專(zhuān)利名稱(chēng)：：基于抗體親和力來(lái)治療狼瘡的方法及使用這種方法的篩選方法和組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)領(lǐng)域，諸如狼瘡。更具體的說(shuō)，本發(fā)明涉及基于抗體親和力來(lái)治療個(gè)體的狼瘡的方法，和選擇接受治療的個(gè)體的方法。
背景技術(shù)：
：系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是特征為生成針對(duì)許多核抗原(包括雙鏈DNA即dsDNA)的抗體的自身免疫疾病。人們認(rèn)為，與DNA發(fā)生反應(yīng)的自身抗體參與SLE病理學(xué)，而且與狼瘡腎炎密切相關(guān).參閱例如Morimoto等人，/，139:1960-1965，1982;Foster等人，Znmst.，69:494-507，1993;terBorg等人，」rt力r"j.s，33:634-643，1990;Bootsma等人，Za/c"，345:1595-1599,1995。合成雙鏈寡核苷酸(dsON)顯示與抗dsDNA抗體發(fā)生交叉反應(yīng)(美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5，276，013)。已經(jīng)建議將與非免疫原性載體(也稱(chēng)為平臺(tái))綴合的dsON用于SLE的治療方法。例如，由四個(gè)dsON附著于聚乙二醇效價(jià)平臺(tái)而構(gòu)成的四價(jià)綴合物L(fēng)JP249被用于在經(jīng)免疫小鼠模型系統(tǒng)中證明耐受性(Jones等人，脅畫(huà)力卵teC力e邁.，5:390-399，1994)。LJP394,由四個(gè)dsON附著于平臺(tái)而構(gòu)成的四價(jià)綴合物，在BXSB實(shí)驗(yàn)用鼠類(lèi)狼瘡腎炎模型中顯示延遲腎病的進(jìn)展并延長(zhǎng)存活(Plunkett等人，Z,s，4:S99，1995;Coutts等人，5:158-159，1996)。LJP394還顯示在SLE人類(lèi)患者中降低抗dsDNA抗體(Weisman等人，/朋e騰to丄，24:314-318,1997)。其它文獻(xiàn)描述了可用于治療SLE的方法，包括通過(guò)誘導(dǎo)B細(xì)胞耐受性來(lái)降低循環(huán)抗體水平的方法，包括但不限于美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5，276，013、5,391,785、5,786,512、5,726,329、5，552，391、5,268,454、5,606,047、5,633,395;5,162,515;美國(guó)流水號(hào)08/118，055(美國(guó)專(zhuān)利號(hào)6,060，056)、60/088，656、和60/103，088(美國(guó)流水號(hào)09/328,199和PCT申請(qǐng)?zhí)朠CT/US99/13194).雖然SLE的整體患者預(yù)后得到了改進(jìn)，但是治療方案尚不理想，而且狼瘡腎炎仍舊具有相對(duì)較差的整體存活(Seleznick等人，5"e邁i幾Art/Lri"s臉"邁.，21:73-80，1991)。需要用于治療SLE的改進(jìn)方法和用于鑒定可能特別響應(yīng)某一指定治療的患者的改進(jìn)方法。將引用的所有參考文獻(xiàn)完整收入本文作為參考。發(fā)明概述本發(fā)明提供了涉及狼瘡免疫耐受治療的方法，該方法基于對(duì)來(lái)自個(gè)體的抗體(即與狼瘡有關(guān)的抗體，也就是抗dsDNA抗體)的最初親和力進(jìn)行評(píng)估。本發(fā)明還提供了基于對(duì)抗體親和力的評(píng)估來(lái)鑒定適合于(或不適合于)治療的個(gè)體的方法，以及基于對(duì)接受治療后親和力變化(如果有的話(huà))的評(píng)估的治療方法。因此，一方面，本發(fā)明提供了治療個(gè)體的SLE(包含狼瘡腎炎)的方法，包括對(duì)個(gè)體施用綴合物，其包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自該個(gè)體的能特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)雙鏈DNA表位(優(yōu)選多核普酸)，其中表位(優(yōu)選多核苷酸)對(duì)于來(lái)自該個(gè)體的抗體的親和力被用作選擇接受治療的個(gè)體的基礎(chǔ)。在其它實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了治療個(gè)體的SLE的方法，包括對(duì)個(gè)體施用綴合物，其包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性5結(jié)合來(lái)自該個(gè)體的能特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)雙鏈DNA表位(優(yōu)選多核苷酸)，其中表位(優(yōu)選多核普酸)對(duì)于來(lái)自該個(gè)體的抗體的親和力被用作選擇繼續(xù)接受治療的個(gè)體的基礎(chǔ)。由于使用親和力作為選擇適合于治療指示的個(gè)體的基礎(chǔ)，因此本文描述的治療方法必需測(cè)量抗體(個(gè)體的抗雙鏈DNA抗體)對(duì)于dsDNA表位的親和力。另一方面，本發(fā)明提供了治療個(gè)體的系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)的方法，包括對(duì)個(gè)體施用綴合物，該綴合物包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自該個(gè)體的能特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)多核苷酸，所述多核普酸優(yōu)選包含雙鏈DNA序列5，-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3，、基本上由該序列組成、或由該序列組成，其中在開(kāi)始治療之前或之時(shí)，該多核苷酸對(duì)于來(lái)自所述個(gè)體的抗體的表觀(guān)平衡解離常數(shù)(Kd')或其功能等同物低于大約1.0mgIgG/ml，而且其中所述K。'值(或其功能等同物)被用作選擇接受治療的個(gè)體的基礎(chǔ)。在有些實(shí)施方案中，治療方法還包括選擇步驟，包括在開(kāi)始治療之前評(píng)估針對(duì)來(lái)自個(gè)體的可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體，該綴合物中所含表位(優(yōu)選多核苷酸)的表觀(guān)平衡解離常數(shù)(Kd')(或其功能等同物)，所述綴合物包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自該個(gè)體的可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)dsDNA表位，其中選擇K。'值(或其功能等同物)低于大約1.0mgIgG/ml的個(gè)體來(lái)接受治療。另外，本文描述了能夠應(yīng)用于試圖用于治療的任何dsDNA表位的更低K。'值，對(duì)于本文所述指定患者群進(jìn)行了百分點(diǎn)分級(jí)。優(yōu)選的是，dsDNA表位是多核苷酸，所迷多核苷酸優(yōu)選包含雙鏈DNA序列5，-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3，、基本上由該序列組成、或由該序列組成。另一方面，本發(fā)明提供了治療個(gè)體的SLE的方法，包括(l)評(píng)估來(lái)自個(gè)體的抗雙鏈DNA抗體對(duì)于治療中待用dsDNA表位的親和力，其中基于所述抗體親和力來(lái)選擇治療的個(gè)體；并(2)對(duì)所述選擇的個(gè)體施用包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)兩個(gè)或多個(gè)dsDNA表位的綴合物。另一方面，本發(fā)明提供了治療個(gè)體的狼瘡腎炎的方法，包括對(duì)個(gè)體施用包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自個(gè)體的可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)多核苷酸的綴合物，所述多核苷酸包含雙鏈DNA序列5，-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3，、基本上由該序列組成、或由該序列組成，其中在開(kāi)始治療之前或之時(shí)，綴合物中的多核苷酸對(duì)于來(lái)自該個(gè)體的抗體的表觀(guān)平衡解離常數(shù)(K。')(或其功能等同物)低于大約1.0mgIgG/ml，而且其中所述K。'值(或其功能等同物)被用作選擇接受治療的個(gè)體的基礎(chǔ)。另一方面，本發(fā)明提供了治療個(gè)體的SLE的方法，包括(l)在開(kāi)始治療之前或之時(shí)，評(píng)估綴合物中的dsDNA表位對(duì)于來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的表觀(guān)平衡解離常數(shù)(K。')，所述綴合物包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)所述表位；并(2)以足以提高K。'值的量對(duì)個(gè)體施用綴合物，其中若K。'值相對(duì)于開(kāi)始治療之前或之時(shí)的K。'值提高了至少大約20。/。，則繼續(xù)治療。在其它實(shí)施方案中，治療方法包括以足以降低親和力(由親和力測(cè)量得到反映，例如由K。'值升高得到反映)的量施用本文所述任何綴合物，優(yōu)選降低至少大約20%，當(dāng)然有可能希望變化更大，另一方面，本發(fā)明提供了治療個(gè)體的狼瘡腎炎的方法，包括對(duì)個(gè)體施用包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)dsDNA表位的綴合物.在有些實(shí)施方案中，通過(guò)本文所述方法評(píng)估抗體親和力。在有些實(shí)施方案中，以足以降低抗體親和力的量施用綴合物.另一方面，本發(fā)明提供了鑒定可能適合于治療SLE的個(gè)體的方法，所述治療包括施用包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DM的抗體的兩個(gè)或多個(gè)多核苷酸的綴合物，所述多核苷酸包含雙鏈DNA序列5，-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'、基本上由該序列組成、或由該序列組成，所述方法包括在開(kāi)始治療之前或之時(shí)，測(cè)量綴合物中所用多核苷酸對(duì)于來(lái)自個(gè)體的抗雙鏈DNA抗體的表觀(guān)平衡解離常數(shù)(K。')或其功能等同物，其中通過(guò)低于大約1.0mgIgG/ml的K。'值或其功能等同物筌定出個(gè)體。另一方面，本發(fā)明提供了鑒定可能不適合于治療SLE的個(gè)體的方法，所述治療包括施用包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)多核苷酸的綴合物，所述多核苷酸包含雙鏈DNA序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'、基本上由該序列組成、或由該序列組成，所述方法包括在開(kāi)始治療之前或之時(shí)，測(cè)量綴合物中的多核苷酸對(duì)于來(lái)自個(gè)體的抗雙鏈DNA抗體的表觀(guān)平衡解離常數(shù)(Kd')或其功能茅同物，其中通過(guò)高于大約1.0mgIgG/ml的K。'值或其功能等同物鑒定出個(gè)體.另一方面，本發(fā)明提供了監(jiān)控個(gè)體的SLE治療的方法，所述治療包括施用包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)dsDNA表位(優(yōu)選多核苷酸)的綴合物，所述方法包括測(cè)量綴合物的dsDNA表位(優(yōu)選多核苷酸)對(duì)于來(lái)自個(gè)體的抗dsDNA抗體的親和力.在有些方面，測(cè)量表觀(guān)平衡解離常數(shù)(Kd')。另一方面，本發(fā)明提供了在合適包裝中包含分子(諸如多核苷酸)的試劑盒，所述分子包含可結(jié)合抗雙鏈DNA抗體的表位，優(yōu)選還包含有關(guān)測(cè)量來(lái)自個(gè)體的抗dsDNA抗體對(duì)于表位的親和力的說(shuō)明書(shū)。另一方面，本發(fā)明提供了包含(l)包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合耒自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)多核苷酸的綴合物；和(2)有關(guān)使用綴合物來(lái)檢測(cè)綴合物對(duì)于來(lái)自個(gè)體的抗dsDNA抗體的親和力的^兌明書(shū)的試劑盒。圖的簡(jiǎn)述圖1A-C描述了LJP394對(duì)來(lái)自各組SLE患者血清的抗體結(jié)合1251-標(biāo)記的dsDNA的竟?fàn)幮砸种啤D2通過(guò)非竟?fàn)幮杂H和力測(cè)定法描述了來(lái)自SLE患者和正?；颊叩难宓慕Y(jié)合。對(duì)來(lái)自10份SLE血清樣品和10份正常血清樣品的IgG級(jí)分評(píng)估了與LJP394dsDNA表位的結(jié)合。圖3A描述了接受10mg(實(shí)心圓形)與50mg(實(shí)心方形)綴合物L(fēng)JP394的患者中抗體親和力的表觀(guān)劑量依賴(lài)性下降(由K。'的升高指示)。安慰劑用空心圓形表示。第2次測(cè)量是服藥前基線(xiàn)；第ll次測(cè)量發(fā)生于每周施用藥物4個(gè)月后。K。，值(Y軸)是mg/mlIgG。圖3B以柱形圖的形式描述了相同數(shù)據(jù)。圖4A和4B描述了LJP394治療或安慰劑(X軸)之前的K。，值相比于LJP394治療或安慰劑處理(Y軸)4個(gè)月之后的K。'值。圖A代表接受LJP394綴合物治療的患者，圖B代表接受安慰劑(即不接受治療)的患者。圖4C和4D描述了圖4A和4B中的相同數(shù)據(jù)，只是補(bǔ)充了來(lái)自其他患者的數(shù)據(jù)。圖5A和5B描述了接受綴合物L(fēng)JP394的患者(A，空心方形)和接受安慰劑的患者(B，實(shí)心方形)的K。'變化.每個(gè)方形代表一名患者。X軸是接受治療(或安慰劑)之前的Kd';Y軸是治療(或施用安慰劑)4個(gè)月之后的IW百分比變化。圖6A和6B描述了與圖5A和5B相同的數(shù)據(jù)，只是補(bǔ)充了來(lái)自其他患者的數(shù)據(jù)。兩張圖描述了接受綴合物L(fēng)JP394(左圖)或安慰劑(右圖)的患者中的Kd'變化。每個(gè)方形代表一名患者.X軸是接受治療(或安慰劑)之前的Kd';Y軸是每周靜脈內(nèi)用100mgLJP394(或安慰劑)治療4個(gè)月之后的K。'