專(zhuān)利名稱(chēng)：一種從積雪草中滲漉提取積雪草總苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及積雪草總苷的提取方法，具體涉及一種從積雪草中滲漉提取積 雪草總苷的方法。
背景技術(shù)：
積雪草是我國(guó)的傳統(tǒng)中藥，古藥典記載積雪草主要用于治療濕熱黃疸、中 暑腹瀉、砂淋血淋、癰腫瘡毒、跌打損傷等病癥。積雪草的主要活性成分為積 雪草總苷，包括積雪草苷、羥基積雪草苷等五環(huán)三萜皂甙?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明， 積雪草總苷具有顯著的生理活性，可用于治療抑郁癥、皮膚創(chuàng)傷、胃潰瘍、傳 染性肝炎、皮膚病和流行性腦脊髓膜炎等。因此積雪草總苷的提取技術(shù)研究具 有明顯的應(yīng)用價(jià)值。
文獻(xiàn)報(bào)道的積雪草總苷的^R取方法有兩類(lèi) 一是醇熱回流提取，二是超聲 輔助提取。專(zhuān)利EP 867447、 CN 1194154、 US 6417349和IN 183285中均公開(kāi) 了采用乙醇水溶液加熱回流提取積雪草總苦的方法，但加熱回流提取法為保證 有較高的提取率， 一般需要較長(zhǎng)的提取時(shí)間和反復(fù)多次的提取，會(huì)因此產(chǎn)生一 些問(wèn)題，如提取時(shí)間和提取次數(shù)增多，會(huì)導(dǎo)致提取物中雜質(zhì)含量上升，使提取 物的成分變復(fù)雜，后續(xù)分離純化困難，難以制備高純度產(chǎn)品；此外，會(huì)消耗大 量溶劑，后續(xù)溶劑回收時(shí)能耗也較高，而且物料中殘留溶劑的充分回收也存在 一定困難?？偟膩?lái)說(shuō)，這種方法并不適合于工業(yè)化生產(chǎn)。文獻(xiàn)(中藥材，2003, 26(3):204)公開(kāi)了超聲輔助提取積雪草總苷的方法，但該方法設(shè)備成本高，工 藝放大困難，因此難以工業(yè)化應(yīng)用。本發(fā)明提供了 一種從積雪草中滲漉提取積雪草總苷的方法，該提取方法操 作簡(jiǎn)單、成本低、對(duì)積雪草總苷的提取率高，有利于工業(yè)化生產(chǎn)。
一種從積雪草中滲漉提取積雪草總苦的方法，包括如下步驟 (1)將顆粒度為5 ~ 60目的積雪草粉末裝填入滲漉柱內(nèi)，壓實(shí)測(cè)得積雪 草堆積體積，加入0.6 ~ 1倍積雪草堆積體積的4是取溶劑，在30 ~ 70°C浸泡0.2 ~ 1小時(shí)；
(2 )將1 ~ 3倍積雪草堆積體積的提取溶劑自上而下流經(jīng)滲漉柱進(jìn)行滲漉 提取，提取溶劑流速為0.2~1倍積雪草堆積體積/小時(shí)，滲漉提取溫度為30 70。C,收集滲濾液，減壓濃縮得到積雪草總苷提取物。
步驟(2)中收集滲濾液后可采用1 2倍積雪草堆積體積的去離子水自上 而下流經(jīng)滲漉柱，流速為0.5 ~ 1.5倍積雪草堆積體積/小時(shí)，溫度為30 ~ 70°C， 收集洗脫液，通過(guò)濃縮和精餾等方式回收所用的提取溶劑，進(jìn)行重復(fù)利用，以 節(jié)約資源。
所述積雪草堆積體積為滲漉柱內(nèi)經(jīng)壓實(shí)的積雪草粉末所占的體積，1千克 經(jīng)壓實(shí)的積雪草粉末的堆積體積為4 ~ 7升。
