專利名稱：：一種治療慢性肝病的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬中藥領(lǐng)域，涉及治療慢性肝病的藥物。具體涉及一種能提高抗肝纖維化、抗肝損傷作用的中藥組分或成分特定配比的有效藥物。
背景技術(shù)：
：肝纖維化幾乎是各種慢性肝病向肝硬化發(fā)展的共同途徑，其實(shí)質(zhì)是細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的過(guò)度沉積。減緩、阻止和逆轉(zhuǎn)肝纖維化是肝病治療的重要環(huán)節(jié)。但迄今現(xiàn)代醫(yī)學(xué)尚缺乏良好的臨床治療手段。國(guó)外肝纖維化的研究進(jìn)展主要體現(xiàn)在發(fā)病機(jī)制的深入研究。美國(guó)著名肝纖維化研究專家Friedman教授曾分析道"肝纖維化機(jī)理的不斷闡明使有效地抗肝纖維化治療成為可能，然而，抗肝纖維化治療仍然是一個(gè)富有挑戰(zhàn)的艱巨任務(wù)，迄今臨床上尚無(wú)有效的抗肝纖維化藥物，其有效作用于肝臟而無(wú)明顯毒副作用的治療藥物研制尚需長(zhǎng)期努力。"肝纖維化的發(fā)病機(jī)制系多因素參與，錯(cuò)綜復(fù)雜。而希冀和聚焦于某一單一環(huán)節(jié)或靶點(diǎn)來(lái)防治多環(huán)節(jié)的復(fù)雜病變，比較困難，這也是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)迄今未尋得理想藥物的重要原因之一。也就是說(shuō)，對(duì)于復(fù)雜性病變，需要探求綜合治療的方法。事實(shí)上，我國(guó)近20多年來(lái)的中醫(yī)藥抗肝纖維化研究，巳取得顯著進(jìn)展，自2000年起，已先后有復(fù)方鱉甲軟肝片、扶正化瘀膠囊等抗肝纖維化國(guó)家中藥新藥應(yīng)用于臨床。業(yè)已證明，中藥復(fù)方抗肝纖維化作用是通過(guò)多途徑、多層次作用實(shí)現(xiàn)的，呈現(xiàn)出綜合效應(yīng)，與纖維化發(fā)生發(fā)展的復(fù)雜機(jī)理相對(duì)應(yīng)，這正是中醫(yī)藥整體觀念的優(yōu)勢(shì)所在。近20多年來(lái)，國(guó)內(nèi)外也開展了一些抗肝纖維化中藥有效組分或成分的研究，并發(fā)現(xiàn)了一些有抗肝纖維化效應(yīng)的中藥有效組分或成分。然而，無(wú)論傳統(tǒng)中藥復(fù)方還是單一的有效成分，皆有其不足之處。傳統(tǒng)中藥復(fù)方由于成分復(fù)雜，難以明了其所含成分，使其制劑存在一定的可控性、穩(wěn)定性的困擾，這也是中醫(yī)藥國(guó)際化的難題之一；而單一組分或成分可能失去中醫(yī)整體觀治療復(fù)雜疾病的特色優(yōu)勢(shì)。因此如何對(duì)傳統(tǒng)復(fù)方"去粗取精"而又保持中醫(yī)復(fù)方配伍治療復(fù)雜疾病的優(yōu)勢(shì)，是一大難題，也是中醫(yī)藥抗肝纖維化藥物研究的突破方向之一。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種治療慢性肝病的藥物組合物。尤其是涉及一種能提高抗肝纖維化、抗肝損傷作用的由特定配比的中藥有效組分或成分組成的有效藥物。本發(fā)明運(yùn)用數(shù)學(xué)模型"均勻設(shè)計(jì)"分析技術(shù)，在現(xiàn)有技術(shù)基礎(chǔ)上，進(jìn)行了有效組分/成分配伍抗肝纖維化的研究，采用蟲草多糖、苦杏仁甙、絞股藍(lán)總皂甙中藥有效組分或成分組成的有理想的抗肝纖維化、抗肝損傷作用的藥物組合物。本發(fā)明所述的藥物組合物由蟲草多糖、苦杏仁甙、絞股藍(lán)總皂甙3種組分或成分組成。其中蟲草多糖(Cordyc印ssinensispolysaccharide)來(lái)源于蟲草菌絲；苦杏仁武(Amygdaloside)來(lái)源于中藥桃仁或杏仁；絞股藍(lán)總皂甙(Gypenosides)來(lái)源于中藥絞股藍(lán)(七葉膽)。所述的蟲草多糖、苦杏仁甙、絞股藍(lán)總皂甙組分或成分的重量比為l/0.210/0.28。其中優(yōu)選重量比是l:8:2.5，更優(yōu)選重量比是l:1.33:0.83。