專利名稱：：作為通道活化蛋白酶抑制劑的化合物和組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明通常涉及通道活化蛋白酶(CAP)抑制劑。
背景技術(shù)：
：前列腺蛋白酶是一種存在于多種哺乳動物組織中的胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶。它是在細胞的胞外膜表達的膜錨定蛋白酶，但是也可以分泌到體液中，所述的體液例如精液、尿液和氣道表面液體。前列腺蛋白酶(PRSS8)與蛋白酶例如蛋白裂解酶(matriptase)、CAP2、CAP3、胰蛋白酶、PRSS22、TMPRSS11、組織蛋白酶A和嗜中性細胞彈性蛋白酶一起可以刺激氨氯吡"秦脒敏感的上皮鈉通道(ENaC)的活性。抑制這些酶可以誘導上皮離子轉(zhuǎn)運的改變，并且因而誘導穿過上皮細胞膜的液體內(nèi)穩(wěn)態(tài)的改變。例如，腎中的CAP抑制被認為促進利尿，同時氣道中的CAP抑制促進肺中粘液和痰的清除。因此，腎中的CAP抑制可以治療性地用于治療高血壓。氣道中的CAP抑制阻止了呼吸分泌物的停滯，否則會4吏患者易受次級細菌感染。發(fā)明公開本發(fā)明提供了化合物、藥物組合物以及應用該化合物調(diào)節(jié)通道活化蛋白酶(CAP)的方法。例如，本發(fā)明的化合物和組合物可以用于調(diào)節(jié)前列腺蛋白酶、PRSS22、TMPRSS11(例如TMPRSS11B、TMPRSS11E)、TMPRSS2、TMPRSS3、TMPRSS4(MTSP誦2)、蛋白裂解酶(MTSP-1)、CAP2、CAP3、胰蛋白酶、組織蛋白酶A和嗜中性細胞彈性蛋白酶。一方面，本發(fā)明提供了式(l)化合物及其可藥用鹽、7jC合物、溶劑化物和立體異構(gòu)體R3—(CR4R5):其中J是5-12元單環(huán)或稠合的碳環(huán)、芳基、雜芳基或包含N、0和/或S的雜環(huán)；R1是-(CR2)rNR2、-(CR2VNRC(=NR)-NR2、-(CR2)rC(=NR)-NR2或5-7元含氮非芳族雜環(huán)；W-W是在環(huán)A任何位置上的取代基；W是或-0(CR2)k-、-S(CR2)k-、-S(0)(CR2)k-、-S02(CR2)k-或-OC(0)(CR2)k-;R2是d_6烷基、C2-6鏈烯基、C2—6炔基、R6、-CR9=CR9-R6或或者W-R2—起形成C，-6烷基、5-7元芳基或-OC(0)NR7R8;R3是NR7R8或R6;R4和R5獨立地是H、Cw烷基、OH或C，-6烷氧基；R7和R8獨立地是H、d-6烷基、C2—6鏈烯基、C2-6炔基或-(CR2)，-R6;或者R7和R8與N—起可以形成任選取代的5-7元單環(huán)或稠合的雜環(huán)；r9是H或Cl6坑基；R'。是卣素、C,—6烷基、Cw烷氧基、OR"或畫(CR2)廣R";R6、R"和X獨立地是任選取代的5-7元碳環(huán)、雜環(huán)、芳基或雜芳基；或者R"是H或cl6烷基；每個R是H或d-6烷基、C2—6鏈烯基或C2-6炔基，其中碳可以任選被NR、O或S取代或代替；，其中環(huán)E是任選取代的5-7元單環(huán)或稠合的碳環(huán)或雜環(huán);i是0畫1;k和l獨立地是0-6;m和n獨立地是1-6;并且p是0-3。在以上式(l)中，R1是國(CH2)廣NH2、(CH2),-NHC(^NH)-NH2或-(CH2),-C(-NH)-NH2NH2，其中每個1是0-1;或者R1是哌咬基。在特別的實例中，R1是-(CH2)「NH2、-(CH2)廣NHC^NH)畫NH2或(CH2)廣C(:NH)-NH2NH2。在以上式(l)中，W是-0(CR2)k-、-S(CR2)k-、-S(0)(CR2)k-、-S02(CR2)k-或-OC(0)(CR2)k-;并且k是l。在特別的實例中，W是-0(CR2)k-。在某些實施方案中，W是任選取代的苯基、C5—7環(huán)烷基、噻吩基、呋喃基、哌啶基、亞甲基環(huán)己基、飛^^、》a》。在特別的實例中，R2是苯基或Cs-7環(huán)烷基。在其它實施方案中，W是任選取代的苯基、吡咬基、噻唑基、哌#或nr71^其中R和r8都是H,或者r"和rs與n—起形成任選取代的哌淀基。在某些實例中，R、R4、R5、r7和R8各自是H。在其它實施方案中，W是任選取代的苯基、C^環(huán)烷基、吡咬基、噻唑基、哌啶基、環(huán)己醇、咪唑基、噻吩基、呋喃基、飛—<—CH=^NH■/。在特別的實例中，W是任選取代的苯基、Cw環(huán)烷基、吡咬基、噻唑基或哌咬基。在其它實施方案中，X是環(huán)己基、苯基或哌"定基，其中各自可以任選被d—6烷基、Cw烷氧基、卣素或它們的組合取代。在某些實例中，X是環(huán)己基或苯基。在以上式(l)中，-J-(R,p—起可以是Z是O或S;Z1、Z2、Z3或Z4獨立地是N、CH或當與R"連接時是C;Z5、Z6或Z"蟲立地是N、O、S、CH或當與R"連接時是C;R"是C^烷基或-(CR2)rR";R"是苯基或C5,環(huán)烷基；并且p是0-l。在某些實例中，J是苯并噻哇基、苯并鳴唑基、噻唑基或喁二唑基。在一個實施方案中，本發(fā)明提供式(2A)或(2B)化合物R2w(Rl2)q—丫-(CR4R5),W(R12)—丫—(CR4R5)m"^n其中Z是O或S;R1是NH2、-NHC(=NH)NH2或-C^NH)-NH2;W是-0(CH2)k-或-S(0)(CH2)k-;R"是任選取代的苯基，或者W-W—起形成d—6烷基或任選取代的苯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>基；R、R4和R5獨立地是H;Y是5-7元芳基、雜芳基或包含N、O或S的雜環(huán)；R'2是鹵素、C!-6烷基或-L-(CH2)rR";L是鍵、O、S02、NHCO、NHSOjS02NH;R"是任選閨代的Ci—6烷基，或任選取代的Cw環(huán)烷基，或5-7元芳基、雜芳基或雜環(huán)；i是0;k是l;l是0-l;m和n獨立地是1-4;并且q是0-3。在以上式(2A)或(2B)中，Y可以是苯基、吡究基、噻喳基或哌咬基。在某些實例中，R"是-L-(CH2)廣R";并且R"是任選鹵代的C"烷基、C3_7環(huán)烷基、嗎啉基、苯基或哌咬基。另一方面，本發(fā)明提供了藥物組合物，該藥物組合物包含具有式(l)、(2A)或(2B)的化合物和可藥用賦形劑。本發(fā)明還提供了調(diào)節(jié)通道活化蛋白酶的方法，該方法包括給需要的系統(tǒng)或個體施用治療有效量的具有式(l)、(2A)或(2B)的化合物或其可藥用鹽或藥物組合物，從而調(diào)節(jié)所述通道活化蛋白酶。另一方面，本發(fā)明提供了改善由通道活化蛋白酶介導的病癥的方法，該方法包括給需要該治療的系統(tǒng)或個體施用有效量的具有式(l)、(2A)或(2B)的化合物或其可藥用鹽或藥物組合物，并且任選與第二種治療劑組合，從而治療所述病癥?？梢耘c本發(fā)明化合物一起應用的第二種治療劑的實例包括但不限于抗炎藥、支氣管擴張藥、抗組胺藥、止咳藥、抗生素或DNA酶?？梢詰帽景l(fā)明化合物調(diào)節(jié)的通道活化蛋白酶的實例包括但不限于前列腺蛋白酶、PRSS22、TMPRSS11(例如TMPRSS11B、TMPRSS11E)、TMPRSS2、TMPRSS3、TMPRSS4(MTSP-2)、蛋白裂解酶(MTSP-1)、CAP2、CAP3、胰蛋白酶、組織蛋白酶A或嗜中性細胞彈性蛋白酶。在特別的實例中，本發(fā)明提供了調(diào)節(jié)前列腺蛋白酶的方法，或治療前列腺蛋白酶介導的病癥的方法。在以上應用本發(fā)明化合物的方法中，具有式(l)、(2A)或(2B)的化合物可以施用于包含細胞或組織的系統(tǒng)。例如，具有式(l)、(2A)或(2B)的化合物可以與支氣管上皮細胞接觸，其可以是人細胞。在其它實施方案中，具有式(l)、(2A)或(2B)的化合物可以施用于人或動物個體。在一個實施方案中，本發(fā)明提供了改善與液體經(jīng)離子轉(zhuǎn)運上皮的移動或呼吸組織中粘液和痰的聚集或它們的組合有關(guān)的病癥的方法。例如，病癥可以是囊性纖維化、原發(fā)性睫運動障礙、肺癌、慢性支氣管炎、慢性阻塞性肺疾病、哮喘或呼吸道感染。另外，本發(fā)明提供了式(l)、(2A)或(2B)化合物或其可藥用鹽或藥物組合物以及任選與第二種治療劑組合在調(diào)節(jié)通道活化蛋白酶(例如在抑制前列腺蛋白酶)中的用途。本發(fā)明還提供了具有式(l)、(2A)或(2B)的化合物或其可藥用鹽或藥物組合物以及任選與笫二種治療劑組合在制備用于治療通道活化蛋白酶介導的病癥(例如前列腺蛋白酶介導的病癥)的藥物中的用途。定義"烷基"指的是基團或作為其它基團的結(jié)構(gòu)元素，所述的其它基團例如卣素—取代的-烷基和烷氧基，并且可以是直鏈的或支鏈的。本文所用的任選取代的烷基、鏈烯基或鏈烯基可以是任選卣代的(例如CF3)，或者可以具有一個或多個凈支雜原子(例如NR、O或S)取代或代替的碳(例如-OCH2CH20-、烷基硫醇、硫代烷氧基、烷基胺等)。"芳基，，指的是包含碳原子的單環(huán)或稠合的二環(huán)芳環(huán)。例如芳基可以是苯基或萘基。"亞芳基，，指的是衍生自芳基的二價基團。本文所用的"雜芳基"如以上芳基定義的，其中一個或多個環(huán)成員是雜原子。雜芳基的實例包括但不限于吡梵基、吲咪基、吲唑基、喹喔啉基、喹啉基、苯并呋喃基、苯并吡喃基、苯并噻喃基、苯并[1,3]間二氧雜環(huán)戊烯、咪唑基、苯并-咪唑基、嘧咬基、呋喃基、噴、唑基、異巧惡唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、瘞吩基等。本文所用的"碳環(huán)"指的是包含碳原子的飽和的或部分不飽和的單環(huán)、稠合的二環(huán)或橋連的多環(huán)，其可以任選被取代，例如被=0取代。碳環(huán)的實例包括但不限于環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)丙烯、環(huán)己酮等。本文所用的"雜環(huán)"如以上碳環(huán)定義的，其中一個或多個環(huán)碳是雜原子。例如，雜環(huán)可以包含N、O、S、-N=、-S-、-S(O)、-S(0)2-或-NR畫,其中R可以是氯、Cw烷基或保護基。雜環(huán)的實例包括但不限于嗎啉代、吡咯烷基、吡咯烷基-2-酮、哌溱基、哌梵基、哌咬基酮、1，4-二氧雜-8-氮雜-螺[4.5]癸-8-基等。本文所用的術(shù)語"共同施用"或"組合施用"等指的是包括給單一患者施用選擇的治療劑，以及旨在包括治療方案，其中藥物不必須通過相同施用途徑或在相同時間施用。本文所用的術(shù)語"藥物組合"指的是通過將活性成分混合或組合而獲得的產(chǎn)物，并且包括活性成分的固定組合和非固定組合。術(shù)語"固定組合"指的是將活性成分例如式(l)、(2A)或(2B)化合物與共同藥物以單一實體或劑型的形式同時施用于患者。術(shù)語"非固定組合"指的是將活性成分例如式(l)、(2A)或(2B)化合物與共同藥物以分開的實體或者同時、共同或者依次施用于患者，沒有特別的時間限制，其中此類施用在患者體內(nèi)提供了治療有效水平的活性成分。后者也應用于雞尾酒療法，例如施用三種或多種活性成分。術(shù)語"治療有效量，，指的是在研究者、獸醫(yī)、醫(yī)生或其它臨床醫(yī)生探索的細胞、組織、器官、系統(tǒng)、動物或人類中引起生物學或醫(yī)學響應的目標化合物的量。