專利名稱：：一種動(dòng)物皮類的酶解產(chǎn)物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種用于補(bǔ)血滋陰、止血、升高白細(xì)胞、補(bǔ)鈣、美容及抗衰老的動(dòng)物皮類酶解產(chǎn)物，是由牛皮、豬皮或驢皮經(jīng)過一系列酶解工藝制得，屬于中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：阿膠作為滋陰、補(bǔ)血和止血的佳品，現(xiàn)收載于《中國藥典》2005年版一部，為馬科動(dòng)物驢的干燥皮或鮮皮經(jīng)蒸煮、濃縮制得；烊化口服，具有補(bǔ)血滋陰，潤燥，止血的功效，主要用于血虛萎黃，眩暈心悸，肌萎無力，心煩不眠，虛風(fēng)內(nèi)動(dòng)，肺燥咳嗽，勞嗽咯血，吐血尿血，便血崩漏，妊娠胎漏，為臨床婦科常用中藥；新阿膠收載于《衛(wèi)生部部頒標(biāo)準(zhǔn)，中藥成方制劑》第19冊234頁，為豬皮經(jīng)煎煮、濃縮制成的固體膠，口服具有滋陰、補(bǔ)血、止血的功效，多用于血虛體弱、月經(jīng)不調(diào)；吐血、衄血、血小板、白血球減少，與阿膠療效相當(dāng)，更具有獨(dú)特的升高白細(xì)胞和血小板的作用；黃明膠收載于《衛(wèi)生部部頒標(biāo)準(zhǔn)，中藥成方制劑》第17冊259頁，為牛皮經(jīng)煎煮，濃縮制成的固體膠，口服具有滋陰潤燥，養(yǎng)血止血的功效，用于體虛便秘，腎虛遺精，吐血、嘔血，胎漏，崩漏。'上述可見，阿膠、新阿膠和黃明膠分別是由驢皮、豬皮和牛皮經(jīng)蒸煮，濃縮制得，具有滋陰補(bǔ)血、養(yǎng)血止血的相似的療效，效果較好，深受廣大婦女患者歡迎。但是研究表明，蛋白質(zhì)、多肽類藥物由于分子量較大，服用后并不能被馬上吸收，而是經(jīng)過體內(nèi)一系列的消化和酶解過程轉(zhuǎn)化為低肽和氨基酸才被吸收。阿膠、新阿膠和黃明膠雖是由驢皮、豬皮和牛皮經(jīng)高溫蒸煮、濃縮制得，但是經(jīng)測定其分子量仍較大，且分布范圍寬，在幾千至二十幾萬之間，顯然部分蛋白質(zhì)及多肽已經(jīng)水解為了小分子肽或氨基酸，但是此部分含量極低，多數(shù)仍以蛋白質(zhì)或多肽的型式存在，不能被人體直接吸收利用。由于阿膠、新阿膠和黃明膠分別是由驢皮、豬皮和牛皮經(jīng)蒸煮，濃縮制得，主要以蛋白質(zhì)或多肽的型式存在，需要在人體內(nèi)經(jīng)過一系列的消化和酶解過程轉(zhuǎn)化后才被吸收利用，而在人體內(nèi)短暫的存留時(shí)間及不同人體的個(gè)體差異性，使得三者未能發(fā)揮應(yīng)有的療效，造成了不同程度的資源浪費(fèi)。節(jié)約資源從源頭做起，選擇一種合適的方法將驢皮、豬皮和牛皮進(jìn)行體外酶解，制得可被人體直接吸收利用的低分子小肽，省去人體復(fù)雜的消化酶解過程，提高了吸收利用率，節(jié)約了資源，具有非常重要的研究意義，值得深入探討。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是針對目前阿膠、新阿膠和黃明膠的生產(chǎn)及應(yīng)用情況，研究了一種體外酶解驢皮、豬皮和牛皮的方法，從而得到了一種動(dòng)物皮類酶解產(chǎn)物，與阿膠、新阿膠和黃明膠相比具有相同的功效，但是可被人體直接吸收利用，生物利用度高，充分節(jié)約了資源。結(jié)合已有的研究結(jié)果，本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的首先，本發(fā)明提供了一種用于補(bǔ)血滋陰、止血、升高白細(xì)胞、補(bǔ)鈣、美容及抗衰老的動(dòng)物皮類酶解產(chǎn)物，該酶解產(chǎn)物可采用如下制備方法制得a、取動(dòng)物皮類原料，脫毛洗凈，并除去脂肪、殘肉等雜質(zhì)，低溫粉碎，加入0.5°/。