專利名稱：：蚯蚓干燥粉末的生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)對治療各種疾病有效的蚯蚓干燥粉末的方法，該方法不會(huì)降低蚯賴原有的藥理作用，并可以除去附著于消化道內(nèi)、體表的污物。
背景技術(shù)：
：自古以來主要在東洋各國中，蚯封l作為各種疾病的預(yù)防劑、治療劑而凈皮應(yīng)用，目前已知有膀胱結(jié)石縮小劑及排出促進(jìn)劑、黃疸治療劑、分娩促進(jìn)劑、強(qiáng)壯劑、育毛劑、強(qiáng)精劑、解熱劑、痙攣治療劑、血液循環(huán)促進(jìn)劑、半身不遂治療劑、間接鎮(zhèn)痛劑、排尿劑、支氣管嗜喘劑、高血壓治療劑等用途。但是，以蚯到l活體為原料制備口服給藥的藥物制劑時(shí)，必須除去殘留在蚯蟲引消化道內(nèi)的消化物、附著于體表的污物等，迄今為止，提出了多種以此為目的的方法。直至目前，提出了以下方法，例如，將蚯蚓活體浸泡在鈉鹽或鉀鹽等堿鹽的水溶液中，排泄出消化道內(nèi)的糞土后，濕式粉碎，將得到的懸濁液真空冷凍干燥，來生產(chǎn)作為糖尿病治療劑、抗高血脂劑或血壓調(diào)節(jié)劑有效的蚯蚓干燥粉末的方法(JP1-47718A、JP1-47719A、JP1-47720A及JP1-268639A);將蚯封l活體在維持于6~26。C的酸性水溶液中浸泡0.1~5小時(shí)，除去蚯蚓消化道內(nèi)的糞土后磨碎，對磨碎物進(jìn)行脫氣，然后進(jìn)行階段性升溫，同時(shí)真空干燥生產(chǎn)血栓病患者治療藥物的方法(JP3-72427A)等。然而，蚯蟲引活體在^5威鹽水溶液或酸水溶液中長時(shí)間浸泡，蚯到l的體力下降，其結(jié)果是，由于活體內(nèi)所含的蛋白質(zhì)發(fā)生變性，酶作用下降，從而使所得蚯到l粉末的藥理作用變差。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于，提供一種在保持良好藥理作用的狀態(tài)下，生產(chǎn)蚯蚓干燥粉末的方法，該方法不會(huì)降低蚯蚓體力，且效率良好地從蚯蚓活體排泄殘留在其消化道內(nèi)的消化物或附著于體表的污物。本發(fā)明人等為了有效使殘留在蚯蚓活體消化道內(nèi)的消化物排泄出來，而不損失蚯封l的體力，進(jìn)行反復(fù)深入研究的結(jié)果發(fā)現(xiàn)先對活蚯封l進(jìn)行加工，通過在明亮處放置及再與有機(jī)酸接觸，制造蚯蚓不喜歡的環(huán)境，在該條件下培育蚯蟲引一定時(shí)間，蚯蟲引為了適應(yīng)所述環(huán)境，排泄出消化道內(nèi)的消化物，由于所述排泄物覆蓋全身，所以除去附著于體表的污物即排泄物就可以得到除去雜質(zhì)的活體，基于該發(fā)現(xiàn)完成本發(fā)明。即，本發(fā)明提供一種蚯蚓干燥粉末的生產(chǎn)方法，該方法包括，將活蚯蚓在明亮處放置10-50小時(shí)后，用無紡布等吸附除去附著于體表的污物，再與有機(jī)酸接觸，然后用水迅速稀釋調(diào)整pH至2~5,在該條件下保持3~180分鐘后，水洗，磨碎，將該磨碎物在-18。C~-35"下冷凍20-240小時(shí)，再在真空下進(jìn)行冷凍干燥，同時(shí)進(jìn)行脫氣。以下對本發(fā)明的方法進(jìn)行詳細(xì)說明。