專(zhuān)利名稱(chēng)：：乳清蛋白膠束的美容用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及乳清蛋白膠束作為摩擦劑(abrasiveagents)、特別是在美容組合物中的用途，并且涉及獲得所述組合物的方法。背景含有摩擦劑如顆粒糊狀物或粒狀液體的異質(zhì)組合物通常用于健康護(hù)理和美容品領(lǐng)域。專(zhuān)利申請(qǐng)WO03000215公開(kāi)了例如含有無(wú)機(jī)粉末作為摩擦劑以除去在牙齒表面形成的蛋白質(zhì)膜的牙骨組合物。US6036966涉及用于重構(gòu)皮膚肌理的含有略微摩擦的粉末組分的局部用組合物，所述粉末組分選自無(wú)機(jī)粉末、金屬皂或有機(jī)粉末如微晶纖維素。在顆粒產(chǎn)品及其用途領(lǐng)域仍然還有很多未開(kāi)發(fā)的區(qū)域。因此，本發(fā)明的目的是提供本領(lǐng)域所用磨擦介質(zhì)的供選物。發(fā)明概述因此，該目的通過(guò)獨(dú)立權(quán)利要求的特征得以完成。從屬權(quán)利要求進(jìn)一步形成了本發(fā)明的重要手段。為了達(dá)到此目的，提議通常將蛋白質(zhì)、例如乳清蛋白膠束或含有乳清蛋白膠束的聚集物用作摩擦介質(zhì)。具體來(lái)說(shuō)，本發(fā)明涉及乳清蛋白膠束的局部應(yīng)用。在本發(fā)明的另一方面，提供了包含乳清蛋白膠束的美容組合物。本發(fā)明的第三個(gè)方面涉及制備美容組合物的方法。另一方面還涉及可通過(guò)該方法獲得的產(chǎn)品。附圖在下文參考附圖中所示的一些優(yōu)選實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明做了進(jìn)一步描述，其中圖l顯示了證明pH和熱處理對(duì)P-乳球蛋白膠束化的影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。圖2顯示了于500nm采用濁度測(cè)定來(lái)確定市售制劑(Bipro⑧，批號(hào)JE032-l-420)膠束化的pH的手段。圖3是乳清蛋白膠束(2wt.%，WPI95，拉克塔利斯公司(Lactalis))在pH7.4的透射電子顯微術(shù)顯微照片。比例條是200nm。圖4顯示了評(píng)估離子強(qiáng)度(精氨酸鹽酸鹽)在恒定pH7.0時(shí)對(duì)蛋白膠束化的影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。圖5顯示了與未膠束化的p-乳球蛋白相比，通過(guò)lwt.%P-乳球蛋白(戴維思科公司(Davisco))膠束在pH7.0、在60mM精氨酸鹽酸鹽的存在下穩(wěn)定的泡沫的體積穩(wěn)定性(FVS)。圖6顯示了通過(guò)將lwt%p-乳球蛋白分軟液于85"C在pH2至8范圍進(jìn)行15分鐘熱處理獲得的乳清蛋白的基于強(qiáng)度的等同流體動(dòng)力學(xué)直徑(equivalenthydrodynamicdiameter)。孚L清蛋白膠束在pH4.25(帶正電荷，;-電位約+25mV)和pH6.0(帶負(fù)電荷，；-電位約-30mV)得到。在pH4.25時(shí)膠束的Z-均流體動(dòng)力學(xué)直徑為229.3nm，在pH6.0時(shí)為227.2nm。顯示了在負(fù)染色后通過(guò)TEM獲得的相應(yīng)的膠束顯微照片。比例條是ljun。圖7顯示了乳清蛋白膠束的高級(jí)示意結(jié)構(gòu)。圖8顯示了乳清蛋白膠束粉末的SEM(掃描電子顯微術(shù))顯微照片，所述乳清蛋白膠束粉末通過(guò)在微量過(guò)濾后將蛋白質(zhì)含量為20%的分散液進(jìn)行噴霧干燥后獲得。圖9是以4%蛋白質(zhì)含量獲得的乳清蛋白膠束*液的負(fù)染色TEM顯微照片。圖10是在微量過(guò)濾后以20。/。蛋白質(zhì)含量獲得的乳清蛋白膠束分散液的負(fù)染色TEM顯微照片。圖11顯示了在微量過(guò)濾后以10%蛋白質(zhì)含量獲得的乳清蛋白膠束分散液在pH7.0時(shí)在NaCl的存在下于85t:加熱15分鐘后的熱穩(wěn)定性。圖12顯示了以4。/。蛋白質(zhì)含量獲得的乳清蛋白分歉液在pH7.0時(shí)在NaCl的存在下于85'C加熱15分鐘后的熱穩(wěn)定性。圖13是4%乳清蛋白膠束*液的負(fù)染色TEM顯微照片，所述*液由純的乳清蛋白膠束噴霧干燥粉末于50X:在去離子水中^:后獲得。圖14是顯示通過(guò)本發(fā)明的方法采用4wt%Prolacta90乳清蛋白分離物(于pH5.9處理)獲得的膠束的尺寸分布圖。圖15是顯示切開(kāi)圖8呈現(xiàn)的噴霧干燥粉末顆粒后內(nèi)部結(jié)構(gòu)的SEM顯微照片。圖16是4%乳清蛋白膠束*液的負(fù)染色TEM顯微照片，所述^t液由純的冷凍千燥的乳清蛋白膠束粉末于室溫在去離子水中后獲得。比例條是0.5拜。圖17是在pH3.0增加混合比率的包有SBO(油酸丁酯石克酸鹽)的WPM的示意圖?；疑珗A表面帶正電荷的WPM。黑色頭+尾來(lái)自SBO的帶負(fù)電荷的頭和疏水性尾。圖18是蒸發(fā)后獲得的20。/。乳清蛋白膠束濃縮物的照片，其中添加有4%NaCl。圖19是甲苯胺藍(lán)染色后乳清蛋白膠束粉末半薄切片的明視野光學(xué)顯微術(shù)顯微照片。比例條為50nm。圖20是切開(kāi)后中空乳清蛋白膠束粉末微粒的SEM顯微照片。左側(cè)內(nèi)部結(jié)構(gòu)。右側(cè)組成粉末顆粒基質(zhì)的乳清蛋白膠束的細(xì)節(jié)。比例條分別是10和l拜。發(fā)明詳述根據(jù)本發(fā)明，蛋白質(zhì)如乳清蛋白膠束或其聚集物可用作摩擦介質(zhì)。可用于本發(fā)明上下文的乳清蛋白膠束在圖7中表示，其中乳清蛋白以這樣的方式排列蛋白質(zhì)的親水部分朝向團(tuán)聚物外部而蛋白質(zhì)的疏水部分朝向膠束的內(nèi)"核"。這種積極有利的構(gòu)型為這些結(jié)構(gòu)在親水環(huán)境中提供了良好的穩(wěn)定性。具體的膠束結(jié)構(gòu)可以從圖、尤其是圖3、9、10和13中看出，其中本發(fā)明所用的膠束基本上由變性乳清蛋白的球狀團(tuán)聚物組成。本發(fā)明的膠束特別地以它們的規(guī)則球形為特征。乳清蛋白膠束可以通過(guò)如下方法生產(chǎn)首先調(diào)節(jié)天然乳清蛋白水溶液的pH和/或離子強(qiáng)度，然后使所述溶液受熱。下文更詳細(xì)地進(jìn)一步描述了該方法o由此生產(chǎn)的乳清蛋白膠束具有雙重特性(親水性和疏水性)。的確，變性乳清蛋白排列為膠束結(jié)構(gòu)看起來(lái)允許疏7jC相如脂肪小滴或空氣與親7jC相的相互作用。因此，乳清蛋白膠束具有完美的乳化和起泡特性。此外，本發(fā)明所用的乳清蛋白膠束以使它們具有極尖尺寸分布(參見(jiàn)圖14)的方式生產(chǎn)，以致于80。/。以上的所生產(chǎn)的膠束將具有l(wèi)jim以下的尺寸。優(yōu)選本發(fā)明所用的乳清蛋白膠束將具有100nm至卯Onm、更優(yōu)選100至770nm、最優(yōu)選200至400nm的尺寸。膠束的平均直徑可以采用透射電子顯微術(shù)(TEM)來(lái)測(cè)定。為了進(jìn)行該測(cè)定，將液態(tài)膠束樣品包埋于瓊脂皿試管中。通過(guò)將其浸入2.5%戊二醛在0.1M、pH7.4卡可酸鹽緩沖液中的溶液中實(shí)現(xiàn)固定，用2%四氧化鋨在相同緩沖液中的溶液進(jìn)行后固定，兩種溶液都含有0.04%釕紅。在一系列各濃度的乙醇(70。/。、80%、卯％、96%、100。