10%的胃蛋白酶，于04°。在0.12mol/L乙酸或檸檬酸溶液中酶解1072小時(shí)，離心，取上清液，透析除雜，溶液加入1%10%胃蛋白酶，于37。C保溫酶解124小時(shí)，加堿調(diào)節(jié)pH為7.59.0，加入0.510%胰酶或胰蛋白酶，于5(TC保溫酶解124小時(shí)，升溫至85'C并保溫20min，離心，取上清液，濃縮，得酶解產(chǎn)物溶液，噴霧干燥或冷凍干燥，得酶解產(chǎn)物細(xì)粉；b、取動(dòng)物皮類原料，脫毛洗凈，并除去脂肪、殘肉等雜質(zhì)，低溫粉碎，加入0.5%10%的胃蛋白酶，于04°〇在0.12mol/L乙酸或檸檬酸溶液中酶解1072小時(shí)，離心，取上清液，透析除雜，溶液于37'C保溫酶解124小時(shí)，加堿調(diào)節(jié)pH為7.59.0，加入0.510%胰酶或胰蛋白酶，于50'C保溫酶解124小時(shí)，升溫至85"C并保溫20min，離心，取上清液，濃縮，得酶解產(chǎn)物溶液，噴霧干燥或冷凍干燥，得酶解產(chǎn)物細(xì)粉。本發(fā)明動(dòng)物皮類酶解產(chǎn)物的制備方法更優(yōu)化為a、取動(dòng)物皮類原料，脫毛洗凈，并除去脂肪、殘肉等雜質(zhì)，低溫粉碎，加入1%5%的胃蛋白酶，于04。C在0.2lmol/L乙酸或檸檬酸溶液中酶解1848小時(shí)，離心，取上清液，透析除雜，溶液加入1%5%胃蛋白酶，于37。C保溫酶解212小時(shí)，加堿調(diào)節(jié)pH為8.0，加入15%胰酶或胰蛋白酶，于5(TC保溫酶解212小時(shí)，升溫至85。C并保溫20min，離心，取上清液，濃縮，得酶解產(chǎn)物溶液，噴霧干燥或冷凍干燥，得酶解產(chǎn)物細(xì)粉；b、取動(dòng)物皮類原料，脫毛洗凈，并除去脂肪、殘肉等雜質(zhì)，低溫粉碎，加入1%5%的胃蛋白酶，于04。C在0.2lmol/L乙酸或檸檬酸溶液中酶解1848小時(shí)，離心，取上清液，透析除雜，溶液于37'C保溫酶解212小時(shí)，加堿調(diào)節(jié)pH為8.0，加入15%胰酶或胰蛋白酶，于5(TC保溫酶解212小時(shí)，升溫至85t:并保溫20min，離心，取上清液，濃縮，得酶解產(chǎn)物溶液，噴霧干燥或冷凍干燥，得酶解產(chǎn)物細(xì)粉。上述制備方法中所用動(dòng)物皮類原料可以是豬皮、牛皮或驢皮中的任意一種或或二種以上的組合。人體口服阿膠、新阿膠或黃明膠后，經(jīng)過胃內(nèi)及腸道一系列的消化和酶解過程，僅以小分子肽類成分吸收而發(fā)揮療效。發(fā)明人參照人體口服阿膠、新阿膠或黃明膠后的消化吸收過程，力爭做到節(jié)約資源從源頭做起，創(chuàng)造性地將驢皮、豬皮和牛皮進(jìn)行體外酶解，制得可被人體直接吸收利用的低分子小肽，省去了人體復(fù)雜的消化酶解過程，與直接口服阿膠、新阿膠或黃明膠相比，本發(fā)明制得的營養(yǎng)及功能小肽更多，更全面，大大提高了吸收利用率，療效更高，并有效節(jié)約了資源，具有廣闊的應(yīng)用前景。本發(fā)明提供的動(dòng)物皮類酶解產(chǎn)物可以單獨(dú)使用，也可以與其它藥物成分，如維生素E、維生素C、褪黑激素、人類生長激素、性激素等西藥原料和葡萄籽提取物等中藥原料聯(lián)合使用，S卩在藥物活性成分中，可以只有該產(chǎn)物，還可以是其與其他藥物的混合物，達(dá)到配合治療、輔助治療的目的。