專利名稱：一類5-位或6-位取代的萘酰亞胺化合物及抗腫瘤應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一類5-位或6-位取代的萘酰亞胺化合物及抗腫瘤應(yīng)用，其屬于精細(xì)化工領(lǐng)域。
技術(shù)背景癌癥嚴(yán)重地威脅著人類的健康與生命安全，開發(fā)高效、低毒的抗腫瘤藥物是醫(yī)學(xué)化學(xué)領(lǐng) 域里十分活躍的研究方向。萘酰亞胺類化合物是一類有很好抗癌活性的化合物，其中氨萘非 特[amonafide (N-( P — 二甲基胺基乙基)_ 3—胺基_ 1 ， 8 —萘酰亞胺)]和米托萘胺 [mitonafide (N-(e—二甲基胺基乙基)一3_硝基_1， 8 —萘酰亞胺)]己經(jīng)進(jìn)入二期臨床試 驗(yàn) (Brana M. F. ， Santos A. ， Roldan C. M. , et al. Eur. J. Med. Chem. Chim. Ther., 1981， 16, 207)。這類化合物能夠嵌插入DNA的堿基對之間，抑制DNA和RNA的合成，并能夠 抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶n ，從而達(dá)到抑制腫瘤的目的。但是，在臨床應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)米托萘胺(mitonafide)具有嚴(yán)重的中樞神經(jīng)毒性；氨萘非特 (amonafide)在體內(nèi)N-乙?；D(zhuǎn)移酶作用下形成N-乙酰氨萘非特(amonafide)，和其他多 數(shù)藥物不同，氨萘非特(amonafide)在快代謝型的人體中容易造成更大的毒副作用，而這種 因?yàn)閭€(gè)人遺傳差異造成的毒副作用不可預(yù)知。因此，開發(fā)新的具有抗腫瘤活性，并且能夠減 少上述副作用的萘酰亞胺化合物是非常必要的。 發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是制備新的、結(jié)構(gòu)多樣的萘酰亞胺化合物，使其具有治療腫瘤用途，并且 這些化合物與已有的萘酰亞胺抗癌先導(dǎo)化合物氨萘非特(amonafide)相比具有更好的療效和 更少的毒副作用。本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是、 一類5-位或6-位取代的萘酰亞胺化合物具有 以下的結(jié)構(gòu)通式(1):<formula>formula see original document page 3</formula>(l)a、 (1)式中K為C, C6的烷基或由(2)式所示的取代基團(tuán) <formula>formula see original document page 3</formula>(2)式(2)中n = 1 6， R4、 Rs選自H、 C, C6烷基中的一種或吡咯環(huán)； b、 (1)式中，當(dāng)R^H時(shí)，R:,選自以下取代基團(tuán)或當(dāng)R:pH時(shí)，R2也選自以下取代基團(tuán):<formula>formula see original document page 4</formula>
含d C6烷基、 {6烷基、鹵素、-NHRe其中R6為d Ce的直鏈或支鏈烷基， Me<formula>formula see original document page 4</formula>鹵素、氨基、硝基的取代苯基，噻吩，吡咯，苯并呋喃，吡啶以及含有C, 氨基、硝基取代的這些雜環(huán)。一類5-位或6-位取代的萘酰亞胺化合物的抗腫瘤應(yīng)用方法是所述化合物對體外抑制腫 瘤細(xì)胞生長活性采用四氮唑鹽還原法對HeLa人宮頸癌細(xì)胞株、P388D1小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞株 進(jìn)行試驗(yàn)，方法是按不同腫瘤生長速度，將一定數(shù)量處于對數(shù)生長期的腫瘤細(xì)胞接種于96孔 微量培養(yǎng)板內(nèi)，培養(yǎng)24小時(shí)后加入藥液10uL/孔，對每個(gè)細(xì)胞株每個(gè)濃度均設(shè)三個(gè)復(fù)孔，另 設(shè)無細(xì)胞凋零孔，在藥物有顏色時(shí)要作相應(yīng)藥物濃度無細(xì)胞凋零孔，腫瘤細(xì)胞在37°C、 5%C02 條件下培養(yǎng)24小時(shí)后，力n MTT (Sigma)液5mg/mL用生理鹽水配置20uL/孔，繼續(xù)培養(yǎng)4 小時(shí)后，加入三聯(lián)液(10%SDS_5%異丁醇-0.01 mol/LHCl) 50nL/孔，于二氧化碳培養(yǎng)箱中 過夜，然后用酶標(biāo)儀測OD570值；按下列公式計(jì)算被測藥物對腫瘤細(xì)胞的生長抑制率 腫瘤抑制率=(對照組OD值-治療組OD值)/對照組0D值X100呢。 合成路線R2含取代基團(tuán)，同時(shí)Ri為H，目標(biāo)化合物的合成路線1 2 4a: R = NH(CH2)2N(CH3)24e: R = HN O4a-4m4i: R4b: R = NH(CH2)3N(CH3)24f: R = HN S4j: R4c:R= NH(CH2)3CH4g: R = HN4k: R :—CH34d: R =、S、NH24h: R = HnT^N-41: R :4m: R =〈-N02反應(yīng)試劑和條件a. Br2，濃硝酸，70 °C，室溫過夜；b. N, N-二甲基乙二胺，乙醇，回 流，2小時(shí)；c. CuI/脯胺酸，各種胺，碳酸銫，二甲基砜(DMS0)， 110°C， 8-12小時(shí)；d.四三苯基磷鈀[Pd(PPh3)4]各種硼酸，碳酸鉀，甲苯，回流，28小時(shí)。5-位取代的萘酰亞胺化合物以工業(yè)品萘酐為原料，通過溴化、氨化和烏爾曼(Ullmami)或 蘇駐奇(Suzuki)偶聯(lián)反應(yīng)制得。