專利名稱：：絨毛伸長劑的制作方法獄領(lǐng)域本發(fā)明涉及以乳酸菌、其死菌體或它們的加工物為有效成分的人、仔,的小腸絨刮申長劑。背景財小腸肚開始依次被稱為十二指腸、空腸、回腸，其中，與胃相連的十二指腸被固定在后腹壁上，而空腸、回腸則附著在腸間膜上，可以相當(dāng)自由的活動。該空、回腸被稱為腸間膜小腸，小腸指該部分。小腸在消化、吸收方面，是消化道中最重要的器官，為了增大消化、吸收的面積，實現(xiàn)了顯著的形態(tài)分化。作為小腸絲特征之一的小腸絨毛，是小腸粘膜的突出，被單層上皮細(xì)胞覆蓋，而且其細(xì)胞表面具有多達(dá)數(shù)千的稱為微絨毛的突起。絨毛構(gòu)造是小腸中的一大特征，并與吸收機(jī)能大大相關(guān)。僅將人的小腸考慮為圓筒形的情況下，其表面積是約0.331112，根據(jù)形成的環(huán)形鈹襞數(shù)，和進(jìn)"^形皿毛(長度lmm,約500萬個)，其表面積可達(dá)到約10m2。根據(jù)每1個吸收細(xì)胞，600個鵬毛(長度l拜)，其表面積進(jìn)一步達(dá)到200m2(約600倍)，顯著的增大了吸收效率。即，僅僅lMl的腸容積，具有約1咖2的吸收表面積。腸絨毛近回腸末端處變粗，絨毛和絨毛之間有小腸隱窩。該粘膜上皮中，大部分旺盛地細(xì)胞分裂，一邊反復(fù)增殖，一邊分化成吸收上皮，狀細(xì)胞向絨毛表面的上方移動，置換老的絨毛上皮。ltM卜，腸上皮細(xì)胞中混雜了許多內(nèi)分泌細(xì)胞，分泌局部的、全身的多種激素。由微絨毛吸收碳水化合物、蛋白質(zhì)、月旨肪等營養(yǎng)物質(zhì)。消化酶一直等候在該部分中，營養(yǎng)物質(zhì)一旦碰到這些,被，，很,被^A至鵬壁內(nèi)。微絨毛細(xì)胞的壽命是24小時，是人體內(nèi)最短命的細(xì)胞。M于人生存必不可少的營養(yǎng)吸收的現(xiàn)場，可以說一直保^的靈,的細(xì)胞是必須的。另外，小腸是幾乎無菌的狀態(tài)。哺乳動物的肉眼病變是以小腸壁微薄化為特征，it31^壁可以觀察到內(nèi)容物，在哺乳豬中，未消化的凝固物滯留在胃內(nèi)。病毒在小腸的粘膜上皮細(xì)胞中增殖，引起細(xì)胞變性壞死。由于小腸絨毛的萎縮，絨毛長度和隱窩長度的比值可以陶氏到l:1以下。因為小腸鵬有排除夕卜來異物的強(qiáng)烈的免疫機(jī)制，隨著絨毛開始萎縮，細(xì)菌侵入(感染)變得容易了，成為一般沒有感染力的細(xì)菌變得容易感染的原因。隔離體外環(huán)境的消化道粘膜上皮經(jīng)常暴露于大量的食餌性抗原或腸道菌群，以形卜來性的細(xì)菌、病毒辦原體。在消^I中,以派伊爾氏淋巴集結(jié)(Pey&spatch)為代表的淋巴組織發(fā)達(dá)，ffi31MA腸道內(nèi)的微生物或食俾性高M(jìn)等抗原進(jìn)行監(jiān)控，實現(xiàn)免M視的重要作用。覆蓋派伊爾氏淋巴集結(jié)的上皮被稱為FAE(連濾泡上皮)，已知表現(xiàn)出與一般的絨€±皮不同的性質(zhì)。在FAE中散布著被稱為M細(xì)胞的、微絨毛不發(fā)達(dá)的上皮細(xì)胞，M31使被稱為胞轉(zhuǎn)作用的細(xì)胞內(nèi)運輸系統(tǒng)發(fā)達(dá)、積極地mA腸內(nèi)抗原，將其交給派伊爾氏淋巴集結(jié)的免自胞，因此被認(rèn)為承擔(dān)著發(fā)動免M視的主要作用。