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      一種陰溝腸桿菌及其多糖和多糖的應(yīng)用的制作方法

      文檔序號:1212023閱讀:525來源:國知局

      專利名稱::一種陰溝腸桿菌及其多糖和多糖的應(yīng)用的制作方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      :本發(fā)明涉及生物工程領(lǐng)域,特別設(shè)計一種具有抗氧化、抗腫瘤、增強免疫力和抗病毒等生物活性的陰溝腸桿菌Z0206細(xì)菌多糖的制備方法及其應(yīng)用。
      背景技術(shù)
      :多糖在自然界分布很廣,在高等植物、動物、微生物體內(nèi)均有存在,是自然界含量最豐富的生物聚合物之一。多糖具有多方面的功能,如能量儲存、結(jié)構(gòu)支持、防御功能等。早在上世紀(jì)40年代,多糖就開始用作藥物,1951年美國人ReihyH首次發(fā)現(xiàn)微生物擔(dān)子菌中的多糖有抑制腫瘤的活性,到了60年代,多糖作為廣泛的免疫促進劑引起人們的極大興趣,開發(fā)多糖為保健食品與藥物也倍受關(guān)注。已有研究證明飼料中添加活性多糖能顯著提高動物免疫功能,改善動物生長和生產(chǎn)性能,降低動物死亡率。很多多糖具有免疫增強活性,表現(xiàn)出對宿主免疫的介導(dǎo)和調(diào)節(jié)作用,通過刺激免疫細(xì)胞的成熟、分化和增殖,改善宿主機體平衡,達(dá)到恢復(fù)和提高宿主細(xì)胞對淋巴因子、激素及其他生理因子的反應(yīng)性。以此為基礎(chǔ),多糖表現(xiàn)出與免疫力相關(guān)的多種活性功能,如抗腫瘤、降血糖、抗衰老、促進肝臟和骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì)和核酸的合成、抗炎及抗輻射作用等。近年來,我們通過分離、篩選和純化,從肉靈芝中分離得到了一株高產(chǎn)胞外多糖的細(xì)菌菌株陰溝腸桿菌Z0206。所謂肉靈芝,在民間被稱之為"太歲",據(jù)《本草綱目》記載,肉靈芝為本草上品,它是在我國發(fā)現(xiàn)的一種天然珍稀物種,即被我國科學(xué)界早已認(rèn)定的一種原生質(zhì)生命體,確切定名應(yīng)為"特大型粘菌復(fù)合體"。研究表明,菌株陰溝腸桿菌Z0206具有高產(chǎn)多糖的特性,這種細(xì)菌多糖以分泌的形式到達(dá)胞外,具有產(chǎn)量高、安全、無毒副作用等優(yōu)點。陰溝腸桿菌Z0206細(xì)菌多糖具有一定的抗氧化、抗腫瘤、抗病毒和免疫調(diào)節(jié)等活性。因此,陰溝腸桿菌Z0206細(xì)菌多糖制備在抗氧化和抗腫瘤藥物及添加劑開發(fā)和應(yīng)用上具有重要的意義和廣闊的前景。
      發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的一種陰溝腸桿菌Z0206,已于2007年12月3日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC)(北京市朝陽區(qū)大屯路,中國科學(xué)院微生物研究所),保藏號CGMCCNO:2279。分類命名陰溝腸桿菌Enterobactercloacae。一種陰溝腸桿菌Z0206多糖的制備方法,依次包括以下步驟-(1)陰溝腸桿菌Z0206菌種活化取出冷凍保存的本發(fā)明的陰溝腸桿菌Z0206菌種,室溫放置lh后,接種到滅菌PDA加富固體培養(yǎng)基上,28i:32。C培養(yǎng)36h48h,再次轉(zhuǎn)接到PDA加富固體培養(yǎng)基上,28。C32。C培養(yǎng)36h48h,得到活化菌種;(2)將活化好的菌種,接種至PDA加富液體培養(yǎng)基中進行搖瓶發(fā)酵,28。C32。