專利名稱：：21(s)阿加曲班定向合成和晶體結(jié)構(gòu)及一水合物的制備的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，特別是涉及一種21(S)阿加曲班定向合成和晶體結(jié)構(gòu)及一水合物的制備。阿加曲班作為一種凝血酶抑制劑已于1978年由日本Misubishi化學(xué)公司的S.Okamoto等首次進(jìn)行了報(bào)導(dǎo)[US4101653]。1992年日本批準(zhǔn)該藥作為非腸道使用的凝血酶抑制劑[Hijikata-Okunomiya,A.,etal.,Thromb.Hemostasis,1992,18,135]。阿加曲班一(2R,4R)-l-[(2S)-5-[(aminoiminomethyl)amino]-l-oxo-2-[[(1,2,3，4-tetrahydro-3-methyl-8-quinolinyl)sulfonyl]amino]pentyl]-4-methyl-2-piperidinecarboxylicacid-其化學(xué)成分是21(R)和21(S)阿加曲班的混合物，通常兩者的比例為6465:3635[US6440417，Cossy.J.,etal,Bioorganic&MedicineChemistryLetters,11(2001),1989-1992，JournalofPharmaceuticalSciences,Vol.82,No,6,672(1993)]。阿加曲班是L-精氨酸的衍生物，其只與凝血酶活性位點(diǎn)相互作用，是凝血酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。該藥能夠直接滅活凝血酶(因子IIa)的活性；對(duì)凝血酶的產(chǎn)生沒有直接作用，其作用不依賴于體內(nèi)的抗凝血酶；其不僅可以滅活血液中游離狀態(tài)的凝血酶，而且還能夠滅活與纖維蛋白血栓結(jié)合了的凝血酶；阻斷凝血瀑布的正反饋；極低濃度時(shí)即可抑制由凝血酶誘導(dǎo)的血小板凝聚反應(yīng)，間接抑制凝血酶的產(chǎn)生。另外，阿加曲班的分子量小，其能夠進(jìn)入到血栓內(nèi)部，因此可以直接滅活巳經(jīng)與纖維蛋白血栓結(jié)合的凝血酶，并對(duì)那
背景技術(shù)：
(IDX=CH3，Y=H，21(S)阿加曲班(WDX=H，Y=CH3，21(R)阿加曲班些陳舊的血栓仍能發(fā)揮抗血栓作用。此外，阿加曲班還能夠大大降低血漿中TAT(凝血酶一抗凝血酶復(fù)合物)的水平，有效改善患者的高凝狀態(tài)，因此在慢性血栓栓塞性疾病中具有非常好的臨床效果。阿加曲班在世界各國(guó)治療血栓等疾病的廣泛應(yīng)用引起了醫(yī)學(xué)工作者對(duì)阿加曲班兩個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體21(S)阿加曲班一(2R,4R)-l-[(2S)-5-[(aminoiminomethyl)amino]-l-oxo-2-[[[(3S)-1,2,3,4陽(yáng)tetrahydro-3-methyl-8-quinolinyl]sulfonyl]amino]pentyl]-4-methyl-2-piperidinecarboxylicacid和21(R)阿加曲班一(2R,4R)-l-[(2S)-5-[(aminoiminomethyl)amino]-l-oxo-2-[[[(3R)-l^'S/Metrahydro-S-methyl-S-quinolinyUsulfonyUaminoJpeiitylM-methyU-piperidinecarboxylicacid的高度關(guān)注，主要涉及21(S)和21(R)阿加曲班的分離或立體選擇性合成及二者生物活性的差異。近年來，世界各國(guó)衛(wèi)生組織對(duì)藥物成分的要求和規(guī)定越來越嚴(yán)格，除了規(guī)定各種雜質(zhì)的總含量和單一雜質(zhì)的最高含量之外，對(duì)藥物成分中允許的異構(gòu)體或光學(xué)異構(gòu)體逐一進(jìn)行分離鑒定，并嚴(yán)格控制其含量。