本發(fā)明所述的藥物組合物，可按常規(guī)方法制成臨床常用制劑，所述制劑的劑型，包括顆粒劑、片劑、膠囊劑等口服固體制劑。本發(fā)明的進(jìn)一步目的是提供由蟲草多糖、苦杏仁甙、絞股藍(lán)總皂甙組成的藥物組合物在治療慢性肝病藥物中的用途。所述的慢性肝病包括慢性肝炎、肝纖維化、肝硬化。本發(fā)明所述的藥物組合物，經(jīng)二甲基亞硝胺(DMN)、四氯化碳(CC14)誘導(dǎo)的兩種經(jīng)典的肝損傷、肝纖維化動(dòng)物模型試驗(yàn)(模型形成后治療性給藥或模型發(fā)展過(guò)程中介入干預(yù))，并運(yùn)用"均勻設(shè)計(jì)"篩選以及反復(fù)驗(yàn)證。結(jié)果證實(shí)，本發(fā)明所述藥物能顯著降低模型大鼠肝組織膠原含量，減輕肝纖維化程度和肝損傷程度，上述作用優(yōu)于各組分單用的效果。所述3種組分或成分配伍組合的藥物可以提高抗肝纖維化的作用，能有效阻止肝纖維化的發(fā)展并促進(jìn)肝纖維化的逆轉(zhuǎn)，可用于治療和預(yù)防各種慢性肝炎、肝纖維化、肝硬化等病癥。圖l是實(shí)施例5的各組肝組織天狼星紅膠原染色示意圖XIOO，其中1:正常組，2:模型組，3:蟲草多糖組，4:絞股藍(lán)總皂甙，5:苦杏仁甙組，6:本法明組，7:扶正化瘀組，8秋水仙堿組。圖2是實(shí)施例6的各組肝組織天狼星紅膠原染色示意圖X100，。其中1:正常組，2:模型組，3:蟲草多糖組，4:絞股藍(lán)總皂甙，5:苦杏仁甙組，6:本法明組，7:扶正化瘀組，8秋水仙堿組。具體實(shí)施例方式本發(fā)明的藥物組合物有益效果通過(guò)下述實(shí)驗(yàn)證實(shí)實(shí)施例l運(yùn)用DMN誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化模型和均勻設(shè)計(jì)方法回歸分析獲得相應(yīng)最佳的降低肝臟膠原含量作用的組合物。材料和方法-動(dòng)物wistar雄性大鼠，清潔級(jí)，體重(160土10)g，由中科院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。主要試劑及藥物二甲基亞硝胺(Ditnethylnitrosamine，DMN)，東京化成工業(yè)株式會(huì)社產(chǎn)品；蟲草多糖(Cordyc印ssinensispolysaccharide):來(lái)源于蟲草，上?？抵壅婢嗵怯邢薰井a(chǎn)品，規(guī)格95%，批號(hào)20060828;丹酚酸B鹽(SalvianolicacidB):從中藥丹參中提取，來(lái)源于中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所，含量大于60%;苦杏仁武(Amygdaloside):來(lái)源于杏仁，西安冠宇生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品，規(guī)格98%，批號(hào)06061;絞股藍(lán)總皂甙(Gypenosides):來(lái)源于七葉膽，西安鴻生生物有限公司產(chǎn)品，規(guī)格98%，批號(hào)GY060913。均勻設(shè)計(jì)藥物篩選實(shí)驗(yàn)94只大鼠隨機(jī)分正常組(5只)及造模組(89只)。造模組每周連續(xù)3天腹腔注射0.5%DMN2mlkg-1,4周后造模組大鼠死亡5只，造模組余84只大鼠隨機(jī)按后述"均勻設(shè)計(jì)方案"分為均勻設(shè)計(jì)l-8組，每組9-10只，模型組9只以驗(yàn)證模型的有效性。分別按均勻設(shè)計(jì)給藥方案按10ral'Kg—1體重灌胃，每周6次，共2周；正常組前4周腹腔注射生理鹽水，后2周用飲用水灌胃。治療2周后，剩余67只大鼠以2X戊巴比妥鈉按2ml*Kg—'劑量腹腔注射麻醉，下腔靜脈采血，離心分離血清，取肝組織備檢。均勻設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案根據(jù)均勻設(shè)計(jì)方案選用U9(98)表，將現(xiàn)有技術(shù)"扶正化瘀膠囊"中的蟲草多糖，丹酚酸B，苦杏仁甙，絞股藍(lán)總皂甙等4種有效組分或成分作為考察因子，每個(gè)因子分別取8個(gè)水平(即呈梯度遞增的8種不同劑量)，蟲草多糖(X,)和苦杏仁甙(X3)的8個(gè)水平在20-160mg之間、丹酚酸B鹽(X2)8個(gè)水平在4-32mg之間、絞股藍(lán)總皂甙(X》的8個(gè)水平在50-400rag的劑量范圍內(nèi)。