專利名稱：Lxr激動劑用于治療骨關節(jié)炎的用途的制作方法
LXR激動劑用于治療骨關節(jié)炎的用途 發(fā)明領域
本發(fā)明涉及采用LXR激動劑治療或預防骨關節(jié)炎的方法。
背景技術：
骨關節(jié)炎也稱為退行性關節(jié)病，它的特征在于關節(jié)軟骨的退化和軟 骨下骨的增殖和重塑。通常的癥狀是僵硬、活動受限和疼痛。骨關節(jié)炎 是關節(jié)炎最常見的形式，并且患病率隨年齡明顯增加。
現有的骨關節(jié)炎治療方法包括運動、藥物、休息和關節(jié)保健、手術、 疼痛緩解技術、替代治療和體重控制。治療骨關節(jié)炎中常用的藥物包括 非甾族抗炎藥(NSAID)如阿司匹林、布洛芬、萘普生鈉、酮洛芬；直接 用于皮膚的局部疼痛緩解乳膏、橡膠和噴霧劑(例如辣椒堿乳膏)；通常 注射到受影響的關節(jié)以暫時緩解疼痛的皮質類固醇；和透明質酸。可進 行手術以使骨表面重建(平滑化)、骨復位和置換關節(jié)。盡管各種藥物療 法已被用于治療疾病，但是它們對長期控制和預防是無效的。
最初從肝鑒定為孤兒受體的肝X受體(LXR)是核激素受體超家族的 成員，并且已發(fā)現它是巨噬細胞炎性基因表達的負調節(jié)物(參見公布的美 國專利申請第2004/0259948號；Joseph SB等人，Nat. Med. 9:213-19(2003))。 LXR是配體活化的轉錄因子并作為與類視黃醇X受體 的專性異二聚體與DNA結合。盡管LXR(x限于某些組織如肝、腎、脂 肪、腸和巨噬細胞，但是LXR卩展示了遍在的組織分布模式。通過巨噬 細胞中的羥膽固醇(內源性配體)的LXR活化引起涉及脂質代謝和膽固醇 逆向轉運的幾種基因(包括ABCA1、 ABCG1和載脂蛋白E)的表達。
發(fā)明概述
一個方面涉及用于治療患有骨關節(jié)炎的哺乳動物的方法，其包括向 需要這種治療的哺乳動物給藥LXR反應性的基因表達誘導量的LXR激動劑。
另一個方面涉及誘導載脂蛋白D在具有骨關節(jié)炎軟骨的哺乳動物 中的表達的方法，其包括向需要這種誘導的哺乳動物給藥有效量的LXR;敫動劑。
一個進一步的方面涉及預防骨關節(jié)炎的方法，其包括(a)測定在 受治療者的正常軟骨中的基線載脂蛋白D的表達水平；以及(b)通過用 LXR激動劑治療來保持受治療者的軟骨中的基線載脂蛋白D的表達水 平。
一個另外的方面涉及治療患有骨關節(jié)炎的哺乳動物的方法，其包括 向需要這種治療的哺乳動物給藥聚集蛋白聚糖酶活性抑制量的LXR激 動劑。
一個進一步的方面涉及抑制具有骨關節(jié)炎軟骨的哺乳動物中聚集 蛋白聚糖酶的活性的方法，其包括向需要這種抑制的哺乳動物給藥有效 量的LXR激動劑。
另 一個方面涉及治療患有骨關節(jié)炎的哺乳動物的方法，其包括向需 要這種治療的哺乳動物給藥有效量的LXR激動劑以抑制促炎性細胞因 子在骨關節(jié)炎損傷中的精制(elaboration)。
一個另外的方面涉及檢測受治療者中的骨關節(jié)炎表型的方法，其包 括(a)測定正常軟骨中的基線載脂蛋白D的表達水平；(b)從疑似患 有骨關節(jié)炎的受治療者中獲得軟骨樣品；以及(c)檢測載脂蛋白D在所 述樣品中的表達水平；其中與基線載脂蛋白D表達相比，在所述樣品中 的更低量的載脂蛋白D表達指示骨關節(jié)炎。
一個進 一 步的方面涉及筌定能減少軟骨中的骨關節(jié)炎效應的LXR 配體的方法，其包括(a)提供包含LXR的樣品；(b)使所述樣品與測 試化合物接觸；以及(c)測定所述測試化合物是否誘導載脂蛋白D的表 達、抑制聚集蛋白聚糖酶活性、抑制促炎性細胞因子的精制、或它們的 組合。
本發(fā)明的其他方面和優(yōu)點對參考下文緊跟的詳述后的本領域技術 人員而言變得顯然。
附圖簡述


圖1A是顯示了在患有重度骨關節(jié)炎(OA)的軟骨中核受體(NR)表達 的相對表達水平的柱狀圖。圖IB是顯示了在患有重度OA的軟骨中類 視黃醇受體表達的相對表達水平的柱狀圖。
圖2A是顯示了正常軟骨和在患有輕度OA與重度OA的軟骨中
5ApoD表達的柱狀圖。疾病嚴重度是通過檢查軟骨樣本中損傷的大小和
深度來宏觀評價的。圖2B是顯示在正常軟骨和患有輕度OA與重度OA 的軟骨中的TNFa表達的柱狀圖。
圖3是顯示在細胞因子誘導的人OA軟骨外植體中的蛋白聚糖降解 /釋放被LXR激動劑抑制并且在這些外植體中細胞因子誘導的總蛋白聚 糖含量減少一皮LXR激動劑預防的柱狀圖。
圖4A是顯示使用BC-3抗體的聚集蛋白聚糖酶產生的聚蛋白多糖新 表位的蛋白質印跡，BC-3抗體識別聚集蛋白聚糖酶產生的聚蛋白多糖分 解產物的N-末端。使用來自患有終末期OA的兩位人供體(關節(jié)置換手 術后)的軟骨外植體。供體#259是57歲男性患者，而供體#261是55歲 女性患者。泳道l、 5:載體。泳道2、 6: TO卯1317 (2 ^M)。泳道3、 7: IL隱1卩+抑瘤素M(OSM)(各為10 ng/ml)。泳道4、 8: IL-1卩+ OSM + TO901317。圖4B是使用AGEG抗體顯示聚集蛋白聚糖酶產生的聚蛋白 多糖新表位的蛋白質印跡，AGEG抗體識別聚集蛋白聚糖酶產生的聚蛋 白多糖分解產物的不同表位。泳道l、 5:載體。泳道2、 6: TO9013H(2 pM)。泳道3、 7: IL-l卩+ OSM(各為10 ng/ml)。泳道4、 8: IL-l卩+ OSM + TO901317。
圖5A是顯示通過LXR激動劑抑制從細胞因子治療的人軟骨外植體 中的總前列腺素E2(PGE2)生產的柱狀圖。圖5B比較用載體對照或LXR 激動劑GW3965(2(iM)處理21天的外植體中呈膜磷脂PC和PE的形式的 花生四烯酸的量。來自2位人OA供體的軟骨樣品被用于這項研究。
發(fā)明詳述