術(shù)語目標化合物的"施用"應當被理解為指的是給需要治療的個體提供本發(fā)明化合物及其前藥。本文所用的術(shù)語"治療"指的是減輕或緩和疾病和/或其伴隨癥狀的方法。術(shù)語"前列腺蛋白酶，，也可以稱為人通道活化蛋白酶(hCAP);通道活化蛋白酶-l;和PRSS8、MERPOPSIDS01.159。進行本發(fā)明的方式本發(fā)明提供了化合物、藥物組合物以及應用該化合物調(diào)節(jié)通道活化蛋白酶(CAP)的方法。一方面，本發(fā)明提供了式(l)化合物及其可藥用鹽、水合物、溶劑化物和立體異構(gòu)體<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>(1)其中J是5-12元單環(huán)或稠合的碳環(huán)、芳基、雜芳基或包含N、0和/或S的雜環(huán)；R1是-(CR2)rNR2、(CR;0「NRC—NR)-NR2、(CR2)「C^NR)-NR2或5-7元含氮非芳族雜環(huán)；W-W是在環(huán)A任何位置上的取代基；W是或-0(CR2)k-、-S(CR2)k-、-S(0)(CR2)k_、-S02(CR2)k-或-OC(0)(CR2)k-;R2是d-6烷基、C2-6鏈烯基、C2—6炔基、R6、-CR9=CR9-R6或—oi=c:^),其中環(huán)E是任選取代的5-7元單環(huán)或稠合的碳環(huán)或雜環(huán)；或者W-r2—起形成d-6烷基、5-7元芳基或-OC(0)NR7r8;r3是NR7r8或R6;R4和R5獨立地是H、Cw烷基、OH或Cw烷氧基；R7和R8獨立地是H、d-6烷基、C2—6鏈烯基、C2-6炔基或-(CR2)「R6;或者R和Rs與N—起可以形成任選取代的5-7元單環(huán)或稠合的雜環(huán)；R9是H或d—6烷基；R"是鹵素、d—6烷基、C"烷氧基、OR"或-(CR2),-R";R6、RH和X獨立地是任選取代的5-7元碳環(huán)、雜環(huán)、芳基或雜芳基；或者R"是H或d—6烷基。每個R是H或C^烷基、C2-6鏈烯基或C2-6炔基，其中碳可以任選被NR、O或S取代或代替；i是o-i;k和l獨立地是0-6;m和n獨立地是l-6;并且p是0-3。在一個實施方案中，本發(fā)明提供了式(2A)或(2B)化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>其中Z是O或S;R1是NH2、-NHC(=NH)-NH2或畫C(^NH)-NH2;W是-0(CH2V或-S(0)(CH2)k-;R2是任選取代的苯基，或者W-R2—起形成Cw烷基或任選取代的苯基；R、R4和R5獨立地是H;Y是5-7元芳基、雜芳基或包含N、O或S的雜環(huán)；R"是鹵素、C"烷基或-L-(CH2)「R13，，L是鍵、O、S02、NHCO、NHSOJS02NH;R"是任選卣代的d-6烷基，或任選取代的C3-7環(huán)烷基，或5-7元芳基、雜芳基或雜環(huán)；i是0;k是l;l是0-l;m和n獨立地是l-4;并且q是0-3。在以上每個式中，X、W和R"可以選擇地是任選取代的Cw環(huán)烷基。在以上每個式中，R1可以是NR，R，，、NH-C(NR，R")=NH、NH-C(NHR，)=NR，，、NH-C(R，)=NR，，、S-C(NR,R，，)-NH、S-C(NHR，)-麼，、C(NR，R""NH、C(NHR，)-NR"或CR=NR，，；其中R，R，，是相同的或不同的并且是H、d—6烷基、Cw芳基烷基、芳基或其中R，R"形成包含(CH2)p的環(huán)，其中p是從2至5的整數(shù)。在以上每個式中，每個任選取代的基團可以被以下基團取代囟素、-O、氨基、胍基、脒基、C,—6烷氧基；d—6烷基、C2—6鏈烯基或C2-6炔基，其中每個可以任選被卣代或可以任選具有可以被N、O或S代替或取代的碳；C02R"、0-(CR2)m曙C(0)-R11;(CR^m-R11、(CR2)m-C(0)-R11或-(CR2)m-S02-R";或它們的組合，其中每個R"是H、d-6烷基或任選取代的碳環(huán)、雜環(huán)、芳基或雜芳基。本發(fā)明的化合物和組合物可以用于調(diào)節(jié)通道活化蛋白酶?？梢詰帽镜鞍酌?、PRSS22、TMPRSS11(例如TMPRSS11B、TMPRSS11E)、TMPRSS2、TMPRSS3、TMPRSS4(MTSP-2)、蛋白裂解酶(MTSP-1)、CAP2、CAP3、胰蛋白酶、組織蛋白酶A或嗜中性細胞彈性蛋白酶。本發(fā)明的新化合物還可以抑制刺激離子通道(例如上皮鈉通道)活性的蛋白酶的活性，并且可以用于治療CAP相關(guān)疾病。藥理學和用途本發(fā)明化合物調(diào)節(jié)通道活化蛋白酶的活性，所述的通道活化蛋白酶例如胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶，例如前列腺蛋白酶等，并且因此用于治療其中前列腺蛋白酶引起疾病的病理學和/或癥狀學的疾病或障礙。通過抑制通道活化蛋白酶、例如通過胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶、例如前列腺蛋白酶介導的疾病包括與穿過上皮細胞膜的液體體積調(diào)節(jié)有關(guān)的疾病。例如，氣道表面液體的體積是粘膜纖毛清除和保持肺健康的關(guān)鍵調(diào)節(jié)器。通道活化蛋白酶的抑制將促進氣道上皮粘膜側(cè)的液體聚集，從而促進粘液清除并且防止呼吸組織(包括肺氣道)中粘液和痰的聚集。此類疾病包括呼吸疾病例如嚢性纖維化、原發(fā)性睫運動障礙、慢性支氣管炎、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、哮喘、呼吸道感染(急性和慢性；病毒性和細菌性)和肺癌。通過抑制通道活化蛋白酶介導的疾病還包括除呼吸疾病外的疾病，該疾病與經(jīng)過上皮的異常液體調(diào)節(jié)有關(guān)，可能涉及在它們表面的保護表面液體的異常生理學，例如口干燥癥(口干燥)或干燥性角膜結(jié)膜炎(keratoconjunctivitissire)(干目艮)。另外，腎中ENaC的CAP調(diào)節(jié)可以用于促進利尿并且因而誘導低血壓作用。慢性阻塞性肺疾病包括慢性支氣管炎或與"M目關(guān)的呼吸困難、肺氣腫以及其它藥物治療(特別是其它吸入藥物治療)后的氣道高反應性惡化。本發(fā)明還適用于治療任何類型或起源的支氣管炎包括例如急性、花生仁吸入性、卡他性、格魯布性、慢性或結(jié)核性支氣管炎。本發(fā)明化合物可以用于治療哮喘，包括但不限于內(nèi)源性(非過敏性)哮喘和外源性(過敏性)哮喘、輕度哮喘、中度哮喘、重度哮喘、支氣管哞喘、運動誘導的哮喘、職業(yè)性孝喘和細菌感染后誘導的哮喘。津喘的治療還應當理解為包括對例如小于4或5歲的個體的治療，這些患者出現(xiàn)喘息癥狀并且被確診或可能被診斷為"喘鳴嬰兒"，這是醫(yī)學界重點關(guān)注的一類患者群并且現(xiàn)在通常被確診為初始或早期哮喘或"喘鳴嬰兒綜合征"。用于治療由抑制通道活化蛋白酶介導的疾病的通道活化蛋白酶抑制劑(例如前列腺蛋白酶抑制劑)的適合性可以根據(jù)下文描述的試驗和本領(lǐng)域已知的方法通過確定通道活化蛋白酶抑制劑的抑制作用來試驗。與前述一致，本發(fā)明進一步提供了在需要該治療的個體中預防或治療上述任何疾病或障礙的方法，該方法包括給所述個體施用治療有效量的式(1)、(2A)或(2B)化合物或其可藥用鹽。對于以上任何用途，所需劑量將取決于施用方式、待治療的特別病癥和預期作用而不同。施用和藥物組合物通常，本發(fā)明化合物以治療有效量通過本領(lǐng)域已知的任何常規(guī)的和可接受的方式單獨施用或與一種或多種治療劑組合施用。本發(fā)明的通道活化蛋白酶抑制劑還用作共同治療劑，用于與其它藥物組合，所述的其它藥物例如抗炎藥、支氣管擴張藥、抗組胺藥或止咳藥，特別用于治療嚢性纖維化或者阻塞性或炎性氣道疾病(例如上文提及的那些)，例如作為該藥物治療活性的增效劑或者作為減少該藥物所需劑量或潛在副作用的方法。通道活化蛋白酶抑制劑可以在固定的藥物組合物中與其它藥物混合或者它可以在其它藥物之前、同時或之后單獨施用。因此，本發(fā)明可以包括通道活化蛋白酶抑制劑與抗炎藥、支氣管擴張藥、抗組胺藥、止咳藥、抗生素和DNA酶藥物的組合，所述的通道活化蛋白酶抑制劑和所述的藥物在相同或不同的藥物組合物中。適合的抗炎藥包括類固醇，特別是糖皮質(zhì)激素例如布地奈德、丙酸倍氯米松、丙酸氟替卡松、環(huán)索奈德或莫米松糠酸酯，或在國際專利申請WO02/88167、WO02/12266、WO02/100879、WO02/00679(例如，實施例3、11、14、17、19、26、34、37、39、51、60、67、72、73、90、99和IOI)、WO03/35668、WO03/48181、WO03/62259、WO03/64445、WO03/72592、WO04/39827和WO04/66920中描述的類固醇；非類固醇類糖皮質(zhì)激素受體激動劑，例如在DE10261874、WO00/00531、WO02/10143、WO03/82280、WO03/82787、WO03/86294、WO03/104195、WO03/101932、WO04/05229、WO04/18429、WO04/19935和WO04/26248中描述的那些；LTD4拮抗劑例如孟魯司特和扎魯司特；PDE4抑制劑例如西洛司特(ARIFLOGlaxoSmithKline)、ROFLUMILAST⑧(BykGulden)、V國11294A(Napp)、BAY19-8004(Bayer)、SCH-351591(Schering-Plough)、AROFYLL腿⑧(Almira11Prodesfarma)、PD189659/PD168787(Parke畫Davis)、AWD曙12畫281(AstaMedica)、CDC-801(Celgene)、SelCID(TM)CC-10004(Celgene)、VM554/UM565(Vernalis)、T-440(Tanabe)、KW-4490(KyowaHakkoKogyo)，以及在WO92/19594、WO93/19749、WO93/19750、WO93/19751、WO98/18796、WO99/16766、WO01/13953、WO03/104204、WO03/104205、WO03/39544、WO04/000814、WO04/000839、WO04/005258、WO04/018450、WO04/018451、WO04/018457、WO04/018465、WO04/018431、WO04/018449、WO04/018450、WO04/018451、WO04/018457、WO04/018465、WO04/019944、WO04/019945、WO04/045607和WO04/037805中/〉開的那些；以及腺甘眾28受體拮抗劑例如在WO02/42298中描述的那些，其中每個以其整體并入本文。