另外，為有效控制本發(fā)明酶解產(chǎn)物的質(zhì)量，保證療效和人體服用安全，本發(fā)明所得動(dòng)物皮類酶解產(chǎn)物的相對分子量不高于10kD，更確切地講，其相對分子量不高于5kD。本發(fā)明所得動(dòng)物皮類酶解產(chǎn)物主要是供口服服用，單獨(dú)使用或與其它藥物成分聯(lián)合使用，加入藥劑學(xué)常規(guī)輔料，按照藥劑學(xué)常規(guī)工藝制得膠囊劑、軟膠囊劑、片劑、顆粒劑、丸劑或口服液等常用口服制劑。本發(fā)明最后的目的是提供所得動(dòng)物皮類酶解產(chǎn)物在補(bǔ)血滋陰、止血、升高白細(xì)胞、補(bǔ)鈣、美容及抗衰老發(fā)明的應(yīng)用，更確切的講，是在在制備用于治療虛癆羸弱、身體虛弱、月經(jīng)不調(diào)、產(chǎn)前產(chǎn)后血虛、肺燥咳嗽、咳血、血痰、貧血、血小板減少癥、白細(xì)胞減少癥等癥的藥物中的應(yīng)用，在制備用于美容養(yǎng)顏及防衰老的藥物中的應(yīng)用以及在制備用于治療骨質(zhì)疏松癥的藥物中的應(yīng)用。有益效果蛋白質(zhì)、多肽類藥物由于分子量較大，服用后并不能被人體立刻吸收利用，而是經(jīng)過體內(nèi)一系列的消化和酶解過程轉(zhuǎn)化為低肽和氨基酸才被吸收。阿膠、新阿膠和黃明膠雖是由驢皮、豬皮和牛皮經(jīng)高溫蒸煮、濃縮制得，但是經(jīng)測定其分子量仍較大，且分布范圍寬，在幾千至二十幾萬之間，不能被人體直接吸收利用。而本發(fā)明所得動(dòng)物皮類酶解產(chǎn)物與阿膠、新阿膠或黃明膠相比，具有相同的功效，但本發(fā)明制得的營養(yǎng)及功能小肽更多，更全面，大大提高了吸收利用率，療效更高，并有效節(jié)約了資源，具有廣闊的應(yīng)用前景。為進(jìn)一步驗(yàn)證本發(fā)明的有益效果，發(fā)明人進(jìn)行了如下系列驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)試驗(yàn)一對貧血?jiǎng)游锬Ｐ偷淖饔?實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，體重1822g，雌雄各半，由安徽省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)藥物本發(fā)明實(shí)施例3所得混合動(dòng)物皮類酶解產(chǎn)物，自制，采用生理鹽水溶灌胃給藥，濃度為0.5g/ml。2實(shí)驗(yàn)方法昆明小鼠100只，隨機(jī)分為5組，每組20只。利用C,射線輻射法，失血性貧血法，2%苯肼致貧血法，環(huán)磷酰胺致貧血法和馬利蘭致貧血法，造成小鼠貧血，然后每種貧血?jiǎng)游锬Ｐ头譃閮山M一組治療組,灌胃本發(fā)明酶解產(chǎn)物，給藥劑量為10ml/kg，濃度為0.5g/ml;二組模型組，灌胃同體積的生理鹽水，連續(xù)給藥9d,末次給藥后lh，眼眶取血，測定每只小鼠的HB、RBC及紅細(xì)胞壓積。3實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用方差分析對試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，以x士s表示，試驗(yàn)結(jié)果如下表l對貧血小鼠的影響結(jié)果表項(xiàng)目昍(％)RBC(X107L)紅細(xì)胞壓積(％)模型組治療組模型組治療組模型組治療組輻射性貧血6.05±0.827.81±0.32*2.95±0.443.09±0.3021.8±0.633.4±0.4"失血性貧血4.44±0.319.14±0.59*2.68±0.673.57±0.30*18.3±0.532.9±1.3"2%苯肼致貧血6.31±0.747.95±0.37*3.89±0.264.34±0.50*19.6±1.031.5±2.2"環(huán)磷酰胺致貧血4.18±0.259.58±0.38*3.Ol士O.443.27±0.39*22.3±0.935.1±1.9**馬利蘭致貧血6.24±0.898.22±0.76*2.91±0.543.18±0.55*19.1±0.530.9±1.2**注與模型組相比，*P<0.05,**P<0.01。