步，當數量、濃度、其他值或參數以范圍、:選范圍或一1列高優(yōu)選值 和低優(yōu)選值給出時，這應理解為明確公開了由任何范圍上限值或優(yōu)選值 和任何范圍下限值或優(yōu)選值的任 一對形成的所有范圍，無論范圍是否單 獨公開。當在此引用數值的范圍時，除非另有說明，此范圍旨在包括其 端點和在此范圍內的所有整數和分數。當限定范圍時，并不期望本發(fā)明 的范圍限制在所引用的特定值。
除非另有說明，本發(fā)明的實施使用細胞生物學、細胞培養(yǎng)、分子生 物學、轉基因生物學、微生物學、重組DNA和免疫學的常規(guī)技術，這
6些技術在本領域的技術內。這些技術在文獻中被充分解釋。例如，參見
Molecular Cloning: A Laboratory Manual(分子克隆實-險室手冊)，第2 版，Sambrook, Fritsch和Maniatis編,(Cold Spring Harbor Laboratory Press: 1989); DNA Clonmg(DNA克隆)，巻I和II (D. N. Glover編，1985); Oligonucleotide Synthesis(寡核苷酸合成)(M. J. Gait編，1984);美國專利 第4,683,195號；Nucleic Acid Hybndization(核酸雜交)(B. D. Hames & S. J. Higgms編1984); Transcription and Translation(摔爭錄和翻i奪)(B. D. Hames & S. J. Higgins編1984); Culture of Animal Cells(動物細胞的培 養(yǎng))(R. I. Freshney, Alan R. Liss, Inc., 1987); Immobilized Cells and Enzymes(固定化細胞和酶)(IRL Press, 1986); B. Perbal, A Practical Guide to Molecular Cloning(分子克隆的實踐指南)(1984) ; Methods m Enzymology(酶學方法)(Academic Press, Inc.， N.Y.); Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells(哺乳動物細胞的基因轉移載體)(J. H. Miller 矛口 M. P. Calos編，1987, Cold Spring Harbor Laboratory); Methods in Enzymology(酶學方法)，巻154和155(Wu等人編)，Immunochemical Methods in Cell and Molecular Biology (細胞和分子生物學的免疫化學方 法)(Mayer和Walker編，Academic Press, London, 1987); Handbook of Experimental Immunology(實驗免疫學手冊)，巻I-IV(D. M. Weir和C. C. Blackwell編，1986); Manipulating the Mouse Embryo(小鼠胚胎操作)(Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N. Y., 1986》
此處，申請人顯示LXRa和LXRp(肝X受體a和p)在正常軟骨、中 度骨關節(jié)炎軟骨和重度骨關節(jié)炎軟骨中表達。申請人還首次證明了骨關 節(jié)炎中可能的脂質缺損，因為在正常軟骨中以很高水平表達的載脂蛋白 D(ApoD)的表達在中度和重度骨關節(jié)炎軟骨中急劇向下調節(jié)。LXR配體 經由存在于ApoD啟動子區(qū)的LXR反應元件誘導ApoD的表達。與表達 數據一致，當與正常軟骨比較時，前載脂蛋白D的蛋白質水平在骨關節(jié) 炎軟骨樣品中也減少。因為ApoD是脂質(花生四烯酸和膽固醇)結合蛋 白，所以其在骨關節(jié)炎軟骨中的減少可解釋在骨關節(jié)炎軟骨中觀察到的 增加的脂質水平。期望在軟骨中增加的花生四烯酸使得炎癥的脂質介質 (PGE2、白三烯及類似物)在患病組織中的水平增加。骨關節(jié)炎軟骨還顯 示軟骨降解酶(聚集蛋白聚糖酶和金屬蛋白酶)的活性增加。
申請人還第一次表明LXR配體抑制聚集蛋白聚糖酶在人骨關節(jié)炎關節(jié)軟骨組織外植體中的活性。LXR配體還抑制TNFa和許多種其他促 炎性細胞因子的表達。因此，通過使脂質缺陷正?；?、抑制聚集蛋白聚 糖酶/金屬蛋白酶的表達和/或活性以及抑制促炎性細胞因子在骨關節(jié)炎 損傷中的精制，期望LXR配體在骨關節(jié)炎中是治療有效的，并且比當 前和即將來臨的骨關節(jié)炎治療更有效。進一步，LXR配體誘導蛋白質的 c-jun/c-fos家族，因此增加AP1活性，這是軟骨生成所需要的。因此，
:生。 — 、、、、'、 、
I.定義
在本文公開的上下文中，將使用許多個術語。
如本文所用，術語"約"或"近似"表示在給定值或范圍的20%內， 優(yōu)選在10%內，且更優(yōu)選在5%內。
術語"聚集蛋白聚糖酶活性"是指被與聚蛋白多糖結合的聚集蛋白 聚糖酶阻斷或啟動的至少一種細胞過程。 一般來說，活性是指通過聚集
蛋白聚糖酶的聚蛋白多糖的蛋白水解斷裂。其他聚集蛋白聚糖酶活性包 括但不限于聚集蛋白聚糖酶與聚蛋白多糖的結合和由聚集蛋白聚糖酶 對聚蛋白多糖的結合或斷裂引起的生物反應。
術語"細胞因子精制"是指通過軟骨組織或軟骨細胞生成細胞因子。
本文所用的術語"有效量"、"治療有效量"、"LXR反應性的基 因表達誘導量，，、"聚集蛋白聚糖酶活性抑制量，，和"有效劑量，，是指 當向需要的哺乳動物給藥時對至少部分改善或至少部分預防與骨關節(jié) 炎有關的狀況有效的效應分子的量。
如本文所用，術語"表達"包括使DNA轉錄成mRNA并翻譯成多 肽或蛋白質的過程。
