專利名稱：：一種復方半邊蓮口服制劑及其制備方法
技術領域：
：本發(fā)明屬于中藥領域，涉及中藥復方半邊蓮制劑及其制備方法。
背景技術：
：復方半邊蓮注射液是國家食品藥品監(jiān)督管理局批準應用于臨床的現(xiàn)代中藥制劑。復方半邊蓮注射液為從中藥半邊蓮、半枝蓮、白花蛇舌草中提取的滅菌水溶液，具有清熱解毒，消腫止痛之功效，臨床上用于多發(fā)性癤腫、扁桃腺炎、乳腺炎等的治療。雖然復方半邊蓮注射液上市多年，臨床應用療效肯定。但是由于注射劑使用不方便、容易引發(fā)患者不良反應，限制了此品種的推廣與使用。因此我們在確保療效的前提下改變了此復方的給藥途徑，即由注射給藥改為口服給藥。經(jīng)過藥效學實驗證明，口服給藥療效肯定、使用方便。
發(fā)明內容本發(fā)明在于公開一種復方半邊蓮口服制劑及其制備方法。所述的復方半邊蓮口服制劑包括口服液體制劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、軟膠囊、咀嚼劑、氣霧劑、滴丸等臨床上經(jīng)口服給藥劑型。本發(fā)明的內容與要點是采用提取、濃縮的方法，將半邊蓮、半枝蓮、白花蛇舌草中主要藥效成分提取出來，并加入相應的輔料經(jīng)過制劑的過程制備成相應的復方半邊蓮口服制劑。采用動物實驗進一步確保口服給藥的療效。本發(fā)明所采用的技術方案是取三味藥材，加水煎煮2次，第一次110小時，第二次15小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.051.20(556(TC)的清膏，澄清處理，加乙醇至含醇量為5070%，靜置124小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，濾液調節(jié)pH值至5.08.0，濾過，得到藥材提取液，再用不同的方法制成不同的制劑。為驗證療效，分別觀察復方半邊蓮制劑對細菌內毒素致家兔體溫升高的影響、復方半邊蓮制劑對啤酒酵母致家兔體溫升高的影響、復方半邊蓮制劑對金黃色葡萄球菌的體外抗菌作用(平皿法)、復方半邊蓮制劑對大腸桿菌的體外抗菌作用(平皿法)、復方半邊蓮制劑對金黃色葡萄球菌感染小鼠的治療作用、復方半邊蓮制劑對大腸桿菌感染小鼠的治療作用、復方半邊制劑液對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響試驗、復方半邊蓮制劑對雞蛋清致大鼠足跖腫脹的影響試驗、復方半邊蓮制劑對組織胺致小鼠皮膚毛細血管通透性的影響試驗、復方半邊蓮制劑對大鼠棉球肉芽腫的影響試驗、復方半邊蓮制劑對小鼠的鎮(zhèn)痛作用(熱板法)、復方半邊蓮制劑對小鼠的鎮(zhèn)痛作用(扭體法)、復方半邊蓮制劑對大鼠的鎮(zhèn)痛作用(壓尾法)。實驗例一、觀察復方半邊蓮制劑對細菌內毒素致家兔體溫升高的影響取體重1.73.Okg的家兔，經(jīng)預測后體溫范圍38.039.6t:，且體溫波動在0.4"C以內的健康家兔36只，給藥前測量兩次正常體溫，間隔30min，兩次體溫之差不得超過0.2'C，以此兩次體溫的平均值作為正常體溫，然后按正常體溫均勻分為六組，每組6只動物①空白對照組；②模型對照組；③陽性對照組(阿司匹林)；復方半邊蓮口服液高劑量組；⑤復方半邊蓮口服液中劑量組；⑥復方半邊蓮口服液低劑量組。家兔經(jīng)口插入人用導尿管灌胃給藥，一天3次，間隔2h，給藥容積均為5.0ml/kg。首次給藥后即開始測量體溫，lh后從耳緣靜脈注射細菌內毒素溶液20EU/kg(20EU/ml，1.0ml/kg,空白對照組不給予細菌內毒素)，每30miii記錄體溫l次，連續(xù)觀察6h。以給藥前正常體溫作為基數(shù)，計算各測定時間點兔體溫的變化(A°C)。結果表明，靜脈注射細菌內毒素后家兔體溫即開始上升，至1.5h左右達高峰，體溫升高〉0.8"C，此后體溫逐漸下降，持續(xù)3h左右。模型對照組與空白對照組比較，注射內毒素后13h，體溫升高(A。C)差別有非常顯著意義或有顯著意義(P<0.01或P〈0.05),說明造模成功；阿司匹林組與模型對照組比較，注射內毒素后2.55h，差別有非常顯著意義或有顯著意義(P〈0.01或P〈0.05);復方半邊蓮口服液高劑量組與模型對照組比較，注射內毒素后22.5h，差別有顯著意義(P〈0.05);中劑量組與模型對照組比較，注射內毒素后25h，差別有非常顯著意義或有顯著意義(P〈0.01或P〈0.05);低劑量與模型對照組比較，差別無顯著意義(P>0.05)。