上述結(jié)果表明，本發(fā)明動(dòng)物皮類酶解產(chǎn)物對各種原因的貧血均具有明顯的治療作用。試驗(yàn)二對小鼠抗疲勞作用的影響1實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，體重1822g，雌雄各半，由安徽省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)藥物本發(fā)明實(shí)施例3所得混合動(dòng)物皮類酶解產(chǎn)物，自制，采用生理鹽水溶灌胃給藥，濃度為0.8g/ml。試驗(yàn)儀器全自動(dòng)生化分析儀(購自日本奧林巴斯公司)；低溫冷凍離心機(jī)(購自美國HettichZentrifugen公司)；尿素氮試劑盒(購自上海順強(qiáng)生物科技有限公司)。2實(shí)驗(yàn)方法取昆明種小鼠30只，雌雄各半，隨機(jī)分成低劑量組、高劑量組和對照組，每組10只。3組均自由攝食和飲水，中藥低、高劑量組每天給藥0.2ml/0.4ml，對照組小鼠灌飼蒸餾水7(0.4ml/d)，造模時(shí)間為2周。2.1末次灌藥30min后將小鼠尾部束2g的負(fù)重物，放入15'C水缸中，并用秒表計(jì)時(shí)，當(dāng)觀察小鼠頭部沒入水中10s不能浮出水面者即為體力耗竭，即刻計(jì)時(shí)結(jié)束，定為小鼠的游泳時(shí)間。2.2游泳體力耗竭后的小鼠，眼眶采血，離心取血清，測血尿素氮。2.3小鼠脫臼處死，取肝臟以生理鹽水沖洗，用濾紙吸干，稱肝臟100mg，加入8ml三氯乙酸，勻漿。勻漿液3000rpm離心15min，取上清液，加95%乙醇沉淀糖原，用蒽酮法測肝糖原含量。3實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用方差分析對試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，以x士s表示，試驗(yàn)結(jié)果如下-表2對小鼠抗疲勞作用的影響結(jié)果表<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注與模型組相比，*P<0.05，**P<0.01。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明酶解產(chǎn)物的兩個(gè)劑量組均可明顯提高小鼠肝糖原的儲備量，降低運(yùn)動(dòng)后血清尿素氮含量，，加速體內(nèi)尿素氮的清除速率，提高小鼠的游泳時(shí)間?？傊?，本發(fā)明酶解產(chǎn)物具有明顯的抗疲勞作用。試驗(yàn)三對小鼠耐缺氧作用的影響1實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，體重1822g，雌雄各半，由安徽省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)藥物本發(fā)明實(shí)施例3所得混合動(dòng)物皮類酶解產(chǎn)物，自制，采用生理鹽水溶灌胃給藥，濃度為0.8g/ml。試驗(yàn)儀器250ml磨口廣口瓶及瓶塞，秒表，凡士林，石灰。2實(shí)驗(yàn)方法取昆明種小鼠30只，雌雄各半，隨機(jī)分成3組，分別稱重，編號。