百分比變化。圖7描述了第二項(xiàng)研究中藥物治療對(duì)患者血清對(duì)于LJP394的親和力的影響的概述。數(shù)據(jù)是每組所有患者的平均值土SEM。該圖比較了每周靜脈內(nèi)用100mgLJP394或安慰劑治療之前(實(shí)心柱)與4個(gè)月之后(斜線(xiàn)柱)的KA圖8描述了來(lái)自圖7的患者群，分成兩組，低親和力組(Kd，高于O.8mgIgG/ml血清)和高親和力組(Kd'低于0.8mgIgG/ml血清).數(shù)據(jù)是每組所有患者的平均值土SEM。該圖比較了每周靜脈內(nèi)用100mgLJP394或安慰劑治療之前(實(shí)心柱)與4個(gè)月之后(斜線(xiàn)柱)的Kd',圖9描述了患者血清對(duì)于LJP394表位的親和力隨時(shí)間的變化.對(duì)于試驗(yàn)的誘導(dǎo)期(每周服藥100mg的前4個(gè)月)，每月一次測(cè)定親和力。X軸是以周計(jì)的時(shí)間；Y軸是Kd'。根據(jù)最初(治療前)親和力選擇樣品，并依相對(duì)親和力分成三組高、中、和低親和力。親和力值是3名患者的平均值。實(shí)心三角代表低親和力"患者(Kd'平均大約1.13mg/邁l);實(shí)心圓代表"t親和力"患者(Kd，平均大約0.44mg/ml);而實(shí)心方形代表高親和力"患者(Kd，平均大約O.14mg/ml)。圖IO描述了用LJP394治療的高和低親和力患者組的抗dsDNA抗體隨時(shí)間的百分比變化，通過(guò)Farr測(cè)定法進(jìn)行評(píng)估.排除在高劑量皮質(zhì)類(lèi)固醇和/或環(huán)磷酰胺治療后收集的數(shù)據(jù)。將患者分成低親和力(Kd'〉0.8mg/ml)和高親和力(Kd，《0.8mg/ml)兩組.用虛線(xiàn)描述低親和力患者，用實(shí)線(xiàn)描述高親和力患者。數(shù)據(jù)是研究的所有患者的平均值.X軸是自試驗(yàn)開(kāi)始后的時(shí)間(以周計(jì))，Y軸是自試驗(yàn)開(kāi)始后抗dsDNA抗體水平的百分比變化?；疑珔^(qū)域標(biāo)志服藥階段，第一階段是每周100mgLJP394或安慰劑的誘導(dǎo)期，第二階段是每周50mgLJP394或安慰劑。圖中白色區(qū)域指示，斷階段"，不施用LJP394或安慰劑.圖11A與圖5A相同，只是用實(shí)心方形指示患者中的活性腎紅肘的發(fā)生.圖11B(用LJP394治療的患者)與圖11A相似，只是擴(kuò)充了用于分析的患者群。圖11C使用擴(kuò)充后的患者群描述了用安慰劑治療的患者中的Kd，百分比變化。對(duì)于經(jīng)歷紅肺的患者，用實(shí)心方形代表用LJP394治療的患者，用實(shí)心圓形代表用安慰劑治療的患者，圖12描述了接受綴合物L(fēng)JP394的患者(實(shí)心方形)中和接受安慰劑的患者(空心方形)中的腎紅腫。每個(gè)方形代表一名患者。X軸是接受治療(或安慰劑)之前的K。'；Y軸是治療(或安慰劑)4個(gè)月之后的Ko'百分比變化。圖13描述了接受安慰劑(即不接受治療)4個(gè)月之后的患者中的K。'變化，實(shí)心方形指示腎紅腫的發(fā)生，空心方形指示安慰劑患者.結(jié)果指示紅胂相對(duì)于最初K。'和相對(duì)于KD，變化的隨機(jī)分布。圖14描述了高親和力患者的腎紅腫發(fā)展隨時(shí)間變化的圖。實(shí)線(xiàn)代表用LJP394治療的患者，虛線(xiàn)代表用安慰劑治療的患者。X軸是自第一次服用LJP394(或安慰劑)后的時(shí)間(以月計(jì))，Y軸是不經(jīng)歷腎紅胂的個(gè)體的百分比.圖15描述了高親和力組中高劑量皮質(zhì)類(lèi)固醇和/或環(huán)磷酰胺(HDCC)治療隨時(shí)間實(shí)施的圖。HDCC治療指在高親和力患者中施用高劑量皮質(zhì)類(lèi)固醇和/或環(huán)磚酰胺的第一次干預(yù)。實(shí)線(xiàn)代表用LJP394治療的個(gè)體，虛線(xiàn)代表用安慰劑治療的個(gè)體。X軸是自第一次服用LJP394(或安慰劑)后的時(shí)間(以月計(jì))，Y軸是不接受HDCC干預(yù)的個(gè)體百分比。圖16描述了高親和力組(Kd，<0.8mg/ml)的臨床效果的概述。圖17描述了整個(gè)患者群(即噫欲治療的"群體)的臨床效果的概述。發(fā)明實(shí)施方式我們發(fā)現(xiàn)，來(lái)自患有狼瘡的個(gè)體的抗dsDNA抗體對(duì)于將要或正在用作治療基礎(chǔ)的表位的平均親和力，可預(yù)示設(shè)計(jì)通過(guò)施用包含至少兩個(gè)含該表位的分子的綴合物來(lái)誘導(dǎo)免疫耐受的治療的功效.根據(jù)我們對(duì)如此治療狼瘡患者得到的臨床數(shù)據(jù)的評(píng)估，我們發(fā)現(xiàn)(l)抗體對(duì)于用于治療的DNA表位的最初親和力能夠預(yù)示對(duì)治療的響應(yīng)程度，即在降低抗體親和力方面，以及在減少癥狀和降低抗dsDNA抗體的量(效價(jià))方面，而且患者的抗體親和力越高，對(duì)治療的響應(yīng)越好；(2)抗體對(duì)于用于治療的DNA表位的最初親和力能夠預(yù)示在減少癥狀方面的功效程度，而且具有較高親和力抗體的患者相對(duì)于具有較低親和力抗體的患者(或具有高親和力抗體但不接受治療的患者)顯示癥狀減少；(3)抗體對(duì)于用于治療的DNA表位的親和力變化能夠預(yù)示在減少癥狀方面的功效程度，而且展示必需親和力變化(降低)的患者相對(duì)于未能展示必需變化的患者顯示癥狀減少.相反，先前的報(bào)導(dǎo)公開(kāi)了在施用本文所述綴合物(LJP394)后測(cè)量抗dsDNA抗體的效價(jià)(即以與dsDNA的結(jié)合指示抗dsDNA抗體水平)，但是沒(méi)有報(bào)導(dǎo)患者抗dsDNA抗體對(duì)于綴合物中多核苷酸表位的親和力.根據(jù)我們的分析，最初報(bào)導(dǎo)的這些效價(jià)或效價(jià)變化都不預(yù)示臨床效果。因此，本發(fā)明提供了治療方法和筌定適合于本文所述治療的個(gè)體的方法，所述治療必需評(píng)估來(lái)自個(gè)體的抗體對(duì)于正在、已經(jīng)、和/或?qū)⒁鳛楸疚乃雒庖吣褪苤委熁A(chǔ)的表位的親和力。一般技術(shù)本發(fā)明的實(shí)踐將采用(除非另有說(shuō)明)分子生物學(xué)(包括重組技術(shù))、微生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)、和免疫學(xué)的常規(guī)技術(shù)，這些屬于本領(lǐng)域技術(shù)范圍之內(nèi).這些技術(shù)在文獻(xiàn)中有完整解釋?zhuān)T如《J/^ecf/hrao/2J'/7f」ZaZorato2T^fe/〃a"〉(分子克隆實(shí)驗(yàn)室指南)，第2版，Sambrook等人，1989，冷泉港出版社；《肌go應(yīng)Je"jVe加t力esj's》(寡核苷酸合成)，M.J.Gait編，1984;《Anj.邁aJCWt"re》(動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng))，R.I.Freshney編，1987;《組力ocfe^7，o7o^K》(酶學(xué)方法)，Academic出版公司；《^fe/7必ooAo/^y/eri邁e力taJ/咖"730J05y》(實(shí)驗(yàn)免疫學(xué)手冊(cè))，D.M.Weir和C.C.Blackwell編；《fe/e7!r朋s/"erFeetorsibrife鵬aJj'朋Ce77s》(用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)移載體)，J.M.Miller和M.P，Calos編，1987;《Ce"t尸rotocohj'/2編,Jsr腸Jo^7》(分子生物學(xué)通用方案)，F(xiàn).M.Ausubel等人編，1987;《潛.'T力e尸W，r雄CiW/zyeac"o"》(PCR:聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))，Mullis等人編，1994;《0/rre/f/!rotoco/sj'/z/鵬w3(x/0^7》(免疫學(xué)通用方案)，J.E.Coligan等人編，1991;和《幼o(hù)rt尸r"ocosj'刀Uecwk萬(wàn)j'o7o^y》(分子生物學(xué)短方案)，WileyandSons,1999。定義12"親和力"在本領(lǐng)域很好理解，指抗體結(jié)合表位的程度或強(qiáng)度.可以以本領(lǐng)域知道的許多方式來(lái)測(cè)量和/或表述親和力，包括但不限于平衡解離常數(shù)(KD或Kd)、表觀(guān)平衡解離常數(shù)(K。，或Kd，)、和IC5。(在竟?fàn)帉?shí)驗(yàn)中實(shí)現(xiàn)50%抑制所需的量；在本文中與15。"可互換使用).可以理解，為了本發(fā)明的目的，親和力是可結(jié)合表位的指定抗體群的平均親和力.在本文中以mgIgG/ml或mg/ml表述的KD'值指mgIg/ml血清，盡管可以使用血漿.在將抗體親和力"用作"施用或選擇本文所述治療方法的塞礎(chǔ)"時(shí)，在治療之前和/或之中測(cè)量抗體親和力，并且臨床醫(yī)生將獲得的數(shù)值用于評(píng)估下述任何項(xiàng)目(1)個(gè)體可能最初適合于接受治療；(2)個(gè)體可能最初不適合于接受治療；(3)對(duì)治療的響應(yīng)；(4)個(gè)體可能適合于繼續(xù)接受治療；(5)個(gè)體可能不適合于繼續(xù)接受治療；(6)調(diào)整劑量；(7)預(yù)示臨床受益的可能性。本領(lǐng)域?qū)⒑芎美斫?，抗體親和力在臨床條件下的測(cè)量清楚指示這個(gè)參數(shù)可用作開(kāi)始、繼續(xù)、調(diào)整、和/或停止施用本文所述治療的基礎(chǔ)。"在開(kāi)始治療之前或之時(shí)"測(cè)量的抗體親和力是在個(gè)體接受第一次施用本文所述治療形式之前和/或在接受第一次施用本文所述治療形式之后至少大約4周內(nèi)、優(yōu)選至少大約2周內(nèi)、優(yōu)選至少大約l周內(nèi)、優(yōu)選至少大約5天內(nèi)、優(yōu)選至少大約3天內(nèi)、優(yōu)選至少大約2天內(nèi)、優(yōu)選至少大約l天內(nèi)在個(gè)體中測(cè)量的抗體親和力。，體"指具有由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)的一組個(gè)體。對(duì)于指定群體(成員數(shù)目可以根據(jù)不同情況而變化)，抗體親和力在一定范圍內(nèi)變化(即最大和最小親和力)。"可能適合于"本文所述治療的個(gè)體(包括貨合于"本文所述治療的個(gè)體)指施用所述治療比不施用該治療更有可能受益的個(gè)體.相反，"T能不適合于"本文所述治療的個(gè)體(包括％適合于"本文所述治療的個(gè)體)指未能由施用所述治療受益的可能性更大的個(gè)體。在用于本文時(shí)，"治療"指用于獲得有益或期望效果(包括且優(yōu)選臨床效果)的方法。為了本發(fā)明的目的，有益或期望效果包括但不限于下列一項(xiàng)或多項(xiàng)減輕癥狀、減小疾病程度、穩(wěn)定疾病狀態(tài)(即不再惡化)、預(yù)防疾病擴(kuò)散(即轉(zhuǎn)移)、預(yù)防疾病發(fā)生或復(fù)發(fā)、延遲或減緩疾病進(jìn)展、改善疾病狀態(tài)、緩解(部分或完全)、降低發(fā)病率、和/或減少癥狀。狼瘡治療包括任何方面的狼瘡，包括但不限于狼瘡腎炎(這是一種慢性炎性腎病)。在狼瘡腎炎過(guò)程中，可能發(fā)生，腫(flare)"。"紅胂"指活性升高，通常是炎性活性。若活性在腎中，則紅肺稱(chēng)為"f紅腫"?？梢栽u(píng)估某些因素來(lái)鑒定"fr紅腫"，包括但不限于蛋白尿水平、血尿水平、和血清肌酸酐水平。不存在狼瘡腎炎癥狀時(shí)也可以施用狼瘡腎炎""治療"，而且這種治療(如％療"的定義所指)可降低紅胂發(fā)病率。^治療"還涵蓋降低任何方面的狼瘡(諸如狼瘡腎炎)的病理學(xué)后果。在用于本文時(shí)，"SLE紅胂"指在SLE患者中發(fā)生的紅腫(即急性臨床事件)。SLE紅腫可能發(fā)生于多種主要器官中，包括但不限于腎、腦、肺、心、肝、和皮膚。SLE紅胂包括腎紅腫。在用于本文時(shí)，"高劑量皮質(zhì)類(lèi)固醇和/或環(huán)磷酰胺"或flDCC"指單獨(dú)或與環(huán)磷酰胺一起加大皮質(zhì)類(lèi)固醇劑量的干預(yù)。高劑量通常指皮質(zhì)類(lèi)固醇。這種干預(yù)通常發(fā)生于紅腫或急性發(fā)作。一般而言，例如，加大劑量是至少15mg/天，而且可以超過(guò)20mg/天?？梢允褂脴?biāo)準(zhǔn)臨床方案來(lái)施用HDCC。臨床醫(yī)生可以通過(guò)評(píng)估某些周素來(lái)監(jiān)控患者并確定何時(shí)需要HDCC治療，所述因素包括但不限于蛋白尿水平、血尿水平、和血清肌酸酐水平。一般而言，對(duì)經(jīng)歷腎紅腫的患者給予HDCC治療，盡管這種治療可用于其它方面的狼瘡。K。，或K。，值的,同物"或"^能等同物"指同樣反映親和力的參數(shù)或參數(shù)值。例如，Kd，的等同物是ICs。。又例如，K。'為0.5的等同值是ICs。為200，如果它們反映相同或大致相同的親和力的話(huà)，這些等同物的測(cè)定完全屬于本領(lǐng)域技術(shù)范圍之內(nèi)，而且本發(fā)明涵蓋這些等同物及其測(cè)定。一般而言，提及Kd'即包括提及Kd'的功能等同物。在用于本文時(shí)，單數(shù)形式"一個(gè)"和"一種"包括復(fù)數(shù)形式，除非另有說(shuō)明。例如，^種"抗體包括一種或多種抗體。"表位"在本領(lǐng)域很好理解，指展示特異性結(jié)合抗體的任何化學(xué)部分。"表位"還可包括抗原，它是包含表位且同樣特異性結(jié)合抗體的部分或分子."雙鏈DNA表位"或^sDNA表位"指展示特異性結(jié)合抗雙鏈DM抗體的任何化學(xué)部分，而且同樣包括包含這種表位的分子。下文進(jìn)一步討論了適用于本發(fā)明綴合物的雙鏈DNA表位。術(shù)語(yǔ)"表位"還包括下文描述的雙鏈DNA自身的模擬物。"可特異性結(jié)合"抗體的表位在本領(lǐng)域很好理解，而且這種特異性結(jié)合的測(cè)定方法在本領(lǐng)域也是眾所周知的。若某種分子與特定細(xì)胞或物質(zhì)發(fā)生的反應(yīng)或聯(lián)系比其它細(xì)胞或物質(zhì)更頻繁、更快速、更持久、和/或具有更高親和力，則說(shuō)該分子展示可特異性結(jié)合"。若某種抗體與靶的結(jié)合比與其它物質(zhì)的結(jié)合更親和、更親合、更容易、和/或更持久，則說(shuō)該抗體可特異性結(jié)合"該靶。"抗雙鏈DNA抗體"或"抗dsDNA抗體"或W鏈DNA抗體"在本文中可互換使用，指可特異性結(jié)合雙鏈DNA(dsDNA)的任何抗體。任何抗體包括任何類(lèi)型的抗體，諸如IgG、IgA、或IgM，而且抗體不必是任何特定類(lèi)型。正如在本文提供的"抗體"定義中清楚指出的，"抗雙鏈DNA抗體"包括展示這種必需功能(即特異性結(jié)合dsDNA)特性的任何片段，諸如包含可變區(qū)的片段，諸如Fab片段.