專利名稱：：三七皂苷st-4,其藥物組合物和其制備方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及藥物化合物及藥物領(lǐng)域，具體地，涉及一種新的達(dá)瑪垸型三萜皂苷化合物三七皂苷ST-4及其制備方法，以及該化合物用于制備抗單純皰疹病毒I型(HSV-1)藥物的用途。技術(shù)背景單純皰疹病毒是DNA病毒，屬于皰疹病毒科a病毒亞科。根據(jù)抗原性的差別可分為I型和II型。單純皰疹病毒I型(HSV-1)主要引起生殖器以外的皮膚、粘膜(口腔粘膜)和器官(腦)的感染。臨床表現(xiàn)主要是粘膜或皮膚局部集聚的皰疹，偶爾也可發(fā)生嚴(yán)重的全身性疾病，累及內(nèi)臟。單純皰疹原發(fā)感染愈后病毒基因潛伏于神經(jīng)節(jié)，當(dāng)機(jī)體抵抗力低下時，病毒基因被激活并開始繁殖，病情反復(fù)發(fā)作。單純皰疹病毒為典型皰疹病毒形態(tài)，球形，有包膜，顆粒直徑120-150nm，內(nèi)有核衣殼，直徑100-110nm，包膜和核衣殼之間有無定形纖維組織皮質(zhì)層，內(nèi)有核心，核心內(nèi)有病毒DNA和蛋白質(zhì)。單純皰疹病毒在全球廣泛分布，人類是唯一的宿主。感染主要通過人群與易感者之間的密切接觸，無季節(jié)差異。機(jī)體感染病毒后可產(chǎn)生抗體，抗體不能清除病毒，但可作為了解HSV感染流行病學(xué)的指標(biāo)。單純皰疹病毒感染在人群中廣泛存在，初次原發(fā)感染絕大多數(shù)形成隱性感染，無臨床癥狀，感染后產(chǎn)生中和抗體，60%-90%的人群中抗體檢測為陽性，但不能清除病毒。少數(shù)感染者出現(xiàn)黏膜、皮膚復(fù)發(fā)性皰疹病灶，新生兒或免疫力低下者感染后可發(fā)展為皰疹性腦炎或全身性感染。唇皰疹為單純皰疹病毒1型常見的皮膚感染，局部出現(xiàn)皰疹病灶，一般自愈，可復(fù)發(fā)。也可引起皮膚皰疹、濕疹。眼角膜炎為單純皰疹病毒常見的黏膜感染，單純皰疹病毒1型感染引起角膜炎，發(fā)病率較高。原發(fā)性感染多為急性樹枝狀角膜炎，愈后經(jīng)常反復(fù)發(fā)作，病變深入角膜基層組織，發(fā)展為角膜潰瘍，影響視力，甚至導(dǎo)致失明，發(fā)作病程長達(dá)數(shù)月。新生兒或免疫力低下者感染皰疹病毒，可侵染神經(jīng)系統(tǒng)，引發(fā)腦炎，病情嚴(yán)重、未治療病人病死率高達(dá)70%，治療后也多發(fā)生后遺癥。嚴(yán)重者可引起全身性單純皰疹病毒感染，病死率極高。目前臨床治療主要采用局部皮膚護(hù)理治療，同時結(jié)合一些口服抗病毒藥物等。臨床適用的中成藥主要是利用其清熱解毒的藥效結(jié)合治療。中藥三七藥理作用廣泛，曾有報道以三七為主要原料的"云南白藥"可用于治療帶狀皰疹等疾病。但三七皂苷類單體化合物對單純皰疹病毒I型的抑制作用未見有過報道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種新的達(dá)瑪垸型三萜皂苷化合物三七皂苷ST-4(notoginsenosideST-4)及其制備方法，以及該化合物用于制備抗單純皰疹病毒I型(HSV-1)藥物的用途。為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案如結(jié)構(gòu)式(I)所示的達(dá)瑪烷型三萜皂苷三七皂苷ST-4，藥物組合物，含有三七皂苷ST-4和藥物學(xué)上可接受的載體。