專利名稱：：來(lái)自高麗參的黑色素生物合成抑制劑及含有該抑制劑的化妝品組合物用于皮膚增白的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及使用酸、堿、酶或產(chǎn)生所述酶的微生物從人參提取物中獲得的人參皂苷Fl的用途，以及含有該人參皂苷Fl的用于皮膚增白的化妝品組合物。
背景技術(shù)：
：決定人的膚色的因素有多種，在這些因素中，諸如人體內(nèi)的產(chǎn)生黑色素的黑素細(xì)胞的活性、血管的分布、皮膚的厚度以及存在或不存在色素(例如，類胡蘿卜素、膽紅素等)等因素具有重要作用。它們中最重要的因素是通過(guò)人體黑素細(xì)胞中的各種酶(例如，酪氨酸酶)的活動(dòng)而產(chǎn)生的黑色素。黑色素的形成受到遺傳因素、激素分泌、與應(yīng)激有關(guān)的生理因素以及環(huán)境因素(例如，紫外(UV)光照射)的影響。人皮膚上的黑色素細(xì)胞中產(chǎn)生的黑色素是一種具有黑色素與蛋白質(zhì)的絡(luò)合物的酚系聚合物。黑色素阻斷太陽(yáng)紫外射線，從而保護(hù)真皮下面的皮膚器官，同時(shí)，黑色素清除皮膚組織中產(chǎn)生的游離自由基從而保護(hù)皮膚中的蛋白質(zhì)和基因。但是，由皮膚中的內(nèi)部或外部應(yīng)激刺激產(chǎn)生的黑色素是一種穩(wěn)定的物質(zhì)，即使在應(yīng)激消失后也不會(huì)被除去，直到通過(guò)皮膚角化作用才能被釋放到外界。因此，如果產(chǎn)生了不必要的大量的黑色素就會(huì)出現(xiàn)有損美麗的色素過(guò)度沉著(hyperpigmentation)，例如變色、雀斑和斑點(diǎn)。隨著休閑人群的增加，喜歡戶外活動(dòng)的人越來(lái)越多，因此防止由UV光引起的黑色素沉著的需求也在增多。為了滿足這一需求，已經(jīng)在化妝品或醫(yī)療藥物中使用了抗壞血酸、曲酸、熊果苷(albutin)、對(duì)苯二酚、谷胱甘肽、或它們的衍生物，或者具有酪氨酸酶抑制活性的物質(zhì)。但是，由于增白效果不充分以及其他的問(wèn)題(例如，將上述物質(zhì)添加到化妝品中所帶來(lái)的皮膚安全問(wèn)題、配方和穩(wěn)定性問(wèn)題)使這些物質(zhì)的使用受到了限制。
發(fā)明內(nèi)容因此，本發(fā)明的發(fā)明人進(jìn)行了大量研究來(lái)制備增白化妝品組合物，該增白化妝品組合物源自天然產(chǎn)生的物質(zhì)，對(duì)皮膚安全，同時(shí)還具有優(yōu)異的增白效果和優(yōu)異的產(chǎn)品穩(wěn)定性。結(jié)果，本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，通過(guò)使植物提取物(特別是人參提取物)與酸、堿或酶進(jìn)行反應(yīng)而獲得的人參皂苷Fl具有優(yōu)異的減少黑色素生物合成的效果，從而完成了本發(fā)明。因此，本發(fā)明的一個(gè)目的在于檢驗(yàn)人參皂苷Fl的黑色素生物合成抑制效果，該人參皂苷Fl是通過(guò)使植物提取物與酸、堿或酶進(jìn)行反應(yīng)而得到的，本發(fā)明還提供了具有優(yōu)異的增白效果的化妝品和治療組合物。本發(fā)明提供了由下式1表示的人參皂苷Fl以及含有該人參皂苷Fl的用于皮膚增白的化妝品組合物的用途。[式1]<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>下面將對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)的描述。人參皂苷Fl是由植物提取物獲得的。具體來(lái)說(shuō)，本發(fā)明的化妝品組合物中含有的人參皂苷Fl獲得自人參、紅參、白參、鮮人參、參須(ginsengtail)、人參葉或人參果?？