C往復(fù)振蕩培養(yǎng),培養(yǎng)時間18h20h,得到發(fā)酵罐發(fā)酵種子液,發(fā)酵罐內(nèi)加入70%發(fā)酵培養(yǎng)基,12rC蒸汽滅菌20min,接種種子液,發(fā)酵時間48h72h,得到含有陰溝腸桿菌Z0206多糖的發(fā)酵液;(3)發(fā)酵液于6(TC70。C濃縮至原體積的1/10,再8(TC9(TC水浴lh1.5h,5000rpm離心10min15min,收集上清液,加入35倍體積預(yù)冷的95%乙醇,4。C靜置12h后,5000rpm離心10min15min,沉淀再依次用無水乙醇、丙酮和無水乙醚洗滌,離心,沉淀真空干燥,即得到粗多糖粉末;(4)蛋白酶處理將步驟(3)得到的粗多糖溶解于20倍體積的熱的蒸餾水中,用Na2C03調(diào)pH至7.09.0,加入0.25%1%胰蛋白酶(w/v),55°C水解12h后,用草酸調(diào)pH至5.05.7,然后加入0.25%1%木瓜蛋白酶(w/v),65。C70。C水解2h3h后,于100。C水浴加熱56min,以終止酶反應(yīng);(5)三氯乙酸法脫蛋白取步驟(4)后得到的蛋白酶處理液,用草酸調(diào)pH值至7.0,加入2%4%三氯乙酸(w/v),室溫下磁力攪拌lh后,11000rpm離心1015min,取上清;(6)Sevag法脫蛋白向步驟(5)取得的上清液中加入1/3體積的Sevag試劑,充分振蕩,混合2030min,充分靜置分層,4000rpm離心5min,重復(fù)操作數(shù)次至兩相界面不再出現(xiàn)蛋白沉淀;然后用35倍體積預(yù)冷的95%乙醇醇析,所得的沉淀再依次用無水乙醇、丙酮和無水乙醚洗滌兩次,真空干燥,得到脫蛋白多糖;(7)脫色將經(jīng)步驟(6)脫蛋白后的多糖配成0.5%多糖溶液,用氨水調(diào)pH至8.0,在50卩下滴加20%的11202,至溶液為淡黃色,保溫2h,然后用稀鹽酸中和至7.0;自來水透析23d,再蒸餾水透析23d后,加入35倍體積預(yù)冷的95%乙醇沉淀,4。C靜置12h后,5000rpm離心10min15min,沉淀真空干燥,得多糖精品。所述步驟(1)和(2)中,PDA加富培養(yǎng)基的配方為馬鈴薯20%,蛋白胨0.20.5%,酵母浸膏0.3%,葡萄糖2%,瓊脂粉1.6%;發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為蔗糖2.5%,酵母浸膏0.5%,蛋白胨0.5°/。,K2HPO40.2%,KH2PO40.1%,MgSO40.05%。所述步驟(2)中,搖瓶發(fā)酵條件為接種量35環(huán),往復(fù)振蕩沖程410cm,振蕩頻率200250rpm。所述步驟(2)中,發(fā)酵罐發(fā)酵條件為接種量3%,pH為7.0,溫度3(TC,通氣量為0.250.75vvm,機械攪拌轉(zhuǎn)速200300rpm,每12h向發(fā)酵罐補充1%3%的葡萄糖。所述步驟(6)中的Sevag試劑的配方為,氯仿和正丁醇的體積比為4:1。一種陰溝腸桿菌Z0206多糖在制備增強機體抗氧化功能和免疫調(diào)節(jié)功能的保健品或添加劑中的應(yīng)用。一種陰溝腸桿菌Z0206多糖在制備抗腫瘤藥物和抗病毒藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的優(yōu)點(1)采用苯酚-硫酸法和凱氏定氮法測定陰溝腸桿菌Z0206多糖中多糖和蛋白質(zhì)含量。測定結(jié)果顯示粗多糖中多糖、蛋白質(zhì)含量分別為68.02%、28.41%;多糖精品中多糖、蛋白質(zhì)含量分別為99.6%和0.03%。結(jié)果表明,上述提取多糖的生產(chǎn)過程簡單,產(chǎn)品產(chǎn)量和純度較高。(2)陰溝腸桿菌Z0206多糖可顯著提高免疫低下小鼠淋巴細(xì)胞增殖能力以及細(xì)胞因子水平,對免疫低下小鼠的免疫功能具有顯著的調(diào)節(jié)作用。(3)陰溝腸桿菌Z0206多糖對由環(huán)磷酰胺所致的氧化損傷有明顯的拮抗作用,可以顯著提高機體抗氧化酶活性,增強機體抗氧化防御系統(tǒng)的功能,防止有害自由基對細(xì)胞內(nèi)生物大分子的損傷。