如果可以理解并人為的調(diào)節(jié)以派伊爾氏淋巴集結(jié)為代表的M細(xì)胞的機(jī)能，就可以與免,答的調(diào)控相聯(lián)系。但是，因為M細(xì)胞的鄉(xiāng)M數(shù)目少，且缺少特異性的標(biāo)記^HF，對它的^細(xì)胞生物學(xué)的分析幾乎沒有進(jìn)展。船卜，腸道上皮細(xì)胞的緊密連接的膜分子的屏障機(jī)能(物質(zhì)滲透性)，被指出有參與過病的可能性。例如，由于幼兒期緊密連接形成的不充分，^T得對SA的，抗原的選擇性，從而引^1敏疾病癥狀。以前關(guān)于乳酸菌和腸絨毛高度的關(guān)系的文獻(xiàn)很少，對于與腸絨毛上皮細(xì)胞的關(guān)系，例如，己知定居腸道的一些學(xué)L酸制齊啲制造方法，其是在存在乳酸菌纖球菌(Streptococcusfaecalis)的餅下組織培養(yǎng)糊的腸絨毛上皮細(xì)胞，只趙^收集駄腸上皮細(xì)胞內(nèi)的菌株，j頓這些衫謎的菌株，用常規(guī)方法形成乳酸菌制劑(例如，參見專利文獻(xiàn)l)。It(^卜，最近已知具有增力鵬絨毛高度，且，腸道吸收的功能，治療短腸癥狀的有效的產(chǎn)生EGF(上皮生長因子)的重組乳酸菌，具體的是產(chǎn)生EGF的重組乳酸乳球菌(Lactococcuslactis)、產(chǎn)生EGF的重組干酪乳桿菌(Lactococcuscasei)(例如，參見專利文獻(xiàn)2)。另一方面，作為乳酸菌自身鄉(xiāng)加工物的用途，可以例舉隨著瞎不斷增加的過敏性疾病的預(yù)防、治療。例如，已知對^^球菌等乳酸菌實施規(guī)定的加工，從乳酸菌中抽提作為抗過敏劑的有效成分的方法(例如，參見專利文獻(xiàn)3),或以屬球菌屬、腸球菌屬(enterococcus)等的腸道內(nèi)細(xì)菌的活菌體作為抗過鵬分的腸道內(nèi)菌叢改善組糊(例如，參見專利文獻(xiàn)4)，或以嗜酸乳酸菌(Lactobacilliusacidophilus)等乳酸菌的菌體為有艦分的IgE抗體產(chǎn)生抑制劑或皿敏劑(例如，參見專利文獻(xiàn)5)。此外，已知以屬于腸球菌屬的菌體的酶加工菌為主要成分的抗過敏劑(例如，參見專利文獻(xiàn)6)，或從人的腸道內(nèi)細(xì)菌群分離的乳酸菌，包括糞腸球菌(AD101株)或羅伊氏乳桿菌(AD0002株)中的一種以上的菌體的I型過敏抑制劑，其具有組織應(yīng)游離抑制皿(例如，參見專利文獻(xiàn)7)，或以乳酸菌的菌體成分為主成分的輔助性T細(xì)胞1型(Thl)誘導(dǎo)劑(例如，參見專利文獻(xiàn)8)，或從屬于嗜酸酪桿菌(Lactobacillusacidophilus)的乳酸菌、屬于酵母酪桿菌(Lactobacillusfemientum)的乳酸菌，或它們組合成的組中釤腿的乳酸菌作為有效成分，含有所述有效成分的JiM敏劑(例如，參見專利文獻(xiàn)9〉。進(jìn)一步的，已知以糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)、屎腸球菌(Enterococcusfaecium)等乳酸菌、其死菌體、其加工抓離氏巨球形菌(Megasphaeraelsdenii)為有艦分的，攜帶甚至感染萬古霉素等藥物耐受性菌的家畜、家禽或魚貝類的感染防除劑(例如，參見專利文獻(xiàn)io)。