說明復方半邊蓮口服液對細菌內毒素致家兔體溫升高有明顯的解熱作用。二、觀察復方半邊蓮制劑對啤酒酵母致家兔體溫升高的影響取體重1.73.0kg家兔，經(jīng)預測后體溫范圍38.039.6°C，且體溫波動在0.4"C以內的健康家兔36只，給藥前測量兩次正常體溫，間隔30min，兩次體溫之差不得超過0.2。C，以此兩次體溫的平均值作為正常體溫，然后按正常體溫均勻分為六組，每組6只動物①空白對照組；②模型對照組；③陽性對照組(阿司匹林)；④復方半邊蓮口服液高劑量組；⑤復方半邊蓮口服液中劑量組；⑥復方半邊蓮口服液低劑量組。家兔經(jīng)口插入人用導尿管灌胃給藥，一天3次，間隔3h，給藥容積均為5.0ml/kg。首次給藥后立即肌肉注射5%啤酒酵母混懸液1.0ml/kg(空白對照組不給予啤酒酵母)，同時開始測量體溫，每30min記錄體溫1次，連續(xù)觀察10h。以給藥前正常體溫作為基數(shù)計算各測定時間點家兔體溫的變化(A'C)。結果表明，肌肉注射啤酒酵母后家兔體溫即開始緩慢上升，至6h左右達高峰，體溫升高〉1.3X:，此后體溫逐漸下降，持續(xù)4h左右。模型對照組與空白對照組比較，注射酵母后49h，體溫升高(A'C)差別有非常顯著意義或有顯著意義(P〈0.01或P〈0.05),說明造模成功；阿司匹林組與模型對照組比較，注射酵母后4.56h，差別有非常顯著意義或有顯著意義(P〈0.01或P〈0.05);復方半邊蓮口服液高劑量組與模型對照組比較，注射酵母后56h，差別有非常顯著意義或有顯著意義(P〈0.01或P〈0.05);中劑量組與模型對照組比較，注射酵母后56h，差別有顯著意義(P〈0.05)，但體溫變化為高于模型對照組；低劑量與模型對照組比較，注射酵母后7.58.5h，差別有顯著意義(P<0.05)。說明復方半邊蓮口服液對啤酒酵母致家兔體溫升高有一定的解熱作用。三、復方半邊蓮制劑對金黃色葡萄球菌的體外抗菌作用(平皿法)3.1藥物平板培養(yǎng)基的制備稱取營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基1.7g，共5份，分別加入到含復方半邊蓮100、50、25、12.5、6.25mg(生藥)/ml的藥液50ml中，搖晃使溶解，12rC高壓滅菌15min。取10個無菌平皿(90mm直徑，下同)，在蓋上作編號，分別加入上述己熔化并冷卻至4(TC左右的含藥培養(yǎng)基20ml，每個濃度平行制備2個平皿，待瓊脂凝固后，即制成為含藥物的平板培養(yǎng)基。另取4個無菌平皿，同法制備不含藥物的空白平板培養(yǎng)基。3.2菌液的制備和接種接種金黃色葡萄球菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，33'C培養(yǎng)24h后，用0.9%氯化鈉注射液以IO倍順序稀釋為10-1、10-2、10-3、10-4、10-5等不同濃度的細菌懸液，分別取10-5濃度的菌液0.2ml接種于每個平板培養(yǎng)基上，33'C培養(yǎng)24h后取出，觀察細菌在不同濃度的藥物平板上的生長情況。使細菌不生長的最低濃度即為藥物對該菌的MIC。結果表明，復方半邊蓮口服液對金黃色葡萄球菌有一定程度的抑制作用，其MIC為50mg(生藥)/ml。結果見表1表l復方半邊蓮口服液對金黃色葡萄球菌的體外抗菌作用菌株接種細菌量(cfu)最低抑菌濃度MIC(mg(生藥)/ml)金黃色葡萄球菌154.050四、復方半邊蓮制劑對大腸桿菌的體外抗菌作用(平皿法)4.1藥物平板培養(yǎng)基的制備稱取營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基1.7g，共5份，分別加入到含復方半邊蓮500、400、300、200、100mg(生藥)/ml的藥液50ml中，搖晃使溶解，121。C高壓滅菌15min。取10個無菌平皿，在蓋上作編號，分別加入上述己熔化并冷卻至4(TC左右的含藥培養(yǎng)基20ml，每個濃度平行制備2個平皿，待瓊脂凝固后，即制成為含藥物的平板培養(yǎng)基。另取4個無菌平皿，同法制備不含藥物的空白平板培養(yǎng)基。