專(zhuān)利名稱(chēng)：pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物制劑領(lǐng)域，具體涉及pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物及其制備方法。
技術(shù)背景腫瘤嚴(yán)重威脅了人類(lèi)的健康與生命，藥物治療是目前腫瘤治療的主要手段之一?？鼓[ 瘤藥物毒性大，目前臨床治療大多采用傳統(tǒng)的藥物劑型及其給藥技術(shù)，藥物生物利用率 低，易產(chǎn)生嚴(yán)重的毒副作用，藥物難于發(fā)揮應(yīng)有的治療作用與效果。脂質(zhì)體是一種定向藥物載體，可以將藥物粉末或溶液包埋在具有類(lèi)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的微粒 中，改變藥物的體內(nèi)分布，減少藥物的治療劑量和降低藥物的毒性。脂質(zhì)體注入體內(nèi)后， 會(huì)被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)攝取而從血流中快速清除，通常需要通過(guò)改變其表面親水性亞結(jié)構(gòu)，形 成表面包裹有高分子材料的長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體。中國(guó)專(zhuān)利CN1883455A公開(kāi)了一種聚乙二醇修飾的羥基喜樹(shù)堿隱形脂質(zhì)納米球及其制 備方法；中國(guó)專(zhuān)利CN1846692A公開(kāi)了一種多烯紫杉醇長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體劑型及其制備方法； 中國(guó)專(zhuān)利CN101062094A公開(kāi)了丹參總酚酸長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體及其制備方法。長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體可以減少網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬、吸收，延長(zhǎng)藥物在體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間，但 不能實(shí)現(xiàn)藥物的智能控制釋放。腫瘤組織在局部缺血時(shí)，腫瘤間質(zhì)液出現(xiàn)異常酸化現(xiàn)象，利用腫瘤組織pH5.0 6.5比 正常組織低的特性，設(shè)計(jì)和研究在生理范圍內(nèi)穩(wěn)定的pH敏感型脂質(zhì)體，不但可以進(jìn)一步 提高脂質(zhì)體的靶向性，而且可以實(shí)現(xiàn)藥物的智能控制釋放。 發(fā)明內(nèi)容羧甲基殼聚糖(CMCT)是殼聚糖經(jīng)羧甲基化反應(yīng)后的一類(lèi)甲殼素衍生物，它既含有 弱堿陽(yáng)離子(一NHS+)基團(tuán)，又含有弱酸陰離子(一COO—)基團(tuán)，是一種兩親性聚電解質(zhì)，具 有特殊的pH敏感性。本發(fā)明利用羧甲基殼聚糖兩性聚電解質(zhì)高分子材料的親水性和pH敏感性，將羧甲基 殼聚糖既作為脂質(zhì)體的pH敏感劑，又作為脂質(zhì)體的立體穩(wěn)定劑，通過(guò)脂質(zhì)體與其修飾劑 羧甲基殼聚糖的相互作用，獲得pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體。羧甲基殼聚糖的親水鏈包裹在脂質(zhì)體周?chē)鴮?duì)血中的蛋白有排斥作用，可以延緩調(diào)理 作用，達(dá)到體內(nèi)長(zhǎng)循環(huán)隱形的目的。羧甲基殼聚糖結(jié)合于脂質(zhì)體表面，由于環(huán)境pH變化 引起羧甲基殼聚糖構(gòu)象的改變，會(huì)迫使磷脂雙分子層發(fā)生重排，破壞脂質(zhì)體膜的屏障性 質(zhì)，從而使內(nèi)容物迅速且定量地釋放出來(lái)，實(shí)現(xiàn)pH敏感控釋。本發(fā)明公開(kāi)了pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，由治療藥物、磷脂、膽固醇、維生素 E、表面活性劑、脂質(zhì)體修飾劑質(zhì)組成。所述的治療藥物為治療各種腫瘤性疾病的治療藥物，選自選自阿霉素、柔紅霉素、表 阿霉素、長(zhǎng)春堿、紫杉類(lèi)、抗葉酸制劑、氮芥、環(huán)磷酰胺、5-氟尿嘧啶、順鉑、拓?fù)洚悩?gòu) 酶抑制劑、他莫昔芬、單克隆抗體藥物和基因治療藥物。所述的治療藥物包括鹽酸阿霉素、鹽酸柔紅霉素、鹽酸表阿霉素和紫杉醇中的一種或 幾種。優(yōu)選鹽酸阿霉素。所述的磷脂選自卵磷脂，包括蛋黃卵磷脂、大豆卵磷脂、氫化大豆卵磷脂、氫化蛋黃 卵磷脂、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰膽堿。優(yōu)選大豆卵磷脂。所述的表面活性劑包括PEG-2000、 Span-60、 Span-80、 Tween-80的一種或幾種。優(yōu)選 Tween-80。所述的脂質(zhì)體修飾劑為羧甲基殼聚糖，羧甲基殼聚糖的取代度為0.5 1.8，羧甲基殼 聚糖的分子量為lxio4 lxl06。所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于含有以下重量比的組分治療藥物 1份磷脂 10 100份 膽固醇 2 20份 維生素E 1 20份 表面活性劑 1 10份 脂質(zhì)體修飾劑0.1 10份。所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物的制備方法包括主動(dòng)載藥制備方法、被動(dòng)載藥制 備方法。優(yōu)選主動(dòng)載藥制備方法。