專利名稱：高分子鍵合阿霉素藥、其納米膠囊及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及可生物降解的高分子鍵合阿霉素藥、其納米膠囊及制備方法。
背景技術(shù)：
阿霉素的分子結(jié)構(gòu)式如下所示<formula>formula see original document page 5</formula>
它是一種蒽環(huán)類抗腫瘤抗生素，為細(xì)胞周期非特異性藥，對S期作用最強(qiáng)，對M、 Gl和G2期也有作用，其作用機(jī)制主要是阿霉素不經(jīng)分子嵌入DNA 而抑制核酸的合成。主要用于治療肺癌、乳腺癌、膀胱癌、睪丸癌、甲狀 腺癌、軟組織腫瘤、骨肉瘤、神經(jīng)母細(xì)胞癌、急性白血病和惡性淋巴瘤等， 也可用于治療胃癌、肝癌、食管癌、宮頸癌等。目前臨床給藥多為靜脈滴 注，但阿霉素不能透過血腦屏障，且靜注后該藥迅速分布全身，對骨髓和 心臟都有較為嚴(yán)重的毒副作用。同時(shí)靜注給藥用藥量大，在病灶部位作用 效率低。 .研究阿霉素的新劑型一直是研究者關(guān)注的熱點(diǎn)。人們探索了多種阿霉 素藥物輸送系統(tǒng)脂質(zhì)體、乳劑、微球、納米藥物載體、阿霉素超細(xì)纖維 等。中國專利CN—99105727公開了一種生產(chǎn)鹽酸阿霉素脂質(zhì)體注射劑的方法及其產(chǎn)品；中國專利CN—1686987 A公開了一種阿霉素磁性藥物微球； 中國專利CN—1476896 A公開了一種阿霉素納米藥物載體；中國專利CN 一97107079公開了一種阿霉素緩釋體內(nèi)植入藥物及其制備方法。但脂質(zhì)體 注射劑、微球及體內(nèi)植入緩釋劑等藥物劑型都會(huì)有載藥量低及藥物突釋等 問題。納米藥物的研究是藥物研究中一個(gè)很有生命力的新方向，藥物主要通 過包封和吸附等方法載入納米藥物載體中。納米技術(shù)用于藥物研究，國外 已進(jìn)行了多年的工作，其粒徑范圍較寬，多在100-1000nm范圍，稱為納米 膠束或納米膠囊。由于納米藥物的粒徑比毛細(xì)血管直徑(6-8pm)還小， 因而可比較容易地進(jìn)入人體的各種組織器官中進(jìn)行控制釋放，大幅提高藥 物的生物利用度。最近，聚合物鍵合藥的制備和研究受到大家的極大關(guān)注。所謂"聚合 物鍵合藥"，就是將藥物分子用共價(jià)鍵結(jié)合到高分子上，制成一定的劑型， 采用相應(yīng)的給藥方式，將高分子連同藥物送到病人體內(nèi)，在生理?xiàng)l件下， 藥物分子從高分子上解離下來，發(fā)揮治療或診斷的作用。藥物與高分子鍵 合后可以改善親油性藥物的親水性，在高分子的保護(hù)下，藥物可以免受生 理環(huán)境中酶和免疫系統(tǒng)的攻擊，達(dá)到緩釋和長效的目的。需要特別指出的 是，如果兩親性聚合物鍵合藥自組裝成膠束，藥物一般處于膠束的內(nèi)核， 由于與高分子結(jié)合牢固， 一般不會(huì)通過擴(kuò)散從膠束中逃逸出來。所以它既 具有傳統(tǒng)物理包埋膠束的優(yōu)點(diǎn)，又避免了因動(dòng)力學(xué)上的不穩(wěn)定造成的藥物 突釋，從而可提高藥物的生物利用度和減少藥物的毒副作用。在發(fā)明人已經(jīng)申請的中國專利(中國專利申請?zhí)?00410011176.3和 200610016559.9)中，公開了兩種紫杉醇高分子鍵合藥。