消旋體藥物是光學(xué)異構(gòu)體的混合物，從降低治療用量和減少對(duì)人體不良反應(yīng)的角度，高活性單一成分光學(xué)活體作為藥物代替消旋體是一個(gè)發(fā)展趨勢(shì)。2006年中國(guó)煒杰科技有限公司宋洪海等報(bào)導(dǎo)了21(S)和21(R)阿加曲班的注射液對(duì)正常犬凝血指標(biāo)的影響實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明單一成分的21(S)阿加曲班對(duì)延長(zhǎng)正常犬全血凝固時(shí)間(CT)作用顯著，其作用效果是21(R)阿加曲班的兩倍；21(S)阿加曲班對(duì)延長(zhǎng)正常犬復(fù)鈣時(shí)間(RT)作用顯著，其作用效果是21(R)阿加曲班的三倍；21(S)阿加曲班對(duì)延長(zhǎng)正常犬凝血酶原時(shí)間(PT)作用顯著，其作用效果是21(R)阿加曲班的兩倍；21(S)阿加曲班對(duì)延長(zhǎng)正常犬白陶土部分凝血活酶時(shí)間(APTT)作用顯著，其作用效果是21(R)阿加曲班的兩倍。21(S)阿加曲班對(duì)延長(zhǎng)正常犬凝血酶時(shí)間(TT)作用顯著，其作用效果比21(R)阿加曲班略強(qiáng)；21(S)阿加曲班對(duì)正常犬血小板粘附率和血小板聚集率有降低作用。顯然21(S)作為凝血酶抑制劑將大大優(yōu)于阿加曲班和21(R)阿加曲班[CN101032485A]。阿加曲班兩個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體21(S)和21(R)的分離工作吸引了眾多研究者。由于二者物化性質(zhì)極為相似，因此分離難度很大。1993年Rawson,ThomasE.;VanGorp,KimmieA.;Yang,Janet等首次用高壓液相色譜法和柱層析法分離而獲得了單一的21(S)禾口21(R)阿力口曲班[JournalofPharmaceuticalSciencesvol,82,No.6，672];ThibaudeauKaren等報(bào)導(dǎo)了ProteinA層析分離法[US6440417]。但由于上述這些方法的分離量小、效率低，因此沒有工業(yè)化實(shí)用價(jià)值。2006年中國(guó)天津煒杰科技有限公司宋洪海等報(bào)導(dǎo)了采用重結(jié)晶法分離21(S)和21(R)阿加曲班的方法[CN1951936A]，從而使批量生產(chǎn)21(S)阿加曲班成為可能，但該法收率低、操作繁雜、成本較高，并且產(chǎn)生大量含有少量21(S)的21(R)阿加曲班副產(chǎn)物，從工業(yè)化生產(chǎn)角度考慮，仍不是一種理想的方法。但到目前為止尚未發(fā)現(xiàn)21(S)阿加曲班定向合成及一水合物制備的報(bào)導(dǎo)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種操作過程相對(duì)簡(jiǎn)單、成本低且收率高的21(S)阿加曲班定向合成方法和一水合物的制備及有關(guān)晶體結(jié)構(gòu)研究。本發(fā)明提供的21(S)阿加曲班一水合物具有下述式I所示的化學(xué)結(jié)構(gòu)式一一(2R，4R)-1-[N2-[(3S)-1,2,3,4-四氫-3-甲基-8-喹啉磺?；鵠丄-精氨酰基]-4-甲基-2-哌啶甲酸一水合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>(I)本發(fā)明提供的上述21(S)阿加曲班的定向合成方法包括按順序進(jìn)行的下列步驟(見圖1):1)以(2R，4R)-1-^(3-硝基丄-精氨酰基]-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯鹽酸鹽作為原料，將其溶于二氯甲烷中，用三乙胺作為縛酸劑，滴加(3S)-1，2，3，4-四氫-3-甲基-8-喹啉磺酰氯，反應(yīng)制得(211,410-1-^(}-硝基^2-[(38)-1,2,3,4-四氫-3-甲基-8-喹啉磺?