正如下文討論的，可以理解，與任何抗雙鏈DNA抗體(或功能片段)的特異性結(jié)合是足夠的.在用于本文時(shí)，術(shù)語(yǔ)滿(mǎn)環(huán)抗雙鏈DNA抗體"指未結(jié)合生物學(xué)樣品上和/或中的雙鏈DNA表位的抗雙鏈DNA抗體，即游離抗體。"抗體"指能夠通過(guò)位于免疫球蛋白分子可變區(qū)中的至少一個(gè)抗原識(shí)別位點(diǎn)而特異性結(jié)合靶(諸如碳水化合物、多核苷酸、或多肽)的免疫球蛋白分子.在用于本文時(shí)，該術(shù)語(yǔ)不僅包括完整抗體，而且包括它們的片段(諸如Fab、Fab，、F(ab，)2、Fv)、單鏈(ScFv)、其突變體、包含抗體部分的融合蛋白、人源化抗體、和包含所需特異性的抗原識(shí)別位點(diǎn)的免疫球蛋白分子的任何其它經(jīng)修飾結(jié)構(gòu).術(shù)語(yǔ)"多核苷酸"和紫酸"可互換使用，指任何長(zhǎng)度的核苷酸15聚合物形式，其或是核糖核香酸或是脫氧核糖核苷酸。這些術(shù)語(yǔ)包括單鏈、雙鏈、和三鏈DNA、基因組DNA、cDNA、RNA、DNA-RNA雜合體、或包含嘌呤和嘧啶堿基或其它天然的、化學(xué)、生物化學(xué)修飾的、非天然的、或衍生化的核苷酸堿基的聚合物。為了本發(fā)明的目的，除非另有說(shuō)明，本文所示序列指雙鏈序列。例如，包含雙鏈序列5，-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3，、基本上由該序列組成、或由該序列組成的多核苷酸包括互補(bǔ)多核普酸序列，具體而言就是序列3，-CACACACACACA'CACACACA-5，?？梢岳斫?，本文描述的雙鏈多核普酸序列還包括本文描述的修飾。多核苷酸的主鏈可包含糖和磷酸基團(tuán)(通?？赡馨l(fā)現(xiàn)于RNA或DNA中)或者修飾后或取代后的糖或磷酸基團(tuán)?；蛘撸嗪塑账岬闹麈溈砂铣蓙喕?諸如氨基磷酸酯)聚合物，因而可以是寡脫氧核苷氨基磷酸酯(P-NH2)或混合型氨基磷酸酯-磷酸二酯寡聚物。硫代磷酸酯鍵可用于取代磷酸二酯鍵.另外，可以通過(guò)合成互補(bǔ)鏈并在適當(dāng)條件下退火而由化學(xué)合成的單鏈多核苷酸產(chǎn)物獲得雙鏈多核苷酸，或者使用DNA聚合酶和適當(dāng)引物從頭合成互補(bǔ)鏈從而獲得。下面是多核苷酸的非限制性范例基因或基因片段、外顯子、內(nèi)含子、mRNA、tRNA、rRNA、核酶、cDNA、重組多核苷酸、分支多核苷酸、質(zhì)粒、載體、任何序列的分離DNA、任何序列的分離RNA、核酸探針、和引物.為了本發(fā)明的目的，多核苷酸通常是少于大約lkb、優(yōu)選少于大約500bp、優(yōu)選少于大約250bp、優(yōu)選少于大約100bp、優(yōu)選少于大約50bp的分離多核苷酸。然而，可以理解，可以使用任何大小或結(jié)構(gòu)的多核苷酸，只要它展示與來(lái)自個(gè)體的抗雙鏈DNA抗體發(fā)生必需結(jié)合即可。還可以理解，可以使用與在治療中曽經(jīng)、正在、或?qū)⒁褂玫亩嗪塑账岵煌亩嗪塑账?例如在大小和/或序列方面)，只要這兩種多核苷酸對(duì)于來(lái)自個(gè)體的抗dsDNA抗體展示等同(或可轉(zhuǎn)換)的結(jié)合親和力即可。換言之，非同一的多核苷酸可用于親和力測(cè)定和治療方面。優(yōu)選的是，多核苷酸是DNA。在用于本文時(shí)，DNA"不僅包括堿基A、T、C、和G，而且包括這些堿基的任何類(lèi)似物或經(jīng)修飾形式，諸如甲基化核香酸、核苷酸間修飾(諸如不帶電荷的鍵和thioate)、使用糖類(lèi)似物、和經(jīng)修飾和/或其它主鏈結(jié)構(gòu)(諸如聚酰胺)。"天然發(fā)生的"部分指內(nèi)源化學(xué)部分，諸如碳水化合物、多核苷酸、或多肽序列，即在自然界中發(fā)現(xiàn)的部分，天然發(fā)生部分的加工可發(fā)生于一個(gè)或多個(gè)步驟，而且這些術(shù)語(yǔ)涵蓋所有加工階段。相反，"非天然發(fā)生的"部分指所有其它部分，即在自然界中不存在的部分，諸如重組多核苷酸序列和非天然碳水化合物。在用于本文時(shí)，術(shù)語(yǔ)免疫原"指在注射到動(dòng)物體內(nèi)后引發(fā)體液免疫應(yīng)答的化學(xué)實(shí)體。免疫原具有B細(xì)胞表位和T細(xì)胞表位二者。在用于本文時(shí)，術(shù)語(yǔ)免疫原的"類(lèi)似物"(也稱(chēng)為紫擬物")指可特異性結(jié)合免疫原能特異性結(jié)合的抗體的生物學(xué)或化學(xué)化合物.同樣的，，鏈DNA表位"包括天然發(fā)生的雙鏈DNA的模擬物。,似物"或紫擬物"與雙鏈DNA共享表位或結(jié)合特異性.類(lèi)似物可以是展示必需結(jié)合特性的任何化學(xué)物質(zhì)，因而可以是例如簡(jiǎn)單或復(fù)雜的有機(jī)或無(wú)機(jī)分子、多肽、多核苷酸、碳水化合物、脂質(zhì)、脂多糖、脂蛋白、或上述任意組合，包括但不限于包含多核苷酸的多肽、糖基化多肽、和糖脂。術(shù)語(yǔ)"類(lèi)似物"涵蓋術(shù)語(yǔ)紫擬型(mimot叩e)",該術(shù)語(yǔ)在本領(lǐng)域是眾所周知的。"個(gè)體"指脊推動(dòng)物，優(yōu)選哺乳動(dòng)物，更優(yōu)選人。哺乳動(dòng)物包括但不限于農(nóng)場(chǎng)動(dòng)物、運(yùn)動(dòng)動(dòng)物、寵物、靈長(zhǎng)類(lèi)、小鼠和大鼠。"T細(xì)胞表位"指在T細(xì)胞上具有抗原特異的特異性結(jié)合位點(diǎn)且與其的結(jié)合導(dǎo)致T細(xì)胞激活的成份或其部分。當(dāng)將本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案描述成餓乏"T細(xì)胞表位時(shí)，這表示使用本領(lǐng)域標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定法檢測(cè)不到T細(xì)胞表位。為了本發(fā)明的目的，"缺乏"T細(xì)胞表位的表位指表位缺乏在待治療個(gè)體(即將接受表位呈遞效價(jià)平臺(tái)分子的個(gè)體)中引起T細(xì)胞激活的T細(xì)胞表位。有可能的是，例如，表位可能缺乏針對(duì)一個(gè)或一組個(gè)體的T細(xì)胞表位，但是擁有針對(duì)其它個(gè)體的T細(xì)胞表位。用于檢測(cè)T細(xì)胞表位的存在的方法在本領(lǐng)域是眾所周知的，而且包括檢測(cè)T細(xì)胞增殖的測(cè)定法(諸如胸苷摻入)。通常認(rèn)為未能誘導(dǎo)高于背景的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著(即使用標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法得到的p通常低于O.05)胸苷摻入的免疫原缺乏T細(xì)胞表位，盡管可以理解，胸苷摻入的定量量可以隨測(cè)試的免疫原而變化。一般而言低于大約2-3、更優(yōu)選低于大約l的刺激指數(shù)指示缺乏T細(xì)胞表位。還可以通過(guò)依照標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)量T細(xì)胞衍生淋巴因子的分泌來(lái)測(cè)定T細(xì)胞表位的存在?？梢愿鶕?jù)經(jīng)驗(yàn)來(lái)確定T細(xì)胞表位的定位和內(nèi)容(若存在)。可以理解，隨著時(shí)間的流逝可以開(kāi)發(fā)出用于檢測(cè)T細(xì)胞表位的存在的更靈敏的測(cè)定法，而且對(duì)缺乏T細(xì)胞表位的說(shuō)明依賴(lài)所用檢測(cè)系統(tǒng)的類(lèi)型。"誘導(dǎo)耐受"或"誘導(dǎo)免疫耐受"指降低和/或穩(wěn)定針對(duì)免疫原的免疫應(yīng)答的程度。免疫應(yīng)答"可以是體液和/或細(xì)胞的，而且可以使用本領(lǐng)域知道的標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定法進(jìn)行測(cè)量，為了本發(fā)明的目的，通常用抗雙鏈DNA抗體的存在和/或水平來(lái)反映免疫應(yīng)答，定量的說(shuō)，降低(以抗體生成和/或水平的降低進(jìn)行測(cè)量)指至少大約15%、優(yōu)選至少大約25%、更優(yōu)選至少大約50%、更優(yōu)選至少大約75%、更優(yōu)選至少大約90%、甚至更優(yōu)選至少大約95%、最優(yōu)選100%。可以理解，耐受是抗原特異的，而且為了本發(fā)明的目的，用于那些具有抗雙鏈DNA抗體的個(gè)體。銹導(dǎo)耐受"還包括減緩和/或延遲抗體水平的升高速率。在用于本文時(shí)，術(shù)語(yǔ)B細(xì)胞無(wú)反應(yīng)性"指需要T細(xì)胞輔助來(lái)生成并分泌抗體的那些B細(xì)胞的不響應(yīng)，包括但不限于未成熟和/或成熟B細(xì)胞的克隆缺失和/或B細(xì)胞不能生成抗體。^響應(yīng)"指針對(duì)免疫原的體液應(yīng)答在治療上有效的降低。定量的說(shuō)，降低(以抗體生成的降低進(jìn)行測(cè)量)指至少50%、優(yōu)選至少75%、最優(yōu)選100%。"有效量"(在用于狼瘡方面或由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)方面時(shí))指足以實(shí)現(xiàn)有益或期望效果(包括臨床效果)的量。可以一次或多次施用給予有效量。為了本發(fā)明的目的，本文所述綴合物(或包含綴合物的組合物)的有效量指足以降低抗雙鏈DNA抗體的循環(huán)水平的量，優(yōu)選通過(guò)誘導(dǎo)耐受性來(lái)實(shí)現(xiàn)降低，特別是在抗雙鏈DNA抗體的方面。就治療而言，本文所述綴合物(或包含綴合物的組合物)的嗜效量"指足以減輕、改善、穩(wěn)定、逆轉(zhuǎn)、減緩、或延遲系統(tǒng)性紅斑狼瘙(SLE)的18進(jìn)展或預(yù)防系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)的量，包括由SLE引起的腎進(jìn)行性炎癥性退化(即狼瘡腎炎)。在生化反應(yīng)中在任意兩種或多種成份間形成的^m定復(fù)合物"指在形成復(fù)式結(jié)構(gòu)或復(fù)合物與隨后檢測(cè)(包括任何任選的清洗步驟或過(guò)渡期可能發(fā)生的其它操作)之間持續(xù)時(shí)間足夠長(zhǎng)的復(fù)式結(jié)構(gòu)或復(fù)合物，"分離的"或"純化的"多肽或多核苷酸指基本上不含自然界中相關(guān)物質(zhì)的多肽或多核苷酸。"基本上不含"指至少50%、優(yōu)選至少70%、更優(yōu)選至少80%、甚至更優(yōu)選至少90%不含自然界中與之相關(guān)的物質(zhì)。在用于本文時(shí)，"效價(jià)平臺(tái)分子"指包含供離散數(shù)目的表位和/或表位模擬物附著的位點(diǎn)的非免疫原性分子.綴合物或效價(jià)平臺(tái)分子的貨價(jià)"指每個(gè)分子中供雙鏈DNA表位附著的位點(diǎn)的數(shù)目。或者，綴合物的效價(jià)指雙鏈DNA表位與效價(jià)平臺(tái)分子的比率(絕對(duì)值或平均值)。在用于描述效價(jià)平臺(tái)分子時(shí)，"非免疫原性"指在將其自身施用于個(gè)體后，效價(jià)平臺(tái)分子不能引發(fā)免疫應(yīng)答(即T細(xì)胞和/或B細(xì)胞應(yīng)答)和/或不能引發(fā)足夠的免疫應(yīng)答?？山邮苊庖邞?yīng)答的程度取決于使用效價(jià)平臺(tái)分子的具體情況，而且可以根據(jù)經(jīng)驗(yàn)來(lái)確定，與效價(jià)平臺(tái)分子,合"的表位指通過(guò)共價(jià)和/或非共價(jià)相互作用而附著于效價(jià)平臺(tái)分子的表位。"表位呈遞效價(jià)平臺(tái)分子"指包含附著的或結(jié)合的表位的效價(jià)平臺(tái)分子，其中至少一些(其中至少兩個(gè))能夠結(jié)合目的抗體."生物學(xué)樣品"涵蓋由個(gè)體獲得且可用于治療或監(jiān)控測(cè)定法的多種樣品類(lèi)型。該定義涵蓋血液和生物學(xué)起源的其它流體樣品、固體組織樣品諸如活組織切片標(biāo)本或組織培養(yǎng)物或由其衍生的細(xì)胞、及其后代.該定義還包括獲得后經(jīng)過(guò)任何方式操作的樣品，諸如試劑處理、溶解、或富集某些成份(諸如蛋白質(zhì)或多核苷酸)。術(shù)語(yǔ)"生物學(xué)樣品"涵蓋臨床樣品，還包括培養(yǎng)中的細(xì)胞、細(xì)胞上清液、細(xì)胞裂解物、血清、血漿、生物學(xué)流體、和組織樣品。"聯(lián)合"指除了施用一種治療形式以外還對(duì)相同個(gè)體施用另一種治療形式，諸如除了施用皮質(zhì)類(lèi)固醇環(huán)磷酰胺免疫遏制劑(或其它免疫遏制劑療法)以外還施用本文所述綴合物.同樣，裉合"指在對(duì)個(gè)體進(jìn)行一種治療形式之前、之中、或之后施用另一種治療形式。"由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)"指與不適當(dāng)生成抗體(通常是針對(duì)自身抗原的抗體)有關(guān)的免疫應(yīng)答紊亂。由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)包括但不限于狼瘡、由抗體介導(dǎo)的血栓形成和血小板過(guò)少、抗磷脂綜合癥、重癥肌無(wú)力。因?yàn)槊庖邞?yīng)答紊亂依賴(lài)具體情況，為了本發(fā)明的目的，"由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)"還可涵蓋移植排斥(尤其是異種移植)，其中就試圖維持外來(lái)移植組織而言，免疫應(yīng)答是不適當(dāng)?shù)?，還包括妊娠中基于Rh的排斥，接受治療"包括開(kāi)始治療和/或繼續(xù)治療。包含"指包括"?；趯?duì)抗體親和力的評(píng)估來(lái)治療狼瘡的方法和鑒定適合于治療狼瘡的個(gè)體的方法本文描述的方法必需評(píng)估來(lái)自個(gè)體的抗體的親和力，其中所述個(gè)體患有或懷疑患有系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)。為了本發(fā)明的目的，(1)討論中的親和力是關(guān)于個(gè)體的抗體，即由該個(gè)體獲得的抗體；(2)測(cè)有關(guān)和/或有涉及的抗體；且(3)感興趣的結(jié)合是抗體與可結(jié)合抗體的表位的結(jié)合，而且表位將如本文所述用于建議的治療(即dsDNA表位).