所述提耳又溶劑為體積百分比濃度為30 ~ 90%的乙醇水溶液或體積百分比 濃度為30~90%的曱醇水溶液。含水乙醇或含水曱醇作為提取溶劑對(duì)積雪草總 苷選擇性好、滲透性強(qiáng)、浸出率高、安全性好。在30 70。C下，積雪草總苷 在該濃度的曱醇水溶液或乙醇水溶液中的溶解度大，同時(shí)，積雪草中其它成分 在其中的溶解度小，因此該濃度的曱醇水溶液或乙醇水溶液對(duì)積雪草中積雪草
總苷的選擇性提取率高，并且積雪草總苷提取液中雜質(zhì)的含量少，從而在提高 積雪草總苷提取率的同時(shí)提高積雪草總苷的純度。
本發(fā)明中選用0.6-1倍積雪草堆積體積的提取溶劑浸泡積雪草粉末，以保 證積雪草粉末能夠完全浸泡在提取溶劑中。本發(fā)明中進(jìn)行滲漉提取時(shí)，提取溶劑的流速優(yōu)選為0.2 ~ 1倍積雪草堆積體 積/小時(shí)。在該流速范圍內(nèi)，既可以保證提取溶劑和積雪草粉末有充分接觸的時(shí) 間，保證積雪草總苷目標(biāo)活性分子從植物纖維組織溶出、擴(kuò)散到提取溶劑中， 提高提取溶劑的利用率，又能兼顧生產(chǎn)能力。
本發(fā)明采用反相高效液相色譜法分析積雪草總苷提取物組成，積雪草總苷 的提取率大于93%。反相高效液相色譜分析條件為C,8柱(<D4.6 x250mm, Waters)，柱溫30。C,流動(dòng)相乙腈/水，流速lml/min,沖企測(cè)波長(zhǎng)為203nm。
本發(fā)明釆用滲漉法從積雪草中提取積雪草總苷可克服醇熱回流提取法和 超聲輔助提取法的缺點(diǎn)。滲漉法提取依靠提取溶劑與植物纖維細(xì)胞內(nèi)外濃度 差，使溶質(zhì)從胞內(nèi)擴(kuò)散到胞外的主體相內(nèi)，隨著溶劑連續(xù)緩慢地加入到滲漉柱 內(nèi)，細(xì)胞周?chē)緷舛容^高的提取液，不斷被新溶劑或低濃度提取液所代替， 保持著細(xì)胞內(nèi)外最大的濃度梯度，加速溶出傳質(zhì)。而且，溶劑自上向下均勻地 流動(dòng)，滲透與擴(kuò)散同時(shí)進(jìn)行，每一層原料與溶劑或提取液都保持一定的濃度差， 因此能顯著提高提取速度與效果，同時(shí)降低溶劑消耗。
本發(fā)明具有如下有益效果
本發(fā)明在保證一定積雪草總苷提取率的前提下，不但能顯著減少提取溶劑 的用量，降低濃縮能耗，還可以充分回收提取溶劑，大大降低溶劑的損耗，降 低生產(chǎn)成本，有利于工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1
將干積雪草粉碎，得到顆粒度為5~60目的積雪草粉末，稱(chēng)取60克積雪草 粉末裝入滲漉柱(①3.0cmx70cm)內(nèi)，壓實(shí)，其堆積體積約為370毫升，加入 l倍積雪草堆積體積、體積百分比濃度70%的乙醇水溶液，在4(TC浸泡1小時(shí)； 將2倍積雪草堆積體積、體積百分比濃度70%的乙醇水溶液從滲漉柱頂部加入，自上而下流經(jīng)滲漉柱，流速為0.5倍積雪草堆積體積/小時(shí)，溫度為40。C,收集 滲濾液，減壓濃縮得積雪草總苷提取物；再將l倍積雪草堆積體積的去離子水 從滲漉柱頂部加入，置換積雪草內(nèi)殘留的乙醇，流速為0.5倍積雪草堆積體積/ 小時(shí)，溫度為40。C，收集洗脫液，通過(guò)濃縮和精餾等方式回收乙醇。反相高效 液相色i普分析積雪草總苷提取物組成，積雪草總苷的提取率為95.5%。