；鵠丄-精氨酰基]-4-甲基-2-哌啶甲酸酯VI;2)將中間體VI在堿性溶液中水解酸化得中間體vn:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>3)將中間體Vn在醇中鈀碳催化氫化脫硝基保護(hù)，得單一非對(duì)映異構(gòu)體無水21(s)阿加曲班vra:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>'N、4)將上述無水21(S)阿加曲班VIII與蒸餾水混合，在8010(TC的溫度下加熱0.51.0小時(shí)，至固體全部溶解，之后冷卻降溫后再低溫放置數(shù)小時(shí)，直至析出晶體，最后過濾、水洗、真空干燥而得到下述式I所示的21(S)阿加曲班一水合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>CI)。所述的步驟3)中氫化壓力為1.0100kg/cm2，反應(yīng)溫度為25100°C，醇為甲醇或乙醇中的任一種。所述的步驟4)中無水21(S)阿加曲班與蒸餾水的重量比為1:30150，真空干燥溫度為4060°C。所述的步驟4)中冷卻降溫時(shí)的速度為80100°C—50°C24小時(shí)；50°C—0°C24小時(shí)；低溫放置溫度為0°C，放置時(shí)間為510小時(shí)。所述的21(S)阿加曲班一水合物的水含量為3.33.8%。將所述的無水21(S)阿加曲班VIII用蒸餾水重結(jié)晶得晶型I。將所述的無水21(s)阿加曲班viii用甲醇一水重結(jié)晶得晶型n。本發(fā)明提供的21(S)阿加曲班的定向合成方法是將(2R，4R)-1-[1^-硝基丄-精氨?；鵠-4-曱基-2-哌啶甲酸乙酯鹽酸鹽與(3S)-1，2，3，4-四氫-3-甲基-8-喹啉磺酰氯縮合得(2R,4R)-1-^(}-硝基-^-[(3S)-1,2,3,4-四氫-3-甲基-8-喹啉磺?；鵠七-精氨酰基]-4-甲基-2-哌啶甲酸酯，然后經(jīng)堿性水解及催化氫化脫硝基得單一非對(duì)映異構(gòu)體21(S)阿加曲班，將21(S)阿加曲班溶于熱水，控制冷卻速度，制得21(S)阿加曲班一水合物。動(dòng)物試驗(yàn)證明，21(S)阿加曲班一水合物的抗凝血作用為21(R)阿加曲班一水合物的23倍。將21(S)阿加曲班用蒸餾水重結(jié)晶而得到晶型I，經(jīng)單晶和多晶粉末X衍射法，確認(rèn)絕對(duì)構(gòu)型為21(S)，晶體結(jié)構(gòu)為正交晶系，19號(hào)空間群。將21(S)阿加曲班用甲醇一水重結(jié)晶而得到晶型II。圖1為21(S)阿加曲班一水合物合成路線圖。圖2為本發(fā)明提供的21(S)阿加曲班晶型I單晶X—衍射空間結(jié)構(gòu)圖。圖3為本發(fā)明提供的21(S)阿加曲班晶型I單晶X—衍射晶胞圖。圖4為本發(fā)明提供的21(S)阿加曲班晶型I多晶粉末X—衍射圖。圖5為本發(fā)明提供的21(S)阿加曲班晶型II多晶粉末X—衍射圖。圖6為本發(fā)明提供的21(S)阿加曲班一水合物差熱分析圖。具體實(shí)施方式實(shí)施例1:1)在500ml四口反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入200ml氯仿和25g(0.061mole)(2R，4R)-1-[NG-硝基-L-精氨?；鵠-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯鹽酸鹽，冷卻至5'C，然后加入18.5g(0.18mole)三乙胺，并滴加14,7g(0.061mole)(3S)-l,2，3,4-四氫-3-甲基-8-喹啉磺酰氯，室溫下攪拌3小時(shí)，TLC跟蹤反應(yīng)，至(2R，4R)-1-[^-硝基丄-精氨?；鵠-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯鹽酸鹽消失，反應(yīng)結(jié)束，用50ml水洗兩次，無水硫酸鎂干燥，蒸除溶劑，柱層析分離，得黃色固體狀(2R,4R)-l-[NG-硝基-N2-[(3S)-1，2，3,4-四氫-3-甲基-8-喹啉磺?；鵠丄-精氨?