制備化合物三七皂苷ST-4的方法，取三七，經(jīng)粉碎成顆粒狀后，置于高溫120°C下蒸制12小時得熟三七，然后用工業(yè)乙醇對其回流提取四次，回收乙醇后濃縮得浸膏，浸膏用水溶解，經(jīng)大孔樹脂柱層析，甲醇洗脫得總皂苷，再經(jīng)200—300目硅膠柱層析，85:15:1的氯仿一甲醇一水洗脫，共得9個組分，組分7經(jīng)硅膠柱、反相柱反復(fù)層析，得到三七皂苷ST-4。更具體的方法為三七粉碎成顆粒狀后，用雙層紗布包裹，置于高溫120。C的高壓鍋，蒸制12小時后得熟三七，用工業(yè)乙醇回流提取4次，減壓回收溶劑濃縮后得浸膏，將浸膏用水溶解，用D101大孔吸附樹脂分兩次進(jìn)行柱層析，先用水洗脫至流出液Molish反應(yīng)呈陰性，再用工業(yè)甲醇洗脫即得粗皂苷；將粗皂苷用硅膠200--300目拌樣，經(jīng)硅膠柱層析，用85:15:1氯仿-甲醇-水洗脫，共得9個組分，組分7經(jīng)硅膠柱層析，從梯度80:20:2氯仿-甲醇-水逐步增加極性，得到組分7，經(jīng)硅膠柱層析，再從80:20:2氯仿-甲醇-水逐步增加極性，得到組分3，經(jīng)硅膠柱層析，從80:20:2氯仿-甲醇-水逐步增加極性洗脫，得到組分1，組分1用反相RP-18分離，流動相為70:30甲醇-水，逐步增加甲醇濃度，得第10號流分，將此流分再行反相RP-18柱層析，流動相為75:25甲醇-水，逐步增加甲醇濃度，得到的1號流分，最后經(jīng)MCICHP20P反相柱純化，流動相為80:20甲醇-水，逐步增加甲醇濃度，最終得到達(dá)瑪烷型四環(huán)三砲皂苷化合物三七皂苷ST-4。三七皂苷ST-4在制備抗單純皰疹病毒1型藥物中的應(yīng)用。三七皂苷ST-4在制備治療單純皰疹病毒1型相關(guān)疾病的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的新化合物三七皂苷ST-4(notoginsenosideST-4)是一種從五加科人參屬藥用植物三七的炮制品中分離提取的新的三萜皂苷類有效成分，經(jīng)試驗證明可顯著抑制單純皰疹病毒I型，具體地說是以經(jīng)炮制的三七為原料提取分離的一種新的達(dá)瑪烷型三萜皂苷。本發(fā)明首先對五加科人參屬植物三七的炮制品進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)研究，利用多種分離手段，包括大孔樹脂柱層析、硅膠柱層析、反相硅膠柱層析等，深入研究了三七炮制品的化學(xué)成分，從中分離鑒定了31個化學(xué)成分，其中1個新的達(dá)瑪垸型三萜皂苷的結(jié)構(gòu)鑒定為3-，12萬，20(5)-三羥基-達(dá)瑪-24-烯-3-^》-D-木吡喃糖基-(1—2)-萬-D-葡萄吡喃糖基-(1—2)-；-D-葡萄吡喃糖苷[3》，12^，20(5)-trihydroxyd誦ar-24-ene-3-<9~》+xylopyranosyl-(1—2)-》-D-glucopyranosy1-(1—2)-》-D-glucopyranoside]，命名為三七皂昔ST-4(notoginsenosideST-4)。本發(fā)明以單純皰疹病毒1型(HSV-1)毒株和人胚肺成纖維細(xì)胞(MRC-5)細(xì)胞為實驗對象，觀察三七皂苷ST-4的抗單純皰疹病毒1型活性。結(jié)果證明，(1)三七皂苷ST-4對HSV-1感染的細(xì)胞具有一定的預(yù)防作用；(2)三七皂苷ST-4對HSV-1感染的細(xì)胞具有治療作用；(3)三七皂苷ST-4可降低HSV-1對MRC-5細(xì)胞的感染性?