由于羰基的強(qiáng)吸電子效應(yīng)，使得5-位電荷堆積，用傳統(tǒng)的 合成方法難以發(fā)生親核取代反應(yīng)，利用CuI/氨基酸催化的改進(jìn)烏爾曼(Ullmann)反應(yīng)和蘇駐 奇(Suzuki)偶聯(lián)反應(yīng)，合成多種5-位取代的萘酰亞胺化合物。Rz為H，同時(shí)R3含有取代基團(tuán)，目標(biāo)化合物的合成路線7a: R = NH(CH2)2N(CH3)2 7b: R = NH(CH2)3N(CH3)2 7c: R = NH(CH2)3CH3 7f: R = HN S7d: R =S'7g: R = HN7e: R = HlsT^07h: R = HnT^N-反應(yīng)試劑和條件a. N，N-一甲基乙二胺，乙醇，冋流，2小時(shí)；b.各種胺，碳酸鉀，乙二醇單甲醚， 加熱回流，8-12小時(shí).6-位取代的萘酰亞胺化合物以4-溴-1， 8-萘酐為原料，通過氨化、親核取代反應(yīng)(包括 上述的烏爾曼偶聯(lián)以及蘇駐奇偶聯(lián)反應(yīng))得到目標(biāo)產(chǎn)物。 在實(shí)驗(yàn)室通過MTT測試方法確定上述化合物對多種不同組織來源的腫瘤細(xì)胞如人宮頸癌、小 鼠淋巴樣瘤等腫瘤細(xì)胞的正常生長具有抑制作用，其中某些化合物的細(xì)胞毒性在同樣實(shí)驗(yàn) 條件下強(qiáng)于先導(dǎo)化合物氨萘非特(amonafide)。 本發(fā)明的有益效果所述的化合物與氨萘非特(amonafide)相比，有些化合物例如4a， 4b， 4h，7a，7b，7h顯示出更強(qiáng)的細(xì)胞毒性。并且所述的化合物呈現(xiàn)結(jié)構(gòu)多樣性，其中不具有?；?位點(diǎn)的化合物可以完全避免類似氨萘非特(amonafide)的毒副作用；而具有?；稽c(diǎn)的化合 物可以通過個(gè)性化給藥避免毒副作用。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例13-溴-l， 8-萘酐(2)的制備液溴(8. 2g， 51.3隱o1)在25 "C時(shí)滴加到1， 8-萘酐(10g, 50. 5 mmol)和70%硝酸(200 mL)的混合溶液中?；旌衔镌?0 。C下攪拌2小時(shí)后，冷卻、過濾、水洗、干燥得到固體目標(biāo)化合物。實(shí)施例25-溴_[2- (二甲胺基)乙基]-l氫-苯并[de]異喹啉-l， 3 (2氫)-二酮(3)的制備3-溴-l， 8-萘酐(2) (277 mg， 1腿ol)和N，N-二甲基乙二胺 (1.2誦ol)的混合物 在乙醇(20 mL)中加熱回流2小時(shí)后，除去溶劑，得到目標(biāo)產(chǎn)物。收率92%，淺棕色固體，mp 77.2-78.6 "C; 'H麗R (400 MHz CDC1J (ppm) 8.65 (s， 1H) 8. 59 (dd， 1H， /= 1. 0 and 7. 2 Hz) 8. 35 (s' 1H) 8. 11 (dd, 1H, /= 0. 7 and 8. 3 Hz) 7. 77 (t, 1H，7.8 Hz) 4.34 (t， 2H， /= 6.9 Hz) 2.70 (t， 2H, / = 6.9 Hz) 2.39 (s, 6H)實(shí)施例35-(二甲胺基-乙胺)-2-[2-(二甲胺基)乙基]-l氫-苯并[de]異喹啉-l， 3(2氫)-二酮(4a) 的制備化合物3 (174mg， 0.5mmo1)， Cul (9. 6 mg， 0. 05 mmol)、脯胺酸(11.5mg， 0. 1 mmol)、 Cs2C03 (247 . 5 mg, 0. 6畫l)和N， N-二甲基乙二胺(0. 75讓ol)的混合物，在DMSO (2 mL) 中，在11(KC及氮?dú)獗Ｗo(hù)下，攪拌反應(yīng)8小時(shí)。粗產(chǎn)物以二氯甲烷甲醇為展開劑，柱層析 得到純品目標(biāo)化合物。收率52%,橙色固體，mp 97.2-98.6 。C; 'H麗R (400 MHz CDC13) 5 (ppm) 8.265 (dd， 1H, /= 0.8 and 7.2 Hz) 8.02 (s， 1H) 7.93 (d， 1H， /= 7. 6 Hz) 7.58 (t， 1H， /= 7.2 Hz) 7.11 (s， 1H) 4.94 (t, 1H， /=4.4Hz) 4.32 (t， 2H, /=7. 2Hz) 3.32—3.28 (m， 2H) 2.67—2.64 (m， 4H) 2.37(s， 6H) 2.30 (s, 6H) ; l3C NMR (100 MHz CDC1:》^ (ppm) 164.6， 164.4， 147.1， 133.8, 131.6' 127.1， 126.6, 123.3, 122.4， 122.0， 121.9, 110.0, 57.4, 57. 0, 45. 7, 45. 1, 41. 0， 38. 1; IR (KBr cm—') 3377， 2955' 1684 1654; HRMS (ESI) m/z (M+H) + calcd for C2。H27N402 3 5 5 . 2 1 34, found 355.2169。實(shí)施例45- (二甲胺基-丙胺)_2-[2- (二甲胺基)乙基]-l氫-苯并[de]異喹啉-1， 3 (2氫)-二酮(4b) 的制備合成方法同實(shí)施例3，反應(yīng)時(shí)間8小時(shí)。收率50%,橙色固體，mp115. 8-116. 3°C; 'H麗R (400 MHz CDC13) ^ (ppm) 8.25 (d, 1H, /= 0.8 and 7.2 Hz) 7.97 (s, 1H, 4—H) 7.92(d， 1H， / = 8. 4 Hz) 7.57 (t, 1H， /= 7.2 Hz) 7.08 (s, 1H) 5.53 (s， 1H) 4.34—4.30 (m, 2H) 3.36 (s， 2H) 2.67—2.64 (m, 2H) 2. 52-2. 49 (m， 2H) 2. 37 (s, 6H) 2. 31 (s， 6H) 1. 90-1. 