專利文獻(xiàn)1特公昭46-38592號公報專利文獻(xiàn)2特表2005-529622號公報專利文獻(xiàn)3特開昭57-154132號公報專利文獻(xiàn)4特開平7-265064號公報專利文獻(xiàn)5特開平9-2959號公報專利文獻(xiàn)6專利第3040744號公報專利文獻(xiàn)7特開2000-95697號公報專利文獻(xiàn)8特開2003-137795號公報專利文獻(xiàn)9特開2004-26729號公報專利文獻(xiàn)10特開200"9421號公報
發(fā)明內(nèi)容斷奶仔豬的消化器官，在從母乳向皿用飼料轉(zhuǎn)換時飼料突然的變化的同時，處于斷奶或環(huán)境變化等的應(yīng)激狀態(tài)，在此瞎況下，經(jīng)?？梢钥吹接捎诓≡源竽c菌引起的腹渴癥狀。這是由于在斷奶前后仔豬腸道內(nèi)的變化，健康的腸絨毛劐申長的，如此，顯著的擴(kuò)展了腸的表面積，鵬消化吸收。此外，在每次哺乳的時候，從母乳供給了哺乳期間母乳中含有的IgA抗體，驢鄉(xiāng)縦的表面，被認(rèn)為可以防治大腸菌舗原性微生物附著在仔豬的腸絨祉。但是，斷奶切斷了營養(yǎng)豐富容易消化的母乳供應(yīng)，突然開始^ffi自用的飼料，腸粘膜的消化吸鄉(xiāng)艮不上這一變化，腸絨毛變短(參見ResVetSci1986Jan;40(1):3240)，營養(yǎng)成分的吸收能力斷氏。由于該狀態(tài)，不被吸收的營養(yǎng)成分到達(dá)大腸，弓胞包括這原性敝物的各種微生物的增殖。本發(fā)明的主題魏供，在包括人的動物中，艦小腸的絨刮申長，改善消化吸收的絨^申長劑。本發(fā)明人，沒有i頓根據(jù)現(xiàn)有獄的產(chǎn)生EGF的重組乳酸菌，而是向斷奶期的仔辦5口或經(jīng)鼻給藥某種糞腸球菌的死菌體，比較給藥的群懶卩沒有給藥的對照群體的小腸內(nèi)的絨毛長度，發(fā)現(xiàn)與對照組相比，給藥該乳酸菌的小腸內(nèi)的絨毛高M(jìn)著的伸長，從而完財發(fā)明。即本發(fā)明涉及(1)特征在于含有乳酸菌(但是，不包括產(chǎn)生EGF的重組乳酸菌)、其死菌體或它們的加工物作為有艦分的動物的小腸絨刮申長劑；或(2)戰(zhàn)(1)記載的動物的小腸絨刮申長抓辦征在于所述乳酸菌是屬于腸球菌屬的微生物；或(3)M(2)記載的動物的小腸絨刮申長劑，其特征在于所，于腸球菌屬的物是糞腸球菌(Enterococcusfeecalis);或(4)，(3)記載的動物的小腸絨毛伸長劑，其特征在于所述糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)是糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)ECM2(PERMBP10284);或(5)(1)至(4)中任一項記載的動物的小腸絨刮申長劑，，征在于以經(jīng)口或經(jīng)鼻給藥。財卜，本發(fā)明還涉及將(6)乳酸菌(但是，不包括產(chǎn)生EGF的重組乳酸菌)、其死菌體或它們的加工物作為動物的小腸絨割申長劑的艦方法；或(7)，(6)記載的方法，其特征在于所述乳酸菌是屬于J^^菌屬的微生物；或(8)上述(7)記載的方法，其特征在于所述屬于腸球菌屬的微生物是糞腸球菌(Enterococcusfaecalis);或(9)M(8〉記載的方法，^fT征在于所述糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)是糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)EC-12(PERMBP10284);或(10)上述(6)至(9)中任一項記載的方法，辦征在于以經(jīng)口或經(jīng)鼻給藥。