本發(fā)明中利用聚乙 二醇-聚乳酸嵌段共聚物和阿霉素鍵合的方法，制備了一種新的阿霉素高分 子鍵合藥。該藥具有兩親性，在水溶液中能夠自組裝得到穩(wěn)定的載有阿霉素的膠囊，克服了現(xiàn)有阿霉素制劑過敏反應(yīng)嚴(yán)重和突釋等缺點(diǎn)；并且得到 的膠束的粒徑為納米級，可望在血液循環(huán)中通過所謂的"增強(qiáng)的滲透和滯 留效應(yīng)"(EPR)在腫瘤部位聚集，提高阿霉素對腫瘤部位的靶向作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是提供一種可生物降解的高分子阿霉素鍵合藥，其 中的生物降解高分子為聚乙二醇(PEG)和聚乳酸(PLA)的兩嵌段共聚物 PEG-PLA或三嵌段共聚物PLA-PEG-PLA，通過聚乳酸(PLA)段的端羧基 與阿霉素(Dox)的氨基相連得到高分子阿霉素鍵合藥PEG-PLA-Dox或 Dox-PLA-PEG-PLA-Dox，其中聚乙二醇段的數(shù)均分子量400-5000，兩嵌段 共聚物中的聚乳酸段的分子量或三嵌段共聚物中的兩個(gè)聚乳酸段的數(shù)均分 子量之和為1000-10000，阿霉素在鍵合藥中的質(zhì)量比例在10 30%范圍。
本發(fā)明的另一目的是提供這種可生物降解高分子阿霉素鍵合藥的制備 方法，步驟如下
(1) 合成聚乙二醇和聚乳酸的嵌段共聚物；
(2) 將嵌段共聚物的端羥基轉(zhuǎn)化成端羧基；
(3) 嵌段共聚物的端羧基與阿霉素的氨基縮合，形成高分子阿霉素鍵合
其中步驟(l)的聚合反應(yīng)表示如下
o
CH3~("OCH2CH2)~OH +
(PEG國OH)
H3C
■0
Sn(Oct)2
a
CH3
O
(LA)
O
ChH。CH2CH2^0'
OH
CH3
(PEG-PLA-OH)
O
H3C
■CH，
(HO-PEG-OH)
O
(LA)
O
、0 Sn(Oct)2
H~^OCH2CH2LOH + i丄~-H十O、O.
V
CH3
n 、 m、 Cl^n
(HO-PLA-PEG孔A-OH)它是以端羥基聚乙二醇PEG-OH或雙端羥基聚乙二醇HO-PEG-OH為
引發(fā)劑的丙交酯的開環(huán)聚合反應(yīng)，所獲得的是聚乙二醇和聚乳酸的帶端l
基的兩嵌段共聚物PEG-PLA-OH或三嵌段共聚物HO-PLA-PEG-PLA-OH。 聚合物的合成參考文獻(xiàn)(Xie, Z.G.等，Journal of Applied Polymer Science 2007, 105, (4), 2271-2279)?？梢圆捎枚喾N開環(huán)聚合催化劑，其中以辛酸亞錫 效果較好。引發(fā)劑PEG-OH或HO-PEG-OH的數(shù)均分子量400-5000，丙交
酯的用量決定于聚乙二醇的分子量和設(shè)計(jì)的阿霉素含量；其中，聚乙二醇 段的數(shù)均分子量400-5000，兩嵌段共聚物中的聚乳酸段的分子量或三嵌段 共聚物中的兩個(gè)聚乳酸段的分子量之和為1000-10000。
步驟(2)就是用丁二酸酐與步驟(1)得到的聚乙二醇和聚乳酸的嵌段共聚
物的端羥基反應(yīng)，發(fā)生酯化，同時(shí)生成羧基，如下所示