；鵠—4-甲基-2-哌啶甲酸酯VI32.5g，收率為92.1%;2)在500ml四口反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入100ml乙醇和30g(0.052mole)中間體VI，攪拌下加入100ml1NNaOH，室溫下攪拌24小時(shí)，TLC跟蹤反應(yīng)，至中間體VI消失，反應(yīng)結(jié)束，用1NNaOH調(diào)pH"11，用100ml乙酸乙酯和100ml氯仿洗滌，水相用1N鹽酸酸化，析出固體，過濾。20ml水洗，干燥，得白色固體狀中間體VII27g，收率為94.7%;3)在100ml高壓蓋中加入lg中間體VII，0.02g三苯基磷，0.2g5%pd/c，13ml無水乙醇和4ml冰乙酸，控制高壓釜外溫65.70'C。通入氫氣，保持壓力10atm，反應(yīng)24小時(shí)，停止反應(yīng)，過濾除去鈀碳。脫溶，用20ml二氯甲垸溶解，飽和碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH"7，分出水層，再用10ml飽和氯化鈉洗漆，靜置，分出有機(jī)層，無水硫酸鎂干燥，過濾，脫除二氯甲垸，得白色固體狀無水21(S)阿加曲班VI0.75g，收率為82%;4)將上述lg無水21(S)阿加曲班Vffi加入到100ml蒸餾水中，攪拌，在0.51.0小時(shí)的時(shí)間內(nèi)升溫至IO(TC,此時(shí)固體全部溶解，然后冷卻降溫，冷卻速度為約2小時(shí)內(nèi)降至5(TC，再2小時(shí)降至0'C。在0"C下放置10小時(shí)，直至析出結(jié)晶，然后過濾，水洗，并在4050'C的溫度下真空干燥，得21(S)阿加曲班一水合物0.73g，mp:227-229°C，含水量為3.8%(卡爾費(fèi)休法)。差熱分析表明，82"C時(shí)21(S)阿加曲班一水合物失結(jié)晶水，10(TC時(shí)21(S)阿加曲班一水合物的結(jié)晶水揮發(fā)(見圖6)。實(shí)施例2:將lg21(S)阿加曲班加入到150ml蒸餾水中，攪拌，在0.51.0小時(shí)的時(shí)間內(nèi)升溫至95。C，此時(shí)固體全部溶解，然后冷卻降溫，冷卻速度為2小時(shí)內(nèi)先勻速降至8(TC，然后1小時(shí)內(nèi)降至50°C，再2小時(shí)內(nèi)降至0'C。在O'C下放置8小時(shí)，直至析出結(jié)晶，然后過濾，水洗，并在506(TC的溫度下真空千燥，得21(S)阿加曲班一水合物O.65g，含水量為3.4%(卡爾費(fèi)休法)。實(shí)施例3:將lg無水21(S)阿加曲班VI用蒸鎦水重結(jié)晶得晶型I，經(jīng)單晶和多晶粉末X衍射，確認(rèn)其絕對(duì)構(gòu)型21位為S體(見圖2)，晶型I為正交晶系，P2(1)2(1)2(1)空間群(19號(hào)空間群)。晶胞參數(shù)a=9.372A，b=15.503A，c=21,735A,a=P=Y=90°C(見圖3)。晶型I多晶粉末X衍射數(shù)據(jù)與單晶X衍射模擬數(shù)據(jù)相吻合(見圖4，表l)。表121(S)阿加曲班晶型I單晶X-衍射模擬數(shù)據(jù)與多晶粉末X-衍射數(shù)據(jù)對(duì)照<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>實(shí)施例4:將lg無水21(S)阿加曲班WI溶于95%甲醇一水溶液中，冷卻，放置，直至析出晶體，然后過濾，水洗，并在60-7(TC下進(jìn)行干燥，得0.7g白色固體，晶型為晶型II，其多晶粉末X衍射圖見圖5，衍射數(shù)據(jù)見表2。表221(S)阿加曲班晶型II多晶粉末X—衍射數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>實(shí)施例5:21(S)和21(R)阿加曲班對(duì)正常犬凝血作用實(shí)驗(yàn)試驗(yàn)材料1、供試品實(shí)施例12中制備出的21(S)阿加曲班一水合物；21(R)阿加曲班一水合物；無色澄明液體，規(guī)格20ml:10mg，貯存遮光、室溫密閉保存。