87 (m' 2H) ; 13C NMR (100 MHz CDC13) 5 (ppm) 164.7, 164.5， 147.2' 133.9, 131.6, 127.0, 126.4， 123.2, 122.4, 122.2, 121.9, 109.3, 58.6， 57.0， 45.7, 43,5, 38.1， 25.9; IR (KBr cnf') 3370， 1691， 1654; HRMS (ESI) m/z (M+H)+ calcd for C21H29N402 369.2291， found 369.2294。實(shí)施例55-丁胺-2-[2- (二甲胺基)乙基]-1氫-苯并[de]異喹啉-1， 3 (2氫)-二酮(4c)的制備 合成方法同實(shí)施例3，反應(yīng)時(shí)間9小時(shí)。收率34%，橙色固體，mpl26-127。C; 'H匿(400 MHz CDC1:,) (卯m) 8.25 (d, 1H， / =7.2 Hz) 7.95—7.91 (m, 2H) 7.58 (t, 1H, / = 7. 2 Hz) 7.07 (s， 1H) 4.33 (t, 2H, / = 6. 8 Hz) 4. 19 (s, 1H) 3. 29-3. 24 (m， 2H) 2. 68 (t, 2H, /= 7. 2 Hz) 2. 39 (s， 6H) 1. 74-1. 67 (m, 2H) 1.55-1.45 (m， 2H) 1.01 (t， 3H, /= 7.6 Hz); l:iC NMR (100 MHz CDC13) 5 (卯m) 164.6， 164.4, 146.9， 133.8， 131.7, 127.1, 126.6, 123.2, 122.3， 122.0， 121.8, 109.6， 56.9， 45.6, 43.6， 38.0， 31.3， 20.3, 13.9; IR (KBr cm—') 3237' 2948， 1704, 1648; H脂S (ESI) m/z (M+H)+ calcd for C2。H26N302 3 40 . 2 0 2 5， found 340.2037。實(shí)施例65-[(噻吩-2-甲基)-胺基]_2-[2- (二甲胺基)乙基]-l氫-苯并[de]異喹啉-l， 3 (2氫)-二酮(4d)的制備合成方法同實(shí)施例3，反應(yīng)時(shí)間12小時(shí)。收率31%,橙色固體，mp 144. 7-146. 1 °C; NMR (400 MHz CDC13)《(ppm) 8.29 (d, 1H， /=7.2Hz) 8.04 (s， 1H) 7.94 (d, 1H， ，/=8. 0Hz) 7.60 (t， 1H, /= 8. 0 Hz) 7.22-7.18 (m, 1H) 7.18 (s' 1H) 7.09 (s， 1H) 7.02—7.00 (m， 1H) 4.70 (s' 3H) 4.38 (t， 2H, /=6.8 Hz) 2. 84 (t， 2H， /= 6. 0 Hz) 2. 50 (s， 6H) ; "C麗R (400 MHz CDC1..0 J (ppm) 164. 6, 164. 3， 146.0， 141.5, 133.6， 132.1， 127.2, 127.1, 126.8, 125.5， 125.0' 124.9, 123.3, 122.4, 122.3， 121.9， 110.7， 56.5， 45.1， 43.2, 37.3, 29.7; IR (KBr cm—') 3377， 2918, 1695， 1651; H脂S (ESI) m/z (M+H)+ calcd for C21H22NAS 380.1433, found 380.1451。實(shí)施例75-嗎啉-2-[2- (二甲胺基)乙基]-l氫-苯并[de]異喹啉-l， 3 (2氫)-二酮(4e)的制備 合成方法同實(shí)施例3，反應(yīng)時(shí)間10小時(shí)。收率30%,橙色固體，mp 147. 8-149. 6 °C; 'H NMR (400 MHz CDC13)《(卯m) 8.38-8.35 (m, 2H) 8.02 (d, 1H, /=8. 0 Hz) 7.65 (t， 1H， ，/=8.0Hz) 7.43 (s' 1H) 4.37 (t， 2H, /= 6.8 Hz) 3.94 (t， 4H， /= 4. 8 Hz) 3.38 (t， 4H， ./= 4.8 Hz) 2.78 (t, 2H， /= 6.8 Hz) 2.46 (s, 6H);13CNMR (100 MHz CDC 1》^ (ppm) 164.4， 149.8， 134.0' 133.2， 132.6, 131.3, 128.2， 127.3, 126.9, 123.3, 123.1， 122.8， 122.3' 115.1, 66.7, 56.7, 49.0， 45.3, 37.6; IR (KBr cm—') 3414, 2955, 1691, 1651， 1261; HRMS (ESI) m/z (M+H)+ calcd for C2。H24N303 354.1818， found 354. 1829。實(shí)施例85-硫嗎啉_2-[2- (二甲胺基)乙基]-l氫-苯并[de]異喹啉-l， 3 (2氫)-二酮(4f)的制備合成方法同實(shí)施例3，反應(yīng)時(shí)間11小時(shí)。收率27%,橙色固體，mp167. 5-168. 8。C; 'H NMR (400 MHz CDC13) 5 (ppm) 8.35 (d， 1H, /=7.6Hz) 8.31 (s, 1H) 8.00 (d, 1H, ./=8.4Hz) 7.64 (t, 1H， /=7.6Hz) 7.40 (s， 1H) 4.37 (t， 2H, /= 6.8 Hz) 3.78 (t, 4H，5.2 Hz) 2.81 (t， 4H, / = 5. 2 Hz) 2.73 (t， 2H, /=6.8Hz) 2.43 (s' 6H) ; 't NMR (100 MHz CDC13) 5 (ppm) 164.4， 149.3， 133.4，132.3, 128.0, 127.3, 126.9， 123.8， 123.6, 122.8， 122.2, 115.9， 57.0, 51.6, 45.7, 38.2, 26. 