專利名稱：一種駱駝蓬子有效部位及去氫駱駝蓬堿單體的制備方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種駱駝蓬子的有效部位及去氫駱駝蓬堿單體的制備 方法及其應(yīng)用，具體的說(shuō)是按所述方法可制得駱駝蓬子的有效部位及 去氫駱駝蓬堿單體，而且制得的駱駝蓬子的有效部位可與藥學(xué)上可接 受的載體或其他適宜的賦型劑相結(jié)合，按照常規(guī)方法可制成經(jīng)口服給 藥的內(nèi)用劑型和非口服給藥的注射劑或其它劑型，而且制得的駱駝蓬 子的有效部位及去氫駱駝蓬堿單體具有鎮(zhèn)痛作用和治療消化系統(tǒng)疾病 的作用，可以用于制備鎮(zhèn)痛藥物與治療消化系統(tǒng)疾病藥物。
背景技術(shù)：
駱駝蓬子是蒺藜科駱駝蓬屬植物Peganum harmala L.的干燥成熟 種子，氣微，味苦。駱駝蓬主要生于戈壁灘、鹽堿化荒地，分布于亞 洲、歐洲、北非等地，在我國(guó)主要分布于西北部新、蒙、陜、甘、寧 等荒漠或半荒漠地區(qū)。駱駝蓬別名臭蓬、臭草、臭古朵、臭牡丹等， 為西北地區(qū)維吾爾族、哈薩克族、蒙古族等少數(shù)民族沿用已久的民族 藥材，維語(yǔ)藥名"阿地?zé)崴姑?，蒙語(yǔ)藥名"阿爾格林伊德"，藥用部 位為種子和全草，主治咳嗽氣喘、風(fēng)濕痹痛、無(wú)名腫痛等癥。駱駝蓬植物種子中主要含有生物堿、黃酮、脂肪酸、蛋白質(zhì)等成 分。主要的活性成份為駱駝蓬堿(Harmaline)、去氫駱駝蓬堿 (Harmine)、去甲駱駝蓬堿(HarmatoL )和鴨嘴花堿(Vasicine ) 等統(tǒng)稱為駱駝蓬總堿(Total alkaloid harmala )。目前已報(bào)道的駱駝蓬提取物制備及生物堿提取分離方法主要有以下幾種① 用40%_95%的乙醇水溶液進(jìn)行萃取得到駱駝蓬子浸膏。② 以5%的醋酸浸提駱駝蓬子，用10%的氯化鈉將醋酸鹽轉(zhuǎn)變 為鹽酸鹽然后冷熱反復(fù)處理得到駱駝蓬生物堿。③ 用乙醇滲漉，回收乙醇，水液用乙醚脫脂，水沉用氨水調(diào) p朋.5加入硫酸銨，用焦炭過(guò)濾，加KI，再用含HI的焦炭 處理，鹽用10%的氨水處理得到駱駝蓬生物堿。
用5%的鹽酸浸提，酸液用陽(yáng)離子樹(shù)脂交換，用氨水堿化樹(shù) 脂，并用乙醚、氯仿或無(wú)水乙醇洗脫得到駱駝蓬生物堿。⑤ 用95%的乙醇回流提取，濃縮至糖漿狀，用稀鹽酸轉(zhuǎn)溶， 氯仿脫脂后的酸液用氨水堿化，析出沉淀，得到駱駝蓬生物 堿。◎ 用酸水與堿水交替煎煮，合并溶液干燥得到駱駝蓬生物堿。⑦ 用乙醇提取，提取液用氯化汞處理使去氫駱駝蓬堿與駱駝蓬 堿以復(fù)合物沉淀下來(lái)，然后用H2S處理得到駱駝蓬生物堿。⑧ 用堿性醇浸潤(rùn)后回流提取，經(jīng)堿化游離、回流分離、轉(zhuǎn)溶精 制、水沉過(guò)濾及噴霧干燥得到駱駝蓬生物堿。藥理研究顯示該植物具有抗癌、抗腫瘤、鎮(zhèn)痛、消炎、殺菌、驅(qū) 蟲和抑制單胺氧化酶等多種生物活性。目前多集中于抗腫瘤方面的研 究和應(yīng)用，而其他方面的作用特點(diǎn)受到忽略，作為特色資源未得到充 分的開(kāi)發(fā)利用。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種駱駝蓬子的有效部位及去氫駱駝蓬堿 單體的制備方法及其在制備鎮(zhèn)痛藥物與治療消化系統(tǒng)疾病藥物中的應(yīng) 用。