2、試劑0.9%氯化鈉注射液，規(guī)格500ml，批號(hào)D510150401，由濟(jì)南三九益民制藥有限公司生產(chǎn)；枸櫞酸鈉，分析純，規(guī)格500g，批號(hào)20021105，由山東博山化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，使用時(shí)用生理鹽水配成3.2%的溶液；凝血酶原時(shí)間、凝血酶時(shí)間、活化部分凝血活酶時(shí)間試劑盒均由上海太陽(yáng)生物技術(shù)有限公司提供；ADP:由北京東方普利生科貿(mào)有限公司提供。3、動(dòng)物普通家犬(Ca"^/aw^"n^"朋e),18條，雌雄各半，10-15kg，由市場(chǎng)購(gòu)入。4、主要儀器設(shè)備HEMAVET-950型全自動(dòng)血球計(jì)數(shù)儀，由DrewScientific公司生產(chǎn)；C2000型血凝儀，由北京東方普利生科貿(mào)有限公司生產(chǎn)；LBY-NJ2型血小板聚集儀，由北京東方普利生科貿(mào)有限公司生產(chǎn)；血小板粘附儀，由北京東方普利生科貿(mào)有限公司生產(chǎn)；試驗(yàn)方法1、動(dòng)物分組取健康普通家犬(C""^/aOT///fl^"m7e)18只，隨機(jī)分為三組，分別為正常對(duì)照組、阿加曲班注射液S體、R體三個(gè)試驗(yàn)組，每組6只動(dòng)物。2、給藥劑量選擇及依據(jù)供試品臨床用法通常對(duì)成人在開始的2日內(nèi)1日6支(阿加曲班60mg)以適當(dāng)量的輸液稀釋，經(jīng)24小時(shí)持續(xù)靜脈滴注。其后的5日中1日2支(阿加曲班20mg)，以適當(dāng)量的輸液稀釋，每日早晚各1次，每次1支(阿加曲班10mg)，1次3小時(shí)靜脈滴注。參考阿加曲班注射液臨床用量，以成人每天15mg計(jì)，按成人70kg和12kg犬等效劑量折算系數(shù)法可得犬用藥劑量為人用量X0.32/12，初步定為0.4mg/kg。3、動(dòng)物藥液配制0.4mg/kg劑量溶液取相應(yīng)的供試品溶液0.8ml(0.5mg/ml測(cè)試藥物)+0.9%氯化鈉注射液9.2ml;4、試驗(yàn)過程每只動(dòng)物給藥前取血測(cè)定全血凝固時(shí)間(CT)、復(fù)鈣時(shí)間(RT)、凝血酶原時(shí)間(PT)、凝血酶時(shí)間(TT)、白陶土部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、血小板粘附率、血小板聚集率等指標(biāo)作為藥前值，測(cè)定完畢，每組動(dòng)物按10ml/kg體積給予相應(yīng)的動(dòng)物藥液，每天一次，連續(xù)3天，第三天給藥后15分鐘取血測(cè)以上凝血相關(guān)指標(biāo)，測(cè)試結(jié)果見表39。其中，全血凝固時(shí)間的測(cè)定方法取試管3個(gè)，標(biāo)號(hào)為1、2、3號(hào)。用一次性無菌注射器順利地抽取犬靜脈血3ml，自血流入針頭開始計(jì)時(shí)，去針頭后沿管壁每管緩慢注入血液lml，置37"水浴中。每隔一定時(shí)間將第一管傾斜1次，直至將試管倒置血液不流動(dòng)為止；再依次觀察第二管，第二管凝固后，再觀察第三管。以第三管凝固時(shí)間為凝血時(shí)間。復(fù)鈣時(shí)間測(cè)定方法取枸櫞酸鈉抗凝血lml，離心取血漿0.2ml，加0.025mol/L的氯化鈣溶液0.2ml，混勻后置于37。C水浴，從加鈣起計(jì)時(shí)，直至凝固的時(shí)間為復(fù)鈣時(shí)間。其它測(cè)試采用儀器測(cè)定。5、數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及結(jié)果判定每組動(dòng)物藥前和藥后各個(gè)指標(biāo)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(^±5)表示。將各藥物組藥后變化值與空白對(duì)照組藥后變化值進(jìn)行t檢驗(yàn)，以判斷藥物的效果。表3:阿加曲班注射液S體、R體及正常對(duì)照組藥液對(duì)正常犬全血凝固時(shí)間(CT)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>*P<0.05**P〈0.01與正常對(duì)照組比較。