本發(fā)明提供了(1)基于對(duì)最初抗體親和力(即開(kāi)始治療之前或之時(shí)的抗體親和力)的評(píng)估來(lái)治療個(gè)體的方法；(2)基于對(duì)抗體親和力變化(如果有的話(huà))的評(píng)估來(lái)治療個(gè)體的方法，即比較(a)開(kāi)始治療之前或之時(shí)的抗體親和力與(b)治療足以引發(fā)親和力變化(如果有的話(huà))的一段時(shí)期之后的抗體親和力；(3)基于對(duì)最初抗體親和力的評(píng)估來(lái)篩選可能適合于接受本文所述治療的個(gè)體(或者可能不適合于接受本文所述治療的個(gè)體)的方法；(4)基于對(duì)抗體親和力變化(如果20有的話(huà))的評(píng)估來(lái)篩選可能適合于接受本文所述治療的個(gè)體(或者可能不適合于接受本文所述治療的個(gè)體)的方法；(5)基于對(duì)抗體親和力的評(píng)估來(lái)監(jiān)控本文所述治療的方法，在本文所述方法方面，可以獨(dú)立于治療方法，同樣可以不同于治療方法，而實(shí)踐篩選方法(即鑒定適合于或不適合于治療的個(gè)體的方法)。除了醫(yī)學(xué)博士以外，熟練技術(shù)人員使用本領(lǐng)域設(shè)備和/或技術(shù)，可以實(shí)踐本文所述篩選方法。對(duì)于本發(fā)明中使用或針對(duì)K。，的所有實(shí)施方案，無(wú)論是篩選、治療、監(jiān)控，或者是針對(duì)親和力評(píng)估的任何其它方法，可以理解，可以測(cè)量并使用其它等同值，它們均包括在本發(fā)明范圍之內(nèi)。例如，如下所述，本領(lǐng)域知道的許多方法能夠測(cè)量(和表述)來(lái)自個(gè)體的抗體對(duì)于將要用于治療的表位(在本發(fā)明的內(nèi)容中是雙鏈DNA表位)的親和力。Kd'是這些參數(shù)之一，而且可以在本發(fā)明中測(cè)量和使用等同參數(shù)。另外，關(guān)于本文報(bào)導(dǎo)的K。，臨界值，這一發(fā)現(xiàn)的基礎(chǔ)是大約每周一次施用大約100mgLJP394綴合物。治療方法因此，本發(fā)明提供了治療個(gè)體的SLE的方法，包括對(duì)個(gè)體施用包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)dsDNA表位(諸如兩個(gè)或多個(gè)包含dsDNA表位的分子，優(yōu)選多核苷酸)的綴合物，其中表位(優(yōu)選(綴合物中的)多核苷酸)對(duì)于來(lái)自個(gè)體的抗體的親和力被用作選擇接受治療的個(gè)體的基礎(chǔ).在其它實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了治療個(gè)體的SLE的方法，包括對(duì)個(gè)體施用包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)dsDNA表位(優(yōu)選多核普酸)的綴合物，其中表位(優(yōu)選(綴合物中的)多核苷酸)對(duì)于來(lái)自個(gè)體的抗體的親和力被用作選擇繼續(xù)接受治療的個(gè)體的基礎(chǔ).測(cè)定親和力的方法在本領(lǐng)域是眾所周知的且描述于下文.治療之前或之中或是通過(guò)測(cè)量K。'或是通過(guò)一些其它方法來(lái)表述的親和力的測(cè)量，強(qiáng)烈(如果不是決定性的話(huà))指示該參數(shù)是選擇接受和/或繼續(xù)接受治療的個(gè)體的基礎(chǔ)。因此，在本文描述的所有治療方法方面，而且正如貨用作...的基礎(chǔ)"的定義所述，其它實(shí)施方案包括(1)如本文所述評(píng)估或測(cè)量親和力(并優(yōu)選選擇適合于接受(包括繼續(xù)接受)治療的個(gè)體)；和(2)如本文所述施用治療。如本文所述，在有些實(shí)施方案中，在評(píng)估親和力變化(如果有的話(huà))時(shí)，進(jìn)行超過(guò)一種測(cè),。本文描述了治療方法中所使用的dsDNA表位.在有些實(shí)施方案中，dsDNA表位是多核苷酸，諸如5，-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3，?？梢允褂镁Y合物中所用表位(或者包含該表位的分子或部分)來(lái)測(cè)量親和力；或者，可以使用相似的、非同一的表位，只要它的親和力至少與綴合物中所用表位的親和力相關(guān)，從而可以獲得有意義的親和力測(cè)量值即可.本發(fā)明提供了治療個(gè)體的SLE的方法，包括對(duì)個(gè)體施用包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)多核苷酸的綴合物，所述多核苷酸包含雙鏈序列5，-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'、基本上由該序列組成、或由該序列組成，其中在開(kāi)始治療之前或之時(shí)，綴合物中的多核苷酸對(duì)于來(lái)自個(gè)體的抗體的表觀(guān)平衡解離常數(shù)(Kd')低于大約1.0mgIgG/ml，而且其中所述K。'值被用作選擇接受治療的個(gè)體的基礎(chǔ).在其它實(shí)施方案中，K。，低于大約下列任何數(shù)值0.8、0.7、0.6、0.5、0.4、0.3、0.2、0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.025.這些K。，值應(yīng)用于其中評(píng)估K。，的所有方法(包括治療和/或篩選)，包括諸如基于5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'的治療的那些方法.在優(yōu)選實(shí)施方案中，Ko'低于大約0.8邁gIgG/ml。在有些實(shí)施方案中，K。'低于大約0.5mgIgG/ml.在有些實(shí)施方案中，K。'低于大約0，lmgIgG/ml。下文描述了測(cè)量K。'的方法。在治療之前或之中通過(guò)測(cè)量K。，或通過(guò)一些其它方法來(lái)表述的親和力的測(cè)量值，強(qiáng)烈(如果不是決定性的話(huà))指示該參數(shù)是選擇接受治療的個(gè)體的基礎(chǔ)，在有些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了治療個(gè)體的SLE的方法，包括(1)在開(kāi)始治療之前或之時(shí)，評(píng)估綴合物中的dsDNA表位(包括包含dsDNA表位的分子，優(yōu)選多核苷酸)對(duì)于來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的表觀(guān)平衡解離常數(shù)(Kd')，所述綴合物包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)DNA表位(優(yōu)選多核苷酸)，所述多核苷酸(如果它就是所用dsDNA表位的話(huà))優(yōu)選包含(雙鏈或ds)序列5，-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3，、基本上由該序列組成、或由該序列組成，其中選擇K。'值低于大約1.0邁glgG/ml的個(gè)體來(lái)接受治療；并(2)對(duì)個(gè)體施用綴合物，優(yōu)選施用足以提高K。'的量.在其它實(shí)施方案中，K。'低于大約下列任何數(shù)值0.8、0.7、0.6、0.5、0.4、0.3、0.2、0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.025。下文描述了測(cè)量K。'的方法.在其它實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了治療個(gè)體的SLE的方法，包括(1)在開(kāi)始治療之前或之時(shí)，評(píng)估綴合物中的dsDNA表位(優(yōu)選多核苷酸)對(duì)于來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的表觀(guān)平衡解離常數(shù)(Kd'),所述綴合物包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)表位(優(yōu)選多核苷酸)，所述多核苷酸(如果使用的話(huà))包含(ds)序列5，-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'、基本上由該序列組成、或由該序列組成；并(2)對(duì)個(gè)體施用足以提高K。'的量的綴合物，其中若K。'相對(duì)于開(kāi)始治療之前或之時(shí)的K。'升高了至少大約20。/。，則繼續(xù)治療，對(duì)于這些實(shí)施方案，在開(kāi)始治療之后測(cè)量的K。'(為了與開(kāi)始治療之前或之時(shí)的K。'進(jìn)行比較)是在開(kāi)始治療之后至少大約4周、優(yōu)選至少大約6周、更優(yōu)選至少大約10周、更優(yōu)選至少大約12周測(cè)量的.我們?cè)趯?duì)治療群治療時(shí)觀(guān)察到較大范圍的抗體親和力變化(圖5).因此，在其它實(shí)施方案中，若K。'升高了至少大約下列任何數(shù)值(與開(kāi)始治療之前或之時(shí)的K。，進(jìn)行比較)，則繼續(xù)治療40%、50%、75%、100%、200%、500%.下文描述了測(cè)量Kd'的方法。在有些實(shí)施方案中，以足以降低腎紅腫(狼瘡腎炎)的發(fā)病率或可能性的量施用綴合物。根據(jù)我們的觀(guān)察，足以實(shí)現(xiàn)這種降低的量對(duì)LJP394而言是大約100mg，每周給藥一次.最初K。'低于大約0.8且接受該量的綴合物的患者展示，因這種紊亂而住院的量降低了超過(guò)大約一半.對(duì)于個(gè)別患者，綴合物的有效量可能與個(gè)體的抗體親和力有關(guān)和/或是它的函數(shù)，而且親和力較高的患者能夠響應(yīng)較低的劑量。相反，若給予足夠高(更高)的劑量，抗體親和力較低的患者也可能響應(yīng)。因此，本發(fā)明提供了治療個(gè)體的狼瘡腎炎的方法，包括對(duì)個(gè)體施用包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)多核苷酸的綴合物，所述多核苷酸包含(ds)序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'、基本上由該序列組成、或由該序列組成，其中在開(kāi)始治療之前或之時(shí)，綴合物中的多核苷酸對(duì)于來(lái)自個(gè)體的抗體的表觀(guān)平衡解離常數(shù)(Kd')低于大約1.OmgIgG/ml，而且其中所述K。'值被用作選擇接受治療的個(gè)體的基礎(chǔ)。在其它實(shí)施方案中，K。'低于大約下列任何數(shù)值0.8、0.7、0.6、0.5、0.4、0.3、0.2、0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.025。下文描述了測(cè)量K。'的方法。在治療之前或之中或是通過(guò)測(cè)量K。，或是通過(guò)一些其它方法來(lái)表述的親和力的測(cè)量，強(qiáng)烈(如果不是決定性的話(huà))指示該參數(shù)是選擇接受治療的個(gè)體的基礎(chǔ).在有些實(shí)施方案中，以足以降低在不施用所述綴合物的情況中將施用的皮質(zhì)類(lèi)固醇和/或環(huán)磷酰胺免疫遏制劑療法劑量的量施用本文所述綴合物。這是有意義的，因?yàn)檫@種免疫療法是有毒的。因此，本發(fā)明提供了治療狼瘡腎炎的方法，其中以相比于使用皮質(zhì)類(lèi)固醇或環(huán)磷酰胺而不施用綴合物的情況足以降低施用于個(gè)體的皮質(zhì)類(lèi)固醇或環(huán)磷酰胺施用量的量施用本文所述綴合物(諸如LJP394)。在有些實(shí)施方案中，降低了個(gè)體的腎紅肺的發(fā)病率，并以足以實(shí)現(xiàn)這種降低的量施用綴合物。本發(fā)明還提供了治療SLE(優(yōu)選狼瘡腎炎)的方法，包括與皮質(zhì)類(lèi)固醇和/或環(huán)磷酰胺聯(lián)合施用(任何)本文所述綴合物.以足以降低抗體對(duì)于綴合物中表位的親和力的量施用綴合物。優(yōu)選的是，綴合物是LJP394。施用皮質(zhì)類(lèi)固醇和/或環(huán)磷跣胺的方法在本領(lǐng)域是知道的?？梢酝ㄟ^(guò)例如與本領(lǐng)域知道的通常隨時(shí)間給藥的已知/或確定平均劑量(在量和/或間隔方面)進(jìn)行比較來(lái)評(píng)估皮質(zhì)類(lèi)固醇和/或環(huán)磷酰胺療法劑量的降低(這降低了對(duì)這些藥物施用的依賴(lài)性并有效延遲這些藥物的施用)。篩選方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明還提供了基于抗體親和力來(lái)鑒定可能適合于接受和/或繼續(xù)接受本文所述治療的個(gè)體的方法，或者，在其它實(shí)施方案中，本發(fā)明還提供了基于抗體親和力來(lái)鑒定可能不適合于接受和/或繼續(xù)接受本文所述治療的個(gè)體的方法。因此，在有些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了鑒定可能適合于治療SLE的個(gè)體的方法，所述治療包括施用包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)dsDNA表位(優(yōu)選多核苷酸)的綴合物，所述多核苷酸(如果使用多核普酸的話(huà))包含(ds)序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'、基本上由該序列組成、或由該序列組成，所述方法包括在開(kāi)始治療之前或之時(shí)，測(cè)量綴合物中的多核香酸與來(lái)自個(gè)體的抗雙鏈DNA抗體的表觀(guān)平衡解離常數(shù)(K。')，其中通過(guò)K。'值(或其功能等同物)低于大約1.0mgIgG/ml鑒定出個(gè)體.在其它實(shí)施方案中，K。'低于大約下列任何數(shù)值0.8、0.7、0.6、0.5、0.4、0.3、0.2、0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.025.本發(fā)明由此提供了基于試圖用于治療的任意數(shù)目的dsDNA表位的篩選。一般而言，較高親和力"蹤界值"(例如由較低K。'值指示)在治療成功可能性方面將提供較高程度的確定性。在其它實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了鑒定可能不適合于治療SLE的個(gè)體的方法，所述治療包括施用包括(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)dsDNA表位(優(yōu)選多核苷酸)的綴合物，所述多核苷酸(如果使用的話(huà))包含(ds)序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3，、基本上由該序列組成、或由該序列組成，所述方法包括在開(kāi)始治療之前或之時(shí)，測(cè)量綴合物中的多核普酸與來(lái)自個(gè)體的抗雙鏈DNA抗體的表觀(guān)平衡解離常數(shù)(Kd')，其中通過(guò)K。'值高于大約1.0mgIgG/ml鑒定出個(gè)體，在其它實(shí)施方案中，通過(guò)K。'值高于大約0.8mgIgG/ml鑒定出個(gè)體.