梢砸韵路绞絹?lái)制備用于本發(fā)明的提取物。向植物中添加有機(jī)溶劑，該有機(jī)溶劑的量約為所述植物的重量的1-6倍，優(yōu)選約3倍，通過(guò)在室溫下對(duì)所述植物進(jìn)行1-5次萃取而將該植物脫脂。向脫脂后的植物中添加有機(jī)溶劑，該有機(jī)溶劑的量約為所述脫脂后的植物的重量的1-8倍，優(yōu)選約4倍，并在回流下對(duì)所述脫脂后的植物進(jìn)行1-5次提取。將提取物在10-20°C下培養(yǎng)1-3天，然后通過(guò)過(guò)濾和離心將該提取物分離成殘?jiān)蜑V液。分離出的濾液在減壓下進(jìn)行濃縮，并將濃縮物懸浮在水中，隨后用例如乙醇進(jìn)行處理以除去其中的色素。接下來(lái)，用有機(jī)溶劑對(duì)水層進(jìn)行1-5次萃取，然后，獲得的有機(jī)溶劑層在減壓下進(jìn)行濃縮，從而獲得有機(jī)溶劑提取物。將所述有機(jī)溶劑提取物溶解在少量的甲醇等中，然后向其中加入大量的乙酸乙酯。將生成的沉淀物干燥，從而得到本發(fā)明的提取物。本發(fā)明所使用的有機(jī)溶劑優(yōu)選為選自由無(wú)水甲醇、水合甲醇(hydratedmethanol)、無(wú)水乙醇和水合乙醇所組成的組中的一種溶劑，或者上述甲醇中的一種與上述乙醇中的一種的混合溶劑。利用酸、堿、酶或產(chǎn)生所述酶的微生物對(duì)所述提取物進(jìn)行水解，從而制得人參皂苷Fl0使用酸時(shí)，所述酸可以是選自由鹽酸、硫酸和硝酸所組成的組中的至少一種酸，或者是上述酸與選自由乙醇、甲醇和丁醇所組成的組中的至少一種醇的混合物。酸_醇混合物中使用的醇優(yōu)選為50%的乙醇。向所述提取物中加入0.1-2N的酸溶液(優(yōu)選IN的酸溶液)或酸-醇混合物，然后通過(guò)在50-100°C(優(yōu)選80°C)的溫度下，在水浴中加熱回流而使該提取物進(jìn)行0.5-2小時(shí)的水解。使用堿時(shí)，所述堿可以是選自由氫氧化鈉和氫氧化鉀所組成的組中的至少一種堿，或者是所述堿與選自由乙醇、甲醇和丁醇所組成的組中的至少一種醇的混合物。堿_醇混合物中使用的醇優(yōu)選為50%的丁醇。向所述提取物中加入0.1-2N的堿溶液(優(yōu)選IN的堿溶液)或酸-醇混合物，然后通過(guò)在50-100°C(優(yōu)選100°C)的溫度下，在水浴中加熱回流而使該提取物進(jìn)行1-12小時(shí)的水解。使用酶時(shí)，所述酶可以是選自由β-葡萄糖苷酶、α，β-阿拉伯糖苷酶(α，β-arabinosidase)、α，β-鼠李糖苷酶、β-葡萄糖苷酸酶、β-半乳糖苷酶和淀粉葡萄糖苷酶所組成的組中的至少一種。將所述提取物溶解于5-20倍體積(優(yōu)選約10倍體積)的酸性緩沖溶液中，接著加入酶。然后，在約37°C下，在水浴中將該提取物攪拌約1-60小時(shí)，同時(shí)通過(guò)薄層色譜法來(lái)檢測(cè)底物的消除速率。底物被完全耗盡后，在80-100°C下，在熱水中將所述提取物加熱5-15分鐘。接著，使水解反應(yīng)終止并收集反應(yīng)溶液。當(dāng)使用微生物時(shí)，所述微生物可以是產(chǎn)生所述酶的微生物。更具體的說(shuō)，所述微生物可以選自由曲霉屬(aspergillussp.)、芽孢桿菌屬(bacillussp.)、青霉屬(peniciIliumsp·)、根霉屬(rhizopussp·)、根毛霉屬(rhizomucorsp·)、籃狀菌屬(talaromycessp.)、雙歧桿菌屬(bifidobacteriumsp.)、被抱霉屬(mortierellasp.)、隱球菌屬(Cryptococcussp.)、微桿菌屬(microbacteriumsp.)等所組成的組。