/。乙醇)中脫水后，將樣品植入Spurr樹(shù)脂(Spurr/乙醇為1:1、1:2、100%)。樹(shù)脂聚合(70。C，48小時(shí))后，用萊卡超切割UCT超薄切片才幾(LeicaultracutUCTultra-microtome)切割出半薄和超薄切片。將超薄切片用乙酸雙氧鈾水溶液和檸檬酸鉛染色，然后通過(guò)透射電子顯微術(shù)(菲利浦(Philips)CM12,80kV)進(jìn)行檢查。不希望受理論的約束，人們認(rèn)為在膠束化過(guò)程中膠束達(dá)到了"最大，，尺寸，這是由于膠束的總靜電荷排斥任何另外的蛋白質(zhì)分子，以致于膠束的尺寸不再生長(zhǎng)。這解釋了所觀察到的尖的尺寸分布(參見(jiàn)圖14)。本發(fā)明中所用的乳清蛋白膠束可以由任何可自商業(yè)途徑獲得的乳清蛋白分離物或濃縮物、即通過(guò)本領(lǐng)域已知的任何用于制備乳清蛋白的方法獲得的乳清蛋白以及由此制得的乳清蛋白級(jí)分或者諸如P-乳球蛋白(BLG)、(X-乳白蛋白和血清白蛋白的蛋白質(zhì)來(lái)制備。具體而言，在奶酪生產(chǎn)中作為副產(chǎn)品獲得的甜乳清、在酸性酪蛋白生產(chǎn)中作為副產(chǎn)品獲得的酸乳清(acidwhey)、通過(guò)奶微量過(guò)濾得到的天然乳清或者在粗制凝乳酶酪蛋白生產(chǎn)中作為副產(chǎn)品獲得的粗制凝乳酶乳清都可以用作乳清蛋白來(lái)源。乳清蛋白可以來(lái)自單一來(lái)源或來(lái)自任意來(lái)源的混合物。優(yōu)選乳清蛋白在膠束化之前沒(méi)有經(jīng)歷任何水解步驟。因此，乳清蛋白在膠束化之前不進(jìn)行任何酶處理。根據(jù)本發(fā)明，在膠束化方法中應(yīng)當(dāng)使用乳清蛋白而不是其水解物是重要的。用于生產(chǎn)在本發(fā)明中使用的乳清蛋白膠束的乳清分離物不限于牛來(lái)源的那些，而是包括來(lái)自所有哺乳動(dòng)物種屬的乳清分離物，例如來(lái)自綿羊、山羊、馬和駱駝。并且，乳清制備物可以是礦物化的、去礦物化的或者略微礦物化的。s^^礦物化例如指除去可透析或可透濾(diafiltrable)的游離礦物質(zhì)后的任意乳清制備物，但是在制備乳清蛋白濃縮物或分離物后仍然保留有通過(guò)天然礦化作用與之聯(lián)合的礦物質(zhì)。這些"略孩先礦物化"的乳清制備物已經(jīng)不含特定的礦物質(zhì)富集。對(duì)于乳清蛋白膠束的制備，基于溶液的總重量計(jì)算，乳清蛋白可以在水溶液中以0.1wt。/。至12wt%、優(yōu)選0.1wt。/。至8wt%、更優(yōu)選0.2wt。/。至7wt%、甚至更優(yōu)選0.5wt。/。至6wt%、最優(yōu)選lwt。/。至4wt。/。的量存在。在膠束化步驟之間存在的乳清蛋白制備物的水溶液還可以包含另外的化合物，例如各乳清生產(chǎn)工序的副產(chǎn)品、其它蛋白質(zhì)、樹(shù)膠、角叉菜膠或碳7JC化合物。該溶液還可以含有其它食物成分(脂肪、碳7K化合物、植物、提取物等)。這些另外的化合物的量通常不超過(guò)溶液總重量的50wt%、優(yōu)選20wtVo，更優(yōu)選不超過(guò)10wtV。。乳清蛋白及其碎片和/或主要蛋白質(zhì)可以以純化的形式或同樣地以粗產(chǎn)品的形式^f吏用。在用于制備乳清蛋白膠束的乳清蛋白中，二價(jià)陽(yáng)離子的含量可以在2.5%以下、優(yōu)選在0.2%以下。最優(yōu)選乳清蛋白是完全去礦物化的。pH值和離子強(qiáng)度是制備乳清蛋白膠束的重要因素。因此，對(duì)于事實(shí)上不含或排除游離陽(yáng)離子如Ca、K、Na、Mg的充分透析的樣品而言，當(dāng)在低于5.4的pH下在2秒至10小時(shí)的時(shí)間期內(nèi)進(jìn)4亍熱處理時(shí)，獲得凝乳，而在超過(guò)6,8的pH下，產(chǎn)生可溶性乳清蛋白(參見(jiàn)圖1)。因此，只有在該非常窄的pH窗口下，才將獲得直徑在lnm以下的乳清蛋白膠束。這些膠束將帶有總負(fù)電荷。對(duì)稱(chēng)地在等電pH以下(導(dǎo)致膠束帶正電荷)、即pH3.5至5.0、更優(yōu)選pH3.8至4.5，也可以獲得相同的膠束形式(參見(jiàn)圖6)。因此，為了獲得帶正電荷的膠束，乳清蛋白的膠束化可以在不含鹽的溶液中在根據(jù)蛋白質(zhì)來(lái)源的礦物質(zhì)含量調(diào)節(jié)至3.8至4.5的pH值下進(jìn)行?；蛘撸瑸榱双@得帶負(fù)電荷的膠束，可以將？11調(diào)節(jié)至6.3至9.0，因?yàn)槎r(jià)陽(yáng)離子的含量占乳清蛋白粉末的0.2%至2.5%。更具體而言，為了獲得帶負(fù)電荷的膠束，將pH調(diào)節(jié)至5.6至6.4，或甚至調(diào)節(jié)至5.8至6.0，因?yàn)槎r(jià)陽(yáng)離子的含量低(例如占初始乳清蛋白粉末的0.2%以下)。pH可以升高至8.4,這取決于乳清蛋白源(濃縮物或分離物)的礦物質(zhì)含量。特別地，在大量游離礦物質(zhì)的存在下，pH可以為7.5至8.4、優(yōu)選7.6至8.0以獲得帶負(fù)電荷的膠束，在中等量游離礦物質(zhì)的存在下，pH可以為6.4至7.4、優(yōu)選6.6至7.2以獲得帶負(fù)電荷的膠束。通常，初始乳清蛋白粉末中鈣和/或鎂的含量越高，膠束化的pH就越高。形成乳清蛋白膠束的條件可以如下進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化將任意來(lái)源的液體天然乳清蛋白去礦物化一_通過(guò)任意已知的去礦物化技術(shù)(透析、超濾、反滲透、離子交換色i普法...)一一所述任意來(lái)源的液體天然乳清蛋白的蛋白質(zhì)濃度為從甜乳清、奶的微量過(guò)濾滲透物或酸乳清的蛋白質(zhì)濃度至蛋白質(zhì)含量為30%的濃縮物的蛋白質(zhì)濃度。透析可以用水(蒸餾水、去離子水或軟化水)進(jìn)行，但是，由于這樣將僅允許除去與乳清蛋白弱結(jié)合的離子，因此通常用pH在4.0以下的酸(有機(jī)酸或無(wú)機(jī)酸)進(jìn)行透析以較好地控制乳清蛋白的離子組成。通過(guò)如此處理，乳清蛋白膠束化的pH將在7.0以下，通常在5.8至6.6之間。在加熱乳清蛋白水溶液之前，pH通常通過(guò)加入酸如鹽酸、磷酸、乙酸、檸檬酸、葡糖酸或乳酸來(lái)進(jìn)行調(diào)節(jié)。當(dāng)?shù)V物質(zhì)含量高時(shí)，pH通常通過(guò)加入堿性溶液如氫氧化鈉、氫氧化鉀或氫氧化銨來(lái)進(jìn)行調(diào)節(jié)。或者，如果不希望有pH調(diào)節(jié)步驟，則有可能調(diào)節(jié)乳清蛋白制備物的離子強(qiáng)度而同時(shí)保持pH恒定。那么，離子強(qiáng)度可以通過(guò)用有機(jī)離子或無(wú)機(jī)離子以允許在恒定pH7下膠束化的方式來(lái)進(jìn)行調(diào)節(jié)。還可以向乳清蛋白水溶液中加入緩沖劑以避免pH值在熱處理乳清蛋白期間顯著變化。原則上，緩沖劑可以選自任何緩沖體系，例如乙酸及其鹽如乙酸鈉或乙酸鉀，磷酸及其鹽如NaH2P04、Na2HP04、KH2P04或K2HP04，或者檸檬酸及其鹽，等等。在加熱之前調(diào)節(jié)水溶液的pH和/或離子強(qiáng)度導(dǎo)致了受控的方法，該方法產(chǎn)生了尺寸在100nm-900nm、優(yōu)選100-700nm、最優(yōu)選200-400nm之間的膠束。優(yōu)選地，當(dāng)進(jìn)行本文所述的方法時(shí)，尺寸在100-700nm之間的膠束分布高于80%(參見(jiàn)圖14)。