5; IR (KBr cm—') 2948， 1691， 1654;服MS (ESI) m/z (M+H)+ calcd for C2。H24N302S 370. 2349， found 370.2358。實(shí)施例95-哌啶-2-[2- (二甲胺基)乙基]-1氫-苯并[de]異喹啉-1， 3 (2氫)-二酮(4g )的制備 合成方法同實(shí)施例3，反應(yīng)時(shí)間11小時(shí)。收率25%,橙色固體，mp 130. 3-131. 6。C; 'H麗R (400 MHz CDC1:,) 5 (卯m) 8. 38(s, 1H) 8.32(d, 1H, /=7.2 Hz) 7.98 (d， 1H， ./=8.0Hz) 7.61 (t， 1H， /=8.0 Hz) 7.41 (s, 1H) 4.34 (t， 2H， /= 7.6 Hz) 3.39 (t， 4H， /= 5.6 Hz) 2.68 (t， 2H， /= 7. 2 Hz) 2.38 (s, 6H) 1.79-1.76 (m， 4H) 1.70-1.67 (m, 2H) ; 1:iC NMR (100 MHz CDCl..,) 5 (ppm) 164.6，150.4, 133.5' 132.3, 131.3， 127.6， 127.0， 123.8, 123.1, 122.6' 122.3' 115.1, 56.9, 50.1， 45.6， 38.0' 25.5， 24.2; IR (KBr cm—') 2926， 1695' 1654; 冊MS (ESI) m/z (M+H) + calcd for C21H26N302 3 5 2 . 20 2 5， found 352. 2030。實(shí)施例105-(4，-甲基-哌嗪)-2-[2-(二甲胺基)乙基]-1氫-苯并[de]異喹啉-l， 3(2氫)-二酮(4h) 的制備合成方法同實(shí)施例3，反應(yīng)時(shí)間12小時(shí)。收率22%,橙色固體，mp 121. 2-122. 8 °C; 'H NMR (400 MHz CDC13) ^ (ppm) 8.38 (s, 1H) 8.35 (d, IH， ，/=6.8Hz) 8.01 (d， 1H， /=8.0 Hz) 7.64 (t' 1H， /=8.0 Hz) 7.43 (s， 1H) 4.34 (t， 2H' 6.8 Hz) 3.44 (t， 4H， /= 4. 8 Hz) 2.68-2.64 (m， 6H) 2.40 (s， 3H) 2.37 (s, 6H);"C剛R (400 MHz CDC13) 5 (卯m) 164.5， 149.7， 133.3, 132.4, 127.9， 127.2, 123.2， 122.3, 115.1, 57.0' 54.8, 48.8, 46.1， 45.7, 38.1; IR (KBr cm—') 3414， 1688' 1647; H脂S (ESI) m/z (M+H)+ calcd for C2'H27N402 3 67 . 2 1 34, found 367.2142。實(shí)施例115-噻吩-2-[2- (二甲胺基)乙基]-l氫-苯并[de]異喹啉-l， 3 (2氫)-二酮(4i )的制備化合物3 (174 mg， 0. 5國o1)，噻吩硼酸(96 mg， 0. 75mmol)， Pd(PPh3)4 (25mg， 0.02 腿ol)和K2C03 (103 . 5 mg， 0.75誦ol)的混合物，在甲苯(3 mL)中，氮?dú)獗Ｗo(hù)下加熱回流 28小時(shí)。粗產(chǎn)物利用二氯甲垸和甲醇為洗脫劑，通過柱層析分離純化制得純目標(biāo)產(chǎn)物。收率55%，草綠色固體，mp 110.5-112, 2°C; 'H NMR (400 MHz CDC1:,) ^ (ppm) 8.87 (s， 1H) 8.55 (dd， 1H， / = 0. 8 and 7. 2 Hz) 8.36 (s, 1H) 8.21 (d， 1H， /=7.6Hz) 7.76 (t，1H, / = 7. 6 Hz) 7. 58 (dd' 1H， / = 0. 8 and '/ = 3.6 Hz)' 7. 43 (dd, 1H' / = 0. 8 and / =4.8 Hz) 7.20—7.18 (m, 1H) 4.40 (t， 2H， /= 6.8 Hz) 2.78 (t， 2H, / = 6. 8 Hz) 2.45 (s， 6H); 13C畫R (100 MHz CDC13)《(卯m) 164.1, 142.3, 140.6' 136.9， 133.9， 133.4， 132.2, 130.9' 129.4, 129.3， 128.6, 127.6， 127.3， 126.4， 124.9， 123.2， 122.6, 56.8， 45.5， 37.8; IR (KBr cm—') 3348, 3103， 2370， 1691, 1654; HRMS (ESI) m/z (M+H)+ calcd for C2。Hl9N202S 351.1123, found 351.1144。實(shí)施例125-苯基-2-[2- (二甲胺基)乙基]-1氫-苯并[de]異喹啉-l， 3 (2氫)-二酮(4j)的制備 合成方法同實(shí)施例11。收率48%，白色固體，mp 126.4-128.2 。C; 'H NMR (400 MHz CDC1:,)《(卯m) 8.87 (s， 1H) 8.58 (dd， 1H， /= 1.0 and 7.2Hz) 8.38 (s' 1H) 8.25 (dd， 1H， /= 0.7 and 8.2 Hz) 7.78—7.76 (m, 2H) 7.75 (s， 1H) 7.55—7.52 (m, 2H， ) 7.47—7.44 (m, 1H) 4.38 (t， 2H， / =7. 0 Hz) 2. 73 (t， 2H' /= 7. 0 Hz) 2. 41 (s, 6H) ; ':'C NMR (100 MHz CDC1:,) 5 (卯m) 164. 2， 140.1， 139.3' 134.1， 132.2， 131.3， 131.0， 130.8, 129.2, 128.4, 127.5, 127.4， 127.3， 123.2， 122.6, 57.0， 45.6, 38.0; IR (KBr cm—') 3444, 2948， 1688， 1654; HRMS (EI) m/z (M+H)+ calcd for C22H2。