將所述提取物溶解于5-10倍體積(優(yōu)選約10倍體積)的離子水(ionizedwater)中，接著在121°C下進(jìn)行30分鐘的滅菌，繼而冷卻至30°C。將預(yù)先培養(yǎng)的微生物接種到提取物溶液中，并在30°C下培養(yǎng)2-5天，以所述提取物溶液的重量為基準(zhǔn)，所述預(yù)先培養(yǎng)的微生物的接種量為5-10重量％。然后，利用薄層色譜法檢測(cè)底物的清除率(scavengingrate)，當(dāng)?shù)孜锉煌耆谋M時(shí)，反應(yīng)完成，以5，000-10,000轉(zhuǎn)/分(rpm)對(duì)反應(yīng)溶液進(jìn)行離心。用蒸餾水將收集的沉淀物洗滌3次，從而獲得沉淀物。如上所述，使用酸、堿、酶或產(chǎn)生所述酶的微生物進(jìn)行水解反應(yīng)之后，在減壓下將反應(yīng)溶液濃縮以除去溶劑。向殘?jiān)屑尤脒x自由甲醇、乙醇和丁醇所組成的組中的醇，并將該溶解攪拌1-5次。然后，通過(guò)過(guò)濾除去沉淀出來(lái)的鹽，將濾液在減壓下進(jìn)行濃縮，從而獲得人參皂苷Fl。本發(fā)明的增白化妝品組合物中含有的所述人參皂苷Fl的量為該組合物總重量的0.0001-10重量％。若人參皂苷Fl的含量低于0.0001重量％，則無(wú)法提供增白等效果，而若人參皂苷Fl的含量超過(guò)10重量％，則含量的增加不會(huì)帶來(lái)效果的提高。本發(fā)明的增白化妝品組合物抑制了由UV光或炎癥所誘導(dǎo)的皮膚黑色素的產(chǎn)生并改善了色素沉著。對(duì)本發(fā)明的增白化妝品組合物的劑型沒(méi)有特別的限制，可以將本發(fā)明的組合物配制成化妝產(chǎn)品，例如潤(rùn)膚液(skinlotion)、收斂洗液(astringentlotion)、乳液(milklotion)、營(yíng)養(yǎng)霜(nourishingcream)、按摩霜(massagecream)、精華素(essence)、目艮霜(eyecream)、目艮部精華素(eyeessence)、i青潔霜(cleansingcream)、i青潔泡沫(cleansingfoam)、清潔水(cleansingwater)、美容涂敷劑(pack)、粉劑(powder)、潤(rùn)體液(bodylotion)、體霜(bodycream)、身體調(diào)和油(bodyoil)和護(hù)體精華素(bodyessence)。本發(fā)明提供的來(lái)源于人參的人參皂苷Fl(20-0-β-D-吡喃葡糖基_20(S)-原人參三醇(20-0-β-D-glucopyranosyl-20(S)-protopanaxatriol))具有抑制黑色素產(chǎn)生并改善色素沉著的效果。由于具有上述效果，在用來(lái)抑制黑色素產(chǎn)生并改善由UV光引起的色素沉著的化妝品組合物中使用人參皂苷Fl(20-0-β-D-吡喃葡糖基-20(S)-原人參三醇)是有利的。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例和測(cè)試?yán)龑?duì)本發(fā)明進(jìn)行更為詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的范圍不僅限于這些實(shí)施例。參考例1人參提取物的制備將2kg的人參添加到4L的甲醇水溶液中，并在回流下提取3次，然后在15°C下培養(yǎng)一天。接著，用濾布過(guò)濾并離心，將提取后的植物分離成為殘?jiān)蜑V液，并將濾液在減壓下濃縮。將濃縮物懸浮在水中，然后用IL的乙醇萃取5次以除去其中的色素，水層用500mL的1-丁醇萃取3次。將獲得的全部的1-丁醇層在減壓下進(jìn)行濃縮，從而得到1-丁醇提取物，隨后將該1-丁醇提取物溶解在少量的甲醇中，并添加到大量的乙酸乙酯中。將產(chǎn)生的沉淀干燥，獲得IOOg的人參提取物。