具體實施例方式以下結(jié)合具體實例對本發(fā)明的技術(shù)方案做進一步說明實施例l、陰溝腸桿菌Z0206多糖的制備方法(1)菌種活化PDA加富培養(yǎng)基配方如下馬鈴薯20%,蛋白胨0.3%,酵母浸膏0.3%,葡萄糖2%,瓊脂粉1.6%。培養(yǎng)用的平板及PDA加富培養(yǎng)基12rC滅菌20min,在無菌室倒平板,待培養(yǎng)基冷卻凝固之后,取冷凍保存的陰溝腸桿菌Z0206菌種,用接種環(huán)接種于PDA加富培養(yǎng)基平板上,3(TC培養(yǎng)2d,重復(fù)操作一次,得到活化的陰溝腸桿菌Z0206菌種。(2)陰溝腸桿菌Z0206多糖發(fā)酵液的制備向250ml三角瓶中加入70ml上述PDA加富液體培養(yǎng)基,12rC滅菌20min,向培養(yǎng)基中接種5環(huán)活化菌種后放置于搖床中30"C振蕩培養(yǎng),往復(fù)振蕩的沖程4-10cm,振蕩頻率200rpm,培養(yǎng)18h后得到發(fā)酵罐種子液。發(fā)酵罐內(nèi)加入70%發(fā)酵培養(yǎng)基(發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為蔗糖2.5%,酵母浸膏0.5%,蛋白胨0.5%,K2HPO40.2%,KH2PO40.1%,MgSO40.05%),121"C蒸汽滅菌20min,接種種子液,接種量3%,發(fā)酵條件為pH為7.0、溫度30°C、通氣量為0.5vvm、機械攪拌轉(zhuǎn)速200rpm,每12h向發(fā)酵罐補充1%葡萄糖,發(fā)酵時間48h,得到含有陰溝腸桿菌Z0206多糖的發(fā)酵液。(3)陰溝腸桿菌Z0206多糖的分離提取a.粗多糖的提取發(fā)酵液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,于6(TC將其濃縮為原體積的1/10,9(TC水浴lh,5000rpm離心15min,收集上清液,用磁力攪拌器邊攪拌邊向上清液中緩緩加入3倍體積的冷無水乙醇,放入4t:冰箱沉淀過夜,然后5000rpm離心15min,沉淀依次用預(yù)冷的丙酮和無水乙醚洗滌,離心,最后將沉淀置于真空干燥器中干燥,得到粗多糖粉末。b.蛋白酶處理取粗多糖10g溶于200mL蒸餾水中(稍加熱促溶),用Na2C03調(diào)PH值至8.0,加胰蛋白酶0.5g,55'C水解2h后,用草酸調(diào)PH值至5.5,加木瓜蛋白酶0.5g,70'C水解3h后,加熱至10(TC,5min終止酶反應(yīng)。7C.三氯乙酸法脫蛋白取200mL的蛋白酶處理液,用草酸調(diào)PH值至7.0,加入8g三氯乙酸,用磁力攪拌器攪拌lh,11000rpm離心10min,取上清。d.Sevag法脫蛋白取上述上清液中,加入1/3體積的Sevag試劑(氯仿和正丁醇的體積比為4:1),充分振蕩,混合25min,充分靜置分層,4000rpm離心5min,重復(fù)數(shù)次直至兩相界面無變性蛋白出現(xiàn)為止。然后用3倍體積預(yù)冷的95%乙醇醇析,所得的沉淀再依次用無水乙醇、丙酮和無水乙醚洗滌兩次,真空干燥,得到脫蛋白多糖。e.脫色將脫蛋白后的多糖配成0.5%的多糖溶液,用氨水調(diào)PH值至8.0,在50'C下滴加20%的11202,至溶液為淡黃色,保溫2h,然后用稀鹽酸中和至7.0。自來水透析48h,蒸餾水透析48h后,加入3倍體積預(yù)冷得95%乙醇,4"C靜置12h后,5000rpm離心10min,沉淀真空干燥,得多糖精品。實施例2、應(yīng)用苯酚-硫酸法檢測陰溝腸桿菌Z0206多糖中多糖含量方法如下準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖20mg于500ml容量瓶中,加水至刻度,吸取0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、l.Oml、1.2ml、1.4ml、1.6ml、1.8ml分別加水補至2.0ml,然后加入6.0%苯酚l.Oml和濃硫酸5.0ml,靜置10min,搖勻,30min水浴,20min后于490nm測定光密度,以2.0ml水按同樣操作為空白,橫坐標(biāo)x為多糖含量,縱坐標(biāo)y為光密度值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。