為了獲得形狀規(guī)則的膠束，根據(jù)本發(fā)明同樣重要的是，乳清蛋白在膠束化之前不經(jīng)歷任何水解步驟。在調(diào)節(jié)pH和/或離子強(qiáng)度之后，將原始乳清蛋白水溶液接受熱處理。在此方面，為了獲得乳清蛋白膠束，重要的是使溫度在約70X:至95X:以下的范圍內(nèi)、優(yōu)選約82t:至約89'C、更優(yōu)選約84"C至約87X:、最優(yōu)選約85X:。還已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在工業(yè)規(guī)模上重要的是，溫度優(yōu)選在95。C以下、更優(yōu)選80。C至90n、最優(yōu)選約85X:。一旦已經(jīng)達(dá)到預(yù)期溫度，就將溶液在此溫度保存最短10秒和最長(zhǎng)2小時(shí)。乳清蛋白水溶液在預(yù)期溫度下保存的時(shí)間期優(yōu)選為12至25分鐘、更優(yōu)選12至20分鐘、最優(yōu)選約15分鐘。對(duì)于在1500W儀器中加熱至沸騰溫度的4wt。/o蛋白質(zhì)溶液而言(在833m的海拔為98匸)，熱處理還可以通過(guò)微波以10秒/10ml的時(shí)間/量比例在微波爐或任意允許加熱的類(lèi)似裝置中進(jìn)行。通過(guò)在玻璃試管周?chē)郊?個(gè)或更多個(gè)磁控管還可以進(jìn)行連續(xù)工藝，通過(guò)將試管保持以增加孵育時(shí)間而被潛在地延長(zhǎng)。如圖2所示，濁度測(cè)定M束化的指示。對(duì)于1%蛋白質(zhì)溶液而言，通過(guò)于500nm的吸光度測(cè)定的濁度通常為至少3個(gè)吸光度單位，但是當(dāng)膠束化的產(chǎn)率在80%以上時(shí)可以達(dá)到16個(gè)吸光度單位(見(jiàn)圖2)。為了從物理化學(xué)的觀點(diǎn)進(jìn)一步解釋膠束化的效果，已經(jīng)將lwt%Bipro⑧介狀液在pH6.0和6.8在MilliQ水中于85。C加熱15分鐘。通過(guò)動(dòng)態(tài)光散射測(cè)定經(jīng)熱處理后獲得的聚集物的流體動(dòng)力學(xué)直徑。聚集物的表觀分子量通過(guò)靜態(tài)光散射、采用所謂的德拜(Debye)曲線(xiàn)測(cè)得。表面疏水性采用疏水性ANS探針和游離可接近的硫醇基團(tuán)通過(guò)DTNB方法采用半胱氨酸(cystein)作為標(biāo)準(zhǔn)氨基酸進(jìn)行探查。最后，通過(guò)負(fù)染色TEM研究聚集物的形態(tài)學(xué)。結(jié)果在表l中給出。由表1可以清楚地看出，在pH6.0形成的乳清蛋白膠束使得蛋白質(zhì)可能降低其特異ANS表面疏水性，與在相同條件下、但是在pH6.8加熱的未膠束化的乳清蛋白相比降低了2個(gè)因子。膠束化還可以從與未膠束化蛋白質(zhì)的分子量0.64x10Sg.mor1相比非常高的分子量27xl06g*mol_1看出，明膠束內(nèi)的物質(zhì)是非常緊密的狀態(tài)(低水含量)。足夠令人感興趣的是，膠束的；-電位(負(fù)值)甚至比未膠束化蛋白質(zhì)更低，即使后者是在比膠束更堿性的pH下形成的。這AJ歐束更親水的表面與溶劑接觸的結(jié)果。最后，應(yīng)當(dāng)注意由于熱處理的不同pH，膠束的硫醇反應(yīng)活性比未膠束化蛋白的硫醇反應(yīng)活性低得多。表1:通過(guò)在有或無(wú)NaCl的存在下將lwt。/。蛋白質(zhì)分軟液進(jìn)行熱處理(85C，15分鐘)獲得的可溶性乳清蛋白聚集物的物理化學(xué)性質(zhì)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>當(dāng)初始蛋白質(zhì)濃度在pH調(diào)節(jié)和熱處理之前增加時(shí)，天然乳清蛋白轉(zhuǎn)化為膠束的產(chǎn)率下降。例如，當(dāng)以乳清蛋白分離物Prolacta卯(來(lái)自拉克塔利斯公司的批號(hào)673)為原料時(shí)，乳清蛋白膠束的形成產(chǎn)率由85%(當(dāng)以4%蛋白質(zhì)開(kāi)始時(shí))下降至50%(當(dāng)以12%蛋白質(zhì)開(kāi)始時(shí))。為了使乳清蛋白膠束的形成最大化(大于初始蛋白質(zhì)含量的85%),以蛋白質(zhì)濃度在12%以下、優(yōu)選在4%以下的乳清蛋白水溶液為原料是較好的。根據(jù)預(yù)期的最終用途，可以在熱處理之前調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)濃度以達(dá)成最優(yōu)化的乳清蛋白膠束產(chǎn)率。根據(jù)預(yù)期用途，在濃縮前膠束的產(chǎn)率為至少50%、優(yōu)選至少80%，殘余的可溶性聚集物或可溶性蛋白質(zhì)的含量?jī)?yōu)選在20%以下。平均膠束尺寸的特征在于多*性指數(shù)在0.200以下。已經(jīng)觀察到乳清蛋白膠束可以在pH4.5左右形成聚集物，然而于4'C達(dá)至少12小時(shí)后沒(méi)有肉眼可見(jiàn)的相分離的跡象。乳清蛋白膠束的純度可以通過(guò)在生產(chǎn)后測(cè)定殘留的可溶性蛋白質(zhì)的量而獲得。膠束通過(guò)于20'C和26900g離心15分鐘而除去。上清液用于在石英比色杯(lcm光程長(zhǎng)度)中于280nm測(cè)定蛋白質(zhì)量。數(shù)值以熱處理前初始值的百分?jǐn)?shù)表示。膠束比例=(初始蛋白質(zhì)量-可溶性蛋白質(zhì)量)/原始蛋白質(zhì)量與常規(guī)方法相反，通過(guò)應(yīng)用本文所述的方法，乳清蛋白膠束在形成期間未進(jìn)行任何導(dǎo)致粒徑減小的物理應(yīng)激。該方法i秀導(dǎo)乳清蛋白在熱處理期間在沒(méi)有剪切的情況下自發(fā)形成膠束。膠束可以作為在液體中的混懸液或分散液獲得，可以具有100-900nm、優(yōu)選100-700nm、最優(yōu)選200-400nm的尺寸?？赏ㄟ^(guò)本文所述的方法獲得的膠束是極其穩(wěn)定的不溶性結(jié)構(gòu)，其可用作本發(fā)明的摩擦介質(zhì)。所述膠束可以原樣用于本發(fā)明，或者可以經(jīng)歷進(jìn)一步加工如濃縮、噴霧干燥等而同時(shí)保留其摩擦性質(zhì)。確實(shí)，經(jīng)熱處理后可獲得的膠束M液的進(jìn)一步濃縮可以通過(guò)例如蒸發(fā)、離心、沉降、微量過(guò)濾和/超濾來(lái)進(jìn)行。富集乳清蛋白膠束以生產(chǎn)其濃縮物提供了如下益處可以以以前所不能達(dá)到的濃度獲得富含蛋白質(zhì)的產(chǎn)品。因此，膠束混懸液可以濃縮至蛋白質(zhì)含量在4%以上、優(yōu)選在10%以上、更優(yōu)選在20%以上。蒸發(fā)可以通過(guò)將膠束M液加入到溫度為5or;至80t:的真空蒸發(fā)器中來(lái)進(jìn)行。所得產(chǎn)物通常將具有膠狀或乳骨狀的外觀，如圖18所示的那樣。該膠束產(chǎn)品可以用作例如摩擦介質(zhì)或者用作美容物質(zhì)，或者用于本發(fā)明的美容組合物中。此外，可通過(guò)蒸發(fā)獲得的乳清蛋白膠束的20%蛋白質(zhì)濃縮物可以通過(guò)采用乳酸進(jìn)行酸化在可鋪展的織物中進(jìn)行織物化處理。離心可以在于pH5以下、優(yōu)選4.5以下酸化乳清蛋白膠束^t液后以高加速率(2000g以下)或低速率(500g以下)進(jìn)行。自發(fā)沉降還可以通過(guò)酸化在乳清蛋白膠束分歉液上進(jìn)行。