結(jié)果表明，與正常對(duì)照組相比，阿加曲班注射液S體和R體均能明顯延長(zhǎng)全血凝固時(shí)間(CT)，其中S體的作用效果約為R體的兩倍。表4:阿加曲班注射液S體、R體及正常對(duì)照組藥液對(duì)正常犬復(fù)鈣時(shí)間(RT)的影響(x士SD，n=6)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>結(jié)果表明，與正常對(duì)照組相比，阿加曲班注射液S體和R體均能明顯延長(zhǎng)復(fù)鈣時(shí)間(RT)，其中S體的作用效果約為R體的三倍。表5:阿加曲班注射液S體、R體及正常對(duì)照組藥液對(duì)正常犬凝血酶原時(shí)間(PT)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>*P〈0.05**P<0.01與正常對(duì)照組比較。結(jié)果表明，阿加曲班注射液S體能明顯延長(zhǎng)犬凝血酶原時(shí)間(PT)，與正常對(duì)照組比較，有顯著性差異(P〈0.05或P〈0.01);R體亦有一定的作用，但與正常對(duì)照組比較無顯著性差異(P〉0.05)。S體的作用效果約為R體的兩倍。表6:阿加曲班注射液S體、R體及正常對(duì)照組藥液對(duì)正常犬凝血酶時(shí)間(TT)的影響(x土SD，n=6)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>*P<0.05**P〈0.01與正常對(duì)照組比較。結(jié)果表明，阿加曲班注射液R體和S體均都能明顯延長(zhǎng)犬凝血酶時(shí)間(TT)，與正常對(duì)照組相比，有顯著性差異(P〈0.01)，其中S體的作用效果略強(qiáng)于R體。表7:阿加曲班注射液S體、R體及正常對(duì)照組藥液對(duì)正常犬白陶土部分凝血活酶時(shí)間(APTT)的影響(^c土SD，n==6)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>*P〈0.05**P<0.01與正常對(duì)照組比較。結(jié)果表明，阿加曲班注射液S體能明顯延長(zhǎng)犬白陶土部分凝血活酶時(shí)間(APTT)，與正常對(duì)照組相比，有顯著性差異(P〈0.Q5);R體亦有-一定的作用，但與正常對(duì)照組比較無顯著性差異(P〉0.05)。S體的作用效果約為R體的兩倍。表8:阿加曲班注射液S體、R體及正常對(duì)照組藥液對(duì)正常犬血小板粘附率的影響(x士SD，n=6)組別劑量藥前粘附率藥后粘附率粘附率變化值(mg/kg)(%)(%)(%)正常對(duì)照組—30.1±5.329.5±5.1-O.6±3.4s體0.429.6±4.124.2±3.8_5.4±4.4R體0.429.0±4.924.7±4.6—4.3±6.6P〉0.05與正常對(duì)照組比較。結(jié)果表明，阿加曲班注射液R體和S體對(duì)血小板粘附率都有一定的降低作用，但與正常對(duì)照組相比，無顯著性差異(P〉0.05)。表9:阿加曲班注射液S體、R體及正常對(duì)照組藥液對(duì)正常犬血小板聚集率的影響(S土SD，n=6)組別劑量藥前聚集率藥后聚集率聚集率變化值(mg/kg)(%)(%)(%)正常對(duì)照組一51.2±8.845.2±6.2-6.0±9.0s體0.447.1±4.442.2±8.6-4.9±9.9R體0.451.5±9.943.5±9.2-8.0±13.6P>0.05與正常對(duì)照組比較。結(jié)果表明，阿加曲班注射液R體和S體對(duì)血小板聚集率都有一定的降低作用，但與正常對(duì)照組相比，無顯著性差異(P>0.05)。試驗(yàn)結(jié)果表明，21(S)阿加曲班一水合物比21(R)阿加曲班一水合物能更顯著延長(zhǎng)全血凝固時(shí)間(CT);能更顯著延長(zhǎng)復(fù)鈣時(shí)間(RT);能更明顯延長(zhǎng)犬凝血酶時(shí)間，能更明顯延長(zhǎng)犬白陶土部分凝血活酶時(shí)間(APTT)，較強(qiáng)延長(zhǎng)犬凝血酶時(shí)間(TT)，上述試驗(yàn)21(S)阿加曲班與正常對(duì)照組相比均有顯著性差異。