專利名稱：抗肥胖藥及其利用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗肥胖藥及肥胖的治療方法等。
背景技術(shù)：
1994年鑒定出了肥胖和糖尿病的模型動物ob/ob小鼠的致病基因， 由此表明，瘦素缺陷是肥胖和糖尿病的病因(非專利文獻1)。由脂肪細 胞分泌的痩素作用于作為攝食調(diào)節(jié)的初級中樞的下丘腦弓狀核，抑制在 弓狀核表達的攝食亢進肽neuropeptide Y(NPY)的表達，并且增強作為 攝食抑制肽的a-MSH前體pro叩iomelanocortin(POMC)的表達，由此 向負方向調(diào)節(jié)能量平衡(非專利文獻2、 3)。但是，通常肥胖者的血中瘦 素濃度高，對肥胖者施用瘦素并未見充分的抗肥胖作用(非專利文獻4、 5)。這種結(jié)果啟示，瘦素抗性、即瘦素信號障礙可能是肥胖發(fā)病的原因。
作為目前臨床應(yīng)用的主要的抗肥胖藥，有腦內(nèi)去甲腎上腺素的重吸 收抑制劑馬吲咮、腦內(nèi)去甲腎上腺素/5-羥色胺的重吸收抑制劑西布曲 明、大麻素受體l的選擇性拮抗劑利莫那班(Rimonabant)等，任一藥物 均不具有抑制NPY或增強POMC的作用。另一方面，啟示了神經(jīng)營養(yǎng) 因子ciliary neurotrophic factor(CNTF)通過與瘦素相同的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系 統(tǒng)表現(xiàn)出抗肥胖作用，目前臨床應(yīng)用正在不斷發(fā)展，但在施用了CNTF 的患者中產(chǎn)生抗CNTF的抗體成為了問題(非專利文獻6)。
非專利文獻1: Zhang. Y. et al. Nature. 1994. 372: 425-432.
非專利文獻2: Stephens, T. W. et al. Nature. 1995. 377: 530-532.
非專利文獻3: Schwartz, M. W. et al. Diabetes. 1997. 46: 2119-2123.
非專利文獻4: Considine, R. V. et al. The New England Journal of Medicine. 1996. 334: 292-295.
非專利文獻5: Heymsfield, S. B. et al. JAMA. 1999. 282: 1568-1575.非專利文獻6: Korner, J. et al. The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism. 2004. 89: 2616-2621.
非專利文獻7: Sato, I. et al. The Journal of Neuroscience. 2005. 25: 8657-8664.
非專利文獻 8 : Niswender, K. D. et al. Frontiers in Neuroendocrinology. 2003. 24: 1-10.

發(fā)明內(nèi)容
期望發(fā)現(xiàn)代替瘦素、通過作用于弓狀核中的NPY神經(jīng)元和POMC 神經(jīng)元而發(fā)揮抗肥胖效果的藥物。本發(fā)明的課題在于，實現(xiàn)這種期望， 即提供新型抗肥胖藥及使用其的治療方法等。
本發(fā)明人等在使用下丘腦器官培養(yǎng)的研究中闡明了，攝食抑制激素 胰島素通過GABA神經(jīng)元抑制弓狀核的NPY表達(非專利文獻7)。得 到該見解后，本發(fā)明人等著眼于確認在下丘腦中胰島素和瘦素的信號轉(zhuǎn) 導(dǎo)系統(tǒng)中存在串話(非專利文獻8)，從而i人為下丘腦弓狀核中的GABA 系統(tǒng)的活化可能會增強瘦素受體下游的信號。瘦素信號的增強與抗肥胖 效果的發(fā)揮相關(guān)。在這種考慮下，本發(fā)明人等為了發(fā)現(xiàn)通過作用于NPY 神經(jīng)元及POMC神經(jīng)元而發(fā)揮抗肥胖效果的藥物進行了深入研究。首 先，著眼于GABAb受體，建立了 GABAB受體激動劑通過增強痩素信 號發(fā)揮抗肥胖效果的假說。然后，構(gòu)建將作為GABAB受體激動劑代表 的巴氯芬施用于肥胖模型動物(瘦素受體缺陷模型db/db小鼠)的實驗系 統(tǒng)，嘗試驗證該假說。其結(jié)果是，在巴氯芬給藥組中可見顯著的攝食抑 制和體重增加抑制，同時可見顯著的血中瘦素濃度和血中脂聯(lián)素濃度的 增加(具體參照后述實施例)。而且，在巴氯芬給藥組的下丘腦弓狀核中