兩組治療組低、高劑量組每天給藥0.2ml/0.4ni1，對照組小鼠每只灌伺等容量(O.4ml)生理鹽水，每天1次，連續(xù)10d。第11天灌藥30min后將小鼠放入盛有15g石灰的250ml的磨口廣口瓶內(nèi)(每瓶一次只放一只小鼠)，用凡士林涂抹瓶口蓋嚴(yán)，使之不漏氣，并用秒表計(jì)時(shí)，以小鼠呼吸停止為指標(biāo)，觀察小鼠因缺氧而死亡的時(shí)間，計(jì)算各組小鼠的平均存活時(shí)間。3實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用方差分析對試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，以x士s表示，試驗(yàn)結(jié)果如下:表3對小鼠耐缺氧作用的影響結(jié)果表<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注與模型組相比，*P<0.05，**P<0.01。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明酶解產(chǎn)物的兩個(gè)劑量組均可明顯提高小鼠的存活時(shí)間(P<0.01)，提示本發(fā)明酶解產(chǎn)物具有明顯的抗缺氧作用。具體實(shí)施例方式以下通過具體的實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，但以下實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而對本發(fā)明沒有限制。實(shí)施例一處方驢皮1800g維生素E15g維生素C25g制法取處方中驢皮，脫毛洗凈，并除去脂肪、殘肉等雜質(zhì)，低溫粉碎，加入10%的胃蛋白酶，于04。C在0.5mol/L乙酸溶液中酶解48h，離心，取上清液，調(diào)節(jié)pH為2.0±0.2，加入5%胃蛋白酶，于37。C保溫酶解12h，升溫至85'C并保溫20min，離心，取上清液，鹽洗，透析除雜，濃縮，采用5kD超濾膜超濾，噴霧干燥，得噴干粉與維生素E、C混勻，加入適當(dāng)藥用輔料，制備顆粒，壓片，制得片劑。實(shí)施例二處方豬皮2200g葡萄籽提取物20g制法取處方中豬皮，脫毛洗凈，并除去脂肪、殘肉等雜質(zhì)，低溫粉碎，加入4%的胃蛋白酶，于04。C在lmol/L乙酸溶液中酶解24h，離心，取上清液，調(diào)節(jié)pH為8.0±0.2，加入3%胰酶，于5(TC保溫酶解18h,升溫至85。C并保溫2(kin，離心，取上清液，鹽洗，透析除雜，濃縮，采用10kD超濾膜超濾，加入葡萄籽提取物，混勻，加入適當(dāng)藥用輔料，制備顆粒，制得顆粒劑。實(shí)施例三處方牛皮2500g9制法取處方中牛皮，脫毛洗凈，并除去脂肪、殘肉等雜質(zhì)，低溫粉碎，加入5%的胃蛋白酶，于04'C在0.3mol/L乙酸溶液中酶解15h，離心，取上清液，調(diào)節(jié)pH為7.0±0.5，加入7%木瓜蛋白酶，于5(TC保溫酶解10h，升溫至85。C并保溫20min，離心，取上清液，鹽洗，透析除雜，濃縮，采用8kD超濾膜超濾，進(jìn)一步濃縮，加入聚乙二醇400混勻，灌裝軟膠囊，即得軟膠囊劑。實(shí)施例四處方豬皮1400g紅參120g熟地黃60g黨參150g山楂80g制法取處方中豬皮，脫毛洗凈，并除去脂肪、殘肉等雜質(zhì)，低溫粉碎，加入8%的胃蛋白酶，于04。C在0.5mol/L乙酸溶液中酶解36h，離心，取上清液，調(diào)節(jié)pH為2.0±0.2，加入2.5%胃蛋白酶，于37。C保溫酶解8h，加堿調(diào)節(jié)pH為8.0±0.2，加入8%胰蛋白酶，于5(TC保溫酶解12h,升溫至85。