專利名稱：：一種氟苯基-取代噻唑二氫嘧啶的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種新的氟苯基-取代噻唑二氫嘧啶，其制備方法及其作為藥物的用途，尤其是在治療和預防乙型肝炎病毒感染上的應用。本發(fā)明還涉及這些二氫嘧啶同其他抗病毒劑、和適當情況下，免疫調(diào)節(jié)劑的組合物，以及含有這些組合物的藥物，尤其是用于治療和預防HBV感染，如乙型肝炎。技術背景乙型肝炎病毒屬于肝病毒科。它可引起急性的和或持續(xù)/漸進的慢性病。B型肝炎病毒還引起病理形態(tài)中的許多其他的臨床表征一一尤其是肝臟的慢性炎癥、肝硬化和肝細胞的癌變。另外，與丁型肝炎的共同感染在疾病的發(fā)展過程中會產(chǎn)生不利影響。被許可用于治療慢性肝炎治療的常規(guī)藥劑是干擾素和拉米夫定(lamivudine)。然而，干擾素只具有中等的活性，并具有有害的副反應；雖然拉米夫定(lamivudine)具有良好的活性，但其在治療中抗性發(fā)展迅速，并在停止治療之后常常出現(xiàn)反彈效應，拉米夫定(3-TC)>的IC5。值為300nM(Science,299(2003),893-896)。。US7074784公開了6-胺基烷基二氫嘧啶及其作為藥物的應用，尤其是用于治療和預防乙型肝炎病毒感染。專利US7074784的實施例12描述了R1=鄰-氯，R2=對-氯，R6=3，5-二氟-吡啶-2-基，X=-CH2-，和Z=嗎啉基。該化合物能在細胞培養(yǎng)中抑制乙型肝炎病毒的生長，IC5Q值為2nM(自己測定)。實施例12中的主要取代基從二-氯變?yōu)閊=鄰-溴和112=對-氟，結果導致化合物9的IC5Q為7nM(專利的實施例9)。并且將主要取代基變?yōu)镽1=鄰-氯，R2=對-氟(實施例5，IC50=2-4nM)也表現(xiàn)出近似的IC5。值。這表明IC5。值不能隨著主要取代基R1和R2的改變而提高(見表l)。專利US7074784B2也公開了一個實施例，其中二氟殘基被噻唑-2-基(專利的實施例45)取代。這個衍生物表現(xiàn)出了相似的IC5o值，為2nM(見表1)。表1專利US7074784B2的實施例<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>
發(fā)明內(nèi)容我們現(xiàn)在驚人地發(fā)現(xiàn)用噻唑-2-基取代基，將主要取代基的變?yōu)閊=鄰-氯和^=對-氟，結果得到了6倍高活性的衍生物，IC5Q低lnM。這在閱讀US7074784是不可能預料到的。(見表2)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>表2本專利實例<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>+R1及其同分異構體其中，R1是鄰-氯，R2是對-氟，R3是CrC4烷基，R6是噻唑-2-基，X是亞甲基，且Z是嗎啉基.優(yōu)選的是，本發(fā)明的分子式(I)和(Ia)給出的化合物，其中Ri是鄰-氯，W是對-氟，R3是甲基或乙基，W是噻唑-2-基，X是亞甲基，且Z是嗎啉基.。本發(fā)明還涉及上述化合物的對映異構體及其各自的混合物。外消旋體能通過已知的手段分離出來，本質(zhì)上說它是立體異構體中的均一成分。本發(fā)明的化合物包含分子式(I)和(Ia)的異構體及其混合物。本發(fā)明的化合物也可以以鹽的形式存在。根據(jù)本發(fā)明的框架，生理上可接受的鹽是優(yōu)選的。生理上可接受的鹽可以是無機酸鹽或者有機酸鹽。