實(shí)施例1通過(guò)酸水解制備人參皂苷Fl將IOg參考例1得到的人參提取物添加到20倍體積(體積/重量)的IN的HCl-50%的甲醇溶液(體積/體積)中，并通過(guò)在80°C下，在水浴中加熱回流8小時(shí)而進(jìn)行水解。然后，將反應(yīng)溶液在減壓下進(jìn)行濃縮以除去溶劑，將殘?jiān)砑拥?00mL的乙醇中并攪拌3次。接著通過(guò)過(guò)濾除去沉淀出來(lái)的鹽，并將濾液在減壓下進(jìn)行濃縮，由此得到粗產(chǎn)品。將粗產(chǎn)品用硅膠柱色譜法(氯仿甲醇=81-41)進(jìn)行純化，由此獲得1.25g的人參皂苷F1。實(shí)施例2通過(guò)堿水解制備人參皂苷Fl將IOg參考例1得到的人參提取物溶解于500mL干燥的吡啶中，并向其中加入IOg甲醇鈉粉末。然后，通過(guò)在水浴中加熱回流8小時(shí)而進(jìn)行水解，將反應(yīng)溶液在減壓下進(jìn)行濃縮以除去溶劑。將殘?jiān)砑拥?00mL的乙醇中并攪拌3次。通過(guò)過(guò)濾除去沉淀出來(lái)的鹽。將濾液在減壓下進(jìn)行濃縮，由此得到粗產(chǎn)品。將粗產(chǎn)品用硅膠柱色譜法(氯仿甲醇=8:1-4:1)進(jìn)行純化，由此獲得0.85g的人參皂苷F1。實(shí)施例3通過(guò)酶水解制備人參皂苷Fl將IOg參考例1得到的人參提取物溶解于IOOmL0.IM的乙酸溶液(pH4.5)中，并加入2.5g的酶(0.5g的橘皮苷酶、0.5g的柚皮苷酶、0.5g的纖維素酶(cellulose)、0.2g的β-葡萄糖苷酸酶和0.3g的淀粉葡萄糖苷酶，Sigma制造)。然后，將溶液在37°C下在水浴中攪拌48小時(shí)，并在80-100°C下在熱水中加熱10分鐘。反應(yīng)完成之后，將反應(yīng)溶液在減壓下進(jìn)行濃縮以除去溶劑。將殘?jiān)砑拥?00mL的乙醇中并攪拌3次。通過(guò)過(guò)濾除去沉淀物，并將濾液在減壓下進(jìn)行濃縮，由此得到粗產(chǎn)品。將粗產(chǎn)品用硅膠柱色譜法(氯仿甲醇=81-41)進(jìn)行純化，由此獲得0.91g的人參皂苷F1。實(shí)施例4利用微生物制備人參皂苷Fl將IOg參考例1得到的人參提取物溶解于IOOmL的離子水中，并在121°C下進(jìn)行30分鐘的滅菌，繼而冷卻至30°C。然后，將預(yù)先培養(yǎng)的黑曲霉(Aspergillusniger)KCCM11885接種到提取物溶液中，并在30°C下培養(yǎng)5天，以所述提取物溶液的重量為基準(zhǔn)，所述預(yù)先培養(yǎng)的黑曲霉KCCM11885的接種量為5-10重量％。然后，通過(guò)薄層色譜法檢測(cè)底物的消除率，當(dāng)?shù)孜锉煌耆谋M時(shí)，反應(yīng)完成。將培養(yǎng)物以5，000-10，OOOrpm進(jìn)行離心，將收集的沉淀物用蒸餾水洗滌3次，然后進(jìn)行離心收集作為沉淀物的反應(yīng)溶液。接著，將沉淀物加入到200mL的乙醇中并攪拌3次。然后，通過(guò)過(guò)濾除去沉淀物，并將濾液在減壓下進(jìn)行濃縮，由此得到粗產(chǎn)品。將粗產(chǎn)品用硅膠柱色譜法(氯仿甲醇=81-41)進(jìn)行純化，由此獲得0.62g的人參皂苷。測(cè)試?yán)?用鼠類黑素細(xì)胞來(lái)檢測(cè)黑餼素產(chǎn)生抑制效果在37°C和5%CO2的條件下，將來(lái)自C57BL/6小鼠的鼠類黑素細(xì)胞(Mel-Ab細(xì)胞)在DMEM(達(dá)爾伯克氏改良伊格爾培養(yǎng)基(Dulbecco'smodifiedEagle，smedia))中進(jìn)行培養(yǎng)，所述DMEM含有10%的胎牛血清、IOOnM的2_0_十四烷酰佛波醋酸酯-13(2-0-tetradecanoyphorbol-13-acetate)和InM的霍亂毒素。