如果表述成范圍，上限可以是任何數(shù)目，包括但不限于大約2.0、大約3.0、大約5.0、大約IO、大約15、大約20本發(fā)明還提供了監(jiān)控個(gè)體的SLE治療的方法，所述治療包括施用包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)dsDNA表位(優(yōu)選多核苷酸)的綴合物，所述方法包括測(cè)量綴合物或dsDNA表位(諸如多核苷酸)與來(lái)自個(gè)體的抗雙鏈DNA抗體的親和力(例如表觀(guān)平衡解離常數(shù)(K。'))。對(duì)于這些方法，K。'變化(與最初Kd'相比)通常指示可以繼續(xù)治療(即治療將是有效的)。K。'的變化可以是至少大約本文所述任何變化(通常由至少大約20%至至少大約500%)，測(cè)量通常間隔至少2-6周，但并非必需如此?？梢允褂萌我鈨纱螠y(cè)量(無(wú)論是否連續(xù)的)間的變化.例如，若兩周后的測(cè)量顯示沒(méi)有變化但四周后的測(cè)量比較顯示有變化，則可以指示繼續(xù)治療.若K。'不發(fā)生變化或者發(fā)生指示親和力升高的變化，則也可以繼續(xù)治療，因?yàn)檫@種發(fā)展(包括沒(méi)有變化)可能是暫時(shí)的。或者，不需要測(cè)試或觀(guān)察親和力(諸如K。')變化.例如，可以測(cè)量親和力，并與來(lái)自普通群體的親和力(即平均親和力)進(jìn)行比較.因而，在針對(duì)監(jiān)控治療的方法的實(shí)施方案方面，對(duì)于將要實(shí)踐的方法不需要觀(guān)察到特定結(jié)果，盡管某些結(jié)果(或結(jié)果范圍)可能是期望的且可以^_用的.在有些實(shí)施方案中，根據(jù)親和力與群體相比的百分點(diǎn)分級(jí)來(lái)選擇治療的個(gè)體，例如，對(duì)于指定患者群存在一定的抗體親和力范圍，并且可以根據(jù)抗體親和力關(guān)于該群體的百分點(diǎn)分級(jí)來(lái)鑒定適合于治療的個(gè)體(或相反，很可能不適合治療的個(gè)體)。因此，在有些實(shí)施方案中，若個(gè)體的抗體親和力處于群體親和力范圍的大約前80%，則治療將包括該個(gè)體或鑒定該個(gè)體適合于接受治療(相反，若個(gè)體處于群體親和力范圍的大約后20%，則他們通常不適合于接受治療).在其它26實(shí)施方案中，若個(gè)體的抗體親和力范圍處于群體親和力范圍的大約前50%,則治療將包括該個(gè)體或鑒定該個(gè)體適合于接受治療(相反，若個(gè)體處于群體親和力范圍的大約后50%,則他們通常不適合于接受治療)。在有些實(shí)施方案中，該個(gè)體的抗體親和力處于大約下列任何百分比前30%、25%、20%、10%、5%。就測(cè)量的個(gè)體數(shù)目而言，群體可以是大約或至少下列任何數(shù)目10、15、20、25、30、50、60、75、100、125、150、175、200、225、250、300、400、500。優(yōu)選的是，測(cè)量足夠數(shù)目的個(gè)體以提供統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的群體，這可以通過(guò)本領(lǐng)域已知方法來(lái)確定。群體的上限可以是任何數(shù)目，包括上文所列。一般而言，若以足以引發(fā)應(yīng)答(就降低抗體親和力而言)的量和時(shí)間施用綴合物之后，個(gè)體的抗體親和力相對(duì)于施用綴合物之前的抗體親和力降低了至少大約任何20%,則該個(gè)體適合于接受(或繼續(xù)接受)本文所述治療。例如，抗體親和力降低20。/。反映為最初K。'0.4變成KD'0.5。在其它實(shí)施方案中，個(gè)體的抗體親和力降低了至少大約50%。在其它實(shí)施方案中，個(gè)體的抗體親和力降低了至少大約75%。根據(jù)我們?cè)诶钳徶委熤械挠^(guān)察，至少大約8周、優(yōu)選至少大約10周、更優(yōu)選至少大約12周應(yīng)當(dāng)是足以觀(guān)察到可測(cè)量應(yīng)答的時(shí)間.在這段時(shí)間里缺乏可測(cè)量變化指示，就減少癥狀而言，接受治療的個(gè)體不太可能由這種治療受益。一般而言，若相比于最初親和力(即在開(kāi)始治療之前或之時(shí)測(cè)量的親和力)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的變化(降低)，則指示響應(yīng)(并因而指示繼續(xù)治療)。統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的變化依賴(lài)所使用的具體測(cè)定法，而且該數(shù)值通常容易獲得。對(duì)于使用表面激元共振(surfaceplasmonresonance)的測(cè)定法，親和力降低至少大約15%、優(yōu)選至少大約20%、更優(yōu)選至少大約25%、更優(yōu)選至少大約40%、更優(yōu)選至少大約50%指示響應(yīng)，并且指示繼續(xù)治療。對(duì)于竟?fàn)幮訤arr測(cè)定法，通常采用相同的親和力降低。對(duì)于其它測(cè)定法，變化可以是至少大約上述任何百分比，還可以是至少大約下列任何百分比75%、100%、150%、200%、250%、300%、350%、400%、450%、500%。本發(fā)明還提供了答定可能是用于選擇接受本文所述治療的個(gè)體的合適^界值"的抗體親和力(由K。'和/或其等同物得到反映)的方法。由本文提供的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯然可以看出，可以通過(guò)比較最初的親和力與開(kāi)始治療之后(以足以引發(fā)應(yīng)答(如果有應(yīng)答的話(huà))的量和時(shí)間給予綴合物，由親和力的降低(如果有的話(huà))指示)的親和力來(lái)評(píng)估個(gè)體群。然后測(cè)定指示響應(yīng)(就降低親和力和/或減輕疾病而言)的最初親和力值，并用作選擇接受本文所述治療的個(gè)體的指示物。因此，本發(fā)明提供了鑒定可能指示治療對(duì)于由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)的適用性(或用途)的抗體親和力的方法，所述方法包括(1)由個(gè)體集合測(cè)量在由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)中涉及的抗體的親和力(優(yōu)選測(cè)量每個(gè)個(gè)體的親和力)，所述個(gè)體具有由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)，所述親和力是由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)中涉及的所述抗體與免疫原類(lèi)似物之間的親和力；(2)對(duì)個(gè)體集合施用包含該類(lèi)似物的分子；(3)使由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)程度與最初親和力相互關(guān)聯(lián).一般而言，親和力與癥狀減少(或一些其它合適臨床終點(diǎn))之間的正相關(guān)指示抗體親和力預(yù)示該治療的適宜性。相反，負(fù)相關(guān)指示具有該親和力(或更低)的個(gè)體可能不適合于治療。對(duì)于這些方法，包含類(lèi)似物的分子可以是本文所述任何平臺(tái)。在有些實(shí)施方案中，類(lèi)似物缺乏能夠在個(gè)體中激活T細(xì)胞的細(xì)胞表位。在有些實(shí)施方案中，關(guān)聯(lián)是指抗體親和力的變化程度與疾病程度之間的關(guān)聯(lián)，因此可鑒定在臨床上有意義的最初抗體親和力和/或抗體親和力變化?？贵w親和力的測(cè)量可以使用本領(lǐng)域用來(lái)評(píng)估DNA表位與抗體的結(jié)合程度的已知方法來(lái)測(cè)量抗體親和力。一般而言，這些方法包括竟?fàn)帨y(cè)定法和非竟?fàn)帨y(cè)定法。就多核香酸表位(它將用于將要施用的綴合物)而言，可以單獨(dú)使用多核苷酸或包含多核苷酸的綴合物來(lái)測(cè)量親和力，只要多核苷酸與包含多核苷酸的綴合物給出等同或至少可轉(zhuǎn)換的數(shù)值即可.在竟?fàn)帨y(cè)定法中，將不同濃度的抗體或表位與表位或抗體發(fā)生反應(yīng)，而結(jié)果可以表述成達(dá)到最大結(jié)合半數(shù)所需抗體量，通常稱(chēng)為ICso.另一種表述親和力的方便方式是表觀(guān)平衡解離常數(shù)或K。'，它反映抗體對(duì)于綴合物上抗體結(jié)合表位的效價(jià)加權(quán)平均親和力。通常由全血獲得抗體，并通過(guò)血漿、血清、或IgG級(jí)分進(jìn)行測(cè)量，還要測(cè)量該級(jí)分對(duì)于綴合物的親和力。用于獲得IgG級(jí)分的方法在本領(lǐng)域是知道的，而且本文有所描述。用于測(cè)量親和力的一種優(yōu)選方式是如實(shí)施例中所述通過(guò)表面激元共振測(cè)定法來(lái)測(cè)量K。'。用于測(cè)量親和力的另一種方式是通過(guò)動(dòng)力學(xué)(即非平衡)分析，它的方法在本領(lǐng)域是知道的。優(yōu)選的是，測(cè)量抗體由表位解離的速率(即解離速率)。治療形式為了本發(fā)明的目的，所用治療方法必需使用包含非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和可結(jié)合來(lái)自個(gè)體的抗dsDNA抗體的至少兩個(gè)(即兩個(gè)或多個(gè))dsDNA表位(優(yōu)選多核苷酸)的綴合物。優(yōu)選的是，多核苷酸是雙鏈DNA，優(yōu)選序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'。在有些實(shí)施方案中，多核苷酸包含該序列((GT)u)),或基本上由該序列組成。對(duì)于治療方法，以足以實(shí)現(xiàn)降低抗體親和力的量，優(yōu)選以足以實(shí)現(xiàn)減少與狼瘡(尤其是狼瘡腎炎)有關(guān)的一種或多種癥狀的量施用綴合物.對(duì)于LJP394，通常施用綴合物至少大約50mg、優(yōu)選至少大約100mg,—周一次，盡管如上所述劑量可以隨來(lái)自個(gè)體的抗體的親和力而變化.dsDNA表位用于本發(fā)明綴合物的雙鏈DNA(dsDNA)表位可以是可特異性結(jié)合dsDNA抗體的任何化學(xué)部分。具體而言，感興趣的表位包括那些可結(jié)合通常而非必需的是，所用dsDNA表位是多核脊酸，優(yōu)選DNA(包括DNA類(lèi)似物).29合適表位的范例包括但不限于那些可結(jié)合狼瘡抗DNA抗體的表位(參閱美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5，162，515、5,391,785、5,276,013、5,786,512、5,726,329、5,552,391、5,268,454、5,633,395、5,606,047).可以使用本領(lǐng)域知道的和本文描述的技術(shù)來(lái)鑒定和/或確認(rèn)具體表位用于結(jié)合本發(fā)明抗體的適用性.例如，為了由模擬用于SLE的dsDNA表位的小型藥物分子文庫(kù)選擇最佳表位，可以構(gòu)建一組平臺(tái)，將每種候選物各個(gè)展示在相似平臺(tái)分子上.然后測(cè)試組合物的功效。例如，對(duì)于體內(nèi)用途，使用具有非期望類(lèi)型的循環(huán)抗體的動(dòng)物模型，例如BXSB小鼠模型系統(tǒng)。如果需要，可以用適當(dāng)表位免疫動(dòng)物以引發(fā)抗體應(yīng)答.然后依照預(yù)期目的通過(guò)施用或通過(guò)離體用法將裝配在平臺(tái)上的待測(cè)候選物用于治療單個(gè)動(dòng)物。在治療之前和之后由動(dòng)物采血，并通過(guò)適用于特異抗體的標(biāo)準(zhǔn)免疫測(cè)定法測(cè)定血漿中的抗體水平.然后依照設(shè)計(jì)用于指示特異于測(cè)試中的表位的抗體親和力的抗體親和力測(cè)定法來(lái)評(píng)估候選物的功效。本文描述了適當(dāng)?shù)挠H和力測(cè)定法.可以使用包含目的抗體的抗血清(例如SLE抗血清)，通過(guò)實(shí)施例中描述的和本領(lǐng)域知道的測(cè)定法來(lái)篩選多核苷酸的結(jié)合活性。這些測(cè)定法的范例包括竟?fàn)幮杂H和力測(cè)定法，例如竟?fàn)幮訤arr測(cè)定法和/或竟?fàn)幮訣LISA測(cè)定法，和/或非竟?fàn)幮云胶庥H和力測(cè)定法，諸如本文描述的基于表面激元共振(例如使用BIAC0RE⑧)的測(cè)定法。例示性測(cè)定法是可以IC5。(導(dǎo)致最大抑制半數(shù)的多核苷酸濃度，單位是摩爾核苷酸)表述結(jié)合活性的竟?fàn)幮訤arr測(cè)定法.認(rèn)為，1"低于大約500nM、優(yōu)選低于50nM的多核苷酸雙鏈體具有顯著的結(jié)合活性，因此可用于生成本發(fā)明的綴合物.另一種適當(dāng)?shù)臏y(cè)定法是本文描述的測(cè)定效價(jià)加權(quán)親和力的非竟?fàn)幮云胶庥H和力測(cè)定法?？梢岳斫?，為了本發(fā)明的目的，在綴合物制備中可以使用超過(guò)一種類(lèi)型的dsDNA表位?；蛘?，可以使用一種類(lèi)型(即一種化學(xué)種類(lèi))的dsDNA表位。如使用多核苷酸(諸如dsDNA)，則長(zhǎng)度通常超過(guò)大約IO堿基對(duì)(bp),更優(yōu)選超過(guò)大約15bp，更優(yōu)選超過(guò)或等于大約20bp。通常而非必需的是，長(zhǎng)度低于大約lkb，優(yōu)選低于大約500bp，優(yōu)選低于大約100bp。效價(jià)平臺(tái)分子在本發(fā)明的綴合物中可以使用多種非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子(也稱(chēng)為"平臺(tái)")中的任何一種。許多在本領(lǐng)域已有描述，諸如聚合物，本文就不需要描述了。優(yōu)選的是，綴合物包含化學(xué)確定的效價(jià)平臺(tái)分子，它提供精確的效價(jià)(而非平均值)。因此，確定的效價(jià)平臺(tái)是具有確定的結(jié)構(gòu)，因而附著點(diǎn)的數(shù)目確定且效價(jià)確定的平臺(tái)。某些種類(lèi)的化學(xué)確定的效價(jià)平臺(tái)、制備它們的方法、包含它們的綴合物、和制備這些適用于本發(fā)明的綴合物的方法包括但不限于美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,162,515、5,391,785、5,276,013、5,786,512、5,726,329、5,268,454、5,552,391、5,606,047、和5，663,395中和在共同擁有的美國(guó)流水號(hào)60/111，641(美國(guó)流水號(hào)09/457,607和PCT申請(qǐng)?zhí)朠CT/US99/29339)和60/138，260(美國(guó)流水號(hào)09/590,592和PCT申請(qǐng)?zhí)朠CT/US00/15968)中所述(收入本文作為參考)。平臺(tái)可以是蛋白質(zhì)性質(zhì)的或非蛋白質(zhì)性質(zhì)的(即有機(jī)的)。