專利名稱：一種注射制劑及其質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種注射制劑及其質(zhì)量控制方法，屬于對藥品進(jìn)行質(zhì)量控制的技 術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
紅景天為景天科紅景天屬(RhodiolaL.)植物的根及根莖，紅景天屬植物在全 世界約有100種，能在及其惡劣而多變的自然環(huán)境中生長，為一種適應(yīng)原樣植物， 主要分布在喜瑪拉雅山區(qū)、亞洲西北部和北美州。我國約有80種，多分布在西 南、西北、華北和東北地區(qū)。目前研究發(fā)現(xiàn)紅景天中含有眾多的有效成分如苷 類，多糖類，有機(jī)酸類，糅質(zhì)，黃酮類、揮發(fā)油，蛋白質(zhì)，微量元素等，紅景 天苷為其重要的活性成分之一，具有抗缺氧、抗疲勞、抗衰老、抗輻射、抗腫 瘤、降血脂和防治心血管疾病等生物學(xué)作用。鑒于紅景天在防病治病方面有如 此多的功用和顯著的療效，使得國內(nèi)外許多學(xué)者紛紛針對紅景天單一活性成分 的結(jié)構(gòu)和藥效進(jìn)行廣泛而深入的研究。紅景天苷(Salickoside)為紅景天中研究 最多的有效成分，是治療心腦血管疾病的主要成分之一，可抑制細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)離子 濃度升高、干預(yù)神經(jīng)細(xì)胞凋亡、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞而治療缺血性腦損傷；對大鼠皮 層神經(jīng)細(xì)胞的自由基損傷有保護(hù)作用，可用于缺血性腦血管疾病；能明顯增加 缺血動物心肌糖原的含量，降低心臟前后負(fù)荷作用，有利于完善和恢復(fù)心臟功
肯g;可提高心肌缺血氧受力，對心肌細(xì)胞損傷有保護(hù)作用等。而毒理實(shí)驗(yàn)表明，
紅景天苷毒性甚小小鼠皮下注射紅景天給與1 g/kg未引起毒性反應(yīng)；小鼠靜 脈注射紅景天苷3 g/kg連續(xù)五天未見任何毒性反應(yīng)。心腦血管疾病在臨床上是常見病、多發(fā)病。近年來，隨著人們生活水平的提 高，加上人口結(jié)構(gòu)的老齡化，其發(fā)病率呈逐年上升的趨勢，開發(fā)治療效果較好 的心腦血管疾病的藥物已經(jīng)成為當(dāng)今藥物研究的熱點(diǎn)，越來越多的臨床研究報 道顯示高純度單一成分紅景天苷在治療心腦血管方面具有良好的應(yīng)用前景。
伹是中藥有效成分的用藥安全性， 一直是困擾廣大科學(xué)研究者的一個難題， 如何提供行之有效的、系統(tǒng)的，全面的質(zhì)量控制方法，是目前中藥開發(fā)市場的 一個瓶頸。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，解決中藥質(zhì)量控制的瓶頸，提供 一種注射制劑及其質(zhì)量控制方法，該制劑為紅景天苷注射制劑，包括注射液、 凍干粉針劑和大容量注射劑。本發(fā)明質(zhì)量控制方法精密度高，重現(xiàn)性好，穩(wěn)定 性好，回收率高，測量結(jié)果準(zhǔn)確，提高了紅景天的制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，可有 效地控制產(chǎn)品質(zhì)量，從而確保其臨床療效。
本發(fā)明所述紅景天的注射劑由紅景天苷-及輔料制備而成。其制備方法為向 有效成分紅景天苷中加入適量輔料，制成，即得。
本發(fā)明所述紅景天苷的凍干粉針劑由紅景天苷-及甘露醇制備而成。其制備方 法為取紅景天提取物，加入適量注射用水，攪拌至完全溶解，再加入適量輔 料，攪拌使溶解，加注射用水至足量。藥液加入0.025% (g/100ml)量加入活性 炭，微沸保溫10分鐘；放冷，用l。/。氫氧化鈉調(diào)pH值，用0.45^m、 0.22^m的 微孔濾膜濾過，濾液灌裝到5ml管制抗生素玻璃瓶，每瓶lml，加蓋經(jīng)處理的 丁基膠塞,凍干，加蓋鋁蓋，即得。
本發(fā)明所述質(zhì)量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測定項(xiàng)目中的部分或全部；其中鑒別包括對制劑中紅景天苷的薄層色譜鑒別和高效液相色譜 鑒別；檢查包括對藥物制劑裝量差異、酸堿度、可見異物、不溶性微粒、水分、 色澤、蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)、樹脂、草酸鹽、熾灼殘?jiān)?、重金屬、砷鹽、鉀離子、無
菌、熱原、溶血與凝聚、異常毒性、過敏反應(yīng)、降壓物質(zhì)進(jìn)行的檢查；含量測
