實施方式，本發(fā)明微膠嚢提供活性劑的控制釋放。如本文使用的，"^浙斧i"意指不立即釋放的任何類型的釋放。例如，控制釋放可被設(shè)計為改性的、廣泛的、持續(xù)的、延遲的、延長的或恒量的(即o級)釋放。理論上，最有效的釋放特性中的一種為在預(yù)定的時間期間內(nèi)的恒量釋放。認(rèn)為劑的控制釋放可通過應(yīng)用到液滴的包衣來獲得及活性劑的釋放特性可一皮在形成外殼的聚合物的組分中的變量所規(guī)定。如本領(lǐng)域已知，也可通過在核滴上應(yīng)用多種聚合物混合物的包衣制成控制速度的聚合物包衣。應(yīng)注意到，使用本發(fā)明方法，構(gòu)造了微球，以致于在活性劑和凝膠形成聚合物(其可為凝膠形成聚合物的混合物)之間不存在直接接觸。此外，應(yīng)注意到本發(fā)明方法^:任何過量的形成外殼的聚合物與凝膠形成聚合物混合，即形成包衣納米膠囊的微球的部分。這樣，在終產(chǎn)品與水環(huán)境接觸時，凝膠形成聚合物凝膠化且溶脹同時過量的與凝膠形成聚合物混合的可溶于水的聚合物或在pH大于5.0時可溶的聚合物被溶解。不被理論所束縛，相信通過這種在微球結(jié)構(gòu)中的凝膠形成聚合物和過量的其它聚合物(用于構(gòu)造納米膠囊壁)的組合，包括活性劑的完整的納米膠嚢從微球中被釋放(假定通過在微球中形成的間隙，所述間隙是可溶聚合物溶解所產(chǎn)生的)及以其游離的形式的藥物不被釋放。不被理論所束縛，還相信納米膠嚢從凝膠中被釋放及以其游離的形式的藥物不被釋放，這允許劑從P-gp外排中脫離且因此它們被淋巴管吸收。本發(fā)明還提供提高活性劑在人類受治療者體內(nèi)生物利用度的方法，所述方法包括向所述受治療者提供本發(fā)明微球。本發(fā)明得出的結(jié)果顯示通過使用根據(jù)本發(fā)明的微球，測試活性劑在血液中的生物利用度將增加，至少增加1.3倍，優(yōu)選地2倍，更優(yōu)選地3倍，這與所使用的對照藥物有關(guān)(見例如圖12)。本發(fā)明還提供針對病理疾患以在需要所述治療的受治療者的血液系統(tǒng)中的有效量活性劑治療受治療者的方法，所述方法包括向所述受治療者提供本發(fā)明微球。本文使用的術(shù)語"^<^疾,悉"指為了改善受治療者健康狀態(tài)要求傳輸藥物或前藥或診斷劑的活性劑(如上文列舉的那些)的任何疾患。當(dāng)活性劑是非親水性實體時，例如但不限于親脂性劑或兩親劑，或活性劑的任何親月旨性/兩親衍生物，根據(jù)本發(fā)明的活性劑的傳輸優(yōu)選地，通過淋巴運輸。疾患的非限制性列表包括，除其它事物以外，炎癥和自身免疫紊亂、寄生(如瘧疾)、細菌、病毒或真菌感染、心臟病(如心率不齊)、凝血功能紊亂、抑郁、糖尿病、癲癇癥、偏頭痛、癌癥、免疫疾病、荷爾蒙失調(diào)、精神疾患、胃腸道疾病、營養(yǎng)疾患及許多其它疾病，如本領(lǐng)域已知的?；钚詣┰谄渌幬锝M合物中和其劑型單元中的有效量可被廣泛地改變或調(diào)整，取決于特殊的應(yīng)用、引入方式、特殊活性劑的潛力、劑向納米膠嚢的裝載和預(yù)期濃度。有效量通常在適當(dāng)設(shè)計的臨床試驗(劑量范圍研究)中被確定且為了確定此有效量本領(lǐng)域技術(shù)人員將知道如何精確的操作此類試驗。如通常已知的，有效量取決于多種因素、各種藥理學(xué)參數(shù)如在體內(nèi)的半衰期、預(yù)期的副作用、因素如年齡和性別(如果有的話)等，所述多種因素包括活性劑的疏水性(hydrophibiclity)和當(dāng)相關(guān)時，親脂性/兩親性、形成納米膠嚢的聚合物的選擇(小油滴的包衣)和/或外部的凝膠形成的封裝、活性劑在從納米膠囊中被釋放后在體內(nèi)的分布特性。術(shù)語指物理上不連續(xù)的單元，其適于作為針對人類受治療者和其它哺乳動物的單一劑量與適合的藥物賦形劑聯(lián)合，每個單元含有預(yù)定量的活性劑，其^^皮計算產(chǎn)生預(yù)期的治療作用。治療的活性劑的濃度可變化。本發(fā)明組合物可作為單一劑量且在若千天之內(nèi)，在延長的時間期間內(nèi)以單一的每日劑量或每天若千劑量等被施用。治療周期一般將具有與疾病過程的時間長度及具體的微球的效力(如通過淋巴系統(tǒng)的有效傳輸、劑的效力等)及被治療的患者物種成比例的時間長度。如所意識到的，雖然在下文詳述的說明書中伴隨著提及微球及它們的制備方法描述了本發(fā)明，但是應(yīng)理解在本發(fā)明中還包括包含它們的藥物組合物及使用此藥物的治療方法，及微球的任何其它用途。如在說明書和權(quán)利要求書中所使用的，詞形"一^Y"尸、"一神TflW/'和包括單數(shù)及復(fù)數(shù)含義除非上下文明確地另有所指。例如，術(shù)語"一;^菜^^浙，包括一種或多種聚合物及術(shù)語"湯"包括一種或多種油類。此外，如本文使用的術(shù)語"逸拔，是用來指含有列舉的成分的微球，但不排除其它成分。術(shù)語......逸4'橋，被用于定義含有列舉的成分但不排除其它成分的微球，所述其它成分對于親脂性劑在受治療者體內(nèi)的生物利用度具有實質(zhì)意義。例如，基本上由以可溶于水的聚合物(非pH依賴型)包衣的小油滴組成的微球?qū)⒉话╬H依賴型聚合物或只包括可忽略量的(對非親水性劑從微球釋放具有可忽略的作用的量)pH依賴型聚合物，所述聚合物關(guān)于它們的溶解度是pH依賴型，如腸內(nèi)聚合物。"洽......盎4"將因此指排除多于痕量成分的其它成分。被這些過渡術(shù)語中的每一個所定義的實施方式在本發(fā)明范圍內(nèi)。此外，所有數(shù)值，如當(dāng)涉及組成微球的成分的量或范圍時，為近似值，圍繞規(guī)定值上下浮動達20%，有時達10%。即使不總是明確規(guī)定，應(yīng)理解在所有的數(shù)字名稱之前加上了術(shù)語"，，。