適合的支氣管擴張藥包括P-2腎上腺素受體激動劑，例如沙丁胺醇、奧西那林、特布他林、沙美特羅、非諾特羅、丙卡特羅、福莫特羅或卡莫特羅及其可藥用鹽，以及在WO00/75114中描述的式(l)化合物(游離或鹽或溶劑化物形式)，將其整體并入本文作為參考，例如下式化合物及其可藥用鹽；WO04/16601的式(l)化合物；以及EP1440966、JP05025045、WO93/18007、WO99/64035、US2002/0055651、WO01/42193、WO01/83462、WO02/66422、WO02/70490、WO02/76933、WO03/24439、WO03/42160、WO03/42164、WO03/72539、WO03/91204、WO03/99764、WO04/16578、WO04/22547、WO04/32921、WO04/33412、WO04/37768、WO04/37773、WO04/37807、WO04/39762、WO04/39766、WO04/45618、WO04/46083和WO04/80964的化合物，每個都是游離或鹽或溶劑化物形式。這些出版物中的每個以其整體并入本文。適合的支氣管擴張藥還包括抗膽堿能藥或抗毒蕈堿藥，特別是異丙托溴銨、氧托溴銨、瘞托溴銨和CHF4226(Chiesi)、格隆溴銨，以及在EP424021、US3714357、US5171744、WO01/04118、WO02/00652、WO02/51841、WO02/53564、WO0層840、WO03/33495、WO03/53966、WO03/87094、WO04/018422和WO04/05285中描述的那些，其中每個以其整體并入本文。適合的雙重抗炎和支氣管擴張藥包括雙重|3-2腎上腺素受體激動劑/毒蕈堿拮抗劑，例如在US2004/0167167、WO04/74246和WO04/74812中公開的那些，其中每個以其整體并入本文。適合的抗組胺藥包括鹽酸西替利溱、對乙酰氨基酚、富馬酸氯馬斯汀、異丙溱、氯雷他定、地氯雷他定、苯海拉明和鹽酸非索非那定、activastine、阿司咪唑、氮簞斯汀、依巴斯汀、依匹斯汀、咪唑斯汀和特芬那定(tefenadine)，以及在JP2004107299、WO03/099807和WO04/026841中公開的那些，其中每個以其整體并入本文。適合的抗生素包括大環(huán)內(nèi)酯類抗生物，例如妥布霉素(TOBF，。適合的DNA酶藥物包括阿法鏈道酶(PULMOZYMET^，其是重組人脫氧核糖核酸酶I(rhDNase)的高純度溶液，選擇性裂解DNA。阿法鏈道酶用于治療嚢性纖維化。通道活化蛋白酶抑制劑和抗炎藥的其它有用的組合是與趨化因子受體拮抗劑的組合，所述的趨化因子受體例如CCR-1、CCR-2、CCR-3、CCR-4、CCR-5、CCR腳6、CCR-7、CCR國8、CCR-9和CCR10、CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4、CXCR5，特別的CCR-5拮抗劑例如先靈葆雅(Schering-Plough)拮抗劑SC-351125、SCH-55700和SCH-D，Takeda拮抗劑例如N-[[4-[[6,7-二氫-2-(4-甲基-苯基)-5H-苯并-環(huán)庚烯-8-基]羰基l氨基]苯基I-甲基1四氫-N，N-二甲基-2H-吡喃-4-氯化銨(TAK-770)和在US6166037、WO00/66558、WO00/66559、WO04/018425和WO04/026873中描述的CCR-5拮抗劑，其中每個以其整體并入本文。在根據(jù)本發(fā)明治療由前列腺蛋白酶的抑制介導的疾病中，游離形式或可藥用鹽形式的本發(fā)明的通道、活4匕蛋白酶抑制齊1可。20施用，例如口服，例如以片劑、膠嚢劑或液體形式施用；非腸道，例如以可注射溶液劑或混懸劑形式施用；鼻內(nèi)，例如應用適合的鼻內(nèi)傳遞裝置以氣霧劑或其它可霧化制劑形式施用，例如鼻腔噴霧劑例如本領(lǐng)域已知的那些；或通過吸入施用，例如應用噴霧器。通道活化蛋白酶抑制劑可以在藥物組合物中與可藥用稀釋劑或載體一起施用。該組合物可以是例如干粉、片劑、膠嚢劑和液體，但也可以是注射溶液劑、輸液或吸入混懸劑，其可以應用本領(lǐng)域已知的其它配制成分和技術(shù)制備。游離形式或可藥用鹽形式的通道活化蛋白酶抑制劑的劑量可以取決于多種因素例如活性成分的活性和作用持續(xù)時間、待治療病癥的嚴重程度、施用方式、個體的種類、性別、種族起源、年齡和體重和/或其個體情況而不同。在正常情況中，施用例如口服施用于溫血動物、特別是重約75kg的人的日劑量估計約0.7mg至約1400mg;或在某些實例中，約5mg至約200mg。該劑量可以以單個劑量施用或分為幾部分劑量施用，例如5至200mg。當組合物包含氣霧劑時，其可以包含氫-氟-烷(HFA)拋射劑例如HFA134a或HFA227或它們的混合物；一種或多種本領(lǐng)域已知的共溶劑例如乙醇(至多20。/。重量)；一種或多種表面活性劑例如油酸或失水山梨醇三油酸酯；和/或一種或多種膨脹劑例如乳糖。當組合物包含干粉制劑時，其可以包含例如粒徑至多10微米的通道活化蛋白酶抑制劑，任選包含所需粒度分布的稀釋劑或栽體(例如乳糖)，以及有助于保護產(chǎn)物免受濕氣破壞的化合物(例如硬脂酸鎂)。當組合物包含霧化制劑時，其可以包含例如溶于或懸浮于含水載體中的通道活化蛋白酶抑制劑、共溶劑(例如乙醇或丙二醇)以及穩(wěn)、定劑(其可以是表面活性劑)。本發(fā)明包括(A)可吸入形式的本發(fā)明化合物，例如氣霧劑或其它可霧化組合物或可吸入顆粒，例如孩￡粒化形式，(B)可吸入藥物，其包含可吸入形式的本發(fā)明化合物；(C)藥物產(chǎn)品，其包含可吸入形式的本發(fā)明化合物以及吸入裝置；以及(D)包含可吸入形式的本發(fā)明化合物的吸入裝置。制備本發(fā)明化合物的方法本發(fā)明還包括制備本發(fā)明化合物的方法。在描述的反應中，在終產(chǎn)物中希望的反應的官能團(例如羥基、氨基、亞氨基、硫代或羧基)可以應用本領(lǐng)域已知的保護基保護，以避免它們參與不希望的反應。常規(guī)的保護基可以根據(jù)標準程序例如參見T.W.Greene和P.G.M.Wuts的"ProtectiveGroupsinOrganicChemistry(有機化學中的保護基)"，JohnWiley和Sons,1991而應用。本發(fā)明化合物可以按照以下反應流程圖I制備流程圖I其中W是(CR2)n-Xi-R、R2l(CR2)kR2;R1、R2、R3、X、Z、i、k和n如在式(l)中定義的；R是M甲酸烷基酯保護基(例如曱基、乙基、叔丁基或芐基等)。中間體化合物II可以通過將中間體化合物Iaa與R"-Y(其中Y是離去基團)型烷基試劑在適合的堿和適合的有機溶劑存在下反應而合成。烷基試劑R2'-Y中的離去基團的實例包括但不限于卣化物例如氯化物和溴化物或甲M酸酯、甲磺酸酯或苯磺酸酯離去基團等。這些反應可以在約(TC至約60X:的溫度范圍內(nèi)進行，并且可以進行約24小時以完成。中間體化合物IV可以通過將中間體化合物II與試劑III和適合的肽偶聯(lián)試劑及適合的堿在適合的溶劑存在下反應而合成。適用于該反應的堿包括但不限于三乙胺、DIEA、吡啶、2，4，6-可力丁以及其它本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的適合的堿。該反應可以在約0。C至約40。C的溫度范圍內(nèi)進行，并且可以進^f于約24小時以完成。在以上反應流程I中，中間體化合物V可以通過用適合的酸，并且任選在適合的有機溶劑存在下，從中間體化合物IV中將氨基曱酸酯保護基除去而合成。適合的酸包括但不限于TFA、p-TsOH、TfOH、HC1、HBr、HF、HBF4以及其它本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的適合的酸。該反應可以在約-20。C至約40。C的溫度范圍內(nèi)進行，并且可以進行約24小時以完成?？蛇x擇的是，中間體化合物V可以通過在適合的催化劑和適合的溶劑或水存在下用氫氣從中間體化合物IV(例如，其中W是千基或任何千基衍生物)中除去氨基甲酸酯保護基而合成。適合的催化劑的實例包括但不限于Pd/C、Pt、Pt02、Pt/C、Rh/C以及其它本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的適合的催化劑。該反應可以在約0'C至約80"C的溫度范圍內(nèi)進行，氫氣壓力約15psi至約80psi，并且可以進4亍約48小時以完成。可選擇的是，中間體化合物V可以通過在適合的催化劑(例如Pd2(dba)3、PdCl2、Pd(PPh3)4等)和適合的溶劑(例如水、甲醇、乙醇、異丙醇、叔丁醇、正丙醇、正丁醇、環(huán)己醇以及它們的混合物等)存在下，通過將式IV化合物與適合的烯丙基清除劑(例如Et2NH、嗎啉、哌啶、吡咯烷、NaBEU等)反應，從中間體化合物IV(例如，其中if是烯丙基或任何烯丙基衍生物)中除去氨基甲酸酯保護基而合成。中間體化合物VII可以在適合的肽偶聯(lián)試劑和適合的堿(Et3N、DIEA、吡啶、2，4，6-可力丁等)以及適合的溶劑存在下通過將中間體化合物V與試劑VI反應而合成。該反應可以在約(TC至約40。C的溫度范圍內(nèi)進行，并且可以進行約24小時以完成。物與適合的氧化劑反應而合成。適合的氧化劑包括但不限于Dess-Martin過櫝烷(periodinane)、2-碘苯甲酸(含過硫酸氫鉀)、TEMPO(含三氯異氰脲酸)、TEMPO(含NaOCI)、DMSO(含草酰氯)、氯鉻酸吡啶錄、Mn02、002以及其它本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的適合的氧化劑。該反應可以在約0。C至約40'C的溫度范圍內(nèi)進行，并且可以進行約24小時以完成。適用于反應流程圖I中描述的反應中的肽偶聯(lián)試劑包括但不限于DCC、DIC、HATU、BOP、PyBOP、EDC和其它本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的偶聯(lián)試劑。適用于反應流程圖I中描述的反應中的堿包括但不限于氫氧化物例如NaOH、KOH或LiOH;碳酸鹽例如K2C03或CsC03;氫化物例如NaH或KH等。其它適合的堿是胺、DIEA、吡啶、2，4，6-可力丁和其它本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的適合的堿。適用于反應流程圖I中描述的反應中的有機溶劑包括但不限于DMSO、THF、DMF、DMAc、乙腈、丙酮、2-丙酮、丁酮、HMPA、NMP、二氯甲烷、氯仿、1，2-二氯乙烷、乙醚、甲醇、乙醇、叔丁醇、異丙醇、丙醇、正丁醇、環(huán)己醇、乙腈、二5惡烷、MTBE、苯、甲苯以及它們的混合物和其它本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的適合的溶劑。制備本發(fā)明化合物的另外的方法可以通過將游離堿形式的化合物與可藥用的無沖幾或有才幾^A應而將本發(fā)明化合物制備成可藥用酸加成鹽?？蛇x擇的是，本發(fā)明化合物的可藥用堿加成鹽可以通過將游離酸形式的化合物與可藥用無機或有M反應而制備?？蛇x擇的是，本發(fā)明化合物的鹽形式可以應用原料或中間體的鹽制備。游離酸或游離堿形式的本發(fā)明化合物可以分別從相應的堿加成鹽或酸加成鹽形式制備。例如通過用適合的堿(例如氫氧化銨溶液、氫氧化鈉等)處理，可以將酸加成鹽形式的本發(fā)明化合物轉(zhuǎn)化為相應的游離堿。通過用適合的酸(例如鹽酸等)處理，可以將堿加成鹽形式的本發(fā)明化合物轉(zhuǎn)化為相應的游離酸。在0。C至80。C下，在適合的惰性有機溶劑(例如乙腈、乙醇、含水二p惡烷等)中，通過用還原劑(例如辟u、二氧化硫、三苯膦、硼氫化鋰、硼氫化鈉、三氯化躊、三溴化磚等)處理，可以從本發(fā)明化合物的N-氧化物制備非氧化形式的本發(fā)明化合物。