按照均勻設(shè)計(jì)表格安排各因子及水平，進(jìn)行組方設(shè)計(jì)，共8組。篩選指標(biāo)肝組織羥脯氨酸(Hyp)含量(Jamall氏法)；數(shù)據(jù)均采用SPSS12.O軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。均勻設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)采用逐步回歸分析(以p0.05作為顯著水準(zhǔn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn))。2均勻設(shè)計(jì)藥物篩選實(shí)驗(yàn)結(jié)果模型組大鼠肝組織Hyp含量(492土66yg/g肝組織)，較正常組(191土6yg/g肝組織)顯著升高(均P〈0.01),病理觀察肝組織纖維化程度重，提示模型成功。在肝纖維化模型成功基礎(chǔ)上，檢測(cè)肝組織Hyp含量，并進(jìn)行逐步回歸分析。得回歸方程Y=0.004X1X4-0.003X3X4+441.763。詳見表1。藥物篩選結(jié)果分析表明以XI、X3、X4三種組分/成分配伍組合，且Xl二60mg，X3=80mg，X4=50mg，即重量比是1:1.33:0.83(命名為A配方)時(shí)，對(duì)DW^誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化效應(yīng)最佳。表1是均勻設(shè)計(jì)各組大鼠肝組織Hyp含量逐步回歸分析表。表l組另IJnHyp均值回歸方程組17388組26337組37438Y=0.004X1X4-0.003X3X4+441.763組47402組57445組66416組77439組88320實(shí)施例2運(yùn)用四氯化碳誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化模型和均勻設(shè)計(jì)方法回歸分析獲得相應(yīng)最佳降低肝臟膠原含量作用的配方。材料和方法動(dòng)物wistar雄性大鼠90只，SPF級(jí)，體重170土15g，由中科院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。主要試劑及藥物四氯化碳、橄欖油購(gòu)自于中國(guó)藥物集團(tuán)。蟲草多糖、丹酚酸B鹽、苦杏仁甙、絞股藍(lán)總皂甙等同"實(shí)施例l"。均勻設(shè)計(jì)藥物篩選實(shí)驗(yàn)77只大鼠隨機(jī)分正常組(7只)及造模組(70只)。造模組大鼠首次皮下注射100%CCl4溶液3ml/kg，其后50%CCl4橄欖油溶液2ml/kg，每周2次，共9周。正常組大鼠注射同劑量的橄欖油。造模6周后造模組死亡3只，余67只大鼠隨機(jī)分為均勻設(shè)計(jì)1-8組，每組7-8只，模型組8只以驗(yàn)證模型成立。治療并同時(shí)造模3周后，以2%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，下腔靜脈采血，離心分離血清，肝組織分裝在1.5ml離心管備用。均勻設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案同"實(shí)施例l"篩選指標(biāo)肝組織輕脯氨酸(Hyp)含量(Jamall氏法)；數(shù)據(jù)均采用SPSS12.O軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。均勻設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)采用逐步回歸分析方法(以^0.05作為顯著水準(zhǔn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn))。結(jié)果顯示模型組的大鼠肝組織Hyp含量(442土51"g/g肝組織)，均較正常組(175±22yg/g肝組織)顯著升高(P〈O.OD，提示模型成功。