術語載脂蛋白D(ApoD)表達的"誘導"是指載脂蛋白D mRNA和/ 或蛋白質表達的增加、誘導或者以其它方式的增強。這種增加、誘導或 增強可通過本文所提供的測定法中的一種來測量。載脂蛋白D表達的誘 導并不必然顯示載脂蛋白D的最大表達。ApoD表達的增加可以是例如 至少約10%、 20%、 30%、 40%、 50%、 60%、 70%、 80%、 90%或更多。 在一個實施方案中，誘導通過比較正常軟骨的ApoDmRNA表達水平和 骨關節(jié)炎軟骨的ApoD mRNA表達水平來測量。
術語聚集蛋白聚糖酶或聚集蛋白聚糖酶活性的"抑制"是指至少一種聚集蛋白聚糖酶活性的減少、抑制或以其它方式的降低。結合的減少、 抑制或降低可通過本文所提供的測定法中的一種來測量。聚集蛋白聚糖 酶活性的抑制并不必然指示聚集蛋白聚糖酶活性的完全否定?；钚缘臏p
少可以是例如至少約10%、 20%、 30%、 40%、 50%、 60%、 70%、 80%、 卯％或更多。在一個實施方案中，抑制通過聚蛋白多糖的分解產物的檢 測的減少來測量。
術語促炎性細胞因子的精制的"抑制"是指細胞因子如例如iNOS、 MCP-3、 COX-2、 MIP1卩、MMP畫9、 IP畫IO、 IL畫1卩、IL誦lou G-CSF、 TNFou MCP-1、 IL-6的活性的減少、抑制或以其它方式的降低。細胞因子精制 的減少、抑制或降低可通過本文所提供的測定法中的一種來測量。促炎 性細胞因子精制的抑制并不必然指示促炎性細胞因子精制的完全否定。 精制的減少可以是例如至少約10%、 20%、 30%、 40%、 50%、 60%、 70%、 80%、 90%或更多。在一個實施方案中，抑制通過比較正常軟骨的TNFa mRNA表達水平與骨關節(jié)炎軟骨的TNFa mRNA表達水平來測量。
"肝X受體"或"LXR"是指LXRa和LXR卩兩者及其變體、同種 型和活性片段。LXR卩被遍在地表達，而LXRa的表達被限制在肝、腎、 腸、脾、脂肪組織、巨噬細胞、骨骼肌和如本文所證實的軟骨。LXRa 序列的代表性GenBank⑧登錄號包括下列人(/7omo Mf/^朋，Q13133)、 小鼠(Mws mMscw/ws, Q9Z0Y9)、 大鼠("認i^ "orveg,'cws, Q62685)、 牛(Bos Q5E9B6)、 豬scra/a, AAY43056)、 雞(G"〃ws ga〃^, AAM卯897)。 LXR卩的代表性GenBank⑧登錄號包括下列人(7/omo sa/ /e"s, P55055)、 'J、鼠(A/wa' wwscw/ws, Q60644)、 大鼠(i^3Ztws wo廠veg/cws, Q62755)、牛(Bos town^， Q5BIS6)。
術語"哺乳動物，，是指人、非人靈長類、犬、貓、牛、羊、豬、鼠 或其他獸醫(yī)或實驗室哺乳動物。本領域技術人員認識到，減少一類哺乳 動物中的病理學嚴重度的治療預測治療對另 一 類哺乳動物的效果。
如果這種ApoD調節(jié)劑的存在導致ApoD表達的增加或減少，則認為 ApoD調節(jié)劑調節(jié)ApoD的表達。 II. LXR激動劑
可用于本發(fā)明的LXR激動劑包括天然的羥膽固醇、合成的羥膽固 醇、合成的非羥膽固醇和天然的非羥膽固醇。示例性的天然的羥膽固醇包括20(S)羥基膽固醇、22(R)羥基膽固醇、24(S)羥基膽固醇、25-羥基膽 固醇、24(S),25-環(huán)氧膽固醇和27-羥基膽固醇。示例性的合成的羥膽固醇 包括N,N-二曱基-3p-幾基膽烯酰胺(DMHCA)。示例性的合成的非羥膽固 醇包括N-(2,2,2-三氟乙基)-N-(4-[2,2,2-三氟-l-羥基-l-(三氟甲基)乙基]苯 基)苯磺酰胺(TO901317; Tularik 0901317)、 [3-(3-(2-氯-三氟曱基千基 -2，2-二苯基乙氨基)丙氧基)苯乙酸](GW3965)、 N-曱基-N-[4-(2,2,2-三氟 -1_羥基-1_三氟曱基_1-乙基)_苯基]_苯磺酰胺(丁0314407)、 4,5-二氳 _1_(3_(3_三氟曱基_7_丙基_苯并異嚅唑_6-基氧基)丙基)-2，6-嘧啶二酮、3-氯-4-(3-(7-丙基-3-三氟曱基-6-(4,5)-異嚅唑基)丙硫基)-苯乙酸(F3曱基AA) 和乙?；?羅漢^^酸二聚體(podocarpic dimer)。示例性的天然的非鞋膽固 醇包括樁蛋白(paxilline)、鏈甾醇和豆甾醇。
例如，在下列中公開了其他有用的LXR激動劑公布的美國專利 申請第2006/0030612、 2005/0131014、 2005/0036992、 2005/0080111、 2003/0181420 、 2003/0086923 、 2003/0207898 、2004/0110947 、 2004/0087632、 2005/0009837、 2004/0048920和2005/0123580號；美國 專利第6,316，503、 6,828,446、 6,822，120和6,卯0,244號;WO01/41704; Menke JG等人，Endocrinology 143:2548-58(2002); Joseph SB等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99:7604-09(2002); Fu X等人，J. Biol. Chem. 276:38378-87 (2001); Schultz JR等人,Genes Dev. 14:2831-38(2000); Sparrow CP等人，J. Biol. Chem. 277:10021-27(2002); Yang C等人，J. Biol. Chem., Manuscript M603781200(July 20, 2006); Bramlett KS等人，J. Pharmacol. Exp. Ther. 307:291-96 (2003); Ondeyka JG等人，J. Antibiot (Tokyo) 58:559-65 (2005)。