吸取樣品液1.0ml(相當(dāng)于40嗎左右的多糖),按上述步驟操作,測定光密度,以標(biāo)準(zhǔn)曲線計算多糖含量。實施例3、應(yīng)用凱氏定氮法測定陰溝腸桿菌Z0206多糖中蛋白質(zhì)含量。采用國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的凱氏定氮法(GB/T5009.5-1985)測定陰溝腸桿菌Z0206多糖中蛋白質(zhì)含量。實施例2和實施例3:采用苯酚-硫酸法和凱氏定氮法測定陰溝腸桿菌Z0206多糖中多糖和蛋白質(zhì)含量。測定結(jié)果顯示粗多糖中多糖、蛋白質(zhì)含量糖精品中多糖、蛋白質(zhì)含量分別為99.6%和0.03%。結(jié)果表明,上述提取多糖的生產(chǎn)過程簡單,產(chǎn)品產(chǎn)量和純度較高。實施例4、陰溝腸桿菌Z0206多糖免疫調(diào)節(jié)活性及抗氧化活性研究。取ICR小鼠40只(雌雄各半),隨機分為對照組(I)、環(huán)磷酰胺組UI)、環(huán)磷酰胺+多糖組(III)和多糖組(IV),I、1I組每天灌胃生理鹽水0.4mL,III、IV組每天灌胃多糖0.4mL(400mg/kg體重),II、11I組在第12d腹腔注射環(huán)磷酰胺(50mg/kg體重)誘導(dǎo)免疫低下,試驗期14d,在試驗的第10天,所有的試驗鼠腹腔注射0.2mL10n/。的SRBC進行免疫。于最后一次給藥后12小時,頸椎脫臼處死小鼠,取樣進行以下指標(biāo)分析。1、采集脾臟,MTT法進行脾臟淋巴細(xì)胞增殖試驗,測定T/B淋巴細(xì)胞增殖效果試驗結(jié)束后,處死小鼠,用75%酒精浸泡5min,取脾臟(無菌操作),置于Hank,S液中于200目網(wǎng)中研磨,無菌制備成單細(xì)胞懸液,用RPMI-1640培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為2xl06/ml,96孔細(xì)胞培養(yǎng)板每孔分別加入不同處理的小鼠脾細(xì)胞懸液90pL,50昭/mL的ConA液10pL或100jig/mL的LPS液10pL,對照孔加入90pL的脾細(xì)胞懸液和lOpLRPMI-1640培養(yǎng)液,置5%C02,37°C細(xì)胞培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),于培養(yǎng)第68h,取出培養(yǎng)板,每孔加入MTT(0.4%)10pL,繼續(xù)培養(yǎng)4h后每孔加入10(^LDMSO,用平板搖床搖勻,紫色結(jié)晶完全溶解后用酶聯(lián)免疫檢測儀(BIO-RAD)于570nm處測OD值。2、采集血樣制備血清,采用ELISA方法試劑盒測定血清中細(xì)胞因子IL-2和TNF-a含量。采集肝臟樣本,制備10%肝臟勻漿,采用試劑盒測定肝臟中SOD和GSH-Px活性。試驗結(jié)果如下表所示表1為陰溝腸桿菌Z0206多糖對ICR小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖的影響;表2為陰溝腸桿菌Z0206多糖對ICR小鼠血清細(xì)胞因子IL-2和TNF-a含量的影響;表3為陰溝腸桿菌Z0206多糖對ICR小鼠肝臟中SOD和GSH-Px活性的影響。9表l<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注同列上標(biāo)字母不同表示差異顯著(p<0.05).