實(shí)施例2
將干積雪草粉碎，得到顆粒度為5~60目的積雪草粉末，稱(chēng)取60克積雪 草粉末裝入滲漉柱(O3.0cm x 70cm)內(nèi)，壓實(shí)，其堆積體積約為370毫升， 加入0.6倍積雪草堆積體積、體積百分比濃度50%的乙醇水溶液，在70°C浸 泡0.2小時(shí)；將3倍積雪草堆積體積、體積百分比濃度50。/。的乙醇水溶液從滲 漉柱頂部加入，自上而下流經(jīng)滲漉柱，流速為0.5倍積雪草堆積體積/小時(shí)，溫 度為70°C，收集滲濾液，減壓濃縮得積雪草總苷提取物；再將2倍積雪草堆積 體積的去離子水從滲漉柱頂部加入，置換積雪草內(nèi)殘留的乙醇，流速為1.5倍 積雪草堆積體積/小時(shí)，溫度為70°C,收集洗脫液，通過(guò)濃縮和精餾等方式回 收乙醇。反相高效液相色i普分析積雪草總苷提取物組成，計(jì)算得到積雪草總苷 的提取率為97.2%。
實(shí)施例3
將干積雪草粉碎，得到顆粒度為5~60目的積雪草粉末，稱(chēng)取60克積雪 草粉末裝入滲漉柱(O3.0cm x 70cm)內(nèi)，壓實(shí)，其堆積體積約為370毫升， 加入l倍積雪草堆積體積、體積百分比濃度30%的乙醇水溶液，在50。C浸泡 l小時(shí)；將2倍積雪草堆積體積、體積百分比濃度30%的乙醇水溶液從滲漉柱 頂部加入，自上而下流經(jīng)滲漉柱，流速為0.5倍積雪草堆積體積/小時(shí)，溫度為 50°C,收集滲濾液，減壓濃縮得積雪草總苷提取物；再將1.5倍積雪草堆積體 積的去離子水從滲漉柱頂部加入，置換積雪草內(nèi)殘留的乙醇，流速為l倍積雪草堆積體積/小時(shí)，溫度為50°C,收集洗脫液，通過(guò)濃縮和精餾等方式回收乙醇。反相高效液相色語(yǔ)分析積雪草總苷提取物組成，計(jì)算得到積雪草總苷的提取率為98.7%。
實(shí)施例4
將干積雪草粉碎，得到顆粒度為5~60目的積雪草粉末，稱(chēng)取60克積雪草粉末裝入滲漉柱(O3.0cm x 70cm)內(nèi)，壓實(shí)，其堆積體積約為370毫升，加入1倍積雪草堆積體積、體積百分比濃度90%的乙醇水溶液，在40°C浸泡1小時(shí)；將2倍積雪草堆積體積、體積百分比濃度90。/。的乙醇水溶液從滲漉柱頂部加入，自上而下流經(jīng)滲漉柱，流速為1倍積雪草堆積體積/小時(shí)，溫度為40°C，收集滲濾液，減壓濃縮得積雪草總苷提取物；再將1.5倍積雪草堆積體積的去離子水從滲漉柱頂部加入，置換積雪草內(nèi)殘留的乙醇，流速為0.5倍積雪草堆積體積/小時(shí)，溫度為40°C，收集洗脫液，通過(guò)濃縮和精餾等方式回收乙醇。反相高效液相色譜分析積雪草總苷提取物組成，計(jì)算得到積雪草總苷的提取率為94.0%。
實(shí)施例5
將千積雪草粉碎，得到顆粒度為5~60目的積雪草粉末，稱(chēng)取60克積雪草粉末裝入滲漉柱(①3.0cm x 70cm)內(nèi)，壓實(shí)，其堆積體積約為370毫升，加入l倍積雪草堆積體積、體積百分比濃度30%的曱醇水溶液，在50。C浸泡l小時(shí)；將3倍積雪草堆積體積、體積百分比濃度30%的甲醇水溶液從滲漉柱頂部加入，自上而下流經(jīng)滲漉柱，流速為0.5倍積雪草堆積體積/小時(shí)，溫度為50°C，收集滲濾液，減壓濃縮得積雪草總苦提取物；再將2倍積雪草堆積體積的去離子水從滲漉柱頂部加入，置換積雪草內(nèi)殘留的曱醇，流速為1.5倍積雪草堆積體積/小時(shí)，溫度為50°C,收集洗脫液，通過(guò)濃縮和精餾等方式回收甲醇。反相高效液相色鐠分析積雪草總苷提取物組成，計(jì)算得到積雪草總苷的提取率為98.2%。實(shí)施例6