本發(fā)明的小腸絨刮申長劑;1M31使小腸絨^申長，預(yù)期可以改善人的乳幼兒或斷奶期的仔豬的消化吸收，改善以消化吸收不良為起因的疾病，或改善切除小腸的短腸綜合征患者的消化吸收，改善營養(yǎng)不良狀態(tài)。圖1小腸組織的模式圖(Kerr,1999)。圖2為了說明小腸組織的術(shù)語(絨毛、隱窩)的圖。圖3顯示乳酸菌經(jīng)口給藥對仔豬小腸(空腸部分)絨毛高的影響的圖。具體實式作為本發(fā)明的小腸絨毛伸長劑，并不特別限于以乳酸菌(但是，不包括產(chǎn)生EGF的重組乳酸菌)、其死菌體或它們的加工物為有效成分，It&卜，作為本發(fā)明的方法，如果是以乳酸菌(但是，不包括產(chǎn)生EGF的重組乳酸菌)、皿定，;于作為對象的動物:合適的可以例舉豬以外的其它家畜、家禽類或?qū)櫸镱悾鳛榧倚?、家禽類，可以具體的例舉出豬、牛、馬、羊、山羊等家畜，雞、野鴨、鴕鳥、家鴨等家禽，作為寵物類，可以具體的例舉出狗、貓、兔子、倉鼠等。財卜，對于i柳方法中的動物，維的可以例舉家畜、家禽類或?qū)櫸镱悺Ｗ鳛樯鲜鋈樗峋?，?yōu)選的是屬于腸球菌屬(Enterococcus)、乳球菌屬(Lactococcus)、鏈球菌屬(Streptococcus)、學(xué)L酸桿菌屬(Lactobacillus)、明串珠菌屬(Leuconostoc)、片球菌屬(Pediococcus)、雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)或四聯(lián)球菌屬(tetragenococcus)中任一項的菌，特別優(yōu)選的是屬于腸球菌屬的菌。作為上述屬于腸球菌屬的菌，可以例,腸球菌、屎腸球菌、耐久腸球菌(Enterococcusdurans)等，特別雌的是糞腸球菌EC-12。作為J^EM于乳球菌屬的菌，可以例舉乳酸乳球菌、植物乳球菌(Lactococcusplantarum)、棉子糖乳球菌(Lactococcusraffinolactis)等。作為Jd^M于鏈球菌屬的菌，可以例辦熱鏈球菌(Streptococcusthemiophilus)等。作為±32^于乳酸桿菌屬的菌，可以例舉嗜酸乳酸桿菌(Lactobacillusaddophihis)、唾液乳酸桿菌(Lactobacillussalivarius)、短乳酸桿菌(Lactobacillusbrevis)、鼠^^乳酸桿菌(Lactobacillus>rhamnosus)、胚芽學(xué)L^桿菌(Lactobacillusplantarum)、J^士乳桿菌(Lactobacillushelveticus)、發(fā)齢L桿菌(Lactobacillusfermentum)、擬干酪乳桿菌(Lactobacillusparacasei)、干酪乳桿菌(Lactobacilluscasei)、德氏乳桿菌(Lactobacillusdelbrueckii)、羅伊氏乳桿菌(Lactobacillusreuteri)、格氏乳酸桿菌(Lactobacillusgasseri)、干酪乳酸桿菌(Lactobacillusjohnsonii)、高加索^J乳桿菌(Lactobacilluskefir)、布赫內(nèi)氏乳桿菌(Lactobacillusbuchneri)等。