蛋白質(zhì)性質(zhì)的平臺(tái)的范例包括但不限于清蛋白、y-球蛋白、免疫球蛋白(IgG)、和卯清蛋白.Borel等人，i"鵬"770丄126:159-跳1990;Dumas等人，Arc力.Ze邁"o.，287:123-128,1995;Borel等人，Arc力.We，J扁"o丄，107:264-267，1995;Borel等人，^37.〃f.5"cj'.，778:80-87，1996.可以由添加到平臺(tái)分子上的分支基團(tuán)的數(shù)目預(yù)先確定本發(fā)明的化學(xué)確定的效價(jià)平臺(tái)分子的效價(jià)。合適的分支基團(tuán)通常衍生自二氨基酸、三胺、和氨基二酸.優(yōu)選的效價(jià)平臺(tái)分子在生物學(xué)上是穩(wěn)定的，即它們通常展示幾小時(shí)至幾天至幾月的體內(nèi)排泄半壽期以賦予治療功效，而且優(yōu)選組成確定的合成單鏈組成。它們通常具有大約200至大約200，000、優(yōu)選大約200至大約50,000(或更少，諸如30，00Q)的分子量范閨。本發(fā)明的效價(jià)平臺(tái)分子的范例是聚合物(或包含聚合物)諸如聚乙二醇(PEG)、聚D-賴(lài)氨酸、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷胡、D-谷氨酸和D-賴(lài)氨酸(比率3:2)。優(yōu)選聚合物基于分子量大約200至大約8,000的聚乙二醇(PEG)。用于本發(fā)明綴合物的其它合適平臺(tái)分子是清蛋白和IgG.適用于本發(fā)明的優(yōu)選效價(jià)平臺(tái)分子是共有的美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5，552，391(收入本文作為參考)中公開(kāi)的化學(xué)確定的、非聚合效價(jià)平臺(tái)分子。適用于本發(fā)明的特別優(yōu)選的均一的化學(xué)確定效價(jià)平臺(tái)分子是衍生后的2,2，-亞乙二氧基二乙胺(EDDA)和三乙二醇(TEG)。下文描述了用于LJP394的AHAB-TEG平臺(tái)。用于dsDNA表位的優(yōu)選平臺(tái)是四溴乙酰化合物，和其它四價(jià)的和八價(jià)的效價(jià)平臺(tái)分子，諸如Jones等人，/#eoT.C力e邁.，38:2138-2144，1995;和上文提供的美國(guó)專(zhuān)利參考文獻(xiàn)中所述。其它合適效價(jià)平臺(tái)分子包括但不限于四氨基苯、七氨基-P-環(huán)式糊精、四氨基季戊四醇、1,4,8,11-四氮雜環(huán)十四烷(Cyclam)、和1，4，7，10-四氨雜環(huán)十二烷(Cycl.en)。一般而言，這些平^是通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)合成技術(shù)來(lái)生成的。PEG必需是衍生后的并制成多價(jià)的，這是使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)實(shí)現(xiàn)的。適用于綴合物合成的有些物質(zhì)，諸如PEG、清蛋白、和IgG可以由商業(yè)途徑獲得.為了本發(fā)明的目的，效價(jià)平臺(tái)分子的最小效價(jià)至少是2，優(yōu)選至少是4，優(yōu)選至少是6，更優(yōu)選至少是8，優(yōu)選至少是IO，優(yōu)選至少是12。作為上限，效價(jià)通常低于128，優(yōu)選低于64，優(yōu)選低于35，優(yōu)選低于30，優(yōu)選低于25，優(yōu)選低于24,優(yōu)選低于20，當(dāng)然上限也可以超過(guò)128。對(duì)于綴合物的效價(jià)范圍，下限可以是下列任意數(shù)目2、4、6、8、10、12、16，而上限可以是下列任意數(shù)目128、64、35、30、25、24、20.在優(yōu)選實(shí)施方案中，效價(jià)平臺(tái)分子包含氨基甲酸酯鍵，即-0-C(=0)-N<。這些平臺(tái)被描述于題目為《ValencyPlatformMolecularComprisingCarbamateLinkages》(包含氨基甲酸酯鍵的效價(jià)平臺(tái)分子)的共有專(zhuān)利申請(qǐng)美國(guó)流水號(hào)60/111，641(美國(guó)流水號(hào)09/457,607和PCT申請(qǐng)?zhí)朠CT/US99/29339)(收入本文作為參考).在其它實(shí)施方案中，可以使用在綴合后提供平均效價(jià)的效價(jià)平臺(tái)(即這些平臺(tái)就效價(jià)而言在化學(xué)上不是精確確定的)。這些平臺(tái)的范例是聚合物諸如線(xiàn)性PEG、分支PEG、星形PEG、聚氨基酸、聚賴(lài)氨酸、蛋白質(zhì)、氨基功能化的可溶性聚合物.dsDNA表位與效價(jià)平臺(tái)分子的綴合可以以任意多種方法實(shí)現(xiàn)生物學(xué)或合成分子與化學(xué)確定的平臺(tái)分子的綴合，通常包括一種或多種交聯(lián)劑和生物學(xué)或合成分子和效價(jià)平臺(tái)分子上的功能基團(tuán)?？捎糜诰Y合的標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)方法的范例包括但不限于l)硫醇取代；2)硫醇Michael加成；3)氨基烷化；4)二硫鍵形成。與效價(jià)平臺(tái)分子偶聯(lián)的合成多核苷酸雙鏈體包含至少大約20bp，優(yōu)選20-50bp。本文所述多核苷酸是脫氧核糖核普酸，除非另有說(shuō)明，而且是5'至3，取向。優(yōu)選的雙鏈體在長(zhǎng)度上基本均一；即群體中的長(zhǎng)度變化通常不超過(guò)平均雙鏈體長(zhǎng)度(單位堿基對(duì))的大約±20%,優(yōu)選±10%。同樣優(yōu)選的是，它們?cè)诤塑账峤M成上基本均一；即雙鏈體之間的堿基組成和序列變化不超過(guò)大約10%。更優(yōu)選的是，雙鏈體之間的核苷酸組成完全均一。根據(jù)圓二色性(CD)光譜的解釋?zhuān)捎糜诒景l(fā)明的雙鏈體采取B-DNA型螺旋結(jié)構(gòu)。可以理解，我們并不想將本發(fā)明限于這種看法，根據(jù)更多的結(jié)論性分析，雙鏈體可以采取Z-DNA和/或A-DNA型螺旋結(jié)構(gòu)。可以由天然DNA合成這些多核苷酸雙鏈體，或者通過(guò)化學(xué)或重組技術(shù)進(jìn)行合成?？梢韵?如酶促、化學(xué)、和/或機(jī)械剪切)并分離(如通過(guò)瓊脂糖凝膠或SephadexTM柱)長(zhǎng)度較長(zhǎng)的天然或重組生產(chǎn)的dsDNA,以獲得期望長(zhǎng)度的多核苷酸?；蛘?，可以使用商品化DNA合成儀容易的制備長(zhǎng)度可長(zhǎng)達(dá)大約70個(gè)堿基的互補(bǔ)單鏈多核苷酸鏈對(duì)，然后通過(guò)常規(guī)流程退火而形成雙鏈體.可以通過(guò)化學(xué)生成的較短鏈的酶促延伸(5，-磷酸化及隨后的連接)來(lái)獲得較長(zhǎng)的合成dsDNA。還可以通過(guò)分子克隆來(lái)獲得多核苷酸。例如，如上合成期望長(zhǎng)度和序列的多核苷酸。這些多核苷酸可能設(shè)計(jì)具有用于連接特定限制性位點(diǎn)的適當(dāng)末端?？梢詫⑦@些寡聚物的多個(gè)重復(fù)前后連接，以提供多拷貝復(fù)制。將產(chǎn)生的構(gòu)建物插入標(biāo)準(zhǔn)克隆載體，并通過(guò)轉(zhuǎn)化將載體導(dǎo)入合適微生物/細(xì)胞。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)記鑒定轉(zhuǎn)化體，并在有利于DNA復(fù)制的條件下進(jìn)行培養(yǎng)。通過(guò)限制酶處理和常規(guī)大小分離(如瓊脂糖凝膠和S印hadexT"柱)，將多核香酸與細(xì)胞/微生物的其它DNA分開(kāi).或者，可以通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)來(lái)復(fù)制多核苷酸。Saiki等人，5"cj'e扁，230:1350-1354，1985;Saiki等人，Scj'e膽，239:487-491，1988;Sambrook等人，第14.1-14.35頁(yè)，1989。以保留抗體結(jié)合活性的方式，將多核苷酸綴合到化學(xué)確定的效價(jià)平臺(tái)分子上.這是通過(guò)例如經(jīng)多核苷酸鏈上預(yù)先確定的位點(diǎn)將多核苷酸綴合到效價(jià)平臺(tái)分子上，使得多核苷酸形成至少大約20bp(由鏈的綴合位點(diǎn)至游離(未附著)末端測(cè)得)的懸垂鏈而進(jìn)行的。在一個(gè)實(shí)施方案中，多核苷酸雙鏈體在長(zhǎng)度上基本均一，而且雙鏈體的一條鏈直接或經(jīng)接頭分子綴合效價(jià)平臺(tái)分子?？梢栽诰Y合效價(jià)平臺(tái)分子之前，將合成多核苷酸偶聯(lián)接頭分子。通常，雙鏈體中含接頭的鏈在它的一個(gè)末端處或附近(即大約5bp以?xún)?nèi))進(jìn)行偶聯(lián)，使得每條鏈形成至少大約20bp(由鏈的附著位點(diǎn)至接頭序列分子測(cè)得)的懸垂鏈。然后將第二條鏈與第一條鏈退火以形成雙鏈體。因而，本發(fā)明的綴合物通?？梢杂孟旅娴耐ㄊ絹?lái)描述[(PN)n-接頭L-效價(jià)平臺(tái)分子其中PN-含<h"個(gè)核苷酸的雙鏈多核苷酸，其中n-至少大約20，且m-2-8。在一個(gè)實(shí)施方案中，綴合物中的多核苷酸在它們的一個(gè)末端處或附近偶聯(lián)接頭分子。然后將接頭分子偶聯(lián)化學(xué)確定的效價(jià)平臺(tái)分子.如美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5，552，391(收入本文作為參考)中所述，本發(fā)明的合適接頭分子的范例是6碳硫醇諸如HAD(硫代6碳鏈磷酸酯)和HADpS(硫代6碳鏈硫代磷酸酯)。本發(fā)明的化學(xué)確定的效價(jià)平臺(tái)分子是例如通過(guò)34將氨基修飾的PEG與3，5-二-(碘乙酰胺)苯甲酰氯(下文稱(chēng)為"IA-DABA")、3-羧基丙酰胺-N，N-二-[(6'-N'-苯甲氧甲酰基氨基己基)乙酰胺]4"-硝基苯酯(下文稱(chēng)為BAHA")、3-羧基丙酰胺-N，N-二-[(8，-N'-苯甲氧甲?；被?3'，6'-二噁辛基)乙酰胺]4"-硝基苯酯(下文稱(chēng)為BAHAox")發(fā)生反應(yīng)；或者將PEG-二-氯甲酸醋與N,N-二(2-[6'-N'-苯甲氧甲酰基氨基己酰胺]乙基)胺(下文稱(chēng)為AHAB")發(fā)生反應(yīng)而形成的。例如，可以如下將確定的雙鏈多核苷酸(PN)綴合效價(jià)平臺(tái)分子首先提供由大約20個(gè)交替胞嘧啶(C)與腺嘌呤(A)核苷酸組成的單鏈。然后可以通過(guò)接頭諸如HAD將四個(gè)CA鏈共價(jià)綴合到衍生后的平臺(tái)分子諸如三甘醇上的四個(gè)反應(yīng)性位點(diǎn)。合成包含基團(tuán)諸如溴乙?；幕鶊F(tuán)的效價(jià)平臺(tái)分子。在綴合過(guò)程中，離去基團(tuán)被硫取代.然后將由大約20個(gè)交替胸腺嘧啶(C)與鳥(niǎo)嘌呤(A)核苷酸組成的第二條單鏈核苷酸與CA鏈退火以形成通式為[(PN)2。-接頭]4-效價(jià)平臺(tái)分子的雙鏈PN綴合物?；蛘?，在另一個(gè)實(shí)施方案中，可以在多核苷酸的3，末端經(jīng)多核苷酸一條鏈上的氧化后的3'末端核糖與衍生后的平臺(tái)分子上的游離氨基縮合形成的嗎啉橋接將多核苷酸偶聯(lián)衍生后的效價(jià)平臺(tái)分子，然后將加合物轉(zhuǎn)入還原條件以形成嗎啉鍵，如美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,553，391中所述.這些偶聯(lián)要求衍生后的平臺(tái)分子所具有的氨基數(shù)目至少與平臺(tái)分子將要結(jié)合的多核苷酸雙鏈體的數(shù)目相等。這種綴合物的合成是通過(guò)兩個(gè)步驟完成的.第一步是通過(guò)縮合/還原反應(yīng)將多核苷酸雙鏈體的一條鏈偶聯(lián)衍生后的平臺(tái)分子。通過(guò)高碘酸處理，將3'末端核糖基團(tuán)轉(zhuǎn)變成氧化后的核糖基團(tuán)，從而在單鏈多核苷酸上形成氧化后的3，末端核糖。然后將單鏈多核普酸緩緩加到衍生后的平臺(tái)分子水溶液(pH大約6.0-8.0，2-8X:)中。在所有綴合策略中，多核苷酸與平臺(tái)分子的摩爾比范圍常常是大約2:1至大約30;1，經(jīng)常是大約2:l至大約8:1，優(yōu)選大約4:1至6:1。在這點(diǎn)上，優(yōu)選的是，不像分子量大于200，000的大分子(特別是具有重復(fù)單位的大分子)那樣具有過(guò)大分子量的綴合物可能是不依賴(lài)T的免疫原。參閱Dintzis等人，J.Immunol.,131:2196，1983;和Dintzis等人，J.Immunol.,143:1239，1989。在縮合反應(yīng)之中或之后(反應(yīng)時(shí)間通常是24-48小時(shí))，加入強(qiáng)還原劑諸如氰基硼氫化鈉以形成嗎啉代基團(tuán).然后向綴合物中加入雙鏈體的互補(bǔ)鏈，將混合物加熱并緩慢冷卻以引起鏈間退火.可以通過(guò)凝膠滲透層析法來(lái)純化綴合物。核糖策略的另一方法是在多核苷酸上形成醛功能性并使用這些功能性通過(guò)其上的反應(yīng)性功能基團(tuán)將多核苷酸偶聯(lián)平臺(tái)分子.可以利用基于如下事實(shí)的優(yōu)勢(shì)附著于多核苷酸3'或5'末端的gem鄰近二醇可以被高碘酸鈉氧化而生成醛，該醛能夠與平臺(tái)分子的功能性氨基縮合.當(dāng)二醇位于環(huán)形系統(tǒng)(如五元環(huán))中時(shí)，產(chǎn)生的縮合產(chǎn)物是含氮雜環(huán)(如六元嗎啉代或哌啶子環(huán))。亞氨基縮合產(chǎn)物通過(guò)用合適還原劑(如硼氫化鈉或氰基硼氫化鈉)還原得到穩(wěn)定。當(dāng)二醇不是環(huán)形時(shí)，產(chǎn)生的氧化產(chǎn)物只包含一個(gè)醛基，而且縮合產(chǎn)物是仲胺.另一種流程包括通過(guò)適當(dāng)?shù)暮塑账峄瘜W(xué)法(如亞磷酰胺化學(xué)法)將烷基氨基或烷基巰基部分導(dǎo)入多核苷酸的3'或5，末端。然后可以使用親核基團(tuán)與大大過(guò)量的同型雙功能交聯(lián)劑在烷基氨基衍生物的情況中，如dimethylsuberimidate)或過(guò)量的異型雙功能交聯(lián)劑(在烷基巰基衍生物的情況中，如間-馬來(lái)酰亞胺苯甲酰-N-羥基琥珀酰亞胺酯(MBS)或(4-碘乙?；?氨基笨甲酸琥珀酰亞胺酯(SIAB))反應(yīng)，一旦除去過(guò)量的交聯(lián)劑，多核苷酸衍生物與平臺(tái)分子上的氨基發(fā)生反應(yīng)?；蛘撸u基可以與平臺(tái)上的親電子中心(諸如馬來(lái)酰亞胺或a-卣乙?；蚱渌m當(dāng)Michael受體)發(fā)生反應(yīng).還有一種策略采用修飾后的核苷.