C并保溫20min，離心，取上清液，鹽洗，透析除雜，濃縮，采用3kD超濾膜超濾，備用；另取人參、熟地黃、黨參、山楂加水煎煮三次，第一、二次分別加10倍量水煎煮2小時(shí)，第三次加8倍量水煎煮1小時(shí)，合并煎液，濾過，與上述超濾液合并，濃縮至相對密度為1.10左右(75'C測)的清膏，噴霧干燥，制成顆粒，填充膠囊，即得膠囊劑。實(shí)施例五處方驢皮1300g褪黑激素15g制法取處方中驢皮，脫毛洗凈，并除去脂肪、殘肉等雜質(zhì)，低溫粉碎，加入4%的胃蛋白酶，于04。C在0.7mol/L乙酸溶液中酶解20h，離心，取上清液，調(diào)節(jié)pH為8.0±0.2，加入4%胰酶和5%胰蛋白酶，于5(TC保溫酶解15h，升溫至85'C并保溫20min，離心，取上清液，鹽洗，透析除雜，濃縮，采用4kD耀濾膜超濾，加入褪黑激素和適當(dāng)量蔗糖粉，混勻，制備顆粒，即得顆粒劑。實(shí)施例六處方豬皮600g牛皮800g熟地黃85g黨參125g黃芪100g枸杞子65g白術(shù)170g制法取處方中豬皮和牛皮，脫毛洗凈，并除去脂肪、殘肉等雜質(zhì)，低溫粉碎，加入8%的胃蛋白酶，于04T:在0.5mol/L乙酸溶液中酶解48h，離心，取上清液，調(diào)節(jié)pH為7.0±0.5，加入5%木瓜蛋白酶和3%無花果蛋白酶，于50。C保溫酶解15h,升溫至85。C并保溫20min，離心，取上清液，鹽洗，透析除雜，濃縮，采用5kD超濾膜超濾，備用；另將熟地黃加水煎煮二次，每次2小時(shí)，合并煎液，濾過，靜置，取上清液備用；其余白術(shù)、枸杞子用60%乙醇，黨參、黃芪用25%乙醇照流浸膏劑與浸膏劑項(xiàng)下的滲濾法(附錄IO)進(jìn)行滲濾，合并濾液，靜置，濾過，加入超濾液和熟地黃上清液，混勻，濃縮至相對密度為1.041.06(75'C)的清膏，噴霧干燥，制成顆粒，壓片，即得片劑。實(shí)施例七處方牛皮450g豬皮650g驢皮750g制法取上述動(dòng)物皮，脫毛洗凈，并除去脂肪、殘肉等雜質(zhì)，低溫粉碎，加入6%的胃蛋白酶，于04。C在0.8mol/L乙酸溶液中酶解32h，離心，取上清液，調(diào)節(jié)pH為2.0±0.2，加入2%胃蛋白酶，于37'C保溫酶解3h，加堿調(diào)節(jié)pH為8.0士0.2，加入5%胰蛋白酶，于50'C保溫酶解6h，升溫至85'C并保溫20min，離心，取上清液，鹽洗，透析除雜，濃縮，采用5kD超濾膜超濾，加入防腐劑、糖精及香精適量，攪勻，加水調(diào)整總量至1000ml，靜置，濾過，灌封，即得口服液劑。實(shí)施例八處方豬皮900g大棗300g黃芪300g制法取處方中豬皮，脫毛洗凈，并除去脂肪、殘肉等雜質(zhì)，低溫粉碎，加入4%的胃蛋白酶，于04'C在0.5mol/L乙酸溶液中酶解18h，離心，取上清液，調(diào)節(jié)pH為2.0±0.2，加入10%胃蛋白酶，于37'C保溫酶解16h,升溫至85'C并保溫20min，離心，取上清液，鹽洗，透析除雜，濃縮，采用10kD超濾膜超濾，備用；另取黃芪、大棗酌予碎斷，加10倍量水煎煮三次，第一次3小時(shí)，第二次2小時(shí)，第三次1小時(shí)，合并煎液，濾過，與上述超濾液合并，濾液濃縮至l.10(75°C)，噴霧干燥，制成顆粒，充填膠囊，即得膠囊劑。實(shí)施例九取實(shí)施例四所制得膠囊劑治療配合人重組促紅細(xì)胞生成素治療腎性貧血患者，并與對照，且(人重組促紅細(xì)胞生成素)進(jìn)行比較。治療組腎性貧血46例，男24例，女22例；年齡3168歲，平均49.64土11.7歲；慢性腎小球腎炎38例，糖尿病腎病5例，狼瘡性腎炎2例，高血壓腎動(dòng)脈硬化1例。