與對照組相比,小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺后,ConA誘導(dǎo)的脾臟T淋巴細(xì)胞增殖率和LPS誘導(dǎo)的B淋巴細(xì)胞增殖率分別降低32.16%(/<0.05)和43.37%(;^0.05);與環(huán)磷酰胺單獨作用組相比,小鼠經(jīng)400mg/kg多糖預(yù)防性灌胃再腹腔注射環(huán)磷酰胺,ConA誘導(dǎo)的脾臟T淋巴細(xì)胞增殖率和LPS誘導(dǎo)的B淋巴細(xì)胞增殖率分別提高10.14%(p<0.05)和22.68%(/<0.05)。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注同列上標(biāo)字母不同表示差異顯著(p<0.05).與對照組相比,小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺后,血清中IL-2和TNF-a水平分別降低40.04%(p<0.05)和47.41%(pO.05);與環(huán)磷酰胺作用組相比,小鼠經(jīng)400mg/kg多糖預(yù)防性灌胃再腹腔注射環(huán)磷酰胺,血清中TNF-a水平提高34.30%(;<0.05);與對照相比,單獨灌胃400mg/kg的多糖組血清中TNF-a水平提高7.84%,但差異不顯著(p>0.05)。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注同列上標(biāo)字母不同表示差異顯著(pO.05).與對照組相比,小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺后,肝臟中SOD和GSH-Px活性分別降低7.14%(;<0.05)和18.64%(/K0.05);與環(huán)磷酰胺作用組相比,小鼠經(jīng)400mg/kg多糖預(yù)防性灌胃再腹腔注射環(huán)磷酰胺,肝臟中SOD和GSH-Px活性分別提高6.61%(p<0,05)和22.38%(;O.05);與對照相比,單獨灌胃400mg/kg的多糖組肝臟SOD活性提高7.49%(/<0.05)。最后,還需要注意的是,以上列舉的僅是本發(fā)明的具體實施例子。顯然,本發(fā)明不限于以上實施例子,還可以有許多變形。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能從本發(fā)明公開的內(nèi)容直接導(dǎo)出或聯(lián)想到的所有變形,均應(yīng)認(rèn)為是本發(fā)明的保護范圍。權(quán)利要求1、一種陰溝腸桿菌,其特征在于該陰溝腸桿菌為陰溝腸桿菌Z0206CGMCCNO2279。2、一種陰溝腸桿菌Z0206多糖的制備方法,其特征依次包括以下步驟(1)陰溝腸桿菌Z0206菌種活化取出冷凍保存的如權(quán)利要求1所述陰溝腸桿菌Z0206菌種,室溫放置lh后,接種到滅菌PDA加富固體培養(yǎng)基上,28。C32。C培養(yǎng)36h48h,再次轉(zhuǎn)接到PDA加富固體培養(yǎng)基上,28。C32。C培養(yǎng)36h48h,得到活化菌種;(2)將活化好的菌種,接種至PDA加富液體培養(yǎng)基中進行搖瓶發(fā)酵,28'C32'C往復(fù)振蕩培養(yǎng),培養(yǎng)時間18h20h,得到發(fā)酵罐發(fā)酵種子液,發(fā)酵罐內(nèi)加入70%發(fā)酵培養(yǎng)基,12rC蒸汽滅菌20min,接種種子液,發(fā)酵時間48h72h,得到含有陰溝腸桿菌Z0206多糖的發(fā)酵液;(3)發(fā)酵液于60。C7(TC濃縮至原體積的1/10,再80。C9(TC水浴lh1.5h,5000rpm離心10min15min,收集上清液,加入35倍體積預(yù)冷的95%乙醇,4。C靜置12h后,5000rpm離心10min15min,沉淀再依次用無水乙醇、丙酮和無水乙醚洗滌,離心,沉淀真空干燥,即得到粗多糖粉末;(4)蛋白酶處理將步驟(3)得到的粗多糖溶解于20倍體積的熱的蒸餾水中,用Na2C03調(diào)pH至7.09.0,加入0.25%1%胰蛋白酶(w/v),55'C水解l2h后,用草酸調(diào)pH至5.05.7,然后加入0.25%1%木瓜蛋白酶(w/v),65。C70。C水解2h3h后,于100。