作為iJ^M于明串珠菌屬的菌，可以例舉乳明串珠菌(Leuconostoclactis)、腸系膜樣明串珠菌(Leuconostocmesentroides)等。作為戰(zhàn)屬于片球菌屬的菌，可以例辨害片球菌(Pediococcusdamnosus)等。作為上述屬于雙歧桿菌屬的菌，可以例舉短雙歧桿菌(Bifidobacteriumbreve)、"^歧桿菌(Bifidobacteriumlongum)、^#雙岐桿菌(B迅dobacteri咖adolescentis)、兩il^岐桿菌(Bifidobacteriumb迅dum)等，特別皿的是短雙歧桿菌。對于Jd^屬于四聯(lián)球菌屬的菌，可以例舉嗜鹽四聯(lián)球菌(Tetragenococcushalophilus)等。這些乳酸菌，可以結(jié)合使用一種或兩種以上的菌種。這些乳酸菌等，可以按照常規(guī)方法用任意斜牛培養(yǎng)獲得。在本發(fā)明中的乳酸菌，可以使用活菌、其死菌體^加工物。作為M死菌體，將按常規(guī)方法培養(yǎng)、集菌的乳酸菌菌Wfe凈、離心脫水、根據(jù)需要重復(fù)洗凈、脫水后，懸浮于蒸餾水、生理lk^等中，可以例舉出il31將該懸浮、艦過例如在80至115。C加熱30併中至3秒鐘獲得的死菌體懸浮、皿其千燥物,或者M(jìn)il用Y射線或中子射線照浙，死菌體懸浮液獲得的死菌體懸浮液^干燥物。作為該死菌體懸濁液的干燥手段，如果是公知的干燥手段，沒有特別的限制，可以例舉噴霧千燥、冷凍干燥等。根據(jù)情況，在艦加熱殺菌處理的前后，或者干燥處理的前后，也可以進(jìn)行酶處理、表面活性劑處理、磨碎、粉碎處理。根據(jù)這些M獲得的物品，包括在本發(fā)明的死菌體或其加工物內(nèi)。作為本發(fā)明的小腸絨毛伸長劑,特另iKM的^含以乳酸菌糞腸球菌EC-12的死菌體或其加工物為有皿分的組合物。糞腸球菌ECM2于2005年2月25日向3拉行政法A^業(yè)fe^^合研舒;專利生物臓中心(亍305-8566日本茨城縣筑波市東l丁目1番地l中鄉(xiāng)6)作為[FERMBP-10284提交生物保藏。作為該糞腸球菌EC-12(PERMBP-10284)的培養(yǎng)方法，包括以前公知的乳酸菌培養(yǎng)方法，沒有特別的限制，合適的可以例對頓乳酸菌生長用培養(yǎng)基，在37。C培養(yǎng)，維持pH在中性附近的同時培養(yǎng)約5至120小時，優(yōu)選培養(yǎng)16至28小時，獲得活菌數(shù)約107至10"Vml，優(yōu)選約108至10"Vml的培養(yǎng)液的方法。本發(fā)明的小腸絨^申長劑作為制劑艦的時，可以結(jié)合4頓淀粉、乳糖、大豆蛋白等載體、賦形劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑、穩(wěn)定劑、懸濁劑等添加劑，用普遍已知的方法制劑化為粉劑、片劑、顆粒抓麟抓液劑等。財卜，也可以將葡糖,、乳寡糖、左方^^類等,^纖維素、P葡聚糖、幾丁質(zhì)等的食物纖維原料等與益生元材料結(jié)合使用。這些制齊阿以直接給藥，也可以與寵物食品、飼料等混合喂食。此外，本制劑作為小腸手術(shù)后的患者的小腸絨€#長抓可以添加在食品或食品原料中l(wèi)柳。