專利名稱：：一種乙氧碳?；?取代噻唑二氫嘧啶的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種新的乙氧碳酰基-取代噻唑二氫嘧嚏，其制備方法及其作為藥物，尤其是作為治療和預(yù)防乙型肝炎病毒感染的藥物的用途。本發(fā)明還涉及這些二氫嘧啶同其他抗病毒劑和，適當(dāng)情況下，免疫調(diào)節(jié)劑的組合物，以及含有這些組合物尤其是治療和預(yù)防HBV感染諸如乙型肝炎的組合物的藥物。
背景技術(shù)：
：乙型肝炎病毒屬于肝病毒科。它可引起急性的和或持續(xù)/漸進(jìn)的慢性病。B型肝炎病毒還引起病理形態(tài)中的許多其他的臨床病征一一尤其是肝臟的慢性炎癥、肝硬化和肝細(xì)胞的癌.變。另外，與丁型肝炎的共同感染在疾病的發(fā)展過程中會產(chǎn)生不利影響。干擾素和拉米夫定(lamivudine)是批準(zhǔn)用于治療慢性肝炎治療的常規(guī)藥物。然而，干擾素只具有中等的活性，并具有有害的副反應(yīng)；雖然拉米夫定(lamivudine)具有良好的活性，但其在治療中抗性發(fā)展迅速，并在停止治療之后常常出現(xiàn)反彈效應(yīng)，拉米夫定(lamivudine)(3-TC)〉的IC50值為300nM(Science,299(2003),893-896)。US7074784公開了6-胺基烷基二氫嘧啶及其作為藥物的應(yīng)用，尤其是用于治療和預(yù)防乙型肝炎病毒感染。該專利公布了54個不同的實(shí)施例，它們幾乎全部(50個)都是在R6的位置具有氟取代2-吡啶殘基的化合物。該專利的所有實(shí)施例(54個)中R3均為甲基。該專利指出具有較長的烷基連(如乙基)的化合物是弱活性或甚至是惰性的。該專利中的具有下述結(jié)構(gòu)的9個化合物(實(shí)施例
發(fā)明內(nèi)容我們驚人地發(fā)現(xiàn)了具有噻唑-2-基取代基((R6=噻唑-2-基)乙酯(尺3=乙基)的該專利的實(shí)施例45鄰-氯和R2=對-氯)，產(chǎn)生了3倍高活性的衍生物，即IC5。低于lnM。(見表l)R2表1<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>因此，本發(fā)明涉及通式(I)所示的化合物及其同分異構(gòu)體(Ia)1，5,7，9，12,24,31，34，45)其中八個具8有6位的氟取代2-吡啶殘基。只有一個實(shí)施例(實(shí)施例45)的116=噻唑-2-基。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>其中W是鄰-氯，R2是對-氯，R3是CVC3烷基，W是噻唑-2-基，X是亞甲基，和Z是嗎啉基。優(yōu)選地，在本發(fā)明的通式(I)和(Ia)所示的化合物中Ri是鄰-氯，W是對-氯，W是乙基，W是噻唑-2-基，X是亞甲基，以及Z是嗎啉基。本發(fā)明還涉及上述化合物的對映異構(gòu)體及其各自的混合物。外消旋體能通過已知的手段分離出來，本質(zhì)上說它是立體異構(gòu)體中的均一成分。本發(fā)明的化合物包含通式(I)和(Ia)的異構(gòu)體及其混合物。本發(fā)明的化合物也可以是鹽的形式。在本發(fā)明中，生理上可接受的鹽是優(yōu)選的。生理上可接受的鹽可以是無機(jī)酸鹽或者有機(jī)酸鹽。優(yōu)選的是無機(jī)酸的鹽，諸如，例如鹽酸、氫溴酸、磷酸或硫酸等，或者有機(jī)羧酸或磺酸，例如醋酸、馬來酸、反丁烯二酸、蘋果酸、杼檬酸、酒石酸、乳酸、苯甲酸或甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸或萘-二硫磺酸等形成的鹽。生理上可接受的鹽還可以是本發(fā)明化合物的金屬鹽或者銨鹽。尤其優(yōu)選的實(shí)例是鈉、鉀、鎂、或鈣鹽，以及由氨或有機(jī)胺，諸如乙胺,二-或三乙胺，二-或三乙醇胺，二環(huán)己基胺，二甲基氨基乙醇，精氨酸，賴氨酸，乙二胺，或2-苯乙胺等生成的銨鹽。