<formula>formula see original document page 8</formula>具體反應(yīng)操作及條件是在催化劑三乙胺(TEA)和N,N-二甲基對氨 基吡啶(DMAP)的存在下，在反應(yīng)溶劑中，將帶端羥基的嵌段共聚物 PEG-PLA-OH或HO-PLA-PEG-PLA-OH與丁二酸酐在室溫進(jìn)行酯化反應(yīng)， 獲得含有端羧基的嵌段聚合物 PEG-PLA-COOH 或 COOH-PLA-PEG-PLA-COOH;其中，帶端羥基的嵌段共聚物PEG-PLA-OH 或HO-PLA-PEG-PLA-OH在反應(yīng)溶劑的溶液中的質(zhì)量濃度為5-20%; 丁二 酸酐的用量是羥基摩爾數(shù)的1-2倍，催化劑TEA和DMAP的用量均與丁二酸酐等摩爾，反應(yīng)時(shí)間是12-36 h，反應(yīng)溫度為0-25°C;所述的反應(yīng)溶劑采 用1,4-二氧六環(huán)、二氯甲垸、四氫呋喃或二甲基亞砜。
步驟(3)的反應(yīng)是聚合物上的端羧基與阿霉素(Dox)上的氨基反應(yīng)，形 成酰胺鍵，將阿霉素用共價(jià)鍵結(jié)合到聚合物鏈端，如下所示
<formula>formula see original document page 9</formula>
具體反應(yīng)操作及條件是在TEA的存在下，在二甲基亞砜(DMSO) 溶液中，將帶羧基的嵌段共聚物的端羧基與阿霉素的氨基進(jìn)行縮合反應(yīng)， 獲得高分子阿霉素鍵合藥，其中，帶羧基的嵌段共聚物在DMSO溶液中的 質(zhì)量濃度為5-20%;阿霉素的用量是帶羧基的嵌段共聚物的端羧基摩爾數(shù) 的1-2倍，TEA與阿霉素等摩爾量，反應(yīng)時(shí)間是12-36 h，反應(yīng)溫度為0-25 。C。
阿霉素(Dox或NH2-Dox)的分子結(jié)構(gòu)式如前所示。在文獻(xiàn)中有利用 羥基進(jìn)行阿霉素修飾的報(bào)道。本發(fā)明選擇阿霉素糖環(huán)上的氨基，是因?yàn)榕c 羥基比較，此氨基的反應(yīng)活性較高，鍵合時(shí)不需要保護(hù)羥基；它遠(yuǎn)離具有 藥學(xué)活性的蒽環(huán)，鍵合以后對阿霉素的抗癌活性影響較小。
本發(fā)明的目的之三是提供上述可生物降解高分子鍵合阿霉素藥的納米 膠囊，它的內(nèi)核由聚乳酸鏈段和阿霉素組成，外殼由聚乙二醇鏈段組成； 該可生物降解高分子鍵合阿霉素藥的納米膠囊的直徑20-200 nm。該可生物 降解高分子鍵合阿霉素藥的納米膠囊的結(jié)構(gòu)示意圖見圖1。其中，1-1由兩 嵌段共聚物鍵合阿霉素PEG-PLA-Dox制成；1-2由三嵌段共聚物鍵合阿霉素Dox-PLA-PEG-PLA-Dox制成。圖中，1為Dox， 2為PLA， 3為PEG。 本發(fā)明的目的之四是提供上述可生物降解高分子阿霉素鍵合藥納米膠
囊的制備方法，步驟如下
(1) 將高分子阿霉素鍵合藥溶于有機(jī)溶劑中，所用的有機(jī)溶劑是丙酮、
四氫呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜或它們中任意兩種或三種的混
合物，有機(jī)溶劑體積的毫升數(shù)是高分子鍵合藥質(zhì)量克數(shù)的4-100倍；
(2) 在攪拌條件下，向高分子阿霉素鍵合藥溶液中滴加二次蒸餾水，形 成納米膠束水溶液，水的體積是有機(jī)溶劑體積的1-5倍；