本發(fā)明化合物的前藥衍生物可以通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方法制備(例嗦口，詳見Saulnier等人(1994)，BioorganicandMedicinalChemistryLetters,第4巻，第1985頁)。例如，適合的前藥可以通過將非衍生的本發(fā)明化合物與適合的氨甲酰化試劑(例如1,1-?；趸榛减Ｂ?carbanochloridate)、碳酸對-硝基苯基酯等)反應而制備。制備。可應用于保護基的引入和脫去的技術(shù)的詳細描述可參見T.W.Greene,"ProtectingGroupsinOrganicChemistry(有機化學中的保護基)"，第3版，JohnWiley和Sons,Inc,，1999。在本發(fā)明的制備過程中，本發(fā)明化合物可以方便地制備或形成溶劑化物(例如水合物)。本發(fā)明化合物的水合物可以通過應用有機溶劑(例如二氧芑、四氫呋喃或甲醇)從水/有機溶劑混合物中重結(jié)晶而方便地制備。本發(fā)明化合物可以通過以下方法制備成其單獨的立體異構(gòu)體將化合對，將非對映異構(gòu)體分離并且回收旋光純的對映異構(gòu)體。對映異構(gòu)體的拆分可以應用本發(fā)明化合物的共價非對映異構(gòu)體衍生物進行，或者通過應用可離解的絡合物(例如結(jié)晶的非對映異構(gòu)體鹽)進行。非對映異構(gòu)體具有獨特的物理學特性(例如熔點、沸點、溶解性和反應性等)并且可以通過利用這些不同容易地分離?？梢酝ㄟ^色譜，或者通過基于溶解性不同的分離/拆分技術(shù)將非對映異構(gòu)體分離。然后，通過不會引起外消旋化的任何實用的方法，應用拆分試劑，回收旋光純的對映異構(gòu)體。可應用于將化合物的見JeanJacques,AndreCollet,SamuelH.Wilen，"Enantiomers，RacematesandResolutions(對映異構(gòu)體、夕卜消》走體和拆分)"，JohnWiley和Sons,Inc.,1981。筒而言之，式(l)化合物可以通過以下方法制備，該方法涉及(a)反應流程圖I的方法；(b)任選將本發(fā)明化合物轉(zhuǎn)化為可藥用鹽；(c)任選將本發(fā)明化合物的鹽形式轉(zhuǎn)化為非鹽形式；(d)任選將本發(fā)明化合物的非氧化形式轉(zhuǎn)化為可藥用N-氧化物；(e)任選將本發(fā)明化合物的N-氧化物形式轉(zhuǎn)化為其非氧化形式；(f)任選將本發(fā)明化合物的單一異構(gòu)體從異構(gòu)體混合物中拆分出來；(g)任選將非衍生化的本發(fā)明化合物轉(zhuǎn)化為可藥用前藥衍生物；以及(h)任選將本發(fā)明化合物的前藥衍生物轉(zhuǎn)化為其非衍生化形式。在原料的制備沒有特殊地描述的范圍內(nèi)，化合物為已知的或可以通過與本領(lǐng)域已知的方法類似的方法或下文的實施例中公開的方法制備。本領(lǐng)域的技術(shù)人員之一將意識到以上轉(zhuǎn)化僅是制備本發(fā)明化合物的方法的代表，并且也可以類似地應用其它眾所周知的方法。通過以下說明本發(fā)明化合物的制備的中間體(參考化合物)和實施例，進一步列舉了本發(fā)明，但不對本發(fā)明構(gòu)成限制。在以下合成方法學中，應用以下本領(lǐng)域已知的常用縮略語DCM(二氯甲烷)；THF(四氫呋喃)和DIEA(二異丙基乙基胺)。參考化合物1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage26</formula>在以上反應流程圖中，試劑和條件是(a)異-BuOCOCl，Et3N，THF;NaBH4，H20。(b)Dess-Martin過捵烷，CH2C12;(c)異-PrMgCl，苯并巧I唑，THF,-20X:，30分鐘，然后l-C，-20。C至室溫。(d)H2(40psi)，EtOH，Pd/C10%,室溫，18小時。l-B:將粗原料Z-Lys(Boc)OH1-A(320g，842mmol)溶于THF(2.5L)中，并且將溶液冷卻至-10。C，然后加入三乙胺(115.2mL，l.O當量)并且滴加氯甲酸異丁酯(118.7mL，1.1當量)。將產(chǎn)生的懸浮液在0。C下攪拌2小時。將反應混合物過濾并且冷卻至-10。C。將NaBHU(64.6g，2.1當量)在0。C下溶于水(500mL)中，并且將溶液分批加入至THF溶液中(大量C02放出)。將反應混合物溫熱至室溫并且攪拌l小時。將反應混合物用1NHC1溶液酸化，并且將水相用EtOAc萃取數(shù)次。將合并的有機層用水、飽和的NaHC03水溶液和鹽水洗滌；在MgS04上干燥，并且將溶劑真空除去。將產(chǎn)物通過快速柱色鐠(己烷/乙酸乙酯)純化，得到預期產(chǎn)物，為白色泡沫狀物。l-C:將醇l-B(200g，545.8mmol)溶于DCM(2.0L)中并且冷卻至O。C。分批加入Dess-Martin試劑(231g，1.0當量)的DCM(2.0L)'溶液。將懸浮液溫熱至室溫并且攪拌直至轉(zhuǎn)化完成(l-4小時)。加入飽和NaHC03水溶液和1M賈328203溶液的1:1混合物，并且將產(chǎn)生的^Uf目體系劇烈攪拌20分鐘。將有機層分離并且將水層用DCM萃取一次。將合并的有機層真空蒸餾，并且將產(chǎn)生的油狀物溶于EtOAc中并且用NaHC03/Na2S203混合物、水和鹽水洗滌6次；在MgS04上干燥；并且將溶劑真空除去，得到粗醛，為淡黃色油狀物。將物質(zhì)直接用于下一步而無需進一步純化。l-D:在-20。C下，在異丙基-氯化鎂(1.67當量，相對于酪，3卯mL的2M畫THF溶液，來自Sigma-Aldrich)的THF(1.5L)溶液中加入在THF(l.OL)中的苯并嗜、唑(92.8g，1.67當量)。將反應混合物在-20。C下攪拌30分鐘(顏色改變至深紅色)并且緩t曼加入醛l-C(170g，466mmol)的THF(1.5L)溶液，同時溫度控制在-20X:至-15。C。將反應混合物溫至室溫并且攪拌直至完成。將反應混合物用飽和的NH4C1水溶液猝滅并且將溶劑真空除去。將7K相用EtOAc萃取三次，并且將合并的有機層用1NHC1溶液、水和鹽水充分洗滌；在MgS04上干燥，并且將溶劑真空除去，得到粗苯并惡唑，為深紅色油狀物。在珪膠上用EtOAc/己烷(l:5至1:1)純化，得到苯并巧悉唑，為黃色固體。l-E:將中間體l-D(25.0g，51.7mmol)溶液溶于乙醇(150mL)中。加入Pd/C(10%，濕潤，Degussa型)，并且將燒瓶置于Parr振蕩器上過夜并且通入40psi的氫氣。將催化劑通過硅藻土過濾并且將溶劑真空除去。將粗物質(zhì)通過快速色i普純化，首先應用梯度為己烷/EtOAc以除去較低極性有色雜質(zhì)，然后梯度為DCM/MeOH以洗脫預期化合物。將溶劑真空除去，并且將化合物在醚中研磨數(shù)次，得到預期參考化合物1,為白色粉末。'H-匪R(匪SO-d6,400MHz)57.73-7.70(2H，m)，7.40-7.34(2H,m)，6.78-6.73(lH，m)，4.55-4.51(lH，m)，3.05-3.01(lH，ni)，2.92-2.83(2H，m)，1.48-1.18(14H，m)。LCMS:350.5(M+H)+。參考化合物2流程圖2在以上流程圖2中，試劑和M是a)Cbz-OSu,Et3N,THF，H20，室溫，18小時，(b)i.異曙BuOCOCl，Et3N，THF;ii.NaBH4，H20;(c)Dess-Martin過橫烷，CH2C12;(d)異-PrMgCl，苯并^悉峻、THF，-20°C，30分鐘，然后2-D，-20匸至室溫；(e)銦，NH4C1，EtOH，回流，5小時；(f)N，N-二(叔丁氧基羰基)-lH-吡唑誦l-甲脒，DIEA，MeOH;(g)H2(40psi)，10%Pd/C，EtOH。2-B:將L-硝基苯基丙氨酸鹽酸鹽(4.45g，18,0mmol)和N-(千基氧基羰基氧基)琥珀酰亞胺(Cbz-OSu)(4.49g，18.0mmol)加入至包含THF(60mL)和水(20mL)的圓底燒瓶中。將混合物在室溫下攪拌并且加入Et3N(10.1mL，72.0mmol),并且將反應在室溫下攪拌過夜。將澄清的溶液用EtOAc(200mL)稀釋并且用1NHCl(3xl00mL)和鹽水(lx100mL)洗滌，并且用MgS04干燥。將溶劑真空蒸發(fā)，得到2-B，為白色固體，將其應用而無需進一步純化。2-C至2-E:這些中間體分別按照制備參考化合物1的中間體l-B至l-D中描述的類似方法制備。2-F:將硝基苯基類似物2-E(1.85g,4.15mmol)溶于EtOH(50mL)中并且加熱至回流。加入飽和的NH4C1水溶液(5mL)，然后加入粉末狀銦(3.2g,27.9mmo1)。將反應混合物在回流溫度下攪拌5小時，冷卻至室溫，并且將溶劑真空除去。將粗物質(zhì)懸浮于EtOAc(100mL)中并且用飽和的NaHCO3(3xl00)洗滌，用MgS04干燥并且通過硅藻土過濾。將溶劑真空除去，得到苯胺2-F，為類白色蠟狀固體，將其應用而無需進一步純化。2-G:將苯胺2-F(1.52g，3.67mmol)溶于MeOH(10mL)中，并且加入DIEA(0.7mL，4.4mmol)和N，N-二(叔丁氧基羰基)-lH-吡唑-l-甲脒(1.37g，4.4mmol)，并且將反應混合物在室溫下攪拌。4小時后，加入另外的0.5當量的N,N-二(叔丁氧基羰基)-lH-吡唑-l-甲脒(0.685g，2.2mmol)，然后將反應在室溫下攪拌過夜。加入EtOAc(100mL)并且將有機層用水和鹽水洗滌；并且在MgS04上干燥。將溶劑真空除去并且將粗物質(zhì)通過硅膠色譜用EtOAc/己烷(0至100%梯度)純化，得到預期產(chǎn)物2-G,為油狀物。2-H:該化合物應用參考化合物1的中間體1-E的制備中描述的類似方法從2-G制備。參考化合物3Boc'H.N、O、OHBoc'HOBoc裁rBoc3-D流程圖3在以上流程圖3中，試劑和條件是(a)HN(OMe)Me.HCl，BOP,Et3N，DMF，(TC至室溫；(b)正-BuLi(2.5M在己烷中)，苯并蓬唑，THF,-78°C，然后3-B，THF，-70"C至室溫;(c)NaBH4，MeOH;(d)對-TsOH,CH2C12，6小時。3-B:在氬氣、0。C下，將BOP(50g，112mmol)—次性加入至攪拌的3-A(49.92g，102.6mmol)、N，0-二甲基鹽酸羥胺(30.4g，224mmol)和三乙胺(88mL,616mmol)的干燥的DMF(200mL)溶液中。歷經(jīng)2小時，將反應混合物緩'隄溫至室溫，通過硅藻土過濾，并且真空濃縮。將殘留物溶于乙酸乙酯中，用H20、1MKHS04水溶液、飽和的NaHC03水溶液和鹽水洗滌；干燥并且真空濃縮。將殘留物通過柱純化，得到化合物3-B。3-C:在-78。C、氬氣下，將正丁基鋰(2.5M在己烷中，272.2mL，681.4mmol)滴加入攪拌的苯并蓬唑(l15.72g，850.7mmol)的干燥的THF(1660mL)溶液中，速率保持在反應溫度低于-64。C。加入完成后，將反應混合物在-70。C下攪拌30分鐘，并且加入化合物3-B(45g，85.7mmol)的干燥的HN-c3爭0>rHNH陽3r+1-N-NHATHF(300mL)溶液，速率保持反應溫度低于-70。C。將反應攪拌15分鐘，用飽和的NH4C1水溶液猝滅，并且在室溫下攪拌16小時。