定是對制劑中紅景天苷的含量測定。
紅景天苷的鑒別方法是以紅景天苷對照品為對照，以氯仿甲醇丙酮水
下層液為展開劑的薄層色譜法；是以紅景天苷對照品為對照，以甲醇-水為流動 相的高效液相色譜法； 鑒別方法包括以下項(xiàng)目的部分或全部
(1) 取本制劑，照中國藥典一部附錄薄層色譜法試驗(yàn)。供試品色譜中，在與
對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點(diǎn)；
(2) 取本制劑，HPLC鑒別主峰保留時間應(yīng)于對照品出峰時間一致。 具體的鑒別方法包括以下項(xiàng)目的部分或全部
(1) 取本品適量，加甲醇-水制成每lml中約含0.5mg的溶液，作為供試品溶 液。另取紅景天苷對照品適量，加甲醇-水制成每lml中約含0.5mg的溶液，作 為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上 述兩種溶液各lOpl,分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板 上，以氯仿-甲醇-丙酮-水下層液為展開劑，展開，取出，晾干。置碘蒸汽中顯 色至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的 斑點(diǎn)。
(2) 樣品與對照品主峰的色譜保留時間，應(yīng)完全一致。 紅景天苷的含量測定方法是以紅景天苷對照品為對照，以甲醇水=15-85:15-85為流動相的高效液相色譜法。
紅景天苷的含量測定方法為照中國藥典高效液相色譜法測定
色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)色譜柱為C18或C4或C8柱；甲醇水二15-85: 15-85為流動相；檢測波長200-500mn;流速0.5-1.5ml/min，柱溫25-35°C ; 理論板數(shù)按紅景天苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000;
對照品溶液的制備取紅景天苷對照品適量，精密稱定，以甲醇-水(l5-85:85-15) 配制成每lml中約含0.5mg的紅景天苷溶液，即得。
供試品溶液的制備取紅景天苷樣品適量，精密稱定，以甲醇-水(l5-85:85-15) 配制成每lml中約含0.5mg的紅景天苷溶液，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法分別取對照品溶液和供試品溶液各20pl，注入液相色譜儀，記錄色譜 圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。
本注射制劑中，注射劑中含紅景天苷以紅景天苷計(jì)，不得少于80mg/g;凍干 粉針劑中含紅景天苷以紅景天苷計(jì)，不得少于70mg/g。
本發(fā)明所述質(zhì)量控制方法包括
性狀對于注射劑本品為淺黃色水溶液，
對于凍干粉針劑本品三批均為白色或類白色結(jié)晶性粉末；無臭、味苦澀。 易溶于水，甲醇，溶解于乙醇，略溶于無水乙醇，微溶于正丁醇、丙酮，幾乎 不溶于氯仿，乙酸乙酯，乙醚。
鑒別(1)取本品適量，加甲醇-水制成每lml中約含0.5mg的溶液，作為供 試品溶液。另取紅景天苷對照品適量，加甲醇-水制成每lml中約含0.5mg的溶 液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VI B)試驗(yàn)， 吸取上述兩種溶液各IOW，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-丙酮-水下層液為展開劑，展開，取出，晾干。置碘蒸 汽中顯色至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同
顏色的斑點(diǎn)。
(2)樣品與對照品主峰的色譜保留時間，應(yīng)完全一致。 檢查
酸度取本品適量，加水制成每lml含50mg的溶液，依法測定(《中國藥典》 2005年版一部附錄VH G),樣品的pH值應(yīng)在3 4之間。
水分取本品適量，依法測定(《中國藥典》2005年版二部附錄則M)水分 不大于5%。
蛋白質(zhì)取本品適量，加水制成每lml含50mg的溶液，取lml,依法測定(《中 國藥典》2005年版一部附錄K S)，不得出現(xiàn)渾濁。
鞣質(zhì) 取本品適量，加水制成每lml含50mg的溶液，取lml，依法測定(《中 國藥典》2005年版一部附錄IX S)，不得出現(xiàn)渾濁或沉淀。
樹脂取本品適量，加水制成每lml含50mg的溶液，取5ml，依法測定(《中 同藥典》2005年版一部附錄IX S)，不得出現(xiàn)沉淀。
