專利名稱：：鹽酸罌粟堿作為透皮吸收促進劑的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及鹽酸罌粟堿在透皮制劑中的應(yīng)用，確切地說是鹽酸罌粟堿在各種透皮給藥制劑或功能型化妝品中作為透皮吸收促進劑的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：透皮給藥系統(tǒng)是指經(jīng)皮膚表面給藥，使藥物以恒定速度(或接近恒速)通過皮膚，經(jīng)毛細血管吸收進入體循環(huán)而產(chǎn)生全身或局部治療作用的一類給藥系統(tǒng)。與傳統(tǒng)的給藥方式相比，透皮吸收制劑具有避免肝臟首過效應(yīng)及腸胃滅活、維持恒定的血藥濃度或藥理效應(yīng)、降低藥物不良反應(yīng)、患者可以自主用藥等特點，因此透皮給藥系統(tǒng)具有良好的應(yīng)用前景。但由于皮膚對外來物質(zhì)的屏障作用，大多數(shù)藥物透皮滲透速率都很難滿足治療的需要，成為研制透皮給藥系統(tǒng)的重大障礙，所以尋找促進藥物滲透皮膚的有效方法是開發(fā)透皮給藥系統(tǒng)的關(guān)鍵。解決此問題常用方法有藥劑學(xué)方法、化學(xué)方法和物理學(xué)方法等，而使用透皮吸收促進劑是應(yīng)用最多的一種藥劑學(xué)方法。透皮吸收促進劑是指所有能夠增加藥物透皮滲透速率而對皮膚不造成嚴重刺激和損害的物質(zhì)。透皮吸收促進劑能促進藥物在一定時間內(nèi)透皮滲透達到治療量，其作用機理主要是通過可逆性改變皮膚結(jié)構(gòu)來滲透進入皮膚并降低藥物經(jīng)過皮膚所受阻力，達到促進藥物全身吸收或局部治療的目的。透皮吸收促進劑可分為化學(xué)合成透皮吸收促進劑和天然透皮吸收促進劑。近年來，天然透皮吸收促進劑以起效快、效果好、副作用小、無污染等優(yōu)點，正日益引起人們的重視，主要有萜類、精油、生物堿和內(nèi)酯等，其中薄荷醇和冰片研究報道較多。在各種化學(xué)透皮吸收促進劑中，報道最多、應(yīng)用最廣的要屬氮酮類化合物。一般認為，氮酮滲入皮膚角質(zhì)層與細胞脂質(zhì)相互作用，脫去脂質(zhì)形成親水性孔道，增加脂質(zhì)流動性，還能增加角質(zhì)層含水量，使其脹大蓬松，使細胞間隙增大，毛囊口外徑拓寬，從而降低藥物的阻力。大量文獻證明，氮酮是良好的透皮吸收促進劑，能有效地促進藥物的透皮吸收，但氮酮存在一定刺激性、起效滯后時間長，及單獨使用有時效果不佳等缺點。國內(nèi)在嘗試透皮吸收促進劑聯(lián)合使用的同時，也一直努力發(fā)掘或合成新型透皮吸收促進劑。鹽酸罌粟堿化學(xué)名稱為1-[(3，4-二甲氧基苯基)甲基]-6，7-二甲氧基異喹啉鹽酸鹽，分子式為C2QH21N04HCL，結(jié)構(gòu)式如下屬于阿片類生物堿，但無明顯麻醉藥性質(zhì)，是一類非特異性血管擴張劑。