將產(chǎn)生的有機層分離，用乙酸乙酯稀釋，用水和鹽水洗滌；干燥并且真空濃縮，并且通過硅膠色譜純化，得到化合物3-C。3-D:在0。C下，在3-C(33.7g,55.82mmol)的MeOH(407mL)溶液中加入NaBH4(9.98g)。歷經(jīng)1小時，將反應混合物緩慢溫至室溫，然后加熱至45。C達1小時，然后冷卻至室溫。將反應用丙酮(60mL)醉滅并且真空濃縮。將殘留物溶于乙酸乙酯中，用鹽水洗滌，經(jīng)MgS04干燥。將粗物質(zhì)通過硅膠色鐠純化，得到產(chǎn)物3-D。3-E:在室溫下，將p-TsOH加入至攪拌的化合物3-D(28.2g)的CH2C12(300mL)溶液中直至溶液飽和。將反應在室溫下攪拌6小時。加入水，并且將有機層用EtOAc萃取，用鹽水和10%Na2CO3水溶液的1:1混合物(VAO洗滌，經(jīng)Na2S04干燥，并且通過硅膠色譜純化，得到產(chǎn)物3-E。參考化合物4<formula>formulaseeoriginaldocumentpage31</formula>流程圖4為了制備中間體4-B，將正丁基鋰(1.6M在己烷中，11.3mL,17.9mmol)滴加至冷卻至-78。C的異-Pr2NH(2.53mL,17.9mmol)的THF(25mL)溶液中并且攪拌10分鐘。滴加入酮4-A(3.25g，16.3mmol)并且將溶液在-78。C下繼續(xù)再攪拌25分鐘。滴加入溶于THF(25mL)中的N-苯基-二-(三氟曱氨磺酰)(6.26g，17.5mmo1)，并且將反應混合物置于0°C的7JC/水浴中并且攪拌4小時。將溶劑蒸發(fā)，并且將粗殘留物溶于最少量己烷中，然后通過氧化鋁填料過濾，應用己烷:EtOAc/9:l作為洗脫劑。將溶劑真空除去，得到預期的三氟曱磺酸酯4-B。將中間體4-B(715mg,2.16mmol)和4-C(514mg，1.96mmol)在微波反應瓶中溶于二悉烷(10mL)中。加入溶于水(2.5mL)中的K3P04(874mg，4.12mmol)，并且將溶液通過三個液氮冷凍-泵-融化循環(huán)脫氣。加入催化劑PdCl2(dppf)(143mg，0.196mmol)，并且將小瓶用氮氣吹掃并且密封。將反應在EmrysPersonalChemistry微ilt^應器中加熱至150。C達25分鐘。將二噍烷真空蒸發(fā)，并且將殘留物溶解并且在EtOAc(50mL)和10。/。檸檬酸水溶液(50mL)之間分配。分離各層，并且將有機相用10%檸檬酸水溶液(2x50mL)和鹽水(50mL)洗滌。將有機層用Na2S04干燥并且蒸發(fā)，并且將粗殘留物通過硅膠色譜(己烷/EtOAc梯度)純化，得到中間體4-D。將中間體4-D(45mg，0.142mmol)在安裝有橡膠隔板的25mL燒瓶中溶于EtOH(10mL)中。加入催化量的Pd/C(10%)，并且將氫氣從安裝有通過隔板插入的針的氣球中引入。將反應在室溫下攪拌直至原料耗盡(通過LCMS指示)。然后將催化劑過濾，并且將溶劑蒸干，得到參考化合物4。參考化合物5<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>流程圖5在以上流程圖5中，試劑和條件是a)Cbz-OSu，Et3N，THF，H20，室溫，18小時；(b)i.異-BuOCOCl，Et3N，THF;ii.NaBH4，H20;(c)Dess-Martin過碘烷，CH2C12;(d)異-PrMgCl，苯并哺'唑，THF，-20。C,30分鐘，然后5-D，畫20。C至室溫；(e)NaBH4，NiCl2,Boc20，MeOH,0。C，(f)H2(40psi)，10%Pd/C，EtOH。5-B至5-E:該化合物應用制備參考化合物2的中間體2-B中描述的類似方法從L-4-氰基苯基丙氨酸(5-A)制備。中間體5-C至5-E分別按照制備參考化合物1的中間體1-B至1-D中描述的類似方法制備。5-F:將腈5-E(3.68g，8.64mmol)溶于甲醇(60mL)中，并且冷卻至0°C。加入Boc20(3.77g，2當量)，然后加入NiCl2(210mg，0.1當量)。將混合物攪拌并且分小部分緩慢加入NaBH4(2.29g,7.0當量)。將混合物溫至室溫并且撹拌l小時。加入二亞乙基三胺(0.94mL,1當量)，并且將混合物再攪拌30分鐘，然后將溶劑真空蒸發(fā)。將殘留物溶于EtOAe中，并且用飽和的NaHCO3(2xl00mL)洗滌。將溶液用MgS04干燥并且將溶劑真空蒸發(fā)。將粗物質(zhì)通過珪膠快速色譜純化，梯度為0-100%的EtOAc和己烷，得到標題化合物，為油狀物。5-G:該化合物應用制備參考化合物1的中間體l-E中描述的類似方法從5-F制備。參考化合物6流程圖66-B:將(R)-Boc-3-哌啶甲酸(2.50g,10.9mmol)和HOBt(1.77g，13.1mmol)溶于DMF(50mL)中，并且加入EDC(2.30g，12.0mmol)。將反應混合物攪拌l小時，并且加入30%氨水溶液(2.8mL)，并且將反應再攪拌2小時。然后將反應用EtOAc(200mL)稀釋并且用水(100mL)分配。將有機層用飽和的NaHC03水溶液(3x200mL)洗滌，然后用MgS04干燥。將溶劑真空除去，得到酰胺6-B，為蠟狀固體。6-C:將酰胺6-B(2.40,10.5mmol)溶于THF(50mL)中。加入Lawesson氏試劑(2.64g，6.54mmol)，并且將反應混合物在室溫下攪拌4小時。將溶劑蒸發(fā)，并且將粗物質(zhì)通過硅膠色譜純化，應用梯度為0-5%在CH2C12中的MeOH作為洗脫劑。將溶劑蒸發(fā)，得到預期的硫代酰胺。6-D:將疏代酰胺6-C(1.27g，5.20mmol)溶于CH2C12(50mL)中。加入乙基-4-氯乙酸乙酯(0.8mL，5.72mmo1)，并且將溶液在室溫下攪拌5小時。將溶劑真空除去，然后將粗殘留物溶于EtOH(50mL)中。加入活化的粉末狀分子篩(1.2g)并且將反應混合物在回流下加熱18小時。然后將混合物冷卻至室溫并且通過珪藻土過濾。將飽和的NaHC03水溶液(50mL)加入至過濾液中，然后用EtOAc(3x50mL)萃取。將合并的有機層用鹽水(IOOmL)洗滌并且干燥(MgS04)。將溶劑真空蒸發(fā)并且將粗物質(zhì)通過硅膠快速色i脊純化，應用梯度為0-100%的EtOAc和己烷，得到噻唑6-D。參考化合物6:將LiOH'H20(65mg，1.55mmol)溶于水(5mL)中并且滴加至撹拌的溶于二喁烷(20mL)中的乙酯6-D溶液中。將反應攪拌2小時，并且將二5惡烷蒸發(fā)。將粗殘留物在EtOAc和lMNaHS04之間分配；將合并的有機層干燥(MgS04)并且真空蒸發(fā)；并且將粗物質(zhì)通過反相HPLC(H20/MeCN為流動相)純化。參考化合物7<formula>formulaseeoriginaldocumentpage35</formula>流程圖7在以上流程圖7中，試劑和條件是a)i.異-BuOCOCl,Et3N,THF;ii.NaBH4，H20;(b)三氯異氰脲酸、TEMPO,0'C至室溫，CH2C12,(c)Cbz-a-膦?；拾彼崛柞ィ珼BU，DCM;(d)H2(60psi)，(S，S)-Me-BPE-Rh(COD)+OTf，MeOH,96小時；(e)LiOH，二嗜、烷，水；(f)i.異-BuOCOCl,Et3N，THF;ii.NaBH4,H20;(g)Dess-Martin過珙烷，CH2C12;(h)異-PrMgCl,苯并S悉唑，THF，-20°C，30分鐘，然后7-G，-20。C至室溫；(i)H2(40psi)，10%Pd/C，EtOH。7-A:該化合物應用制備流程圖1中的參考化合物1的中間體1-B中描述的類似方法從反式-4-(叔丁氧基羰基氨基甲基)環(huán)己烷甲酸(7-A)制備。7-B:將醇7-A(4.14g，17.0mmol)溶于CH2C12(35mL)中并且將溶液冷卻至0。C。加入三氯異氰脲酸(4.15g,17.8mmoI)，然后加入TEMPO(28mg,0,17mol)。然后將反應溫至室溫并且在室溫下再攪拌15分鐘。形成沉淀，并且將反應混合物通過硅藻土過濾并且用CH2C12洗滌。將合并的CH2C12溶液(~100mL)用飽和的NaHC03水溶液(2x50mL)、1MHCl(2x50mL)和鹽水(50mL)洗滌，干燥(MgS04)并且將溶劑蒸發(fā)，并且將其直接應用于下一步而無需進一步純化。7-C:將N-節(jié)基氧基羰基-a-膦?；拾彼崛龝貂?5.63g，17mmol)溶于CH2C12(35mL)中；加入DBU(5.1mL，34mmol)并且將溶液攪拌20分鐘。將醛7-B(4.09g，17.0mmol)作為在CH2C12(10mL)中的溶液滴加入。將反應攪拌過夜，然后將溶劑蒸發(fā)并且將殘留物溶于EtOAc(lOOmL)中并且用1MNaHSO4(2x50mL)和鹽水洗滌，然后干燥(MgS04)并且真空蒸發(fā)。將粗物質(zhì)通過快速色譜應用梯度為0-100。/。EtOAc/己烷純化，得到預期產(chǎn)物，為白色固體。7-D:將烯經(jīng)7-C(2.04g，4.56mmol)溶于MeOH(100mL)中并且將溶液脫氣，然后加入催化劑(-)-l，2-二-((2S，3S)-2，5-二甲基phospholano)乙烷(環(huán)辛二烯)-銠(1)-三氟-曱磺酸鹽(28mg,1mol%)。將反應混合物置于Parr振蕩器上并且在60psiH2下振搖4天。然后將溶劑真空蒸發(fā)，并且將粗物質(zhì)通過快速色諳應用梯度0-100。/。EtOAc/己烷純化，得到預期產(chǎn)物，為白色固體。7-E:將甲酯7-D(1.81g，4.04mmol)溶于二嗜、烷(50mL)中并且在0"C下攪拌。滴加溶于水(10mL)中的LiOH(203mg，4，84mmo1)，然后將溶液溫至室溫。原料消失(通過LCMS)后，將溶劑蒸發(fā)，并且將粗物質(zhì)溶于EtOAc(100mL)中，用1NNaHSO4(2x50mL)和鹽水(50mL)洗滌，并且干燥(MgSCM。將溶劑真空除去并且將產(chǎn)物直接用于下一步而無需進一步純化。7-F至7-H:中間體7-F至7-H按照制備參考化合物1的中間體中描迷的類似方法制備。7-1:該化合物應用制備參考化合物1的中間體l-E中描述的類似方法從7-H制備。MSm/z404.2(M+l);，H-NMR(CDCb，400MHz)d7.66-7.64(lH,m),7.49-7,47(lH，m)，7.31-7.26(2H，m)，4.85-4.64(lH，m),3.44-3.16(lH，m)，2.96-2.88(2H，m),1.80-1.55(4H，m)，1.39-1.14(13H,m)，0.89-0.72(4H,m)。參考化合物8參考化合物8應用制備參考化合物6中描述的類似方法從(S)-Boc-3-36哌啶甲酸制備。參考化合物9參考化合物9應用制備參考化合物5中描述的類似方法從3-M苯基丙氨酸開始制備。參考化合物10參考化合物10應用制備參考化合物6中描述的類似方法從Boc-異-3.哌啶甲酸開始制備。參考化合物11<formula>formulaseeoriginaldocumentpage37</formula>11-D將Boc-異-3-吡啶甲酸(3,24g，14.1mmol)、DL-4-t^-3-羥基-丁酸甲酯鹽酸鹽(2.40g,14.1mmol)和DIEA(7.0mL，42.3mL)溶于CH2C12(50mL)中。加入HATU(5.9g，15,5mmol)，并且將反應混合物在室溫下攪拌2小時。將溶劑蒸發(fā)，并且將粗殘留物溶于EtOAc(100mL)中。將有機相用0.1MHCl(2xl00mL)和鹽水(100mL)洗滌，用MgS04干燥，并且真空蒸發(fā)。