在肝纖維化模型成功基礎(chǔ)上，檢測(cè)均勻設(shè)計(jì)各組Hyp并進(jìn)行逐步回歸分析，得回歸方程Y^.006X1X4-0.633X3+360.832。結(jié)果分析表明以XI、X3、X4三種組分/成分配伍組合，且當(dāng)Xl=20mg、X3=160mg、X4=50mg，即重量比是l:8:2.5時(shí)(命名為B配方)，對(duì)CC14誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠肝組織HYP抑制作用最佳。表2是均勻設(shè)計(jì)各組大鼠肝組織Hyp含量逐步回歸分析結(jié)果。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>實(shí)施例3運(yùn)用DMN誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化模型對(duì)篩選出的A、B配方進(jìn)行療效驗(yàn)證材料和方法動(dòng)物SD雄性大鼠，清潔級(jí)，體重(170土10)g,由中科院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。主要試劑及藥物對(duì)照藥物扶正化瘀膠囊(原料藥，由上?，F(xiàn)代中醫(yī)藥技術(shù)發(fā)展有限公司提供)，肝功能檢測(cè)試劑盒(購(gòu)自南京建成生物工程研究所)，其他材料同"實(shí)施例1"。分組及造模SD大鼠60只，隨機(jī)分為正常組(5只)和造模組(55只)，造模方法同"實(shí)施例l"，造模4周后造模組死亡6只，余49只造模組大鼠隨機(jī)分為模型組(9只)，A、B配方組(各8只)，A配方+丹酚酸B組、B配方+丹酚酸B組各8只(所增丹酚酸B劑量為12.5mg/kg)，扶正化瘀膠囊對(duì)照組(8只)，扶正化瘀膠囊給藥劑量4.6g/kg，模型組給等量飲用水。治療2周后，各組生存大鼠以2°/。戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后，下腔靜脈采血，并取肝組織標(biāo)本。檢測(cè)指標(biāo)肝組織羥脯氨酸(Hyp)含量(Jamall氏法)；血清ALT、AST、GGT活性，血清Alb、Tbil含量；數(shù)據(jù)均采用SPSS12.O軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以S士s表示，進(jìn)行方差分析和組間兩兩比較。結(jié)果顯示與正常組比較，模型組肝Hyp含量，血清ALT、AST、GGT活性及Tbil含量均顯著升高，Alb含量顯著下降。A配方組的肝組織Hyp含量，血清ALT、AST、GGT、Tbil均顯著低于模型組，而Alb含量顯著高于模型組，且與扶正化瘀膠囊組療效無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。B配方組對(duì)血清GGT活性無(wú)降低作用外，其他指標(biāo)變化基本與A配方相近。但A配方組和B配方組各添加丹酚酸B后，療效反而下降。結(jié)果證實(shí)通過(guò)均勻設(shè)計(jì)篩選所獲得的A、B配方對(duì)DMN誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化、肝損傷具有顯著的治療作用。同時(shí)證實(shí)，配方中增加丹酚酸B，其作用反而下降,即證明了有效組分組合可增效也可減效。表3是各組大鼠肝組織Hyp含量，血清ALT、AST活性(5士s)。表4各組大鼠血清GGT活性和Tbil、Alb含量(S土s))。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表4<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注與模型組比較，*/<0.05,**;<0.01;與扶正化瘀膠囊比較，S"<0.0，5##p<0.01，與相應(yīng)的配方組比較，△p<0.05實(shí)施例4運(yùn)用四氯化碳誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化模型對(duì)篩選出的A、B配方進(jìn)行療效驗(yàn)證動(dòng)物SD雄性大鼠，SPF級(jí)，體重170土10g，由中科院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。