專利名稱：：四氫姜黃素用于制備抗抑郁藥的用途及其固體分散體的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及四氫姜黃素用于制備抗抑郁藥的用途及一種四氫姜黃素固體分散體的制備方法。
背景技術(shù)：
：四氫姜黃素(Tetrahydrocurcumin，THC，如下圖所示)是姜黃素的主要代謝產(chǎn)物之一，水溶性，穩(wěn)定性均比姜黃素好。目前主要用于化妝品增白劑、抗衰老保健品和減肥藥中的添加劑。H(y^v、0H國外文獻(xiàn)報道，四氫姜黃素和姜黃素都具有抗氧化活性，但二者的藥理作用有所不同。Sandur等研究發(fā)現(xiàn)，四氫姜黃素對TNF誘導(dǎo)的NF-kappaB活化沒有抑制作用，抗炎作用弱于姜黃素，抑制細(xì)胞生長的作用也比姜黃素弱得多。Pari等的研究顯示，四氫姜黃素治療的糖尿病大鼠，血漿糖化蛋白的水平降低，血漿胰島素和組織中唾液酸的水平升高，而組織中己糖、己糖胺和巖藻糖維持正常。四氫姜黃素的這一作用強(qiáng)于姜黃素。Murugan等報道，口服四氫姜黃素80mg/kg15天可以顯著降低脂質(zhì)過氧化作用，增強(qiáng)細(xì)胞抗氧化保護(hù)作用，對依托紅霉素誘導(dǎo)的大鼠肝損害有保護(hù)作用。Pari等研究發(fā)現(xiàn)，四氫姜黃素還可以顯著降低血漿尿素和肌酐的水平，使肌3酐清除率恢復(fù)正常，減輕氯喹引起的大鼠實驗性腎損傷。近年來，還有些文獻(xiàn)報道姜黃素具有抗抑郁作用。徐英，庫寶善等研究發(fā)現(xiàn)5mg/kg和10mg/kg姜黃素可以逆轉(zhuǎn)利血平誘導(dǎo)的小鼠體溫下降，結(jié)果與對照組差異明顯(p<0.05,0.01);5mg/kg和10mg/kg姜黃素能顯著增加5-羥色胺酸(5-HTP)誘導(dǎo)的小鼠的甩頭次數(shù)(p<0.05,0.01);5mg/kg和10mg/kg姜黃素還可以明顯拮抗高劑量阿撲嗎啡引起的小鼠體溫下降，與對照組差異明顯(p<0.05,0.01);姜黃素在2.5，5和10mg/kg劑量可以顯著增加小鼠腦內(nèi)5-羥色胺(5-HT)的含量，在10mg/kg劑量可以顯著增加小鼠腦內(nèi)去甲腎上腺素(NE)、多巴胺(DA)的含量，與對照組差異明顯(p<0.05)。這些實驗結(jié)果表明姜黃素具有抗抑郁作用，其作用發(fā)揮可能與單胺神經(jīng)系統(tǒng)有關(guān)。(詳見《中國臨床康復(fù)》，2005,9(44):162-164)。此外，王任燁，庫寶善等報道姜黃素及原花青素在小鼠行為絕望模型中顯示出明顯的抗抑郁活性，其作用可能與中樞單胺遞質(zhì)系統(tǒng)有關(guān)。姜黃素在慢性應(yīng)激大鼠模型中亦顯示出抗抑郁活性，且其分子機(jī)制可能與增強(qiáng)AC-cAMP-CREB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的功能有關(guān)。(詳見《中國藥理通訊》，2006，23(4):51-52)。2004年庫寶善等對姜黃素的抗抑郁作用這一發(fā)明申請了專利。然而四氫姜黃素是否有抗抑郁作用國內(nèi)外尚未見文獻(xiàn)報道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的之一是提供四氫姜黃素及其固體分散體用于制備抗抑郁藥的應(yīng)用。本發(fā)明的另一個目的是提供上述四氫姜黃素固體分散體的制備方法。