可見NPY mRNA的表達抑制及POMC mRNA的表達增強，啟示了巴 氯芬通過對弓狀核的NPY神經(jīng)元及POMC神經(jīng)元的作用而發(fā)揮抗肥胖 效果。該結(jié)果證明巴氯芬作為抗肥胖藥有效，另一方面表明，并不限于 巴氯芬，與巴氯芬同樣地能夠增強GABAB受體介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的物質(zhì)、 即其他的GABAB受體激動劑也有望作為抗肥胖藥的候補。
而且，在更接近人的肥胖模型動物、通過施與高脂肪飲食而誘導(dǎo)的
4飲食性肥胖小鼠(diet-induced obese mice:DIO小鼠)中，巴氯芬的施用 也表現(xiàn)出了攝食抑制效果和體重增加抑制效果，抑制了下丘腦弓狀核中 的NPY mRNA的表達，并且增強了 POMC mRNA的表達。而且，在 DIO小鼠中，施用其他的GABAB受體激動劑3-氨基丙基(甲基)次膦酸 (3國 aminopropyl(methyl)phosphinic acid)和 3-氛基丙基膦酸 (3-aminopropylphosphonic acid)后表現(xiàn)出與巴氯芬相同的抗月巴胖效果。
但是，巴氯芬中存在R構(gòu)型(R-對映異構(gòu)體)和S構(gòu)型(S-對映異構(gòu) 體)，進一步研究的結(jié)果確定，前者具有特別強的抗肥胖效果。
本發(fā)明主要基于上述見解完成，本發(fā)明的第一方面提供以下的抗肥 胖藥。一種抗肥胖藥，含有GABAB受體激動劑或其在藥理學(xué)上可接受
的鹽作為有效成分。如1卜[3中任一項所述的抗肥胖藥，作用于下丘腦弓狀核中的
NPY神經(jīng)元和POMC神經(jīng)元而發(fā)揮抗肥胖效果。^各 濃度溶解于飲用水中，對巴氯芬給藥組進行5周的連續(xù)經(jīng)口給藥。經(jīng)時 測定(士)-巴氯芬5周給藥期間的攝食量、體重及飲水量。
242.實驗的結(jié)果和討論
db/db小鼠中(土)-巴氯芬的施用，在100xl(T6M及40xl06M給藥組 中自給藥開始l周起顯著抑制了攝食量及體重增加量，兩者的顯著抑制 一直持續(xù)到實驗結(jié)束時。在10xl(^M給藥組中自給藥開始2周起、在 4xl(T6M給藥組中自給藥開始4周起可見攝食量及體重增加的顯著抑 制，兩者的顯著抑制一直持續(xù)到實驗結(jié)束時(

圖14)。估算每天的巴氯芬 的施用量為100x10 6M為5 mg/kg/day、 40xl06M為2 mg/kg/day、 10xl06M為0.5 mg/kg/day、 4xlO_6M為0.2 mg/kg/day。
<db/db小鼠中巴氯芬之外的GABAB受體激動劑的抗肥胖作用的研
究>
以研究巴氯芬之外的GABAB受體激動劑的施用在db/db小鼠中是 否也表現(xiàn)出抗肥胖作用作為目的，將3-氨基丙基(甲基)次膦酸(目錄編 號EA畫133， CAS Number: 127729-35-5, BIOMOL 乂〉司)(以下， SKF97541)及3-氨基丙基膦酸(目錄編號268615， CAS Number: 13138-33-5， Sigma-Aldrich公司)(以下、3-APPA)向db/db小鼠連續(xù)經(jīng) 口給藥，對它們的抗肥胖作用進行了研究。而且，也對非肥胖模型動物 db/+m小鼠的作用進行了比較研究。
1.實驗方法