本發(fā)明的化合物(I)可由下述方法制備[A]首先將苯甲醛(ii)與通式(in)所示的p-酮酯在加入或不加入堿或酸，適當(dāng)時在惰性有機(jī)溶劑存在下進(jìn)行反應(yīng)轉(zhuǎn)化成通式(IV)所示的苯亞甲基化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>其中R1、R2、R3、X和Z的含義如前所述。然后，將后者與通式(V)所示的脒或者其鹽(諸如，例如鹽酸鹽或醋酸鹽)，在加入或不加入堿或酸，適當(dāng)時在存在惰性有機(jī)溶劑的情況下，進(jìn)行反應(yīng)其中R6含義如前所述，或[B]將通式(III)所示化合物同醛(II)和脒(V)或它們的鹽(諸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>如，鹽酸鹽或醋酸鹽)在加入或不加入堿或酸，適當(dāng)時在存在惰性有機(jī)溶劑的情況下，進(jìn)行一步反應(yīng)；或[C]當(dāng)通式(I)中的X是亞甲基，將通式(VI)所示化合物其中R1、R2、R3和R6含義如前所述，Y是親核取代基團(tuán)，諸如氯化物，溴化物，碘化物，甲磺酰基或甲苯磺?；c嗎啉(VII)H、z(vn)在加入或不加入堿，適當(dāng)時存在惰性溶劑的條件下進(jìn)行反應(yīng)?；衔?vi)的制備可以通過，例如，用通式(vm)所示化合物其中R1，R2，R3和R6含義如前所述，和溴化劑諸如，N-溴琥珀酰亞胺，優(yōu)選在惰性溶液中進(jìn)行反應(yīng)，得到通式(IX)所示化合物將具有親核取代基團(tuán)的后者直接或者按照文獻(xiàn)中所述的常規(guī)方法進(jìn)一步轉(zhuǎn)變之后，與嗎啉(VII)反應(yīng)。[D]通式(II)所示的醛與通式(X)所示的化合物，當(dāng)適合時在惰性溶劑中反應(yīng)，O3IIR3—0—C—CH=C—X—ZNH2(X)其中R3，X和Z含義如前所述，通式(V)所示的脒帶有或不帶有堿基加成物。為制備本發(fā)明的通式(I)所示化合物，其中X是亞甲基，Z是嗎啉基，可將通式(XI)所示的氯乙酸酯與嗎啉(VII)反應(yīng)來制備相應(yīng)的卩-酮羧酸酯(III)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>(XI)其中R3含義如前所述。作為起始原料的2-氯-4-氟-苯甲醛(n)可通過商業(yè)途徑獲得。用作起始原料的p-酮羧酸酯(III)是公知的，或者是能夠從文獻(xiàn)公布的已知方法中類推制得的[如，D.Borrmann，"UmsetzungvonDiketenmitAlkoholen，PhenolenundMercaptanen"，in"MethodenderorganischenChemie"(Houben-Weyl)，vol.VII/4,230ff(1968);Y.Oikawa，K.SuganoundO.Yonemitsu,J.Org.Chem.43,2087(1978)]?；衔?V)是已知的，并可根據(jù)WO-A-"/54326和WO-A-99/54329的描述來制備。嗎啉(VII)可通過商業(yè)途徑獲得?；衔?VIII)和(X)可根據(jù)WO-A-99/54326中描迷的步驟[A]或[B]制得。所有的惰性有機(jī)溶劑都適用于A、B、C和D步驟。其中優(yōu)選的包括醇如，甲醇、乙醇、異丙醇，醚如二惡烷、二乙醚、四氫吹喃、乙二醇單甲醚，乙二醇二甲醚，羧酸諸如冰醋酸、或二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、乙腈、吡啶和六甲基磷酰三胺。反應(yīng)溫度可以在相當(dāng)寬的范圍內(nèi)變化。通常使用20到15(TC之間的溫度，但優(yōu)選的是在所選溶劑的沸點(diǎn)溫度。