對照組46例中，男25例，女21例；年齡3269歲，平均48.59±12.l歲；慢性腎小球腎炎37例，糖尿病腎病6例，狼瘡性腎炎l例，高血壓腎動(dòng)脈硬化2例。治療方案治療組本發(fā)明膠囊口服，每次3粒，每日2次，配合人重組促紅細(xì)胞生成素皮下注射，每周3次，每次3000u，60天為一療程；對照組單純使用人重組促紅細(xì)胞生成素。結(jié)果治療組效果明顯好于對照組，總有效率為89.2%，抽搐發(fā)生者l例，消化道出血者2例，無血栓形成者；而對照組總有效率為68.8%，抽搐發(fā)生者5例，消化道出血者8例，血栓形成者1例。實(shí)施例十取實(shí)施例六所得顆粒劑配合歸脾丸治療特發(fā)性血小板減少性紫癜陰道出血不止患者30例，并與服用強(qiáng)的松片治療的15例患者作對照觀察。治療組30例中，年齡1463歲，平均38.5歲；病程3個(gè)月4年，6個(gè)月以上者26例；對照組15例中，年齡1666歲，平均38.2歲；病程3個(gè)月6年，6個(gè)月以上者12例。兩組血小板計(jì)數(shù)及骨髓象在1.5craX3cm的骨髓片內(nèi)，治療組巨核細(xì)胞數(shù)6155個(gè)，對照組7185個(gè)；兩組巨核細(xì)胞均可見成熟障礙；有血小板巨核細(xì)胞明顯減少，甚至缺如。均有不同程度的陰道出血，兩組一般資料對比,無顯著性差異，具有可比性。治療方案歸脾丸，每次8粒，每日3次，本發(fā)明顆粒劑每次10g，每日3次；4周為1個(gè)療程，見效者繼續(xù)服藥至血小板數(shù)升至正常，正常后再服藥3個(gè)月，如無效則停藥；對照組口服強(qiáng)的松片，每天30mg，4周為1個(gè)療程，血小板數(shù)回升接近正常時(shí)，逐漸減量至維持量(10mg/天)，用藥34個(gè)月，直至完全緩解；如無效，則停藥。結(jié)果在治療6個(gè)月后二組療效進(jìn)行比較，治療組30例中，顯效12例，良效8例，進(jìn)步7例，無效3例，總有效率為90.0%;對照組15例中，顯效5例，良效4例，進(jìn)步2例，無效4例，總有效率為73.3%。權(quán)利要求1、一種動(dòng)物皮類的酶解產(chǎn)物，其特征在于該酶解產(chǎn)物采用如下任一方法制備A、取動(dòng)物皮類原料，脫毛洗凈，并除去脂肪、殘肉等雜質(zhì)，低溫粉碎，加入0.5％～10％的胃蛋白酶，于0～4℃在0.1～2mol/L乙酸或檸檬酸溶液中酶解10～72小時(shí)，離心，取上清液，透析除雜，溶液加入1％～10％胃蛋白酶，于37℃保溫酶解1～24小時(shí)，加堿調(diào)節(jié)pH為7.5～9.0，加入0.5～10％胰酶或胰蛋白酶，于50℃保溫酶解1～24小時(shí)，升溫至85℃并保溫20min，離心，取上清液，濃縮，得酶解產(chǎn)物溶液，噴霧干燥或冷凍干燥，得酶解產(chǎn)物細(xì)粉；B、取動(dòng)物皮類原料，脫毛洗凈，并除去脂肪、殘肉等雜質(zhì)，低溫粉碎，加入0.5％～10％的胃蛋白酶，于0～4℃在0.1～2mol/L乙酸或檸檬酸溶液中酶解10～72小時(shí)，離心，取上清液，透析除雜，溶液于37℃保溫酶解1～24小時(shí)，加堿調(diào)節(jié)pH為7.5～9.0，加入0.5～10％胰酶或胰蛋白酶，于50℃保溫酶解1～24小時(shí)，升溫至85℃并保溫20min，離心，取上清液，濃縮，得酶解產(chǎn)物溶液，噴霧干燥或冷凍干燥，得酶解產(chǎn)物細(xì)粉。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的酶解產(chǎn)物，其特征在于該酶解產(chǎn)物采用如下任一方法制備A、取動(dòng)物皮類原料，脫毛洗凈，并除去脂肪、殘肉等雜質(zhì)，低溫粉碎，加入1%5%的胃蛋白酶，于04。