4.2菌液的制備和接種接種大腸桿菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，33。C培養(yǎng)24h后，用0.9%氯化鈉注射液以10倍順序稀釋為10-1、10-2、10-3、10-4、10-5等不同濃度的細菌懸液，分別取10-5濃度的菌液0.4ml接種于每個平板培養(yǎng)基上，33°C培養(yǎng)24h后取出，觀察細菌在不同濃度的藥物平板上的生長情況。使細菌不生長的最低濃度即為藥物對該菌的MIC。結果表明，復方半邊蓮口服液人對大腸桿菌有一定程度的抑制作用，其MIC為500mg(生藥)/ml。結果見表2。表2復方半邊蓮口服液對大腸桿菌的體外抗菌作用菌株接種細菌量(cfo)最低抑菌濃度MIC(mg(生藥)/ml)大腸桿菌153.0500五、復方半邊蓮口服液對金黃色葡萄球菌感染小鼠的治療作用5.1菌液的制備接種金黃色葡萄球菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，33"C培養(yǎng)24h后，用0.9%氯化鈉注射液以IO倍順序稀釋為10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6等不同濃度的細菌懸液備用。選取IO-6濃度的菌液，用平皿表面活菌計數(shù)法測定實驗感染的活菌數(shù)。5.2小鼠腹腔感染模型的建立取小鼠24只，分別尾靜脈注射氫化可的松40mg/kg(2mg/ml，0.2ml/10g體重)，每天1次，連續(xù)2天。第3天分別腹腔注射不同濃度(原液、10-1、10-2、'10-3、10-4、10-5)的菌液0.5ml/只，每個濃度4只小鼠，觀察動物在4天內的死亡情況。選擇最小致死量(MLD)，即感染后能引起小鼠80100%死亡的菌液濃度進行藥物防治實驗。5.3藥物防治實驗取體重1822g的小鼠60只，雌雄各半，隨機分為六組，每組10只動物①空白對照組；②模型對照組；③陽性對照組(雙黃連口服液)；④復方半邊蓮口服液高劑量組；⑤復方半邊蓮口服液中劑量組；⑥復方半邊蓮口服液低劑量組。灌胃給藥，每天1次，連續(xù)10天，給藥容積均為0.2ml/10g體重。給藥第4、5天，除空白對照組外，各組尾靜脈注射氫化可的松40mg/kg(2mg/ml，0.2ml/10g體重)。給藥第6天，除空白對照組外，各組腹腔注射濃度為7.45X108個/ml的菌液0.5ml/只(3.725X108個菌/鼠)，造成感染。逐日觀察動物的死亡情況，連續(xù)觀察7天。以生存時間、生存率作指標，采用簡化直接概率法對結果進行統(tǒng)計學分析。結果表明，模型對照組小鼠死亡率為90%，說明造模成功。與模型對照組比較，雙黃連口服液組和復方半邊蓮口服液高劑量組對金黃色葡萄球菌感染小鼠具有明顯的保護作用，可顯著降低感染小鼠的死亡率，死亡時間亦有一定的延遲；中、低劑量組雖無統(tǒng)計學意義，但死亡率亦有所降低。結果見表3。表3復方半邊蓮口服液對金黃色葡萄球菌感染小鼠的治療作用("=10)組別劑量(g(生藥)kg)死亡數(shù)(只)死亡率(%)死亡時間空白對照組000模型對照組099024h以內陽性對照組20m1(2倍濃縮液)/kg330*2448h高劑量組33330*2448h中劑量組16.55024h以內低劑量組8.2566024h以內注尸<0.05，><0.01，與模型對照組比較六、復方半邊蓮制劑對大腸桿菌感染小鼠的治療作用6.1菌液的制備接種大腸桿菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，33°C培養(yǎng)24h后，用0.9%氯化鈉注射液以10倍順序稀釋為10-1、10-2、10-3、10_4、10-5、10-6、10-7等不同濃度的細菌懸液備用。選取10-7濃度的菌液，用平皿表面活菌計數(shù)法測定實驗感染的活菌數(shù)。6.2小鼠腹腔感染模型的建立取小鼠24只，分別尾靜脈注射氫化可的松40mg/kg(2mg/ml，0.2ml/10g體重)，每天1次，連續(xù)3天。第4天分別腹腔注射不同濃度(原液、10-1、10-2、10-3、10-4、10-5)的菌液0.5ml/只，每個濃度4只小鼠，觀察動物在4天內的死亡情況。選擇最小致死量(MLD)，即感染后能引起小鼠80100%死亡的菌液濃度進行藥物防治實驗。