優(yōu)選地，pH將為4.5，沉降時(shí)間在12小時(shí)以上?；蛘?，本發(fā)明中所用的乳清蛋白膠束的濃縮可以通過(guò)孩史量過(guò)濾膠束分散液來(lái)進(jìn)行。這種富集技術(shù)不僅能夠通過(guò)除去溶劑使乳清蛋白膠束濃縮，而且能夠除去非膠束化蛋白質(zhì)(例如天然蛋白質(zhì)或可溶性聚集物)。因此，最終產(chǎn)品基本上只包含膠束(如透射電子顯微術(shù)所檢查的那樣，參見(jiàn)圖9和10)。在這種情況下，在滲透物穿過(guò)膜的初始流速已經(jīng)降低至其初始值的20%后獲得可能達(dá)到的濃縮因子。這允許以80。/。以上的濃度獲得膠束。乳清蛋白膠束的進(jìn)一步加工可以在可采用本文所述的方法得到的膠束^L液上進(jìn)4亍。例如，為了調(diào)節(jié)乳清蛋白膠束的功能性，乳清蛋白膠束可以包有例如乳化劑如磷脂或其它包衣料如蛋白質(zhì)、肽、蛋白質(zhì)水解物或者樹(shù)膠如阿拉伯膠。當(dāng)使用蛋白質(zhì)作為包衣料時(shí)，其可以選自等電點(diǎn)顯著高于或低于乳清蛋白的任意蛋白質(zhì)。例如有魚(yú)精蛋白、乳鐵蛋白或一些米蛋白。當(dāng)使用蛋白質(zhì)水解物作為包衣料時(shí)，其優(yōu)選是來(lái)自諸如精蛋白、乳鐵蛋白、米蛋白、酪蛋白、乳清蛋白、小麥蛋白或大豆蛋白的蛋白質(zhì)的水解物或其混合物。優(yōu)選包衣是選自如下的乳化劑油酸丁酯硫酸鹽、甘油單酯和甘油二酯的雙乙?；剖狨ヮ?lèi)、甘油單酯的檸檬酸酯類(lèi)、硬脂?；轷Ｈ樗猁}及它們的混合物。圖17是油酸丁酯硫酸鹽的這類(lèi)包衣的示意圖。而且，共噴霧干燥(如本文進(jìn)一步所述)也產(chǎn)生了乳清蛋白膠束的包衣。也可以在乳清蛋白膠束上進(jìn)行諸如干燥、例如噴霧干燥、冷凍干燥、滾筒干燥等的進(jìn)一步加工。因此，乳清蛋白濃縮物可以在添加或不添加其它成分的情況下進(jìn)行噴霧干燥，可以用作傳送系統(tǒng)或構(gòu)成單元以用于各種方法、例如可消耗生產(chǎn)、美容應(yīng)用等。圖8顯示了在未添加任何其它成分的情況下通過(guò)噴霧干燥獲得的粉末，由于在噴霧干燥期間發(fā)生膠束聚集，其平均粒徑在ljim以上。乳清蛋白膠束粉末的通常的平均體積中間粒徑(D43)為45-55jim、優(yōu)選51fim。這些粉末的表面中間粒徑(D32)優(yōu)選為3-4nm、更優(yōu)選3.8nm。噴霧干燥后所得的粉末的水含量?jī)?yōu)選在10%以下、更優(yōu)選在4%以下。當(dāng)其包含至少卯％乳清蛋白、其中至少80%是膠束形式時(shí)，這種乳清蛋白膠束粉末被認(rèn)為是"純"的。另外，"純"的乳清蛋白膠束粉末對(duì)溶劑如水、甘油、乙醇、油、有機(jī)溶劑等具有高的結(jié)合量。粉末與水的結(jié)合量為至少50%、優(yōu)選至少卯％、最優(yōu)選至少100%。對(duì)于溶劑如甘油和乙醇而言，結(jié)合量為至少50%。乳清蛋白膠束粉末的這一特性使得它們可以被噴霧有或填充有選自肽、植物提取物、蛋白質(zhì)水解物、生物活性物、維生素、礦物質(zhì)、藥物、美容組分等的其它活性劑?；钚詣┛梢砸?.1-50%的量包括在粉末中。因此，粉末可以充當(dāng)那些功能性成分的載體。在噴霧干燥之前可以與乳清蛋白膠束或其濃縮物混合的另外的成分包括可溶性或不溶性鹽、肽、蛋白質(zhì)水解物、色素、脂肪、乳化劑、芳香劑、植物提取物、配體或生物活性物(礦物質(zhì)、維生素、藥物…)、奶、奶蛋白質(zhì)、脫脂奶粉、膠束酪蛋白、酪蛋白鹽、植物蛋白質(zhì)、氨基酸、多酚類(lèi)及它們的任意混合物。所得的混合乳清蛋白膠束粉末包含重量比為1:1至1:1000的乳清蛋白膠束和另外成分。這導(dǎo)致團(tuán)聚物還包含這些另外的成分，以致它們才艮據(jù)本發(fā)明可以用作呈現(xiàn)出另外的功能性質(zhì)和健康益處的摩擦介質(zhì)，所述另外的功能性質(zhì)和健康益處取決于所用的另外的成分。因此，這種混合粉末可充當(dāng)例如生物活性劑的載體。通過(guò)本發(fā)明獲得的乳清蛋白膠束粉末可以通過(guò)主要由中空球、但還由被破壞球組成的內(nèi)部結(jié)構(gòu)來(lái)表征(參見(jiàn)圖19)。中空球結(jié)構(gòu)可以容易地通過(guò)在噴霧干燥期間在WPM濃縮小滴內(nèi)形成蒸汽小滴來(lái)進(jìn)行解釋。當(dāng)蒸汽小滴由于溫度高于ioox:而離開(kāi)WPM小滴時(shí)留下了中空球。"骨架形狀"是因?yàn)樗畯男〉沃械恼舭l(fā)聯(lián)合小滴內(nèi)的外部壓力。在沿直徑切割顆粒后，通過(guò)SEM研究了球形中空球的內(nèi)部結(jié)構(gòu)(圖20，左圖)。顆粒的壁厚度為5fim左右并且看起來(lái)非常光滑，而內(nèi)部結(jié)構(gòu)具有更顆粒狀的外觀。增加放大率顯示，這種顆粒狀態(tài)事實(shí)上是由于存在初始WPM，其被融合以形成粉末顆粒的內(nèi)部基質(zhì)。令人感興趣的是，膠束的球形以及均勻的粒徑分布在噴霧干燥期間得以保留(圖20,右圖)。因此，在微觀基礎(chǔ)上，乳清蛋白膠束粉末的特征在于含有中空或被破壞球的完整和個(gè)體化乳清蛋白膠束的獨(dú)特顆粒形態(tài)學(xué)。乳清蛋白膠束粉末的特征在于非常高的流動(dòng)性，這賦予了使用和轉(zhuǎn)移簡(jiǎn)單的益處。這些粉末的休止角優(yōu)選在35。以下、更優(yōu)選在30。以下。如此小的休止角使得粉末可以例如在美容應(yīng)用中用作助流物質(zhì)。根據(jù)本發(fā)明，這些粉末還可以用作例如摩擦介質(zhì)、用作美容物質(zhì)或者用于生產(chǎn)美容組合物。粉末顆粒、即乳清蛋白膠束聚集物的尺寸以及乳清蛋白膠束本身的尺寸呈現(xiàn)出如下益處乳清蛋白膠束或其聚集物幾乎不能被感覺(jué)到，當(dāng)局部應(yīng)用時(shí)將充當(dāng)不刺激皮膚的摩擦劑。無(wú)論其形式如何(濃縮物、混懸液、干燥粉末等)，乳清蛋白膠束的一個(gè)重要特征是，乳清蛋白的基本膠束結(jié)構(gòu)被保留。圖15顯示了已經(jīng)被切開(kāi)、由此可以觀察乳清蛋白膠束個(gè)體的乳清蛋白粉末顆粒。另外，膠束結(jié)構(gòu)可以容易地在溶劑中重構(gòu)。例如，已經(jīng)顯示由乳清蛋白膠束濃縮物獲得的粉末可以容易地在室溫或50X:水中重新介軟。與初始濃縮物相比，乳清蛋白膠束的尺寸和結(jié)構(gòu)完全被保留。例如，在圖13中，在20%蛋白質(zhì)濃度噴霧干燥的乳清蛋白濃縮物已經(jīng)在50%蛋白質(zhì)濃度在50'C去離子水中重新分散。膠束的結(jié)構(gòu)已經(jīng)通過(guò)TEM進(jìn)行了探查并與圖IO進(jìn)行了比較。獲得了類(lèi)似的膠束形狀。通過(guò)動(dòng)態(tài)光散射發(fā)現(xiàn)膠束直徑為315nm,多介軟性指數(shù)為0.2。圖16還顯示了冷凍干燥乳清蛋白膠束粉末的分散液，其中膠束是重構(gòu)的。在重構(gòu)噴霧干燥或冷凍干燥粉末后在溶液中觀察到乳清蛋白膠束和僅少量聚集物的事實(shí)證明，乳清蛋白膠束就噴霧干燥、冷凍干燥等而言在物理學(xué)上是穩(wěn)定的。同樣值得一提的是，濃縮物如果調(diào)節(jié)至蛋白質(zhì)含量為10%則能夠經(jīng)受隨后的熱處理，所述熱處理在例如最多0.15M氯化鈉的存在下在pH7.0于85r進(jìn)行15分鐘，如圖11所示。作為對(duì)照，天然乳清蛋白分歉液(Prolacta90，來(lái)自拉克塔利斯公司，批號(hào)500658)在0.1M氯化鈉的存在下、在4%蛋白質(zhì)濃度形成了凝膠(參見(jiàn)圖12)。