草酸鹽取本品適量，加水制成每lml含50mg的溶液，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值 至1~2，濾過，取濾液21111,依法測定(《中國藥典》2005年版一部附錄IX S)， 不得出現(xiàn)渾濁或沉淀。
鉀離子取本品10mg,小火熾灼至炭化，在550。C熾灼至完全灰化。將灰化 的樣品加稀醋酸Sml使溶解，置Mml量瓶中，加水稀釋至刻度，混勻，作為供 試品溶液。依法測定(《中國藥典》2005年版一部附錄IX S)，裝供試品的比色管的濁度不得更濃。
溶液顏色取本品適量，加水制成每lml中約含0.5mg的溶液，依法測定(《中 國藥典》2005年版一部附錄XI A),供試品管呈現(xiàn)的顏色應(yīng)淺于黃色2號標(biāo)準(zhǔn)比色液。
澄清度取本品適量，加水制成每lml含50mg的溶液，置于比濁用玻璃管中， 依法測定(《中國藥典》2005年版二部附錄1X B),應(yīng)澄清。
熾灼殘?jiān)”酒穕.Og,依法檢查(《中國藥典》2005年版一部附錄僅J),不 得過10.0%。
重金屬取熾灼殘?jiān)?xiàng)遺留的殘?jiān)?，依法檢查(《中國藥典》2005年版一部附 錄IX E第二法)，含重金屬不得過百萬分之十。
砷鹽取本品1.0g,加2X硝酸鎂乙醇溶液3ml，點(diǎn)燃，燃盡后，先用小火熾 灼使炭化，再在500 600t熾灼至完全灰化，放冷，殘?jiān)欲}酸5ml與水21ml 使溶解，依法檢查(《中國藥典》2005年版一部附錄K F第一法)，含砷鹽不得 過百萬分之二。
異常毒性
有機(jī)殘留溶劑的檢查 大孔吸附樹脂樹脂殘留
含量測定照中國藥典高效液相色譜法測定 照高效液相色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VI D)測定。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑； 流動相甲醇-水(15-85: 85-15);
流速0.5-1.5ml/min;柱溫25-35°C; 進(jìn)樣量20^1; 檢測波長275nm。理論板數(shù)按羥紅景天苷峰計(jì)算，應(yīng)不低于2000。
對照品溶液的制備取紅景天苷對照品適量，精密稱定，以甲醇-水(15-85: 85-15)配制成每lml中約含0.5mg的紅景天苷溶液，即得。
供試品溶液的制備取紅景天苷樣品適量，精密稱定，以甲醇-水(15-85: 85-15) 配制成每lml中約含0.5mg的紅景天苷溶液，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法分別取對照品溶液和供試品溶液各20)Li1，注入液相色譜儀，記錄色譜 圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。
本注射制劑中，注射劑中含紅景天以紅景天苷計(jì)，不得少于80mg/g;凍干粉
針劑中含紅景天以紅景天苷計(jì)，不得少于70mg/g。
具體的實(shí)施方式 實(shí)施例1:
注射用紅景天苷iv對小鼠耐缺氧能力的影響
20 22g昆明種小鼠180只，雌雄各半，隨機(jī)分為18組，每組10只，分別 為對照組，模型組，溶媒組，葛根素注射液組劑量19.1mg/kg、 27.3 mg/kg、 39.0mg/kg、 55.7 mg/kg、 79.6 mg/kg;地爾硫卓組劑量1.1mg/kg、 2.〗mg/kg、 3.0mg/kg、 4.3mg/kg、 6.1 mg/kg;注射用紅景天苷組劑量23.5mg/kg、 33.6mg/kg、 48.0mg/kg、 68.6mg/kg、 98.0 mg/kg。對照組、模型組均注射0.9。/。的氯化鈉注射 液，各組小鼠尾靜脈給藥體積皆為0.1ml/10g。各組分別連續(xù)給藥5天。最后一 次給藥lSmin后，除正常組外均皮下注射異丙腎上腺素(Iso) 15mg/kg[5]， 15min 后，將小鼠裝于有10g鈉石灰的250ml廣口瓶中，用涂有凡士林的瓶塞蓋緊，造 成密閉性缺氧。記錄從蓋瓶塞到停止呼吸的持續(xù)時間，作為小鼠缺氧條件下的 存活時間，計(jì)算存活延長率{存活延長率=(給藥組存活時間 一模型組存活時間)/ 模型組存活時間X 100%}并用Bliss法計(jì)算ED50。數(shù)據(jù)用f ± S表示，各組分別與模型組及溶媒對照組進(jìn)行組間t檢驗(yàn)。
表l:注射用紅景天苷iv對缺氧狀態(tài)下小鼠存活時間的影響(x±s， n = 10)
存活時間 95%值信
劑量 存活時間 ED50
組別 延長率 區(qū)間
(mg/k《 (— (％) (mg/k《
對照組 34.6 ±4.9
模型組 16.8±2.0##
溶媒組 17.0±2,7##