所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物的制備方法包含下述步驟 (1)脂類(lèi)膜制備按配方量稱(chēng)取磷脂、膽固醇、維生素E、表面活性劑溶于有機(jī)溶劑 中，形成均勻混合溶液，減壓蒸干混合溶液形成脂類(lèi)薄膜；(2) 水合往脂類(lèi)薄膜中加入酸性水合介質(zhì)進(jìn)行水合，采用超聲、高壓乳勻或攪拌制 得空白脂質(zhì)體懸液；(3) 藥物加載用堿性水合介質(zhì)調(diào)節(jié)空白脂質(zhì)體外水相pH至6.8 7.3，再加入治療藥 物，所得懸液在55 65'C繼續(xù)水合2 6小時(shí)，即得含治療藥物脂質(zhì)體懸液；(4) 脂質(zhì)體修飾向步驟(3)制得的脂質(zhì)體懸液中加入脂質(zhì)體修飾劑，繼續(xù)水合0.5h 即得pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體。所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物的制備方法，有機(jī)溶劑為氯仿和甲醇的混合物。水合介質(zhì)選自磷酸鹽緩沖溶液、檸檬酸鹽緩沖溶液、乳酸緩沖溶液。 本發(fā)明所制得的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物粒徑為0.02 50um。 本發(fā)明所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物制成注射液、凍干粉針劑和/或噴霧劑。 本發(fā)明制備工藝簡(jiǎn)單，脂質(zhì)體藥物包封率較高、性能穩(wěn)定；羧甲基殼聚糖修飾制備的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物具有多重靶向、智能控釋等顯著特征，而且具有儲(chǔ)存穩(wěn)定性和體內(nèi)循環(huán)穩(wěn)定性好，藥物的治療指數(shù)高、毒副作用低等特點(diǎn)，可用于治療各種腫瘤性疾病。


圖1為pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物電鏡照片。 圖2為pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物粒徑分布。圖3為pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物在不同pH的PBS緩沖液中阿霉素的滲漏百分率具體實(shí)施方式
下面通過(guò)實(shí)驗(yàn)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行具體描述，有必要指出的是本實(shí)施例只用于對(duì)本發(fā) 明做進(jìn)一步說(shuō)明，不能理解為對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限制，該領(lǐng)域的技術(shù)熟練人員可以根據(jù) 上述本發(fā)明的內(nèi)容做出一些非本質(zhì)的改進(jìn)和調(diào)整。實(shí)施例l稱(chēng)取150mg大豆卵磷脂、30mg膽固醇、20mg維生素E、 10mg Tween-80溶于10ml混 合溶劑(VM:V =2:1)中，減壓蒸干混合溶液至形成一層均勻的脂質(zhì)薄膜。加適量 pH=4.0的PBS溶解后超聲形成均勻懸液，用pH7.4的PBS調(diào)節(jié)pH至6.8，加入1.75mg/ml 阿霉素水溶液lml后進(jìn)行超聲，6(TC水浴條件下水合3h后即得阿霉素脂質(zhì)體。向制得的阿霉素脂質(zhì)體中加入0.08% (wAv)取代度為1.2的羧甲基殼聚糖水溶液lml，繼續(xù)水合0.5h即得羧甲基殼聚糖修飾的阿霉素脂質(zhì)體。羧甲基殼聚糖修飾的阿霉素脂質(zhì)體平均粒徑 為75nm，透射電鏡照片如附圖1所示，粒徑分布如附圖2所示。實(shí)施例2稱(chēng)取100mg大豆卵磷脂、25mg膽固醇、10mg維生素E、 5mgTween-80溶于10ml混 合溶劑(VM:VW=2:1)中，減壓蒸干混合溶液至形成一層均勻的脂質(zhì)薄膜。加適量 pH=4.0的PBS溶解后超聲形成均勻懸液，用pH7.4的PBS調(diào)節(jié)pH至7.1 ，加入4mg/ml阿 霉素水溶液lml后進(jìn)行高壓乳勻，55'C水浴條件下水合3h后即得阿霉素脂質(zhì)體。向制得 的阿霉素脂質(zhì)體中加入0.4% (w/w)取代度為0.9的羧甲基殼聚糖水溶液lml，繼續(xù)水合 0.5h即得羧甲基殼聚糖修飾的阿霉素脂質(zhì)體。測(cè)得羧甲基殼聚糖修飾的阿霉素脂質(zhì)體包封 率為80.5%，平均粒徑為38nm。實(shí)施例3按實(shí)施例1相同方法分別制備取代度為0.6、 0.9、 1.2的羧甲基殼聚糖修飾的阿霉素脂 質(zhì)體，并測(cè)定pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體分別在pH5.0、 pH5.5、 pH6.0、 pH6.1、 pH6.3、 pH6.5、 pH7.0的PBS外液中的藥物滲漏百分率，以阿霉素的滲漏百分率對(duì)pH值作圖，即 得脂質(zhì)體藥物滲漏的pH敏感性曲線(xiàn)，如附圖3所示。
權(quán)利要求
1. pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于由治療藥物、磷脂、膽固醇、維生素E、表面活性劑、脂質(zhì)體修飾劑組成。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于所述的治療藥物為治療各種腫瘤性疾病的治療藥物。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于，所述的治療藥物選 自阿霉素、柔紅霉素、表阿霉素、長(zhǎng)春堿、紫杉類(lèi)、抗葉酸制劑、氮芥、環(huán)磷酰胺、5-氟尿嘧啶、順鉑、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑、他莫昔芬、單克隆抗體藥物和基因治療藥物。