優(yōu)選的是無機酸，諸如酸鹽、氫溴酸、磷酸或硫酸等，或者有機羧酸或磺酸，例如醋酸、馬來酸、反丁烯二酸、蘋果酸、杼檬酸、酒石酸、乳酸、苯甲酸或甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸或萘-二硫磺酸等形成的鹽。生理上可接受的鹽還可以是本發(fā)明的化合物的金屬鹽或者銨鹽。尤其優(yōu)選的例子是鈉、鉀、鎂、或鈣鹽，以及由氨或有機胺，諸如乙胺，二-或三乙胺，二-或三乙醇胺，二環(huán)己基胺，二甲基氨基乙醇，精氨酸，賴氨酸，乙二胺，或2-苯乙胺等生成的銨鹽。本發(fā)明的化合物(I)可由下述方法制備[A]首先將苯甲醛，(其中R1和R2的含義如前所述)與分子式(III)所示的P-酮酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>(其中R3、X和Z的含義如前所述，加入或不加入堿或酸，以適于存在于惰性有機溶劑中)反應，得到如分子式(IV)所示的苯亞甲基化合物其中R6含義如前所述，或者其鹽(例如，鹽酸鹽或醋酸鹽)加入或不加入堿或酸，以適于存在于惰性有機溶劑中，進行反應或[b]將分子式(in)所示化合物同醛(n)和脒(v)或它們的鹽(諸如，鹽酸鹽或醋酸鹽s)加入或不加入堿或酸，以適于存在于惰性有機溶劑中，進行一步反應；或[c]分子式(i)中的x是亞甲基，分子式(vi)所示化合物然后，將后者與分子式(v)所示的脒<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>其中R1、R2、R3和R6含義如前所述，Y是親核取代基團，諸如氯化物，溴化物，碘化物，甲磺?；蚣妆交酋；c嗎啉(VII)，H,N、、^(VII)加入或不加入堿，以適于存在與惰性溶劑中進行反應。制備化合物(VI)可以通過，例如，用分子式(VIII)所示化合物其中R1、R2、R3和R6含義如前所述，和溴化劑諸如，N-溴琥珀酰亞胺，優(yōu)選在惰性溶液中進行反應，得到分子式(IX)所示化合物Br(IX)將具有親核取代基團的后者直接或者如文獻中的常規(guī)方法進一步轉(zhuǎn)變之后，與嗎啉(VII)反應。[D]分子式(II)所示的醛與分子式(X)所示的化合物反應，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>其中R3、X和Z含義如前所述，分子式(V)所示的脒，加入或不加入堿，為適合存在于惰性溶劑中。.，進行反應。為制備本發(fā)明的分子式(I)所示化合物，其中x是亞甲基，z是嗎啉基，相應的p-酮羧酸酯(m)可由分子式(XI)所示的氯乙酸酯其中R"含義如前所述，與嗎啉(VII)反應制得。作為起始原料的2-氯-4-氟-苯甲醛(II)可通過商業(yè)途徑獲得。用作起始原料的P-酮羧酸酯(III)是公知的，或者是能夠從文獻公布的已知方法中類推制得的[如，D.Borrmann，"UmsetzungvonDiketenmitAlkoholen,PhenolenundMercaptanen"，in"MethodenderorganischenChemie"(Houben-Weyl)，vol.VII/4,230ff(1968);Y.Oikawa，K.SuganoundO.Yonemitsu，.Org.Chem.43，2087(1978"?；衔?V)是已知的，并可根據(jù)WO-A-99/54326和WO-A-99/54329的描述制備。嗎啉(VII)可通過商業(yè)途徑獲得?；衔?VIII)和(X)可根據(jù)WO-A-99/54326中的描述按照步驟[A]或[B]制得。A、B、C和D所有步驟都適合的溶劑是所有的惰性有機溶劑。其中優(yōu)選的包括醇如，甲醇、乙醇、異丙醇，醚如二惡烷、二乙醚、四氫吹喃、乙二醇單甲醚，乙二醇二甲醚，羧酸諸如冰醋酸、或二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、乙腈、吡啶和六甲基磷酰三胺。