；谏鲜鲅芯拷Y(jié)果，本發(fā)明證實了三七皂苷ST-4具有預(yù)防和治療單純皰疹病毒1型感染引起的疾病的用途，可用于制備抗單純皰疹病毒1型的藥物。本發(fā)明提供了用于治療單純皰疹病毒1型相關(guān)疾病的藥物組合物，包括有效治療劑量的作為活性成分的三七皂苷ST-4，以及藥物學(xué)上可接受的載體。本發(fā)明所述的治療單純皰疹病毒1型相關(guān)疾病的藥物組合物，由三七皂苷ST-4與藥學(xué)上可接受的載體制備的藥物劑型包括片劑、膠囊、口服液、針劑或粉針劑。由于新達(dá)瑪烷型三萜皂苷(三七皂苷ST-4)可從三七及相關(guān)藥材中提取分離，而片劑、膠囊、口服液、針劑或粉針劑等藥物劑型的制備也是本領(lǐng)域的常規(guī)知識，因此，由三七皂苷ST-4與相應(yīng)載體制備的各種藥物劑型也能夠由本領(lǐng)域技術(shù)人員容易實現(xiàn)。上文所述的的藥學(xué)上可接受的載體是指藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的藥物載體，例如稀釋劑、賦形劑如水等，填充劑如淀粉、蔗糖等；黏合劑如纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠和聚乙烯吡咯烷酮；濕潤劑如甘油；崩解劑如瓊脂、碳酸鈣和碳酸氫鈉；吸收促進(jìn)劑如季銨化合物；表面活性劑如十六烷醇；吸附載體如高嶺土和皂黏土；潤滑劑如滑石粉、硬脂酸鈣和鎂、以及和聚乙二醇等。另外還可以在組合物中加入其它輔劑如香味劑、甜味劑等。本發(fā)明化合物可以組合物的形式通過口服、鼻吸入、直腸或腸胃外給藥的方式施用于需要這種治療的患者。用于口服時，可將其制成常規(guī)的固體制劑如片劑、粉劑、粒劑、膠囊等，制成液體制劑如水或油懸浮劑或其他液體制劑如糖漿、酏劑等；用于腸胃外給藥時，可將其制成注射用的溶液、水或油性懸浮劑等。優(yōu)選的形式是片劑、膠囊和注射劑。本發(fā)明藥物組合物的各種劑型可以按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)生產(chǎn)方法制備。例如使活性成分與一種或多種載體混合，然后將其制成所需的劑型。本發(fā)明的藥物組合物優(yōu)選含有重量比為0.1%~99.5%的活性成分，最優(yōu)選含有重量比為0.5%~95%的活性成分。本發(fā)明化合物的施用量可根據(jù)用藥途徑、患者的年齡、體重、所治療的疾病的類型和嚴(yán)重程度等變化，其日劑量可以是0.01~10mg/kg體重，優(yōu)選0.1~5mg/kg體重?？梢砸淮位蚨啻问┯?。本發(fā)明的有益效果在于新達(dá)瑪垸型三萜皂苷(三七皂苷ST-4)對HSV-1感染的細(xì)胞具有預(yù)防和治療作用。三七皂苷ST-4可降低對MRC-5細(xì)胞的感染性。將三七皂苷ST-4用于制備治療單純皰疹病毒1型相關(guān)疾病的藥物，具有重要的開發(fā)應(yīng)用前景。圖1為正常細(xì)胞對照組的顯微鏡圖(10xl0倍)；圖2為病毒感染對照組的顯微鏡圖(10x10倍)；圖3為加藥治療組的顯微鏡圖(10xl0倍)。具體實施方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步闡述，但不對其有任何限制。實施例1.