膠束結(jié)構(gòu)的高穩(wěn)定性在濃縮步驟期間也得以保持。這提供了如下益處膠束結(jié)構(gòu)所賦予的摩擦性質(zhì)在本發(fā)明的美容組合物的生產(chǎn)、貯存等中不會(huì)損失。根據(jù)本發(fā)明，乳清蛋白膠束或其聚集物可用作摩擦介質(zhì)。乳清蛋白膠束的聚集物可以是噴霧干燥或冷凍干燥粉末的形式。它們可以包含另外的成分，所述成分選自可溶性或不溶性鹽、色素、脂肪、乳化劑、芳香劑、植物提取物、配體或生物活性物(礦物質(zhì)、維生素、藥物...)及它們的任意混合物。根據(jù)本發(fā)明，乳清蛋白膠束或其所述的聚集物可用作美容劑或用于生產(chǎn)美容組合物。它們可以與其它活性劑組合，所述活性劑選自肽、植物提取物、蛋白質(zhì)水解物、生物活性物、維生素、礦物質(zhì)、藥物、美容組分及它們的混合物。優(yōu)選地，乳清蛋白膠束或其聚集物以至少1%、優(yōu)選5%以上、更優(yōu)選10%以上、甚至更優(yōu)選20%以上、最優(yōu)選高達(dá)50。/。的量包含在組合物中。乳清蛋白膠束可以以液體分敉液、混懸液、凝膠、乳膏劑或粉末的形式存在。優(yōu)選乳清蛋白在所述液體*液、混懸液、凝膠、乳青劑或粉末中的濃度在4%以上、優(yōu)選在10%以上。本發(fā)明中所用的乳清蛋白膠束具有100nm-900nm、優(yōu)選100-770nm、更優(yōu)選200-400nm的平均尺寸。另一方面，本發(fā)明中所用的乳清蛋白膠束聚集物可以具有l(wèi)pm以上的平均尺寸。所述乳清蛋白膠束或其聚集物可以用于生產(chǎn)香波、沐浴凝膠等。它們還可用于局部應(yīng)用，由此乳清蛋白膠束是液體M液、混懸液、乳膏劑、凝膠或粉末的形式。所述乳清蛋白膠束可以摻入到局部應(yīng)用的美容組合物中。根據(jù)實(shí)施方案，本發(fā)明提供了摩擦皮膚顆粒(skinparticles)的方法，該方法包括給皮膚應(yīng)用乳清蛋白膠束的步驟。乳清蛋白膠束可以是液體^ft液、混懸液、乳骨劑、亂歐或粉末的形式，或者可以在應(yīng)用前被摻入組合物中。膠束以至少1%、優(yōu)選5%以上、更優(yōu)選10%以上、甚至更優(yōu)選20%以上、最優(yōu)選高達(dá)50%的量包含在本發(fā)明的組合物中。優(yōu)選地，乳清蛋白在組合物中的濃度在1%以上、優(yōu)選在10%以上、更優(yōu)選在20。/。以上、最優(yōu)選在50%以上。組合物可以是溶液、乳膏劑、凝膠、糊劑、泡沫、噴霧劑等形式。根據(jù)實(shí)施方案，組合物是毛發(fā)護(hù)理產(chǎn)品，例如香波。其還可以是沐浴凝膠或身體/毛發(fā)香波。本發(fā)明還提供了生產(chǎn)美容組合物的方法，該方法包括如下步驟a.生產(chǎn)乳清蛋白膠束或其聚集物，和b.將所述膠束或其聚合物摻入組合物中。乳清蛋白膠束或其聚合物以及通過(guò)本發(fā)明的方法獲得的組合物例如是上文所述的那些。乳清蛋白膠束的摩擦性質(zhì)使得它們可用于本發(fā)明的摩擦皮膚顆粒的方法。這可以通過(guò)局部應(yīng)用混懸液、^t液、乳膏劑、凝膠或粉末形式的乳清蛋白膠束來(lái)進(jìn)行，所述乳清蛋白膠束可以原樣應(yīng)用或者與其它活性劑組合使用。這類(lèi)活性劑選自肽、植物提取物、蛋白質(zhì)水解物、生物活性物、維生素、礦物質(zhì)、藥物、美容組分等。此外，乳清蛋白膠束或其聚集物還可在應(yīng)用之前被摻入到組合物中。其中摻入有乳清蛋白膠束的組合物可以是從基礎(chǔ)乳骨劑組合物到精細(xì)制作的清洗溶液、皂類(lèi)、凝膠、泡沫、牙骨、噴霧劑、香波等。通過(guò)應(yīng)用乳清蛋白膠束作為美容劑所帶來(lái)的益處是不僅磨擦方面對(duì)于例如除去死皮細(xì)胞而言是令人感興趣的，而且膠束的特定性質(zhì)允許它們進(jìn)行其它功能。除了物理摩擦行為，帶有高的負(fù)電荷或正電荷的乳清蛋白定清除。以相同的方式，膠束的天然疏水性可以幫助從皮膚上清除親脂性雜質(zhì)而絕不會(huì)對(duì)皮膚產(chǎn)生攻擊性或刺激性。此外，已經(jīng)顯示，乳清蛋白膠束理想地適于用作乳化劑、增白劑、脂肪替代物、膠束酪蛋白替代物或起泡劑，因?yàn)樗鼈兡軌驅(qū)⒅竞?或空氣在含水系統(tǒng)中穩(wěn)定延長(zhǎng)的時(shí)間。泡沫穩(wěn)定性示于圖5，其比較了應(yīng)用非膠束化乳清蛋白與本發(fā)明中所用的乳清蛋白膠束。因此，乳清蛋白膠束可用作乳化劑，這種材料理想地適于乳化劑，因?yàn)樗兜肋m中并且應(yīng)用該材料不會(huì)產(chǎn)生不良?xì)馕?。另外，本發(fā)明的乳清蛋白膠束還可用作增白劑，以便可以使用一種化合物實(shí)現(xiàn)數(shù)個(gè)任務(wù)。由于乳清是供應(yīng)豐富的物質(zhì)，它的應(yīng)用降低了需要乳化劑、填充劑、增白劑或起泡劑的產(chǎn)品的成本。同樣，在乳清蛋白膠束作為乳化劑的作用中，它們不僅可用作例如乳膏劑或泡沫的穩(wěn)定劑，而且還可能幫助除去油性殘余物、提供完全的清潔作用。而且，乳清蛋白膠束可以與其它活性成分組合使用，所述的其它活性成分例如有乳鐵蛋白、吸水劑、潤(rùn)膚劑、止痛藥、收斂劑、抗氧化劑、抗微生物劑、抗病毒劑、抗炎劑、藥物、抗生素、物質(zhì)、酸、玫瑰露、甘油等。它們可以在香波中用作清潔劑、增白劑或甚至用作著色劑。它們還可以用于沐浴凝膠中。因此，乳清蛋白膠束(無(wú)論哪種形式)的應(yīng)用包括皮膚護(hù)理、口腔護(hù)理如牙骨、嗽口劑、清潔膠物質(zhì)等以及毛發(fā)護(hù)理。乳清蛋白膠束或其濃縮物根據(jù)應(yīng)用可原樣使用或者稀釋后使用。因此，本發(fā)明還提供了生產(chǎn)美容組合物的方法，其中按照例如上文所述的方法生產(chǎn)乳清蛋白膠束，并且其中將膠束進(jìn)一步摻入到組合物中。其中摻入有乳清蛋白膠束的組合物可以是從基礎(chǔ)乳骨劑組合物到精細(xì)制作的清洗溶液、皂類(lèi)、凝膠、泡沫、牙骨、噴霧劑、香波等。它們可以含有其它活性成分，所述的其它活性成分例如有乳4失蛋白、吸水劑、潤(rùn)膚劑、止痛藥、收斂劑、抗氧化劑、抗微生物劑、抗病毒劑、抗炎劑、藥物、抗生素、物質(zhì)、酸、玫瑰露、甘油、磺基琥珀酸酯鹽、烷基磺酸鹽、椰油基甜菜堿、黃原膠、EDTA、山梨酸鉀、大豆油、杏仁油、丙基三甲基季銨鹽、十六/十八醇聚氧乙烯-20-醚、十六醇、精油、植物油、氫化蓖麻油、19乳化劑、穩(wěn)定劑、尼泊金酯-DU(Paraben-DU)、芳香劑、月桂基葡糖普、聚氧乙烯月桂基醚硫酸銨、月桂基聚氧乙烯醚硫酸鈉、丁二醇、月桂?；“彼徕c、硬脂酸聚乙二醇-2-酯、十六/十八醇、Cleth-12、十八醇、mieticone(密替康)、尿嚢素、依地酸二鈉、依地酸四鈉、乙基己基甲氧基肉桂酸酯、甘草亭酸、sodiummethylcocyl(甲基椰油基鈉)、牛磺酸、BHT、氯化鈉、咪唑烷基脲、a-異甲基紫羅蘭酮、7jC楊酸千酯、丁基苯基、甲基丙醛、羥基異己基3-環(huán)己烯曱醛、7jc楊酸、聚乙烯、三乙醇胺、黃原膠、聚氧乙烯-60-氫化蓖麻油、二苯酮-4、咪唑烷基脲、癸基葡糖苷、二甲氨基乙醇(dimethylmea)、椰油酰胺基丙基甜菜堿、乙醇酸、PPG-2羥乙基椰油酰胺(PPG-2hydroxyethylcocamide)、甘油聚氧乙烯-7-醚、聚氧乙烯-120-甲基葡糖醚二油酸酯、椰油?；“彼徕c、苯氧乙醇、尼泊金甲酯、尼泊金丙酯、尼泊金丁酯、尼泊金乙酯、尼泊金異丁酯、薄荷醇香料、香茅醇、香葉醇、己基肉桂醛、苧烯等。通常而言，組合物將包含占粉末的至少1%、5%、10%、20%、一直到50%量的乳清蛋白膠束或其聚集物。下述實(shí)施例非限制性地解釋"^兌明了本發(fā)明。