反應溫度可以在相當寬的范圍內(nèi)變化。通常使用20到150。C之間的溫度，但優(yōu)選的是在所選溶劑的沸點溫度。反應可以在大氣壓下進行，也可以在高壓下進行。通常在大氣壓下進行。反應可以在加入或者不加入酸或者堿的環(huán)境下進行；但是，在弱酸諸如醋酸或者敗酸等的存在下進行反應是較好的。本發(fā)明的一種實施方案涉及含有A)至少一種上述的二氫嘧嚏，B)至少一種與A)不同的其他抗病毒劑的組合物。本發(fā)明的一個詳細的實施方案涉及含有A)上述二氫嘧啶，B)HBV聚合酶抑制劑和，和合適的情況下，C)免疫調(diào)節(jié)劑的組合物。優(yōu)選的免疫調(diào)節(jié)劑C)包括，例如，所有的干擾素諸如a-,p-和Y-干擾素，尤其是a-2a-和oc-2b-干擾素，白細胞介素諸如白細胞介素-2，多肽諸如胸腺素-a-l和胸腺托南(thymoctonan)，咪唑喹啉衍生物諸如⑧左咪唑，免疫球蛋白和治療疫苗。.因此，本發(fā)明還涉及用于治療和預防HBV感染的這些組合物及其在治療HBV引發(fā)的疾病上的用途。.相對于單一化合物的單一治療，本發(fā)明的組合物的使用對治療HBV引發(fā)的疾病是有益的，主要是增進的抗病毒活性，以及相對于單個成分的Tox-50(有50%的細胞存活的毒性范圍)來說，本發(fā)明的組合物具有良好的耐受性。用于實現(xiàn)本發(fā)明目的的HBV聚合酶抑制劑B為Ph.A.Furman等在《抗微生物制劑與化療方法》(AntimicrobialAgentsandChemotherapy)Vol.36(No.12)，2688(1992)中的內(nèi)生聚合酶實驗中揭示的那些物質(zhì)，以及那些在下文中描述的，抑制HBVDNA雙鏈的形成，從而導致最大50%活性值為零的那些物質(zhì)。在試管中，將HBV毒粒與核苷5'-三磷酸鹽一起從培養(yǎng)懸浮物中移至HBVDNA正鏈上。通過使用瓊酯糖凝膠電泳，發(fā)現(xiàn)其中存在有[oc，P]-脫氧核苷5'-三磷酸鹽和病毒的3.2kbDNA的結合產(chǎn)品，不存在具有潛在HBV聚合酶-抑制性質(zhì)的物質(zhì)。從HepG2.2.15細胞的細胞培養(yǎng)懸浮物中，用聚乙二醇沉淀、濃縮得到HBV毒粒。將l體積份的澄清細胞培養(yǎng)懸浮物與1/4體積份的含有50%(重量)聚乙二醇8000和0.6M氯化鈉的水溶液混合。2500xg離心沉淀15分鐘，沉淀物用2ml含有0.05Mtris-HClM(pH7.5)的緩沖液再懸浮，用含有100mM氯化鉀的該緩沖液透析。樣品在-80。C時冷凍。每個反應混合物(IOOW)含有至少105HBV毒粒、50mMtris-HCl(p.sub.H7.5)、300mM氯化鉀、50mM氯化鎂、0,1%NonidentP-40(非離子型洗滌劑，BoehringerMannheim)、10//MdATP，10〃MdGTP,10//MdTTP;10//Ci[32P]dCTP(3000Ci/mmol;最終濃度為33nM)and1//M三磷酸形式的聚合酶潛在抑制劑。樣品在37°C下培養(yǎng)一個小時，然后加入50mMEDTA中止反應。加入10%重量/體積SDS溶液(每90ml水含有10gSDS)到最終濃度為1%(體積)(基于溶液總體積)，加入蛋白酶K至最終濃度為lmg/ml。然后在37。C培育1小時，用等體積的苯酚/氯仿/異戊醇(體積比為25:24:1)溶液提取，DNA從含有乙醇的水相中沉淀出來。DNA小球在10〃1凝膠緩沖液(l升水中含有10.8gtris、5.5g硼酸和0.75gEDTA(=TBEbuffer))中在懸浮，并用瓊脂糖凝膠電泳分離。將其中的凝膠干燥或者釆用Southern轉(zhuǎn)移技術將其中的核酸轉(zhuǎn)到膜上。