III.治療/預防的方法
根據一種調節(jié)方法，通過將細胞與LXR激動劑接觸而使LXR活性 在細胞中受到激發(fā)。這種LXR激動劑的實例被描述在上面部分II中。 如詳細在此描述(部分V),可用于激發(fā)LXR活性的其他LXR激動劑可 使用選擇用于這種化合物的篩選測定法來鑒定。
調節(jié)方法可在體外(例如通過用LXR激動劑培養(yǎng)細胞或通過將LXR 激動劑引入至培養(yǎng)中的細胞)或可選擇地體內(例如通過對受治療者給藥 LXR激動劑或通過將LXR激動劑引入至受治療者的細胞)來進行。為了 實施體外調節(jié)方法，可通過標準方法從受治療者獲得細胞并且將其與LXR激動劑在體外一起溫育(即培養(yǎng))以調節(jié)細胞中的LXR活性。
1. 預防方法
在一個方面中，本發(fā)明提供了通過對受治療者給藥誘導ApoD表達 和/或抑制聚集蛋白聚糖酶活性和/或抑制促炎性細胞因子在骨關節(jié)炎損 傷中的精制的LXR激動劑來預防受治療者骨關節(jié)炎的方法。預防性LXR 激動劑的給藥可在骨關節(jié)炎癥狀的表現前發(fā)生，以使骨關節(jié)炎在其進展 中被預防或可選擇地延緩。
2. 治療方法
技術領域：
本發(fā)明的另一個方面涉及為了骨關節(jié)炎的治療目的而調節(jié)LXR活 性的方法。因此，在示例性的實施方案中，本發(fā)明的調節(jié)方法包括將細 胞與調節(jié)ApoD表達和/或聚集蛋白聚糖酶活性和/或抑制促炎性細胞因 子在骨關節(jié)炎損傷中的精制的LXR激動劑接觸。這些調節(jié)方法可在體 外(例如通過用LXR激動劑培養(yǎng)細胞)或可選4奪地在體內(例如通過對受 治療者給藥LXR激動劑)來進行。照這樣，本發(fā)明提供了治療患有骨關 節(jié)炎的個體的方法，所述個體將從調節(jié)ApoD表達和/或聚集蛋白聚糖酶 活性和/或骨關節(jié)炎損傷中的促炎性細胞因子精制中獲益。
IV. LXR激動劑的給藥
以生物學上相容的形式向受治療者給藥LXR激動劑，所述形式適 于體內藥物給藥，以增強ApoD表達和/或抑制聚集蛋白聚糖酶活性和/ 或抑制促炎性細胞因子的精制。"適于體內給藥的生物學上相容的形 式"表示待給藥的LXR激動劑的形式，其中所述激動劑的治療作用超 出任何毒性作用。預期術語"受治療者"包括免疫反應可被誘發(fā)的活生 物體，例如哺乳動物。如本文所述的LXR激動劑的給藥可以是任何藥 理學的形式，所述形式包括單獨或與藥學上可接受的載體組合的治療有 效量的LXR激動劑。
LXR激動劑的治療有效量可隨各因素如疾病狀態(tài)、年齡、性別和個 體的重量和LXR激動劑在個體中誘發(fā)期望反應的能力而改變?？烧{整 劑量方案以提供最佳的治療反應。例如，幾個分開的劑量可每天被給藥， 或如由治療情況的緊急事件所示的，所述劑量可被按比例地減少。
本發(fā)明的治療組合物或藥物組合物可通過任何適合的本領域已知 途徑，包括如口服、靜脈內、皮下、肌內、透皮、鞘內或腦內給藥或在 體外治療方案中給藥至細胞。給藥可以是快速的(如通過注射)或經歷一段時間(如通過緩慢輸注或給藥緩慢釋放制劑)。為了治療或預防骨 關節(jié)炎，本發(fā)明的治療組合物或藥物組合物的給藥可例如通過口服給藥 或通過關節(jié)內注射來進行。
此外，LXR激動劑可與聚合物如聚乙二醇穩(wěn)定地連接以獲得期望 的溶解度性質、穩(wěn)定性、半衰期和其他藥學上有利的性質(例如，參見
Davis等人，Enzyme Eng. 4:169-73 (1978); Burnham NL, Am. J. Hosp. Pharm. 51:210-18 (1994》。
LXR激動劑可以在有助于遞送到細胞胞漿的組合物中。例如，LXR 激動劑可與載體部分如能遞送所述激動劑到細胞胞漿的脂質體軛合。這 種方法在本領域中眾所周知(例如，參見Amselem S等人，Chem. Phys. Lipids 64:219-37 (1993))。此外，LXR激動劑可通過顯孩"主射^皮直4妻遞送 至細月包。
LXR激動劑可以以藥物制品的形式^L使用。這種制品以藥物領域眾 所周知的方法來制備。 一種優(yōu)選的制品使用生理鹽水溶液的運載體，但 是期望還可使用其他藥學上可接受的載體如生理濃度的其他無毒鹽、5% 葡萄糖水溶液、無菌水或類似物。本文所用的"藥學上可接受的載體" 包括任何和所有溶劑、分散介質、包衣、抗菌劑和抗真菌劑、等滲劑和 吸收延遲劑及類似物。這種介質和試劑用于藥學上活性的物質的用途在 本領域中眾所周知。除任何常規(guī)介質或試劑與LXR激動劑不相容的情 況之外，包括它們在治療組合物中的使用。補充的活性化合物也可被摻 入所述組合物中。還可期望合適的緩沖液存在于所述組合物中。如需要， 這種溶液可凈皮凍干并貯藏在無菌安4瓦中，以待通過添加用于備注射的無 菌水而重建。主要溶劑可以是水性的或可選擇地非水性的。LXR激動劑 還可被摻入可植入到需要治療的組織的固體或半固體生物相容性基質 中。
所述載體還可包含用于調節(jié)或保持制劑的pH、滲克分子濃度 (osmolarity)、粘度、透明度、顏色、無菌、穩(wěn)定性、溶出速率或氣味的 其他藥學上可接受的賦形劑。
劑量給藥可根據劑量制劑的藥代動力學參數和所用的給藥途徑來 重復。