將干積雪草粉碎，得到顆粒度為5 ~ 60目的積雪草粉末，稱(chēng)取60克積雪草粉末裝入滲漉柱(0>3.0cm x 70cm)內(nèi)，壓實(shí)，其堆積體積約為370毫升，加入l倍積雪草堆積體積、體積百分比濃度90。/。的曱醇水溶液，在50。C浸泡0.5小時(shí)；將1倍積雪草堆積體積、體積百分比濃度90%的曱醇水溶液從滲漉柱頂部加入，自上而下流經(jīng)滲漉柱，流速為0.2倍積雪草堆積體積/小時(shí)，溫度為50°C,收集滲濾液，減壓濃縮得積雪草總苦提取物；再將1倍積雪草堆積體積的去離子水從滲漉柱頂部加入，置換積雪草內(nèi)殘留的曱醇，流速為0.5倍積雪草堆積體積/小時(shí)，溫度為50°C,收集洗脫液，通過(guò)濃縮和精餾等方式回收曱醇。反相高效液相色譜分析積雪草總苷提取物組成，計(jì)算得到積雪草總苷的提取率為93.0%。
權(quán)利要求
1、一種從積雪草中滲漉提取積雪草總苷的方法，包括如下步驟(1)將顆粒度為5～60目的積雪草粉末裝填入滲漉柱內(nèi)，壓實(shí)測(cè)得積雪草堆積體積，加入0.6～1倍積雪草堆積體積的提取溶劑，在30～70℃浸泡0.2～1小時(shí)；(2)將1～3倍積雪草堆積體積的提取溶劑自上而下流經(jīng)滲漉柱進(jìn)行滲漉提取，提取溶劑流速為0.2～1倍積雪草堆積體積/小時(shí)，滲漉提取的溫度為30～70℃，收集滲濾液，減壓濃縮得到積雪草總苷提取物。
2、 如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于收集滲濾液后采用1~2倍積 雪草堆積體積的去離子水自上而下流經(jīng)滲漉柱，流速為0.5 ~ 1.5倍積雪草堆積 體積/小時(shí)，溫度為30 70。C，收集洗脫液，以回收提取溶劑。
3、 如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于所述的提取溶劑為體積 百分比濃度為30 ~ 90%的乙醇水溶液或體積百分比濃度為30 ~ 90%的曱醇水 溶液。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種從積雪草中滲漉提取積雪草總苷的方法，該方法以積雪草為原料，以乙醇水溶液或甲醇水溶液為提取溶劑，采用滲漉法高效地從積雪草中提取積雪草總苷，積雪草總苷的提取率達(dá)到93％以上。該方法具有提取率高、溶劑消耗少、生產(chǎn)成本低、易于工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61K36/23GK101455693SQ200810163859
公開(kāi)日2009年6月17日 申請(qǐng)日期2008年12月25日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月25日
發(fā)明者任其龍, 姜麗燕, 楊亦文, 云 蘇, 蘇寶根, 邢華斌 申請(qǐng)人:浙江大學(xué)