將粗物質(zhì)通過硅膠快速色鐠(EtOAc/己烷梯度)純化，得到中間體ll-B。ll-C:應用制備實施例l-F中的類似條件將醇ll-B氧化為酮。ll畫D:將酮ll-C(l.lOg，3.21mmol)溶于THF(100mL)中。加入Lawesson氏試劑(650mg,1.61mmol)，并且將反應混合物在室溫下攪拌48小時。將溶劑真空除去，并且將粗物質(zhì)通過珪膠快速色謙(EtOAc/己烷0:100梯度)純化。11:應用制備參考化合物6中描述的類似方法將甲酯ll-D皂化。參考化合物1212-A12召以上參考化合物12的反應中的試劑和條件是a)(環(huán)己基羰基氧基)琥珀酰亞胺，吡啶，DMAP，室溫，THF;(b)在水中的1NNaOH。將(4-#^-苯基)乙酸乙酯(0.895g，5.0mmol)和N-(環(huán)己基羰基氧基)琥珀酰亞胺(1.051g，5.0mmol)加入至含有THF(20mL)、吡啶(0,60mL)和DMAP(10mg)的圓底燒瓶中。將混合物在室溫下攪拌過夜。將澄清溶液用EtOAe(200mL)稀釋，用1NHCl(3xl00mL)和鹽水(100mL)洗滌，并且用MgS04干燥。將溶劑真空蒸發(fā)，得到中間體12-B，為白色固體，將其應用而無需進一步純化。將乙酯12-B(l,46g，5mmol)溶于lNNaOH(15mL，15mmol)中。原料消失(通過LCMS)后，將反應用1NHC1酸化，得到參考化合物12,為白色沉淀。參考化合物1313-A13七以上參考化合物13的反應中的試劑和條件是a)MeS02Cl，吡啶，室溫，THF;(b)在水中的1NNaOH。將(3-氨基-苯基)乙酸乙酯(0.895g，5.0mmol)和(0.281mL，5.0mmol)加入至含有THF(20mL)和吡啶(0.60mL)的圓底燒瓶中。將混合物在室溫下攪拌過夜。將澄清溶液用EtOAc(200mL)稀釋，用1NHCl(3xl00mL)和鹽水(100mL)洗滌，并且用MgS04干燥。將溶劑真空蒸發(fā)，得到中間體13-B，為白色固體。將乙酯13-B按照制備參考化合物12中描述的類似方法皂化，得到參考化合物13。參考化合物1414-A14-B以上參考化合物14的反應中的試劑和條件是a)CH3COCl，吡啶，DMAP，室溫，THF;(b)在水中的1NNaOH。將(3-氨基-苯基)乙酸乙酯(0.895g,5.0mmol)和乙酰氯(0.26mL,5.0mmol)加入至含有THF(20mL)、吡淀(0.60mL)和DMAP(10mg)的圓底燒瓶中。將混合物在室溫下攪拌過夜。將澄清溶液用EtOAc(200mL)稀釋，用1NHCl(3xl00mL)和鹽水(100mL)洗滌，并且用MgS04千燥。將溶劑真空蒸發(fā)，得到中間體14-B,為白色固體，將其應用而無需進一步純化。將乙酯14-B按照上述類似方法皂化，得到參考化合物14。參考化合物1515-A15-B以上參考化合物15的反應中的試劑和條件是a)EtNH2，CH2C12，DMAP;(b)在水中的1NNaOH。將(4-氯橫?；?苯基)乙酸甲酯(0.895g，5.0mmol)和二乙胺(1mL)加入至含有CH2C12(20mL)和DMAP(10mg)的圓底燒瓶中。將混合物在室溫下攪拌過夜。將澄清溶液用EtOAc(200mL)稀釋，用1NHCl(3xl00mL)和鹽水(lxi00mL)洗滌，并且用MgS04干燥。將溶劑真空蒸發(fā)，得到中間體15-B,應用二氧化硅柱將其從反應混合物中純化。將乙酯15-B按照上述類似方法急化，得到參考化合物15。參考化合物16<formula>formulaseeoriginaldocumentpage40</formula>以上參考化合物16的反應中的試劑和條件是a)4-Cl-PhB(OH)2，C2H4C12，Cu(OAc)2，吡啶，4A分子篩;(b)在水中的1NNaOH。將(3-羥基-苯基)乙酸曱酯(0.268g，1.6mmol)和4-氯苯基硼酸(755mg，4.84m咖l)、p比咬(0.388mL,4.8mmol)和醋酸銅(11)(477mg,2.4mmol)加入至含有1，2-二氯乙烷(10mL)和4A分子篩(300mg)的圓底燒瓶中。將混合物在室溫下攪拌過夜。將澄清溶液用EtOAc(200mL)稀釋，用1NHCl(3xl00mL)和鹽水(100mL)洗滌，并且用MgS04干燥。將溶劑真空蒸發(fā)，得到中間體16-B，應用二氧化硅柱將其從反應混合物中純化。將甲酯16-B按照上述類似方法皂化，得到參考化合物16。實施例1l-B:將細粉KOH(35g，0.622mol)溶于DMSO中并且在室溫下攪拌20分鐘，然后冷卻至0'C。將N-Cbz-反式-4-羥基-L-脯氨酸(Cbz-Hyp-OH,l-A)(10g,43.3mmol)溶于DMSO(10mL)中并且加入，并且將反應混合物在0'C下再攪拌10分鐘。然后，加入溴甲基環(huán)己烷(33g，0.204mol),并且將反應混合物在ox:下再攪拌15分鐘，隨后將冰浴除去并且將反應混合物溫至室溫并且攪拌4小時。將反應混合物傾倒入水(300mL)中，并且將反應容器用另外部分的水(300mL)沖洗。將合并的水層用醚(2x300mL)萃取并且棄去。將水層用87。/。H3P04酸化至pH2.3,然后用醚(3x300mL)萃取。將合并的醚萃取液用水(2x400mL)和鹽水(2x400mL)洗滌，經(jīng)MgS04干燥，過濾，并且真空濃縮。將殘留物通過色譜在硅膠上純化，得到化合物1-B，為澄清油狀物。l-C:將l-B(250mg,0.695mmol)、參考化合物1-E(243mg,0.695mmol，1當量)、HATU(291mg，0.765mmol，1.1當量)、iPr2EtN(0.15mL，0.834mmol，1.2當量)和CH2Cl2(4mL)加入至40mL的小瓶中。將反應在室溫下攪拌l小時。將揮發(fā)試劑減壓除去，并且將反應混合物溶于EtOAc中。將有機層用NaHS04、水飽和的NaHC03和鹽水洗滌。然后將有機層用MgS04干燥，并且將產(chǎn)物通過珪膠色譜從反應混合物中純化，得到化合物1-C，將其用于1-D的制備。1畫D:將l-C(2.5g，3.6mmol)、Pd/C(3.6g，0.36mmol，1當量)、t-BuOH(20mL)和水(5mL)加入至Parr反應容器中。將容器置于Parr裝置中并且在50psi的H2氣壓力下振搖18小時。將反應混合物通過硅藻土填料過濾，得到化合物1-D，將其直接用于1-E的制備。1隱E:將l-D，mg,0.18mmol)、4-苯基丁酸(30mg，0.18mmol,1當量)、HATU(75mg，0.20mmol，1.1當量)、iPr2EtN(0.04mL，0.22mmol,1.2當量)和CH2C12(2mL)加入至40mL的小瓶中。將反應在室溫下攪拌1小時。將揮發(fā)試劑減壓除去并且將反應混合物溶于EtOAc中。將有機層用NaHS04、水、飽和的NaHCO;3和鹽水洗滌。然后將有機層用MgS04干燥，并且將產(chǎn)物通過珪膠色譜從反應混合物中純化，l-E，將其用于l-F的制備。l-F:將醇l-E(127mg,0.18mmol)溶于DCM(2mL)中并且加入Dess-Martin過碘烷(85mg，0.2mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌過夜。將溶劑真空除去，并且將粗品通過快速色語(4g硅膠柱)純化，應用梯度為EtOAc:己烷，得到酮1-F，為白色泡沫狀物，將其用于1-G的制備。l-G:將酮l-F(128mg，0.18mmol)溶于DCM(lmL)中并且加入50%在DCM中的TFA(5mL)。將反應在室溫下攪拌2小時并且將溶劑真空除去。將粗物質(zhì)通過反相HPLC純化，并且將溶劑凍干，得到l-G，為白色粉末。實施例2-7實施例2按照實施例1中描述的類似方法，應用3-叔丁氧基羰基#^丙酸制備，得到中間體2-E。實施例3按照實施例1中描述的類似方法，應用參考化合物l3制備，得到中間體3-E。實施例4按照實施例1中描迷的類似方法，應用參考化合物"制備，得到中間體4-E。實施例5按照實施例1中描述的類似方法，應用(4-乙磺?；被?苯基)乙酸(應用參考化合物13中描述的類似方法制備)制備，得到中間體5_E。實施例6按照實施例1中描述的類似方法，應用參考化合物l2制備，得到中間體6-E。實施例7按照實施例1中描述的類似方法，應用4-(甲磺?；鵐)苯基乙酸制備，得到中間體7-E。實施例88-GNH8-HNH:Boc8-B:將反式-4-羥基脯氨酸(Hyp-OH)(7.90g，60.1mmol)和N-(烯丙基氧基羰基氧基)琥珀酰亞胺(12.0g,60.1mmol)加入至含有THF(220mL)、三乙胺(21mL,150.3mmol)和水(55mL)的圓底燒瓶中。將混合物在室溫下攪拌過夜。將澄清溶液用1NHC1(100mL)酸化并且用EtOAc(4x150mL)萃取。將合并的有機層用鹽水(100mL)洗滌并且用MgS04干燥。將溶劑真空蒸發(fā)，得到預期產(chǎn)物，為白色固體，將其應用而無需進一步純化。8-C:該化合物應用制備實施例1的中間體l-B中描述的類似方法通過將8-B和l-氯-4-氯甲基-苯進行坑基化而制備。8-D:該化合物應用制備實施例1的中間體l-C中描迷的類似方法通過將8-C和參考化合物l-E進行HATU偶聯(lián)而制備。8-E:將醇8-D(780mg,1.16mmol)、Et2NH(1.8mL,17.43mmol，15當量)、Pd2(dba)3(55mg,0.06mmol,0.05當量)、膦酉己體dppe(26mg，0.06mmol，0.05當量)和THF(5mL)加入至50mL的圓底燒瓶中。將試劑在室溫下攪拌15分鐘，然后濃縮至干。將產(chǎn)物(非對映異構(gòu)體混合物)從反應混合物中通過硅膠色譜純化，應用梯度為2-9。/。在CH2Cl2中的MeOH。然后將8-E用于8-F的制備。8-F:按照制備實施例1的中間體l-E中描述的類似方法，化合物8-F通過將8-E和(4-乙磺?；鵐-苯基)-乙酸(應用制備(4-曱磺酰基氨基)苯基乙酸中描述的類似方法制備，其應用制備參考化合物13中描述的類似方法制備)進4亍HATU偶聯(lián)而制備。8-G:該化合物應用制備實施例1的中間體l-F中描述的類似方法通過將8-F氧化而制備。8-H:該化合物應用制備實施例1中描述的類似方法通過將8-G脫保護而制備。實施例9-30實施例9按照實施例8中描述的類似方法，應用參考化合物15制備，得到中間體9-F。實施例IO按照實施例8中描述的類似方法，應用(4-甲氧基-苯基)-乙酸制備，得到中間體10-F。實施例11按照實施例8中描述的類似方法，應用吡咬-4-基-乙酸制備，得到中間體11-F。實施例12按照實施例8中描述的類似方法，應用(3-氯-苯基)-乙酸制備，得到中間體12-F。實施例13按照實施例8中描述的類似方法，應用[4-(嗎#~4-磺酰基)-苯基l-乙酸制備，得到中間體13-F。實施例14按照實施例8中描述的類似方法，應用(3，5-二氯-苯基)-乙酸制備，得到中間體14-F。實施例15按照實施例8中描述的類似方法，應用(4-苯基-苯基)-乙酸制備，得到中間體15-F。實施例16按照實施例8中描述的類似方法，應用(2-氯-苯基)-乙酸制備，得到中間體16-F。實施例17按照實施例8中描迷的類似方法，應用(3-苯氧基-苯_&)-乙酸制備，得到中間體17-F。實施例18按照實施例8中描述的類似方法，應用(2-苯基-瘞唑-4-基)-乙酸制備，得到中間體18-F。實施例19按照實施例8中描述的類似方法，應用(4-苯基曱磺?；被?