本發(fā)明方法中，采用活蚯蚓作為原料，所述活蚯蚓，可以任意選自例如4分正蟲引(丄wm6Wciwn^e〃tw)、Pi正蟲引(丄wm6WcMS/^re^n》)、赤子愛勝蟲引(5&em'a/oe"Ga)、背聞異唇蟲引(^4〃o/o6o;/7oraca/z'g/wosa)、/^道^主木蟲引(De"(i廠o^3e"a、y4〃o/oZop/zoray。;ow.caMichaelsen(廿夕，S$X)、Z)rawWa/2a"aw/w/zMHatai(7、、;/夕$$X)、戶/2ereHwad/vergewMichaelsen(ir夕、口$$JX)、P/zere〃wacowmww&w.ma(7、乂々$$_^)、戶/zeren7waagres"s(7、夕$卜、jy千乂^S;^、)、戶o"/0(irz7i^wa&Ms/H'wewwilizuka(^f乂$$^>、)、絲蟲丘蟲引(7k6z/ex/z加toz'Nomura)、Ziw"o^H/iwgotoz.Hatai=丄./S"oc/a/^Stephenson(〕、卜々<卜s^乂(工y$sx))等一般統(tǒng)稱為蚯蚓的環(huán)節(jié)動(dòng)物門寡毛綱類生物。本發(fā)明方法中，先將活蚯蚓在明亮處放置特定的時(shí)間。即，從養(yǎng)殖床中取出活蚯蟲引，轉(zhuǎn)移到托盤這樣的平箱中，在陽光下或夜間在電照明下保持明亮放置10~50小時(shí)。這時(shí)平箱內(nèi)的收納量設(shè)置為形成30-60mm，優(yōu)選40~50mm厚的量。由于蚯到具有夜行性，放置在明亮處，發(fā)揮自我防御的本能，為了阻斷光，防止水分蒸發(fā)而附著的污物來覆蓋體表，所以反復(fù)數(shù)次通過適當(dāng)?shù)姆椒ǔミ@些污物，最后從腸道內(nèi)排泄出固體物質(zhì)或體液來覆蓋體表。于是，在這期間內(nèi)，在平箱中，大量的活蚯蚓呈相互疊在一起的狀態(tài)，各個(gè)蚯蟲引為了確保暗處而鉆入其他蚯到的身體之下，相互接觸，通過摩擦，將覆蓋于體表的污物、排泄物擦落。于是，例如用無紡布等覆蓋在活蚯劃上，擦落的污物、排泄物就能夠被其吸附，不費(fèi)力即可除去。本發(fā)明方法中，將這樣除去污物或排泄物的活蚯到l水洗后，與有機(jī)酸接觸，急速形成讓活蚯封l產(chǎn)生不適感的生活環(huán)境。與該有機(jī)酸的接觸，既可以將有機(jī)酸粉末直接撒在活蚯封l上，也可噴灑高濃度的有機(jī)酸水溶液。這時(shí)使用的有機(jī)酸，可以列舉，例如醋酸、蘋果酸、檸檬酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸等。所述物質(zhì)既可單獨(dú)使用，也可2種以上混合使用。特別優(yōu)選的有機(jī)酸是檸檬酸。這樣的情況下，如果活蚯蟲引長時(shí)間與有機(jī)酸粉末或高濃度的有機(jī)酸水溶液接觸，就會(huì)死亡，或者失去生活能力，而不能排泄出消化道內(nèi)的消化物，所以活蚯蟲引與有機(jī)酸的接觸要盡量快，通常在30秒以內(nèi)，優(yōu)選在20秒以內(nèi)就必須用水稀釋有機(jī)酸，調(diào)整pH至2-5的范圍。所述的用水稀釋必須迅速進(jìn)行。時(shí)間過長將引起蟲丘蟲引死亡，因此必須充分注意。在本發(fā)明的方法中，利用有機(jī)酸的殺菌作用，暫時(shí)對活蚯賴進(jìn)行殺菌，然后，通過冷凍真空干燥進(jìn)一步殺菌，能夠切實(shí)更保證殺菌效果。