一種新的達(dá)瑪浣型三萜皂苷三七皂苷ST-4(notoginse謹(jǐn)ideST-4)的分離提取5kg三七購于云南，將其粉碎成顆粒狀后，用雙層紗布包裹，置于高壓鍋中，將溫度控制在高溫120°C，蒸制12小時后即得熟三七。用工業(yè)乙醇回流提取(5Lx4)，減壓回收溶劑濃縮后得總浸膏778g。將浸膏用水溶解，用D101大孔吸附樹脂(90x8.5cm)分兩次進(jìn)行柱層析，先用水洗脫至流出液Molish反應(yīng)呈陰性，再用工業(yè)甲醇洗脫即得粗皂苷440g。將粗皂苷用硅膠(200—300目)約500g拌樣，經(jīng)硅膠(200_300目)柱層析，用氯仿-甲醇-水(85:15:1)洗脫，共得9個組分。組分7(38g)經(jīng)硅膠柱層析，從梯度氯仿-甲醇-水(80:20:2)逐步增加極性，得到組分7(7.6g)，再經(jīng)硅膠柱層析，也是從氯仿-甲醇-水(80:20:2)逐步增加極性，得到組分3(5.2g)，再經(jīng)硅膠柱層析，從氯仿-甲醇-水(80:20:2)逐步增加極性洗脫，得到組分l(1.4g)。此組分用反相RP-18分離，流動相為甲醇-水.(70:30)，逐步增加甲醇濃度，得第10號流分。將此流分再行反相RP-18柱層析，流動相為甲醇-水(75:25)，逐步增加甲醇濃度，得到的1號流分，最后經(jīng)MCICHP20P反相柱純化，流動相為甲醇-水(80:20)，逐步增加甲醇濃度，最終得到新的達(dá)瑪垸型四環(huán)三萜皂苷化合物三七皂苷ST-4(31mg)。達(dá)瑪垸型三萜皂苷三七皂苷ST-4(notoginsenosideST-4)的結(jié)構(gòu)鑒定三七皂苷ST-4(notoginsenosideST-4)為白色無定形粉末，高分辨質(zhì)譜匿SIMS顯示邁/z915.5323[M-H]-(calcd.for915.5317,C47H79017)，由此推出其分子式為C47H8。017&負(fù)離子FAB-MS給出_784[M-132]—，622[M-132-162]—特征碎片峰，表明末端五碳糖基和六碳糖基的存在，并且五碳糖應(yīng)為末端糖基。同時，NMR譜中，觀察至IJ5H4.92(d，/二8.0Hz，H-l')，、5.51(d，/=7.5Hz，H—1，，)，5H5.39(d，/二6.5Hz，H-l，，，)三個端基質(zhì)子信號；13CNMR譜中，觀察到&104.8，&103.2，&106.5三個端基碳信號，以及^62.9，^67.5三個仲碳信號，提示該化合物中可能存在兩個葡萄糖基和一個木糖基。在HMBC譜中，觀察到、4.92(d，/二8.0Hz，H-l，)與5C88.9(C—3);5.51(d，/二7.5Hz，H—1，，)與&83.0(C—2，)以及"5.39(d，/=6.5Hz，H—1，，，)與&84.6(C-2'')的相關(guān)，由此證明了該化合物的糖基連接方式。與三七皂苷Fti的碳譜數(shù)據(jù)比較.，發(fā)現(xiàn)二者結(jié)構(gòu)相近。唯一區(qū)別是三七皂苷F仁中C-17，C-21，C-22的化學(xué)位移分別為&50.7，22.8，43.2;而該化合物中C-17，C-21，C-22的化學(xué)位移則分別為5c54.8，27.1，35.9。由此確證該化合物與三七皂苷Ft的不同在于C-20位構(gòu)象，三七皂苷F仁的20位為y構(gòu)象，而該化合物應(yīng)為S構(gòu)象。