具體說(shuō)，本發(fā)明的目的之一在于提供一種駱駝蓬子的有效部位的制備方法及其在制備鎮(zhèn)痛藥物與治療消化系統(tǒng)疾病藥物中的應(yīng)用；本發(fā)明的另一目的在于提供一種去氫駱駝蓬堿單體的制備方法及 其在制備鎮(zhèn)痛藥物與治療消化系統(tǒng)疾病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的目的是通過(guò)如下的技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明提供的駱駝蓬子的有效部位及去氫駱駝蓬堿單體，其為由如 下的方法得到-1) 、有效部位將干燥成熟的駱駝蓬種子粉碎至10 20目，先用 二氧化碳超臨界萃取裝置在壓力15 35Mpa、溫度35 45'C、 二氧化 碳流量4 5 L / h條件下萃取2 3小時(shí)，萃取后藥渣加6 8倍量水， 用濃氨水調(diào)pH9以上，冷浸提取1 2次，24 48h/次，過(guò)濾，棄取 堿水液，藥渣再用70 95%酸性乙醇水溶液(加鹽酸調(diào)pH值至3 6) 作為提取溶劑進(jìn)行提取，所得提取物減壓濃縮干燥后，加5 10倍量 的1 2%鹽酸浸泡8 24小時(shí)，過(guò)濾，濾液中加氨水調(diào)pH9以上，冷 忙24小時(shí)，過(guò)濾，干燥得有效部位。2) 、去氫駱駝蓬堿單體以1)所述步驟制得有效部位，取有效部 位加5 10倍量經(jīng)氨水堿化的95%乙醇(pH9 10)，回流15 30分 鐘，過(guò)濾，干燥，加鹽酸酸化的95%乙醇(pH2 3)重結(jié)晶，晶體干 燥后加水，用氨水調(diào)pH7，冷貯，析出晶體再用無(wú)水乙醇重結(jié)晶，即 得去氫駱駝蓬堿單體。所述步驟l)的酸性乙醇水溶液提取為加入6 8倍量的提取溶劑 提取2 3次，提取方式為在室溫下浸漬提取24 48h/次；或?yàn)橛?20 70kHz的超聲波提取20 30min /次；或在60 8(TC加熱提取l 2h/次；或回流提取l 2h/次。所述步驟O的酸性乙醇水溶液提取優(yōu)選60 80。C加熱提取1 2次；或回流提取l 2h/次。本發(fā)明所述的駱駝蓬子的有效部位主要成分為去氫駱駝蓬堿，駱 駝蓬子有效部位或去氫駱駝蓬堿單體中去氫駱駝蓬堿的含量分別為駱 駝蓬子有效部位20 40% ，去氫駱駝蓬堿單體純度在95 %以上。本發(fā)明提供一種所述的駱駝蓬子的有效部位和去氫駱駝蓬堿單體 及其在藥學(xué)上可接受的酸形成的加成鹽在制備鎮(zhèn)痛藥物與治療消化系 統(tǒng)疾病藥物中的應(yīng)用，所述酸如鹽酸、磷酸、硫酸、醋酸、檸檬酸、 馬來(lái)酸、酒石酸。將駱駝蓬子的有效部位作為治療鎮(zhèn)痛藥物與消化系 統(tǒng)疾病的有效成分，使之與藥學(xué)上可接受的載體或其他適宜的賦型劑 相結(jié)合，按照常規(guī)方法制成經(jīng)口服給藥的內(nèi)用劑型和非口服給藥的注 射劑或其它劑型，可以臨床應(yīng)用于鎮(zhèn)痛與消化系統(tǒng)疾病的治療。