具體實施方式實施例l:容納在微球中的納米膠嚢材料聚(丙烯酸乙酯、曱基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸三甲基乙基氯化氨)1:2:0.2(EudragitRL)、聚(丙烯酸乙酯、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸三曱基乙基氯化氨)1:2:0.1(EudragitRSPO)和聚(甲基丙烯酸、丙烯酸乙酯)1:1(EudragitL100-55)從Rohm(Dramstadt,GmbH，德國)購得，鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素酯(HPMCP55NF)從Eastman(Rochester,USA)獲得。鞋丙基曱基纖維素(MethocelE4MPremium)從DowChemicalCompany(Midland,MI,USA)獲得，曱基纖維素(Metolose90SHIOO,OOO)從Shin-Etsu(Tokyo,Japan)獲得，摩洛哥堅果油(ArganOil)從Alban-Muller(Vincenny,France)購得，聚氧乙烯基油酸甘油酯(LabrafilM1944CS)是Gattefosse(St.Priest,France)友情捐贈的，地塞米松棕櫚酸酯(DXPL)按照2.1中所描述合成，他克莫司(為一水化物)乂人ConcordBiotechLimited(Ahmedabad,Indm)購得，兩性霉素B可從Alpharma(LotN:A1960561)購得。其它化學(xué)品和溶劑是分析純試劑并且在研究中使用雙蒸水。方法蘇贈萌備各種初步制劑按照表1和表2所描述被制備。在本研究中針對納米膠囊制備使用兩種不同的溶劑添加方法。第一種方法基于已為大家接受的Fessi等人的方法[FessiH等人.Nanoc叩suleformationbyinterfacialpolymerdepositionfollowingsolventdisplacement(在替代溶劑之后通過分界面聚合物沉積制得的納米膠嚢).IntJPharm198955:R1-R4(1989).],其在從油/有機相中替代與水混溶的半極化共溶劑系統(tǒng)(丙酮乙醇；19:1)之后，使用包衣聚合物的分界面沉積。包括丙酮溶液的油相、親脂性表面活性劑、包衣聚合物(形成納米膠囊封裝的聚合物)及各自的藥物纟皮倒入最終含有乳液穩(wěn)定劑的水溶液中。作為納米膠嚢形成的結(jié)果，水相立即變?yōu)槿闋?，具有帶藍色的乳白光(表l)。相反，在表2中所提出的納米膠嚢制劑中，水相被緩緩加到丙酮乙醇/有機相中，首先導(dǎo)致w/o微乳液的形成，其在替代雙極性溶劑之后繼續(xù)加水時產(chǎn)生相反的o/w乳液，導(dǎo)致納米膠嚢的形成。表l根據(jù)Fessi等人的方法通過分界面丙酮替代擴散制備的納米膠囊制劑組成(24=26)<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>油相包括摩洛哥堅果油丄abrafilM1944CS;5:1和相對于摩洛哥堅果油體積5%恒定濃度的DXPL200780010197.5轉(zhuǎn)溢也被26/415t表2:在乳液相轉(zhuǎn)化之后(水相被倒入丙酮相中)，利用溶劑萃取工藝，通過聚合物分界面的納米沉積制備的納米膠囊制劑組成<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>*油相包括摩洛哥堅果油:LabrafilM1944CS;5:1和相對于摩洛哥堅果油體積5%恒定濃度的DXPL或相對于摩洛哥堅果油體積4%恒定濃度的他克莫司應(yīng)強調(diào)，他克莫司是非常昂貴和有毒的藥物，其需要被小心地加工。因此，決定用地塞米松棕櫚酸酯(DXPL)實行初步實驗，所述DXPL為親脂性藥物，其作為模型藥物特別地用于評價體外釋放動力學(xué)實驗。她墓^在、樣*趁^^合4地塞米松(l當(dāng)量)被溶解在新干燥的吡啶中(對每l克地塞米松使用2.5ml吡啶)。所產(chǎn)生的溶液用二氯甲烷稀釋1到5并在水浴中被冷卻到4'C(溶液A)。棕櫚酰氯(1.2當(dāng)量，Aldrich)被溶解在二氯甲烷中(對每1克棕櫚酰氯使用15ml二氯甲烷)并且也冷卻到0'C(溶液B)。溶液B被轉(zhuǎn)移到均壓漏斗中并逐滴添加到劇烈攪拌并冷卻的溶液A中。添加完成之后(5g地塞米松30分鐘)，反應(yīng)混合物用氮氣吹掃、封頂并在冰浴中攪拌過夜。第二天早上取樣品使用薄層色譜評價反應(yīng)進程，用乙酸乙酯己烷(按體積3:1)洗提。通常獲得三個主峰第一個代表地塞米松，第二個是棕櫚酰氯且第三個代表產(chǎn)物地塞米松棕櫚酸酯。在反應(yīng)未完成的情況下，混合物被留下攪拌另外12小時。在此時期結(jié)束時，在減壓下(加熱不超過60。C)除去有機溶劑。向殘余物中加100ml2:l的乙酸乙酯己烷混合物。所得到的懸浮液被劇烈攪拌且通過Buckner漏斗過濾。用乙酸乙酯洗滌半固體且分離所得過濾物。用100ml5y。的冷氳氧化鈉溶液洗滌有機層兩次，用水洗滌兩次且用氯化鈉飽和溶液洗滌一次。有機層在無水硫酸鈉上過濾且蒸發(fā)以干燥。殘余物被溶解在最小量的氯仿中且被應(yīng)用到硅柱(40cm長)用于快速色譜。以氯仿:己烷(l:l)洗提柱且合并富含地塞米松棕櫚酸酯的組分，蒸發(fā)至干燥并用HPLC^r測產(chǎn)物純度。實際產(chǎn)率為60%。必乂弱蘇魔顏備EudragitRS、EudragitL10055、Labrafil1944CS、摩洛哥堅果油和他克莫司以表3中所描述的濃度被溶解在100ml丙酮乙醇(90:10)溶液(油相)中。向油相中加入75ml水(在2分鐘之內(nèi))以形成分散體。向分散體溶液中，在噴霧干燥步驟之前加入200ml0.5%的曱基纖維素溶液。僅在納米膠嚢形成之后加入曱基纖維素和最后的水部分。除非另外說明，甲基纖維素指MethocelE4M。本文示例了三種制劑29號制劑和30號制劑，其中它們的成分在表3、4中描述。這些制劑在它們的聚合物比例上不同分別地，EudragitRS:EudragitL100匿55為25:75或75:25。進一步的制劑為32號制劑，其具有與29號制劑相似的成分，但是沒有EudragitRS和EudragitLIOO-55。表3:29號納米膠嚢制劑組成#材料名稱量單位1丙酮95ml2EudragitRS*0.25g3EudragitL100-55*0.75g4乙醇ml5摩洛哥堅果油0.5ml6LabrafilM1944CS0.1ml7他克莫司20mg8DD水75ml9MethocelE4M1g10DD水200ml*制劑32與制劑29的成分相同，但不含EudragitRS和Eudragit1100-55。