在本發(fā)明的方法中，將夜行性的活蚯蚓放置在難以行動(dòng)的生活環(huán)境下即明亮處，然后，將該活蚯蚓放入迅速產(chǎn)生不適感的生活環(huán)境下，活蚯蚓由于自我保護(hù)本能釋放出污物、排泄物等固體物質(zhì)或體液以改善生活環(huán)境，自動(dòng)地進(jìn)行凈化。有機(jī)酸具有殺菌性，所以在本發(fā)明的方法中，如上所述，利用有機(jī)酸，發(fā)揮排泄殘留在消化道內(nèi)的消化物的作用，同時(shí)能夠殺滅水洗無法除去的雜菌。為了發(fā)揮所述的身體保護(hù)機(jī)能，必須存在水分，由于活蚯到l的組織的65%是水分，所以用于發(fā)揮所述身體保護(hù)機(jī)能的時(shí)間尚且有些寬余，但是如果活蚯封l死亡，就一無所得，所以將活蚯到l放置在促使其產(chǎn)生不適感的生活環(huán)境下的時(shí)間必須慎重控制。所述時(shí)間受條件控制，通常在3180分鐘范圍內(nèi)。將活蚯封l放置在與有機(jī)酸接觸而促使其產(chǎn)生不適感的生活環(huán)境下，不僅將殘留在消化道內(nèi)的消化物排出，還將含有產(chǎn)生惡臭的氨和對人體有毒的砷的體液排出，氨幾乎被完全除去。以往，由于將洗凈的活蚯蟲引直接進(jìn)行磨碎冷凍，因此無法除去氨，在后續(xù)的冷凍真空干燥工序中除去氨，但不能完全除去氨，產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊，產(chǎn)品的品質(zhì)管理出現(xiàn)困難。并且，在冷凍真空干燥工序中，為了除去氨，易損傷該工序中的裝置，必須進(jìn)行繁瑣的維護(hù)，運(yùn)行成本增加，無法避免成本方面的不利。而且，活蚯蟲引的氨含量隨季節(jié)變動(dòng)，即使少量殘留也會(huì)引起胃炎，所以出現(xiàn)制品的品質(zhì)管理難的問題，但是根據(jù)本發(fā)明方法，在進(jìn)行冷凍真空干燥前幾乎完全除去氨，即使微量殘留的量也可以通過冷凍真空干燥而完全地除去，所以具有能夠生產(chǎn)均一品質(zhì)的產(chǎn)品的優(yōu)點(diǎn)。其次，將實(shí)質(zhì)上完全除去了污物的蟲丘到活體用純水洗凈后，磨碎形成液狀至糊狀的磨碎物。所述磨碎采用例如勻漿機(jī)、混合機(jī)、高速攪拌機(jī)、混砂機(jī)、加壓型細(xì)胞破壞裝置，通常在1~25°C，優(yōu)選在2~15。C溫度下進(jìn)行。接著將所述磨碎物放入不銹鋼盤中，干燥，這時(shí)，蚯蚓活體所含的酶不作用于活細(xì)胞而對死細(xì)胞瞬間作用，并發(fā)熱、腐敗產(chǎn)生強(qiáng)腐敗性的氣體，所以為了防止所述情況，必須迅速置于-18。C至-35。C的溫度下，采用能夠抑制酶作用的冷凍真空干燥。為了不損失蚯賴原有的藥理作用進(jìn)行粉末化，必須迅速冷凍，但是另一方面過短時(shí)間內(nèi)冷凍，則使與作為蚯蟲引糊主要成分的蛋白質(zhì)同時(shí)存在的雜質(zhì)形成點(diǎn)班狀的不冷凍部分，無法分離，所以不優(yōu)選過度迅速冷凍。因此，冷凍在-18。C--35匸低溫下進(jìn)行20~240小時(shí)，優(yōu)選進(jìn)行50-170小時(shí)。