用0.25%的胰蛋白酶-EDTA來(lái)消化(detach)經(jīng)過(guò)培養(yǎng)的Mel-Ab細(xì)胞，并在24孔板中以IO5個(gè)細(xì)胞/孔的濃度進(jìn)行培養(yǎng)。從開(kāi)始培養(yǎng)之后的第2天起，將IOppm的各種測(cè)試物質(zhì)(曲酸，參考例1和實(shí)施例1-4)添加到培養(yǎng)中的細(xì)胞中再培養(yǎng)3天。在此，曲酸作為對(duì)照組以檢測(cè)本發(fā)明的人參皂苷Fl的黑色素產(chǎn)生抑制效果。移除培養(yǎng)基，用PBS(磷酸鹽緩沖液)洗滌細(xì)胞，并用IN的氫氧化鈉溶解(Iyse)。檢測(cè)細(xì)胞在400nm處的吸光度，然后根據(jù)下列的公式1來(lái)計(jì)算各個(gè)測(cè)試樣品的黑色素產(chǎn)生抑制率(％)。計(jì)算結(jié)果列于下表1中(多利法(Dooleymethod))。[公式1]黑色素產(chǎn)生抑制率(％)=100_(各個(gè)測(cè)試樣品的吸光度/對(duì)照組的吸光度χ100)表1黑色素產(chǎn)生抑制效果^測(cè)試樣品黑色素產(chǎn)生抑制率(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>如上表1所示，與現(xiàn)有的增白劑曲酸相比，根據(jù)本發(fā)明的人參皂苷Fl表現(xiàn)出優(yōu)異的黑色素產(chǎn)生抑制率(％)。此外，可以看到，從人參提取物中通過(guò)水解方法制備的人參皂苷Fl之間的黑色素產(chǎn)生抑制率(％)幾乎相同。測(cè)試?yán)?對(duì)人體皮膚的增白效果的測(cè)試將具有直徑為1.5cm的穿孔的不透明膠帶粘附到12位健康男性的上臂上。然后，用UV射線(UVB)對(duì)每位受試者進(jìn)行照射，照射的劑量比最小紅斑劑量高1.5-2倍，從而使皮膚變黑。用UV進(jìn)行照射之后，將1重量％的各個(gè)測(cè)試樣品溶液(使用1，3_丁二醇乙醇=73作為賦形劑)施敷到每位受試者的皮膚上。將3重量％的曲酸和賦形劑溶液分別施敷到每位受試者的皮膚上，作為陰性對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組。對(duì)照組不施敷任何東西，并對(duì)受試者的皮膚狀態(tài)改變進(jìn)行持續(xù)10周的觀察。每隔一周用比色計(jì)(Minolta，日本)檢測(cè)皮膚的顏色。然后，根據(jù)下列公式2計(jì)算各個(gè)樣品的施敷時(shí)間點(diǎn)與施敷結(jié)束的時(shí)間點(diǎn)之間的膚色差值(ΔL*)，并且計(jì)算結(jié)果列于下表2中。同時(shí)，通過(guò)將施敷了各個(gè)樣品的部位與對(duì)照部位之間的進(jìn)行比較來(lái)評(píng)估增白效果。在該評(píng)估中，△L*的值約為2表示色素沉著得到了明顯的改善，ΔL*值高于1.5說(shuō)明該樣品具有增白效果。[公式2]ΔL*=施敷結(jié)束時(shí)的L*值一開(kāi)始施敷時(shí)的L*值表2對(duì)人體皮膚的增白效果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>由上表2中可以看出，根據(jù)本發(fā)明的人參皂苷Fl的ΔL*值高于1.6，說(shuō)明該人參皂苷Fl具有優(yōu)異的增白效果。此外還可以看出，與已知具有優(yōu)異的增白效果的曲酸相比，根據(jù)本發(fā)明的人參皂苷Fl具有優(yōu)異的增白效果。工業(yè)實(shí)用性如上所述，提取自人參的人參皂苷Fl具有優(yōu)異的抑制黑色素產(chǎn)生以及改善由UV光引起的色素沉著的效果。