表4:30號納米膠嚢制劑組成#材料名稱量單位1丙酮95ml2EudragitRS0.75g3EudragitL100-550.25g4乙醇ml5摩洛哥堅果油0.5ml6LabrafilM1944CS0.1ml7他克莫司20mg8DD水75ml9MethocelE4M1g10DD水200ml勁^魔#教備EudragitRS、EudragitLI0055、Labrafil1944CS、摩洛哥堅杲油和(以乙酸溶解的兩性霉素)以表3所描述的濃度被溶解在100ml丙酮乙醇(90:10)溶液("有機相")中。向有機相添加75ml水(在2分鐘內(nèi))導(dǎo)致分散體的形成。在噴霧干燥步驟之前，向分散的溶液中加入200ml0.5%的羥丙基曱基纖維素溶液。羥丙基甲基纖維素與最后一批水只在納米膠嚢形成之后被添加，羥丙基甲基纖維素指MethocelE4M。納米膠嚢制劑在表5中表示。表5:兩性霉素A納米膠嚢制劑組成<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>用Buchi小型噴霧干燥儀B-190儀器(Flawil,Switzerland)在以下條件下將懸浮液噴霧干燥入口溫度為180。C;出口溫度為113。C;通風(fēng)(aspiration)50%;懸浮液的進料速度為2.5ml/分。在旋風(fēng)分離器中收集粉末且計算出口產(chǎn)率。必義^《汾^屋,和應(yīng)#好凝屋#W參理化他克莫司在粉末中的總量通過將樣品溶解在5mlPBS中被分析。在聚合物纟皮溶解之后，加入lml乙腈(ACN)且攪拌(100rpm)混合物1小時。隨后，加入3ml乙酸乙酯并劇烈攪拌混合物并在4000rpm下離心分離5分鐘。用乙酸乙酯反復(fù)萃取他克莫司3次以確保藥物從混合物中全部除去。不同的乙酸乙酯層(上層)被轉(zhuǎn)移到干凈的管中并在空氣中蒸發(fā)至干燥。合并的殘余物被溶解在1mlACN中，并在以下條件下向HPLC中注射50pi:流動相-乙腈100%，流速-0.5ml/分，波長-213nm，柱-LiChrospher100RP-18(5jxm),4/120mm。以范圍在5嗎/ml到250〖ig/ml之間的他克莫司濃度建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線產(chǎn)生線性相關(guān)性。發(fā)現(xiàn)他克莫司檢測限值為3.9嗎/ml。用以下公式計算他克莫司加入產(chǎn)率藥物產(chǎn)率(％)=^|^#><100%力n入的藥物玄兩性霉素B在粉末中的總量通過將樣品溶解在5ml二曱亞砜(DMSO)中被分析。在聚合物纟皮溶解之后，攪拌(100rpm)混合物1小時。之后，在波長407nm處用分光光度計測定兩性霉素B的濃度。從兩性霉素B濃度從0.781嗎/ml到100pg/ml的范圍建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線產(chǎn)生線性相關(guān)性(具有R2=0.999)。發(fā)現(xiàn)噴霧干燥的粉末的兩性霉素B的含量為0.85%w/w。my丄^#藥物在粉末中的總量通過將樣品溶解在5mlPBS中被分析。在聚合物被溶解之后，加入5ml甲醇且攪拌(100rpm)混合物1小時。之后，加入3ml二氯曱烷并劇烈地攪拌混合物，并在4000rpm下離心分離5分鐘。用二氯甲烷重復(fù)萃取DXPL三次以確保藥物從混合物中全部除去。不同的二氯甲烷層(下層)被轉(zhuǎn)移到干凈的管中并在空氣中蒸發(fā)至干燥。合并的殘余物-故溶解在200pl曱醇中，并在以下條件下將50pl注射到HPLC中流動相-曱醇100%,流速-0.7ml/分，波長-242nm，柱-LiChrospher100RP-18(5jim)，4/120mm。從DXPL濃度在0.01嗎/ml和5pg/ml之間的范圍建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線產(chǎn)生線性相關(guān)性。發(fā)現(xiàn)DXPL的檢測限為9.8ng/ml。用以下公式計算DXPL的加入產(chǎn)率藥物產(chǎn)率(。/。)-^Ittx1000/。力口入的藥物fA^f在傳/A^^義動力夢的^/介由于當(dāng)漏槽條件占優(yōu)勢時他克莫司的檢測限值受限制，體外動力學(xué)實驗以DXPL進行，使用無任何壓力的超濾技術(shù)[MagenhiemB，等人Anewinvitrotechniquefortheevaluationofdrugreleaseprofilefromcolloidalcarriers-ultrafiltrationtechniqueatlowpressure(—種用于"^H古藥4勿,人月交質(zhì)載體中的釋放特性的新的體外技術(shù)-在低壓下的超濾技術(shù)).IntJPharm94:115-123(1993).]。使用超濾細胞裝置Amicon(AmiconCorp,Danvers,Mass,USA)。所使用的過濾器為ISOPORE8.0TEPT(Millipore,Bedford,MA,USA)。在此研究中，匹配漏槽條件釋放。將微粒樣品(5mg)置于100ml釋放介質(zhì)中(10%乙腈的pH7.4的磷酸鹽緩沖液，其不改變納米膠囊的物理穩(wěn)定性)。在給定的時間間隔內(nèi)，釋放介質(zhì)的0.5ml樣品通過8.0過濾器被收集，其使納米膠嚢通過此過濾器擴散。隨后，加入0.5ml甲醇并渦旋以使納米膠嚢溶解。之后，加入3ml二氯曱烷并劇烈地渦旋混合物，隨后在4000rpm下離心分離超過5分鐘。在離心分離之后，將二氯甲烷層(下層)轉(zhuǎn)移到干凈的管中并在空氣下蒸發(fā)至干燥。殘余物被溶解在200pl甲醇中，并在先前描述的條件下將50nl注射到HPLC中。確定處初韻^魔襲及,二凝球親粒人亍使用ALV非侵入性背散射高效粒度儀(Non-InvasiveBackScatteringHighPerformanceParticleSizer)(ALV-NIBSHPPS;Langen,Germany)在25。C下并以水做溶劑執(zhí)行納米膠嚢尺寸測定。使用在632nm波長的激光束。靈敏度范圍為0.5nm-5pm。