形成一定數(shù)量的標記DNA雙鏈進行對照檢測(=空白或有惰性對照物進行ndo-pol反應)。如果存在對照組的最大50%濃度則存在HBV聚合酶抑制劑。優(yōu)選的HBV聚合酶抑制劑B)包括，例如，3TC-拉米夫定(lamivudine)=4-氨基-1-[(211-順式)-2-(羥甲基)-1.3-氧硫茂-5-基-]-嘧^^畫2(lH)-酮cf.EP-B382526(=U.S.Pat.No.5，047，407)和WO91/11186(=U.S.Pat.No.5，204，466);阿德福韋酯(Adefovirdipivoxil)=9-[2-[雙(特戊酰羥甲氧基)膦酰甲氧基]乙基]腺嘌呤，cf.EP-B481214(=U,S.Pat.Nos.5，663，159和5,792,756),U.S.Pat.Nos.4,724，233和4,808，716;BMS200475=[1S-(1..alpha.,3..alpha.，4丄613.)]畫2誦氨基-1.9-二氫-9-[4-羥基—3-(羥甲基)-2-亞甲基-環(huán)戊基]-6H-嘌呤-6-酮，cf.EP-B481754(=U.S.PatNos.5，206，244和5，340，816)，WO98/09964和99/41275;阿巴卡韋(Abacavir)氣-)-(lS-順式)-4-[2-氨基-6-(環(huán)丙胺)-9H-嘌呤-9-基]國2-基-環(huán)戊烯-l-甲醇，cf.EP-B349242(=U.S.Pat.No.5，049，671)和EP-B434450(=U.S.Pat.No.5,034，394);FTC-(2R-順式)-4-氨基-5-氟-l-[2-(羥甲基)-1.3-氧硫茂-5-基]-嘧啶.2(1H)-酮，cf.WO92/14743(=U.S.Pat.Nos.5，204，466;5，210，085;5，539,116;5，700，937;5，728，575;5，814，639;5，827,727;5,852，027;5,892，025;5，914,331;5，914，400)和WO92/18517;卩-L-FDDC二5-(6-氨基-2-氟-9H-嘌呤-9-基)-四氫-2-吹喃甲醇，cf.WO94/27616(=U.S.Pat.Nos.5，627,160;5,561，120;5,631，239和5，830,881);L-FMALNl-(2-脫氧-2-氟-.beta,L-阿拉伯呋喃糖)-5-甲基-嘧啶e國-2.4(1H，3H)-二酮，cf.WO99/05157，WO99/05158和U.S.Pat.No.5，753，789本發(fā)明進一步優(yōu)選的實施方案涉及含有A)上述二氫嘧啶(I)和(Ia)及B)拉米夫定(lamivudine)的組合物。另一個優(yōu)選的HBV抗病毒劑B含有，例如，下述分子式所示的苯基丙烯酰胺其中，R1和R2,分別獨立為，d-C4-烷基或者，在他們所在的位置上帶有一個氮原子，形成具有5到6個原子含有碳和/或氧的環(huán)。R3到R12,分別獨立為，氫、鹵素、d-Cr烷基、任意的取代CrQ-烷氧基、硝基，氰基或三氟甲基。R"是氫，d-Q-烷基，d-C7-?；蚍纪榛?，以及X是鹵素或任意取代的CrQ-烷基，及其鹽。這些苯基丙烯酰胺及其制備方法已在WO98/33501中公開，這里提及是為了公開的目的。AT-61是化合物優(yōu)選的免疫調(diào)節(jié)劑C)包括例如，所有的干擾如，a-，p-和Y-干擾素，尤其還可以是0^2&-和oc-2b-干擾，白細胞介素如白細胞介素-2，多肽如胸腺素-a-l和胸腺托南(thymoctonan)，咪唑喹啉衍生物如⑧左咪唑，免疫球蛋白和治療疫苗。本發(fā)明的另一個優(yōu)選的實施方式涉及含有A)上述二氫嘧^^(I)和(la);B)拉米夫定(lamivudine);以及合適的情況下C)干擾素的組合物。