綜上所述，該化合物的結(jié)構(gòu)鑒定為3-，12^,20(5)-三羥基-達(dá)瑪-24-烯-3-^--D-木吡喃糖基-(1—2)-D-葡萄吡喃糖基-(1—2)-》-D-葡萄吡喃糖苷[3》，12》，20(5)-trihydroxydammar-24-ene-3HD-xylopyranosyl-(1—2)-/-D-glucopyranosyl-(1—2)_^-D-glucopyranoside]，命名為三七皂苷ST-4(notoginsenosideST-4)，化學(xué)結(jié)構(gòu)式如式(I)所示。式(I)三七皂苷ST-4的化學(xué)結(jié)構(gòu)式三七皂苷ST-4(notoginsenosideST-4):分子式為C47H80017，易溶于甲醇、吡啶等有機(jī)溶劑，瑢點187-191°C，旋光值[a]矽+3.5°(c0.21,Me0H)，紅外光譜數(shù)據(jù)為3422，2942,2878，1637，1452，1376，1307，1077，1043，896cm—1，F(xiàn)AB-MS(negative)邁/z916[Mr，784[M-132]—，622[M-132-162]、匿SIMS(negative)邊/z915.5323[M-H]—(calcd.for915.5317，C47H79017).力-騰(500MHz，^inppm，inC5D5N)和13C-NMR(125MHz，5inppm，inC5D5N)波譜數(shù)據(jù)見表1。表1新化合物三七皂苷ST-4的^和13C-NMR化學(xué)位移值(5inppm，/inHz,inC5D5N)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>實施例2、三七皂苷ST-4(notoginsenosideST-4)對單純皰疹病毒I型(HSV-1)感染Vero細(xì)胞的影響試驗(一)材料1、器材進(jìn)口24孔培養(yǎng)板(平底)、倒置顯微鏡、C02細(xì)胞培養(yǎng)箱、微量可調(diào)加樣器、培養(yǎng)基為MEM(含青鏈雙抗各250U/ml)，除菌過濾前用碳酸氫鈉調(diào)pH至7.0-7.2、小牛血清經(jīng)56°C30min滅活補(bǔ)體，除菌分裝；消化液為5%胰蛋白酶5ml+0.01mol/L(pH7.2)PBS93ml，除菌分裝，低溫保存。2、病毒和細(xì)胞株單純皰疹病毒1型毒株是來源于美國ATCC(VR733)，由申請人所在的實驗室保存。MRC-5細(xì)胞購自中國科學(xué)院細(xì)胞庫，由申請人所在的實驗室保存。MRC-5細(xì)胞系來自14周齡男性胎兒'的正常肺組織，是正常二倍體細(xì)胞系，是皰疹病毒敏感細(xì)胞。MRC-5細(xì)胞用含10%胎牛血清的MEM培養(yǎng)基連續(xù)傳代3次保持在對數(shù)生長期，供實驗用，維持液為含2%小牛血清的MEM培養(yǎng)基。3、藥物將10mg藥物先加入100WDMSO(二甲基亞砜)溶解后配成儲存液，-2CTC保存?zhèn)溆?。陽性對照藥無環(huán)鳥苷(ACV)為湖北科益藥業(yè)股份有限公司產(chǎn)品，臨用前用MEM維持液稀釋。(二)三七皂苷ST-4對HSV-1預(yù)防作用藥物稀釋1mg樣品溶于10WDMSO配制藥物母液，-20°C長期保存，使用時用MEM維持液稀釋，倍比稀釋為50Pg/ml，25]Lig/ml，12.5Pg/ml，6.25Pg/ml，3.125Pg/ml。陽性對照藥ACV稀釋藥物10mg樣品溶于100W去離子水配制藥物母液，4'C長期保存，使用時用MEM維持液稀釋，稀釋為50Pg/ml，25Pg/ml，12.5Pg/ml，6.25Pg/ml，3.125Pg/ml。