實(shí)施例本發(fā)明參考下述實(shí)施例做了進(jìn)一步定義，所述實(shí)施例詳細(xì)描述了本發(fā)明的膠束的制備。本文描述和要求保護(hù)的發(fā)明在范圍方面不受本文所公開(kāi)的具體實(shí)施方案的限制，因?yàn)檫@些實(shí)施方案意欲作為本發(fā)明各方面的解釋。任何等同的實(shí)施方案意欲落入本發(fā)明的范圍。確實(shí)，除了本文顯示和描述的那些以外，本發(fā)明的各種變通在上述描述的基礎(chǔ)上對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn)的。這類(lèi)變通也意欲落入所附權(quán)利要求的范圍之內(nèi)。實(shí)施例l:p-乳球蛋白的膠束化從戴維思科公司(Davisco)(LeSueur，MN，USA)獲得卩-乳球蛋白(批號(hào)JE002-8-922,13-12-2000)。通過(guò)超濾和離子交換色譜法由甜乳清純化蛋白質(zhì)。粉末的組成為89.7%蛋白質(zhì)、8.85%水份、1.36%灰份(0.079%Ca2+、0.013%Mg2+、0.097%K+、0.576%Na+、0.050%Cl_)。所用的所有其它試劑均為分析級(jí)(默克7〉司(Merck),Darmstadt,德國(guó))。在0.2%濃度如下制得蛋白質(zhì)溶液將p-乳球蛋白溶于MilliQ⑧水中，于20。C攪拌2小時(shí)。然后通過(guò)添加鹽酸調(diào)節(jié)等分試樣的pH為5.0、5.2、5.4、5.6、5.8、6.0、6.2、6.4、6.6、6.8、7.0。將溶液裝入20ml玻璃小瓶(安捷倫技術(shù)公司(AgilentTechnologies))中，用含有^TFE密封劑的鋁夾膜密封。將溶液于85"C加熱15分鐘(達(dá)到該溫度的時(shí)間為2.30-3.00分鐘)。在熱處理后，將樣品于水水中冷卻至20X:。產(chǎn)品的目視外觀(圖l)顯示膠束化的最佳pH為5.8。實(shí)施例2:乳清蛋白分離物的膠束化從戴維思科公司(LeSueur，MN，USA)獲得乳清蛋白分離物(WPI)(Bipro,批號(hào)JE032-l-420)。粉末組成才艮告與于表l中。在3.4%蛋白質(zhì)濃度如下制得蛋白質(zhì)溶液將乳清蛋白粉末溶于MilliQ⑧水(密里博公司(Millipore))中，于20。C攪拌2小時(shí)。初始pH為7.2。然后通過(guò)添加0.1N鹽酸調(diào)節(jié)等分試樣的pH為5.6、5.8、6.0、6.2、6.4和6.6。將溶液裝入20ml玻璃小瓶(安捷倫技術(shù)公司)中，用含有^/PTFE密封劑的鋁夾膜密封。將溶液于851C加熱15分鐘(達(dá)到該溫度的時(shí)間為2.30-2.50分鐘)。在熱處理后，將樣品于冰水中冷卻至20X:。已經(jīng)在500nm和25C測(cè)定了經(jīng)熱處理的乳清蛋白的濁度，樣品被稀釋以使得測(cè)定值在0.1-3個(gè)吸光度單位內(nèi)(分光光度計(jì)Uvikon810，控創(chuàng)儀器公司(KontronInstrument))。計(jì)算初始蛋白質(zhì)濃度3.4%的值。通過(guò)對(duì)于同一樣品而言在10分鐘內(nèi)于500nm測(cè)定的吸光度的穩(wěn)定(變動(dòng)小于初始值的5%)。認(rèn)為達(dá)到了膠束化的pH,如圖2所解釋的那樣。對(duì)于該產(chǎn)品，膠束化的最佳pH為6.0至6.2。對(duì)于這一在熱處理之前調(diào)節(jié)的pH,穩(wěn)定的濁度為21，在離心后通過(guò)280nm處的吸光度所評(píng)價(jià)的殘余可溶性蛋白質(zhì)為1.9%。我們得出如表2:WPI的組成和膠束化后的樣品特征<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>實(shí)施例3:膠束的微觀觀測(cè)膠束的制備在2。/。蛋白質(zhì)濃度如下制得蛋白質(zhì)溶液:將乳清蛋白粉末(WPI90批號(hào)989/2，拉克塔利斯公司，Retier，法國(guó))溶于MilliQ⑧水(密里博公司)中，于20。C攪拌2小時(shí)。然后采用O.lNHCl或O.lNNaOH調(diào)節(jié)等分試樣的pH。將溶液裝入20ml玻璃小瓶(安捷倫技術(shù)公司)中，用含有^PTFE密封劑的鋁夾膜密封。將溶液于85X:加熱15分鐘(達(dá)到該溫度的時(shí)間為2.30-2.50分鐘)。在熱處理后，將樣品于冰水中冷卻至201C。對(duì)于鈣產(chǎn)品，膠束化的最佳pH為7.4。微觀觀測(cè)將液體膠束樣品包埋于瓊脂凝膠試管中。通過(guò)浸入2.5%戊二醛在O.IM、pH7.4卡可酸鹽緩沖液中的溶液中實(shí)現(xiàn)固定，用2%四氧化鋨在相同緩沖液中的溶液進(jìn)行后固定，兩種溶液都含有0.04%釕紅。在一系列各濃度的乙醇(70%、80%、90%、96%、100%乙醇)中脫水后，將樣品^JVSpurr樹(shù)脂(Spurr/乙醇為1:1，1:2，100%)。樹(shù)脂聚合(70。C，48小時(shí))后，用萊卡超切割UCT超薄切片機(jī)切割出半薄和超薄切片。將超薄切片用乙酸雙氧鈾水溶液和檸檬酸鉛染色，然后通過(guò)透射電子顯微術(shù)(菲利浦CM12，80kV)進(jìn)4于檢查。TEM顯微照片在圖3中給出。所得膠束呈現(xiàn)出直徑200nm的球形。粒度分布針對(duì)通過(guò)將lwt%p-乳球蛋白分軟液于85C在pH4.25(帶正電荷，；-電位約+25mV)和pH6.0(帶負(fù)電荷，；-電位約-30mV)進(jìn)行15分鐘熱處理后得到的膠束測(cè)量了它們基于強(qiáng)度的尺寸分布。在pH4.25時(shí)膠束的Z-均流體動(dòng)力學(xué)直徑為229.3nm，在pH6.0時(shí)為227.2nm。采用動(dòng)態(tài)光散射跟蹤了(5-LG和乳清蛋白聚集物。使用裝配有633nm激光發(fā)射和4.0mW功率的NanosizerZS儀器(馬爾文儀器有限公司(MalvernInstruments),UK)。該儀器以反向散射模式使用，檢測(cè)在173。散射角進(jìn)行。這使得渾濁樣品中的多重散射信號(hào)顯著減少。樣品置于方形石英試池(Hellma，光程長(zhǎng)度lcm)中。光束的徑長(zhǎng)由儀器根據(jù)樣品濁度自動(dòng)設(shè)置(衰減)。由散射強(qiáng)度的波動(dòng)計(jì)算自相關(guān)函數(shù)。結(jié)果在圖6中給出。其顯示，平均顆粒的特征在于非常窄的多分散性指數(shù)(<0.200)。實(shí)施例4:p-乳球蛋白在恒定pH的膠束化使用2%p-乳球蛋白的水溶液重復(fù)實(shí)施例l所述的方法。在加入精氨酸鹽酸鹽溶液后，該溶液的pH已經(jīng)調(diào)節(jié)至7.0，以獲得5-200mM的最終鹽濃度和l。/。的最終P-乳球蛋白濃度。隨后進(jìn)行熱處理(80CIO分鐘，約2分鐘加熱至目標(biāo)溫度)以產(chǎn)生膠束。結(jié)果在表4中給出，其清楚地顯示，只有在約50-70mM的離子強(qiáng)度范圍內(nèi)才能觀察到顯著的混濁，表明存在乳清蛋白膠束。實(shí)施例5:增白劑的制備按照實(shí)施例2處置天然乳清蛋白(WPI95批號(hào)848，拉克塔利斯公司；8wt-。/。水溶液)。采用裝配有2mm測(cè)量池的MacBethCE-XTHD6510。SCE儀器以反式反射模式測(cè)定所得產(chǎn)品的亮度(L)。所得亮度為L(zhǎng)=74.8，其可以全脂奶的值L-74.5的不相上下。