測試說明本發(fā)明的化合物對乙型肝炎病毒的抗病毒作用通過M.A.Sells等描述的方法基礎上進行研究，Proc.Natl.Acad.Sci.84，10051009(1987)andB.E.Korbaetal.，AntiviralResearch19，5570(1992).抗病毒測試在96-孔微量滴定板上進行。第一直列只接受培養(yǎng)基和HepG2.2.15細胞，作為病毒對照.測試化合物的儲備液(50mM)是先溶解在DMSO中，然后在HepG2.2.15培養(yǎng)基中稀釋制得。根據(jù)本發(fā)明的化合物通常每次用移液管移取100//M測試濃度(lst測試濃度)到微量滴定板的第二測試列，然后在加入2%重量胎牛血清(體積25的培養(yǎng)基中分兩步稀釋21。倍。微量滴定板的每個加入了2%重量胎牛血清的培養(yǎng)基的孔中都含有225〃lHepG2.2.15細胞懸浮液(5x104cells/ml)。37。C、5%C02(V/V)培養(yǎng)測試混合物4天。然后將表面懸浮物吸出丟棄，向孔中加入225//1新制備的培養(yǎng)基。根據(jù)本發(fā)明的化合物是每個都在25^體積中重新加入了10-fold濃縮溶液?；旌衔锢^續(xù)培養(yǎng)4天。在收集懸浮物測試抗病毒效果之前，先在光學顯微鏡下或者通過生物化學檢測方法(例如AlamarBluestainorTrypanBluestain)檢測HepG2.2.15細胞細胞毒素的改變。收集表面懸浮物和/或細胞并用抽真空的方法在96-孔斑點室上覆蓋一層尼龍膜(根據(jù)制造商的信息)。細胞毒素的測定檢測HepG2.2.15細胞中物質(zhì)引發(fā)的細胞毒素或抑制細胞的改變，例如，在光學顯微鏡下細胞形態(tài)的改變。HepG2.2.15細胞的這些物質(zhì)引發(fā)的改變與未處理過的細胞相比起來是明顯的，例如，細胞溶解，液泡或者細胞形態(tài)的改變。50%毒性(Tox,-50)指的是相較于對應的對照細胞50%的細胞表現(xiàn)出一種形態(tài)。根據(jù)本發(fā)明一些化合物的耐受性在其他的宿主細胞如，HeLa細胞，primary人外周造血細胞或轉(zhuǎn)化細胞系如H-9細胞上進行測試。在本發(fā)明的化合物濃度MO/zM是沒有檢測到細胞毒素的改變?？共《咀饔玫臋z測在將表面懸浮物或溶解的細胞轉(zhuǎn)移到點裝置(如上述)的尼龍膜上之后，將HepG2.2.15細胞的胞內(nèi)或胞外懸浮物變性(1.5MNaCl/0.5NNaOH)，中和(3MNaCl/0.5MTrisHC1，pH7.5),然后水洗(2xSSC)。通過在120。C下培養(yǎng)過濾器2-4小時，使DNA回到膜上。DNA雜化從尼龍過濾器上處理過的HepG2.2.15細胞中得到的病毒DNA的檢測在非放射性，地高辛標記的乙型肝炎DNA探針，每個均用地高辛標記條件下進行，純化并且根據(jù)搡作信心進行雜化。預雜化和雜化在5xSSC，lx封閉試劑，0.1%(重量)N-月桂酰肌氨酸，0.02%(重量)SDS和100//g青魚精子DNA中進行。預雜化在60。C進行30分鐘，然后與20至40ng/ml地高辛標記過的，變性的HBV-DNA(14小時，60。C)進行特定雜化。洗滌過濾器。用地高辛抗體檢測HBV-DNA按照造制造商的信息進行地高辛-標記DNA的免疫檢測洗滌過濾器在封閉試中雜化(依照制造商的信息)。雜化使用抗-DIG抗體和堿性磷酸酶，進行30分鐘。在洗滌步驟之后，加入堿性磷酸酶的底物，CSPD，帶著過濾器培養(yǎng)5分鐘，然后包上塑料膜，37°C再培養(yǎng)15分鐘.將過濾器曝光在X射線層下，可看見乙型肝炎DNA的發(fā)光信號(培養(yǎng)取決于信號強度10分鐘至2小時).