反應(yīng)可以在大氣壓下進(jìn)行，也可以在高壓下進(jìn)行。通常在大氣壓下進(jìn)行。反應(yīng)可以在加入或者不加入酸或者堿的環(huán)境下進(jìn)行；但是，在弱酸諸如醋酸或者蟻酸等的存在下進(jìn)行反應(yīng)是較好的。本發(fā)明的一種實(shí)施方案涉及含有A)至少一種上述的二氫喻^^，B)至少一種與A)不同的其他抗病毒劑的組合物。本發(fā)明的一個詳細(xì)的實(shí)施方案涉及含有A)上述二氫嗜^^，B)HBV聚合酶抑制劑和，和合適的情況下，C)免疫調(diào)節(jié)劑的組合物。優(yōu)選的免疫調(diào)節(jié)劑C)包括，例如，所有的干擾素諸如a-，p-和，干擾素，尤其是a-2a-和oc-2b-干擾素，白細(xì)胞介素諸如白細(xì)胞介素-2,多肽諸如胸腺素-a-l和胸腺托南(thymoctonan)，咪唑喹啉衍生物諸如⑧左咪唑，免疫球蛋白和治療疫苗。.因此，本發(fā)明還涉及用于治療和預(yù)防HBV感染的這些組合物及其在治療HBV引發(fā)的疾病上的用途。相對于單一化合物的單一治療，本發(fā)明組合物的使用對治療HBV引發(fā)的疾病是有益的，主要是協(xié)同的抗病毒活性，以及相對于單個成分的Tox-50(有50%的細(xì)胞存活的毒性范圍)來說，本發(fā)明的組合物具有良好的耐受性。用于實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的HBV聚合酶抑制劑B為在Ph.A.Furman等在《抗微生物制劑與化療方法》(AntimicrobialAgentsandChemotherapy)Vol.36(No.12),2688(1992)中的內(nèi)生聚合酶實(shí)驗(yàn)中揭示的那些物質(zhì)，以及那些在下文中描述的，抑制HBVDNA雙鏈的形成，從而導(dǎo)致最大50%活性值為零的那些物質(zhì)。來自培養(yǎng)懸浮液的HBV毒粒在體外將核苷5'-三磷酸鹽整合到HBV的DNA正鏈中。通過使用瓊酯糖凝膠電泳，發(fā)現(xiàn)其中存在[ct，P]-脫氧核苷5'-三磷酸鹽摻入到病毒3.2kbDNA中的產(chǎn)物，不存在具有潛在HBV聚合酶-抑制性質(zhì)的物質(zhì)。從HepG2.2.15細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)懸浮物中，用聚乙二醇沉淀、濃縮得到HBV毒粒。l體積份的澄清細(xì)胞培養(yǎng)懸浮物與1/4體積份的含有50%(重量)聚乙二醇8000和0.6M氯化鈉的水溶液混合。2500xg離心沉淀15分鐘，沉淀物用2ml含有0.05Mtris-HClM(pH7.5)的緩沖液再懸浮，用含有100mM氯化鉀的該緩沖液透析。樣品在-80。C時冷凍。每個反應(yīng)混合物(IOOnl)含有至少105HBV毒粒、50mMtris-HCl(p.sub,H7.5)、300mM氯化鉀、50mM氯化鎂、0.1%NonidentP-40(非離子型洗滌劑，BoehringerMannheim)、10nMdATP，10dGTP，10dTTP;10nCi[32P]dCTP(3000Ci/mmol;最終濃度為33nM)和1pM三磷酸形式的聚合酶潛在抑制劑。樣品在37t:下培養(yǎng)一個小時，然后加入50mMEDTA中止反應(yīng)。加入10%重量/體積SDS溶液(每90ml水含有10gSDS)到終濃度為1%(體積)(基于溶液總體積)，加入蛋白酶K至最終濃度為lmg/ml。然后在37'C溫育l小時，用等體積的苯酚/氯仿/異戊醇(體積比為25:24:1)溶液提取，DNA從含有乙醇的水相中沉淀出來。將DNA小球懸浮在10nl凝膠緩沖液(l升水中含有10.8gtris、5.5g硼酸和0.75gEDTA(=TBEbuffer))中，并用瓊脂糖凝膠電泳分離。