可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)DNA合成化學(xué)法在多核苷酸中的期望位置(優(yōu)選5，或3'末端)摻入合適脫氧核苷衍生物。應(yīng)?；蛘?，可以通過(guò)采用合適核苷衍生物作為待附著鏈的3，末端來(lái)防止上文所述二醛化學(xué)法中看到的副反應(yīng)(諸如胺催化的P-消除).它的范例是核糖的5，亞甲基延伸，即5'(2-羥乙基)基團(tuán)取代5，-羥甲基基團(tuán).另一種方式是使用膦酸醋鍵或亞磷酸醋鍵作為待附著平臺(tái)分子的多核苷酸3'末端二核苷酸。Jones等人(1995)和美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5，552，391(收入本文作為參考)描述了綴合物L(fēng)JP394(—種四價(jià)綴合物)的合成.LJP394包含四個(gè)由交替C和A核苦酸即(CA)u)組成的20聚體寡核普酸，它們附著在平臺(tái)上，并與由交替G和T核苷酸即(GT)H)組成的互補(bǔ)20聚體寡核苷酸退火。下文顯示了在LJP394中使用的效價(jià)平臺(tái)分子，綴合物的施用表位呈遞綴合物的多種配方可用于施用。在有些實(shí)施方案中，可以單純施用表位呈遞綴合物。在有些實(shí)施方案中，組合物包含綴合物和制藥學(xué)可接受賦形劑，而且可以是多種配方。制藥學(xué)可接受賦形劑在本領(lǐng)域是知道的，而且是便于施用制藥學(xué)有效物質(zhì)的相對(duì)惰性的物質(zhì).例如，賦形劑能夠給予形狀或堅(jiān)固，或者擔(dān)當(dāng)稀釋劑.合適的賦形劑包括但不限于穩(wěn)定劑、潤(rùn)濕和乳化劑、用于改變滲透壓的鹽類(lèi)、包囊劑、緩沖液、和皮膚'滲透增強(qiáng)劑.《7e辺j'7^to/7，s尸力ar辺aceu"caJ5cj'e/7ces》(雷明頓藥物矛+學(xué))第19版(MackPublishing,1995)列出了用于胃腸外和非胃腸外藥物投遞的賦形劑以及配方。一般而言，這些組合物配制用于通過(guò)注射(如腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、皮下、肌肉內(nèi)等)進(jìn)行的施用.因此，這些組合物優(yōu)選聯(lián)合制藥學(xué)可接受載體，諸如鹽類(lèi)、Ringer氏液、右旋糖溶液、等等.一般而言，出于實(shí)踐、經(jīng)驗(yàn)的考慮(諸如溶解度和滲透壓)，綴合物通常占到配方質(zhì)量的大約O.01%-10%。具體的給藥方案(即劑量、給藥時(shí)間、和重復(fù)頻率)將取決于具體的個(gè)體和個(gè)體的病史.一般而言，劑量是NHCO(CH2)5NHCOCH2S(CH2)60"P—0~PN■NHCO(CH2)5NHCOCH2S(CH2)60—P—0~~PNOPN=(CA)10.(TG)1037大約lpg-大約100mg綴合物/kg體重的劑量，優(yōu)選大約100Mg-大約10mg綴合物/kg體重的劑量，優(yōu)選大約150)ig-大約5mg綴合物/kg體重的劑量，優(yōu)選大約250yg-大約lmg綴合物/kg體重。出于經(jīng)驗(yàn)的考慮(諸如半壽期)通常將有助于確定劑量。本文還描述了其它劑量，諸如大約50-100mg/周。若作為耐受原使用，可以例如每天施用綴合物，以實(shí)現(xiàn)抗體清除(除去成份)，隨后是頻率較低的施用，諸如每周兩次，每周一次，或甚至更低的頻率。可以隨治療進(jìn)程并基于維持耐受(即降低或缺乏針對(duì)dsDNA的免疫應(yīng)答)來(lái)確定并調(diào)整施用頻率.根據(jù)個(gè)體或疾病狀況，其它適當(dāng)給藥方案可以頻繁得像每日持續(xù)輸液、或每周3劑、或每周1劑、或每2-4周1劑、或每月1劑、或更低頻率的方案.為了實(shí)現(xiàn)和/或維持體液無(wú)變應(yīng)性的狀態(tài)，可能需要重復(fù)施用(通常根據(jù)B細(xì)胞轉(zhuǎn)換速率來(lái)計(jì)時(shí))。這些重復(fù)施用通常包括每30-60天進(jìn)行大約lMg-大約10mg/kg體重或更高的治療，或者更短時(shí)間(若檢測(cè)到抗dsDNA抗體水平升高)?；蛘?，組合物的緩釋配方可能是適當(dāng)?shù)?本領(lǐng)域知道用于實(shí)現(xiàn)緩釋的多種配方和裝置。其它配方包括適用于口服施用的配方，若綴合物能夠穿過(guò)粘膜，則這些配方是合適的.相似的，氣霧劑配方可能是合適的.其它配方包括本領(lǐng)域知道的合適投遞形式，包括但不限于載體諸如脂質(zhì)體.Mahato等人，Pharm.Res.，14:853-859，1997.脂質(zhì)體制劑包括但不限于細(xì)胞轉(zhuǎn)染劑、多層小泡、和單層小泡。在有些實(shí)施方案中，組合物中可能存在超過(guò)一種綴合物.這些組合物可以包含至少一種、至少兩種、至少三種、至少四種、至少五種不同的綴合物。這些鵁尾酒"(正如它們?cè)诒绢I(lǐng)域的常用稱(chēng)謂)，可能在治療廣泛的個(gè)體群中特別有用。它們還可能比只使用一種(或少于雞尾酒中所含種類(lèi))綴合物更有效。組合物可以單獨(dú)施用，或者聯(lián)合有助于增強(qiáng)和/或補(bǔ)充本發(fā)明綴合物功效的其它形式試劑，包括但不限于抗輔助T細(xì)胞治療。這些治療通常采用遏制T細(xì)胞的試劑，諸如類(lèi)固醇或環(huán)孢菌素.另一種試劑是皮質(zhì)類(lèi)固醇和/或環(huán)磷酰胺免疫遏制療法.功效指示物的檢測(cè)和測(cè)量通?；诳闺p鏈DNA抗體的測(cè)量和/或與SLE有關(guān)的臨床癥狀，這在本領(lǐng)域是知道的。狼瘡腎炎(腎小球腎炎或腎發(fā)炎)的特征是進(jìn)行性喪失腎功能，在腎衰竭時(shí)達(dá)到頂點(diǎn)。狼瘡腎炎的特征是血尿、尿量減小、血液尿素氮水平升高、血清肌酸酐水平升高、高血壓、和蛋白尿。因此，可以監(jiān)控這些參數(shù)作為監(jiān)控腎退化的手段。本發(fā)明的組合物包含可結(jié)合抗dsDNA抗體的表位的試劑盒本發(fā)明還提供了用于測(cè)量本文所述方法中使用的抗體親和力的試劑盒，特別是可結(jié)合抗dsDNA抗體的表位的親和力，因此，本發(fā)明包括包含一種或多種dsDNA表位的試劑盒，優(yōu)選包含可結(jié)合來(lái)自個(gè)體的抗dsDNA抗體的表位的多核普酸(優(yōu)選雙鏈(ds)DNA分子)(含表位的多核苷酸可結(jié)合來(lái)自個(gè)體的抗dsDNA抗體)。因此，試劑盒包括包含dsDNA表位(諸如本文所述任何表位)的分子或部分。在一個(gè)實(shí)施方案中，試劑盒包含具有(包含)序列5，-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'(或者基本上由該序列組成或由該序列組成)的多核苷酸。包含多核苷酸或任何其它合適dsDNA表位的試劑盒還可以包含使用該多核苷酸來(lái)檢測(cè)個(gè)體的抗dsDNA抗體對(duì)于多核香酸(或dsDNA表位)的親和力的說(shuō)明書(shū)。在其它實(shí)施方案中，試劑盒包含本文所述綴合物，和使用綴合物來(lái)檢測(cè)個(gè)體的抗dsDNA抗體對(duì)于綴合物的親和力的說(shuō)明書(shū)。優(yōu)選的是，綴合物是LJP394.試劑盒可用于例如測(cè)試個(gè)體以確定個(gè)體是否適合于使用綴合物治療，以及用于監(jiān)控目的。試劑盒還可用于測(cè)定親和力臨界值(即與臨床效果有關(guān)的親和力數(shù)值)。本發(fā)明的試劑盒處于合適包裝中，而且可以任選提供額外成份，諸如用于測(cè)定對(duì)于抗dsDNA抗體的親和力或結(jié)合的緩沖液和說(shuō)明書(shū)，諸如捕獲劑、顯影劑、標(biāo)記物、反應(yīng)表面、檢測(cè)手段、對(duì)照樣品、和說(shuō)明性信息.說(shuō)明書(shū)可能是關(guān)于抗體親和力的測(cè)量，包括但不限于本文所述測(cè)定法.因此，在有些實(shí)施方案中，說(shuō)明書(shū)是關(guān)于使用表面激元共振來(lái)測(cè)定親和力，在其它實(shí)施方案中，說(shuō)明書(shū)是關(guān)于使用直接結(jié)合測(cè)定法和/或Farr測(cè)定法來(lái)測(cè)定親和力，在有些實(shí)施方案中，提供上文所述試劑，從而能夠進(jìn)行多種測(cè)量，諸如能夠隨時(shí)間測(cè)量相同個(gè)體或者測(cè)量多個(gè)個(gè)體.一般而言，試劑盒中的dsDM表位，優(yōu)選試劑盒中的多核苷酸(或是游離形式，或是附著于綴合物或其它基質(zhì))包含將要或正在用于治療的表位，或由該表位組成；或者已經(jīng)證明對(duì)于個(gè)體的抗dsDNA抗體具有與將要用于治療的表位大致相同的親和力。在其它實(shí)施方案中，試劑盒所包含的dsDNA表位對(duì)于抗dsDNA抗體的親和力模擬將要用于治療的dsDNA表位(諸如5，-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3')的親和力或者與之相關(guān).在評(píng)估本文所述方法的抗體親和力時(shí)，這些dsDNA表位可用作將要用于治療的dsDNA表位(諸如LJP394)的代理"。可以采用(并在試劑盒中提供)用于檢測(cè)抗體結(jié)合的任何適當(dāng)手段，諸如經(jīng)標(biāo)記抗人抗體(當(dāng)測(cè)試是否存在人抗dsDNA抗體時(shí))，其中標(biāo)記物可以是酶、熒光團(tuán)、化學(xué)發(fā)光材料、放射性同位素、或輔酶，一般而言，所用標(biāo)記物將是酶。因此，在有些實(shí)施方案中，本發(fā)明的試劑盒還包含標(biāo)記物。在有些實(shí)施方案中，試劑盒中的多核苷酸綴合了生物素。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，dsDNA表位(諸如多核苷酸，例如雙鏈DNA)是生物素化的.還可以使用商品化試劑來(lái)實(shí)現(xiàn)生物素化(即Pharmacia,Uppsala,瑞典)。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，生物素化的dsDNA表位包含5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'、基本上由該序列組成、或由該序列纟且成。在其它實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了包含(a)本文所述綴合物，諸如LJP394;和(b)綴合物中所用多核普酸(或其它dsDNA表位)或者包含綴合物中所用多核苷酸的多核苷酸(或包含綴合物中所用表位的分子或部分)的試劑盒.在用于親和力測(cè)量時(shí)，綴合物和/或多核苷酸可以生物素化。在有些實(shí)施方案中，試劑盒包含對(duì)個(gè)體施用綴合物的說(shuō)明書(shū)，以及使用綴合物和/或多核苷酸(包括包含綴合物中所用多核苷酸的多核苷酸)來(lái)檢測(cè)個(gè)體中結(jié)合本文所述dsDNA的抗體的親和力的說(shuō)明書(shū).如本文討論的，試劑盒中使用了將要用于治療的綴合物與包含dsDNA表位的分子的聯(lián)合，所述dsDNA表位的結(jié)合活性或親和力模擬綴合物的表位或與之相關(guān)。在其它實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了包含類(lèi)似物的試劑盒，所述類(lèi)似物可結(jié)合由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)中所涉及的抗體，在有些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了包括含表位的分子的試劑盒，所述表位可結(jié)合由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)中涉及的抗體。同樣可用于進(jìn)行親和力測(cè)定的這些試劑盒處于合適包裝中，而且任選包括使用試劑盒中的類(lèi)似物或分子來(lái)測(cè)定由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)中涉及的抗體對(duì)于該類(lèi)似物或含表位分子的親和力的說(shuō)明書(shū)。W096/40197和W097/46251中公開(kāi)了可結(jié)合抗磷脂綜合癥(APS)和狼瘡中涉及的抗體的肽類(lèi)似物。共同擁有的美國(guó)流水號(hào)09/328,199(PCT/US99/13194)中公開(kāi)了可結(jié)合由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)中涉及的對(duì)P2GPI結(jié)構(gòu)域1具有特異性的抗體的多肽。其它類(lèi)似物和含表位分子在本領(lǐng)域是知道的.在另一個(gè)實(shí)施方案中，試劑盒包含D-吡喃半乳糖苷或展示可特異結(jié)合抗aGal(半乳糖al,3半乳糖基)抗體的分子和用于測(cè)定抗體親和力的說(shuō)明書(shū)和/或試劑.實(shí)施例為了例示而非限制本發(fā)明而提供下列實(shí)施例.實(shí)施例l:LJP394對(duì)抗dsDNA抗體與DNA的結(jié)合的抑制在使用Farr測(cè)定法確定了患者中抗dsDNA抗體的存在之后，使用竟?fàn)幮訤arr測(cè)定法來(lái)測(cè)量在來(lái)自SLE患者的血清中發(fā)現(xiàn)的抗dsDNA抗體對(duì)于LJP394的親和力.另外，使用該測(cè)定法來(lái)測(cè)量在來(lái)自三種SLE動(dòng)物模型(BXSB小鼠、NZBxNZWFl小鼠、和MRL/lpr小鼠)的血清中發(fā)現(xiàn)的抗dsDNA抗體的親和力.Farr駛J定法^f吏用"5l—才示i己的重纟且dsDNA(DiagnosticProductsCorporation,洛杉風(fēng)，加利福尼亞)，它結(jié)合在來(lái)自SLE患者或SLE小鼠模型的血清中發(fā)現(xiàn)的抗dsDNA抗體.由通過(guò)志愿供體計(jì)劃匯集的SLE供體的血清樣品獲得抗dsDNA抗體。采集血液樣品，收獲血清，分裝，標(biāo)記，并凍存于-70t:直至使用.在這種測(cè)定法中，向75nlTris緩沖液(50mMTrispH7.5、150mMNaCl、10%正常兔血清)中加入25p1患者血清，然后加入100p1^I-標(biāo)記的重組dsDNA，混勻，并于37t:保溫l小時(shí).在同一時(shí)間制備包含已知量的抗dsDNA抗體的相似樣品(校準(zhǔn)物)并保溫。向毎管中加入500m170%飽和硫酸銨，混勻，然后以800xg離心15分鐘以沉淀溶液中的抗體。倒掉上清液，并通過(guò)在y計(jì)數(shù)器中進(jìn)行放射性計(jì)數(shù)來(lái)測(cè)定沉淀產(chǎn)物中放射性的量。沉淀中的放射性的量與結(jié)合^I-標(biāo)記的重組dsDNA的抗dsDNA抗體的量成比例，含已知量的抗dsDNA抗體的校準(zhǔn)物用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，由此能夠計(jì)算由抗dsDNA抗體結(jié)合的dsDNA的量.