噴霧干燥的微粒被掃描電子顯微鏡定性地評估?！蔨fi凝裙「SEM」使用掃描電子顯微鏡(型號Quanta200,FEI，Germany)執(zhí)行納米膠囊和噴霧千燥的微^^的形態(tài)學(xué)評估。使用雙面膠帶將樣品固定在SEM-stub上并隨后在真空下按照金濺射(goldspattering)(pilaronE5100)試驗方案進行標(biāo)準(zhǔn)包衣4吏之導(dǎo)電。邊#密子^凝裙^EMJ4吏用TEM分析完成納米膠嚢的形態(tài)學(xué)評估。樣品纟皮;故在火棉膠-包衣的、碳-穩(wěn)定化的銅網(wǎng)中1分鐘，用1。/。磷鵠酸(PTA)染色。樣品被干燥且用TEM(PhillipsCM-12;Philips,Eindhoven,TheNetherlands)檢查。在義虞盧^效炎々f宏本研究由本地實驗動物管理倫理委員會根據(jù)與實驗動物的管理和使用相關(guān)的準(zhǔn)則和方針MD104.01-3所批準(zhǔn)。在此研究中，使用重為300-325g的SpragueDawley大鼠。使動物住在SPF條件下并在實驗前禁食24小時。第二天早上，動物在禁食的狀態(tài)下，用0.2mg/鼠的他克莫司經(jīng)口灌給藥，所述他克莫司被配制為？1"(^『3(*膠嚢成分(批次-5C5129Bexp.-06/2007，F(xiàn)ujisawaLtd.UK)(CAPS)的懸浮液、水包油乳液(OIL)或新型DDS(29號制劑和30號制劑)或32號制劑。從劑量施用后在O分鐘、30分鐘和1、2、3、4、6和24小時從大鼠尾部取血液樣品(100-150pL)。血液樣品用含有肝素的管收集。樣品被立即冷凍在-2(TC并遵循公司所表示的方法使用PRO-TracIIELISA試劑盒(DiaSorin,USA)檢驗他克莫司水平。此ELISA方法在臨床實踐中被廣為接受且可準(zhǔn)確地檢測從0.3ng/ml到30ng/ml的他克莫司血液水平。使用初始Prograf⑧濃縮物注射安瓿(5mg/ml)(批次5A3098Hexp:11/06，F(xiàn)ujisawaLtd.UK)通過I.V推注以160嗎/kg他克莫司對每只大鼠給藥。在5分鐘、30分鐘和1、2、3、4、6和24小時從動物尾部取血液樣品(100-150pL)。樣品被處理并如上文所描述被分析。使用WinNonlin軟件(版本4.0.1)，使用計算AUC的梯形法則計算不同制劑的藥物動力學(xué)參數(shù)?？诜牟煌苿┑慕^對生物利用度通過使用以下公式被計算AUCns絕對生物利用度(%)=口服xl00%AU"凈脈注射與標(biāo)準(zhǔn)的市場化制劑(CAPS)相比，任何口服制劑的相對生物利用度使用以下公式計算AUCna相對生物利用度(%)=口服><100%T^磁焱心W潛定^一,在5mg他克莫司溶解在300pl摩洛哥堅果油Labrafil5:1溶液(ALSOL.)中后，他克莫司在摩洛哥堅果油/labrafil中在不同的實驗條件下經(jīng)過長期儲存在37。C下的化學(xué)穩(wěn)定性被評估。各種抗氧化劑賦形劑也被溶解在表6中所描述的油制劑中。被儲存在完好封閉的玻璃小瓶中的制劑中的一些以氮氣吹掃以確保惰性的氣體條件。表6:含1.66%他克莫司的油制劑組成<table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table>在小費裙,^僅研^:在此研究中，使用重18kg到21kg的小型豬。紹每只動物口服施用1mg他克莫司，執(zhí)行吸收研究，所述他克莫司被配制為Prograf⑧明膠膠嚢商業(yè)產(chǎn)品(Comm.Prod.)，和使用不同Eudragit混合物的新型DDS明膠月交嚢(新型DDS二制劑29)。手術(shù)步驟HebrewUniversity的動物管理和使用委員會(MD117.04-3)檢查并批準(zhǔn)了所有手術(shù)和實驗步驟。針對所有研究使用重為18-21kg的小豬。動物被禁食過夜；在研究中允許自由得到飲用水。第二天早上，使用isofloran(面具)將動物麻醉短時期(lO分鐘)。在此期間動物被(1)在禁食狀態(tài)下，口服給藥lmg每動物的他克莫司，其被配制為Progra微膠囊商業(yè)產(chǎn)品，及被配制為新型DDS;(2)將導(dǎo)管插入頸靜脈中用于取血液樣品并將其固定在豬背上。在0、15min、30min和l、1.5、2、3、4、8、12和24小時時耳又血液樣品(lml)并收集在含有肝素的管中(在實驗中動物是有知覺的)。樣品立即^皮冷凍在-20。C下并使用PRO-TmcIIELISA試劑盒(DiaSorin,USA)檢驗他克莫司水平。結(jié)果與討論教悉夢賄出人意料地，當(dāng)水相被緩慢加到有機相時(表2);首先，水在油相中分散，隨后，在約為15ml水的水量加到100ml丙酮溶液中后，形成了o/w乳液，證據(jù)為在分散介質(zhì)中乳白光的快速形成。在此階段，內(nèi)部丙酮/乙醇相向外部水相的快速擴散發(fā)生，導(dǎo)致疏水聚合物在o/w界面的沉積及由油核心組成的納米膠嚢的形成，所述油核心被如在圖1中描述的Eudragit聚合物混合物包衣，其中丙酮溶液比水的最終比例為100:75v/v。應(yīng)強調(diào)在相同的Eudragit混合物濃度下但在不含有油時，Eudragit相分離現(xiàn)象和反映聚合物從丙酮溶液中分離的乳白光，在45和35ml水分別地加到29號制劑和30號制劑中后發(fā)生。此不同可能由于在制劑29和制劑30之間，EudragitRS和EudragitLI00-55在混合物中的不同比例。明顯地，當(dāng)水緩慢地加到含有l(wèi)abrafil表面活性劑的展示為4的低HLB值的丙酮乙醇/油相中時，形成透明的w/o微乳液且注意到?jīng)]有相分離。當(dāng)水進行性和繼續(xù)添加時，在某種親水性:親脂性體積比，相反的0/w乳液自發(fā)形成，隨后立即地丙酮和乙醇向外部的水相取代(擴散)，導(dǎo)致疏水Eudragit聚合物混合物在小油滴的oAv分界面上沉積，導(dǎo)致在摩洛哥堅果油核心周圍的納米膠嚢封裝的形成，其中藥物和表面活性劑溶解在油核心中。在此階段僅加入了75ml水，在納米膠嚢周圍的Eudragit混合物膜仍然為部分水合的且薄，如在圖1A和1B中所注意到的。