冷凍真空干燥時(shí)，選擇在除去水分的同時(shí)也除去雜質(zhì)的條件是重要的。因此，在50Pa以下的壓力下，-60°0至+90°。的溫度中，溫度階段性上升，優(yōu)選控制在10-60小時(shí)的范圍內(nèi)。例如，如上所述，磨碎物需要在-18。C至-35。C的溫度下冷凍20-240小時(shí)，然后，使溫度在-60。C~十9(TC之間，壓力在4~80Pa之間，分多階段變化，冷凍真空干燥10~60小時(shí)，能夠得到無菌狀態(tài)的淡黃色蚯衫j干燥粉末。這時(shí)，通過真空抽吸進(jìn)行脫氣。在本發(fā)明方法中，通過選擇干燥條件，能夠明顯縮短以往冷凍干燥所需的100小時(shí)或100小時(shí)以上的時(shí)間。這樣所得的蚯賴干燥粉末根據(jù)蚯到l的種類、采集地點(diǎn)、采集時(shí)間會(huì)有一些變動(dòng)，粉末100g中，含有精氨酸70~120mg、賴氨酸110-150mg、組氨酸35~60mg、苯丙氨酸55~80mg、酪氨酸50~75mg、亮氨酸100~150mg、異亮氨酸60~90mg、蛋氨酸25~40mg、纈氨酸70~105mg、丙氨酸85~135mg、甘氨酸75105mg、脯氨酸6085mg、谷氨酸210~300mg、絲氨酸80~110mg、蘇氨酸75~110mg、天冬氨酸150-220mg、色氨酸15~30mg及胱氨酸2035mg。具體實(shí)施例方式以下，通過實(shí)施例對本發(fā)明的具體實(shí)施方式進(jìn)行說明。實(shí)施例1將活的粉正蟲引(丄Mm6n'ciwra6e〃w"30kg放入平箱中，平鋪成約5cm厚，在熒光燈照射下保持24小時(shí)，用無紡布覆蓋在活蚯蚓上，體表上分離的污物、排泄物吸附在無紡布上，除去后進(jìn)行水洗。再均勻地撒入檸檬酸粉末250g，過15秒后加入30升純水稀釋。剛加入水后的pH為2.25,完全稀釋后的pH為2.74。再將浸泡在所述稀釋檸檬酸中的蚯到l在2(TC下放置60分鐘，蚯蚓為了緩解對于其本身來講不適的生活環(huán)境，體液隨著消化道內(nèi)的消化物排出體外，同時(shí)造成惡臭的氨和對人體有害的砷也一起排泄出來。以往，由于必須在pH3~6.5的擰檬酸水溶液中至少浸泡1小時(shí)左右，蚯蟲l變得虛弱，損失多，所以這樣迅速與高濃度的檸檬酸接觸的結(jié)果，蚯蚓沒有變虛弱，且能夠幾乎完全除去氨。然后從臟的檸檬酸水溶液中取出活蟲丘蟲引，水洗后，用勻漿機(jī)在l(TC下進(jìn)行磨碎，調(diào)制成蚯封l糊。再將所述蚯封l糊轉(zhuǎn)移至不銹鋼盤上，瞬間驟冷至-30°C,在該溫度下維持50小時(shí)慢慢冷凍。這樣，冷凍的蚯封l糊在-35。C下緩慢減壓至50Pa并保持3小時(shí)后，溫度升溫至20。C,在40Pa的壓力下保持12小時(shí)，再升溫至40。C,在35Pa壓力下保持25小時(shí)，最后升溫至80。C,在20Pa壓力下保持5小時(shí)，進(jìn)行冷凍真空干燥。通過所述處理得到含水量8質(zhì)量％的淡黃色蚯蚓干燥粉末。這樣得到的干燥粉末的氨基酸含量如表1所示。實(shí)施例2用陸正到l(丄z^6n'cw^re^n》30kg代替實(shí)施例1中的粉正蟲l30kg，與實(shí)施例1完全相同進(jìn)行處理，得到淡黃色的蚯蚓干燥粉末。由此所得的干燥粉末的氨基酸含量如表1所示。