它通過抑制平滑肌細胞磷酸二酯酶起作用，增加環(huán)磷酸腺苷、環(huán)鳥苷3、5腺苷的含量，此外，罌粟堿還能抑制腺苷的攝取，對平滑肌細胞膜的鈣離子內(nèi)流有阻滯作用，它對腦血管、冠脈血管、周圍血管都有較好的松馳作用，并有溶解血栓、抗凝、降低毛細血管脆性的作用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種新的透皮吸收促進劑——鹽酸罌粟堿，并將其應(yīng)用于各種透皮給藥系統(tǒng)或功能型化妝品中，提高藥物制劑和化妝品中藥物的透皮滲透速率和透過量o近年來，隨著實驗研究和臨床探討的不斷深入，鹽酸罌粟堿的臨床應(yīng)用范圍不斷擴大，療效不斷提高，被廣泛應(yīng)用于神經(jīng)內(nèi)科、神經(jīng)外科、心血管內(nèi)科、皮膚外科、生殖內(nèi)科、疼痛科、呼吸內(nèi)科等臨床多學(xué)科多種疾病的治療，其治療機理都是通過緩解血管平滑肌痙攣，從而改善局部血液循環(huán)達到治療目的，而在透皮制劑中作為透皮吸收促進劑從未見報道。本發(fā)明的發(fā)明人通過大量的實驗證實鹽酸罌粟堿是一種新型的透皮吸收促進劑，能在給藥部位的皮膚積聚，促進有效成分透過皮膚進入血液，對一般常見的親水性或親脂性藥物均有較好效果。為了能夠進一步理解本發(fā)明，以下將通過離體透皮吸收實驗和在體透皮吸收實驗，證明鹽酸罌粟堿作為一種新的透皮吸收促進劑的應(yīng)用。1.實驗方法簡介離體透皮吸收實驗大鼠固定后用剃須刀去除腹部鼠毛，去毛24h后用10%水合氯醛腹腔注射麻醉(3.3ml/kg)，剪取并剝離大鼠腹部去毛皮膚，取下已去毛的鼠皮于生理鹽水中，除凈皮下脂肪和結(jié)締組織。皮膚的有效擴散透過面積為2.92cm2。將皮膚樣本固定在Fmnz吸收池中(接受室體積17ml)，角質(zhì)層朝向供給室貼于供給室與接受室之間，加入己預(yù)熱至37'C的接受液，穩(wěn)定一定時間，加入藥物于皮膚上，整個實驗過程恒溫37。C、不斷攪拌，分別于所設(shè)計的取樣點從接受室中取樣，每次把全部接受液取出，同時重新?lián)Q取全部的新鮮接受液，對樣品進行分析檢測。在體透皮吸收實驗大鼠固定后用剃須刀去除腹部鼠毛，去毛24h后按體重隨機分組，腹部皮膚給藥，分別于給藥后的不同時點從各大鼠的眼靜脈叢采血lml，制備血清樣品，進行樣品處理后進行分析檢測。2.實驗結(jié)果鹽酸罌粟堿透皮吸收的絕對透過量少，只能在皮膚局部給藥周圍起作用，起局部作用而不是全身作用。鹽酸罌粟堿能在給藥部位的皮膚積聚，促進其他藥物透過皮膚，提高其入血吸收量及生物利用度。已知的透皮吸收促進劑的作用機制主要是可逆性改變皮膚結(jié)構(gòu)一一改變皮膚角質(zhì)層細胞排列、影響皮膚角質(zhì)層水合作用、溶解皮脂腺管內(nèi)皮脂、擴大汗腺和毛囊開口、抑制局部血液流速。發(fā)明人認為鹽酸罌粟堿在在體透皮吸收實驗中促進藥物透皮吸收，可能與鹽酸罌粟堿擴張局部皮膚的皮下血管有關(guān)。發(fā)明人的實驗結(jié)果提示鹽酸罌粟堿是一種新的透皮吸收促進劑，其具體作用機制還有待于進一步研究。下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行說明。以含1.4%鹽酸罌粟堿的鹽酸小檗堿貼片(鹽酸小檗堿36mg、鹽酸罌粟堿7mg、半合成脂肪酸甘油酯457mg)、不含鹽酸罌粟堿的鹽酸小檗堿貼片(空白對照片，鹽酸小檗堿36mg、半合成脂肪酸甘油酯464mg)、鹽酸罌粟堿溶液(臨用前用純凈水配成7mg/ml)進行大鼠皮膚的離體透皮吸收實驗。鹽酸小檗堿貼片的制備取處方量的鹽酸小檗堿、鹽酸罌粟堿混勻，另取半合成脂肪酸甘油酯，加熱融化，加入上述藥粉，攪勻，注入模具中，冷卻成型，藥片重0.5g。采用磷酸緩沖溶液(pH=6.8)作為接受液。皮膚的有效擴散透過面積為2.92cm2。