理的樣本50%的濃度下測試最大半抑制濃度(IC5Q,50%抑制濃度)。本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出的抗病毒作用值為IC5。低于lnM，這是沒有預料到的。因此，本發(fā)明的化合物適用于病毒引發(fā)的疾病的治，尤其是急性和慢性持續(xù)的HBV病毒感染。HBV引發(fā)的慢性病毒病可能導致病態(tài)變得嚴重，慢性乙型肝炎病毒感染在許多情況下可導致肝硬化和/或肝細胞癌變。對本發(fā)明的化合物來說，可能被提及的指示區(qū)域是，例如可能導致傳染性肝炎的急性和慢性病毒感染的治療，例如乙肝病毒感染。本發(fā)明的化合物尤其適合治療慢性乙肝感染和急性和慢性乙肝病毒感染。本發(fā)明包括藥物的制備，除了無毒，惰性的制藥學上合適的載體之外，還含有一種或多種本發(fā)明的化合物(I)或(Ia)或組合物或由一種或多種活性成分(I)或(Ia)組成的組合物或由者本發(fā)明的組合物組成的組合物。上述藥物制備中所指的活性成分(I)和(Ia),濃度約為0.1至99.5%(重量)，優(yōu)選約為0.5至95%(重量)，相對于整個混合物。上述藥物制備也可以包含化合物(I)和(Ia)以外的其他活性藥物成分。本發(fā)明的組合物中組分A、B和合適的C的含量比例可以在較寬的限制范圍內(nèi)變化，優(yōu)選5至500mgA/10至1000mgB，尤其是10至200mgA/20至400mgB.組分C，適當?shù)臅r候也可使用，其總使用量，優(yōu)選，1至IO百萬，更優(yōu)選2至7百萬，I.U.(國際單位)，在超過一年的時期內(nèi)每周3次。上述藥物制備所指的本發(fā)明的化合物或組合物濃度通常為約0.1%至99.5%,優(yōu)選約0.5%至95%，(重量百分比)，相對于整個混合物。上述藥物制備可以通過公知的常規(guī)方法實現(xiàn)，例如將活性成分和載體混合。無論是在人體還是在獸醫(yī)學上每24小時服用總劑量為約0.05至約500,優(yōu)選O.l至100mg/kg體重的活性成分已經(jīng)被普遍證明是有益的，合適的單劑的多次服用，可以達到理想的效果。單劑含有的活性成分優(yōu)選在總量約0.1至約80，優(yōu)選0.1至30mg/kg體重。無論如何，根據(jù)上述劑量尤其是根據(jù)個人和治療對象的體重，藥物制作的類型，藥物服用的方式以及藥物服用的時間或間隔有所偏移是必要的。因此，本發(fā)明還涉及用于控制疾病的上述化合物和組合物。本發(fā)明還涉及至少含有一種上述化合物或組合物和適當?shù)那闆r下，一種或幾種其他活性藥物成分的藥物。本發(fā)明還涉及，用于制備治療和預防上述疾病尤其是病毒性疾病特別是乙型肝炎的藥物的上述化合物和組合物的用途。下述實施例中的百分數(shù)均是重量百分數(shù)，特別指明的除外?；旌先芤褐腥軇┑谋壤阁w積比。實施例A.中間體實施例l乙基4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-6-甲基-l，4-二氫嘧啶-5-羧酸酯10.0g(49.3mmol)of2-氯-4-氟苯甲醛,8.2g(63.1mmol)乙基乙酰乙酸，10.3g(63.1mmol)2-脒基-蓬唑鹽酸鹽和6.2g(75.7mmol)醋酸鈉溶解或懸浮于500ml乙醇中回流下沸騰16小時。冷卻至室溫，抽氣過濾，水洗殘渣去除無機鹽。得產(chǎn)品12.8g(53.4%)熔點162-164。C.甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-6-甲基-l,4-二氫嘧啶-5-羧酸酯該化合物釆用甲基乙酰乙酸通過類似實施例1的方法合成得到。