專利名稱：具有抗癌活性的2,3,3a,4-四氫硫色烯并二氫吡唑系列化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明專利涉及含氮硫的雜環(huán)化合物，2,3,3a,4-四氫硫色烯并二氫吡唑系列 化合物的抗癌活性。
背景技術(shù)：
普遍認為癌癥主要是為化學(xué)的、物理和生物(真菌毒素、病毒等)的致癌因 素所引起。癌癥因所在身體部位不一樣分為食管癌、肺癌、乳腺癌、肝癌等。目 前雖然對抗癌藥物進行大量研究，如發(fā)現(xiàn)了順鉑、長春化堿、長春新堿、喜樹堿、 及其衍生物、紫杉醇等一系列抗癌活性藥物，但是還沒有非常有效的廣譜或窄譜 的抗癌藥物出現(xiàn)。因此，開發(fā)和探求一種高效低毒、具有治療預(yù)防雙重功效的廣 譜和窄譜抗抗癌活行的新化合物，成為當(dāng)前一項具有重要意義的研究工作。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于彌補上述現(xiàn)有技術(shù)中的不足之處，提供2,3,3a,4-四氫硫色
烯并二氫吡唑系列化合物(如I 、 n所示)的良好抗癌活性。
其中
當(dāng)R卜R2、 R3中有一個或兩個為H時，另外兩個或一個分別為
R尸X (卣素取代基)、-OH、 -OMe、 -OEt、 -Me、 -Et、 C3-do烴基或 取代烴基
R2=X (鹵素取代基)、Me、 -OMe、 -OEt、 -CF3、 C3-do烴基或取代烴 基
R3=X (卣素取代基)、Me、 -Ome、 C3-C化烴基或取代烴基R4=H、 -Me、 C2-Qo烴基或取代烴基
R5=-COCH3、 -COCH2CH3、 -COCH2CH2CH3
當(dāng)R6、 R7、 Rs中有一個或兩個為H時，另外兩個或一個分別為
R6=H、 X (卣素取代基)、-OMe、 -OEt、 -Me、 -Et、 -NMe2、 C2-C1()烴基
或取代烴基
R產(chǎn)H、 X (卣素取代基)、-OMe、 -OEt、 -Me、 -Et、 -NMe2、 C2-Cio烴基或
取代烴基 R8=H、 X (卣素取代基)、-Me、 卣素取代基是指氟、氯、溴、碘。 抗癌活性試驗
2,3,3a,4-四氫硫色烯并二氫吡唑系列化合物對8種癌細胞的體外抑制效果是 通過MTT法測得。結(jié)果見體外抗癌結(jié)果表。
供試癌細胞人肝癌細胞HepG2，大鼠乳腺癌細胞SHZ-888，人乳腺癌細胞 MCF-7， SGC-7901， KB， L-02。
細胞培養(yǎng)RPMI Medium 1640細胞培養(yǎng)基，10%(體積分數(shù))小牛血清和 0.01。/。L-谷氨酰胺配制成培養(yǎng)液。培養(yǎng)的細胞株置于37'C、 5%(體積分數(shù))002 飽和濕度下常規(guī)培養(yǎng)傳代，實驗均用處于對數(shù)生長期的細胞。
供試化合物為
AB
Al:FR2= HBhCIR2 =H
A2:Ri =FR2= -OMeB2:R2=-OMe
A3:FR2=C1B3:Ri = ClR2=CI
A4:R產(chǎn)FR2=MeB4:R4=C1R2=MeC D MTT實驗用0.25%胰酶將細胞消化并制成單細胞懸液，按每孔6000-7000個 細胞接種于96板，37°C、 5%(體積分數(shù))0)2過夜，加入不同濃度的樣品，分別以單 純的培養(yǎng)液和未經(jīng)藥物作用的細胞作為空白對照和陰性對照,每組設(shè)8個復(fù)孔,繼 續(xù)培養(yǎng)48或72h。每孔加MTT(5mg/mL)20ul繼續(xù)培養(yǎng)4h，棄上清液，每孔加DMSO 150uL， 37。C孵育10min，酶標(biāo)儀檢測570nm波長處的吸光度(A57o)值。按以下公式 計算平均抑制率
陰性對照一A實驗樣品)/ (A陰性對照—A空白對照)X 100% 從實驗結(jié)果可以看出，2,3,3a,4-四氫硫色烯并二氫吡唑類化合物對癌細胞都 有不同程度的抑制活性。
本發(fā)明化合物廣泛應(yīng)用于抗癌藥物領(lǐng)域，有廣闊的研究價值和應(yīng)用前景。
體外抗癌試驗結(jié)果表
_IC50(ug/mL)
CompoundHepG2SHZ-888 MCF-7SGC-7卯1KBS180
Al252540303030
A2352540353025
A3403025202040
A4204030352530
Bl403025403035
B2352035352020
B3203040303525
B4352525354040
C352025253045
D30254035402權(quán)利要求
1.2，3，3a，4-四氫硫色烯并[4，3-c]吡唑類化合物具有抗癌活性。
2.根據(jù)權(quán)利要求l，2,3，3a,4-四氫硫色烯并[4,3-c]吡唑類化合物，其特征在于用通式(I)、 (II)表示化合物其中當(dāng)R卜R2、 R3中有一個或兩個為H時，另外兩個或一個分別為X (鹵素取代基)、-OH、 -OMe、 -OEt、 -Me、 -Et、 C3-do烴基或取R2=X (鹵素取代基)、Me、 -OMe、 -OEt、 -CF3、 C3-do烴基或取代烴基 R3=X (鹵素取代基)、Me、 -Ome、 C3-Cu)烴基或取代烴基R4=H、 -Me、 C2-d。烴基或取代烴基R5=-COCH3、 -COCH2CH3、 -COCH2CH2CH3當(dāng)Re、 R7、 Rs中有一個或兩個為H時，另外兩個或一個分別為Rs=H、 X (鹵素取代基)、-OMe、 -OEt、 -Me、 -Et、 -NMe2、 C2-C1()烴基 或取代經(jīng)基R產(chǎn)H、 X (卣素取代基)、曙OMe、 -OEt、 -Me、 -Et、 -NMe2、 C2-Cio烴基或取代烴基 R8=H、 X (鹵素取代基)、-Me、鹵素取代基是指氟、氯、溴、碘。
3.根據(jù)權(quán)利要求1， 2,3，3a,4-四氫硫色烯并[4,3-c]吡唑類化合物可用于抗癌代烴基藥物。
全文摘要
本發(fā)明公開了含氮硫的環(huán)雜環(huán)化合物2，3，3a，4-四氫硫色烯并二氫吡唑類化合物具有抗癌活性。針對現(xiàn)有技術(shù)中抗癌藥物少，毒性大的研發(fā)現(xiàn)狀，本發(fā)明進行了2，3，3a，4-四氫硫色烯并二氫吡唑類化合物的抗癌實驗，試驗中以RPMIMedium 1640作為細胞培養(yǎng)基，測試方法采用MTT法。實驗結(jié)果表明這一類化合物具有好的體外抗癌活性，可用于抗癌藥物。
文檔編號A61P35/00GK101584690SQ20081009787
公開日2009年11月25日 申請日期2008年5月20日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月20日
發(fā)明者劉玉欣, 楊更亮, 祝士國, 馬正月 申請人:楊更亮