6.3藥物防治實驗取體重1822g的小鼠60只，雌雄各半，隨機分為六組，每組10只動物①空白對照組；②模型對照組；③陽性對照組(雙黃連口服液)；④復方半邊蓮口服液高劑量組；⑤復方半邊蓮口服液中劑量組；⑥復方半邊蓮口服液低劑量組。灌胃給藥，每天1次，連續(xù)10天，給藥容積均為0.2ml/10g體重。給藥第4、5、6天，除空白對照組外，各組尾靜脈注射氫化可的松40mg/kg(2mg/ml，0.2ml/10g體重)。給藥第7天，除空白對照組外，各組腹腔注射濃度為9.25X109個/ml的菌液0.5ml/只(4.625X109個菌/鼠)，造成感染。逐日觀察動物的死亡情況，連續(xù)觀察7天。以生存時間、生存率作指標，采用簡化直接概率法對結果進行統(tǒng)計學分析。結果表明，模型對照組小鼠死亡率為100%,說明造模成功。與模型對照組比較，雙黃連口服液組和復方半邊蓮口服液高劑量組對大腸桿菌感染小鼠具有明顯的保護作用，可顯著降低感染小鼠的死亡率，死亡時間亦有一定的延遲；中劑量組雖無統(tǒng)計學意義，但死亡率有一定的降低，死亡時間略有延遲。結果見表4。表4復方半邊蓮口服制劑對大腸桿菌感染小鼠的治療作用("=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注尸<0.05,戶<0.01,與模型對照組比較七、復方半邊蓮制劑對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響取體重1822g的雄性小鼠50只，隨機分為五組，每組10只動物①空白對照組；②陽性對照組(阿司匹林)；③復方半邊蓮口服液高劑量組；④復方半邊蓮口服液中劑量組；⑤復方半邊蓮口服液低劑量組。灌胃給藥，每天1次，連續(xù)4天，給藥容積均為0.2ml/10g體重。末次給藥前動物禁食不禁水12h，末次給藥后30min，分別在小鼠右耳前后兩面涂100%二甲苯0.02ml/只，左耳不作任何處理。4h后將動物頸椎脫臼處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用9mm直徑的打孔器分別在同一部位打下圓耳片，稱重，分別按下列公式計算腫脹度、腫脹率和抑制率。腫脹度和腫脹率結果以均數(shù)士標準差(；土s)表示，采用SPSS14.0統(tǒng)計分析軟件進行t檢驗。腫脹度fei=右耳片重-左耳片重腫脹率f%J:胡H-f腫x訓0/。左耳片重^^^/。/,空白對照組平均腫脹率_給藥組平均腫脹率1nnQ/抑制率廣％,=-空白對照組平柳中脹率-x，％結果表明，小鼠耳廓涂抹二甲苯后30min即出現(xiàn)明顯的紅腫，4h內腫脹程度可基本維持。阿司匹林組和復方半邊蓮制劑高劑量組的腫脹度及腫脹率分別與空白對照組比較，差別有非常顯著意義(P〈0.01)，抑制率分別為64.60%和66.44%;中劑量組與空白對照組比較，腫脹度差別有顯著意義(P<0.05)，腫脹率差別無顯著意義(P>0.05)，抑制率為40.57%;低劑量組與空白對照組比較，差別無顯著意義(P>0.05)。提示復方半邊蓮制劑對二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹有明顯的抑制作用。結果見表5。表5復方半邊蓮制劑對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響(；b，w=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注'尸<0.05，**尸<0.01，與空白對照組比較八、復方半邊蓮口服液對雞蛋清致大鼠足跖腫脹的影響取體重130150g的雄性大鼠50只，隨機分為五組，每組10只動物①空白對照組；②陽性對照組(阿司匹林)；③復方半邊蓮口服液高劑量組；④復方半邊蓮口服液中劑量組；⑤復方半邊蓮口服液低劑量組。灌胃給藥，每天l次，連續(xù)7天，給藥容積均為1.0ml/100g體重。末次給藥前動物禁食不禁水12h，末次給藥后即刻將動物后肢拉直，自左后足跖中部皮下注入10%雞蛋清0.lml/只致炎。分別于致炎前及致炎后0.5、1、2、4、6h測定大鼠足跖厚度，按下列公式計算各時間點的腫脹度、腫脹率和抑制率，同時觀察腫脹達峰時間和消退時間。腫脹度和腫脹率結果以均數(shù)士標準差(5士s)表示，采用SPSS14.0統(tǒng)計分析軟件進行t檢驗。