當(dāng)進一步添加200ml0.5。/。甲基纖維素溶液時，發(fā)生了丙酮和乙醇從納米膠嚢中完全提取出來且更加剛性的和Eudragit膜形成，如可從在圖2A和2B中的數(shù)據(jù)推導(dǎo)出來的。由于曱基纖維素的存在和在分散體中納米膠嚢的高濃度，形成大的納米膠嚢聚集體。在d、油滴周圍的剛性聚合物膜是不同的且與在圖1A和1B中顯現(xiàn)的納米膠嚢中的薄膜相比可^皮輕易地識別。當(dāng)30號制劑用75ml不含甲基纖維素溶液(即100:75，v/v)的水稀釋時，這進一步被證實。更加顯著的Eudragit混合物的分界面沉積發(fā)生且形成厚度定性地估計為30nm的剛性Eudragit膜，如在圖3A和3B中所示。確實，此特殊混合物的溶解性比在制劑29中的當(dāng)加入至少45ml水時稍后分離的Eudragit混合物的溶解性小，而對于制劑30，替代的35ml。非油相或小油滴使用此方法檢測，如在表2中所描述的。所選納米膠嚢分散體29號制劑的顆粒尺寸分布展現(xiàn)窄的范圍，具有平均直徑為479nm(圖4)。SEM分析證實先前的TEM結(jié)果并顯示在向制劑29中加入75ml水后形成單獨的納米膠嚢(圖5A和5B)。然而，在加入甲基纖維素溶液和噴霧干燥之后，球狀微球(定性地尺寸范圍為從2pm到5pm)形成的小聚集體(定性地尺寸范圍為/人10pm到30pm)可^皮檢測到(圖6A和6B)。此外，在噴霧干燥的聚集體在釋i文介質(zhì)pH7.4中浸漬超過3小時后，不可能區(qū)別出任何規(guī)則的結(jié)構(gòu)形態(tài)學(xué)(圖7A和7B)。實際上，在29號制劑中的Eudragit形成膜混合物包括EudragitL100-55:EudragitRS75:25。EudragitL100-55在大于pH5.5時是易于溶解的而EudragitRS無論何種pH都是不可溶的。這樣，最初甲基纖維素包衣和第二納米膠嚢Eudragit混合物包衣被快速的溶解且沒有確定的結(jié)構(gòu)可被鑒別。然而，可從SEM分析(圖8A-8D)觀察到在干燥噴霧之后，30號制劑展現(xiàn)較少的聚集體和更多的球狀結(jié)構(gòu)，作為真空的結(jié)果，其是坍陷的。此外，在圖9A和9B中，在釋放介質(zhì)中浸漬超過3小時后，在微球的空核心中可檢測到許多納米膠囊，證明了包括EudragitRS:EudragitL100-55為75:25的Eudragit混合物納米膠嚢包衣更能夠抵抗水釋放介質(zhì)和能夠控制膠嚢化的藥物隨時間釋放的發(fā)現(xiàn)。體外釋放動力學(xué)評估體外釋放數(shù)據(jù)可暗示劑從微球中的釋放可被在小油滴周圍應(yīng)用的聚合物包衣的變化所控制。如從圖IO中可被注意到的，DXPL的釋放特性為在具有EudragitL:RS,75:25時比具有RS丄，75:25時要快，說明EudragitL可更容易地滲透且比EudragitRS得到快的釋放速度。圖11顯示沒有Eudragit包衣的DXPL亞微米乳液在與29號制劑相同的實驗條件下被噴霧千燥的結(jié)果。兩種類型的微球得到相似的釋放特性。不同于溶解的DXPL和裝載有DXPL的納米膠囊的釋放，溶解的DXPL和裝載有DXPL的小油滴^皮釋放，反映出對于兩個實驗的DXPL總釋放量相同。這些發(fā)現(xiàn)暗示釋放動力學(xué)實驗不能區(qū)別溶解的DXPL和摻入小油滴或納米膠嚢中的DXPL。在不同實驗條件下被溶解于納米膠嚢油核心中的他克莫司的穩(wěn)定性評價可從表7中所描述的數(shù)據(jù)中推出，他克莫司當(dāng)溶解在油制劑中在37匸下儲存一個月后，即使在氮氣氛下及在各種抗氧化劑存在時也是不穩(wěn)定的，除非用BHT和五倍子酸丙酯配制且與氮氣氛相結(jié)合。儲存在室溫下的微膠嚢化他克莫司納米膠嚢的穩(wěn)定性評估在室溫下，微膠嚢化的他克莫司納米膠囊的最終千燥制劑被儲存在完好封閉的塑料容器中。在3和4個月后，檢驗29號制劑且發(fā)現(xiàn)用HPLC測定的他克莫司含量分別為各自含量的初始的99%和95%。在室溫下，最終產(chǎn)物的穩(wěn)定性在繼續(xù)的監(jiān)視中。最終選擇的最終制劑在不久的將來將進行加速穩(wěn)定性實驗。表7:當(dāng)儲存在371C時，作為制劑參數(shù)的函數(shù)的在油核心中的他克莫司含量的評估<table>tableseeoriginaldocumentpage43</column></row><table>在大鼠中的吸收研究如先前提到的，在口服施用之后，他克莫司與顯著可變的生物利用度和藥代動力學(xué)相關(guān)聯(lián)。這表示著他克莫司本質(zhì)的空腸通透性相當(dāng)高。也檢查了他克莫司的區(qū)域依賴的通透性，且研究揭露與在空腸中相比在回腸和結(jié)腸中他克莫司通透性顯著地降低。在那種情況下，很多他克莫司的可變性似乎由其他因素導(dǎo)致，如P-糖蛋白(P-gp)夕卜排機制或CYP3A代謝作用，其可造成觀察到的區(qū)域依賴性(5)。確實，經(jīng)報導(dǎo)CYP3A和P-gp在腸吸收和口服生物利用度上的合并作用是他克莫司口服藥物傳輸?shù)闹饕系K[KagayamaA，等人，OralabsorbtionofFK506inrats(在大鼠中FK506的口服吸收).PharmRes.10:1446-50(1993)]。已嘗試通過o/w油酸乳液將藥物選擇性地運輸?shù)搅馨拖到y(tǒng)中以改進他克莫司吸收(15)。作者將他克莫司乳液以2mg/kg和1mg/kg的劑量口服地施用給大鼠且將它與商業(yè)產(chǎn)品比較。觀察到將劑量從2mg/kg減少到1mg/kg顯著地降低了在大鼠血液中的Qnax,對于商業(yè)和乳液劑型分別地為從36.3土18.3到8.5±4.8和從32.1士9.6到6.0士2.2ng/ml。當(dāng)以劑量1、3.2和10mg/kg將分散體劑型的他克莫司口服施用給喂養(yǎng)的大鼠時，相似的結(jié)果被報導(dǎo)，其產(chǎn)生的Qnax值為8.8士4.9、11.6±5.3和40.2士19.4ng/ml。現(xiàn)在的結(jié)果顯示以劑量0.7mg/kg口服施用商業(yè)產(chǎn)品(CAPS)展現(xiàn)了1.U0.8ng/ml的Cmax，極大地小于報導(dǎo)值，清楚地顯示了施用劑量對Cmax值的顯著影響。