N202 3 44. 152 5， found 344. 1526。實(shí)施例135-(4'-甲基-苯基)_2-[2-(二甲胺基)乙基]-1氫-苯并[de]異喹啉-l， 3(2氫)-二酮(4k) 的制備合成方法同實(shí)施例11。收率51%，白色固體，mp 219. 8-220. 9°C; 'H NMR (400 MHz CDC1》5 (卯m) 8.87 (s， 1H) 8. 57(dd, 1H， ，/= 0. 8 and 7.2 Hz) 8.37 (s， 1H) 8.25 (d' 1H， /= 8. 0 Hz) 7.79 (t， 1H, 7.2 Hz) 7.68 (d' 2H, / = 8. 0 Hz) 7.35 (d, 2H' / = 8. 4 Hz) 4.41 (t， 2H， / = 6. 8 Hz) 2.79 (t， 2H, 6.8 Hz) 2.45 (s, 9H) ; '3C NMR (100 MHz CDC13) 5 (ppm) 164.3, 140.0' 138.4, 136.3, 134.1, 132.2, 130.9, 130.8， 130.0' 129.9， 127.2, 123.0， 122.5, 56.8， 45.4， 37.8， 21.2; IR (KBr cm-') 3370， 2940， 1694， 1663; HRMS (ESI) m/z (M+H) + calcd for 。2風(fēng)359. 1735， found 359. 1736。實(shí)施例145-(3' ，4， -2 -苯基)-2-[2-(二甲胺基)乙基]-l氫-苯并[de]異喹啉-1， 3(2氫)-二酮(41) 的制備合成方法同實(shí)施例11。收率43%，白色固體，mp 115.1-116.3 °C; 'H NMR (400 MHz CDC1:,) 5 (ppm) 8.78 (s， 1H) 8.62(d, 1H, /= 7.2 Hz) 8.32 (s, 1H) 8.26 (d， 1H， /= 8.0 Hz) 7.80 (t, 1H' / = 7.6 Hz) 7.61-7.56 (m， 1H) 7.553—7.49 (m, 1H) 7.37—7.30 (m' 1H) 4.37(t， 2H, /=6.8Hz) 2.69 (t' 2H' /=6. 8Hz) 2.37 (s, 6H) ; "CNMR (1—00 MHz -CDC13) 5 (卯m) 164.0， 151.9， 149.4， 137.9, 136.4, 136.3, 134.0, 132.1， 131.3, 131.1, 130.0， 127.6, 127.5， 123.5,122.7, 118.2， 118.0, 116.5， 116.4， 57.0， 45.8， 38.3; l9F陋R 5 —) -136.4, -138.1; IR (KBr cm1) 2940， 1703， 1654, 1142; HRMS (ESI) m/z (M+H) + calcd for C22H19F2N202 381.1415， found 381. 1396。實(shí)灘例155- (3' _硝基-苯基)-2-[2-(二甲胺基)乙基]-1氫-苯并[de]異喹啉-l， 3(2氫)-二酮(4m ) 的制備合成方法同實(shí)施例11。收率40%，淡黃色固體，mp 188. 2-183. 6。C;'H NMR (400 MHz CDC1:,)《(卯m) 8.87 (s， 1H) 8.64-8.63 (m, 2H) 8.45 (s， 1H) 8.33-8.30 (m, 2H) 8.11 (d， 1H， /=8.0Hz) 7.83 (t， 1H' /= 8. 0 Hz) 7.74 (t， 1H， / = 8. 0 Hz) 4.39 (t， 2H, / = 6. 8 Hz) 2.74 (t, 2H， /=6. 8Hz) 2. 41(s, 6H) ; 13C NMR (100 MHz CDC1:,) 5 (卯m) 165.2' 149.0， 141.0， 137.4, 134.2， 133.3， 132.1， 131.7, 130.3， 130.0， 127.8， 123.7, 123.1, 122.7, 122.2, 56.9， 49.9， 45.6, 38.1， 29.7, 22.7; IR (KBr cm—') 3333, 2933' 1695， 1658, 1385; HRMS (ESI) m/z (腕)+ calcd for C22H20N:,04 390. 1430， found 390. 1434。實(shí)施例166- 溴-[2- (二甲胺基)乙基]-1氫-苯并[de]異喹啉-l， 3 (2氫)-二酮(6)的制備4-溴-l， 8-萘酐(277 mg， 1 mmol)和N， N-二甲基乙二胺(1.2 mmol)在乙醇(20 mL) 中加熱回流2小時(shí)后，除去溶劑，得到目標(biāo)產(chǎn)物。實(shí)施例176-(二甲胺基-乙胺)-2-[2-(二甲胺基)乙基]-l氫-苯并[de]異喹啉-l， 3(2氫)-二酮(7a) 的制備化合物(6) (174 mg， 0. 5鵬o1)， N' N-二甲基乙二胺(2 mmol)和K2C0:, (69 mg' 0.5 國ol)的混合物，在乙二醇單甲醚(15 mL)中加熱回流12小時(shí)后，經(jīng)提純得到目標(biāo)產(chǎn)物。收率75%，黃色固體，mp 118-118.6 。C ; 'H NMR (400 MHz CDC13) 5 (ppm) 8.58 (d， 1H， /=7.2Hz) 8.46 (d, 1H, /= 8.0 Hz) 8.14 (d' 1H， /=8.4Hz) 7.62 (t， 1H， /=8.0 Hz) 6.66 (d, 1H, /=8.8Hz) 6.3 (br， 1H) 4.32 (t， 2H， /=7. 