二者對(duì)血小板粘附率和聚集率均有降低作用，但無顯著性差異。試驗(yàn)結(jié)果表明，21(S)阿加曲班一水合物與21(R)阿加曲班一水合物比較，有更顯著的抗凝血作用，單一成分21(S)阿加曲班作為抗凝血酶藥物將提高效果或降低用量。權(quán)利要求1.一種具有化學(xué)結(jié)構(gòu)式I的21(S)阿加曲班一水合物——(2R，4R)-1-[N2-[(3S)-1，2，3，4-四氫-3-甲基-8-喹啉磺?；鵠-L-精氨酰基]-4-甲基-2-哌啶甲酸一水合物，其特征在于該化合物內(nèi)含有一個(gè)結(jié)晶水。2.—種如權(quán)利要求1所述的21(S)阿加曲班一水合物的制備方法，其特征為(1)21(S)阿加曲班與水混合，在80-10(TC下加熱0.5-1.0小時(shí)，固體溶解，控制冷卻速度，析出結(jié)晶，得21(S)阿加曲班一水合物；(2)制備21(S)阿加曲班一水合物時(shí)，21(S)阿加曲班水=1:30150(w/w)(3)制備21(S)阿加曲班一水合物時(shí)，冷卻速度80100°C—40-5CTC24小時(shí)；40-50°C—0°C2小時(shí)；0'C放置510小時(shí)；(4)制備21(S)阿加曲班一水合物時(shí)，晶體干燥溫度40-50°C;(5)制得的21(S)阿加曲班一水合物，其含水量為3.3-3.8%。3.根據(jù)權(quán)利要求2，21(S)阿加曲班的定向合成方法，其特征為(1)以(2R，4R)-l-[NG-硝基-L-精氨?；鵠-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯鹽酸鹽作為原料，與(3S)-1,2，3，4-四氫-3-甲基-8-喹啉磺酰氯反應(yīng)得中間體VI——(211,411)-1-|7^-硝基-]^-[(38)-1,2,3,4-四氫-3-甲基-8-喹啉磺酰基]丄-精氨?；鵠-4-甲基-2-哌啶甲酸酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>(2)將中間體VI在氫氧化鈉水溶液中水解，酸化，得中間體VH——(2R,4R)-l-[N^硝基-N24(3S)-1,2,3,4-四氫-3-甲基-8-喹啉磺?；鵠丄-精氨?；鵠-4-甲基-2-哌啶甲酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>(3)中間體vn經(jīng)鈀碳催化氫化，得阿加曲班vm:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>4.根據(jù)權(quán)利要求3，無水21(S)阿加曲班VIL經(jīng)單晶和多晶粉末衍射確認(rèn)21位絕對(duì)構(gòu)型為S型，晶體結(jié)構(gòu)為晶型I:正交晶系，19號(hào)空間群——P2(l)2(l)2(l);無水21(S)阿加曲班用甲醇-水重結(jié)晶，晶體經(jīng)多晶粉末X衍射證明的晶型為晶型II。5.根據(jù)權(quán)利要求l，21(S)阿加曲班一水合物的抗凝血作用為21(R)阿加曲班一水合物的23倍。全文摘要一種21(S)阿加曲班定向合成和晶體結(jié)構(gòu)及一水合物的制備。定向合成方法是以(3S)-1，2，3，4-四氫-3-甲基-8-喹啉磺酰氯為原料制得單一非對(duì)映異構(gòu)體21(S)阿加曲班。通過單晶和多晶粉末X衍射法，確認(rèn)絕對(duì)構(gòu)型為21(S)及晶型I和II。21(S)阿加曲班溶于熱水，控制冷卻速度，制得21(S)阿加曲班一水合物。動(dòng)物試驗(yàn)證明21(S)阿加曲班一水合物的抗凝血作用為21(R)阿加曲班一水合物的2～3倍。文檔編號(hào)A61P7/00GK101235031SQ20081005238公開日2008年8月6日申請(qǐng)日期2008年3月7日優(yōu)先權(quán)日2008年3月7日發(fā)明者宋洪海申請(qǐng)人:天津市煒杰科技有限公司