產(chǎn)率55°/。(熔點152-154°C)實施例3乙基6-氯甲基-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-l,4-二氫嗜^^-5-羧酸酯實施例2將4.0g(8.72mmol)實施例1制得的乙基t(2-氯4-氟苯基)-2-(蓬唑-2-基)-6-甲基-l，4-二氫嘧啶_5-羧酸酯加入到80ml四氯化碳中，氬氣氛圍下加熱至50°C，得到澄清溶液。在此溫度，加入l.73g(9.61mmol)N-溴琥珀酰亞胺，保持在該溫度混合10分鐘。立刻冷卻，室溫下抽氣過濾，減壓濃縮。根據(jù)HPLC檢驗產(chǎn)品純度高于90%,并作為下一步的原材料。Rfi.70(石油醚/乙酸乙酯=8:2)實施例4甲基6-溴甲基-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-1,4-二氫嘧啶-5-羧酸酯該化合物釆用實施例2制得的化合物按照類似實施例3的方法合成制得。R—0.70(石油醚/乙酸乙酯=8:2)B.制備實施例實施例5乙基4-(2-氯4-氟苯基)-2_(噻唑-2-基)-6-(4-嗎啉甲基)-1,4-二氫嘧啶-5-羧酸酯〔:〕將3.0g實施例3新制備的乙基-6-溴甲基-4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(謹唑-2-基)-l，4-二氫嘧啶-5-羧酸酯加入到40ml甲醇中形成溶液，同5倍量的嗎啉混合，室溫下攪拌30分鐘。溶液用水稀釋，乙酸乙酯萃取。產(chǎn)率23g熔點155-157。C.Rf=0.46(石油醚/乙酸乙酯=8:2)實施例6甲基4-(2-氯-4-氟苯基)-2-(噻唑-2-基)-6-(4-嗎啉甲基)-l，4-二氫嘧啶-5-羧酸酯該化合物采用實施例4制得的化合物通過類似實施例5的方法合成制得。熔點167-1690C.Rf=0.44(石油醚/乙酸乙酯=8:2)實施例5和6制得的對映異構體在手性柱(DaicelChiralpakAS-H，流動相正己烷/乙醇=99/1)上分離兩個實施例中的抗-HBV活性化合物均是保留時間較長的對映體。本發(fā)明的化合物的活性數(shù)據(jù)列表如下實施例No.ICso(nM)50.3(-)-50.260.6(-)-60.3使用本發(fā)明的化合物治療乙型肝炎病毒產(chǎn)生的HepG2.2.15細胞會導致胞內(nèi)和/或胞外病毒DNA的減少。權利要求1、通式(I)及其同分異構體(Ia)所示的化合物以及其對映異構體及它們的鹽id="icf0001"file="A2008101257240002C1.tif"wi="70"he="80"top="43"left="59"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>其中R1是鄰-氯，R2是對-氟，R3是C1-C4烷基，R6是噻唑基-2-基，X是亞甲基，以及Z是嗎啉基。2、如權利要求1所述的化合物及其對映異構體及它們的鹽，其中R1是鄰-氯，R2是對-氟，R3是甲基或乙基，R6是噻唑基-2-基，X是亞甲基，以及Z是嗎啉基。3、具有下述結構的化合物及其對映異構體、其互變異構體(la)及其鹽4、制備權利要求l所述化合物的方法，包括步驟[A]首先將通式(II)所示苯甲醛與通式(III)所示P-酮酯反應生成通式(iv)所示的苯亞甲基化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage31</formula>其中r1、r2、r3、x和z具有權利要求1中所述的含義，且然后將通式(iv)所示苯亞甲基化合物與通式(v)所示的脒或其鹽:或其它化合物反應，NHR6NH2其中r6具有權利要求1中所述的含義；[b〗將通式(in)所示化合物同醛(n)和脒(v)或其鹽，或其它化合物通過一步法進行反應，[c]當通式(i)中x是亞甲基時，將通式(vi)所示化合物和嗎啉(vii)或其鹽反應<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>5.