對其種類沒有特別的限制，可以例舉出，例如，礦泉水、運動飲料、果汁、牛奶、豆奶、酒、咖啡、紅茶、煎茶、烏龍縛各種飲料，,、t畑,郝丁、餅干、面包、蛋糕、果凍、煎餅等烘烤的點心、羊羹等日式點心、冷凍甜點、口香糖等面包、點心類，或面條、蕎麥面等面食類，或魚糕、火腿、魚肉腸等魚肉揉捏(練。)的制品、味噌、醬油、調(diào)味汁、蛋黃醬、甜味劑等調(diào)味類、或奶酪、黃油等乳制品、或豆腐、蒴篛、或者咸烹海味、餃子、炸丸子、沙拉等各種家常菜。在本發(fā)明的小腸絨刮申長劑或使用方法中的給藥量或給藥次數(shù)，根據(jù)作為對象的動物的種類、體重、日齡、月齡、病狀、恢復(fù)狀態(tài)，可以酌情決定，對于人雌在乳幼兒中或小腸切除后給藥，對于麟家畜，tt^在斷奶期給藥。例如，在i頓糞腸球菌ECM2的死菌體棘加工物的情況下，在寵物食品或飼料中包含0.0001%至0.2%，更理想的，相對于飼料，含有0.01%至0.05%,對于人皿人，可以使用50mg至600mg/日作為一般的每日的，量和喂食次數(shù)。以下根據(jù)實施例對本發(fā)明進(jìn)行具體的說明，并不是將本發(fā)明的M范圍限定在這些示例的范圍內(nèi)。實施例1(微目的)由于斷奶，仔豬的小腸絨毛萎縮，對消化吸收產(chǎn)生不良影響，因此需要預(yù)防絨毛高的萎縮或者早日恢復(fù)。在經(jīng)口或經(jīng)鼻給藥糞腸球菌ECM2的死菌體時,在小腸中對影響絨毛高的影響進(jìn)行組織學(xué)的評價，，究了小腸組織培養(yǎng)中的免疫相關(guān)^f的基因^iifi。(糞腸球菌EC-12的死菌體的制備)將糞腸球菌ECM2(PERMBP-10284)在ROGOSA培養(yǎng)基中37。C下培養(yǎng)24小時的前培養(yǎng)液，按0.1(v/v)接種在包含4%酵母提取物、3%多肽、10%乳糖的液體培養(yǎng)基上，一邊艦恒pH(PH-STAT)、用氫氧化鈉7K溶液調(diào)整到pH6.8至7.0，"ii于37t:進(jìn)行22至24小時的中和i^。培養(yǎng)結(jié)束后，用，離心機(jī)將菌體分離、回收后，加7jC稀釋至原來的液體量，再次用用連續(xù)離心機(jī)分離、回收菌體。該操作一共重復(fù)4次，洗凈菌體。然后，懸浮于縫的水中，在10(TC滅菌30射中后，^ffl噴霧千燥將菌體千燥，制備戯鵬艦的菌體粉末(以下稱為"EC-12千燥粉末')。4柳下列EC-12千燥粉末，即予跌制備予跌用小魏稀釋10倍的預(yù)混糊，按含有0.05。/。EC-12千燥粉末的比例，在基礎(chǔ)鵬SDSNo.l(日本配糊料株式會社生產(chǎn))中添加EC-12而成的EC-12干燥粉末。Jl^卜，對照飼料使用的是在基礎(chǔ)飼料中添加0.5%市售小麥粉。作為供K^t)，將剛斷奶的仔豬6頭，分為ECM2千燥粉末經(jīng)口給藥組(OE組)和對照組(OC組)，OE組中按戰(zhàn)在飼料中添加0.05%(w/w)EC-12干燥粉末，OC組中分別^J^的對照，10誠11天。jJt^卜，將剛斷奶的仔豬6頭，分為ECM2經(jīng)鼻給藥組(NE組)和對照組(NC組)，對于NE組，向左右鼻腔內(nèi)每天按10mg/kg體重噴霧lml的EC-12千燥粉末懸濁PBS10域11天，對于NC組，向左右鼻腔內(nèi)每天按10mg/kg體重噴霧lml的PBS10天或11天。,后摘出小腸并切出一部分，制作成薄片標(biāo)本。