(3) 將高分子阿霉素鍵合藥納米膠束水溶液進(jìn)行透析，除去溶液中的有 機(jī)溶劑，透析膜截流分子量3000g/mo1以上，透析介質(zhì)為二次蒸餾水，4-8 小時(shí)更換一次，共透析24-72小時(shí)；
(4) 將透析后的高分子阿霉素鍵合藥納米膠束水溶液濃縮到質(zhì)量濃度 0.5-5%，采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)或超濾膜法濃縮；
(5) 將濃縮后的高分子阿霉素鍵合藥納米膠束水溶液冷凍干燥，得到高 分子鍵合阿霉素藥的納米膠囊。
當(dāng)上述步驟(l)中使用揮發(fā)性有機(jī)溶劑丙酮或四氫呋喃或者兩者的混合 溶劑，步驟(3)和〈4)采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)的方法，除去阿霉素鍵合藥納米膠束混合 水溶液中的揮發(fā)性有機(jī)溶劑，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)的時(shí)間是2-8小時(shí)，至溶液總體積 的毫升數(shù)達(dá)到鍵合藥質(zhì)量克數(shù)的20-200倍。
為了增加凍干后的納米膠囊的溶解性，在步驟(5)的凍干之前，在納米 膠束水溶液中添加增溶劑乳糖、甘露醇、水解明膠、氯化鈉、葡萄糖或它 們的混合物，混合均勻；增溶劑用量為膠束水溶液中生物降解高分子阿霉 素鍵合藥質(zhì)量的50-200%。
本發(fā)明的有益效果本發(fā)明采用聚乙二醇和聚乳酸的嵌段共聚物作為 阿霉素的載體。眾所周知，聚乳酸是一種完全生物降解的聚合物，已被美國FDA批準(zhǔn)在人體內(nèi)使用。它以玉米淀粉為原料，價(jià)廉易得，經(jīng)發(fā)酵獲得 乳酸，再聚合為聚乳酸，生產(chǎn)成本相對較低。
本發(fā)明所制備的高分子阿霉素鍵合藥具有雙親性，可以分散在水介質(zhì) 中形成納米粒子，阿霉素被包裹在納米粒子的內(nèi)部，起到隔離和保護(hù)的作 用，使阿霉素免受人體免疫系統(tǒng)的攻擊，因而可以降低用藥劑量，減少毒 副反應(yīng)；由于與高分子結(jié)合牢固，阿霉素分子不會(huì)直接通過擴(kuò)散從膠束中
逃逸出來。所以它既具有傳統(tǒng)物理包埋膠束的優(yōu)點(diǎn)，又避免了因動(dòng)力學(xué)上 的不穩(wěn)定造成的藥物突釋，從而可提高藥物的生物利用度和減少藥物的毒 副作用。
本發(fā)明使用聚乙二醇的高度親水性使它處于納米膠束的外圍，由于人 體免疫系統(tǒng)對聚乙二醇不敏感，這種在聚乙二醇保護(hù)下的阿霉素鍵合藥的 納米膠束可以在血液循環(huán)系統(tǒng)中滯留很長時(shí)間而不被免疫細(xì)胞吞噬，具有
長期藥效。所選用的聚乙二醇的分子量在5000以下，在聚乳酸段降解后，
可經(jīng)腎臟排出體外。


圖1為PEG和PLA嵌段共聚物與阿霉素Dox鍵合物自組裝成納米膠 束的結(jié)構(gòu)示意圖。l為Dox， 2為PLA， 3為PEG。其中5-1由兩嵌段共聚 物鍵合阿霉素PEG-PLA-Dox制成；5-2由三嵌段共聚物鍵合阿霉素 Dox-PLA-PEG- PLA-Dox制成。