實(shí)施例6:制備含水泡沫將天然P-乳球蛋白(Biopure，戴維思科公司，批號(hào)JE002-8-922，2wt-。/。水溶液)與120mM精氨酸鹽酸鹽溶液混合，以便最終p-乳球蛋白濃度為1wt.%和精氨酸鹽酸鹽為60mM。然后通過(guò)添加1N鹽酸調(diào)節(jié)pH至7.0。然后將混合物于80X:熱處理10分鐘，以便90%的初始|5-乳球蛋白轉(zhuǎn)化為Z-均直徑為130nm的膠束。在本例中，采用NanosizerZS儀器(馬爾文儀器有限公司，UK)測(cè)定膠束的直徑。將樣品倒入石英比色杯中，自動(dòng)記錄散射光的變化。釆用累積量方法擬合所得的自相關(guān)函數(shù)，以便計(jì)算顆粒的擴(kuò)散系數(shù)，之后采用斯托克斯-愛(ài)因斯坦(Stokes-Einstein)定律計(jì)算Z-均流體動(dòng)力學(xué)直徑。對(duì)于該測(cè)定，溶劑的折射率取值為1.33,膠束的折射率取值為1.45。然后通過(guò)經(jīng)由產(chǎn)生12-16nm氣泡的玻璃料(glassMt)噴射氮?dú)?，從而?0ml所得的p-乳球蛋白膠束分散液形成泡沫，以產(chǎn)生采用標(biāo)準(zhǔn)化FoamscanTM(伊特概念公司(ITConcept))儀器測(cè)定體積為180cm3的泡沫。然后于26t:采用圖像分析隨時(shí)間的推移跟蹤泡沫的體積穩(wěn)定性，并與由如下處理的P-乳球蛋白獲得的泡沫的穩(wěn)定性進(jìn)行比較(5-乳球蛋白在相同條件下處理，但是不使用精氨酸鹽酸鹽，其中沒(méi)有形成膠束。圖5顯示，泡沫的體積穩(wěn)定性由于(5-乳球蛋白膠束的存在被顯著改善。實(shí)施例7:通過(guò)噴霧干燥獲得的粉末狀乳清蛋白膠束原料蛋白質(zhì)含量為90。/o的乳清蛋白分離物(WPI，Prolacta90⑧，來(lái)自拉克塔利斯公司，R6tiers，法國(guó))可食用乳糖麥芽糖糊精合劑DE39去離子水1M可食用鹽酸24方法采用雙套層100L水槽，將Prolacta卯⑧粉末于50。C以10wt。/。的蛋白質(zhì)濃度分散于去離子水中，同時(shí)輕微攪拌以避免形成泡沫，即，將llkgProlacta卯⑧介軟于89kg去離子水中。分散1小時(shí)后，通過(guò)添加HC1使分散液的pH調(diào)節(jié)至膠束化pH(在該例中約6.3)。將分散液的溫度升至85"C并維持15分鐘，以產(chǎn)生乳清蛋白膠束。15分鐘后，溫度降至50X:，將10wt%乳清蛋白膠束^L液分出兩批，每批50kg。在第一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中，將20kg乳糖于50。C^:于50kg膠束^L液中并攪拌30分鐘。類(lèi)似地，將20kg麥芽糖糊精合劑DE39加入剩余的50kg乳清蛋白膠束分散液中。然后，將兩種混合物以15L/h的流速?lài)婌F干;^VNIROSD6.3N塔中。輸入空氣溫度為140■€，輸出空氣溫度為80X:。所得粉末的水含量在5%以下。在噴霧干燥之前和之后，采用動(dòng)態(tài)光散射在乳糖和麥芽糖糊精合劑(DE39)的存在下、在水中測(cè)定乳清蛋白膠束的尺寸。為了在乳清蛋白膠束的粘度的稀釋方案內(nèi)，通過(guò)在噴霧干燥前將*液稀釋或者將粉末重構(gòu)將總蛋白質(zhì)濃度設(shè)置為0.4%。使用NanosizerZS儀器(馬爾文儀器有限公司)，由20個(gè)測(cè)定值計(jì)算膠束直徑的平均值。測(cè)得在乳糖和麥芽糖糊精合劑(DE39)的存在下乳清蛋白膠束的粒徑分別為310.4nm和306.6nm。粉末重構(gòu)后，測(cè)得各自的粒徑分別為265.3nm和268.5nm。這些測(cè)定證實(shí)，乳清蛋白膠束就噴霧干燥而言在物理上是穩(wěn)定的。該結(jié)果通過(guò)在1%磷鎢酸的存在下、于pH7采用負(fù)染色對(duì)在水中的0.1wt。/。乳清蛋白膠束分散液進(jìn)行的TEM顯微術(shù)觀察結(jié)果得以證實(shí)。使用于80kV運(yùn)行的菲利浦CM12透射電子顯微鏡。在噴霧干燥前和在經(jīng)噴霧干燥的粉末重構(gòu)后在溶液中觀察乳清蛋白膠束。未檢測(cè)到形態(tài)學(xué)和結(jié)構(gòu)的差異。實(shí)施例8:蒸發(fā)濃縮已經(jīng)將來(lái)自拉克塔利斯公司的乳清蛋白分離物Prolacta卯(lo500648)于15t:以4。/o蛋白質(zhì)濃度在軟水中重構(gòu)，以獲得最終批量為2500kg。通過(guò)添加1M鹽酸調(diào)節(jié)pH，以便最終pH值為5.90。將乳清蛋白分狀液以5001/h的流速加壓穿iiH板APV-mix熱交換器。于60X:進(jìn)行預(yù)熱，然后于85'C熱處理15分鐘。通過(guò)采用動(dòng)態(tài)光散射測(cè)定粒徑和于500nm測(cè)定濁度來(lái)檢測(cè)乳清蛋白膠束的形成。所得的4%乳清蛋白膠束^1液表征如下顆粒的流體動(dòng)力學(xué)半徑為250nm，多*性指數(shù)為0.13，濁度為80。然后將乳清蛋白膠束*液以5001/h的流速送入Scheffers蒸發(fā)器中。調(diào)節(jié)蒸發(fā)器的溫度和真空，以便生產(chǎn)蛋白質(zhì)濃度為20%的500kg乳清蛋白膠束濃縮物并冷卻至4"C。實(shí)施例9:通過(guò)微量過(guò)濾法富集已經(jīng)將來(lái)自拉克塔利斯公司的乳清蛋白分離物Prolacta90(lo500648)于15X:以4%蛋白質(zhì)濃度在軟水中重構(gòu)，以獲得最終批量為2500kg。通過(guò)添加1M鹽酸調(diào)節(jié)pH，以便最終pH值為5.卯。將乳清蛋白分散液以5001/h的流速加壓穿it^L-板APV-mix熱交換器。于60X:進(jìn)行預(yù)熱，然后于85匸熱處理15分鐘。通過(guò)采用動(dòng)態(tài)光散射測(cè)定粒徑和于500nm測(cè)定濁度來(lái)檢測(cè)乳清蛋白膠束的形成。所得的4%乳清蛋白膠束*';^征如下顆粒的流體動(dòng)力學(xué)半徑為260nm,多M性指數(shù)為0.07，法度為80。還通過(guò)TEM檢查蛋白質(zhì)的膠束形式，可以清楚地看到膠束結(jié)構(gòu)，其平均粒徑為150-200nm(圖9)。可以將乳清蛋白膠束分散液冷卻至4'C以供貯存或直接用于以1801/h的流速送入裝配有6.8m2CarbosepM14薄膜的過(guò)濾部件上。在該例中，乳清蛋白膠束的濃縮在10-70'C下進(jìn)行直至滲透流速達(dá)到701/h。在該例中，最終乳清蛋白濃縮物含有20%蛋白質(zhì)。通過(guò)TEM檢測(cè)濃縮物中膠束的結(jié)構(gòu)，可以清楚地看出，與微量過(guò)濾前的4%乳清蛋白分散液相比沒(méi)有顯著變化(圖10)。實(shí)施例10:包含至少90%乳清蛋白的乳清蛋白膠束粉末將通過(guò)孩i量過(guò)濾在20%蛋白質(zhì)(參見(jiàn)上文實(shí)施例)獲得的200kg乳清蛋白膠束濃縮物以25kg/h的產(chǎn)品流速采用霧化噴口(0-O.5mm，噴霧角=65°，壓力=40巴)注入NiroSD6,3N塔中。產(chǎn)品輸入溫度為，輸出溫度為75'C。塔中氣流為150m3/h。粉末的含水量在4%以下，粉末的特征為非常高的流動(dòng)性。對(duì)粉末進(jìn)行掃描電子顯微術(shù)顯示顆粒非常圓，^J!見(jiàn)直徑為10至100nm(圖8)。實(shí)施例ll:混合的乳清蛋白膠束粉末將20kg乳清蛋白膠束濃縮物與1.7kg麥芽糖糊精合劑DE39混合，以便粉末中最終的乳清蛋白膠束:麥芽糖糊精合劑的比例為70/30。