將其中的凝膠干燥或者釆用Southern轉(zhuǎn)化技術(shù)將其中的核酸轉(zhuǎn)變成膜。然后與陰性對照(=與空白或惰性對照物進(jìn)行endo-pol反應(yīng))比較來檢測生成的標(biāo)記DNA雙鏈的量。如果存在對照組的最大50%濃度則表明存在HBV聚合酶抑制劑。優(yōu)選的HBV聚合酶抑制劑B)包括，例如，3TC-拉米夫定(lamivudine)=4-氨基-1-[(211-順式)-2-(羥甲基)-1.3-氧硫茂-5-基-]-嘧嗖國2(lH)-酮，cf.EP-B382526(=U.S.Pat.No.5，047,407)和WO91/11186(=U.S.Pat.No.5,204,466);阿德福韋酯(Adefovirdipivoxil)=9-[2-[雙(特戊酰羥甲氧基)膦酰甲氧基]乙基]腺嘌呤，cf.EP-B481214(=U.S.PatNos.5,663,159和5,792,756)，U.S.Pat.Nos.4,724,233和4，808，716;BMS200475=[1S-(1..alpha.,3"alpha.，4,.beta.)]畫2-氨基誦1.9-二氫-9-[4-羥基-3-(羥甲基)-2-亞甲基-環(huán)戊基]-611-嘌呤-6-酮，cf.EP-B481754(=U.S.Pat.Nos.5,206,244和5,340,816),WO98/09964和99/41275;阿巴卡韋(Abacavir)0(1S-順式)-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙胺)-9H-嘌吟-9-基]-2-基-環(huán)戊烯-l-甲醇,cf.EP-B349242(=U.S.Pat.No.5,049,671)和EP國B434450(=U.S.PatNo.5,034,394);FTC氣2R-順式)-4-氨基-5-氟-l-[2-(羥甲基)-1.3-氧硫茂-5-基]-p-嘧^^-2(lH)誦酮，cf.WO92/14743(=U.S.PatNos.5,204，466;5,210,085;5,539,116;5,700,937;5,728,575;5,814,639;5，827，727;5,852,027;5,892,025;5,914,331;5,914,400)和WO92/18517;卩-L-FDD05-(6-氨基-2-氟-9H-嘌呤-9-基)-四氫-2-吹喃甲醇，cf.WO94/27616(=U.S.Pat.Nos.5,627,160;5,561,120;5，631，239和5,830，881);L-FMAlK-(2-脫氧-2-氟-.beta.-L-阿拉伯吹喃糖)-5-甲基-嗜^^e—2.4(1H,3H)-二酮，cf.WO99/05157，WO99/05158和U.S.Pat-No.5，753，789。本發(fā)明的一個更優(yōu)選的實(shí)施方案涉及含有A)上述二氫嘧啶(I)和(Ia)及B)拉米夫定(lamivudine)的組合物。另一個優(yōu)選的HBV抗病毒劑B含有，例如，下述通式所示的苯基丙烯酰胺其中R1和R2，分別獨(dú)立地為，CrC4-烷基或者，與其所在位置上的氮原子一起，形成具有5-6個環(huán)原子包括碳和/或氧原子的環(huán)。R3至R12，分別獨(dú)立地為氫，卣素，d-Cr烷基，任意的取代C廣C4畫烷氧基，硝基，氰基或三氟甲基。R13是氫，CKV烷基，d-CV?；蚍纪榛襒是鹵素或任意的取代d-C4-烷基。這些苯基丙烯酰胺及其制備方法已在WO98/33501中公開，這里提及是為了公開的目的。AT-61是化合物優(yōu)選的免疫調(diào)節(jié)劑C)包括例如，所有的干擾如，oc-，p-和Y-干擾素，尤其還可以是a-2a-和oc-2b-干擾，白細(xì)胞介素如白細(xì)胞介素-2,多肽如胸腺素-oc-l和胸腺托南(thymoctonan)，咪唑喹啉衍生物如⑧左咪唑，免疫球蛋白和治療疫苗。本發(fā)明的另一個優(yōu)選的實(shí)施方式涉及含有A)上述二氫嘧P定(I)和(Ia);B)拉米夫定(lamivudine);以及合適的情況下C)干擾素的組合物。