圖2: COOH-PLA-PEG-PLA-COOH的iHNMR譜圖，見實(shí)施例2。 圖3:阿霉素(A)和高分子鍵合藥PEG-PLA-Dox(B)的^ NMR譜圖， 見實(shí)施例3。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例l:嵌段聚合物PEG-PLA-OH的合成
將4 g數(shù)均分子量為400的聚乙二醇(PEG-OH)加入到帶有分水器、回流冷凝管和磁攪拌子的干燥安瓶中，加入無水甲苯40 ml，共沸除水30 分鐘，然后冷卻到室溫，加入10g用乙酸乙酯重結(jié)晶三次的丙交酯(LA)單 體，反應(yīng)瓶用高純氬氣換氣三次，然后加入為LA單體摩爾數(shù)1/500的辛酸 亞錫，110°C下攪拌反應(yīng)24h，然后將產(chǎn)物溶于適量二氯甲烷，用乙醚沉降， 得到白色產(chǎn)物，在40。C下真空干燥，即得PEG-PLA-OH嵌段聚合物，其數(shù) 均分子量為1400 (由^NMR算出)。 實(shí)施例2:端羧基化嵌段聚合物PEG-PLA-COOH的合成
將1.84 g的PEG-PLA-OH聚合物溶于10 ml 1,4-二氧六環(huán)，加入0.013 g丁二酸酐，然后依次加入0.018 ml三乙胺(TEA)和0.016 g N,N-二甲基 對氨基吡啶(DMAP)，室溫反應(yīng)12 h。過濾掉反應(yīng)所生產(chǎn)的鹽，濾液用乙 醚沉降，得到白色產(chǎn)物，在40。C下真空干燥，即得端羧基化的嵌段聚合物 PEG-PLA-COOH。其核磁譜圖見圖2。 實(shí)施例3: PEG-PLA-COOH和阿霉素的鍵合
在50 ml的安瓶中加入0.38 g端羧基嵌段聚合物PEG-PLA-COOH，然 后加入20 ml無水二甲基亞砜，待聚合物溶解后，加入27.2 mg阿霉素、0.007 mlTEA和6mgDMAP， (TC下反應(yīng)12h，濾掉反應(yīng)過程中生成的沉淀，濾 液用無水乙醚沉降，得到白色沉淀物，真空干燥。阿霉素在鍵合藥中的質(zhì) 量含量為12%。其核磁譜圖見圖3(B)。為了比較，阿霉素的核磁譜圖給在 圖3(A)中。
實(shí)施例4:制備高分子阿霉素鍵合藥PEG-PLA-Dox的納米膠囊。
取0.1 g阿霉素鍵合藥溶解于10 ml四氫呋喃中，緩慢加入20 ml 二次 蒸餾水，然后在25。C條件下，透析2天除去四氫呋喃，得到阿霉素鍵合藥 的膠束水溶液。將透析后的高分子阿霉素鍵合藥納米膠束水溶液采用旋轉(zhuǎn) 蒸發(fā)濃縮到質(zhì)量濃度2%;然后冷凍干燥，得到高分子阿霉素鍵合藥納米膠 束的凍干粉。實(shí)施例5:嵌段聚合物PEG-PLA-OH的合成
將4g分子量為5000的聚乙二醇(PEG-OH)加入到帶有分水器、回流 冷凝管和磁攪拌子的干燥安瓶中，加入無水甲苯20ml，共沸除水30分鐘， 然后冷卻到室溫，加入8g用乙酸乙酯重結(jié)晶三次的丙交酯(LA)單體，反 應(yīng)瓶用高純氬氣換氣三次，然后加入為LA單體摩爾數(shù)1/1000的辛酸亞錫， 140。C下攪拌反應(yīng)12 h，然后將產(chǎn)物溶于適量二氯甲垸，用乙醚沉降，得 到白色產(chǎn)物，在40。C下真空干燥，即得嵌段聚合物PEG-PLA-OH，其數(shù)均 分子量為15000 (由iHNMR算出)。 實(shí)施例6:端羧基化嵌段聚合物PEG-PLA-COOH的合成