更具體的是，將小腸的兩個部位(空腸末端、回腸中部)展開后，用生鵬7jC冼滌除去內(nèi)^tl，戰(zhàn)泡苯乙烯上伸展貼附。在10%中性緩沖福爾馬林中固定后，為了呈現(xiàn)斷面將其細(xì)切成3至5mm左右的厚度，在10%中性緩沖福爾馬林中再固定。組織包埋在石蠟中，切成4Mm厚的薄片后，貼附在載玻片上，實施HE染色。用CCD照相艦所有斷面進(jìn)行數(shù)字照相，{鯛MHImage計算測魏毛高度和隱窩深度。另夕卜用鵬測微尺的刻度計算測量，按比例算出mm值。財卜，采集小腸粘膜固有層，在RPMI1640培養(yǎng)基中37'C線2天。此時，將EC-12干燥粉末作為抗原使用，分附歸上清中的IgA和IgG濃度，以及培養(yǎng)后組織中的各種免疫物質(zhì)的基因表達(dá)。在IgA和IgG濃度測量中，j頓豬IgAELISA定SU劑盒(Bethyl，Montgomery,TX，USA)和豬IgGELISA定fii^劑盒(Bethyl)。{柳NucleoSpinRNAD試齊!j盒(Macherey-Nagel，Easton,PA,USA)從於組織中提取mRNA。4頓ReverTraAce(TOYOBO，Tokyo)進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。4頓實時PCR分析IFN個IL"8(嗜中性粒細(xì)胞活化因子)、IM0(趨化因子合成抑制因子)、TNF"a的mRNA的表達(dá)，用管g因GADPH的數(shù)值校正。(結(jié)果)圖l是小腸組織的模式圖(Keir,1999)，圖2是為了說明小腸組織的術(shù)語(絨毛、隱窩)的亂圖3題示乳酸菌EC-12千燥粉末經(jīng)口給藥對仔豬小腸(空腸部分)絨毛高的影響的圖。從圖3中，可以了解JMEC-12干燥粉末經(jīng)口給藥，空腸部分的絨割申長變高了。此外，表1顯示了ECM2千燥粉末經(jīng)口給藥i微的回腸和空腸中絨毛高度的測定結(jié)果，表2顯示了EC-12千燥粉末經(jīng)鼻給藥i微的回腸和空腸中絨毛髙度的測定結(jié)果。從表l中了解，OE組與OC組相比，小腸絨毛高顯示為駄的值。而且，從表2中了解，NE組與NC組相比，小腸絨毛高顯示為駄的值。因為經(jīng)口給藥和經(jīng)鼻給藥，絨^/隱窩比與對照相比都變大了，因此可以確定在空腸和回腸中絨毛劐申長了的。表1取材部位微組個體編號絨毛高度(mm)隱窩深度(mm)絨毛/隱窩比回腸對照豬l0.210.270.80豬20.150.260.59豬30.160.240.69平均0.180.260.70平均標(biāo)準(zhǔn)偏差0.030.01O.UECM2自鎖豬40.260.221.21豬50.290.261.13豬60.140.200.75平均0.230.221.03平均標(biāo)準(zhǔn)偏差0.080.030.25t-檢驗0.320.150.096空腸對照豬l0.230.290.82豬20.250.310.81豬30.190.240.80平均0.220.280.81標(biāo)準(zhǔn)偏差0.030.030.01ECM2給藥豬40.320.231.42豬50.400.341.21豬60.350.291.30平均0.360.291.31標(biāo)準(zhǔn)偏差0.040.05Oilt-檢驗0.010,930.2表2取材部位i微組個體編號絨毛高度隱窩深度絨毛/隱窩(mm)(mm)比回腸對照￡20