實(shí)驗(yàn)描述基于M.A.SellsProc.Natl.Acad.Sci.84，10051009(1987)以及B.E.Korba等.，AntiviralResearch19，5570(1992)等描述的方法研究本發(fā)明的化合物對乙型肝炎病毒的抗病毒作用?？共《緶y試在96-孔微量滴定板上進(jìn)行。第一直列只接受培養(yǎng)基和HepG2.2.15細(xì)胞，作為病毒對照.將測試化合物的母液(50mM)先溶解在DMSO中，然后用HepG2.2.15培養(yǎng)基稀釋。通常每次用移液管移取100)tiM測試濃度(1st測試濃度)的本發(fā)明化合物到微量滴定板的第二測試列，然后在加入2%重量胎牛血清(體積25pl)的培養(yǎng)基中分兩步稀釋21()倍。微量滴定板的每個加入了2%重量胎牛血清的培養(yǎng)基的孔中都含有225julHepG2.2.15細(xì)胞懸浮液(5x104cells/ml)。37°C、5%C02(v/v)培養(yǎng)測試混合物4天。然后將表面懸浮物吸出丟棄，向孔中加入225pl新制備的培養(yǎng)基。重新加入25nl體積的1/10濃度的本發(fā)明化合物的溶液?；旌衔锢^續(xù)培養(yǎng)4天。在收集懸浮物測試抗病毒效果之前，先在光學(xué)顯微鏡下或者通過生物化學(xué)檢測方法(例如AlamarBluestain或TrypanBluestain)檢測HepG2.2.15細(xì)胞細(xì)胞毒素的變化。收集表面懸浮物和/或細(xì)胞并用抽真空的方法在96-孔斑點(diǎn)室上覆蓋一層尼龍膜(根據(jù)制造商的信息)細(xì)胞毒素的測定檢測HepG2.2.15細(xì)胞中物質(zhì)引發(fā)的細(xì)胞毒素或抑制細(xì)胞的變化，例如，在光學(xué)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)的改變。HepG2.2.15細(xì)胞的這些物質(zhì)引發(fā)的變化與未處理過的細(xì)胞相比起來是明顯的，例如，細(xì)胞溶解，液泡或者細(xì)胞形態(tài)的改變。50%毒性(丁(《.-50)是指與相應(yīng)的對照細(xì)胞相比50%的細(xì)胞表現(xiàn)出一種形態(tài)學(xué)。通過其他的宿主細(xì)胞諸如，例如HeLa細(xì)胞，初級人外周造血細(xì)胞或轉(zhuǎn)化細(xì)胞系如H-9細(xì)胞上測試本發(fā)明的一些化合物的耐受性。在本發(fā)明的化合物濃度MO^M時沒有檢測到細(xì)胞毒素的改變?？共《咀饔玫臏y定在將表面懸浮物或溶解的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到點(diǎn)裝置(如上述)的尼龍膜上之后，將HepG2.2.15細(xì)胞的胞內(nèi)或胞外懸浮物變性(1.5MNaC1/0.5NNaOH),中和(3MNaC1/0.5MTrisHC1，pH7.5),然后沖洗(2xSSC)。通過在120。C下溫育過濾器2-4小時，將DNA烘干至膜上。DNA雜交通常通過非放射性，地高辛-標(biāo)記的乙型肝炎-特異性DNA探針檢測來自尼龍過濾器上已處理的HepG2.2.15細(xì)胞的病毒DNA，DNA探針用地高辛標(biāo)記，并且根據(jù)制造商的說明書進(jìn)行純化和雜交。預(yù)雜交和雜交在5xSSC，lx封閉試劑，0.1%(重量)N-月桂酰肌氨酸，0.02%(重量)SDS和IOOjug鯡魚精DNA中進(jìn)行。預(yù)雜交在60。C進(jìn)行30分鐘，然后與20至40ng/ml地高辛標(biāo)記的、變性的HBV-特異性DNA(14小時，60。C)進(jìn)行特定雜交。洗滌過濾器。用地髙辛抗體險測HBV-DNA按照造制造商的說明進(jìn)行地高辛-標(biāo)記DNA的免疫檢測洗滌過濾器在封閉試劑中雜交(依照制造商的說明)。