將2.6 g的PEG-PLA-OH聚合物溶于10 ml 二甲基亞砜，加入0.026 g 丁二酸酐，然后依次加入三乙胺(TEA) 0.036 ml和N,N-二甲基對氨基吡 啶(DMAP) 0.032 g，室溫反應(yīng)24h。過濾掉反應(yīng)所生產(chǎn)的鹽，濾液用乙醚沉 降，得到白色產(chǎn)物，在40 °C下真空干燥，即得端羧基化的嵌段聚合物 PEG-PLA-COOH。
實(shí)施例7: PEG-PLA-COOH和何霉素的鍵合
在50 ml的安瓶中加入0.5 g端羧基嵌段聚合物PEG-PLA-COOH,然后 加入5 ml無水二甲基亞砜，待聚合物溶解后，加入36 mg阿霉素、0.005 ml TEA和8mgDMAP， 0。C下反應(yīng)24h，濾掉反應(yīng)過程中生成的沉淀，濾液 用無水乙醚沉降，得到白色沉淀物，真空干燥。阿霉素在鍵合藥中的質(zhì)量 含量為15.4%。
實(shí)施例8:制備高分子阿霉素鍵合藥PEG-PLA-Dox的納米膠囊。
取o.l g阿霉素鍵合藥溶解于10 ml丙酮中，緩慢加入30 ml 二次蒸餾 水，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去丙酮，得到阿霉素鍵合藥的膠束水溶液，體積20ml。在 得到的納米膠束水溶液中添加增溶劑乳糖O.lg和氯化鈉0.05g;然后冷凍干 燥，得到高分子阿霉素鍵合藥納米膠束的凍干粉。實(shí)施例9:嵌段聚合物HO-PLA-PEG-PLA-OH的合成
將4 g分子量為2000的雙羥基的聚乙二醇(HO-PEG-OH)加入到帶有 分水器、回流冷凝管和磁攪拌子的干燥安瓶中，加入無水甲苯40ml，共沸 除水30分鐘，然后冷卻到室溫，加入4 g用乙酸乙酯重結(jié)晶三次的丙交酯 (LA)單體，反應(yīng)瓶用高純氬氣換氣三次，然后加入為LA單體摩爾數(shù)1/500 的辛酸亞錫，110。C下攪拌反應(yīng)12h，然后將產(chǎn)物溶于適量二氯甲烷，用乙 醚沉降，得到白色產(chǎn)物，在4(TC下真空干燥，即得HO-PLA-PEG-PLA-OH 三嵌段聚合物，其數(shù)均分子量為3900(由^NMR算出)。 實(shí)施例10:端羧基化嵌段聚合物COOH-PLA-PEG-PLA-COOH的合成
將1 g的HO-PLA-PEG-PLA-OH聚合物溶于10 ml 二氯甲烷，加入0.1 g丁二酸酐，然后依次加入0.14ml三乙胺(TEA)和0.12 gN,N-二甲基對 氨基吡啶(DMAP)，室溫反應(yīng)36 h。過濾掉反應(yīng)所生產(chǎn)的鹽，濾液用乙醚 沉降，得到白色產(chǎn)物，在40。C下真空干燥，即得端羧基化的PEG-PLA嵌 段聚合物。
實(shí)施例ll: COOH-PLA-PEG-PLA-COOH和阿霉素的鍵合
在50 ml的安瓶中加入0.5 g端羧基嵌段聚合物COOH-PLA-PEG-PLA-COOH, 然后加入10 ml無水二甲基亞砜，待聚合物溶解后，加入200 mg阿 霉素、0.07mlTEA和600mgDMAP， (TC下反應(yīng)36h，濾掉反應(yīng)過程中生 成的沉淀，濾液用無水乙醚沉降，得到白色沉淀物，真空干燥。阿霉素在 鍵合藥中的質(zhì)量含量為25.4%。