將皮膚樣本固定在Franz吸收池中(接受室體積7ml)，而后加入藥物于皮膚上，鹽酸小檗堿貼片組加入含1.4%鹽酸罌粟堿的鹽酸小檗堿貼片1片/L(含鹽酸罌粟堿7mg);空白對照組加入空白對照片1片/L，鹽酸罌粟堿溶液組加入溶液lml/L(含鹽酸罌粟堿7mg)，整個實驗過程恒溫37'C不斷攪拌，分別于0、2.0h、4.0h、8.0h、12h、18h、24h和30h從接受室中取樣，每次把全部接受液取出，同時重新?lián)Q取全部的新鮮接受液，樣品用針筒過濾器過濾后采用HPLC(外標法)進行分析測定。鹽酸罌粟堿30h累5計透過量、透皮時滯和穩(wěn)態(tài)透皮速率見表l:表l.鹽酸罌粟堿30h累計透過量、透皮時滯和穩(wěn)態(tài)透皮速率<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>實驗結(jié)果提示鹽酸罌粟堿制備成貼片后，透皮擴散時滯顯著縮短，穩(wěn)態(tài)透皮速率顯著降低，30h累計透過量也是絕對減少。以含1.4%鹽酸罌粟堿的肛泰(貼片，由煙臺榮昌制藥提供，0.5g/片)進行大鼠皮膚的在體透皮吸收實驗。肛泰組腹部皮膚給藥組，每只大鼠24h前腹部皮膚用剃須刀去毛后貼敷1片肛泰，共貼敷24h;鹽酸罌粟堿溶液組(鹽酸罌粟堿臨用前用純凈水配成6mg/ml)每只大鼠灌胃給予10ml/kg的鹽酸罌粟堿溶液。2個給藥組中每組分為4個小組進行采血在用藥5min時從眼靜脈叢取血lml，在用藥15min時從眼靜脈叢取血lml，在用藥0.5h、2.0h、8.0h和24h時從眼靜脈叢取血l.Oml和在用藥的0.5h、4.0h、12h和24h時從眼靜脈叢取血1.0ml，各血樣于3000rpm離心5min，取血清，冷凍儲存于-2(TC冰箱待分析檢測用。每個采血點動物數(shù)為5只，肛泰組大鼠在腹部皮膚貼敷給藥24h后去除和擦凈皮膚表面剩余藥物，取給藥部位皮膚剪碎于10ml水中，超聲提取20min，3000rpm離心5min，取上清液，用針筒過濾器過濾，濾液釆用HPLC(外標法)進行分析測定，以測定局部給藥部位皮膚中鹽酸罌粟堿的含量。大鼠給藥后不同時間血清鹽酸罌粟堿濃度見表2:表2.大鼠給藥后不同時間血清鹽酸罌粟堿濃度(|ag/L，n=5)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注"-"表示低于最低檢測濃度，低于最低檢測限的血藥濃度以O(shè)計算。本次實驗的最低檢測濃度為40pg/L(0.8ng)，低于該濃度則不能定量。由表2可見鹽酸罌粟堿口服和腹部皮膚貼敷給藥后不同時間大鼠血清鹽酸罌粟堿濃度，結(jié)果口服給予鹽酸罌粟堿(約16.8mg/只大鼠)，在給藥后的4小時內(nèi)能檢測其血藥濃度，在給藥824h后各時間點大鼠血清鹽酸罌粟堿濃度均低于最低檢測限，口服給藥后4h內(nèi)的Tmax(達峰時間)為0.25h(15min)，Cmax(最大血藥濃度)為251.6|ig/L，統(tǒng)計距參數(shù)AUQ^4h(藥時曲線下的面積)為327.107pg/L七，T,/2為0.942h;而腹部皮膚貼敷給藥后(7mg/只大鼠)，各時間點大鼠血清鹽酸罌粟堿濃度均低于最低檢測限，表明大鼠貼敷1片肛泰后的24h內(nèi)鹽酸罌粟堿的血藥濃度均不能達到起全身作用的有效血藥濃度。大鼠腹部皮膚貼敷肛泰，給藥24h后在給藥部位的皮膚中鹽酸罌粟堿的含量為9.94±1.46pg，其貼敷面積約為1.5cm2，則每平方厘米皮膚中鹽酸罌粟堿的含量為6.62±0.87pg/cm2。