本發(fā)明提供的駱駝蓬子的有效部位和去氫駱駝蓬堿單體制備工藝 有三個(gè)重要特點(diǎn)本發(fā)明第一個(gè)重要特點(diǎn)是首先采用二氧化碳超臨界萃取裝置對(duì) 樣品進(jìn)行脫脂處理，即避免了油酯成分對(duì)后處理工序的干擾，又可保 證更有效的提取有效成分，比采用低極性有機(jī)溶劑進(jìn)行脫脂更具優(yōu)勢(shì)。本發(fā)明第二個(gè)重要特點(diǎn)是脫脂處理后采用堿性水冷浸提取，過(guò) 濾棄取堿水液，進(jìn)一步除去了有效成分以外的水溶性雜質(zhì)，使有效部 位提取物的有效成分含量更高，且便于進(jìn)一步純化得到去氫駱駝蓬堿 單體。本發(fā)明第三個(gè)重要特點(diǎn)是采用兩步除雜后，直接采用酸性醇水 溶液進(jìn)行提取，有效成分在此條件下更易溶解浸出。本發(fā)明提供的駱駝蓬子有效部位和去氫駱駝蓬堿單體的制備方法 工藝操作簡(jiǎn)便，生產(chǎn)成本低，便于工業(yè)化生產(chǎn)。所得有效部位純度高， 純化得到的去氫駱鴕蓬堿單體收率高。相比同類工藝，不僅更易操作，去氫駱駝蓬堿單體收率也由0.5 0.6%提高到0.6 0.7%。本發(fā)明通過(guò)對(duì)冰醋酸致小鼠扭體次數(shù)的影響試驗(yàn)和對(duì)剛哚美辛致 小鼠胃潰瘍的影響試驗(yàn)證明了駱駝蓬子有效部位和去氫駱駝蓬堿單體 具有一定的鎮(zhèn)痛和抗?jié)冏饔?，提示了駱駝蓬子的有效部位及單體去 氫駱駝蓬堿可作為活性成分在制備鎮(zhèn)痛藥物與治療消化系統(tǒng)疾病藥物 中的應(yīng)用。具體實(shí)施方法實(shí)施例l、駱駝蓬子有效部位的制備取駱駝蓬(PeganumharmalaL.)的種子1000克粉碎至20目，先 用二氧化碳超臨界萃取裝置在壓力35Mpa、溫度40'C、 二氧化碳流量 4. 5 L / h條件下萃取3小時(shí)，萃取后藥渣加8000毫升水，用濃氨水 調(diào)pH=9.5，冷浸提取2次，24h /次，過(guò)濾，棄去堿水液，藥渣用7500 毫升80%酸性乙醇水溶液(調(diào)pH值至4)回流提取三次，每次2小 時(shí)。合并提取液，減壓濃縮至近干，加2200毫升的2%鹽酸浸泡12 小時(shí)，過(guò)濾，濾液中加濃氨水調(diào)pH-9.5，冷貯24小時(shí)，過(guò)濾，濾渣 干燥，即得駱駝蓬子有效部位65克，含量以去氫駱駝蓬堿計(jì)為35.2%。實(shí)施例2、駱駝蓬子有效部位的制備取駱駝蓬(PeganumhaimalaL.)的種子1000克粉碎至10目，先 用二氧化碳超臨界萃取裝置在壓力15Mpa、溫度35'C、 二氧化碳流量 4. 5 L / h條件下萃取3小時(shí)，萃取后藥渣加8000毫升水，用濃氨水 調(diào)pH-9.5，冷浸提取48h，過(guò)濾，棄去堿水液，藥渣用6000毫升90 %酸性乙醇水溶液(調(diào)pH值至5)用50kHz的超聲波提取三次，每次 30min。合并提取液，減壓濃縮至近干，加1600毫升的1%鹽酸浸泡8 小時(shí)，過(guò)濾，濾液中加氨水調(diào)pH=10，冷貯24小時(shí)，過(guò)濾，濾渣干 燥，即得駱駝蓬子有效部位71克，含量以去氫駱駝蓬堿計(jì)為31.2%。實(shí)施例3、駱駝蓬子有效部位的制備取駱駝蓬(PeganumharmalaL.)的種子1000克粉碎至20目，先 用二氧化碳超臨界萃取裝置在壓力25Mpa、溫度40'C、 二氧化碳流量 4. 