因此，本發(fā)明提供了一種化妝品組合物，該化妝品組合物含有人參皂苷Fl作為活性成分，從而具有優(yōu)異的增白效果。權(quán)利要求人參皂苷F1(20-O-β-D-吡喃葡糖基-20(S)-原人參三醇)在皮膚增白中的用途。2.一種化妝品組合物在皮膚增白中的用途，該組合物含有人參皂苷Fl(20-0-β-D-吡喃葡糖基-20(S)-原人參三醇)作為活性成分。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其中，以所述組合物的總重量為基準(zhǔn)，所述人參皂苷Fl的含量為0.0001-10重量％。4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用途，其中，含有人參皂苷Fl(20-0-β-D-吡喃葡糖基-20(S)-原人參三醇)的所述組合物獲得自人參、紅參、白參、鮮人參、參須、人參葉或人參果的提取物。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用途，其中，所述人參皂苷Fl是通過(guò)使所述提取物與酸、堿、酶或產(chǎn)生所述酶的微生物進(jìn)行反應(yīng)而得到的。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其中，所述酸為選自由鹽酸、硫酸和硝酸所組成的組中的至少一種，或者為所述酸與選自由乙醇、甲醇和丁醇所組成的組中的至少一種醇的混合物。7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其中，所述堿為選自由氫氧化鈉和氫氧化鉀所組成的組中的至少一種堿，或者為所述堿與選自由乙醇、甲醇和丁醇所組成的組中的至少一種醇的混合物。8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其中，所述酶為選自由葡萄糖苷酶、α，阿拉伯糖苷酶、α，β-鼠李糖苷酶、β-葡萄糖苷酸酶、β-半乳糖苷酶和淀粉葡萄糖苷酶所組成的組中的至少一種。9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其中，所述微生物為選自由曲霉屬(aspergillussp.)、芽孢桿菌屬(bacillussp.)、青霉屬(penicilliumsp.)、根霉屬(rhizopussp.)、根毛霉屬(rhizomucorsp·)、籃狀菌屬(talaromycessp·)、雙歧桿菌屬(bifidobacteriumsp.)、被孢霉屬(mortierellasp.)、隱球菌屬(Cryptococcussp.)、禾口微桿菌屬(microbacteriumsp.)所組成的組中的至少一種。10.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用途，其中，所述組合物抑制黑色素的產(chǎn)生。11.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用途，其中，所述組合物改善由UV光造成的色素沉著。全文摘要本文公開(kāi)了一種含有源自植物的人參皂苷F1(20-O-β-D-吡喃葡糖基-20(S)-原人參三醇)作為活性成分的增白化妝品組合物。更具體地說(shuō)，所述人參皂苷F1是通過(guò)使用酸、堿、酶或微生物由人參提取物獲得的，而且含有該人參皂苷F1的增白化妝品組合物具有優(yōu)異的抑制黑色素生物合成的效果，從而提供優(yōu)異的皮膚增白效果。文檔編號(hào)A61P17/18GK101820854SQ200780101086公開(kāi)日2010年9月1日申請(qǐng)日期2007年10月31日優(yōu)先權(quán)日2007年10月31日發(fā)明者姜炳永,安秀美,張利燮,樸惠胤,樸葰星,李真锳,金德熙,金銀珠申請(qǐng)人:株式會(huì)社太平洋