該結(jié)果提示鹽酸罌粟堿能在給藥部位的皮膚積聚，起局部作用而不是全身作用。以肛泰(貼片，由煙臺榮昌制藥提供，含1.4%鹽酸罌粟堿，0.5g/片)、不含鹽酸罌粟堿的肛泰(對照組)進行大鼠皮膚的在體透皮吸收實驗。大鼠按體重隨機分為肛泰組和肛泰對照組，每只大鼠24h前腹部皮膚去毛后貼敷肛泰或不含鹽酸罌粟堿的對照片l片，共貼敷24h。2個給藥組中每組分為4個小組進行采血在用藥5min時從眼靜脈叢取血lml，在用藥15min時從眼靜脈叢取血lml，在用藥0.5h、2.0h、6.0h和24h時從眼靜脈叢取血0.8ml和在用藥的l.Oh、4.0h、8.0h、12h和24h時從眼靜脈叢取血0.8ml，每個采血點動物數(shù)為46，各血樣于4000卬m離心5min，取血清，立即進行樣品處理后進行分析檢測。大鼠腹部皮膚給藥后不同時間鹽酸小檗堿血藥濃度見表3:表3不同時間鹽酸小檗堿血藥濃度(mg/L,n二5)Time(h)肛泰組肛泰對照組00±00±00.080.0915±0.01160.0500±0.00770.250.1191±0.01360.0678±0.00540.50.1200±0扁40扁4±0.007410.1337±0.01170.0780±0.006220.0998±0.01490.0597±0.011540.0741±0.00990.0500±0.007160.0546±0.01070.0384±0.008680.0539±0.00410.0354±0.0063120.0381±0.00510.0284±0.0066240.0215±0.00530扁8±0.0004表4大鼠腹部皮膚給藥后鹽酸小檗堿藥動學(xué)參數(shù)比較肛泰組肛泰對照組劑量(mg鹽酸小檗堿/大鼠)3636劑量(mg鹽酸罌粟堿/大鼠)70Tmax(h)1.01.0AUC"24h(mg/L'h)(倍數(shù))1.178(1.56)0.753(1)Cmax(mg/L)(倍數(shù))0.1337(1.71)0.0780(1)由表3和表4可見，含鹽酸罌粟堿的肛泰組與不含鹽酸罌粟堿的對照組相比較，鹽酸小檗堿血藥濃度有所增加，鹽酸小檗堿的達峰濃度Cmax增加了71%，AUC"24h增加了56%，達峰時間Tmax沒有變化，該結(jié)果表明鹽酸罌粟堿在肛泰中具有促進鹽酸小檗堿透皮吸收的作用。鹽酸罌粟堿作為透皮吸收促進劑可應(yīng)用于各種透皮給藥系統(tǒng)或功能型化妝品，具體方案為(1)將鹽酸罌粟堿添加到W/0或0/W型乳化體系中，將制成的乳化體系體系涂抹在人(或動物)的皮膚表面，使該乳化體系中具有生物活性的物質(zhì)的透皮速度比未添加鹽酸罌粟堿前有所提高；(2)將鹽酸罌粟堿添加到親水性溶液體系或親脂性有機溶液體系中，將制成的溶液體系體系涂抹在人(或動物)的皮膚表面或?qū)⑵つw部分或整體浸泡在該溶液體系中，使該溶液體系中具有生物活性的物質(zhì)的透皮速度比未添加鹽酸罌粟堿前有所提高；(3)將鹽酸罌粟堿添加到水溶性聚合物混合體系或脂溶性聚合物混合體系中，將制成的聚合物混合體系制成貼片或薄膜粘貼在人(或動物)的皮膚表面，使該貼片或薄膜中具有生物活性的物質(zhì)的透皮速度比未添加鹽酸罌粟堿前有所提高。以上實施方案中，鹽酸罌粟堿的用量優(yōu)選為0.5-10%(重量百分比)。具體實施例方式以下實施例是對本發(fā)明進行進一步的闡述和解釋，而不應(yīng)該被看作是對本發(fā)明的限制。