腫脹度6/W=致炎后足跖厚度-致炎前足跖厚度腫脹釘％;:致炎后足^g;^，妬厚度x腿致炎前足跖厚度抑制率廣％;=站對照組平柳中脹率-給藥組平均腫脹率x薩空白對照組平均腫脹率結果表明，大鼠足跖注射雞蛋清后即逐漸腫脹，于0.5lh達到腫脹高峰，然后開始緩慢消退。阿司匹林組和復方半邊蓮口服液三個劑量組均能顯著降低致炎后0.51h的腫脹度和腫脹率，與空白對照組比較差別有顯著意義(P〈0.05或P〈0.01)，對26h的腫脹度和腫脹率無明顯影響(P〉0.05)，抑制率分別為37.51%、17.78%、35.71%、42.35%、26.25%。提示復方半邊蓮口服液對雞蛋清引起的大鼠足跖腫脹有明顯的抑制作用。結果見表6。九、復方半邊蓮口服液對組織胺致小鼠皮膚毛細血管通透性的影響取體重1822g的小鼠50只，雌雄各半，隨機分為五組，每組10只動物①空白對照組；②陽性對照組(阿司匹林)；③復方半邊蓮口服液高劑量組；④復方半邊蓮口服液中劑量組；⑤復方半邊蓮口服液低劑量組。灌胃給藥，每天1次，連續(xù)4天，給藥容積均為0.2ml/10g體重。末次給藥前動物禁食不禁水12h,末次給藥后30min，于小鼠腹部正中去毛部位皮內注射0.1%組織胺0.02ml/只，立即尾靜脈注射1%伊文思藍溶液0.1ml/10g體重，30min后將動物處死，取下腹部藍染皮膚，剪碎，置裝有6ml丙酮-生理鹽水提取液(7:3，v:v)的具塞試管中浸泡24h，其間輕輕搖動試管23次，2000rpm離心10min，取上清液于610nm處測定吸光度。結果以均數(shù)土標準差(5士s)表示，采用SPSS14.0統(tǒng)計分析軟件進行t檢驗。結果表明，阿司匹林組與空白對照組比較，差別有顯著意義(P〈0.05)，復方半邊蓮制劑三個劑量組分別與空白對照組比較，差別有非常顯著意義(P〈0.01)。提示復方半邊蓮口服液對組織胺引起的小鼠毛細血管通透性增加有明顯的抑制作用。結果見表7。表7復方半邊蓮口服液對組織胺致小鼠皮膚毛細血管通透性的影響(x±&w=10)組別劑量(g(生藥)kg)吸收度空白對照組00.128±0.052陽性對照組0.2g/kg0.080±0.024*高劑量組330.071士0.032"中劑量組16.50.048±0.028**低劑量組8.250.050士0.029"注*尸<0.05，"尸<0.01，與空白對照組比較十、復方半邊蓮口服液對大鼠棉球肉芽腫的影響取體重120150g的大鼠50只，雌雄各半，腹腔注射戊巴比妥鈉30mg/kg(0.3%，1ml/100g體重)麻醉，在每只鼠的左右蹊部用碘酒消毒，75%酒精棉球脫碘后，各切0.51cm長小口，用眼科鑷子將20mg的高壓滅菌棉球從切口處植入皮下，隨即縫合皮膚，并在創(chuàng)口局部皮下注射硫酸慶大霉素0.2m1/只。然后隨機分為五組，每組10只動物①空白對照組；②陽性對照組(阿司匹林)；③復方半邊蓮口服液高劑量組；④復方半邊蓮口服液中劑量組；復方半邊蓮口服液低劑量組。灌胃給藥，每天1次，連續(xù)7天，給藥容積均為l.Oml/100g體重。第8天頸椎脫臼處死后打開原切口，將棉球連同周圍結締組織一起取出，剔除脂肪組織，放6(TC烘箱中烘12h后稱重。按將稱得的重量減去棉球原重量即得肉芽腫重量，取兩側肉芽腫重量的平均值。結果以均數(shù)土標準差(5±s)表示，采用SPSS14.0統(tǒng)計分析軟件進行t檢驗。結果表明，阿司匹林組與空白對照組比較，差別有顯著意義(P<0.05)，復方半邊蓮口服液高劑量組與空白對照組比較，差別有非常顯著意義(P〈0.01)，中、低劑量與空白對照組比較，差別無顯著意義(P〉0.05)，但肉芽腫重量均低于空白對照組。提示復方半邊蓮制劑對大鼠的棉球肉芽腫有一定的抑制作用。結果見表8。表8復方半邊蓮口服液對大鼠棉球肉芽腫的影響(k，n=10)組別劑量(g(生藥)kg)肉芽腫干重(g)空白對照組00.0600±0.0138陽性對照組0.1g/kg0.0460±0細1'高劑量組16.20.0424±0.0058**中劑量組8.10.048U0.0135低劑量組4.050.0551±0.0102注尸<0.05，尸O.Ol，與空白對照組比較十一、復方半邊蓮口服液對小鼠的鎮(zhèn)痛作用(熱板法)取體重1822g的雌性小鼠，每次1只放在預先加熱到(55±0.5)'C的熱板儀的金屬板上，自接觸熱板至出現(xiàn)舔后足所需時間(秒)作為該鼠的痛閾值，痛閾值在530秒且不跳躍者為合格鼠。