主要試劑及藥物對(duì)照藥物扶正化瘀膠囊(原料藥，上?，F(xiàn)代中醫(yī)藥技術(shù)發(fā)展有限公司)。其他材料同"實(shí)施例2"。分組及造模55只大鼠隨機(jī)分為正常組(5只)及造模組(50只)。造模方法同"實(shí)施例2"，造模6周后，造模組死亡2只，余48只大鼠隨機(jī)分為模型組，A配方組、B配方組，A配方+丹酚酸B組，B配方+丹酚酸B組，扶正化瘀膠囊對(duì)照組，每組8只。9各組給藥劑量同"實(shí)施例3"。治療3周后，各組剩余大鼠以2%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后，下腔靜脈采血，并取肝組織標(biāo)本。觀察指標(biāo)和方法肝組織羥脯氨酸(Hyp)含量(Jamall氏法)；血清ALT、AST、GGT活性，血清Alb、Tbil含量數(shù)據(jù)均采用SPSS12.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以5士s表示，進(jìn)行方差分析和組間兩兩比較。結(jié)果顯示與實(shí)施例3結(jié)果相似，模型組肝Hyp含量，血清ALT、AST、GGT活性及Tbil含量均顯著升高，Alb含量顯著下降。A配方組和B配方的肝組織Hyp含量，血清ALT、AST、GGT、Tbil均顯著低于模型組，而Alb含量顯著高于模型組，且與扶正化瘀膠囊組療效無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。但A配方組和B配方組各添加丹酚酸B后，療效反而下降(其中前者的Hyp、Tbil指標(biāo)結(jié)果核模型組無(wú)顯著差異，后者的GGT活性和模型組無(wú)顯著性差異)。結(jié)果證實(shí)，對(duì)CC14誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化模型試驗(yàn)結(jié)果證明，通過(guò)均勻設(shè)計(jì)篩選所獲得的A、B配方對(duì)肝損傷、肝纖維化具有顯著的干預(yù)作用。同時(shí)證實(shí)了實(shí)施例3中所獲得的結(jié)論，即配方中增加丹酚酸B，其作用反而下降,提示有效組分組合可增效也可減效。表5是各組大鼠肝組織Hyp含量，血清ALT、AST活性(S士s)。表6是各組大鼠血清GGT活性，Tbil、Alb含量(5±s)。表5<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注與模型組比較，*:/7<0.05;**p<0.01;與A配方組比較，#:p《0.05:*W/7<0.01表6<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注與模型組比較，*p<0.05,**p<0.01;與扶正化瘀膠囊比較，#p<0.0,5,*p<0.01實(shí)施例5用DMN誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化模型證實(shí)本發(fā)明復(fù)方藥物療效優(yōu)于單一組分或成分材料和方法秋水仙堿(購(gòu)于西雙版納版納藥業(yè)有限公司，批號(hào)070705)，其他材料同實(shí)施例3。動(dòng)物造模和分組SD大鼠80只，隨機(jī)分為正常組6只和造模組74只。造模方法同實(shí)施例l。造模4周后造模組死亡4只，余76只造模組大鼠隨機(jī)分為模型組、A配方組、組成該組方的各單藥組、扶正化瘀膠囊及秋水仙堿作為陽(yáng)性對(duì)照組，每組各10只。秋水仙堿給藥劑量0.1mg/Kg,扶正化瘀膠囊給藥劑量4.6g/Kg，本發(fā)明組(按實(shí)施例l獲得的配方，即蟲草多糖60mg+絞股藍(lán)總皂甙50mg+苦杏仁甙80mg/Kg)給藥，各單藥組給藥劑量絞股藍(lán)總皂甙給藥劑量200mg/Kg，苦杏仁甙給藥劑量80mg/Kg，蟲草多糖給藥劑量60mg/Kg，各組均按照10ml/Kg體積進(jìn)行灌胃，模型組給予同體積飲用水。治療2周后，剩余61只大鼠以2%戊巴比妥鈉按腹腔注射麻醉，下腔靜脈采血，離心分離血清，肝組織分裝在l.5ml離心管備用。在肝臟同一葉的固定位置切取兩塊肝組織，浸泡于福爾馬林溶液中，備檢。