本發(fā)明的另一個目的是提供四氫姜黃素及其固體分散體用于制備抗抑郁的保健品、食品或食品添加劑的應(yīng)用。四氫姜黃素固體分散體是以四氫姜黃素與表面活性劑兩者按一定比例制備成固體分散體。表面活性劑選自下列之一或它們的組合泊洛沙姆188、聚乙烯吡咯烷酮、聚山梨酯20、聚山梨酯80、十二烷基硫酸鈉、十八烷基硫酸鈉、十二烷基苯磺酸鈉。表面活性劑優(yōu)選為泊洛沙姆188。四氫姜黃素固體分散體的制備方法將質(zhì)量比為1:31:30的四氫姜黃素和表面活性劑加熱至完全熔融后，置于0"C-2(TC低溫環(huán)境中冷凍,然后取出烘干，粉碎，得到四氫姜黃素固體分散體。本發(fā)明人通過多種動物實驗，包括小鼠強(qiáng)迫游泳實驗、小鼠懸尾實驗、5-羥色胺酸(5-HTP)誘導(dǎo)的小鼠甩頭實驗及測定懸尾實驗后的小鼠腦組織(NE)、多巴胺(DA)、5-羥色胺(5-HT)等神經(jīng)遞質(zhì)的含量，探討四氫姜黃素的抗抑郁作用及其機(jī)制。動物實驗結(jié)果顯示，在一定劑量范圍內(nèi)，四氫姜黃素的作用強(qiáng)度具有劑量依賴性，其中四氫姜黃素2.5mg/kg和5mg/kg單次給藥和連續(xù)給藥14天均可顯著縮短小鼠強(qiáng)迫游泳實驗和小鼠懸尾實驗的不動時間。這一結(jié)果說明，四氫姜黃素可以抵抗行為絕望動物模型小鼠的絕望行為，具有抗抑郁活性，且四氫姜黃素在5mg/kg劑量下的抗抑郁作用與陽性對照藥氟西汀80mg/kg相似。四氫姜黃素5mg/kg連續(xù)給藥14天后，能顯著增強(qiáng)5-HTP誘導(dǎo)的小鼠甩頭行為，說明四氫姜黃素具有抗抑郁活性且其作用發(fā)揮可能與增強(qiáng)5-HT能和/或NE能神經(jīng)系統(tǒng)功能有關(guān)。懸尾實驗后小鼠中樞神經(jīng)遞質(zhì)的測定結(jié)果顯示，連續(xù)給藥14天后，四氫姜黃素在產(chǎn)生抗抑郁作用的同時可提高小鼠全腦NE、DA、5-HT的含量，其中5mg/kg和10mg/kg組可以顯著增加懸尾實驗后小鼠腦組織NE的含量；5mg/kg組可以顯著增加小鼠腦組織DA的含量；5mg/kg和10mg/kg組，可以顯著增加懸尾實驗后小鼠腦組織5-HT的含量。實驗結(jié)果提示四氫姜黃素的抗抑郁作用可能是通過增加NE、DA、5-HT三種神經(jīng)遞質(zhì)在全腦神經(jīng)突觸間的含量來實現(xiàn)的。綜上，四氫姜黃素具有抗抑郁作用，其作用發(fā)揮可能與單胺神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)有關(guān)，與氟西汀比較，四氫姜黃素具有毒性低、療效好的優(yōu)點(diǎn)。具體實施例方式例1小鼠強(qiáng)迫游泳實驗選體重1822g的雄性昆明鼠，在給藥后lh放入水深10cm的水缸(25cm高，18cm直徑)，水溫25'C。觀察6min，比較對照組和給藥組在后4min內(nèi)不動時間的差異。在實驗前23天，小鼠給予雙蒸水并以前述同樣的條件先進(jìn)行初篩，選取后4min內(nèi)不動時間在70160S的小鼠進(jìn)行正式實驗。將篩選出的60只合格小鼠隨機(jī)分成6組，每組10只。實驗前l(fā)h，對照組給予等體積同濃度的賦型劑對照，氟西汀陽性對照組給予氟西汀80.00mg/kg，四氫姜黃素不同劑量組分別給予0.5mg/kg、lmg/kg、2.5mg/kg、5mg/kg的四氫姜黃素灌胃。另將篩選出的60只合格小鼠隨機(jī)分成6組，每組10只，觀察連續(xù)給藥的抗抑郁作用。實驗前13天每天8:309:OO給藥。