還提供了可口服給藥的包含LXR激動劑的某些制劑。這些制劑優(yōu) 選用適合載體包封并配制成固體劑型。適合載體、賦形劑和稀釋劑的一些實例包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯膠、 磷酸鈣、藻酸鹽、硅酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、明 膠、糖漿、曱基纖維素、羥基苯曱酸曱酯和羥基苯曱酸丙酯、滑石、鎂、 硬脂酸酯、水、礦物油和類似物。所述制劑可另外包括潤滑劑、潤濕劑、 乳化和懸浮劑、防腐劑、甜味劑或調味劑。所述組合物可配制以在通過 使用本領域眾所周知的程序對患者給藥后提供活性成分的快速釋放、持 續(xù)釋放或延遲釋放。所述制劑還可包含減少蛋白水解降解的物質和/或促 進吸收的物質如表面活性劑。
為了給藥方便和劑量均勻，配制以劑量單位形式的組合物是尤其有 利的。本文所用的劑量單位形式是指以單劑量適用于待治療的哺乳動物
受治療者的物理上分立的單位；每個單位包含與需要的藥物載體結合
的、計算為產生預期治療效應的預定量的活性化合物。本發(fā)明的劑量單
位形式的規(guī)才各由下述確定并且直接取決于下述(a) LXR激動劑的獨特 性質和要達到的具體治療效果以及(b)在配制(compound)這種用于治療
由本領域普通技術人員容易地計算，例如根據患者的大約體重或體表面 積或者待占據的身體空間的體積。所述劑量還可根據所選的具體給藥途 徑來計算。對測定用于治療的適合劑量所必需的計算的進一步細化由本 領域普通技術人員常規(guī)地進行。這種計算可依據靶細胞的測定制品中的 本文所公開的LXR激動劑活性由本領域技術人員在沒有過多實驗的情 況下來進行。準確劑量是結合標準劑量響應研究而一皮確定的。應理解， 實際所給藥的組合物的量可依據包括待治療的狀況、待給藥的組合物的 選擇、個體患者的年齡、重量和反應、患者癥狀的嚴重度和所選的給藥 途徑的有關情況由醫(yī)生確定。
這種LXR激動劑的毒性和治療效力可通過標準藥學程序在例如用 于測定LD5。(50。/。種群致死的劑量)和ED5o(在50%種群中治療有效的劑 量)中的細胞培養(yǎng)物或實驗動物中測定。毒性和療效之間的劑量比是治療 指數并且它可被表示為LDWED5()比。優(yōu)選顯示大治療指數的LXR激動 劑。盡管可使用顯示毒副作用的LXR激動劑，但是應該小心設計將這 種激動劑靶向到受影響組織的部位以使對未感染細胞的潛在性損傷降 至最低因而減少副作用的遞送系統(tǒng)。
從細胞培養(yǎng)測定和動物研究中獲得的數據可被用于配制用于人的一系列劑量。這種LXR激動劑的劑量優(yōu)選在極少毒性或無毒的包括ED50 的循環(huán)濃度范圍內。所述劑量可根據所用的劑型和所用的給藥途徑在此 范圍內變化。對于用于本發(fā)明方法的任何LXR激動劑，治療有效的劑 量最初可從細胞培養(yǎng)測定中評價?？稍趧游颺t型中制定劑量以達到包括 如在細胞培養(yǎng)物中測定的IC5。(即實現癥狀的半數最大抑制的LXR激動 劑濃度)的循環(huán)血漿濃度范圍。這種信息可用于更準確地確定可用在人中 的劑量。在血漿中的水平可例如通過高效液相色譜法來測量。
監(jiān)測LXR激動劑對ApoD的表達和/或聚集蛋白聚糖酶的活性和/或 促炎性細胞因子的精制的影響不僅可應用于基本藥物篩選，而且應用于 臨床試驗。例如，LXR激動劑的有效性可在顯示ApoD基因表達在軟骨 細胞中減少和/或聚集蛋白聚糖酶活性增加和/或促炎性細胞因子在骨關 節(jié)炎損傷中的精制增加的受治療者的臨床試驗中監(jiān)測。在這些臨床試驗 中，ApoD的表達和/或聚集蛋白聚糖酶的活性和/或促炎性細胞因子的精 制可用作不同骨關節(jié)炎階段的表型的"讀出"或標志。
因此，例如為了在臨床試驗中研究LXR激動劑對骨關節(jié)炎的作用， 可分離細胞，制備RNA,并分析ApoD和涉及骨關節(jié)炎的其他基因(例 如TNFa)表達的水平?；虮磉_的水平(即基因表達譜)可通過RNA印跡 分析或RT-PCR、通過測量所產生的蛋白質的量、或通過測量ApoD或 其他基因的活性水平來定量，全部通過本領域普通技術人員眾所周知的 方法進行。以這種方式，基因表達"i普可用作指示細胞對LXR激動劑的 生理反應的標志。因此，這種反應狀態(tài)可在用LXR激動劑治療個體前 以及在用LXR激動劑治療個體期間的不同點測定。
本發(fā)明還提供了監(jiān)測用LXR激動劑治療受治療者的有效性的方法， 其包括以下步驟(i)在給藥LXR激動劑前從受治療者中獲得給藥前的 樣品；(ii)在給藥的前樣品中檢測ApoD表達的水平和/或聚集蛋白聚糖 酶活性的水平和/或促炎性細胞因子精制的水平；(iii)從所述受治療者中 獲得一種或多種給藥后的樣品；(iv)在給藥后的樣品中檢測ApoD表達 或活性的水平和/或聚集蛋白聚糖酶活性的水平和/或促炎性細胞因子精 制的水平；(v)將在給藥前的樣品中的ApoD表達的水平和/或聚集蛋白 聚糖酶活性的水平和/或促炎性細胞因子精制的水平與在給藥后樣品中 的ApoD表達和/或聚集蛋白聚糖酶活性和/或促炎性細胞因子精制的水 平比較；以及(vi)相應地改變LXR激動劑向所述受治療者的給藥。例
14如，期望增加的LXR激動劑給藥，以使ApoD表達增加至比已檢測水平 更高的水平和/或使聚集蛋白聚糖酶活性減小至比已檢測水平更低的水 平和/或使促炎性細胞因子精制減小至比已檢測水平更低的水平，即增加 LXR激動劑的有效性?？蛇x擇地，期望減少的LXR激動劑給藥，以使 ApoD表達或活性減小至比已檢測水平或活性更低的水平和/或使聚集蛋 白聚糖酶活性增加至比已檢測水平更高的水平和/或使促炎性細胞因子 精制增加至比已檢測水平更高的水平，即減少LXR激動劑的有效性。 根據這樣的實施方案，ApoD表達和/或聚集蛋白聚糖酶活性和/或促炎性 細胞因子精制可用作LXR激動劑甚至在缺乏可觀測的表型反應中有效 的指示劑。