苯基)-乙酸(應用參考化合物13中描述的類似方法制備)制備，得到中間體19-F。實施例20按照實施例8中描述的類似方法，應用[4-(哌咬-1-磺?；?-苯基]-乙酸制備，得到中間體20-F。實施例21按照實施例8中描述的類似方法，應用[3-(4-氯-苯氧基)-苯基l-乙酸參考化合物16制備，得到中間體21-F。實施例22按照實施例8中描述的類似方法，應用[4-(三氟-乙磺?；被?-苯基卜乙酸(按照參考化合物13中描述的類似方法)制備，得到中間體22-F。實施例23:該化合物按照制備實施例8中描述的類似方法從l-Boc-哌梵-4-基-丙酸制備。實施例24:該化合物按照制備實施例8中描述的類似方法從N-Boc-4-哌啶-4-基-丁酸制備。實施例25:該化合物按照制備實施例8中描述的類似方法從l-Boc-哌啶-4-基-乙酸制備。實施例26:該化合物按照制備實施例8中描述的類似方法從l-Boc-哌啶-3-基-乙酸制備。實施例27:該化合物按照制備實施例8中描迷的類似方法從l-Boc-哌啶-3-基-丙酸制備。實施例28-30按照制備實施例8中描述的類似方法制備。實施例3131-B:將細粉KOH(19.4g，0.346mol)溶于DMSO中并且在室溫下攪拌20分鐘，然后冷卻至0"C。將N-Boc-反式-4-羥基-L-脯氨酸(Boc-Hyp-OH,l-A)(10g，43.3mmol)溶于DMSO(10mL)中并且加入，并且將反應混合物在0。C下再攪拌10分鐘。然后，加入4-氯千基氯(33g，0.204mol)，并且將反應混合物在0'C下再攪拌15分鐘，隨后將水浴除去并且將反應混合物溫至室溫并且攪拌4小時。將反應混合物傾倒入水(300mL)中，并且將反應容器用另外部分的水(300mL)沖洗。將合并的水層用醚(2x300mL)萃取并且棄去。將水層用87°/。H3P04酸化至pH2.3，然后用醚(3x300mL)萃取。將合并的醚萃取液用水(2x400mL)和鹽水(2x400mL)洗滌，經(jīng)MgS04干燥，過濾并且真空濃縮。將殘留物通過色語在硅膠上純化，應用EtOAc/己烷(梯度0至100%),得到化合物l-B，為澄清油狀物。MSm/z256.1(M+l-Boc);NMR(DMSO-D6，400MHz)57.39-7.31(4H,m)，4.52畫4.40(2H，m)，4.16畫4.10(2H，m)，3.48-3.41(2H，m)，2.40誦2.30(1H，m)，2.03-1.94(lH，m),1.39-1.34(9H，m)。^i^將(三甲基甲硅烷基)二氮雜甲烷(2M在乙醚中)(4.7mL，9.45mmol)溶液加入至溶于DCM/MeOH(5:l，25mL)中的羧酸l-B(2.4g，8.6mmol)中。當LCMS確定原料耗盡后，將反應混合物真空濃縮，并且將粗殘留物通過快速色謙(梯度EtOAc:己烷)純化，得到甲酯，為澄清油狀物。31-D:將攪拌棒和1-C(510mg,1.38mmol)加入至圓底燒瓶中。加入在DCM(6mL)中的TFA(50。/o)并且將溶液在室溫下攪拌1小時。將溶劑真空除去，加入己烷，然后在真空中再蒸發(fā)至干，并且如果需要將剩余的THF共沸。將粗物質(zhì)直接用于下一步而無需進一步純化。31-E:該化合物應用制備實施例l-E中描述的類似方法從31-D和可商購的{2-[1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基卜5-甲基-1，3-噻唑-4-基}乙酸制備。31-F:該化合物按照制備參考化合物6中描述的類似方法通過皂化從31-E制備。31-G:該化合物應用制備實施例l-C中描述的類似方法從31-F和參考化合物3制備。31-H:該化合物應用制備實施例l-F中描述的類似方法從31-G制備。31:參考化合物31應用制備實施例l-G中描述的類似方法從31-H制備。實施例32-43實施例32按照制備實施例31中描述的類似方法從參考化合物10制備。實施例33按照制備實施例31中描述的類似方法制備。實施例34按照制備實施例8中描述的類似方法從參考化合物11制備。實施例35按照制備實施例8中描述的類似方法從參考化合物8制備。實施例36按照制備實施例8中描述的類似方法從參考化合物6制備。實施例37按照制備實施例8中描述的類似方法從參考化合物2制備。實施例38按照制備實施例8中描述的類似方法從參考化合物2制備。實施例39按照制備實施例8中描述的類似方法從參考化合物2制備。實施例40按照實施例8中描述的類似方法從參考化合物5和{2-[1-(叔丁氧基羰基)派梵-4-基1-5-曱基-1,3-噻唑-4-基}乙酸制備。實施例"按照實施例8中描述的類似方法從參考化合物9和{2-[1-(叔丁氧基羰基)哌吱-4-基-5-曱基-1，3-噻唑_4-基}乙酸制備。實施例42按照實施例8中描述的類似方法從參考化合物7和{2-1-(叔丁氧基0哌啶-4-基-5-曱基_1，3-噻唑-4-基}乙酸制備。實施例43按照實施例8中描述的類似方法從參考化合物2和{2-[1-(叔丁氧基羰基)哌淀-4-基卜5-曱基-1，3-噻唑-4-基}乙酸制備。表1給出了如實施例1-42中描述的式(l)化合物。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage48</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage49</column></row><table>實施例結(jié)構(gòu)物理數(shù)據(jù)MS(m/z)，元素分析和'H匪R楊MHz(DMSO誦d6)4MSm/z632.4(M+1);'H醒RS830(s，1H)，7.91(d，1HJ=8.0Hz)，7.67(d，1HJ=8.0Hz)，7,47-7.59(m，2H)，7.37(s，1H)，7.30(d，1HJ=8.0Hz)，7.17-7.19(m,3H)，7.97-7.99(m，1H)，5.71-5.77(m，1H)，4.40-4.44(m,1H)，4.20(s，1H)，3.84-3.87(m,2H)，3.16-3.26(m，2H)，2.844(s，1H)，2.69(s，1H),2.23-2.37(m，2H)，2.17(s，3H)，1.14-1.27(m，4H)，0.86-0.97(m，3H)。MSm/z682.4(M+1);'H醒R57.92(d，1HJ=8.0Hz)，7.76(d,1HJ=8.0Hz)，7.61-7.65(m，1H)，7,52-7.55(m，1H)，7.20-7.23(ra，6H)，5.58-5.61(m，1H)，4.51-4.55(m，1H)，4.10-4.14(m,2H)，3.66-3.79(m，5H)，3.19-3.23(m，2H)，3.06-3，13(m，5H)，2,92-2.95(m，2H)，2.66(s，1H)，2.32-2.37(ni，1H)，2.17-2.24(m，1H)，1.94-2.01(m，1H),1.27-1.32(m，7H)，0.84-0.98(m，3H)。<table>tableseeoriginaldocumentpage51</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage52</column></row><table>實施例結(jié)構(gòu)物理數(shù)據(jù)MS(m/z),元素分析和醒R400MHz(DMSO-d6)11N、〈itlU0、~\—/MSm/z604.3(M+1);^醒R57.93(d),8'72(s，IH)，7.78-7.81(m，IH)，7.50-7.67(m,2H),7.34-7.41(m，3H)，7.02(s，2H)，5，47漏5.53(m，IH)，4.46-4.56(m，2H)，4.29-4.31(m，IH)，3.95-4.02(m，2H)，3.73-3.82(m，2H)，2.86(s，2H)，2.54(s，2H)，2.31隱2.37(m)，2.06-2.15(m，1H)，1.52-1.74(m，3H)。12NH2MSm/z637.2(M+1)13o，A=/NH2MSm/z752.3(M+1)14CI，NH2MSm/z671.2(M+1)<table>tableseeoriginaldocumentpage54</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage55</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage56</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage57</column></row><table>實施例結(jié)構(gòu)物理數(shù)據(jù)MS(m/z)，元素分析和'H醒R400MHz(DMSO-d6)28工z\rw。MSm/z707.3(M+1)29i、.。。、Z工r"^=。一MSm/z693.3(M+1)30o〈\=/NH—MSm/z686.3(M+1)31工工。Tt)m工Z工1$。1MSm/z651.3(M+1)329So0〈\=/HNH2NMSm/z637.3(M+1)<table>tableseeoriginaldocumentpage59</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage0</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage61</column></row><table>實施例結(jié)構(gòu)物理數(shù)據(jù)MS(m/z)，元素分析和]HNMR400MHz(DMSOd6)48〇、、'、111MSm/z686，3(M+1)49工2。、、'、1MSm/z754.4(M+1)50J_^r、、。、。f2工MSm/z748.4(M+1)實施例51-53表2中的實施例51-53是本發(fā)明的實例化合物，其具有包含3-烷基或3-芳基取代的脯氨酸的式(1),其可以通過重復以上實施例中描述的步驟，應用本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的適合的原料制備。<table>tableseeoriginaldocumentpage63</column></row><table>通道活化蛋白酶抑制劑例如前列腺蛋白酶抑制劑在治療通道活化蛋白酶的抑制介導的疾病中的適宜性可以通過確定通道活化蛋白酶抑制劑對以下的抑制作用而測定(l)天然的、分離的、純化的或重組的通道活化蛋白酶，應用適合的生物化學試驗形式，應用Shipway等人；Biochem.Biophys.Res.Commun.2004;324(2):953-63中描述的方法；和/或(2)在適合的分離細胞或融合上皮中的離子通道/離子轉(zhuǎn)運功能，應用Bridges等人；Am.丄Physiol.LungCellMol.Physiol.2001;281(l):L16-23和Donaldson等人；J.Biol.Chem.2002;277(10):8338-45中描述的方法。生物化學試驗重組人前列腺蛋白酶和蛋白裂解酶以及豚鼠前列腺蛋白酶是根據(jù)Shipway等人；Biochem.Biophys.Res.Commun.2004;324(2):953-63中描述的方法產(chǎn)生的。將重組酶在適合的多孔試驗板例如96或384孔板上在包含試驗化合物或栽體的電解質(zhì)緩沖液中培養(yǎng)。在酶與化合物或栽體混合后的指定時間，將適合的熒光肽底物加入至試驗混合物中。當?shù)孜锉换钚悦噶呀夂?，熒?