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>實(shí)施例3用蘋果酸160g取代實(shí)施例1中的檸檬酸250g，與實(shí)施例1完全相同進(jìn)行處理，得到與實(shí)施例1所得物質(zhì)幾乎相同組成的深黃色蚯蟲引干燥粉末。參考例實(shí)施例1所得的蚯封l干燥粉末按照J(rèn)P2716472B公報(bào)的實(shí)施例所記載的方法進(jìn)行處理，調(diào)制成精制蛋白酶。用所述精制蛋白酶0.5jug,加入精制人血纖維蛋白溶酶原(KABIAB社制0.05CU)反應(yīng)，測定反應(yīng)后的纖溶酶活性。再根據(jù)添加和未添加精制蛋白酶的情況的活性差異，算出纖溶酶水解活性，為0.145nmol/分。為了進(jìn)行比較，使用采用上述專利公報(bào)中的以往方法所得的蚯蟲引干燥粉末調(diào)制的精制蛋白酶同樣求出纖溶酶水解活性，為0.112nmol/分，發(fā)現(xiàn)才艮據(jù)本發(fā)明方法生產(chǎn)的蚯到l干燥粉末的酶活性約高1.3倍。工業(yè)實(shí)用性根據(jù)本發(fā)明方法，可以不需要任何人工操作，利用活蚯封l自身的行為，除去污物、排泄物，能夠得到不含細(xì)菌、沒有氨臭等惡臭、低砷含量的優(yōu)質(zhì)蚯蟲引干燥粉末。且根據(jù)本發(fā)明方法所得的蚯封l干燥粉末，與以往方法所得的物質(zhì)相比，含有效價(jià)高1.2-1.5倍的酶，且顯示出對細(xì)胞的浸透性大的效果。通過本發(fā)明方法生產(chǎn)的蚯封l干燥粉末，與通過以往方法生產(chǎn)的蚯到l干燥粉末相同，可作為血壓調(diào)節(jié)劑、抗高血脂癥劑、糖尿病治療劑、血栓溶解劑等使用。從蚯蟲引干燥粉末分離有效成分，能夠用作美白劑、除皺劑、濕滲治療藥、腳癬治療藥等用途。權(quán)利要求1.一種蚯蚓干燥粉末的生產(chǎn)方法，該方法包括，將活蚯蚓在明亮處放置10～50小時(shí)后，除去附著于體表的污物，再與有機(jī)酸接觸，然后，迅速用水稀釋調(diào)整pH至2～5，在該條件下保持3～180分鐘后，進(jìn)行水洗，磨碎，將所述磨碎物在-18℃～-35℃下冷凍20～240小時(shí)，然后在真空下進(jìn)行冷凍干燥，同時(shí)進(jìn)行脫氣。2.權(quán)利要求1所述的蚯蚓干燥粉末的生產(chǎn)方法，其中，有機(jī)酸是選自醋酸、蘋果酸、檸檬酸、乳酸、丙二酸及琥珀酸中的至少l種。全文摘要本發(fā)明涉及蚯蚓干燥粉末的生產(chǎn)方法，該方法包括將活蚯蚓在明亮處放置10～50小時(shí)后，除去附著于體表的污物，再與有機(jī)酸接觸，然后用水迅速稀釋調(diào)整pH至2～5，在所述條件下保持3～180分鐘后，水洗，磨碎，將所述磨碎物在-18℃～-35℃下冷凍20～240小時(shí)，在真空下進(jìn)行冷凍干燥，同時(shí)進(jìn)行脫氣，從而不降低蚯蚓體力且效率良好地從蚯蚓活體排泄殘留在其消化道內(nèi)的消化物，除去附著于體表的污物，而不會(huì)降低有用的藥理作用，由此生產(chǎn)蚯蚓的干燥粉末。文檔編號A61P3/06GK101543512SQ200810088558公開日2009年9月30日申請日期2008年3月28日優(yōu)先權(quán)日2008年3月28日發(fā)明者吉田悅男,石井陽一,須見洋行申請人:井石有限會(huì)社