分別以不同濃度的三七皂苷ST-4維持液和ACV維持液各100Pl/L加到單層MRC-5細(xì)胞的孔中，每個濃度設(shè)4個復(fù)孔，培養(yǎng)2小時后，接種100TCID50HSV-1病毒液100Ml/孔，置于5%C02細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)2小時，病毒完全吸附到細(xì)胞后，加入完全覆蓋液800Ml，培養(yǎng)72小時，觀察藥物處理后的細(xì)胞對HSV-l感染的影響，同時設(shè)定病毒對照組、正常細(xì)胞對照組，實驗重復(fù)3次。試驗分析方法72小時后，病毒對照組的細(xì)胞不再出現(xiàn)空斑時，棄去維持液，以10%甲醛溶液固定30分鐘，然后用5%結(jié)晶紫溶液染色后作空斑計數(shù)，計算空斑抑制率?？瞻咭种坡?％)二(病毒對照組空斑數(shù)-藥物處理組空斑數(shù))/病毒對照組空斑數(shù)XIOO%計算IC5。(半數(shù)抑制濃度)，計算方法為加權(quán)直線回歸法，從而估測三七皂苷ST-4對HSV-1的感染有無預(yù)防作用。結(jié)果顯示:三七皂苷ST-4藥物對預(yù)防HSV-1感染的半數(shù)有效劑量(IC5。)為200.02Pg/ml。(三)對HSV-1感染治療作用三七皂苷ST-4藥物和陽性對照藥物ACV的稀釋方法同上。先接種100TCID50的HSV-1于24孔板的單層MRC-5細(xì)胞上，在37'C、C02細(xì)胞培養(yǎng)箱吸附2小時，再加入相應(yīng)濃度三七皂苷ST-4稀釋液和ACV，100W/孔，每個濃度設(shè)定4個復(fù)孔，置于5%(:02細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)72小時，觀察空斑形成的情況。同時設(shè)病毒對照組、正常細(xì)胞對照組，實驗重復(fù)3次。試驗分析方法統(tǒng)計不同的藥物濃度作用下的空斑形成數(shù)目，計算IC50。結(jié)果顯示ICs。為50.12Pg/ml。(四)對HSV-1感染細(xì)胞的綜合作用藥物三七皂苷ST-4和陽性對照藥ACV稀釋方法如上。不同濃度三七皂苷ST-4維持液和病毒各100W混合后，200Pl/孔加到24孔板單層MRC-5細(xì)胞上，每個濃度設(shè)定4個復(fù)孔，置于5%(:02細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)72小時，觀察藥物對HSV-1感染細(xì)胞的綜合作用。同時設(shè)病毒對照組、正常細(xì)胞對照組，實驗重復(fù)3次。試驗分析方法統(tǒng)計各藥物濃度作用下的空斑形成數(shù)，計算IC50。結(jié)果顯示ICs。為50.34Pg/ml。結(jié)論(1)三七皂苷ST-4對HSV-1感染的細(xì)胞有一定的預(yù)防作用。(2)三七皂苷ST-4對HSV-1感染的細(xì)胞具有治療作用。(3)三七皂苷ST-4可降低HSV-1對MRC-5細(xì)胞的感染性。實施例3:片劑實施例1所得化合物三七皂苷ST-410mg，乳糖180mg，淀粉55mg，硬脂酸鎂5mg;制備方法將化合物、乳糖和淀粉混合.，用水均勻濕潤，把濕潤后的混合物過篩并干燥，再過篩，加入硬脂酸鎂，然后將混合物壓片，每片重250mg，化合物含量為10mg。安瓿劑實施例1所得化合物三七皂苷ST-42mg，氯化鈉10mg;制備方法:將化合物和氯化鈉溶解于適量的注射用水中，過濾所得溶液，在無菌條件下裝入安瓿瓶中。