取合格小鼠50只，測定其正常痛閾值，作為給藥前痛閾值，然后隨機分為五組，每組10只動物①空白對照組；②陽性對照組(阿司匹林)；③復方半邊蓮口服液高劑量組；④復方半邊蓮口服液中劑量組；⑤復方半邊蓮口服液低劑量組。灌胃給藥，每天1次，連續(xù)4天，給藥容積均為0.2ml/10g體重。末次給藥前動物禁食不禁水12h，末次給藥后30min,測定小鼠痛閾值。如60秒仍無反應，將小鼠取出，以免燙傷，其痛閾值以60秒計算。痛閾值結果以均數(shù)土標準差(S士s)表示，釆用SPSS14.0統(tǒng)計分析軟件進行配對t值法檢驗。結果表明，阿司匹林組和復方半邊蓮制劑高劑量組分別與給藥前比較，差別有非常顯著意義(P〈0.01)，中劑量組與給藥前比較，差別有顯著意義(P〈0.05)，低劑量組與給藥前比較，差別無顯著意義(P〉0.05)。提示復方半邊蓮口服液對小鼠有明顯的鎮(zhèn)痛作用。結果見表9。表9復方半邊蓮口服液對小鼠的鎮(zhèn)痛作用(熱板法)("=10)組別劑量(g(生藥)kg)給藥前痛閾值(s)給藥后痛閾值(s)空白對照組015.41±3.8818.58±5.51陽性對照組0.2g/kg14.69±4.1223.28士4.0廣高齊u量組3314.57±3.7922.21士5.75"*中劑量組16.514.72±4.5620.45±4.18*低劑量組8.2515.92±3.6217.89±5.21注*尸<0.05，"尸<0.01，與給藥前比較十二、復方半邊蓮口服液對小鼠的鎮(zhèn)痛作用(扭體法)取體重1822g的小鼠50只，雌雄各半，隨機分為五組，每組10只動物①空白對照組；②陽性對照組(阿司匹林)；③復方半邊蓮口服液高劑量組；④復方半邊蓮口服液中劑量組；⑤復方半邊蓮口服液低劑量組。灌胃給藥，每天1次，連續(xù)4天，給藥容積均為0.2ml/10g體重。末次給藥前動物禁食不禁水12h，末次給藥后30min，分別腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.2ml/只，立即觀察并記錄20min內動物的扭體次數(shù)及出現(xiàn)扭體反應的動物數(shù)，按下列公式計算給藥組的鎮(zhèn)痛百分率。扭體次數(shù)結果以均數(shù)士標準差(；士s)表示，采用SPSS14.0統(tǒng)計分析軟件進行非參數(shù)統(tǒng)計(Mann-Whitney法)，采用x2(2X2)法對出現(xiàn)扭體反應的動物數(shù)結果進行統(tǒng)計學分析。鎮(zhèn)痛百分率f%J對照組扭體反應鼠數(shù)-給藥組扭體反應鼠數(shù)對照組扭體反應鼠數(shù)xl00%結果表明，阿司匹林組與空白對照組比較，差別有非常顯著意義(P〈0.01)，鎮(zhèn)痛百分率達80%，復方半邊蓮口服液高劑量組與空白對照組比較，差別有顯著意義(P<0.05)，鎮(zhèn)痛百分率達70%，中、低劑量組與空白對照組比較，差別無顯著意義(P>0.05)，但扭體次數(shù)及出現(xiàn)扭體反應的動物數(shù)均低于空白對照組。說明復方半邊蓮制劑對小鼠有一定的鎮(zhèn)痛作用。結果見表10。表io復:^半邊蓮口服液對小鼠的鎮(zhèn)痛作用(扭體法)(/7=io)組別劑量(g(生藥)kg)扭體次數(shù)出現(xiàn)扭體反應(只)鎮(zhèn)痛百分率(%)空白對照組04.40±5.10910陽性對照組0.2g/kg0.20±0.42**2**80高劑量組330.90±1.73*3*70*中劑量組16.52.70±2.63730低劑量組8.253.70±4.16730注'尸<0.05，"尸O.Ol，與空白對照組比較十三、復方半邊蓮口服液對大鼠的鎮(zhèn)痛作用(壓尾法)取體重130150g的雄性大鼠60只，隨機分為五組，每組10只動物①空白對照組；②陽性對照組(阿司匹林)；③復方半邊蓮口服液高劑量組；④復方半邊蓮口服液中劑量組；⑤復方半邊蓮口服液低劑量組。灌胃給藥，每天l次，連續(xù)6天，給藥容積均為1.0ml/100g體重。采用壓痛儀在大鼠尾尖端1/3處壓痛，以產生嘶叫時的重量(g)作為痛閾值。首次給藥前測定大鼠正常痛閾值，作為給藥前痛閾值。末次給藥前動物禁食不禁水12h，末次給藥后30min，測定大鼠痛閾值。