此外，在骨關節(jié)炎的治療中，包含LXR激動劑的組合物可^皮外源 性給藥，并且期望它有可能在血清中、在任何期望的組織室中和/或在受 影響的組織中實現LXR激動劑的某些耙水平。因此，能監(jiān)測LXR激動 劑在患者中或在包括獲自患者的組織活檢樣品的生物樣品中的水平是 有利的，并且在某些情況下，還監(jiān)測ApoD表達和/或聚集蛋白聚糖酶活 性和/或促炎性細胞因子精制的水平。因此，本發(fā)明還提供了用于在患者 的樣品中檢測LXR激動劑的存在的方法。
V. 篩選測定法
在一個實施方案中，LXR反應性基因的表達水平或由此的蛋白活性 水平可用于促進通過基于LXR的機理治療骨關節(jié)炎的化合物的設計和/ 或鑒定。因此，本發(fā)明提供用于鑒定例如對ApoD表達和/或聚集蛋白聚 糖酶活性和/或細胞因子精制具有激發(fā)或抑制作用的調節(jié)劑即LXR激動 劑的方法(本文也稱為"篩選測定法")。如此所鑒定的化合物可用于治 療如本文別處所述的骨關節(jié)炎。
測試化合物例如可使用本領域已知的組合文庫法中的很多方法中 的任一種來獲得，所述組合文庫法包括空間可尋址平行固相或液相文 庫；需要去巻積的合成文庫法；'一珠一化合物'文庫法；和使用親和 色"i普篩選的合成文庫法。
用于合成分子文庫的方法的實例可在例如下述中發(fā)現DeWitt SH 等人，Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90:6909-13(1993); Erb E等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91:11422-26(1994); Zuckermann RN等人，J. Med. Chem. 37:2678-85(1994); Cho CY等人，Science 261:1303-05(1993);
15Carrell等人，Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 33:2059(1994); Carrell等人, Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 33:2061(1994); Gallop MA等人,J. Med. Chem. 37:1233-51 (1994)。
化合物文庫可以以溶液(例如Houghten RA等人，Biotechniques 13:412-21(1992))或以珠(Houghten RA等人，Nature 354:82-84(1991))、芯 片(FodorSA等人，Nature 364:555-56(1993))、細菌(美國專利第5,223,409 號)、孢子(美國專利第5,223,409號)、質粒(Cu11 MG等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:1865-69(1992))或噬菌體(Scott JK & Smith GP, Science 249:386-90(1990); Devlin JJ等人，Science 249:404-06(1990); Cwirla SE 等人，Proc. Natl. Acad. Sci. 87:6378-82(1990); Felici F等人，J. Mol. Biol. 222:301-10 (1991);美國專利第5,223,409號)提供。
示例性篩選測定法是基于細胞的測定法，其中使表達LXR的細胞 與測試化合物接觸，測試化合物能夠通過基于LXR的機理調節(jié)ApoD表 達和/或聚集蛋白聚糖酶活性和/或細胞因子的精制。測定調節(jié)ApoD表 達和/或聚集蛋白聚糖酶活性和/或細胞因子精制的測試化合物的能力可 通過監(jiān)測例如DNA、 mRNA或蛋白水平、或通過測量ApoD、聚集蛋白 聚糖酶和/或TNFa的活性水平來完成，全部通過本領域普通技術人員眾 所周知的方法進4于。所述細^^例如可以是哺乳動物源例如人的。
由上述篩選測定法鑒定的新型調節(jié)劑可用于本文所述的治療。
實施例
進一步在下述實施例中定義本發(fā)明。應理解，這些實施例盡管指示 本發(fā)明的優(yōu)選實施方案，但是它們僅以舉例說明的方式給出。從上文詳 述和這些實施例中，本領域技術人員可確定本發(fā)明的優(yōu)選特征，并且在 不偏離本發(fā)明的精神和范圍下，可對本發(fā)明作出各種變化和調整以使其 適應于各種用途和條件。
實施例1
為了鑒定在關節(jié)炎或正常關節(jié)軟骨中表達的轉錄，從末期膝關節(jié)置 換的關節(jié)炎患者和非關節(jié)炎截肢個體中獲得組織樣品。通過組織學確認 關節(jié)炎的存在或缺乏。
將人基因組U95Av2(HG-U95Av2) GeneChip 陣列(Affymetrix， Santa Clara, CA)用于表達特征。HG-U95Av2芯片包含表示得自人基因組的 12,000初級全長序列( 16探針對/序列)的25聚體寡核苷酸探針。對 于設計以與耙序列完全互補的每個探針，產生除其中心的單堿基錯配之 外相同的配偶體探針。這些探針對允許對信號進行定量并且減去非特異 性噪音。
從個體關節(jié)軟骨組織中提取RNA,將其轉化為生物素化的cRNA, 并根據Affymetrix方案片段化。將片段化的cRNA在含有100 )ig/ml紳 魚精DNA和500昭/ml乙?；腂SA的lx MES緩沖液中稀釋并在99 。C下變性5分鐘，之后直接在45。C下變性5分鐘。通過短暫離心將不溶 性材料從雜交混合物中移出，將雜交混合物加至每個陣列并于45。C在伴 有60 rpm的連續(xù)旋轉下孵化16小時。孵化后，移出雜交混合物并將芯 片用6x SSPET充分洗滌，如在Affymetrix方案中所述用SAPE溶液染 色。