對照組和氟西汀陽性對照組每天灌胃給予等體積同濃度的賦型劑對照，四氫姜黃素不同劑量組分別給予0.5mg/kg、lmg/kg、2.5mg/kg、5mg/kg的四氫姜黃素灌胃。第14天，實驗前l(fā)h，除氟西汀陽性對照組灌胃給予鹽酸氟西汀80mg/kg外，其余各組仍按上述方法給藥。上述各組給藥體積均為0.2ml/10g。實驗結(jié)果見表l、表2。表1四氫姜黃素單次給藥對小鼠強(qiáng)迫游泳實驗不動時間的影響組別齊懂(mg/kg)動物(只)4min不動時間(s)對照組10130.60±28.90氟西汀組80.001089.50±39.60*四氫姜黃素組0.5010119.30±32.201.0010107.50±34.602.501092.90±44.70*5.0010卯.20士25.40**與對照組比較，*:P<0.05，**:P<0.01，下同。四氫姜黃素連續(xù)給藥14天對小鼠強(qiáng)迫游泳實驗不動時間的影響組別劑量(mg/kg)動物數(shù)4min不動時間(s)對照組10143.60±38.87氟西汀組80.001082.50±32.87**四氫姜黃素組0.5010128.20±36.081.0010123.00士40.562.5010107.70±31.88*5.001098.80±26.59**表1、表2顯示，在一定劑量范圍內(nèi)，四氫姜黃素作用強(qiáng)度具有劑量依賴性，其中四氫姜黃素2.5mg/kg和5mg/kg單次給藥和連續(xù)給藥14天均可顯著縮短小鼠強(qiáng)迫游泳實驗的不動時間，提示四氫姜黃素具有抗抑郁活性。例2小鼠懸尾實驗選體重1822g的雄性昆明鼠，在給藥后lh，將其尾端2cm的部位貼在一水平玻璃棒上，使小鼠成倒掛狀態(tài)，其頭部離臺面約5cm，懸掛兩側(cè)用板隔開小鼠視7線。觀察6min，比較給藥組和對照組在后5min內(nèi)的不動時間。在實驗前23天，小鼠給予雙蒸水并以前述同樣的條件先進(jìn)行初篩，選取后5min內(nèi)不動時間在70160S的小鼠進(jìn)行正式實驗。本實驗分組和給藥同小鼠強(qiáng)迫游泳實驗。實驗結(jié)果見表3、表4。表3四氫姜黃素單次給藥對小鼠懸尾實驗不動時間的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>四氫姜黃素連續(xù)給藥14天對小鼠懸尾實驗不動時間的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>表3、表4顯示，在一定劑量范圍內(nèi)，四氫姜黃素作用強(qiáng)度具有劑量依賴性,其中四氫姜黃素2.5mg/kg和5mg/kg單次給藥和連續(xù)給藥14天均可顯著縮短小鼠懸尾實驗的不動時間，提示四氫姜黃素具有抗抑郁活性。例35-HTP誘導(dǎo)的小鼠甩頭實驗體重1822g的雄性昆明鼠60只，隨機(jī)分成6組，每組10只。實驗給藥同連續(xù)給藥14天的小鼠強(qiáng)迫游泳實驗。小鼠末次灌胃給藥lh后，腹腔注射5-HTP70mg/kg，10min后開始觀察，記錄6min內(nèi)小鼠甩頭次數(shù)，比較給藥組和對照組小鼠甩頭次數(shù)的差異。實驗結(jié)果見表5。表5四氫姜黃素對5-HTP誘導(dǎo)的小鼠甩頭實驗的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表5顯示，在一定劑量范圍內(nèi)，四氫姜黃素作用強(qiáng)度具有劑量依賴性，四氫姜黃素5mg/kg連續(xù)給藥14天后，能顯著增強(qiáng)5-HTP誘導(dǎo)的小鼠甩頭行為，提示四氫姜黃素具有抗抑郁活性且其作用發(fā)揮可能與增強(qiáng)5-HT能和/或NE能神經(jīng)系統(tǒng)功能有關(guān)。