.170.350.52G0.230.340.70m20.350.271.35平均0.250.320.86標(biāo)準(zhǔn)偏差0.090.050.44E(M2給藥fl0.290.300.99f40.250.260.99ml0.390.241.71平均0.310.271.23標(biāo)準(zhǔn)偏差0.070.030.42t-檢驗0.430.160.34空腸對照f20.400.361.14f30.200.310.70m20.260.281.02<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>小腸絨毛組織的培養(yǎng)上清中的IgA和IgG濃度的測定結(jié)果是，在OE組和OC組、以及NE組和NC組的樹可情況下，M31小腸粘膜組織線對產(chǎn)生的免疫球蛋白量沒有大的影響。從小腸粘膜固有層的組織片來看，在OE組中IFN，和n^8的生產(chǎn)增強(qiáng)，相反IL"10,表現(xiàn)出較低值的傾向。在NE組中，TNF《的生產(chǎn)亢進(jìn)，但是IL"10械彭見出較低值的傾向。際了艦EC-12千燥粉末的給藥，刺激了小腸組織中炎癥性趨化因子的生產(chǎn)，從而刺#±皮細(xì)胞增殖的可能性。權(quán)利要求1、動物的小腸絨毛伸長劑，其特征在于其含有乳酸菌、其死菌體或它們的加工物作為有效成分，其中乳酸菌不包括產(chǎn)生EGF的重組乳酸菌。2、權(quán)利要求1記載的動物的小腸絨割申長劑，其伊征在于0M乳酸菌是屬于腸球菌屬的微生物。3、權(quán)利要求2記載的動物的小腸絨毛伸長抓其特征在于所述屬于腸球菌屬的微生物是糞腸球菌。4、權(quán)利要求3記載的動物的小腸絨刮申長劑，其特征在于戶脫糞腸球菌是糞腸球菌EC-12(FERMBP10284)。5、權(quán)利要求1至4中任一項記載的動物的小腸絨刮中長劑，其特征在于其經(jīng)口或經(jīng)鼻給藥。6、j頓乳酸菌、艦菌體或它們的加工物作為動物的小腸絨€#長齊啲方法，其中乳酸菌不包括產(chǎn)生EGF的重組乳酸菌。7、權(quán)利要求6記載的方法，，征在于所述乳酸菌是屬于腸球菌屬的微生物。8、權(quán)利要求7記載的方法，其特征在于所i^于腸球菌屬的微生物是糞腸球菌。9、權(quán)利要求8記載的方法，其特征在于所述糞腸球菌是糞腸球菌EC-12(FERMBP10284)。10、權(quán)利要求6至9中任一項記載的方法，其特征在于其經(jīng)口或經(jīng)鼻給藥。全文摘要本發(fā)明提供對于包括人的動物，可促進(jìn)小腸的絨毛伸長，改善消化吸收的絨毛伸長劑。培養(yǎng)乳酸菌后，用水洗凈除去培養(yǎng)基成分，過熱殺菌，經(jīng)口或經(jīng)鼻給藥給人的乳幼兒或斷奶期的仔豬，通過促進(jìn)小腸的絨毛伸長，改善以消化吸收不良為起因的疾病。此外，改善切除小腸的短腸綜合征患者的消化吸收，改善營養(yǎng)不良狀態(tài)。對于上述乳酸菌，優(yōu)選的是糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)EC-12。文檔編號A61K35/66GK101284021SQ20081009638公開日2008年10月15日申請日期2008年4月9日優(yōu)先權(quán)日2007年4月9日發(fā)明者塚原隆充,松原范宜,渡邊卓巳,牛田一成申請人:康貝株式會社