5 L / h條件下萃取2小時(shí)，萃取后藥渣加6000毫升水，用濃氨水 調(diào)pH^10，冷浸提取48h，過(guò)濾，棄去堿水液，藥渣用6500毫升70 %酸性乙醇水溶液(調(diào)pH值至6) 60 80。C加熱提取2次，每次2小 時(shí)。合并提取液，減壓濃縮至近干，加1200毫升的2%鹽酸浸泡24 小時(shí)，過(guò)濾，濾液中加氨水調(diào)pH-lO，冷貯24小時(shí)，過(guò)濾，濾渣干 燥，即得駱駝蓬子有效部位60克，含量以去氫駱駝蓬堿計(jì)為32.3%。實(shí)施例4、去氫駱駝蓬堿單體的制備取駱駝蓬(PeganumharmalaL.)的種子1000克粉碎至20目，先 用二氧化碳超臨界萃取裝置在壓力30Mpa、溫度45-C、 二氧化碳流量 4.5 L/h條件下萃取3小時(shí)，萃取后藥渣加8000毫升水，用濃氨水 調(diào)pH-10.5，冷浸提取2次，24h/次，過(guò)濾，棄去堿水液，藥渣用 7000毫升85%酸性乙醇水溶液(調(diào)pH值至5)回流提取三次，每次 2小時(shí)。合并提取液，減壓濃縮成稠浸膏，加2000毫升的1%鹽酸浸 泡24小時(shí)，過(guò)濾，濾液中加氨水調(diào)pH-9.5，冷貯24小時(shí)，過(guò)濾， 濾渣干燥，加350毫升氨水堿化的95%乙醇(pH=10.5)回流15分 鐘，過(guò)濾，干燥，加鹽酸酸化的95%乙醇(pH=2)重結(jié)晶，晶體干 燥后加水，用氨水調(diào)pH二7，冷貯，析出晶體再用無(wú)水乙醇重結(jié)晶， 即得去氫駱駝蓬堿單體7.0克，含量以去氫駱駝蓬堿計(jì)為98.8%。實(shí)施例5、去氫駱駝蓬堿單體的制備取駱駝蓬(PeganumharmalaL.)的種子1000克粉碎至10目，先 用二氧化碳超臨界萃取裝置在壓力25Mpa、溫度35"C、 二氧化碳流量4.5 L/h條件下萃取2小時(shí)，萃取后藥渣加8000毫升水，用濃氨水 調(diào)pH=9.5，冷浸提取2次，24h /次，過(guò)濾，棄去堿水液，藥渣用7500 毫升75%酸性乙醇水溶液(調(diào)pH值至4)在室溫下浸漬提取兩次， 每次48小時(shí)。合并提取液，減壓濃縮成稠浸膏，加1800毫升的1% 鹽酸浸泡24小時(shí)，過(guò)濾，濾液中加氨水調(diào)pH-10.5，冷貯24小時(shí)， 過(guò)濾，濾渣干燥，加450毫升氨水堿化的95%乙醇(pH=9.5)回流 30分鐘，過(guò)濾，干燥，加鹽酸酸化的95%乙醇(pH=2.5)重結(jié)晶， 晶體干燥后加水，用氨水調(diào)pH-7，冷jie，析出晶體再用無(wú)水乙醇重 結(jié)晶，即得去氫駱駝蓬堿單體6.7克，含量以去氫駱駝蓬堿計(jì)為95.3%。實(shí)施例6、去氫駱駝蓬堿單體的制備取駱駝蓬(PeganumharmalaL.)的種子1000克粉碎至20目，先 用二氧化碳超臨界萃取裝置在壓力30Mpa、溫度4(TC、 二氧化碳流量 4. 5 L / h條件下萃取2小時(shí)，萃取后藥渣加6000毫升水，用濃氨水 調(diào)pH=10，冷浸提取2次，24h /次，過(guò)濾，棄去堿水液，藥渣用6500 毫升80%酸性乙醇水溶液(調(diào)pH值至3)回流提取三次，每次2小 時(shí)。