例4懸尾實驗后小鼠中樞神經(jīng)遞質(zhì)的測定4.l小鼠懸尾實驗用與前述相同的初篩方法篩選出適合做小鼠懸尾實驗的小鼠66只并將其隨機(jī)分成6組，每組11只。實驗前13天每天8:309力0給藥，對照組每天灌胃給予等體積同濃度的賦型劑對照，氟西汀陽性對照組每天灌胃給予氟西汀4.5mg/kg，四氫姜黃素不同劑量組分別給予lmg/kg、2.5mg/kg、5mg/kg、10mg/kg的四氫姜黃素灌胃。第14天給藥后lh，按前述小鼠懸尾實驗方法進(jìn)行實驗。上述各組給藥體積均為0.2ml/10g小鼠體重。實驗結(jié)果見表6。表6四氫姜黃素連續(xù)給藥14天對小鼠懸尾實驗不動時間的影響組別劑量(mg/kg)動物數(shù)5min不動時間(s)對照組140.27±38.22氟西汀組4.501176.09±33.43**四氫姜黃素組1.0011130.73±31.852.5011117.73±43.685.001198.64±43.16*10.001193.55±35.13**表6顯示，在一定劑量范圍內(nèi)，四氫姜黃素作用強(qiáng)度具有劑量依賴性，與對照組比較，四氫姜黃素5mg/kg和10mg/kg連續(xù)給藥14天均能顯著縮短小鼠懸尾實驗的不動時間(P<0.05，P<0.01)。4.2懸尾實驗后小鼠腦組織NE、DA、5-HT等神經(jīng)遞質(zhì)含量的測定4.2.1樣品處理方法小鼠懸尾試驗后24h，將小鼠斷頭，迅速取出全腦組織，在冰生理鹽水中洗去血跡，用濾紙拭干，稱重，一7(TC冰箱保存待測。測定前將其從冰箱取出，在室溫中解凍，倒入玻璃勻漿器中，加入少量冰冷的0.4mol/lHCL04溶液，在冰浴中上下轉(zhuǎn)動數(shù)10次，充分研磨使組織勻漿化(每個腦組織約需68min)，將勻漿液轉(zhuǎn)入Ependet管中，加冰冷的0.4mol/lHCL04溶液適量，渦流2min，置高速冷凍離心機(jī)(4°C)內(nèi)以12000r/min，離心20min，將離心后的上清液轉(zhuǎn)入Ependet管中，再以12000r/min，二次離心15min，取上清液用0.4mol/lHCL04溶液定容至lml，渦流混勻，得樣品溶液。4.2.2色譜條件色譜柱<:18色譜柱(ZorbaxeclipseXDBC18，5um，150mmX4.6■i.d)，流動相為0.1mo1/1NaAc(內(nèi)含0.01mmol/lEDTA-2Na)，用HAc調(diào)pH值至5.1,取此緩沖液與甲醇按93:7混合，用0.45um的微孔濾膜過濾，超聲脫氣，流速為lml/min，進(jìn)樣量10ul/次，發(fā)射波長330nm，激發(fā)波長290nm。柱溫30°C。測定結(jié)果見表7、表8、表9。表7四氫姜黃素對懸尾實驗后小鼠腦組織NE的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>表7顯示與對照組比較，四氫姜黃素5mg/kg和10mg/kg連續(xù)給藥14天可以顯著增加懸尾實驗后小鼠腦組織NE的含量。表8四氫姜黃素對懸尾實驗后小鼠腦組織DA的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>表8顯示與對照組比較，四氫姜黃素5mg/kg連續(xù)給藥14天可以顯著增加懸尾實驗后小鼠腦組織DA的含量。