用Hewlett-Packard基因陣列掃描儀以6 mm的分辨率測量每個轉錄 物的原熒光強度值。使用測定基因是"存在"還是"缺失"的算法的 GeneChip 軟件3.2(Affymetrix)、以及陣列上每個基因的特異性雜交強 度值或"平均差"來評價熒光數據。參照已知豐度的11個對照轉錄物 的平均差而將每個基因的平均差歸 一 化為頻率值，所述對照轉錄物根據 Hill AA等人Science 290:809-12(2000)的程序被摻入(spike mto)每個雜 交混合物。計算每個基因的頻率并且該頻率表示等于每106總轉錄物個 體基因轉錄物的總數的值。
圖1A描述了核激素受體超家族的19位不同成員(LXRa、 LXR卩、 Rev畫erba、 Rev隱e棒GR、 EAR2、 COUP TF-I、 COUP TF誦II、 CAR、 PXR、 MR、 SF-1、 TR-2、 TR-4、 NOR陽l、 Nurrl、 Nur77、 SHP、 FXR)在重度 骨關節(jié)炎軟骨中的mRNA水平(以百萬分率(ppm)表示)。用于這些基因 芯片研究的定量檢測下限經測定約為5 ppm。圖1中顯示的數據提供了 LXR(3、 Rev-erba和GR似乎通過關節(jié)軟骨以基因芯片的敏感度水平來表 達的證據。在圖1B中，顯示了六個類視黃醇受體家族成員(視黃酸受體 (RAR)和類視黃醇X受體(RXR))的表達水平。這些數據顯示RXRa在關 節(jié)軟骨組織中以易檢測的水平表達。RXRa是LXR的異二聚體配偶體并 且LXR配體作用的生物活性單位是LXR-RXR異二聚體。這些數據提供 了關注LXR表達在關節(jié)軟骨中的功能作用的動力。
實施例2
17圖2A顯示了正常軟骨和獲自中度和重度骨關節(jié)炎患者的軟骨中的
ApoD mRNA水平的比較(以百萬分率(ppm)表示)。用于這些基因芯片研 究的定量檢測下限經測定約為5 ppm。圖2A中顯示的數據提供了輕度
據。^ 2B顯示了在正常軟骨和獲自中度和重度骨關節(jié)炎患者-軟骨中 的TNF(xmRNA水平的比較(以百萬分率(ppm)表示)。用于這些基因芯片 研究的定量檢測下限經測定約為5 ppm。圖2B中顯示的數據提供了輕 度和重度骨關節(jié)炎軟骨中的TNFa表達相對于正常軟骨被顯著誘導的證據。
實施例3
^!爭人OA供體(#154，來自National Disease Research Interchange (國 家疾病研究交換中心))的新鮮軟骨外植體( 20塊，共 200 mg/孔)在包 含1% Nutridoma (Roche Applied Science, Indianapolis, ESQ的 1 ml DMEM/F12中培養(yǎng)10天。在這10天期間，在有或沒有LXR激動劑(2 ^VI GW3965,報道過的LXR激動劑或2 下式I, LXR激動劑)下將外植 體暴露于細胞因子(l ng/ml ILl卩+5 ng/ml抑瘤素M)。
C〇2H
每2天，用新鮮的細胞因子和LXR激動劑替代培養(yǎng)基。在使用 DMMB(二曱基亞曱藍)測定法后于這些培養(yǎng)物中測量蛋白聚糖的累積釋 放。然后在10天治療結束時，將外植體用蛋白酶K消化并測定總蛋白 聚糖含量。LXR激動劑顯著減少了細胞因子誘導的蛋白聚糖進入培養(yǎng)基的釋放；因而，用LXR激動劑治療OA軟骨外植體10天顯著增加了外 植體中的總蛋白聚糖含量(圖3)。由于ILip和抑瘤素M都存在于患有 OA的關節(jié)中，并認為它們在OA疾病進展中起作用，我們的數據表明 LXR激動劑在OA軟骨中可能具有結構修飾的效果。 實施例4
將人OA供體的新鮮軟骨切成塊( 10mg/塊， 2x2x2mm)。將軟骨 外植體隨機放至24孔板( 250 mg濕重/孔)中。每個治療組包括三個外才直 體孔。將外植體在含有10%FBS的1 mlDMEM/F-12中培養(yǎng)3天，然后 用無血清培養(yǎng)基替代完全培養(yǎng)基。12小時后，移除培養(yǎng)基并加入新鮮無 血清培養(yǎng)基(lml),隨后是LXR激動劑T0901317處理(2pM)。 8小時后 加入ILip/抑瘤素M(每孔10 ng/ml)。然后將外植體在LXR激動劑 T0卯1317和ILip/抑瘤素M的存在或缺乏下培養(yǎng)另外20小時。在37°C 下將從每個治療組收集的180 )il培養(yǎng)基在50 mM EDTA的存在下用專欠 骨素酶ABC、角質素酶、角質素酶II去糖基化3小時。然后將樣品濃縮 并在4-12% SDS-PAGE凝膠中分離。使用小鼠BC3新表位抗體(1:1500) 或兔抗AGEG抗體(1:1000)作為第一抗體和與堿性過氧化酶(1:5000)軛合 的抗小鼠或抗兔IgG抗體作為第二抗體，進行蛋白質分析。圖4A顯示 了使用BC3抗體的結果，并且圖4B顯示了使用AGEG抗體的結果。在 使用供體#259的軟骨的實驗中，細胞因子治療誘導了包含聚蛋白多糖片 段的BC3和AGEG兩者進入培養(yǎng)基的釋放。用T0901317的治療阻斷了 通過細胞因子的BC3和AEEG釋放的誘導。在使用供體#261的實-驗中， 使含有BC3和AEGE的聚蛋白多糖片段從未治療過的軟骨外植體中釋 放進入培養(yǎng)基。T0901317治療減少了這些片段在培養(yǎng)基中的量。含
T0901317治療所阻斷。 實施例5
^夸人OA供體(由National Disease Research Interchange (國家疾病 研究交換中心)提供)的新鮮軟骨外植體( 20塊，總數為 200 mg/孔)在 包含1% Nutridoma (Roche Applied Science, Indianapolis, IN)的1 ml DMEM/F12中培養(yǎng)21天。在這21天期間，在有或沒有LXR激動劑(2)iM GW3965或式I)下將外植體暴露于細胞因子(IO ng/ml IL1卩+10 ng/ml抑 瘤素M)。每2-3天，將培養(yǎng)基用新鮮的細胞因子和LXR激動劑所替代。于第7、 14、 21天收集的培養(yǎng)基樣品中前列腺素E2(PGE2)的總量使用 EIA測定法(Cayman)來測量。