如重量達IOOOg時動物仍未嘶叫，其痛閾值以IOOOg計算。痛閾值結果以均數(shù)士標準差(S±s)表示，采用SPSS14.0統(tǒng)計分析軟件進行配對t值法檢驗。結果表明，阿司匹林組和復方半邊蓮口服液高劑量組分別與給藥前比較，差別有非常顯著意義(P〈0.01)，高、中劑量組分別與給藥前比較，差別有顯著意義(P<0.05)，低劑量組與給藥前比較，差別無顯著意義(P〉0.05)。提示復方半邊蓮口服液對大鼠有明顯的鎮(zhèn)痛作用。結果見表ll。表ll復方半邊蓮口服液對大鼠的鎮(zhèn)痛作用(壓尾法)(^te，《=10)組別劑量(g(生藥)kg)給藥前痛闞值(g)給藥后痛閾值(g)空白對照組0573.2±108.2596.6±124.3陽性對照組0.1g/kg593.6±146.8819.0±134.7**高劑量組16.2575.2±191.8766.6±250.9*中劑量組8.1529.6±146.6695.2士251.6'低劑量組4.05548.8土170.3558.4±98.1注尸<0.05，*P<0.01，與給藥前比較結合以上結果得出以下結論1、復方半邊蓮制劑對細菌內毒素、啤酒酵母致家兔體溫升高均有明顯的解熱作用。2、復方半邊蓮制劑對小鼠和大鼠均有明顯的抗炎作用。3、復方半邊蓮制劑對金黃色葡萄球菌(G+)、大腸桿菌(G-)有一定程度的體外抗菌作用，其最低抑菌濃度(MIC)分別為50、500mg(生藥)/ml;對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌感染小鼠具有明顯的保護作用，可顯著降低感染小鼠的死亡率，死亡時間亦有一定的延遲。4、復方半邊蓮制劑對小鼠和大鼠均有明顯的鎮(zhèn)痛作用。綜合以上結果說明口服復方半邊蓮制劑可以達到清熱解毒，消腫止痛之功效。實施例以下通過實施例來進一步說明本發(fā)明，應該指出的是，這些實施例僅用于說明的目的，不構成對本發(fā)明的范圍的限制。本領域的技術人員清楚，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍的情況下，可以作出一些變化和改良，這些均包含在本發(fā)明的范疇內。實施例1取半邊蓮、半枝蓮、白花蛇舌草三味藥材各500克，加水煎煮，第一次2小時，第二次1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15(5560°C)的清膏，加乙醇至含醇量為60%，靜置后濾過，濾液回收乙醇至無醇味，濾液調節(jié)pH值至6.07.0，濾過，加糊精與矯味劑適量，制成顆粒、干燥，即得復方半邊蓮顆粒。一次12袋，一日3次(日服生藥量4590克)，口服。清熱解毒，消腫止痛。用于多發(fā)性癤腫、扁桃腺炎、乳腺炎等。實施例2半邊蓮、半枝蓮、白花蛇舌草各500g，將以上三味，加水煎煮兩次，第一次5小時，第二次3小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05(5560°C)的清膏，澄清處理，加乙醇至含醇量為70%，靜置12小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，濾液調節(jié)pH值至6.0-7.0,冷藏24小時，濾過，干燥得干膏，粉碎后，加入微晶纖維素40克，90%乙醇制粒，干燥，整粒，加硬脂酸鎂l克，淀粉調至適量，壓片，即得復方半邊蓮片劑。一次36片，一日3次，口服。清熱解毒，消腫止痛。用于多發(fā)性癤腫、扁桃腺炎、乳腺炎等。實施例3半邊蓮、半枝蓮、白花蛇舌草各500g，將以上三味，加水煎煮兩次，第一次2小時，第二次1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15(5560°C)的清膏，澄清處理，加乙醇至含醇量為60%，靜置12小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，濾液調節(jié)pH值至6.0-7.0，冷藏24小時，濾過，加蔗糖180g，加注射用水至1000ml，再調節(jié)pH值至6.07.0，灌封，滅菌，即得復方半邊蓮口服液。一次1020ml，一日3次，口服。清熱解毒，消腫止痛。用于多發(fā)性布腫、扁桃腺炎、乳腺炎等。