實(shí)施例12:制備高分子阿霉素鍵合藥Dox-PLA-PEG-PLA-Dox的納米膠囊。 取O.l g阿霉素鍵合藥溶解于10mlN,N-二甲基甲酰胺中，緩慢加入20 ml二次蒸餾水，然后在25。C條件下，用截流分子量3500g/mol透析袋透析 3天除去N,N-二甲基甲酰胺，得到阿霉素鍵合藥的膠束水溶液。將透析后 的高分子阿霉素鍵合藥納米膠束水溶液用超濾膜法濃縮到質(zhì)量濃度4 %;在納米膠束水溶液中添加增溶劑甘露醇和葡萄糖各O.lg，混合均勻；然后冷 凍干燥，得到高分子鍵合阿霉素藥的納米膠囊。
權(quán)利要求
1、高分子鍵合阿霉素藥，其特征在于，鍵合藥中的高分子為聚乙二醇和聚乳酸的兩嵌段共聚物聚乙二醇-聚乳酸或三嵌段共聚物聚乳酸-聚乙二醇-聚乳酸，通過聚乳酸段的端羧基與阿霉素的氨基相連得到高分子阿霉素鍵合藥聚乙二醇-聚乳酸-阿霉素或阿霉素-聚乳酸-聚乙二醇-聚乳酸-阿霉素，其中聚乙二醇段的數(shù)均分子量400-5000，兩嵌段共聚物中的聚乳酸段的分子量或三嵌段共聚物中的兩個(gè)聚乳酸段的數(shù)均分子量之和為1000-10000，阿霉素在鍵合藥中的質(zhì)量比例在10～30％范圍。
2、 如權(quán)利要求1所述高分子鍵合阿霉素藥的納米膠囊，其特征在于， 它的內(nèi)核由聚乳酸鏈段和阿霉素組成，外殼由聚乙二醇鏈段組成。
3、 權(quán)利要求2所述高分子鍵合阿霉素藥的納米膠囊，其特征在于，其 直徑為20-200 nm。
4、 如權(quán)利要求1所述的高分子鍵合阿霉素藥的合成方法，步驟如下(1) 合成聚乙二醇和聚乳酸的兩嵌段或三嵌段共聚物，其中聚乙二醇 段的數(shù)均分子量400-5000，兩嵌段共聚物中的聚乳酸段的分子量或三嵌段 共聚物中的兩個(gè)聚乳酸段的分子量之和為1000-10000;(2) 將步驟(1)的嵌段共聚物的端羥基轉(zhuǎn)化成端羧基 在催化劑三乙胺和N,N-二甲基對氨基吡啶的存在下，在反應(yīng)溶劑中，將帶端羥基的嵌段共聚物聚乙二醇-聚乳酸或帶端羥基的嵌段共聚物聚乙二 醇-聚乳酸-聚乙二醇與丁二酸酐在室溫進(jìn)行酯化反應(yīng)，獲得含有端羧基的嵌 段聚合物聚乙二醇-聚乳酸或含有端羧基的嵌段聚合物聚乙二醇-聚乳酸-聚 乙二醇；其中，帶端羥基的嵌段共聚物聚乙二醇-聚乳酸或帶端羥基的嵌段 共聚物聚乙二醇-聚乳酸-聚乙二醇在反應(yīng)溶劑的溶液中的質(zhì)量濃度為 5-20%; 丁二酸酐的用量是羥基摩爾數(shù)的l-2倍，催化劑三乙胺和N,N-二甲基對氨基吡啶的用量均與丁二酸酐等摩爾，反應(yīng)時(shí)間是12-36 h，反應(yīng)溫 度為0-25°C;所述的反應(yīng)溶劑采用1,4-二氧六環(huán)、二氯甲烷、四氫呋喃或 二甲基亞砜；(3)嵌段共聚物的端羧基與阿霉素的氨基縮合，形成高分子阿霉素鍵合藥在三乙胺的存在下，在二甲基亞砜溶液中，將帶羧基的嵌段共聚物的 端羧基與阿霉素的氨基進(jìn)行縮合反應(yīng)，獲得高分子阿霉素鍵合藥，其中，帶羧基的嵌段共聚物在二甲基亞砜溶液中的質(zhì)量濃度為5-20%;阿霉素的 用量是帶羧基的嵌段共聚物的端羧基摩爾數(shù)的1-2倍，三乙胺與阿霉素等 摩爾量，反應(yīng)時(shí)間是12-36 h，反應(yīng)溫度為0-25。C，得到高分子鍵合阿霉素 藥。