此外，乳液展現(xiàn)了2.2±0.46ng/ml的Cn^值而29號制劑展現(xiàn)了11.1土2.7ng/ml的Qnax值，如在表8中所描述的。另外，制劑29展現(xiàn)的吸收特性顯著的好于乳液和商業(yè)產(chǎn)品產(chǎn)生的特性(圖12)。然而，與制劑29相比，制劑30不展現(xiàn)加強的釋放特性(圖13)。另外，在口服吸收對大鼠給藥的各種制劑中0.7mg/kg(平均值土SD，n=3-6，？〉0.05)的他克莫司之后，檢測他克莫司血液水平(圖14)。使用口灌法，以0.7mg/kg(0.2mg/鼠)他克莫司執(zhí)行大鼠吸收研究，所述他克莫司被配制為Progra產(chǎn)膠嚢商業(yè)產(chǎn)品(Comm.Prod.)的懸浮液、乳液(Emuls.)、包埋在不含Eudragit但含有曱基纖維素的微球中的乳液(干燥Emuls.)、包埋在不含曱基纖維素但含有Eudragit納米膠嚢和作為噴霧干燥劑的乳糖的微球中的乳液(不含Methocel)。從制劑30的較差的表現(xiàn)來看，決定評估以制劑29獲得的裝載有微膠嚢化的他克莫司的納米膠囊的生產(chǎn)工藝的重現(xiàn)性?？蓮脑趫D15中提出的數(shù)據(jù)推導(dǎo)出與制劑29相同的制劑31展現(xiàn)的吸收特性與制劑29產(chǎn)生的特性接近。考慮他克莫司吸收的高可變性，這些發(fā)現(xiàn)暗示工藝參數(shù)為良好控制的和重J見的。此外，從圖16中提出的數(shù)據(jù)可推導(dǎo)出，明顯地29號制劑可對他克莫司的肝旁路有貢獻且促進他克莫司的一些淋巴吸收，導(dǎo)致與商業(yè)產(chǎn)品相比，更加加強的生物利用度。為了計算口服制劑的絕對生物利用度，執(zhí)行靜脈內(nèi)藥代動力學(xué)研究且數(shù)據(jù)在圖17中提出?？诜苿┑慕^對生物利用度小于12%,證實了已經(jīng)在他克莫司生物利用度上報導(dǎo)的數(shù)據(jù)(表8)。然而，用29號制劑達到的結(jié)果顯示生物利用度比表8中所顯示的商業(yè)膠嚢制劑提高了490%,在表8中對于所有制劑AUQ)-24值和Qnax值被描述。也應(yīng)指出，與商業(yè)產(chǎn)品相比乳液制劑將相對生物利用度提高了210%但僅展現(xiàn)了制劑29的生物利用度的42.8%,如從在表8中的各自的AUCo—24值所反映出來的。他克莫司被實際的微膠嚢化的納米膠嚢(本發(fā)明微球)改良的口服吸收可^^腸淋巴吸收所介導(dǎo)。微粒和納米顆粒被胃腸上皮的吸收現(xiàn)在是被廣泛接受的現(xiàn)象且已促進研究者注意于此傳輸途徑，對于易分解的分子使用微粒載體(29)。表8:藥代動力學(xué)參數(shù)及生物利用度計算值<table>tableseeoriginaldocumentpage45</column></row><table>在表8中提出的結(jié)果顯示納米膠嚢的形成對于傳輸系統(tǒng)的性能是重要的。簡單乳液不能在油核心中保持他克莫司，導(dǎo)致顯著的他克莫司系統(tǒng)代謝前降解，如被制劑32展現(xiàn)的結(jié)果清楚地反映，所述制劑32在成分上與制劑29相同但不含形成納米膠嚢包衣壁的Eudragit混合物。另外，在口灌29號制劑30分鐘之后，從大鼠十二指腸取組織病理學(xué)薄片。用熒光顯微鏡檢查薄片且在組織的各種區(qū)域輕易地檢測到納米月交嚢。這些發(fā)現(xiàn)暗示顆粒也可經(jīng)歷向正常腸上皮細胞的內(nèi)吞作用。另一方面，在派伊爾淋巴集結(jié)區(qū)域發(fā)現(xiàn)明顯的納米顆粒的聚集體(圖18)。顯著的大量納米膠嚢在派伊爾淋巴集結(jié)中的存在因此被暗示為潛在的從P-gp外排脫離和它們被淋巴管吸收的指示，這使得膠嚢內(nèi)含物在系統(tǒng)血液循環(huán)中通過肝首關(guān)效應(yīng)被釋放。另外，取以下不同的顯微照片(photomicrograph)(圖19A-19D):-干燥的微膠嚢化的以EudragitL:RS(75:25)納米膠嚢包衣和曱基纖維素基質(zhì)(matrix)包衣制備的空納米膠嚢(圖19A);隱在以磷酸鹽緩沖液(pH7.4)培養(yǎng)3分鐘后，以EudragitL:RS(75:25)納米膠囊包衣和甲基纖維素基質(zhì)包衣制備的浸漬的微膠嚢化的空納米膠嚢(圖19B);-在以磷酸鹽緩沖液(pH4.8)培養(yǎng)5分鐘后，以EudragitL:RS(75:25)納米膠嚢包衣和甲基纖維素基質(zhì)包衣制備的浸漬的微膠嚢化的空納米膠嚢(圖19C和19D，圖19D是圖19C部分的放大)。顯微照片描述的結(jié)果引起暗示，微球基質(zhì)不僅包括甲基纖維素也包括過量的EudragitRS和L，其不參與納米膠嚢包衣的形成。這樣，在pH小于5時，觀察不到基質(zhì)的快速凝膠化和溶脹，而在pH7.4時，EudragitL快速溶解且對基質(zhì)的快速凝膠化和溶脹及納米膠囊從微球中的釋放有貢獻。不被理論所束綽，因此假設(shè)微膠嚢化的納米膠嚢的活性劑改良的口服吸收被腸內(nèi)淋巴顆粒吸收所介導(dǎo)。這也是從獲得的結(jié)果得到的證據(jù)，當(dāng)在成分上與29號制劑相同，但不含Eudragit聚合物微膠囊包衣時的制劑不展現(xiàn)增加的生物利用度，如在圖17(Emul.和干燥的Emuls.)和上文表8中所注意到的。此外不被理論所束縛，暗示根據(jù)本發(fā)明的傳輸系統(tǒng)不僅可以促進淋巴吸收，也可以擺脫代謝前降解和P-gp外排。普通的乳液，雖然與商業(yè)產(chǎn)品相比有改良的生物利用度，但程度與制劑29不同，可能因為他克莫司在GI(胃腸)液中的分配在其被腸上皮細胞攝取之前。這樣，本發(fā)明傳輸系統(tǒng)可優(yōu)選地應(yīng)用于傳輸各種活性劑，其作為或被認(rèn)為是P-gp外排基質(zhì)。此夕卜，上文提出的發(fā)現(xiàn)顯示類似于29號制劑但不含Eudragit聚合物納米膠嚢包衣的干燥乳液不能在GI液中將他克莫司保持在油核心中，導(dǎo)致比商業(yè)產(chǎn)品更低的生物利用度。