4、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于，所述的治療藥物選 自鹽酸阿霉素、鹽酸柔紅霉素、鹽酸表阿霉素和紫杉醇中的一種或幾種。
5、 根據(jù)權(quán)利要求4所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于，所述的治療藥物優(yōu) 選鹽酸阿霉素。
6、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于所述磷脂選自卵磷 月旨，包括蛋黃卵磷脂、大豆卵磷脂、氫化大豆卵磷脂、氫化蛋黃卵磷脂、磷脂酰乙醇 胺、磷脂酰膽堿。
7、 根據(jù)權(quán)利要求6所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于所述磷脂優(yōu)選大豆 卵磷脂。
8、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于，所述的表面活性劑 包括PEG-2000、 Span-60、 Span-80、 Tween-80的一種或幾種。
9、 根據(jù)權(quán)利要求8所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于，所述的表面活性劑 優(yōu)選Tween-80。
10、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于所述脂質(zhì)體修 飾劑為羧甲基殼聚糖。
11、 根據(jù)權(quán)利要求IO所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于所述的羧甲基 殼聚糖的取代度為0.5 1.8。
12、 根據(jù)權(quán)利要求11所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于所述的羧甲基 殼聚糖的分子量為Ixl04 lxl06。
13、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于含有以下重量 比的組分治療藥物 1份 磷脂 10 100份 膽固醇 2 20份 維生素E 1 20份 表面活性劑 1 10份 脂質(zhì)體修飾劑(U 10份。
14、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于其制備方法包 括主動(dòng)載藥制備方法、被動(dòng)載藥制備方法。
15、 根據(jù)權(quán)利要求14所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于其制備方法優(yōu) 選主動(dòng)載藥制備方法。
16、 根據(jù)權(quán)利要求15所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于其制備方法包含下述步驟(1) 脂類(lèi)膜制備按配方量稱(chēng)取磷脂、膽固醇、維生素E、表面活性劑溶于有機(jī)溶劑 中，形成均勻混合溶液，減壓蒸干混合溶液形成脂類(lèi)薄膜；(2) 水合往脂類(lèi)薄膜中加入酸性水合介質(zhì)進(jìn)行水合，采用超聲、高壓乳勻或攪拌制 得空白脂質(zhì)體懸液；(3) 藥物加載用堿性水合介質(zhì)調(diào)節(jié)空白脂質(zhì)體外水相pH至6.8 7.3，再加入治療藥 物，所得懸液在55 65'C繼續(xù)水合2 6小時(shí)，即得含治療藥物脂質(zhì)體懸液；(4) 脂質(zhì)體修飾向步驟(3)制得的脂質(zhì)體懸液中加入脂質(zhì)體修飾劑，繼續(xù)水合0.5h 即得pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體。
17、 根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其特征在于，所述的有機(jī)溶劑為氯仿和甲醇的混合 物。
18、 根據(jù)權(quán)利要求16所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于所述的水合介 質(zhì)選自磷酸鹽緩沖溶液、檸檬酸鹽緩沖溶液、乳酸緩沖溶液。
19、 根據(jù)權(quán)利要求16所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于制得的pH敏 感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體粒徑為0.02 50um。
20、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物，其特征在于所述的pH敏感 長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物制成注射液、凍干粉針劑和/或噴霧劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物及其制備方法。本發(fā)明的脂質(zhì)體組合物由治療藥物、磷脂、膽固醇、維生素E、表面活性劑、脂質(zhì)體修飾劑組成。所述的pH敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體組合物不僅具有普通脂質(zhì)體的優(yōu)點(diǎn)，而且兼具pH敏感智能控釋和長(zhǎng)循環(huán)主動(dòng)靶向給藥功能，可用于治療各種腫瘤性疾病。
文檔編號(hào)A61K31/337GK101264057SQ20081003679
公開(kāi)日2008年9月17日 申請(qǐng)日期2008年4月29日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月29日
發(fā)明者姜厚友, 徐云龍, 趙崇軍, 錢(qián)秀珍, 馬新勝 申請(qǐng)人:上海微納科技有限公司