圖5顯示了在所有3個時間點兩種LXR激動劑都強烈抑制細胞因 子(ILl(3/抑瘤素M)誘導的PGE2合成。脂質特性分析(Lipomics Inc.)結果 顯示，膜磷脂的兩種形式(大多數花生四烯酸(AA)來源于此)的量通過 LXR激活而減少，表明了總PGE2的減少至少部分由OA軟骨中的總AA 含量減少來介導。涉及PGE2合成的酶的表達還可^皮LXR活性所抑制。
PGE2是主要的促炎性前列腺素類，它在具有類風濕性關節(jié)炎(RA) 或OA的關節(jié)中發(fā)現。軟骨中增加的PGE2還可在炎癥介導的具有關節(jié) 炎疾病特征的結構性損傷中起作用。更重要地，PGE2是炎癥、疼痛過 敏性的關鍵特征中的一個。因此，LXR激動劑;f艮有可能成為可通過阻斷 OA關節(jié)中的PGE2生成而緩解疼痛以及通過阻斷軟骨基質退化而預防 疾病進展的OA治療劑。
權利要求
1. 一種治療患有骨關節(jié)炎的哺乳動物的方法，其包括向需要這種治療的哺乳動物給藥LXR反應性的基因表達調節(jié)量的LXR激動劑。
2. 根據權利要求1所述的方法，其中所述LXR激動劑是天然的羥 膽固醇、合成的羥膽固醇、合成的非羥膽固醇或天然的非羥膽固醇。
3. 根據權利要求1或權利要求2所述的方法，其中所述LXR激動 劑是20(S)羥基膽固醇、22(R)羥基膽固醇、24(S)羥基膽固醇、25-羥基膽 固醇、24(S),25-環(huán)氧膽固醇、27-羥基膽固醇、N,N-二甲基-3p-羥基膽烯 酰胺、N-(2,2,2-三氟乙基)-N-H-[2,2,2-三氟-l-羥基-l-(三氟甲基)乙基]苯 基}苯磺酰胺、[3-(3-(2-氯-三氟甲基芐基-2,2-二苯基乙氨基)丙氧基)苯乙 酸]、N-甲基-N-[4-(2，2,2-三氟-l-羥基-l-三氟曱基-l-乙基)-苯基]-苯磺酰 胺、4,5-二氫-1-(3-(3-三氟曱基-7-丙基-苯并異嚅唑-6-基氧基)丙基)-2,6-嘧啶二酮、3-氯-4-(3-(7-丙基-3-三氟曱基-6-(4,5)-異哺唑基)丙硫基)-苯乙 酸、乙?；?羅漢松酸二聚體、樁蛋白、鏈甾醇或豆甾醇。
4. 根據權利要求3所述的方法，其中所述LXR激動劑是N-(2,2,2-三氟乙基)-N-[4-(2,2,2-三氟-l-羥基-l-三氟甲基-l-乙基)-苯基]-苯磺酰胺。
5. 根據權利要求1至4中任一項所述的方法，其中采用LXR激動 劑的治療抑制軟骨退化并誘導軟骨再生。
6. 根據權利要求1至5中任一項所述的方法，其中所述LXR激動 劑抑制聚集蛋白聚糖酶活性。
7. 根據權利要求1至6中任一項所述的方法，其中所述LXR激動 劑抑制促炎性細胞因子和/或炎性介質在骨關節(jié)炎關節(jié)中的精制。
8. 根據權利要求7所述的方法，其中所述炎性介質是前列腺素E2。
9. 根據權利要求1至8中任一項所述的方法，其中采用LXR激動 劑的治療提供骨關節(jié)炎關節(jié)的疼痛緩解。
10. 根據權利要求1至9中任一項所述的方法，其中所述LXR反應 性基因是載脂蛋白D。
11. 一種誘導載脂蛋白D在具有骨關節(jié)炎軟骨的哺乳動物中表達的 方法，其包括向需要這種誘導的哺乳動物給藥有效量的LXR激動劑。
12. —種預防骨關節(jié)炎的方法，其包括(a)測定在受治療者的正常軟骨中的基線載脂蛋白D表達水平；以及(b)通過用LXR激動劑治療來保持受治療者的軟骨中的基線載脂蛋白D的表達水平。
13. —種用于治療患有骨關節(jié)炎的哺乳動物的方法，其包括向需要 這種治療的哺乳動物給藥聚集蛋白聚糖酶活性抑制量的LXR激動劑。
14. 一種抑制具有骨關節(jié)炎軟骨的哺乳動物中聚集蛋白聚糖酶的活 性的方法，其包括向需要這種抑制的哺乳動物給藥有效量的LXR激動 劑。
15. —種用于治療患有骨關節(jié)炎的哺乳動物的方法，其包括向需要 這種治療的哺乳動物給藥有效量的LXR激動劑以抑制促炎性細胞因子 和脂質在骨關節(jié)炎關節(jié)中的精制。
16. —種用于治療患有骨關節(jié)炎的哺乳動物的方法，其包括向需要 這種治療的哺乳動物給藥有效量的LXR激動劑以緩解骨關節(jié)炎關節(jié)的 疼痛。
17. 根據權利要求16所述的方法，其中所述LXR激動劑抑制TNFa表達。
18. —種檢測受治療者中的骨關節(jié)炎表型的方法，其包括(a) 測定在正常軟骨中的基線載脂蛋白D的表達水平；(b) 從疑似患有骨關節(jié)炎的受治療者中獲得軟骨樣品；以及(c) 檢測載脂蛋白D在所述樣品中的表達水平； 其中與基線載脂蛋白D表達相比，在所述樣品中的更低量的載脂蛋白D表達指示骨關節(jié)炎。
19. 一種鑒定能減少軟骨中的骨關節(jié)炎效應的LXR配體的方法，其 包括(a) 提供包含LXR的樣品；(b) 使所述樣品與測試化合物接觸；以及(c)測定所述測試化合物是否誘導載脂蛋白D的表達、抑制聚集蛋 白聚糖酶的活性、抑制促炎性細胞因子的精制、或它們的組合。
20. LXR激動劑在制備用于治療或預防骨關節(jié)炎的藥物中的用途。
全文摘要
本文公開了LXR激動劑用于預防和治療骨關節(jié)炎的用途，以及在受治療者中檢測骨關節(jié)炎表型的方法和鑒定能減小軟骨中的骨關節(jié)炎效應的LXR配體的方法。
文檔編號A61K31/00GK101547688SQ200780034740
公開日2009年9月30日 申請日期2007年9月18日 優(yōu)先權日2006年9月19日
發(fā)明者E·拉瓦利, E·莫里斯, L·科林斯-拉西, S·納帕爾, Z·楊 申請人:惠氏公司