用適合的熒光板讀數(shù)器測定)增加并且底物的轉(zhuǎn)換率(即酶活性)可以被定量，并且因此任何試驗化合物的抑制作用可以;陂定量。試驗化合物的作用表示為誘導酶活力(Ki)降低50%的濃度。通常，本發(fā)明化合物的Kj值可以為0.1nM至5^M。在某些實施例中，本發(fā)明化合物的Ki值可以為0.1nM至500nM;0.1nM至50nM;0.1nM至5nM;或0.1nM至0.5nM。在特別的實施例中，本發(fā)明化合物的K,值可以為0.1nM至0.5nM;0.5nM至5nM;5nM至50nM;50nM至500nM;或500nM至5pM。在其它實施例中，化合物的Kj值可以小于0.1nM或大于5|iM。上皮離子轉(zhuǎn)運才艮據(jù)Danahay等人，Am.丄Physiol.LungCellMol.Physiol.2002;282(2):L226-36中描述的方法培養(yǎng)人支氣管上皮細胞。當適當分化(形成頂端空氣界面后14-21天)時，將上皮細胞用栽體、抑酶肽(200(ag/mL)或試驗化合物處理90分鐘。然后將上皮置入，應用Danahay等人，Am.J.Physiol.LungCellMol.Physiol.2002;282(2):L226畫36中描述的Chamber,保持上皮頂端側(cè)的載體、抑酶肽或試驗化合物的濃度。然后通過電壓鉗制上皮至零毫伏來測定短路電流(ISC)。然后通過將氨氯吡嗪脒(10iaM)加入至上皮的頂端表面來測定氨氯吡溱脒敏感ISC。試驗化合物的潛能表示為誘導總的抑酶肽敏感組分的氨氯吡溱脒敏感ISC抑制50%的濃度。通常，本發(fā)明化合物的ICs。值可以為1nM至10(iM。在某些實施例中，本發(fā)明化合物的lQo值可以為lnM至l^iM;或更特別的是lnM至100nM。在其它實施例中，本發(fā)明化合物的IC5Q值可以為100nM至1，或1pM至10jaM。在其它實施例中，本發(fā)明化合物的ICs。值可以小于1nM或大于10juM。氣管電位差(體內(nèi))將豚鼠用短作用的吸入麻醉劑例如卣烷和N;jO麻醉。在短作用麻醉下，將口腔灌胃針通過口咽途徑插入至氣管中。一旦進入氣管，將在適合的基于水的稀釋劑中的小體積(50-200iLiL)載體或試驗化合物灌入氣道中。然后動物恢復并且變得完全能走動。可選擇的是，可以將試驗化合物用氣霧劑或干粉給藥施用于動物。在給藥后的指定時間，將動物用適合的麻醉劑例如氯胺酮和賽拉溱外科麻醉。然后將氣管暴露并且將塑料的瓊脂橋電極插入氣管腔中。將參比電極也插入動物頸部的肌肉層中。然后應用Takahashi等人，ToxicolApplPharmacol.1995;131(1):31-6中描述的適合的高阻伏特計測定氣管電位差。試驗化合物的潛能表示為在敏感組分中誘導氣管電位差降低50%的劑量。應當理解的是本文描述的實施例和實施方案僅用于說明目的，并且根據(jù)其的多種修飾和改變將給本領(lǐng)域技術(shù)人員以建議并且包括在本申請的精神和范圍以及附屬權(quán)利要求的范圍內(nèi)。本文引用的所有出版物、專利和專利申請為了所有目的并入本文作為參考。權(quán)利要求1.式(1)化合物及其可藥用鹽、水合物、溶劑化物和立體異構(gòu)體其中J是5-12元單環(huán)或稠合的碳環(huán)、芳基、雜芳基或包含N、O和/或S的雜環(huán)；R1是-(CR2)l-NR2、-(CR2)l-NRC(＝NR)-NR2、-(CR2)l-C(＝NR)-NR2或5-7元含氮非芳族雜環(huán)；W-R2是在環(huán)A任何位置上的取代基；W是或-O(CR2)k-、-S(CR2)k-、-S(O)(CR2)k-、-SO2(CR2)k-或-OC(O)(CR2)k-；R2是C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、R6、-CR9＝CR9-R6或其中環(huán)E是任選取代的5-7元單環(huán)或稠合的碳環(huán)或雜環(huán)；或者W-R2一起形成C1-6烷基、5-7元芳基或-OC(O)NR7R8；R3是NR7R8或R6；R4和R5獨立地是H、C1-6烷基、OH或C1-6烷氧基；R7和R8獨立地是H、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基或-(CR2)l-R6；或者R7和R8與N一起可以形成任選取代的5-7元單環(huán)或稠合的雜環(huán)；R9是H或C1-6烷基；R10是鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、OR11或-(CR2)l-R11；R6、R11和X獨立地是任選取代的5-7元碳環(huán)、雜環(huán)、芳基或雜芳基；或者R11是H或C1-6烷基；每個R是H或C1-6烷基、C2-6鏈烯基或C2-6炔基，其中碳可以任選被NR、O或S取代或代替；i是0-1；k和l獨立地是0-6；m和n獨立地是1-6；并且p是0-3。2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是-(CH^-NHs、-(CH2)廣NHC(-NH)-NH2或-(CH2)廣C(-NH)-NH2NH2，其中每個1是0-1;或R1是哌1^。3.權(quán)利要求1的化合物，其中W是-0(CR2)k-、-S(CR2)k-、-S(0)(CR2)k-、-802(€112)『或-0<:(0)(€議2)1<-;并且k是l。4.權(quán)利要求l的化合物，其中W是任選取代的苯基、Cs-7環(huán)烷基、噻吩基、呋喃基、哌啶基、亞甲基環(huán)己基、;X、-，-CH==^〉或-「CH=<NH5.權(quán)利要求1的化合物，其中W是任選取代的苯基、吡淀基、噻唑基、哌P定基或NR71^其中R和RS都是H,或者Ff和RS與N—起形成任選取代的哌梵基。6.權(quán)利要求l的化合物，其中R、R4、R5、R7和R8各自是H。7，權(quán)利要求l的化合物，其中W是任選取代的苯基、Cw環(huán)烷基、吡啶基、噻唑基、哌啶基、環(huán)己醇、咪唑基、噻吩基、呋喃基、8.權(quán)利要求l的化合物，其中X是環(huán)己基、苯基或哌咬基。9.權(quán)利要求l的化合物，其中-J-(R,p—起是Z是O或S;Z1、Z2、Z3或Z4獨立地是N、CH或當與R"連接時是C;Z5、Z6或Z7獨立地是N、O、S、CH或當與R"連接時是C;R"是d—6烷基或-(CR2),-R";R"是苯基或Cw環(huán)烷基；并且p是0-l。10.權(quán)利要求1的化合物，其中J是苯并噻唑基、苯并惡唑基、噻哇基或哺、二唑基。11.權(quán)利要求l的化合物，其中所述化合物是式(2A)或(2B):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>(2B)其中Z是O或S;R1是NH2、-NHC(=NH)-NH2或-C(-NH)-NH2;W是-O(CH2)k-或-S(O)(CH;0k-;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>R"是任選取代的苯基，或者W-R2—起形成d-6烷基或任選取代的苯基；R、R4和R5獨立地是H;Y是5-7元芳基、雜芳基或包含N、O或S的雜環(huán)；R'2是鹵素、d—6烷基或-L-(CH2)「R";L是鍵、O、S02、NHCO、NHS02或S02NH;R"是任選卣代的d-6烷基，或任選取代的C3-7環(huán)烷基，或5-7元芳基、雜芳基或雜環(huán)；i是0;k是l;l是0-l;m和n獨立地是l-4;并且q是0-3。12.權(quán)利要求11的化合物，其中Y是苯基、吡淀基、噻唑基或哌#。13.權(quán)利要求ll的化合物，其中R12A-L-(CH2)rR13;并且R"是任選卣代的d—6烷基、C3—7環(huán)烷基、嗎啉基、苯基或哌<^&。14.藥物組合物，該藥物組合物包含治療有效量的權(quán)利要求1的化合物和可藥用賦形劑。15.調(diào)節(jié)通道活化蛋白酶的方法，該方法包括給需要的系統(tǒng)或個體施用治療有效量的權(quán)利要求l的化合物或其可藥用鹽或藥物組合物，從而調(diào)節(jié)所述的通道活化蛋白酶。16.權(quán)利要求15的方法，其中所述的通道活化蛋白酶是前列腺蛋白酶、PRSS22、TMPRSS11(例如TMPRSS11B、TMPRSS11E)、TMPRSS2、TMPRSS3、TMPRSS4(MTSP-2)、蛋白裂解酶(MTSP-1)、CAP2、CAP3、胰蛋白酶、組織蛋白酶A或嗜中性細胞彈性蛋白酶。17.權(quán)利要求16的方法，其中所述的通道活化蛋白酶是前列腺蛋白酶。18.沖又利要求15的方法，該方法包括給細胞或組織系統(tǒng)或者人或動物個體施用權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽或藥物組合物。19.權(quán)利要求18的方法，其中所述的細胞是支氣管上皮細胞。20.改善通道活化蛋白酶介導的病癥的方法，該方法包括給需要該治療的系統(tǒng)或個體施用有效量的權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽或藥物組合物，并且任選與第二種治療劑組合，從而治療所述病癥。21.權(quán)利要求20的方法，其中所述的通道活化蛋白酶是前列腺蛋白酶、PRSS22、TMPRSS11(例如TMPRSS11B、TMPRSS11E)、TMPRSS2、TMPRSS3、TMPRSS4(MTSP-2)、蛋白裂解酶(MTSP-1)、CAP2、CAP3、胰蛋白酶、組織蛋白酶A或嗜中性細胞彈性蛋白酶。22.權(quán)利要求21的方法，其中所述的通道活化蛋白酶是前列腺蛋白酶。23.權(quán)利要求20的方法，其中所述病癥與液體經(jīng)離子轉(zhuǎn)運上皮的移動或呼吸組織中粘液和痰的聚集或它們的組合有關(guān)。24.權(quán)利要求20的方法，其中所述病癥是嚢性纖維化、原發(fā)性睫運動障礙、肺癌、慢性支氣管炎、慢性阻塞性肺疾病、哮喘或呼吸道感染。25.權(quán)利要求20的方法，其中所述的第二種治療劑是抗炎藥、支氣管擴張藥、抗組胺藥、止咳藥、抗生素或DNA酶。26.權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽或藥物組合物并且任選與第二種治療劑組合在調(diào)節(jié)通道活化蛋白酶中的用途。27.權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽或藥物組合物并且任選與第二種治療劑組合在制備用于治療通道活化蛋白酶介導的病癥的藥物中的用途。全文摘要本發(fā)明提供了用于調(diào)節(jié)通道活化蛋白酶的化合物及其藥物組合物，以及應用該化合物治療、改善或預防與通道活化蛋白酶有關(guān)的病癥的方法，所述的通道活化蛋白酶包括但不限于前列腺蛋白酶、PRSS22、TMPRSS11(例如TMPRSS11B、TMPRSS11E)、TMPRSS2、TMPRSS3、TMPRSS4(MTSP-2)、蛋白裂解酶(MTSP-1)、CAP2、CAP3、胰蛋白酶、組織蛋白酶A或嗜中性細胞彈性蛋白酶。文檔編號A61K38/55GK101443348SQ200780017230公開日2009年5月27日申請日期2007年5月15日優(yōu)先權(quán)日2006年5月23日發(fā)明者A·K·查特吉,B·布爾蘇拉亞,D·C·塔利,G·斯普拉貢,H·M·J·彼得拉西申請人:Irm責任有限公司