C水浴加熱56min,以終止酶反應(yīng);(5)三氯乙酸法脫蛋白取步驟(4)后得到的蛋白酶處理液,用草酸調(diào)pH值至7.0,加入2%4%三氯乙酸(w/v),室溫下磁力攪拌lh后,11000rpm離心1015min,取上清;(6)Sevag法脫蛋白向步驟(5)取得的上清液中加入1/3體積的Sevag試劑,充分振蕩,混合2030min,充分靜置分層,4000rpm離心5min,重復(fù)操作數(shù)次至兩相界面不再出現(xiàn)蛋白沉淀;然后用35倍體積預(yù)冷的95%乙醇醇析,所得的沉淀再依次用無水乙醇、丙酮和無水乙醚洗滌兩次,真空干燥,得到脫蛋白多糖。(7)脫色將經(jīng)步驟(6)脫蛋白后的多糖配成0.5%多糖溶液,用氨水調(diào)pH至8.0,在5(TC下滴加20。/。的H202,至溶液為淡黃色,保溫2h,然后用稀鹽酸中和至7.0;自來水透析23d,再蒸餾水透析23d后,加入35倍體積預(yù)冷的95%乙醇,4。C靜置12h后,5000rpm離心10min15min,沉淀真空干燥,得多糖精品。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的陰溝腸桿菌Z0206多糖的制備方法,其特征在于所述步驟(1)和(2)中,PDA加富培養(yǎng)基的配方為馬鈴薯20%,蛋白胨0.20.5%,酵母浸膏0.3%,葡萄糖2%,瓊脂粉1.6%;發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為蔗糖2.5%,酵母浸膏0.5%,蛋白胨0.5%,K2HPO40.2°/。,KH2PO40.1%,MgSO40.05%。4、根據(jù)權(quán)利要求2所述的陰溝腸桿菌Z0206多糖的制備方法,其特征在于所述步驟(2)中,搖瓶發(fā)酵條件為接種量3%,往復(fù)振蕩沖程410cm,振蕩頻率200250rpm。5、根據(jù)權(quán)利要求2所述的陰溝腸桿菌Z0206多糖的制備方法,其特征在于所述步驟(2)中,發(fā)酵罐發(fā)酵條件為接種量3%,pH為7.0,溫度3(TC,通氣量為0.250.75vvm,機械攪拌轉(zhuǎn)速200300rpm,每12h向發(fā)酵罐補充1%3%的葡萄糖。6、根據(jù)權(quán)利要求2所述的陰溝腸桿菌Z0206多糖的制備方法,其特征在于所述步驟(6)中的Sevag試劑的配方為,氯仿和正丁醇的體積比為4:1。7、一種如權(quán)利要求2所述陰溝腸桿菌Z0206多糖在制備增強機體抗氧化功能和免疫調(diào)節(jié)功能的保健品或添加劑中的應(yīng)用。8、一種如權(quán)利要求2所述陰溝腸桿菌Z0206多糖在制備抗腫瘤藥物和抗病毒藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開了一種陰溝腸桿菌Z0206,已于2007年12月3日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏號CGMCCNO2279;還公開了一種陰溝腸桿菌Z0206多糖的制備方法和多糖的應(yīng)用。本發(fā)明的優(yōu)點本發(fā)明提取多糖的生產(chǎn)過程簡單,產(chǎn)品產(chǎn)量和純度較高;陰溝腸桿菌Z0206多糖可顯著提高免疫低下小鼠淋巴細(xì)胞增殖能力以及細(xì)胞因子水平,對免疫低下小鼠的免疫功能具有顯著的調(diào)節(jié)作用;陰溝腸桿菌Z0206多糖對由環(huán)磷酰胺所致的氧化損傷有明顯的拮抗作用,可以顯著提高機體抗氧化酶活性,增強機體抗氧化防御系統(tǒng)的功能,防止有害自由基對細(xì)胞內(nèi)生物大分子的損傷。文檔編號A61P31/00GK101440355SQ20081012131公開日2009年5月27日申請日期2008年10月6日優(yōu)先權(quán)日2008年10月6日發(fā)明者徐春蘭,汪以真,羊雪芹,靳明亮申請人:浙江大學(xué)
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