C在0.2lmol/L乙酸或檸檬酸溶液中酶解1848小時(shí)，離心，取上清液，透析除雜，溶液加入1%5%胃蛋白酶，于37'C保溫酶解212小時(shí)，加堿調(diào)節(jié)pH為8.0，加入15%胰酶或胰蛋白酶，于5(TC保溫酶解212小時(shí)，升溫至85'C并保溫20min,離心，取上清液，濃縮，得酶解產(chǎn)物溶液，噴霧干燥或冷凍干燥，得酶解產(chǎn)物細(xì)粉；B、取動(dòng)物皮類原料，脫毛洗凈，并除去脂肪、殘肉等雜質(zhì)，低溫粉碎，加入1%5%的胃蛋白酶，于04。C在0.2lmol/L乙酸或檸檬酸溶液中酶解1848小時(shí)，離心，取上清液，透析除雜，溶液于37'C保溫酶解212小時(shí)，加堿調(diào)節(jié)pH為8.0，加入15%胰酶或胰蛋白酶，于50。C保溫酶解212小時(shí)，升溫至85t:并保溫20min，離心，取上清液，濃縮，得酶解產(chǎn)物溶液，噴霧干燥或冷凍干燥，得酶解產(chǎn)物細(xì)粉。3、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的酶解產(chǎn)物，其特征在于所用動(dòng)物皮類原料可以是豬皮、牛皮或驢皮中的任意一種或二種以上的組合。4、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的酶解產(chǎn)物，其特征在于其相對分子量不高于10kD。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的酶解產(chǎn)物，其特征在于其相對分子量不高于5kD。6、根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的酶解產(chǎn)物，其特征在于被制成膠囊劑、軟膠囊劑、片劑、口服液、顆粒劑或丸劑等口服制劑。7、權(quán)利要求1至5中任一所述的動(dòng)物皮類酶解產(chǎn)物的制備方法。8、權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述酶解產(chǎn)物在制備用于治療虛癆羸弱、身體虛弱、月經(jīng)不調(diào)、產(chǎn)前產(chǎn)后血虛、肺燥咳嗽、咳血、血痰、貧血、血小板減少癥、白細(xì)胞減少癥的藥物中的應(yīng)用。9、權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述酶解產(chǎn)物在制備用于補(bǔ)血滋陰、止血、升高白細(xì)胞、補(bǔ)鈣、美容及抗衰老的藥物中的應(yīng)用。10、權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述酶解產(chǎn)物在制備用于治療骨質(zhì)疏松癥的藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開了一種動(dòng)物皮類的酶解產(chǎn)物，特別是一種由牛皮、豬皮或驢皮經(jīng)過一系列酶解工藝制得的產(chǎn)物，屬于中藥領(lǐng)域。該酶解產(chǎn)物是通過將驢皮、豬皮或牛皮進(jìn)行體外酶解，制得可被人體直接吸收利用的低分子小肽，與現(xiàn)有的阿膠、新阿膠或黃明膠相比，該產(chǎn)物提高了人體的吸收利用率，使藥材的生物利用度大大提高，節(jié)約了資源。文檔編號A61K35/36GK101647816SQ200810118150公開日2010年2月17日申請日期2008年8月13日優(yōu)先權(quán)日2008年8月13日發(fā)明者劉國飛,周小明申請人:北京凱瑞創(chuàng)新醫(yī)藥科技有限公司