然后利用與堿性磷酸酶耦合的抗-DIG抗體雜交30分鐘。在洗滌步驟之后，加入堿性磷酸酶的底物，CSPD,與過濾器一起溫育5分鐘，然后包上塑料膜，37'C下另外15分鐘.將過濾器曝光在X射線層下，可看見乙型肝炎DNA的發(fā)光信號(溫育取決于信號強(qiáng)度10分鐘至2小時).最大半抑制濃度(IC5。，50%抑制濃度)為與未處理樣本相比本發(fā)明化合物降低50%胞內(nèi)或胞外乙肝病毒群的濃度。本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出ICs。低于1nM的有效的抗病毒作用，這是沒有預(yù)料到的。因此，本發(fā)明的化合物適用于病毒引發(fā)的疾病尤其是急性和慢性持續(xù)的HBV病毒感染的治療。HBV引發(fā)的慢性病毒病可能導(dǎo)致病態(tài)變得嚴(yán)重，慢性乙型肝炎病毒感染在許多情況下可導(dǎo)致肝硬化和/或肝細(xì)胞癌變。對本發(fā)明的化合物來說，可能被提及的指示區(qū)域是，例如可能導(dǎo)致傳染性肝炎的急性和慢性病毒感染的治療，例如，乙肝病毒感染。本發(fā)明的化合物尤其適合治療慢性乙肝感染和急性和慢性乙肝病毒感染。本發(fā)明包括藥物制劑，除了無毒，惰性的制藥學(xué)上合適的載體之外，還含有一種或多種本發(fā)明的化合物(I)或(Ia)或組合物或含有一種或多種活性成分(I)或(Ia)或本發(fā)明的組合物。用于上述藥物制劑中的活性成分(I)和(Ia),其濃度相對于整個混合物約為0.1至99.5%(重量)，優(yōu)選約為0.5至95%(重量)。上述藥物制劑也可以包含化合物(I)和(Ia)以外的其他活性藥物成分。本發(fā)明的組合物中組分A、B和合適的C的含量比例可以在較寬的限制范圍內(nèi)變化，優(yōu)選5-500mg的A/10-1000mg的B,尤其是10-200mg的A/20-400mg的B。組分c，適當(dāng)?shù)臅r候也可使用，其用量優(yōu)選1至10百萬，更優(yōu)選2至7百萬，I.U.(國際單位)，在超過一年的時期內(nèi)每周3次。用于上述藥物制劑的本發(fā)明的化合物或組合物，其濃度相對于整個混合物通常為約0.1%至99.5%,優(yōu)選約0.5%至95%，(重量百分比)。上述藥物制劑可以通過公知的常規(guī)方法來制備，例如將活性成分和載體混合。無論是在人體還是在獸醫(yī)學(xué)上每24小時服用總劑量為約0.05至約500，優(yōu)選O.l至100mg/kg體重的活性成分已經(jīng)被普遍證明是有益的，合適單劑量的多次服用，可以達(dá)到理想的效果。單劑量含有的活性成分優(yōu)選在總量約0.1至約80，優(yōu)選0.1至30mg/kg體重。無論如何，尤其是根據(jù)待治療受試者的種類和體重，病癥的特性和嚴(yán)重程度，制劑的類型，藥物服用的方式以及藥物服用的時間或間隔來改變上述的劑量是必要的。因此，本發(fā)明還涉及用于控制疾病的上述化合物和組合物。本發(fā)明還涉及至少含有一種上述化合物或組合物和適當(dāng)?shù)那闆r'下，含有一種或幾種其他活性藥物成分的藥物。本發(fā)明還涉及，用于上述化合物和組合物用于制備治療和預(yù)防上述疾病尤其是病毒性疾病特別是乙型肝炎的藥物的用途。除特別指明的外，下述實(shí)施例中的百分?jǐn)?shù)均是重量百分?jǐn)?shù)?；旌先芤褐腥軇┑谋壤阁w積比。實(shí)施例A.中間體實(shí)施例l乙基4-(2,4-二氯苯基)-2-(噻唑-2-基)-6-甲基-l,4-二氫嘧啶-5-羧酸酯將訓(xùn)g(57.1mmol)of2,4-二氯苯甲醛，7.4g(57.1mmol)乙基乙酰乙酸，9.3g(57.1mmol)2-脒基-噻唑鹽酸鹽和5.7g(69.5mmol)醋酸鈉溶解或懸浮于500ml乙醇中沸騰回流16小時。