實施例5:膠囊劑實施例1所得化合物三七皂苷ST-410mg，乳糖187mg，硬脂酸鎂3mg;制備方法將化合物與助劑混合，過篩，均勻混合，把得到的混合物裝入硬明膠膠囊，每個膠囊重200mg，活性成分含量為10mg。權(quán)利要求1、如結(jié)構(gòu)式(I)所示的達(dá)瑪烷型三萜皂苷三七皂苷ST-4，2、藥物組合物，含有三七皂苷ST-4和藥物學(xué)上可接受的載體。3、制備權(quán)利要求1所述化合物三七皂苷ST-4的方法，取三七，經(jīng)粉碎成顆粒狀后，置于高溫120。C下蒸制12小時得熟三七，然后用工業(yè)乙醇對其回流提取四次，回收乙醇后濃縮得浸膏，浸膏用水溶解，經(jīng)大孔樹脂柱層析，甲醇洗脫得總皂苷，再經(jīng)200—300目硅膠柱層析，85:15:1的氯仿一甲醇一水洗脫，共得9個組分，組分7經(jīng)硅膠柱、反相柱反復(fù)層析，得到三七皂苷ST-4。4、如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于三七粉碎成顆粒狀后，用雙層紗布包裹，置于高溫120°C的高壓鍋，蒸制12小時后得熟三七，用工業(yè)乙醇回流提取4次，減壓回收溶劑濃縮后得浸膏，將浸膏用水溶解，用D101大孔吸附樹脂分兩次進(jìn)行柱層析，先用水洗脫至流出液Molish反應(yīng)呈陰性，再用工業(yè)甲醇洗脫即得粗皂苷；將粗皂苷用硅膠200—300目拌樣，經(jīng)硅膠柱層析，用85:15:1氯仿-甲醇-水洗脫，共得9個組分，組分7經(jīng)硅膠柱層析，從梯度80:20:2氯仿-甲醇-水逐步增加極性，得到組分7，經(jīng)硅膠柱層析，再從80:20:2氯仿-甲醇-水逐步增加極性，得到組分3，經(jīng)硅膠柱層析，從80:20:2氯仿-甲醇-水逐步增加極性洗脫，得到組分1，組分1用反相RP-18分離，流動相為70:30甲醇-水，逐步增加甲醇濃度，得第10號流分，將此流分再行反相RP-18柱層析，流動相為75:25甲醇-水，逐步增加甲醇濃度，得到的l號流分，最后經(jīng)MCICHP20P反相柱純化，流動相為80:20甲醇-水，逐步增加甲醇濃度，最終得到達(dá)瑪烷型四環(huán)三萜皂苷化合物三七皂苷ST-4。5、權(quán)利要求1所述的三七皂苷ST-4在制備抗單純皰疹病毒1型藥物中的應(yīng)用。6、權(quán)利要求1所述的三七皂苷ST-4在制備治療單純皰疹病毒1型相關(guān)疾病的藥物中的應(yīng)用。全文摘要提供結(jié)構(gòu)式(I)所示的一種新的達(dá)瑪烷型三萜皂苷化合物三七皂苷ST-4(notoginsenosideST-4)，及其制備方法，并提供其在制備抗單純皰疹病毒I型(HSV-1)藥物中的應(yīng)用。以單純皰疹病毒1型(HSV-1)毒株和人胚肺成纖維細(xì)胞(MRC-5)細(xì)胞實驗對象，進(jìn)行本發(fā)明新化合物三七皂苷ST-4的抗病毒活性實驗，結(jié)果證明三七皂苷ST-4對HSV-1感染的細(xì)胞具有治療作用；并可降低HSV-1對MRC-5細(xì)胞的感染性，可在制備抗單純皰疹病毒I型藥物中得到應(yīng)用。文檔編號A61P31/12GK101323635SQ20081005872公開日2008年12月17日申請日期2008年7月25日優(yōu)先權(quán)日2008年7月25日發(fā)明者廖彭瑩,張穎君,楊崇仁,東王,王一飛,贏裴申請人:中國科學(xué)院昆明植物研究所