2Hz) 3.40—3.36 (m, 2H) 2.73 (t, 2H， /= 6.0 Hz) 2.65 (t， 2H， ./= 7.2 Hz) 2.37 (s， 6H) 2.34 (s, 6H) ; l3C麗R (400 MHz CDCL) 5 (ppm) 164.8， 164.2, 149.7, 134.6, 131.1, 129.9, 126.4, 124.6, 123.0, 120.4， 110.0, 104.4， 57.1, 45.7， 45.0, 40.1， 37.9; IR (KBr cm—') 3274, 2955， 1677, 1640; HRMS (EI) m/z (M+H)+ calcd for C2。H27N402 355.2134， found 355.2118。10實(shí)施例186-(二甲胺基-丙胺)-2-[2-(二甲胺基)乙基]-l氫-苯并[de]異喹啉-l， 3(2氫)-二酮(7b) 的制備:合成方法同實(shí)施例17。收率72%，黃色固體，mp 117-117.8 。C; 'H薩(400 MHz CDCl:i) 5 (ppm) 8.58-8.55 (m， 2H) 8.43 (d， 1H, /= 8.0 Ilz) 8.00 (d， 1H， / = 8. 0 Hz) 7.57 (t， 1H, /= 7.6 Hz) 6.58 (d, 1H， /= 8. 0 Hz) 4.32 (t, 2H, 7. 2 Hz) 3.48 (s, 211) 2.67—2.63 (m, 4H) 2.42 (s， 6H) 2.37 (s, 6H) 1,97 (t, 2H， /= 5. 6 Hz) : l3C麗R (100 MHz CDC 13) 5 (ppm) 164.9, 164.2， 150.9， 134.9， 131.0, 130.0, 126.7, 124.4， 122.9, 120.7, 109.1， 103.4, 59.6, 57.1， 44.8, 37.8, 24.2; IR (KBr cm—') 3422， 2948， 1680, 1639; HRMS (EI) m/z (M+H) + calcd for C21H29t^02 369.2291， found 369.2281。實(shí)施例196-丁胺-2-[2- (二甲胺基)乙基]-1氫-苯并[de]異喹啉-1， 3 (2氫)-二酮(7c)的制備 合成方法同實(shí)施例17。收率60%，黃色固體，mp 105-106.7 °C ; 'H麗R (400 MHz CDC13) (ppm) 8.55 (d, 1H, /= 7. 6 Hz) 8,43 (d, 1H, /二 8. 0 Hz) 8.07 (d， 1H， /= 8.0 Hz) 7.59 (t, 1H, /= 8.0 Hz) 6.69 (d， 1H， 8.0 Hz) 5.32 (br， 1H) 4.33 (t， 2H， ，/= 7.2 Hz) 3.43-3.38 (m， 2H) 2.69 (t， 2H, ,/=7.2 Hz) 2.39 (s, 6H) 1.84—1.76 (m, 2H) 1.59—1.49 (m， 2H) 1.032 (t, 3H, /= 7. 6 Hz) ; ':!C NMR (100 MHz CDC 13) (卯m) 164.7， 164.1， 149.5, 134.5， 131.1， 129.8, 125.8, 124.6, 123.1， 120.1, 110.1, 104.3， 57.1, 45.7, 43.4, 37.8, 31.0, 20.3， 13.8; IR (KBr cm—') 3291, 2952， 1683, 1637; HRMS (EI) m/z (M+H)+ calcd for C20H26NA 340.2025， found 340. 2023。實(shí)施例206-[(噻吩-2-甲基]-胺基]-2-[2- (二甲胺基)乙基]-1氫-苯并[de]異喹啉-1， 3 (2氫)-二酮(7d)的制備:合成方法同實(shí)施例17。收率54%，黃色固體，mp 162.4-164 。C ; 'H NMR (400 MHz CDC1:〕《(ppm) 8.56 (d， 2H, /= 7.2 Hz) 8.44 (d, 1H, /= 8. 0 Hz) 8.09 (d, 1H, / = 8.0 Hz) 7.61 (t， 1H， / = 7. 6 Hz) 7.31 (dd, 1H， /= 0.8 and 4.8 Hz) 7.14 (s， 1H) 7.05—7.03 (m, 1H) 6.80 (d， 1H， /= 7.6 Hz) 5.69 (t, 111, /= 4. 8 Hz) 4.79 (d, 2H, /= 4.8 Hz) 4.35 (t, 2H， / = 7. 2 Hz) 2. 73 (t, 2H, /= 6. 8 Hz) 2. 42 (s， 6H) ; '3C NMR (100 MHz CDCL) (ppm) 164. 6, 164. 0， 148.6, 140.0, 134.3， 131.2， 129.7， 127.3， 126.3, 126.0， 125.6， 125.0， 123.1， 120.4, 111.2, 105.0, 57.0, 45.6, 43.0， 37.6; IR (KBr era—') 3311, 2348， 1677， 1647; HRMS (EI) m/z (M+H)+ calcd for C2,H22N202S 380.1433, found 380.1422。實(shí)施例216-嗎啉-2-[2- (二甲胺基)乙基]-l氫-苯并[de]異喹啉-l， 3 (2氫)-二酮(7。的制備 合成方法同實(shí)施例17。收率70%，黃色固體，mpl33. 3-134. 8°C; 'H NMR (400 MHz CDC1:,) 5 (ppm) 8.59 (d， 1H， /= 7.2 Hz) 8.54 (d, 1H， / = 8. 0 Hz) 8.42 (d' 1H, / = 7. 6 Hz) 7.71 (t， 1H， / = 8. 0 Hz) 7.23 (d， 1H, /= 8.0 Hz) 4.33 (t, 2H, /= 7. 2 Hz) 4.02 (t, 4H' /= 4.4 Hz) 3.27 (t. 4H' 4. 4 Hz) 2.68 (t， 2H, / = 6. 