實施例4半邊蓮、半枝蓮、白花蛇舌草各500g，將以上三味，加水煎煮兩次，第一次3小時，第二次1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20(5560°C)的清膏，澄清處理，加乙醇至含醇量為550%，靜置12小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，濾液調節(jié)pH值至6.0-7.0，冷藏24小時，濾過，粉碎后，加入微晶纖維素40克，90%乙醇制粒，干燥，整粒，加硬脂酸鎂l克，淀粉調至適量，填充，即得復方半邊蓮膠囊。一次36粒，一日3次，口服。清熱解毒，消腫止痛。用于多發(fā)性癤腫、扁桃腺炎、乳腺炎等。實施例5半邊蓮、半枝蓮、白花蛇舌草各500g，將以上三味，加水煎煮兩次，第一次1小時，第二次1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05(5560°C)的清膏，澄清處理，加乙醇至含醇量為70%，靜置12小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，濾液調節(jié)pH值至6.0-7.0，冷藏24小時，濾過，粉碎成80目細粉后，與植物油950克混均，制丸，即得復方半邊蓮軟膠囊。一次36粒，一曰3次，口服。清熱解毒，消腫止痛。用于多發(fā)性癤腫、扁桃腺炎、乳腺炎等。權利要求1、復方半邊蓮口服制劑，按照重量比計算由半邊蓮500重量份、半枝蓮500重量份、白花蛇舌草500重量份制備成口服液體制劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、軟膠囊劑、咀嚼劑、口崩劑、滴丸、口腔噴霧劑，其特征在于取三味藥材，加水煎煮2次，第一次1～5小時，第二次1～3小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.05～1.20(55~60℃)的清膏，澄清處理，加乙醇至含醇量為50~70％，靜置1~24小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，濾液調節(jié)pH值至5.0~8.0，濾過，得到藥材提取液，再用不同的方法制成不同的制劑。2、如權利要求l所述的復方半邊蓮口服制劑，其特征在于口服液的制備工藝是取三味藥材各500克，加水煎煮，第一次2小時，第二次1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15(556(TC)的清膏，加乙醇至含醇量為60%，靜置后濾過，濾液回收乙醇至無醇味，濾液調節(jié)pH值至6.07.0，濾過，加矯味劑適量，加水至1000ml，即得復方半邊蓮口服液。3、如權利要求2所述的復方半邊蓮口服液的制備工藝，其特征在于加入的矯味劑包含但不限于以下的一種或幾種蔗糖、蜂蜜、甜菊糖、阿斯巴甜、甘油、甘犁醇、木糖醇、高果糖、甜蜜素、果汁糖漿等。4、如權利要求l所述的復方半邊蓮口服制劑，其特征在于顆粒劑的制備工藝是取三味藥材各500克，加水煎煮，第一次2小時，第二次1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15(5560°C)的清膏，加乙醇至含醇量為600%，靜置后濾過，濾液回收乙醇至無醇味，濾液調節(jié)pH值至6.07.0，濾過，加糊精與矯味劑適量，制成顆粒、干燥，即得復方半邊蓮顆粒。5、如權利要求4所述的復方半邊蓮顆粒的制備工藝，其特征在于加入的矯味劑包含但不限于以下的一種或幾種蔗糖、蜂蜜、甜菊糖、阿斯巴甜、甘油、甘犁醇、木糖醇、高果糖、甜蜜素、果汁糖漿等。全文摘要本發(fā)明涉及一種中藥復方半邊蓮制劑及其制備工藝，屬于中藥領域。本發(fā)明由半邊蓮、半枝蓮、白花蛇舌草制成，口服給藥。與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明療效可靠、毒副作用低、成本低廉、易于控制質量。本發(fā)明清熱解毒，消腫止痛。用于多發(fā)性癤腫、扁桃腺炎、乳腺炎等。文檔編號A61K36/185GK101480439SQ20081000064公開日2009年7月15日申請日期2008年1月11日優(yōu)先權日2008年1月11日發(fā)明者朱成功申請人:輔仁藥業(yè)集團有限公司