5、權(quán)利要求2所述高分子鍵合阿霉素藥的納米膠囊的制備方法，步驟如下(1) 將髙分子阿霉素鍵合藥溶于有機(jī)溶劑中，所用的有機(jī)溶劑是丙酮、四氫呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜或它們中任意兩種或三種的混 合物，有機(jī)溶劑體積的毫升數(shù)是高分子鍵合藥質(zhì)量克數(shù)的4-100倍；(2) 在攪拌條件下，向高分子阿霉素鍵合藥溶液中滴加二次蒸餾水，形 成納米膠束水溶液，水的體積是有機(jī)溶劑體積的1-5倍；(3) 將高分子阿霉素鍵合藥納米膠束水溶液進(jìn)行透析，除去溶液中的有 機(jī)溶劑，透析膜截流分子量3000g/mo1以上，透析介質(zhì)為二次蒸餾水，4-8 小時(shí)更換一次，共透析24-72小時(shí)；(4) 將透析后的高分子阿霉素鍵合藥納米膠束水溶液濃縮到質(zhì)量濃度 0.5-5%，采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)或超濾膜法濃縮；(5) 將濃縮后的高分子阿霉素鍵合藥納米膠束水溶液冷凍干燥，得到高 分子鍵合阿霉素藥的納米膠囊。
6、 權(quán)利要求5高分子鍵合阿霉素藥的納米膠囊的制備方法，其特征在 于，上述步驟(l)中使用揮發(fā)性有機(jī)溶劑丙酮或四氫呋喃或者兩者的混合溶 劑，步驟(3)和(4)采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)的方法，除去阿霉素鍵合藥納米膠束混合水 溶液中的揮發(fā)性有機(jī)溶劑，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)的時(shí)間是2-8小時(shí)，至溶液總體積的 毫升數(shù)達(dá)到鍵合藥質(zhì)量克數(shù)的20-200倍。
7、 權(quán)利要求5或6所述生物降解高分子阿霉素鍵合藥納米膠囊的制備 方法，其特征在于，在步驟(5)的凍干之前，在納米膠束水溶液中添加增溶 劑乳糖、甘露醇、水解明膠、氯化鈉、葡萄糖或它們的混合物，混合均勻； 增溶劑用量為膠束水溶液中生物降解高分子阿霉素鍵合藥質(zhì)量的50-200 %。
全文摘要
本發(fā)明提供高分子鍵合阿霉素藥、其納米膠囊及制備方法。該鍵合藥由聚乙二醇-聚乳酸的嵌段共聚物和阿霉素鍵合而成。首先在聚乙二醇、溶劑和催化劑的存在下，進(jìn)行脂肪族環(huán)酯的開環(huán)聚合得到聚乙二醇-聚乳酸嵌段共聚物，再將其端羥基轉(zhuǎn)化為端羧基，然后在縮合劑的存在下，與阿霉素進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，得到高分子阿霉素鍵合藥。該鍵合藥具有兩親性，因而能夠在水溶液中自組裝制成核-殼結(jié)構(gòu)的納米膠囊。阿霉素被包裹在膠囊的內(nèi)部，起到隔離和保護(hù)的作用，克服了現(xiàn)有阿霉素制劑體內(nèi)循環(huán)時(shí)間短、用藥量大、過敏反應(yīng)嚴(yán)重等缺點(diǎn)。而且納米粒子可望在血液循環(huán)中通過所謂的“增強(qiáng)的滲透和滯留效應(yīng)”在腫瘤部位聚集，提高阿霉素對腫瘤部位的靶向作用。
文檔編號(hào)A61P35/00GK101234204SQ20081005040
公開日2008年8月6日 申請日期2008年2月28日 優(yōu)先權(quán)日2008年2月28日
發(fā)明者呂常海, 景遐斌, 時(shí) 柳, 胡秀麗, 鄭勇輝, 陳學(xué)思, 黃宇彬 申請人:中國科學(xué)院長春應(yīng)用化學(xué)研究所