通式(XII)的化合物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中，R1，R2,R3和R6具有上述的含義，Y是親核取代基，[D]將通式(II)所示醛與通式(X)所示化合物及通式(V)所示的脒或其鹽反應其中R1，R2，R3和R6具有權利要求1-3中所述的含義并且所述化合物用作合成化合物(I)或(Ia)的中間體。6、權利要求l-3之任一所述的用于控制疾病的化合物。7、一種藥物，該藥物含有至少一種權利要求1至3所述的化合物，適當時，進一步含有其它活性藥物組分。8、權利要求1至3所述的化合物在制備治療和預防病毒性疾病的藥物中的用途。9、權利要求1至3所述的化合物在制備治療和預防乙型肝炎感染的藥物中的用途。10、一種治療乙型肝炎的方法，包括給予哺乳動物有效量的權利要求l所述的化合物。11、一種治療由乙型肝炎感染引起的疾病的方法，包括給予哺乳動物有效量的權利要求1所述的化合物。12、如權利要求ll所述的方法，其中所述的疾病是肝炎。13、如權利要求ll所述的方法，其中所述的疾病是肝硬化。14、如權利要求ll所述的方法，其中所述的疾病是肝細胞癌變。nh2(X)其中，R3、X和Z具有權利要求l中所述的含義。5、通式(XII)所示的化合物15、一種藥物制劑，其包含一種或多種權利要求l所述的化合物及一種藥學上可接受的載體。16、一種組合物由下列組分組成A)至少一種如權利要求1至3之任一所述的二氫嘧啶，B)至少一種不同于A的HBV抗病毒劑和，適當情況下，C)至少一種免疫調(diào)節(jié)劑。17、如權利要求16所述的組合物，其中組分B是HBV聚合酶抑制劑。18、如權利要求16所述的組合物，其中組分B是拉米夫定(lamivudine).19、如權利要求16所述的組合物，其中組分B選自下述通式所示的化合物及其鹽其中R1和R2，分別獨立地為，CrC4-烷基或者，與其所在位置上的氮原子一起，形成具有5-6個環(huán)原子包括碳和/或氧原子的環(huán)，R3至R^分別獨立地為氫，鹵素，CVC4-垸基，任意的取代CrC4-烷氧基，硝基，氰基或三氟甲基，R13是氫，d-Q-烷基，Q-CV?；蚍纪榛?且X是鹵素或任意的取代d-Q-烷基。20、如權利要求19所述的組合物，其中化合物具有如下結構21、如權利要求16至20之任一所述的組合物，其中免疫調(diào)節(jié)劑C包括干擾素。22、一種組合物，其由下述物質(zhì)組成A)權利要求1至3所述的二氫嘧啶，B)拉米夫定(lamivudine)和，適當時，C)干擾素。23、一種如權利要求16至22之任一所述的組合物的制備方法，其特征在于，以適合方式組合或混合組分A,B和，適當情況下的組分C。24、如權利要求16至22之任一所述的用于控制疾病的組合物。25、一種藥物，其包含至少一種如權利要求16至22之任一所述的組合物，且適當情況下，其他活性藥物成分。26、如權利要求16至22之任一所述的組合物在制備治療和預防病毒性疾病的藥物中的用途。27、如權利要求16至22之任一所述的組合物在制備治療和預防乙型肝炎感染的藥物中的用途。全文摘要本發(fā)明涉及一種適用于對抗B型肝炎病毒(HBV)感染的新型氟苯基-取代噻唑二氫嘧啶，及其與其他抗病毒劑的組合物。文檔編號A61K31/5377GK101328170SQ20081012572公開日2008年12月24日申請日期2008年6月18日優(yōu)先權日2007年6月18日發(fā)明者S·戈爾德曼,劉遺松,靜李申請人:張中能