實施例1雙氯芬酸鈉凝膠的離體透皮吸收實驗處方雙氯芬酸鈉10g，乙醇適量，三乙醇胺18g，鹽酸罌粟堿20g，卡波姆-940水溶液500g，蒸餾水加至1000g。工藝將雙氯芬酸鈉溶于適量乙醇中，再將卡波姆-940水溶液、鹽酸罌粟堿混合均勻，研磨，攪拌下將雙氯芬酸鈉溶解液加入到卡波姆-940基質(zhì)中，慢慢滴加三乙醇胺，邊加邊攪拌使成凝膠，加蒸餾水至全量，攪勻，分裝即得含2%鹽酸罌粟堿的雙氯芬酸鈉凝膠。根據(jù)以上處方和工藝再分別制成含5%鹽酸罌粟堿的雙氯芬酸鈉凝膠及不含鹽酸罌粟堿的雙氯芬酸鈉凝膠。以生理鹽水為接受液進行大鼠皮膚的離體透皮吸收實驗，取0.5g凝膠均勻涂于皮膚角質(zhì)層上，分別于0.5h、lh、1.5h、2h、4h、6h、8h、10h、12h取樣，進行分析檢測，實驗結(jié)果見表5:表5雙氯芬酸鈉的單位面積累積透藥量(pg/cm2，n=5)T<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注表中數(shù)據(jù)為各組平均值。實施例2雌二醇軟膏的離體透皮吸收實驗雌二醇軟膏規(guī)格為10g:13.3mg。以含40%聚乙二醇400的生理鹽水為接受液進行大鼠皮膚的離體透皮吸收實驗，取0.5g軟膏均勻涂于皮膚角質(zhì)層上，分別于lh、3h、5h、8h、10h取樣，進行分析檢測，實驗結(jié)果見表6:表6雌二醇的單位面積累積透藥量(^g/cm2，n=5)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注表中數(shù)據(jù)為各組平均值。實施例3維生素E霜的離體透皮吸收實驗處方維生素E20g，單硬脂酸甘油酯70g，硬脂酸112.5g，甘油85g，白凡士林85g，十二烷基硫酸鈉10g，對羥基苯甲酸乙酯lg，蒸餾水加至1000g。工藝取甘油、十二烷基硫酸鈉、對羥基苯甲酸乙酯溶于8(TC水中(水相)；另取單硬脂酸甘油酯、硬脂酸、白凡士林置水浴上加熱至8(TC使熔融，停止加熱，加入維生素E并充分攪勻(油相)；將油相緩緩加入水相，邊加邊攪拌，至冷凝即得不含鹽酸罌粟堿的維生素E霜。根據(jù)以上處方和工藝再制成含1%鹽酸罌粟堿的維生素E霜。以含10%聚乙二醇400的生理鹽水為接受液進行大鼠皮膚的離體透皮吸收實驗，取0.5g軟膏均勻涂于皮膚角質(zhì)層上，分別于lh、3h、5h、7h、9h取樣，進行分析檢測，實驗結(jié)果見表7:表7維生素E的單位面積累積透藥量(mg/cm2，n=5)Time(h)不含鹽酸罌粟堿組1%鹽酸罌粟堿組10.0440.10530.3770.6060.7241.2680.9432.09791.1212.154注表中數(shù)據(jù)為各組平均值。實施例4尼群地平乳膏的離體透皮吸收實驗稱取尼群地平適量，用一定量的無水乙醇潤濕，加入到0/W型乳膏基質(zhì)中，充分攪拌均勻，制成3%尼群地平乳膏(其中乙醇在乳膏中的質(zhì)量百分數(shù)為30%)。按以上方法再制成含2.5%鹽酸罌粟堿的尼群地平乳膏。以含20%無水乙醇的生理鹽水為接受液進行大鼠皮膚的離體透皮吸收實驗，取0.5g軟膏均勻涂于皮膚角質(zhì)層上，分別于lh、3h、5h、7h、9h取樣，進行分析檢測，實驗結(jié)果見表8:表8尼群地平的單位面積累積透藥量(^g/cm2，n-5)Time(h)不含鹽酸罌粟堿組2.5%鹽酸罌粟堿組11.7039.420210.16426.893315.91040.266420.49247.564524.98458.475630細60.814734.64165.494839.41872.896注表中數(shù)據(jù)為各組平均值。