更進一步，不含Methocel的Eudragit納米膠囊未得到顯著的血液水平，說明現(xiàn)行的納米膠嚢包衣不能夠在現(xiàn)在的實驗條件下保持他克莫司，且不能致力于阻止他克莫司外排。這些發(fā)現(xiàn)已被4個小型豬交叉動物實驗所證實。在圖19和在下文的表9中提出的結(jié)果顯示本發(fā)明傳輸系統(tǒng)，如通過制劑29所示例的，得出被肝旁路他克莫司貢獻的高出2.4倍的藥物水平，導(dǎo)致與商業(yè)產(chǎn)品(Prograf⑧)相比加強的生物利用度。表9:在小型豬中，藥代動力學(xué)參數(shù)和生物利用度計算值(平均值士SD，n=4)<table>tableseeoriginaldocumentpage47</column></row><table>從在小型豬中的吸收研究中得出的結(jié)果中明顯可知通過本發(fā)明藥物傳輸系統(tǒng)達到的相對生物利用度比測試制劑的大2.4倍。在本發(fā)明中，從新型藥物傳輸系統(tǒng)如何顯著地增加藥物的口服吸收的可能機理解釋所提出的整體結(jié)果來看，可因此涉及，不被理論所束縛(a)淋巴吸收-被派伊爾淋巴集結(jié)的M細胞吸收的顆粒(顆粒尺寸<5jim)及(c)適當(dāng)?shù)纳镎澈系牧u丙基曱基纖維素包衣引起了微球和納米膠嚢向腸上皮加強的粘合，全面導(dǎo)致顯著的向腸細胞吸收的改良，由于從耐多藥的泵蛋白脫離的能力。權(quán)利要求1.一種微球，其包括容納在凝膠形成聚合物中的多個納米膠囊，所述多個納米膠囊包括攜帶非親水性活性劑的油核心及聚合物包衣外殼。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微球，其中所述聚合物包衣包括至少一種聚合物或聚合物的組合，所述聚合物不溶于水或在pH大于約5.0時可溶。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的微球，其中所述聚合物包衣包括至少兩種聚合物的組合。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的微球，其中所述至少兩種聚合物的組合包括至少一種在pH大于約5.0時可溶的聚合物及至少一種不溶于水的聚合物。5.根據(jù)權(quán)利要求2到4中任一項所述的微球，其中所述在pH大于約5.0時可溶的聚合物選自鄰苯二曱酸羥丙基曱基纖維素酯(HPMPC)、乙酸鄰苯二曱酸纖維素酯、鄰苯二曱酸羧甲基纖維素酯、蟲膠、EudragitL100-55、玉米蛋白。6.根據(jù)權(quán)利要求2到5中任一項所述的微球，其中所述不溶于水的聚合物選自乙基纖維素、EudragitRS、EudragitRL、聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸(PGA)及PLA和PGA的共聚物(PLAGA)、乙基纖維素。7.根據(jù)權(quán)利要求3到6中任一項所述的微球，其中所述聚合物的組合包括至少兩種聚合物，不溶于水的第一聚合物和在pH大于約5.0時可溶的第二聚合物，所述不溶于水的聚合物與在pH大于約5.0時可溶的聚合物之間的比率為在5:95和70:30之間的范圍內(nèi)。8.根據(jù)權(quán)利要求3到7中任一項所述的微球，其中所述至少兩種聚合物的組合包括選自EudragitRL或EudragitRS的第一聚合物與選自EudragitL100-55和鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素酯(HPMPC)的第二聚合物的混合物。9.根據(jù)權(quán)利要求1到8中任一項所述的微球，其中所述納米膠嚢具有在約100nm和900nm之間的平均直徑。10.根據(jù)權(quán)利要求1到9中任一項所述的微球，其中所述凝膠形成聚合物的特征在于其為以下中的至少一種可溶于水的聚合物；或在水存在下溶脹的聚合物。11.根據(jù)權(quán)利要求1到10中任一項所述的微球，其中所述凝膠形成聚合物是改性的纖維素。12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的微球，其中所述改性的纖維素選自羥乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧曱基纖維素鈉、鄰苯二甲酸幾丙基甲基纖維素酯或乙酸琥珀酸幾丙基曱基纖維素酯、乙酸鄰苯二甲酸纖維素酯、鄰苯二甲酸曱基纖維素酯及微晶纖維素。13.根據(jù)權(quán)利要求10所述的微球，其中所述可溶于水的聚合物選自羥丙基甲基纖維素、低分子量的甲基纖維素、分子量在5000以上的聚乙二醇。14.根據(jù)權(quán)利要求1到13中任一項所述的微球，其中所述微球具有在約5jxm到約500[xm之間的平均直徑。15.根據(jù)權(quán)利要求1到14中任一項所述的微球，其中所述活性劑是P-gp外排泵的基質(zhì)。16.根據(jù)權(quán)利要求1到15中任一項所述的微球，其中所述活性劑是親脂性活性劑或兩親活性劑。17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的微球，其中所述親脂性活性劑是藥物，其選自他克莫司、西羅莫司、鹵泛群、利托那韋、洛匹那韋、安普那韋、沙奎那韋、骨化三醇、屈大麻酚、異維A酸、維A酸、利培酮堿、丙戊酸。18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的微球，其中所述親脂性活性劑是前藥，其選自地塞米松棕櫚酸酯、紫杉醇棕櫚酸酯、多西紫杉醇棕櫚酸酯。19.一種制備微球的方法，所述微球包括容納在凝膠形成聚合物中的多個納米膠囊，所述多個納米膠囊包括攜帶非親水性活性劑的油核心和聚合物包衣外殼，所述方法包括(a)提供有機相，其包括油、與水混溶的有機溶劑、溶解在所述溶劑中的非親水性活性劑和用于包衣所述油核心的聚合物或聚合物組合；(b)向所述有機相中緩緩加入水以獲得油包水(w/o)乳液；(c)向所述w/o乳液中繼續(xù)加入水以引發(fā)所述乳液的相轉(zhuǎn)化，從而獲得水包油(o/w)乳液；(d)將所述o/w乳液與凝膠形成聚合物或凝膠形成聚合物的組合混合；(e)除去所迷有機溶劑和水以獲得所述微球。