冷卻至室溫，抽氣過濾，水洗殘?jiān)コ裏o機(jī)鹽。得產(chǎn)物11.8g(52.5%)熔點(diǎn)164-166。C。實(shí)施例2乙基6-溴甲基4-(2，4-二氯苯基)-2-(噻唑-2-基)-l,4-二氫嘧啶-5-羧酸酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>將實(shí)施例1制得的8.0g(20.2mmol)乙基4-(2，4-二氯苯基)-2-(噻唑-2-基)-6-甲基-l，4-二氫嘧啶-5-羧酸酯加入到140ml四氯化碳中，氬氣氛圍下加熱至50。C，得到澄清溶液。在此溫度，加入4.36g(24.2mmol)N-溴琥珀酰亞胺，保持在該溫度混合10分鐘。立刻冷卻，室溫下抽氣過濾，減壓濃縮。HPLC檢測產(chǎn)物純度高于90%,并作為下一步的原料。RfK).68(石油醚/乙酸乙酯=8:2)B.制備實(shí)施例乙基4-(2,4-二氯苯基)-2-(噻唑-2-基)-6-(4-嗎啉甲基)-l，4-二氫嘧啶-5隱羧酸酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>將5.0g實(shí)施例2新制備的乙基-6-溴甲基-4-(2-氯4-氯苯基)-2-(蓬哇-2-基)-l，4-二氫嘧嚏-5-羧酸酯加入到60ml甲醇中形成溶液，同5倍量的嗎啉混合，室溫下攪拌30分鐘。溶液用水稀釋，乙實(shí)施例3酸乙酯萃取。產(chǎn)量:4.1g熔點(diǎn)155-157°C。Rf=0.48(石油醚/乙酸乙酯=8:2)實(shí)施例3制得的對映異構(gòu)體在手性柱(DaicelChiralpakAS-H,流動相正己烷/乙醇=99/1)上分離實(shí)施例3中的抗-HBV活性化合物均是保留時間較長的對映體。本發(fā)明的化合物的活性數(shù)據(jù)列表如下實(shí)施例No.IC50(nM)30.6(-)-30.3使用本發(fā)明的化合物治療乙型肝炎病毒產(chǎn)生的HepG2.2.15細(xì)胞導(dǎo)致了胞內(nèi)和/或胞外病毒DNA的減少。權(quán)利要求1、通式(I)及其同分異構(gòu)體(Ia)所示的化合物以及其對映異構(gòu)體及它們的鹽id="icf0001"file="A2008101257230002C1.tif"wi="63"he="81"top="45"left="67"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>其中R1是鄰-氯，R2是對-氯，R3是C1-C4烷基，R6是噻唑基-2-基，X是亞甲基，以及Z是嗎啉基。2、如權(quán)利要求1所述的化合物及其對映異構(gòu)體及它們的鹽，其中R1是鄰-氯，R2是對-氯，R3是甲基或乙基，R6是噻唑基-2-基，X是亞甲基，以及Z是嗎啉基。3、具有下述結(jié)構(gòu)的化合物及其對映異構(gòu)體、其互變異構(gòu)體(la)及其鹽4、制備權(quán)利要求l所述化合物的方法，包括步驟[A]首先將通式(II)所示苯甲醛與通式(III)所示(3-酮酯反應(yīng)生成通式(IV)所示的苯亞甲基化合物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中R1、R2、R3、X和Z具有權(quán)利要求1中所述的含義，且然后將通式(IV)所示苯亞甲基化合物與通式(V)所示的脒或其鹽，或其它化合物反應(yīng)，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中R6具有權(quán)利要求1中所述的含義；間將通式(ni)所示化合物同醛(n)和脒(v)或其鹽，或其它化合物通過一步法進(jìn)行反應(yīng)，[C]當(dāng)通式(I)中X是亞甲基時，將通式(VI)所示化合物和嗎啉(vn)或其鹽反應(yīng)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中，R1，R2，R3和R6具有上述的含義，Y是親核取代基，[D]將通式(II)所示醛與通式(X)所示化合物及通式(V)所示的脒或其鹽反應(yīng)其中R3，X，Z具有權(quán)利要求1中所述的含義。