購入5周齡的雄性C57BL/KsJ-db/db小鼠(db/db小鼠體重 19~25g、日本SLC)，使用小籠進行單獨飼養(yǎng)。向db/db小鼠施與普通 食物顆粒(CE-2)，使其自由飲水、自由攝食。自飼養(yǎng)開始時，每天測定 體重和24小時攝食量。在飼養(yǎng)開始第3天，禁食6小時后眼窩采血， 測定血糖值和血中胰島素濃度。以使體重、24小時攝食量、血糖值、血 中胰島素濃度均等的方式將db/db小鼠分為3組(各組10只)，設(shè)為對照 組、SKF97541給藥組及3-APPA給藥組。將SKF97541以10xlO_6M、 將3-APPA以100xlO"M的濃度溶解于飲用水中，進行5周的連續(xù)經(jīng)口 給藥，經(jīng)時測定給藥期間的攝食量及體重。對db/+m小鼠也同樣將 SKF97541(10xl(r6M)或3-APPA (10(^1()-6]\1)溶解于飲用水中并進行經(jīng) 口給藥，經(jīng)時測定攝食量及體重。2.實驗的結(jié)果和討論
3-APPA的施用自給藥開始1周起、SKF97541的施用自給藥開始2 周起顯著抑制了累積攝食量(圖15a)，并且顯著抑制一直持續(xù)到實驗結(jié) 束時。而且，SKF97541及3-APPA的施用自給藥開始1周起顯著抑制 了體重增加量(圖15b),且顯著抑制一直持續(xù)到實驗結(jié)束時。另一方面， db/+m小鼠中SKF97541或3-APPA的施用對給藥期間的攝食量及體重 沒有顯著影響(圖15c， d)。以上結(jié)果啟示，利用不同的3種GABAb受 體激動劑在db/db小鼠中可見抗肥胖作用，而且抗肥胖作用僅在肥胖狀 態(tài)下可見。
本發(fā)明的抗肥胖劑對肥胖(包含肥胖癥)的治療或預(yù)防有效。通過本 發(fā)明的抗肥胖劑，通過利用其有效成分的中樞性作用能夠得到良好的抗 肥胖效果。
本發(fā)明并不限于上述發(fā)明的實施方式及實施例的說明。不脫離專利 申請的范圍的記載、且本領(lǐng)域技術(shù)人員能容易想到的范圍中的各種變形 方式也包含于本發(fā)明中。
本說明書中明示的論文、公開專利公報及專利公報等的內(nèi)容以引用 其全部內(nèi)容的方式引用。
2權(quán)利要求
1. 一種抗肥胖藥，含有GABAB受體激動劑或其在藥理學(xué)上可接受的鹽作為有效成分。
2. 如權(quán)利要求l所述的抗肥胖藥，其中，所述GABAB受體激動劑 為巴氯芬。
3. 如權(quán)利要求2所述的抗肥胖藥，其中，所述巴氯芬為R構(gòu)型。
4. 如權(quán)利要求l-3中任一項所述的抗肥胖藥，作用于下丘腦弓狀 核中的NPY神經(jīng)元和POMC神經(jīng)元而發(fā)揮抗肥胖效果。
5. 如權(quán)利要求1~3中任一項所述的抗肥胖藥，對由瘦素抗性引起 的肥胖或伴隨瘦素抗性的肥胖發(fā)揮抗肥胖效果。
6. GABAB受體激動劑或其在藥理學(xué)上可接受的鹽在制造抗肥胖藥 中的應(yīng)用。
7. 如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其中，所述GABAB受體激動劑為巴 氯芬。
8. 如權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其中，所述巴氯芬為R構(gòu)型。
9. 一種肥胖治療方法，包括對需要治療肥胖的對象施用治療上有 效量的GABAB受體激動劑或其在藥理學(xué)上可接受的鹽。
10. 如權(quán)利要求9所述的治療方法，其中，所述GABAB受體激動 劑為巴氯芬。
11. 如權(quán)利要求10所述的治療方法，其中，所述巴氯芬為R構(gòu)型。
全文摘要
本發(fā)明的課題在于提供新型的抗肥胖藥及使用其的治療方法。提供含有GABA_B受體激動劑或其在藥理學(xué)上可接受的鹽作為有效成分的抗肥胖藥。
文檔編號A61K31/185GK101500610SQ20078002995
公開日2009年8月5日 申請日期2007年7月19日 優(yōu)先權(quán)日2006年8月11日
發(fā)明者佐藤郁子, 大磯裕, 有馬寬 申請人:國立大學(xué)法人名古屋大學(xué)