將該混合物以25kg/h的產(chǎn)品流速采用霧化噴口(0=0.5mm，噴霧角-65。，壓力=40巴)注入NiroSD6,3N塔中。產(chǎn)品輸入溫度為150'C，輸出溫度為75"C。塔中氣流為150m3/h。粉末的含水量在4%以下，粉末的特征為非常高的流動(dòng)性。當(dāng)實(shí)施例10和11的粉末在水中重構(gòu)后，其基本上包含具有與乳清蛋白膠束濃縮物相同的結(jié)構(gòu)和形態(tài)學(xué)的膠束。實(shí)施例12:包含3.8%乳清蛋白膠束的美容組合物處方.去皮(exfoliating)淋浴凝膠<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>方法將20%濃度的WPM和玫瑰露溫?zé)嶂?0°C,然后加入甘油和黃原膠。將該混合物加入烷基磺酸鹽、椰油基甜菜堿、磺基琥珀酸酯鹽和EDTA中。將所有成分通過(guò)攪拌進(jìn)行混合，然后加入山梨酸鉀和芳香劑。實(shí)施例17:包含11.8%乳清蛋白膠束的美容組合物處方.WPM去屑洗液<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>十六/十八醇聚氧乙烯-20-醚1-5十六醇1-5尼泊金酯-DU0.1-2芳香劑0.1-1方法將20。/。濃度的WPM溫?zé)嶂?0。C,然后加入甘油和丙基三曱基季銨鹽。加入熔化的油相(大豆油、CreamMakerWax、十六/十八醇聚氧乙烯-20-醚、椰油基甜菜堿、十六醇)(7(TC)并攪拌至獲得均一^t液。將該混合物在室溫下冷卻，然后加入尼泊金酯-DU和芳香劑。29權(quán)利要求1.蛋白膠束、尤其是乳清蛋白膠束或其聚集物作為磨擦介質(zhì)的用途。2.根據(jù)權(quán)利要求l的用途，其中聚集物包含另外的選自如下的成分可溶性或不溶性鹽、肽、蛋白質(zhì)水解物、色素、脂肪、乳化劑、芳香劑、植物提取物、配體或生物活性物如礦物質(zhì)、維生素、藥物、奶、奶蛋白質(zhì)、脫脂奶粉、膠束酪蛋白、酪蛋白鹽、植物蛋白質(zhì)、M酸、多酚類(lèi)及它們的任意混合物。3.乳清蛋白膠束或其聚集物作為美容劑的用途。4.乳清蛋白膠束或其聚集物在制備美容組合物中的用途。5.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的用途，其中乳清蛋白膠束或其聚集物與其它活性劑組合。6.權(quán)利要求5的用途，其中活性劑選自肽、植物提取物、蛋白質(zhì)水解物、生物活性物、維生素、礦物質(zhì)、藥物、美容組分及它們的混合物。7.根據(jù)權(quán)利要求4-6的用途，其中乳清蛋白膠束或其聚集物以至少1%、優(yōu)選至少5%、更優(yōu)選至少10%、甚至更優(yōu)選至少20%、最優(yōu)選高達(dá)50%的量包含在組合物中。8.根據(jù)權(quán)利要求l-7任一項(xiàng)的用途，其中乳清蛋白膠束以液體分散液、混懸液、凝膠、乳膏劑或粉末的形式存在。9.根據(jù)權(quán)利要求5的用途，其中乳清蛋白的濃度為在4%以上、優(yōu)選在10%以上。10.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的用途，其中乳清蛋白膠束具有100nm至900nm的平均尺寸。11.根據(jù)權(quán)利要求10的用途，其中乳清蛋白膠束具有100至770nm、優(yōu)選200至400nm的平均尺寸。12.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的用途，其中乳清蛋白膠束聚集物具有l(wèi)nm以上的平均尺寸。13.根據(jù)權(quán)利要求4-12任一項(xiàng)的用途，其中美容組合物是香波。14.根據(jù)權(quán)利要求4-12任一項(xiàng)的用途，其中美容組合物是沐浴凝膠。15.蛋白質(zhì)膠束如乳清蛋白或酪蛋白膠束的局部應(yīng)用。16.根據(jù)權(quán)利要求15的局部應(yīng)用，其中乳清蛋白膠束是液體^i液、混懸液、乳膏劑、凝膠或粉末的形式。17.根據(jù)權(quán)利要求15或16任一項(xiàng)的局部應(yīng)用，其中乳清蛋白膠束被摻入到美容組合物中。18.摩擦皮膚顆粒的方法，該方法包括給皮膚應(yīng)用乳清蛋白膠束的步19.根據(jù)權(quán)利要求18的方法，其中乳清蛋白膠束是液體^t液、混懸液、乳膏劑、凝膠或粉末的形式。20.根據(jù)權(quán)利要求18或19任一項(xiàng)的方法，其中乳清蛋白膠束在應(yīng)用前被摻入到組合物中。21.美容組合物，該組合物包含磨擦介質(zhì)，所述磨擦介質(zhì)包含蛋白質(zhì)如乳清蛋白或酪蛋白膠束或其聚集物。22.根據(jù)權(quán)利要求21的組合物，其中乳清蛋白膠束以至少1%、優(yōu)選至少5%、更優(yōu)選至少10%、甚至更優(yōu)選至少20%、最優(yōu)選高達(dá)50%的量包含在組合物中。23.根據(jù)權(quán)利要求21和22的組合物，其中乳清蛋白膠束具有100nm至卯0nm的平均尺寸。24.根據(jù)權(quán)利要求21-23的組合物，其中乳清蛋白膠束聚集物具有l(wèi)jiin以上的平均尺寸。25.權(quán)利要求21-24的組合物，其中乳清蛋白的濃度在l。/。以上、優(yōu)選在10%以上、更優(yōu)選在20。/。以上、最優(yōu)選在50。/。以上。26.根據(jù)權(quán)利要求21-25任一項(xiàng)的組合物，所述組合物是溶液、乳青劑、凝膠、糊劑、泡沫、噴霧劑、香波等形式。27.根據(jù)權(quán)利要求21-26任一項(xiàng)的組合物，為身體/毛發(fā)護(hù)理產(chǎn)品。28.根據(jù)權(quán)利要求27的組合物，為香波。29.根據(jù)權(quán)利要求21-26任一項(xiàng)的組合物，為沐浴凝膠產(chǎn)品。30.生產(chǎn)美容組合物的方法，該方法包括如下步驟a.生產(chǎn)乳清蛋白膠束或其聚集物，和b.將所述膠束或其聚合物摻入組合物中。31.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中乳清蛋白膠束具有100nm至900nm的平均尺寸。32.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中乳清蛋白膠束聚集物具有l(wèi)fim以上的平均尺寸。33.根據(jù)權(quán)利要求30-32的方法，其中乳清蛋白膠束是混懸液、分散液、乳膏劑、凝膠或干燥粉末的形式。34.根據(jù)權(quán)利要求30-33的方法，其中摻入有乳清蛋白膠束或其聚集物的組合物是溶液、糊劑、凝膠、乳膏劑、泡沫或噴霧劑的形式。35.根據(jù)權(quán)利要求30-34任一項(xiàng)的方法，其中摻入有乳清蛋白膠束或其聚集物的組合物是香波。36.可通過(guò)權(quán)利要求30-35任一項(xiàng)的方法獲得的美容組合物。全文摘要本發(fā)明涉及蛋白膠束如乳清蛋白或酪蛋白膠束的局部應(yīng)用。其還涉及可通過(guò)包括如下步驟的方法獲得的美容組合物a.生產(chǎn)乳清蛋白膠束或其聚集物，和b.將所述膠束或其聚合物摻入組合物中。其還涉及乳清蛋白膠束或其聚集物作為美容劑的用途。其還涉及蛋白膠束、尤其是乳清蛋白膠束或其聚集物作為摩擦介質(zhì)的用途。文檔編號(hào)A61K8/64GK101453980SQ200780019326公開(kāi)日2009年6月10日申請(qǐng)日期2007年3月26日優(yōu)先權(quán)日2006年3月27日發(fā)明者C·J·E·施密特,L·J·R·博韋托申請(qǐng)人:雀巢產(chǎn)品技術(shù)援助有限公司