8 Hz) 2.38 (s' 6H) ; ':t陋R (100 MHz CDC13) J (卯m) 164.5， 164.0, 155.6， 132.6， 131.2, 130.1， 130.0, 126.2, 125.8, 123.3, 117.2, 115.0， 67.0， 57.0， 53.4, 45.7, 37.9; IR (KBr cm—1) 2977， 1699， 1651; HRMS (EI) m/z (M+H)+ calcd for C2。H24N:i03 354. 1818， found 354.1824。實(shí)施例226-硫嗎啉-2-[2- (二甲胺基)乙基]-l氫-苯并[de]異喹啉-l， 3 (2氫)-二酮(7f)的制備 合成方法同實(shí)施例17。收率73%，黃色固體，mp 118.3-119.5 °C; 'H NMR (400 MHz CDC1:,) 5 (卯m) 8.59 (d, 1H， /=7.6 Hz) 8.52 (d, 1H' /=8.0Hz) 8.37 (d， 1H， ，/= 8.0 Hz) 7.71 (t, 1H, ,/= 7.6 Hz) 7.24 (d, 1H, ,/= 8.0 Hz) 4.33 (t, 2H, /= 7. 2 Hz) 3.51 (t, 4H, / = 4.0 Hz) 2.97 (t， 4H， /= 4.4 Hz) 2.68 (t, 2H, /= 6.8 Hz) 2.38 (s, 6H) ; 't NMR (100 MHz CDC13) ^ (ppm) 164.5, 164.0， 156.8' 132.5， 131.2， 130.0, 129.9, 126.6' 125.9, 123.3, 117.2， 116.0， 56.9， 55.6， 45.6' 37.8， 28.2; IR (KBr cm—" 3311， 2963, 1677， 1647; HRMS (EI) m/z (M+H)+ calcd for C2。H2iN:,02S 370.1589, found 370.1579。實(shí)施例236-哌啶-2-[2- (二甲胺基)乙基]-1氫-苯并[de]異喹啉-l， 3 (2氫)-二酮(;7g)的制備 合成方法同實(shí)施例17。收率78%，黃色固體，mp 128-129.3 。C; 'H醒(400 MHz CDCU (卯m) 8.57 d, 1H， 7. 2 Hz) 8.49 (d, 1H, /= 8. 0 Hz) 8.39 (d, 1H, /= 8. 0 Hz) 7.67 (t, 1H， /= 8. 0 Hz) 7.17 (d, 1H, /= 8.0 Hz) 4.32 (t， 2H, ./= 7.2 Hz) 3.23(s, 4H) 2.66 (t, 2H, / = 7.2Hz) 2.37(s, 6H) 1.90—1.86 (m， 4H) 1.74-1.72 (m' 2H) ; 13C NMR (100 MHz CDC13) 5 (ppm) 164.6， 164.1， 157.4, 132.7, 131.1, 130.6， 126.3, 125.3, 123.1， 115.9, 114.7, 56.9, 54.5, 45.6, 37.8, 26,2， 24.3; IR (KBr cm-1) 3370, 2933, 1691， 1654; HRMS (EI) m/z (M+Hr calcd for C21H26N302 3 52 . 20 2 5, found 352.2034。實(shí)施例246-(4'-甲基-哌嗪)-2-[2-(二甲胺基)乙基]-l氫-苯并[de]異喹啉-1， 3(2氫)-二酮(7h) 的制備合成方法同實(shí)施例17。收率72%，黃色固體，rap 162.4-163.7 °C ; 'H麗R (400 MHz CDC13) 5 (ppm) 8.58 (dd, 1H, /= 0. 8 and 7. 2 Hz) 8. 51 (d， 1H, /= 8. 0 Hz) 8. 41 (d, 1H, /= 0. 8 and 8. 0 Hz) 7. 69 (t, 1H, /= 7.6 Hz) 7.22 (d, 1H, / = 8. 0 Hz) 4.36 (t， 2H， ./= 7.2 Hz) 3.32 (t， 4H， /= 4.4 Hz) 2.76—2.72 (m, 6H) 2.45 (s, 3H) 2.43 (s, 6H) ; '3C NMR (100 MHz CDC13) 5 (ppm) 164.5, 164.0, 156.0， 132.7' 131.2, 130.3, 130.0， 126.2, 125.6, 123.2, 116.6, 115.0, 56.8' 55.1, 52.9, 46.1， 45.5， 37.6; IR (KBr cm—0 3392, 2985, 1692, 1652; HRMS (EI) m/z (M+H)+ calcd for C21H27N402 3 67 . 20 89, found 367.2090。實(shí)施例25體外抑制腫瘤細(xì)胞生長活性測定用四氮唑鹽(microculture tetrozolium, MTT)還原法對P388D1小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞和 HeLa人宮頸癌細(xì)胞進(jìn)行抑制試驗(yàn)。四氮唑鹽(MTT)還原法的具體操作是按不同腫瘤生長速率，將一定數(shù)量處于對數(shù)生長 期的腫瘤細(xì)胞接種于96孔微量培養(yǎng)板內(nèi)，培養(yǎng)24 h后加入藥液10u 1/孔，對每個(gè)細(xì)胞株， 每個(gè)濃度均為三個(gè)復(fù)孔。另設(shè)無細(xì)胞調(diào)零孔、如果藥物有顏色要做相應(yīng)藥物濃度無細(xì)胞調(diào)零 孔。腫瘤細(xì)胞在37 °C、 5% )2條件下培養(yǎng)24 h后，加MTT(Sigma)液5 mg/ml用生理鹽水配 制20 ul/孔；繼續(xù)培養(yǎng)4h后，加入三聯(lián)液(10%SDS-5%異丁醇-0. 01 mol/LHCl) 50 u 1/ 孔，于C0z培養(yǎng)箱中過夜。然后用酶標(biāo)儀測0D570值。按下列公式計(jì)算被測物對癌細(xì)胞生長的抑制率腫瘤抑制率=(對照組0D值-治療組0D值)/對照組0D值X100%。 