觀察指標(biāo)和方法肝組織羥脯氨酸(Hyp)含量(Jamall氏法)；血清肝功能指標(biāo)；肝組織HE染色和天狼星紅染色，參照文獻(xiàn)肝纖維化程度SO-S4的分期標(biāo)準(zhǔn)，判定肝纖維化程度。數(shù)據(jù)均采用SPSS12.O軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以5土s表示，進(jìn)行方差分析和組間兩兩比較。等級(jí)資料組間比較采用ridit分析。結(jié)果表明模型組肝組織各項(xiàng)指標(biāo)均較正常組顯著升高；單用蟲草多糖、苦杏仁甙、絞股藍(lán)總皂甙均有改善DMN誘導(dǎo)的肝纖維化作用，但本發(fā)明藥物作用更顯著，顯著優(yōu)于其三種組分或成分的單一應(yīng)用以及秋水仙堿(均/<0.05)。肝組織天狼星紅染色顯示正常組肝組織中僅中央處有少量膠原纖維，肝小葉結(jié)構(gòu)正常，其間未見纖維增生。模型對(duì)照組肝組織含有大量膠原纖維，肝小葉失去正常結(jié)構(gòu)，被重新分割，膠原纖維呈寬帶狀，互相連結(jié)。秋水仙堿組較模型組肝組織膠原纖維有所減少(/5<0.05)。扶正化瘀膠囊組及1號(hào)配方組較模型組肝組織膠原纖維明顯減少(p<0.01),肝小葉結(jié)構(gòu)基本恢復(fù)正常(圖1)。此外，本發(fā)明組的抗肝損傷作用顯著，優(yōu)于其三種組分的單用以及秋水仙堿。表7是各組大鼠肝組織Hyp含量，血清ALT、AST活性(5土s)。表8是各組大鼠血清GGT，Tbil含量(5士s)。表9是各組大鼠肝纖維化程度比較。表7Hyp(iigj'肝濕重)ALT(Umr')AST(U'm1—')正常組6165±35**17.69士2.95林38.14±3.14**模型組8435±9175.50±11.29107.36±13.69蟲草多糖組7338士70*#61.15±18.91#77.31±15.09*絞股藍(lán)總皂甙組8318±54*#43.94±17.62林68.02±16.15**苦杏仁甙組8323±79*#55.39±15.56*#69.13±15.74*本發(fā)明組8254±39**38.43±14.70**58.65±25.95**扶正化瘀膠囊組259±58**28.75±6.77**54.00±6.44**秋水仙堿組8300±47**#47.55士17.47林62.81±13.04**注與模型組比較，p<0.05;**jO<0.01;與A配方組比較，#:p<0.05;/<0.01表8nGGTTbil(mgdr1)正常組610.62±2.99**0.46±0.14林模型組849.40±19.461.58±0.70蟲草多糖組739.19±16.92##0.79±0.30*##絞股藍(lán)總皂甙組826.09±6.10**0.64±0.22**#苦杏仁甙組837.01±19.92抑0.95±0.58#本發(fā)明組818.05±7.67**0.38±0.21**扶正化瘀膠囊組715.55±4.96**0.51±0.51林秋水仙堿組831.30±17.21*##0.86±0.56*注與模型組比較，*:p<0.05:*印<0.01;與A配方組比較，p<0.05;ft#p<0.01表9<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>注與模型組比較，*::p<0.05;林p<01。結(jié)果證實(shí)本發(fā)明藥物組合物對(duì)DMN誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化、肝損傷具有顯著的治療作用，作用效果優(yōu)于單一組分或成分用藥。實(shí)施例6用四氯化碳誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化模型證實(shí)配方療效優(yōu)于單一組分或成分材料和方法秋水仙堿(購(gòu)于西雙版納版納藥業(yè)有限公司，批號(hào)070705)，其他材料同實(shí)施例4。動(dòng)物造模和分組SD大鼠86只，隨機(jī)分為正常組6只和造模組80只。造模方法同"實(shí)施例2"。造模6周后，造模組死亡2只，余造模組78只大鼠隨機(jī)分組為模型組(12只)、本發(fā)明組(ll只)、組成該組方的各單藥組(每組各ll只)、扶正化瘀膠囊組(ll只)及秋水仙堿組(ll只)作為陽(yáng)性對(duì)照組，給藥情況同實(shí)施例5。