合并提取液，減壓濃縮成稠浸膏，加1200毫升的2%鹽酸浸泡16 小時(shí)，過(guò)濾，濾液中加氨水調(diào)pH-lO，冷貯24小時(shí)，過(guò)濾，濾渣干 燥，加550毫升氨水堿化的95%乙醇(pH=9.5)回流20分鐘，過(guò)濾， 干燥，加鹽酸酸化的95%乙醇(pH=3)重結(jié)晶，晶體干燥后加水， 用氨水調(diào)pH-7，冷貯，析出晶體再用無(wú)水乙醇重結(jié)晶，即得去氫駱 駝蓬堿單體6.5克，含量以去氫駱駝蓬堿計(jì)為96.5%。實(shí)施例7:駱駝蓬子有效部位及單體對(duì)冰醋酸致小鼠扭體次數(shù)的影響 取小鼠40只，雌雄兼用，體重18-22g，隨機(jī)分為生理鹽水組、阿 斯匹林對(duì)照組和兩個(gè)樣品組，ig給藥，每天一次，連續(xù)三天，于末次 給藥lh后，給小鼠腹腔注射0.6%醋酸0.2ml/只，記錄10min內(nèi)小鼠扭體次數(shù)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)見(jiàn)表l:表l駱駝蓬子有效部位及單體對(duì)冰醋酸致小鼠扭體次數(shù)的影響組別n劑量(mg/kg)扭體次數(shù)(XiSD)生理鹽水組(NS)10lml60.4±19.4阿斯匹林組1010014.6±11.4"有效部位組10115.617.1±6.9**鹽酸去氫駱駝蓬堿組1059.216.肚9.8"與生理鹽水組比較* <0.05, **P<0.01從表1可見(jiàn)，有效部位115.6 mg/kg及鹽酸去氫駱駝蓬59.2mg/kg均 可顯著減少冰醋酸致小鼠的扭體次數(shù)。實(shí)施例8:駱駝蓬子有效部位及單體對(duì)吲哚美辛致小鼠胃潰瘍的影響 取體重為18-22g左右的小鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分為4組， 兩個(gè)樣品組，雷尼替丁O. 2g/kg和生理鹽水組，ig給藥，每天一次， 連續(xù)5天，末次給藥前禁食24h，末次給藥后lh皮下注射吲哚美辛20mg /kg， 7h后脫頸處死動(dòng)物，結(jié)扎胃賁門及幽門，并沿胃壁注入10%福 爾馬林2ml /只，30min后剖開(kāi)胃，在放大鏡下計(jì)數(shù)小鼠胃內(nèi)的潰瘍數(shù)， 結(jié)果見(jiàn)表2。表2駱駝蓬子有效部位及單體對(duì)吲哚美辛致小鼠胃潰瘍的影響組另ljn劑量(mg/kg)潰瘍數(shù)(;iSD)生理鹽水組(NS)10lml41肚13.3雷尼替丁組1020020.1±8.4"有效部位組10115.620.4±6.5"鹽酸去氫駱駝蓬堿組1059.215.9±7.5"與生理鹽水組比較* <0.05, **P<0.01從表2可見(jiàn)，有效部位115.6mg/kg及鹽酸去氫駱駝蓬59.2mg/kg可顯 著抑制吲哚美辛致小鼠胃潰瘍的形成。
權(quán)利要求
1、一種駱駝蓬子的有效部位及去氫駱駝蓬堿單體制備方法，其特征在于按下列步驟進(jìn)行1)、有效部位將干燥成熟的駱駝蓬種子粉碎至10～20目，先用二氧化碳超臨界萃取裝置在壓力15～35Mpa、溫度35～45℃、二氧化碳流量4～5L/h條件下萃取2～3小時(shí)，萃取后藥渣加6～8倍量水，用濃氨水調(diào)pH9以上，冷浸提取1～2次，24～48h/次，過(guò)濾，棄取堿水液，藥渣再用70～95％酸性乙醇水溶液(加鹽酸調(diào)pH值至3～6)作為提取溶劑進(jìn)行提取，所得提取物減壓濃縮干燥后，加5～10倍量的1～2％鹽酸浸泡8～24小時(shí)，過(guò)濾，濾液中加氨水調(diào)pH9以上，冷貯24小時(shí)，過(guò)濾，干燥得有效部位。