篩選方法四氮唑鹽(microculture tetrozolium, MTT)還原法 細(xì)胞株P(guān)388D1小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞，HeLa人宮頸癌細(xì)胞 作用時(shí)間24 h對化合物的體外生測結(jié)果如下 化合物對P388D1和HeLa生長的抑制率％化合物 細(xì)胞毒性(ICW， uM)HeLaP388D14a0. 620.834b0. 70.234c9. 43. 244d9. 43. 544e9. 40. 534f36. 342. 344g1.930. 434h21. 62. 644i3. 10.684j5. 70.684k45.82.19415. 30.984m4. 70.380. 690.537b0. 620.237c4. 53.997d6. 11.817e6. 10.637f5. 65.127g0. 60.617h8. 556.32Amonafide60.68以上化合物具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性。
權(quán)利要求
1、一類5-位或6-位取代的萘酰亞胺化合物，其特征在于該化合物具有以下的結(jié)構(gòu)通式(1) id="icf0001" file="A2008100124980002C1.tif" wi="37" he="32" top= "45" left = "61" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="yes"/>a、(1)式中R1為C1～C6的烷基或由(2)式所示的取代基團(tuán) id="icf0002" file="A2008100124980002C2.tif" wi="36" he="11" top= "77" left = "141" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="yes"/>式(2)中n＝1～6，R4、R5選自H、C1～C6烷基中的一種或吡咯環(huán)；b、(1)式中，當(dāng)R2＝H時(shí)，R3選自以下取代基團(tuán)或當(dāng)R3＝H時(shí)，R2也選自以下取代基團(tuán)-NHR6其中R6為C1～C6的直鏈或支鏈烷基， id="icf0003" file="A2008100124980002C3.tif" wi="75" he="11" top= "112" left = "109" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="yes"/> id="icf0004" file="A2008100124980002C4.tif" wi="137" he="17" top= "128" left = "20" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="yes"/>含C1～C6烷基、鹵素、氨基、硝基的取代苯基，噻吩，吡咯，苯并呋喃，吡啶以及含有C1～C6烷基、鹵素、氨基、硝基取代的這些雜環(huán)。
2、按照權(quán)利要求1所述的一類5-位或6-位取代的萘酰亞胺化合物的抗腫瘤應(yīng)用方法，其特征在于所述化合物對體外抑制腫瘤細(xì)胞生長活性采用四氮唑鹽還原法對HeLa人宮頸癌 細(xì)胞株、P388D1小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞株進(jìn)行試驗(yàn)，方法是按不同腫瘤生長速度，將一定數(shù)量處 于對數(shù)生長期的腫瘤細(xì)胞接種于96孔微量培養(yǎng)板內(nèi)，培養(yǎng)24小時(shí)后加入藥液10u L/孔，對 每個(gè)細(xì)胞株每個(gè)濃度均設(shè)三個(gè)復(fù)孔，另設(shè)無細(xì)胞凋零孔，在藥物有顏色時(shí)要作相應(yīng)藥物濃度 無細(xì)胞凋零？L，腫瘤細(xì)胞在37DC、 5%C02條件下培養(yǎng)24小時(shí)后，加MTT (Sigma)液5mg/mL用 生理鹽水配置20u L/孔，繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)后，加入三聯(lián)液(10% SDS-5%異丁醇-O. 01 mol/LHCl) 50uL/孔，于二氧化碳培養(yǎng)箱中過夜，然后用酶標(biāo)儀測0D570值； 按下列公式計(jì)算被測藥物對腫瘤細(xì)胞的生長抑制率 腫瘤抑制率=(對照組0D值-治療組0D值)/對照組0D值X 100%。
全文摘要
一類5-位或6-位取代的萘酰亞胺化合物及抗腫瘤應(yīng)用，其屬于精細(xì)化工領(lǐng)域。這種化合物的特征是在萘酰亞胺5-位或6-位分別通過親核取代反應(yīng)引入各種脂肪氨基、雜環(huán)氨基、芳基、雜芳基得到的類似先導(dǎo)化合物氨萘非特(amonafide)結(jié)構(gòu)的小分子化合物。這些化合物對HeLa(人宮頸癌細(xì)胞)P388D1(鼠淋巴樣瘤細(xì)胞)在體外試驗(yàn)顯示出明顯的抑制活性，其中一些化合物在同樣測試條件下的細(xì)胞毒性要強(qiáng)于氨萘非特(amonafide)。并且這些化合物結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)多樣性，其中沒有乙?；稽c(diǎn)的化合物，可以避免出現(xiàn)類似氨萘非特(amonafide)的副作用；另一部分有乙酰化位點(diǎn)的化合物，可以通過個(gè)性化給藥避免副作用的發(fā)生。說明該類化合物具有治療腫瘤相關(guān)疾病的醫(yī)學(xué)應(yīng)用前景。
文檔編號A61K31/473GK101323591SQ200810012498
公開日2008年12月17日 申請日期2008年7月23日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月23日
發(fā)明者崔京南, 徐玉芳, 義 肖, 解麗娟, 錢旭紅 申請人:大連理工大學(xué)