5.通式(XII)所示的化合物其中R1，R2，R3和R6具有權(quán)利要求1-3中所述的含義并且所述化合物用作合成化合物(I)或(Ia)的中間體。6.權(quán)利要求1-3之任一所述的用于控制疾病的化合物。7.—種藥物，該藥物含有至少一種權(quán)利要求1至3所述的化合物，適當(dāng)時，進(jìn)一步含有其它活性藥物組分。8.權(quán)利要求1至3所述的化合物在制備治療和預(yù)防病毒性疾病的藥物中的用途。9.權(quán)利要求1至3所述的化合物在制備治療和預(yù)防乙型肝炎感染的藥物中的用途。10.—種治療乙型肝炎的方法，包括給予哺乳動物有效量的權(quán)利要求l所述的化合物。11.一種治療由乙型肝炎感染引起的疾病的方法，包括給予哺乳動物有效量的權(quán)利要求1所述的化合物。12.如權(quán)利要求11所述的方法，其中所述的疾病是肝炎。13.如權(quán)利要求11所述的方法，其中所述的疾病是肝硬化。14.如權(quán)利要求ll所述的方法，其中所述的疾病是肝細(xì)胞癌變。NH2(X)其中，R3、X和Z具有權(quán)利要求1中所述的含義。5.通式(XII)所示的化合物15.—種藥物制劑，其包含一種或多種權(quán)利要求1所述的化合物及一種藥學(xué)上可接受的載體。16.—種組合物由下列組分組成A)至少一種如權(quán)利要求1至3之任一所述的二氫嘧啶，B)至少一種不同于A的HBV抗病毒劑和，適當(dāng)情況下，c)至少一種免疫調(diào)節(jié)劑。17.如權(quán)利要求16所述的組合物，其中組分B是HBV聚合酶抑制劑。18.如權(quán)利要求16所述的組合物，其中組分B是拉米夫定(lamivudine).19.如權(quán)利要求16所述的組合物，其中組分B選自下述通式所示的化合物及其鹽其中R1和R2,分別獨(dú)立地為，d-Q-烷基或者，與其所在位置上的氮原子一起，形成具有5-6個環(huán)原子包括碳和/或氧原子的環(huán)，R3至R、分別獨(dú)立地為氫，鹵素，Q-C4-烷基,任意的取代C,-Cr烷氧基，硝基，氰基或三氟甲基，R13是氬，CKV烷基，d-Cr酰基或芳烷基，且X是鹵素或任意的取代CrQ-烷基。20、如權(quán)利要求19所述的組合物，其中化合物具有如下結(jié)構(gòu)21.如權(quán)利要求16至20之任一所述的組合物，其中免疫調(diào)節(jié)劑C包括干擾素。22.一種組合物，其由下述物質(zhì)組成A)權(quán)利要求1至3所述的二氫嘧啶，B)拉米夫定(lamivudine)和，適當(dāng)時，C)干擾素。23.一種如權(quán)利要求16至22之任一所述的組合物的制備方法，其特征在于，以適合方式組合或混合組分A，B和，適當(dāng)情況下的組分C。24.如權(quán)利要求16至22之任一所述的用于控制疾病的組合物。25.—種藥物，其包含至少一種如權(quán)利要求16至22之任一所述的組合物，且適當(dāng)情況下，其他活性藥物成分。26.如權(quán)利要求16至22之任一所述的組合物在制備治療和預(yù)防病毒性疾病的藥物中的用途。27.如權(quán)利要求16至22之任一所述的組合物在制備治療和預(yù)防乙型肝炎感染的藥物中的用途。全文摘要本發(fā)明涉及一種適于對抗B型肝炎病毒(HBV)感染的新型乙氧碳?；?取代噻唑二氫嘧啶，及其與其他抗病毒劑的組合物。文檔編號A61K31/5377GK101328169SQ20081012572公開日2008年12月24日申請日期2008年6月18日優(yōu)先權(quán)日2007年6月18日發(fā)明者S·戈?duì)柕侣?劉遺松,靜李申請人:張中能