實施例5鹽酸托垸司瓊?cè)芤旱碾x體透皮吸收實驗鹽酸托垸司瓊配成30mg/ml的溶液，再制成含2%鹽酸罌粟堿的鹽酸托烷司瓊?cè)芤?。以生理鹽水為接受液進行大鼠皮膚的離體透皮吸收實驗，加入鹽酸托烷司瓊?cè)芤簂ml于皮膚角質(zhì)層上，分別于lh、2h、3h、4h、6h、8h、10h、12h、16h、20h和24h取樣,進行分析檢測，實驗結(jié)果見表9:<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注表中數(shù)據(jù)為各組平均值。實施例6鹽酸托烷司瓊貼片的離體透皮吸收實驗鹽酸托烷司瓊貼片(鹽酸托烷司瓊30mg、半合成脂肪酸甘油酯470mg，0.5g/片)，另制含3%鹽酸罌粟堿的鹽酸托烷司瓊貼片，以磷酸鹽緩沖液(pH7.4)為接受液進行大鼠皮膚的離體透皮吸收實驗，分別于lh、2h、4h、6h、8h、12h、16h、24h取樣，進行分析檢測，實驗結(jié)果見表10:表10<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>注表中數(shù)據(jù)為各組平均值。實施例7鹽酸格拉司瓊巴布劑的離體透皮吸收實驗取明膠lg加水30g，升溫至5(TC充分溶脹后，加入鹽酸格拉司瓊325mg、D-山梨醇19g，保溫攪勻，得I相溶液；另取聚丙烯酸鈉lg、聚乙烯吡咯烷酮3g、羧甲基纖維素鈉2g、高嶺土lg、1，2-丙二醇10g、甘油4g，混勻后溶脹過夜，得II相溶液。將I、II相溶液混合，加入適量氫氧化鈣，攪拌均勻，鋪于無紡布上，用巴布劑涂布機涂布，5(TC烘干，用防黏膜覆蓋，切割即得鹽酸格拉司瓊巴布劑(10mg/20cm2)。同法制得含1.5%鹽酸罌粟堿的鹽酸格拉司瓊巴布劑。以磷酸鹽緩沖液(pH7.4)為接受液進行大鼠皮膚的離體透皮吸收實驗，分別于lh、2h、4h、6h、8h、12h、16h、24h取樣，進行分析檢測，實驗結(jié)果見表11:表ll鹽酸格拉司瓊的單位面積累積透藥量(嗎/cm2，n=5)Time(h)不含鹽酸罌粟堿組3%鹽酸罌粟堿組<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>2h8.99417.6744h24.31545.3476h37.78968.0218h46.82290.69512h75.579136.04216h96.484181.38924h152.087272擦注表中數(shù)據(jù)為各組平均值。權(quán)利要求1、鹽酸罌粟堿作為透皮吸收促進劑的應(yīng)用。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于應(yīng)用于透皮給藥制劑和功能型化妝品。全文摘要本發(fā)明涉及鹽酸罌粟堿在透皮制劑中的應(yīng)用，確切地說是鹽酸罌粟堿在各種透皮給藥制劑或功能型化妝品中作為透皮吸收促進劑的應(yīng)用。文檔編號A61K8/49GK101543629SQ20081008415公開日2009年9月30日申請日期2008年3月27日優(yōu)先權(quán)日2008年3月27日發(fā)明者夏丕芳,熊曉濱申請人:北京榮昌藥物研究院有限公司