2)、去氫駱駝蓬堿單體以1)所述步驟制得有效部位，取有效部位加5～10倍量經(jīng)氨水堿化的95％乙醇(pH9～10)，回流15～30分鐘，過(guò)濾，干燥，加鹽酸酸化的95％乙醇(pH2～3)重結(jié)晶，晶體干燥后加水，用氨水調(diào)pH7，冷貯，析出晶體再用無(wú)水乙醇重結(jié)晶，即得去氫駱駝蓬堿單體。
2、 權(quán)利要求1所述的駱駝蓬子的有效部位，其特征在于所述步驟1) 中用酸性乙醇水溶液提取時(shí)，以6 8倍量的提取溶劑提取2 3次， 提取方式為在室溫下浸漬提取24 48h/次；或?yàn)橛?0 70kHz的 超聲波提取20 30min /次；或在60 80。C加熱提取1 2 h /次；或 回流提取l 2h/次。
3、 權(quán)利要求1所述的駱駝蓬子的有效部位，其特征在于所述步驟1) 的酸性乙醇水溶液提取為在60 8(TC加熱提取1 2h/次；或回流提 取1 2h/次。
4、 權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于用該方法制備的駱駝蓬子有 效部位中去氫駱駝蓬堿的含量為20 40%;該方法制備的去氫駱駝蓬堿單體純度為95%以上。
5、 權(quán)利要求1-3所述的方法制備的駱駝蓬子有效部位，可與藥學(xué)上 可接受的載體或其他適宜的賦型劑相結(jié)合，按照常規(guī)方法制成經(jīng)口服 給藥的內(nèi)用劑型和非口服給藥的注射劑或其它劑型。
6、 權(quán)利要求1-3所述的方法制備的駱駝蓬子有效部位作為制備鎮(zhèn)痛 藥物的用途。
7、 權(quán)利要求1-3所述的方法制備的駱駝蓬子有效部位作為制備治療 消化系統(tǒng)疾病的藥物的用途。
8、 權(quán)利要求1所述的去氫駱駝蓬堿單體及其在藥理學(xué)上可接受的酸 形成加成鹽在制備鎮(zhèn)痛藥物與治療消化系統(tǒng)疾病藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種駱駝蓬子的有效部位及去氫駱駝蓬堿單體的制備方法及其在鎮(zhèn)痛或治療消化系統(tǒng)疾病中的用途。它首先采用二氧化碳超臨界萃取進(jìn)行脫脂和堿性水冷浸進(jìn)行去雜處理，然后采用酸性醇水溶液提取，最后經(jīng)酸溶、堿沉、純化、減壓干燥而得，其主要成分為去氫駱駝蓬，經(jīng)冰醋酸致小鼠扭體次數(shù)的影響試驗(yàn)和對(duì)吲哚美辛致小鼠胃潰瘍的影響試驗(yàn)證明駱駝蓬子有效部位及去氫駱駝蓬堿單體具有一定的鎮(zhèn)痛和抗?jié)冏饔茫崾究勺鳛榛钚猿煞衷谥苽滏?zhèn)痛藥物與治療消化系統(tǒng)疾病藥物中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K36/185GK101229203SQ20081007281
公開(kāi)日2008年7月30日 申請(qǐng)日期2008年1月31日 優(yōu)先權(quán)日2008年1月31日
發(fā)明者于富生, 劉永斌, 孫殿甲, 徐建軍, 戴秀勇, 范文璽, 亮 郭, 芹 馬 申請(qǐng)人:新疆華世丹藥物研究有限責(zé)任公司