20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中所述有機溶劑選自乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、異丙醇。21.根據(jù)權(quán)利要求19或20所述的方法，其中所述聚合物包衣包括至少一種聚合物或聚合物的組合，所述聚合物不溶于水或在pH大于約5.0時可溶。22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的方法，其中所述聚合物包衣包括至少兩種聚合物的組合。23.根據(jù)權(quán)利要求22所述的方法，其中所述至少兩種聚合物的組合包括至少一種在pH大于約5.0時可溶的聚合物與至少一種不溶于水的聚合物。24.根據(jù)權(quán)利要求21到23中任一項所述的方法，其中所述在pH大于約5.0時可溶的聚合物選自鄰苯二曱酸羥丙基甲基纖維素酯(HP55)、乙酸鄰苯二甲酸纖維素酯、鄰苯二甲酸羧甲基纖維素酯、蟲膠、EudragitL100-55、玉米蛋白。25.根據(jù)權(quán)利要求21到24中任一項所述的方法，其中所述不溶于水的聚合物選自乙基纖維素、EudragitRS、EudragitRL、聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸(PGA)及PLA和PGA的共聚物(PLAGA)、乙基纖維素。26.根據(jù)權(quán)利要求19到25中任一項所述的方法，其中所述聚合物的組合包括兩種聚合物，不溶于水的第一聚合物和在pH大于約5.0時可溶的第二聚合物，所述不溶于水的聚合物與在pH大于約5.0時可溶的聚合物之間的比率在5:95和70:30之間的范圍內(nèi)。27.根據(jù)權(quán)利要求26所述的方法，其中所述聚合物的組合包括選自EudragitRL或EudragitRS的第一聚合物與選自EudragitL]00-55和鄰苯二甲酸羥丙基曱基纖維素酯(HPMPC)的第二聚合物的混合物。28.根據(jù)權(quán)利要求27所述的方法，其中所述聚合物的組合包括比率為約25:75的EudragitRS和EudragitL100-55。29.根據(jù)權(quán)利要求19到28中任一項所述的方法，其中所述有機相包括親脂性賦形劑。30.根據(jù)權(quán)利要求19到29中任一項所述的方法，其中所述有機相包括親脂性表面活性劑。31.根據(jù)權(quán)利要求19到31中任一項所述的微球，其中所述凝膠形成聚合物的特征在于其為以下中的至少一種可溶于水的聚合物；或在水存在下溶脹的聚合物。32.根據(jù)權(quán)利要求19到25中任一項所述的方法，其中所述凝膠形成聚合物是改性的纖維素。33.根據(jù)權(quán)利要求26所迷的方法，其中所述改性的纖維素選自羥乙基纖維素、輕丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和微晶纖維素。34.根據(jù)權(quán)利要求19到27中任一項所述的方法，其中所述活性劑是P-gp外排泵的基質(zhì)。35.根據(jù)權(quán)利要求19到28中任一項所述的方法，其中所述活性劑是親脂性活性劑或兩親活性劑。36.根據(jù)權(quán)利要求29所述的方法，其中所述親脂性活性劑是藥物，其選自他克莫司、西羅莫司、鹵泛群、普羅布可、利托那韋、洛匹那韋、安普那韋、沙奎那韋、骨化三醇、屈大麻酚、異維A酸、維A酸、利培酮堿、丙戊酸。37.根據(jù)權(quán)利要求29所述的方法，其中所述親脂性活性劑是前藥，其選自地塞米杠、棕櫚酸酯、紫杉醇棕櫚酸酯、多西紫杉醇棕櫚酸酯。38.根據(jù)權(quán)利要求19到31中任一項所述的方法，其中除去所述有機溶劑和水是可通過噴霧干燥獲得的。39.—種藥物組合物，其包括根據(jù)權(quán)利要求1到18中任一項所述的微球，所述微球包括容納在凝膠形成聚合物中的多個納米膠囊且包括攜帶非親水性活性劑的油核心和聚合物包衣外殼。40.—種藥物組合物，其包括可通過權(quán)利要求19到34中任一項所述的方法獲得的微球，所述微球包括容納在凝膠形成聚合物中的多個納米膠嚢且包括攜帶非親水性活性劑的油核心和聚合物包衣外殼。41.根據(jù)權(quán)利要求41所述的藥物組合物，其是口服施用的劑型。42.根據(jù)權(quán)利要求34或35所述的藥物組合物，其為干燥的藥物組合物。43.根據(jù)權(quán)利要求34到36中任一項所述的藥物組合物，其中所述微球包括可溶于水的凝膠形成聚合物及所述微球被包裝在腸包衣的載體中。44.根據(jù)權(quán)利要求37所迷的藥物組合物，其中所述腸包衣的載體是腸包衣的膠嚢。45.根據(jù)權(quán)利要求34到38中任一項所述的藥物組合物，其用于所述活性劑從所述微球中控制釋放。46.—種提高親脂性劑在人類受治療者體內(nèi)的生物利用度的方法，所述方法包括向所述受治療者施用微球，所述微球包括容納在凝膠形成聚合物中的多個納米膠嚢，所述納米膠嚢包括攜帶親脂性劑的油核心和聚合物包衣外殼。47.—種針對病理疾患治療需要有效血液水平的活性劑的所述治療的受治療者的方法，所述方法包括向所述受治療者施用微球，所述微球包括容納在凝膠形成聚合物中的多個納米膠嚢，所述納米膠嚢包括攜帶親脂性劑的油核心和聚合物包衣外殼。48.根據(jù)權(quán)利要求40或41所述的方法，所述方法包括向所述受治療者口服提供所述微球，其中所述微球如在根據(jù)權(quán)利要求1到18中任一項所定義或所述微球可通過權(quán)利要求20到32中任一項所述的方法獲得。全文摘要本發(fā)明提供微球，所述微球包括容納在凝膠形成聚合物中的多個納米膠囊，所述多個納米膠囊包括攜帶非親水性活性劑的油核心和聚合物包衣外殼。本發(fā)明還提供制備本發(fā)明微球的方法、包括該微球的藥物組合物及微球的使用方法，尤其是在治療、化妝品和診斷中的應(yīng)用。文檔編號A61K9/51GK101410098SQ200780010197公開日2009年4月15日申請日期2007年1月23日優(yōu)先權(quán)日2006年1月23日發(fā)明者塔赫爾·納賽爾,希蒙·貝妮塔,阿羅娜·羅姆申請人:耶路撒冷希伯來大學(xué)伊森姆研究發(fā)展公司