葛根素 8.2 22.3±4.2##^ 32.6 13.3 7.8 22.7
11.2 24.5±4.4##^ 45.7 16.8 26.2±5.1##^ 55.7 24.0 27.8±4.8#aa 65.3
34.3 29.2土5.3弁aa 73.4
j:也爾^S卓 1.5 20.8±5.0##a〃 24.9 2.7 2.0 3.8
2.1 21.0±3.9##aa 43.5
3.0 24.1±3.6##aa 56.2
4.3 26.3±7.6##aa 66.76.128.1土4.5弁弁aa79.4
23.520.2±3.4##A33,7
33.622.5±4.6##^A48.6
48.025.0±6.8##aa59.3
68.626.8±4.1##aa66.4
98.028.0±5.0##aa83.5
37.6 24.4 58.0
# P<0.05, ## P<0.01 VS對照； A P<0.05， a p<o.01 VS模型
異丙腎上腺素能明顯降低小鼠的耐缺氧能力(P<0.01 VS對照)；注射用紅 景天苷iv給藥均能顯著增加小鼠的存活時間(P《.05 0.01 VS模型)，但低于正常 對照組(P0.05 0.01 VS對照)，各組隨著劑量增加，存活時間同時增加。陽性 對照葛根素和地爾硫卓iv給藥也能顯著增加小鼠的缺氧存活時間(P〈0.01 VS模型)。
權(quán)利要求
1.本發(fā)明所述的紅景天的凍干粉針劑，其特征在于由紅景天苷和藥物上可接受的輔料，注射用水制備而成。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的輔料是指甘露醇。
3. 根據(jù)權(quán)利要求l, 2所述的凍干粉針劑制備方法，其特征是為取 紅景天提取物，加入適量注射用水，攪拌至完全溶解，再加入適量甘 露醇，攪拌使溶解，加注射用水至足量。藥液加入0.025% (g/100ml) 量加入活性炭，微沸保溫10分鐘；放冷，用l。/。氫氧化鈉調(diào)pH值， 用0.45pm、 0.22pm的微孔濾膜濾過，濾液灌裝到5ml管制抗生素玻 璃瓶，每瓶lml，加蓋經(jīng)處理的丁基膠塞，凍干，加蓋鋁蓋，即得。
4. 本發(fā)明所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于主要包括性狀、鑒別、 檢查以及含量測定項(xiàng)目中的部分或全部；其中鑒別包括對制劑中紅景 天苷的薄層色譜鑒別和高效液相色譜鑒別；檢查包括對藥物制劑裝量 差異、酸堿度、可見異物、不溶性微粒、水分、色澤、蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)、 樹脂、草酸鹽、熾灼殘?jiān)⒅亟饘佟⑸辂}、鉀離子、無菌、熱原、溶血與凝聚、異常毒性、過敏反應(yīng)、降壓物質(zhì)進(jìn)行的檢查；含量測定是對制劑中紅景天苷的含量測定。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的鑒別方法,其特征在于是以紅景天苷對照品 為對照，以氯仿甲醇丙酮水下層液為展開劑的薄層色譜法；是 以紅景天苷對照品為對照，以甲醇-水為流動相的高效液相色譜法。
6. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的含量測定方法，其特征在于紅景天苷的含量 測定方法為照中國藥典高效液相色譜法測定。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的采用高效色譜法測定方法,其特征在于流動相為甲醇水=15-85: 15-85;檢測波長200-500nm;流速 0.5-1.5ml/min，柱溫25-35°C ;理論板數(shù)按紅景天苷峰計(jì)算應(yīng)不低于 2000。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種紅景天注射制劑，包括注射液、凍干粉針劑和大容量注射劑。本發(fā)明質(zhì)量控制方法精密度高，重現(xiàn)性好，穩(wěn)定性好，回收率高，測量結(jié)果準(zhǔn)確，提高了紅景天的制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，可有效地控制產(chǎn)品質(zhì)量，從而確保其臨床療效。
文檔編號A61K9/19GK101584730SQ20081004443
公開日2009年11月25日 申請日期2008年5月23日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月23日
發(fā)明者劉淑華, 劉艾磊, 康海岐, 張春容, 彭紅衛(wèi), 偉 楊, 董兆勇, 斌 趙, 陳怡凡, 陳春會 申請人:西藏諾迪康藥業(yè)股份有限公司