表9四氫姜黃素對懸尾實驗后小鼠腦組織5-HT的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>表9顯示與對照組比較，四氫姜黃素5mg/kg和10mg/kg連續(xù)給藥14天可以顯著增加懸尾實驗后小鼠腦組織5-HT的含量。例5四氫姜黃素用于制備抗抑郁藥的不同可用劑型的制備5.1片劑四氫姜黃素加適量淀粉，壓成片劑，基片重0.5g。5.2膠囊四氫姜黃素與輔料混合后直接填充入膠囊，每粒膠囊相當(dāng)于0.5g四氫姜黃素。5.3含片四氫姜黃素加入適量山梨醇和水溶性淀粉，壓制成舌下含片。5.4固體分散體四氫姜黃素作為原料藥，表面活性劑為藥物載體，兩者按一定比例制備成固體分散體。例6四氫姜黃素用于抗抑郁的保健品、食品或食品添加劑的制備6.1抗抑郁功能的果汁飲料在10公斤純凈水中加入lg的四氫姜黃素及適量芒果、菠蘿或橙汁、西番蓮和添加劑，做成抗抑郁功能的果汁飲料。6.2抗抑郁癥功能的蛋糕在10公斤面粉中加入lg的四氫姜黃素及1公斤雞蛋和添加劑，做成具有抗抑郁癥功能的蛋糕。6.3抗抑郁癥功能的餅干或饅頭在10公斤面粉中加入lg的四氫姜黃素和添加劑，做成具有抗抑郁癥功能的餅干或饅頭。權(quán)利要求1、四氫姜黃素用于制備抗抑郁藥的應(yīng)用。2、四氫姜黃素固體分散體，其特征在于該固體分散體以四氫姜黃素與表面活性劑按一定比例制備而成。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的四氫姜黃素固體分散體，其特征在于表面活性劑選自下列之一或它們的組合泊洛沙姆188、聚乙烯吡咯垸酮、聚山梨酯20、聚山梨酯80、十二烷基硫酸鈉、十八烷基硫酸鈉、十二烷基苯磺酸鈉。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的四氫姜黃素固體分散體，其特征在于表面活性劑為泊洛沙姆188。5、權(quán)利要求2或3或4的四氫姜黃素固體分散體用于制備抗抑郁藥的應(yīng)用。6、權(quán)利要求2或3的四氫姜黃素固體分散體的制備方法，其特征在于將質(zhì)量比為1:31:30的四氫姜黃素和表面活性劑加熱至完全熔融后，置于0"C-2(TC低溫環(huán)境中冷凍，然后取出烘干,粉碎，得到四氫姜黃素固體分散體。7、四氫姜黃素及其固體分散體用于制備抗抑郁保健品、食品或食品添加劑的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明涉及四氫姜黃素用于制備抗抑郁藥的用途及一種四氫姜黃素固體分散體的制備方法。本發(fā)明的目的在于提供四氫姜黃素用于制備抗抑郁藥的應(yīng)用。四氫姜黃素固體分散體，以四氫姜黃素與表面活性劑兩者按一定比例制備成固體分散體。其制備方法為將質(zhì)量比為1∶3～1∶30的四氫姜黃素和表面活性劑加熱至完全熔融后，置于低溫環(huán)境中冷凍，然后取出烘干，粉碎，得到四氫姜黃素固體分散體。四氫姜黃素及其固體分散體用于制備抗抑郁的藥品、保健品、食品或食品添加劑的應(yīng)用。四氫姜黃素具有抗抑郁作用，其作用發(fā)揮可能與影響單胺神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)有關(guān)，另外，與氟西汀比較，四氫姜黃素具有毒性低、療效好的優(yōu)點(diǎn)。文檔編號A61K31/12GK101543486SQ20081007080公開日2009年9月30日申請日期2008年3月25日優(yōu)先權(quán)日2008年3月25日發(fā)明者溫彩霞,許建華,魏小娟,黃秀旺申請人:福建醫(yī)科大學(xué)