造模并同時(shí)治療3周后，剩余81只大鼠以2%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，下腔靜脈采血，離心分離血清，肝組織分裝在l.5ml離心管備用。在肝臟同一葉的固定位置切取兩塊肝組織，浸泡于福爾馬林溶液中，備檢。觀察指標(biāo)和方法同實(shí)施例5。數(shù)據(jù)均采用SPSS12.O軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以S土s表示，進(jìn)行方差分析和組間兩兩比較。結(jié)果顯示模型組肝組織各項(xiàng)指標(biāo)均較正常組顯著升高。本發(fā)明組改善DMN誘導(dǎo)的肝纖維化、肝損傷的作用顯著優(yōu)于單一蟲草多糖、苦杏仁甙或絞股藍(lán)總皂甙組分以及秋水仙堿。肝組織天狼星紅染色顯示正常組肝組織中僅中央處有少量膠原纖維，肝小葉結(jié)構(gòu)正常，其間未見纖維增生。模型對(duì)照組肝組織含有大量膠原纖維，肝小葉失去正常結(jié)構(gòu)，被重新分割，膠原纖維呈寬帶狀，互相連結(jié)。秋水仙堿組較模型組肝組織膠原纖維有所減少。本發(fā)明組較模型組肝組織膠原纖維明顯減少，肝小葉結(jié)構(gòu)基本恢復(fù)正常(圖2)。表10是各組大鼠肝組織Hyp含量，血清ALT、AST活性、GGT，血清Tbil、Alb含量(S土s)。表ll是各組大鼠肝組織Hyp含量，血清ALT、AST活性、GGT，血清Tbil、Alb含量(5土s)。表10<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>注與模型組比較，*/<0.05,;畔p<0.01;與1號(hào)配方組比較，#p<0.0,5##/<0.01結(jié)果證實(shí)本發(fā)明的藥物組合物對(duì)CC14誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化、肝損傷的進(jìn)展有顯著干預(yù)作用，作用效果優(yōu)于單一組分或成分用藥。權(quán)利要求1、一種治療慢性肝病的藥物組合物，其特征是由中藥有效組分或成分蟲草多糖、苦杏仁甙和絞股藍(lán)總皂甙組成。2、按權(quán)利要求1所述的治療慢性肝病的藥物組合物，其特征是所述的蟲草多糖、苦杏仁甙與絞股藍(lán)總皂甙的重量比為1:0.210:0.28。3、按權(quán)利要求1或2所述的治療慢性肝病的藥物組合物，其特征是所述的蟲草多糖、苦杏仁甙與絞股藍(lán)總皂甙的重量比是l:8:2.5。4、按權(quán)利要求1或2所述的治療慢性肝病的藥物組合物，其特征是所述的蟲草多糖、苦杏仁甙與絞股藍(lán)總皂甙的重量比是h1.33:0.83。5、權(quán)利要求1的藥物組合物在制備治療慢性肝炎藥物中的應(yīng)用。6、權(quán)利要求1的藥物組合物在制備防治肝纖維化藥物中的應(yīng)用。7、權(quán)利要求1的藥物組合物在制備治療肝硬化藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明屬中藥領(lǐng)域，涉及治療慢性肝病的藥物。本發(fā)明采用特定配比的蟲草多糖、苦杏仁甙、絞股藍(lán)總皂甙中藥有效組分或成分組成有理想療效的抗肝纖維化、抗肝損傷作用的藥物組合物。經(jīng)經(jīng)典動(dòng)物模型試驗(yàn)并驗(yàn)證，結(jié)果證實(shí)，所述藥物能顯著降低模型大鼠肝組織膠原含量，減輕肝纖維化程度和肝損傷程度，能提高抗肝纖維化作用，有效阻止肝纖維化的發(fā)展并促進(jìn)肝纖維化的逆轉(zhuǎn)，上述作用優(yōu)于各組分單用的效果，可用于治療和預(yù)防各種慢性肝炎、肝纖維化、肝硬化等病癥。本發(fā)明藥物可制成顆粒劑、片劑、膠囊劑等口服固體制劑。文檔編號(hào)A61K31/7028GK101361782SQ20081004294公開日2009年2月11日申請(qǐng)日期2008年9月12日優(yōu)先權(quán)日2008年9月12日發(fā)明者琴馮,平劉,劉成海,彭景華,徐列明,李雪梅,胡義揚(yáng)申請(qǐng)人:上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院