使用上文所述Farr測(cè)定法對(duì)來(lái)自58名患者的血清樣品測(cè)定了針對(duì)dsDNA的抗體的存在情況.這些樣品中的42份具有足夠抗體水平(>20%結(jié)合)，可以用于LJP394抑制測(cè)定法。通過(guò)竟?fàn)幮訤arr測(cè)定法，對(duì)LJP394測(cè)試它抑制抗dsDNA抗體結(jié)合^I-標(biāo)記的重組dsDNA的能力，抑制測(cè)定法中還使用了小牛胸腺DNA(ctDNA)作為另一種dsDNA來(lái)源。小牛胸腺dsDNA是如下制備的將小牛胸腺DNA溶于核酸酶S1緩沖液(0.2MNaCl、50mM醋酸鈉pH4.5、ImMZnSO"0.5%甘油)和IOO,OOOUSl核酸酶，并于37匸保溫1小時(shí).通過(guò)加入等體積的酚-氯仿、混勻、離心、和回收水層，由該混合液抽提dsDNA。然后通過(guò)加入2倍體積的EtOH、混勻、和離心，沉淀dsDNA。回收沉淀，真空干燥，并溶于水至大約10mg/ml。通過(guò)分光光度法測(cè)定ctDNA制劑的終濃度，260nm的消光系數(shù)采用33mg/10D單位.在抑制測(cè)定法中測(cè)試產(chǎn)生>20%結(jié)合的每份血清樣品。簡(jiǎn)而言之，向75nl含多種濃度抑制物(小牛胸腺dsDNA或LJP394)的Tris緩沖液(50mMTrispH7.0、150mMNaCl、10%正常兔血清)中加入25yl患者血清，然后加入100p11251-標(biāo)記的重組dsDNA，混勻，并于37匸保溫1小時(shí)。向每管中加入500p170%飽和硫酸銨，混勻，然后以800xg離心15分鐘.倒掉上清液，并通過(guò)在Y計(jì)數(shù)器中進(jìn)行放射性計(jì)數(shù)來(lái)測(cè)定沉淀產(chǎn)物中放射性的量.通過(guò)下面的公式計(jì)算抑制程度{[(有患者血清、無(wú)抑制物下的cpm-無(wú)患者血清、無(wú)抑制物下的cpm)-(有患者血清、有抑制物下的cpm-無(wú)患者血清、無(wú)抑制物下的cpm)]+(有患者血清、無(wú)抑制物下的cpm-無(wú)患者血清、無(wú)抑制物下的cpmMxioo。圖1A-C圖解了LJP394抑制來(lái)自代表性SLE患者群的自身抗體的結(jié)合的能力?？傊谒?2名SLE患者中，LJP394能夠抑制自身抗體結(jié)合dsDNA。LJP394和小牛胸腺dsDNA的抑制曲線(xiàn)是平行的，說(shuō)明由SLE血清識(shí)別的抗原決定簇在小牛胸腺dsDNA和LJP394上是同一的。還測(cè)試了LJP394在SLE小鼠模型中抑制抗DNA抗體的結(jié)合的能力。如上所述使用小牛胸腺dsDNA和LJP394進(jìn)行了竟?fàn)幮砸种茰y(cè)定法，結(jié)果顯示于表l。與小鼠抗體相比，人抗dsDM抗體(來(lái)自SLE血清)的50%抑制比率(IC5QLJP394/IC5。ctDNA)是最低的。LJP394顯示針對(duì)人抗體和NZBxNZWFl小鼠品系具有高親和力.表1:ctDNA和LJP394對(duì)抗dsDNA抗體的結(jié)合的竟?fàn)幮砸种蒲錓C50,ng/ml(平均值SD)ICS0LJP394/ctDNA比率血清來(lái)源c髓AUP3943MRL(lpr/lpr)(小鼠)0.356勸.455200±425623NZBxNZWFl(小鼠)0.021i0.0U5.72585BXSB(小鼠)0.028iO.000215±144767942人SLE1.88^0.92046±1624實(shí)施例2:通過(guò)親和力測(cè)定法來(lái)鑒定SLE患者通過(guò)使用下文所述表面激元共振測(cè)定法測(cè)量來(lái)自SLE患者的血清對(duì)于LJP394dsDNA表位的結(jié)合親和力，容易鑒定出SLE患者.如本文所述，使用非竟?fàn)幮灾苯佑H和力測(cè)定法(BIACORE軟皮斯卡塔韋，新澤43西州)，對(duì)來(lái)自10份SLE患者血清樣品和10份正常患者血清樣品的IgG級(jí)分評(píng)估與LJP394dsDNA表位的結(jié)合。圖2圖解了SLE樣品都顯示對(duì)于表位的可飽和結(jié)合，而正常樣品顯示對(duì)于LJP394表位的低結(jié)合和低特異性結(jié)合。實(shí)施例3:抗體對(duì)綴合物的效價(jià)加權(quán)平均親和力和對(duì)綴合物治療的應(yīng)答的測(cè)定開(kāi)發(fā)了使用表面激元共振的測(cè)定法，直接測(cè)量來(lái)自SLE患者的抗體對(duì)于綴合物L(fēng)JP394的效價(jià)加權(quán)平均親和力。表面激元共振用于量化抗原與抗體的飽和比例。調(diào)整這種測(cè)定法使之適用于測(cè)量LJP394的IgG群體的平均親和力.#存和才法試劑鏈霉親和素CM5芯片、HBS緩沖液(0.01MHEPESpH7.4、0.15MNaCl、3mMEDTA、0.005%(v/v)表面活性劑P20)得自BIACOREAB(皮斯卡塔韋，新澤西州)。LJP394是由通過(guò)硫醇鍵共價(jià)附著于基于三甘醇的平臺(tái)的四個(gè)20聚體dsDNA表位組成的。DNA表位是由5'-(CA)k)-3'鏈與互補(bǔ)GT鏈退火而組成的，生物素附著于GT鏈的游離5'末端.生物素是使用Bioditebiotinamidite(Pharmacia,烏普薩拉，瑞典)在(GT)1()鏈的最后偶聯(lián)中摻入的?；旧先鏙ones等人(1995)所述制備LJP394,但在退火步驟使用這種生物素修飾的(GT)h)鏈。在有些實(shí)驗(yàn)中，只有dsDNA表位用于鏈霉親和素芯片上的固定化。表位是通過(guò)使5，-(CA)h)-3，與5，-生物素-(TG)h)-3，鏈退火并通過(guò)HPLC純化dsDNA而制備的。在第2次拜訪(fǎng)(開(kāi)始施用研究藥物之前)和第ll次拜訪(fǎng)(每周施用一次藥物4個(gè)月之后)時(shí)由SLE患者采集血漿樣品。由血漿分離總IgG級(jí)分依照制造商的推薦，將100nl血漿與100P1IgG結(jié)合緩沖液(PierceChemical公司，羅克福德，伊利.譯斯州)混合，并與I謹(jǐn)nopurePlus⑧蛋白G瓊脂糖珠(PierceChemical公司)44混勻。遵循PierceChemical公司的酸洗脫/中和方案，將IgG由珠上洗脫下來(lái)，并用100nl1MNaP04pH7.5中和300nl酸洗脫IgG.然后將這些純化IgG樣品用于滴定實(shí)驗(yàn)。使用Bradford測(cè)定法(Biorad，Hercules,加利福尼亞)來(lái)測(cè)定總IgG濃度。表面激元共振所有實(shí)驗(yàn)都是使用BIACORE⑧2000型儀器于25C、流速10p1/min進(jìn)行的。將以50mg/ml溶于HBS+0.3MNaCl的LJP394溶液以5n1/min流過(guò)芯片達(dá)20分鐘，從而將LJP394通過(guò)它的5，生物素基團(tuán)附著于鏈霉親和素CM5芯片上。在滴定前將芯片預(yù)處理，即使用再生緩沖液(1MNaCl、50mMNaOH)進(jìn)行3xlmin脈沖。在將LJP394的dsDNA表位用于固定化時(shí)，使用與用于生物素化LJP394相似的條件使生物素化的表位以10mg/ml的濃度流過(guò)芯片。用在HBS中1:2系列稀釋的純化IgG進(jìn)行dsDNA(LJP394)芯片的抗體滴定。注入樣品達(dá)5分鐘，這是有效接近應(yīng)答平臺(tái)的合適結(jié)合時(shí)間；隨后是4分鐘的解離期，使朋S流過(guò)芯片；然后是30秒鐘的再生，使用1MNaCl、50mMNaOH進(jìn)行。分析在為了考慮到體積應(yīng)答/緩沖液影響而減去空流小室的背景曲線(xiàn)后，通過(guò)解離曲線(xiàn)與方程式l的非線(xiàn)性最小二乘法擬合，并使用制造商的軟件(BiaEvaluation，2.2版，烏普薩拉，瑞典)獲得應(yīng)答平臺(tái)值(Req),R^IWl-e鄉(xiāng),+Ro(方程式1)其中Rt指于時(shí)間t測(cè)量的應(yīng)答，Rsq指平衡平臺(tái)應(yīng)答，t指時(shí)間，t。指起始時(shí)間，ks指表觀(guān)結(jié)合常數(shù)(ks=kaC+kdis，其中ka指結(jié)合常數(shù)，C指分析物濃度，kdis指解離常數(shù))，R。指應(yīng)答偏移.將這些應(yīng)答平臺(tái)對(duì)總IgG濃度作圖，并擬合方程式2以獲得R^和K/的值。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage45</formula>---(方程式2)其中Ar指總抗體(IgG)濃度，R咖指最大應(yīng)答平臺(tái)，K/指表觀(guān)解離常數(shù)。K/與方程式3(下文)中的〈Kd'〉是相同的，即效價(jià)加權(quán)平均(TWA)解離常數(shù)。如Sem等人(1999)所述進(jìn)行Kd'的衍生，并洞察K/常數(shù)在方程式2中的物理學(xué)含義.這種分析適合于n種不同抗體亞群的多克隆集合的情況，其中B-LJP394且Ai-抗體亞群i。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage46</formula>=-------(方程式3)其中ri(相對(duì)效價(jià))指形式i占總抗體的分?jǐn)?shù)，定義為n-Ai/Ki。因而，方程式3是描述為相對(duì)效價(jià)(存在分?jǐn)?shù))n和解離常數(shù)Ki的n種不同抗體亞群的多克隆群體觀(guān)察到的解離常數(shù)的通用方程式。這種〈Kd，〉是方程式2的表觀(guān)Kd，即K二測(cè)量的表觀(guān)解離常數(shù)Kd，反映抗體亞群i對(duì)于抗原的內(nèi)在親和力，和抗體亞群i的相對(duì)效價(jià)(ri)。一般而言，0〈;n〈1，所以K》Ki。即能夠引起Kd，降低的因素是親和力的升高(Ki降低)和/或抗體亞群i相對(duì)效價(jià)的升高(ri升高)。在實(shí)踐中，在抗體的多克隆群體中，將存在結(jié)合親和力略有不同的許多種不同抗體亞群，上述分析和Sem等人(1999)的進(jìn)一步描述產(chǎn)生了反映多克隆集合中克隆相關(guān)抗體亞群的多種親和力和效價(jià)的表觀(guān)解離常數(shù).如上所述獲得的表觀(guān)解離常數(shù)是在方程式3中衍生的效價(jià)加權(quán)平均(TWA)解離常數(shù)，即〈Kd，〉.〈Kd'〉的值主要受具有最大n(最高相對(duì)效價(jià))和最小Ki(最高親和力)聯(lián)合的抗體亞群的影響.依照方程式3，具有指定親和力的亞群的相對(duì)效價(jià)的任何變化將改變表觀(guān)解離常數(shù).紹研究l使用基于表面激元共振的親和力測(cè)定法，對(duì)來(lái)自SLE患者的血漿IgG的4個(gè)稀釋度評(píng)估平衡結(jié)合值，以測(cè)定達(dá)到最大結(jié)合半數(shù)所需要的IgG濃度.該數(shù)值，即表觀(guān)平衡解離常數(shù)(Kd',單位mg/mlIgG)，反映IgG群體對(duì)于LJP394的效價(jià)加權(quán)平均親和力，正如上文和Sem等人(1999)所述.表2包含來(lái)自首次患者中最初IgG對(duì)于LJP394的親和力(第2次拜訪(fǎng))與每周一次使用研究藥物4個(gè)月后的親和力(第ll次拜訪(fǎng))的Kd'比較。來(lái)自第一個(gè)患者群的數(shù)據(jù)指示參加試驗(yàn)且具有針對(duì)LJP394的高親和力(低數(shù)值的Kd，-高親和力)抗體的患者更有可能響應(yīng)藥物治療(較高數(shù)值的Kd'-TWA降低)。表2:KV值的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage47</column></row><table>圖3A描述了用LJP394治療的SLE患者中抗dsDNA抗體承受量(Kd，)的劑量依賴(lài)型下降.圖3B以柱形圖的形式描述了相同數(shù)據(jù)。這些結(jié)果證明，50mg/wkLJP394的劑量依賴(lài)型效應(yīng)提供了比10mg/wk更好的應(yīng)答，而且兩組都與安慰劑不同。研究2對(duì)于研究的第二個(gè)SLE患者群，在第2或3次拜訪(fǎng)(開(kāi)始施用研究藥物前)時(shí)采集第一份血漿樣品，并在以100mg/wk使用研究藥物4個(gè)月后立即(第18或19次拜訪(fǎng))采集第二份樣品.然后將這兩份樣品用于確定首次患者的最初親和力和施用研究藥物4個(gè)月后的親和力.樣品的采集沒(méi)有已知偏愛(ài)，只是它們包括采樣時(shí)可獲得的所有患者.結(jié)果顯示于表4(可獲得樣品的數(shù)目指可獲得用于分析的樣品數(shù)目；紅腫總數(shù)目只代表歸咎于狼瘡的紅腫)。表5包括所有表4的樣品，還有更多患者樣品。<table>tableseeoriginaldocumentpage48</column></row><table>藥物治療組和安慰劑組的結(jié)果顯示于圖4和圖5.每個(gè)正方形代表來(lái)自一個(gè)患者的數(shù)據(jù)。圖4A和4B反映了表4中概述的患者集合。圖4C和4D反映了表5中概述的患者集合。圖5A和5B展示了圖4A和4B中的數(shù)據(jù)(關(guān)于Kd'百分比變化)。V3preKd，代表正好在開(kāi)始施用研究藥物之前患者的Kd，。在圖4A-D中，Y軸代表用藥物或安慰劑治療4個(gè)月后的Kd，值.在圖5A和5B中，Y軸代表用藥物或安慰劑治療4個(gè)月后親和力(Kd'值)的百分比變化.圖6A和6B反映了與圖5所示相似的數(shù)據(jù)分析，但是擴(kuò)充了患者群，正如表5中概述的。擴(kuò)充患者群的數(shù)據(jù)概述于圖7(每周100mgLJP394)。當(dāng)來(lái)自圖7的結(jié)果如圖8所示分成高親和力組(Kd'<0.8mg/ml)和低親和力組(Kd'>0.8mg/ml)時(shí)，高親和力組在4個(gè)月期間顯示親和力變化，而低親和力組不顯示任何顯著的親和力變化?？贵w親和力變化還描述于圖9.根據(jù)最初(治療前)親和力選擇樣品，并分成三組相對(duì)親和力高、中、和低親和力。親和力值是3名患者的平均值。實(shí)心三角代表低親和力"患者(Kd'平均大約l.13mg/ml);實(shí)心圓代表沖親和力"患者(Kd，平均大約O.44mg/ml);而實(shí)心方形代表^親和力"患者(Kd'平均大約O.14mg/ml)。這些數(shù)據(jù)證明，對(duì)于LJP394表位具有高親和力的患者(低數(shù)值的Kd'-高親和力)與最初抗體親和力較低的患者相比在4個(gè)月后展示更大的藥物應(yīng)答。它們還說(shuō)明，可以預(yù)先選擇最有可能對(duì)LJP394具有陽(yáng)性血清學(xué)應(yīng)答的患者。通過(guò)將患者分成兩組，即低親和力(K。'〉0.8mg/ml)和高親和力(Kd，《0.8mg/ml)組，對(duì)通過(guò)非竟?fàn)幮訤arr測(cè)定法在用LJP394治療的患者中評(píng)估的抗dsDNA抗體水平隨時(shí)間的變化進(jìn)行分析。圖IO描述了兩組的比較。排除在高劑量皮質(zhì)類(lèi)固醇和/或環(huán)磷酰胺治療后收集的數(shù)據(jù)。用虛線(xiàn)描述低親和力組，用實(shí)線(xiàn)描述高親和力組。灰色、陰影背景的區(qū)域顯示服藥階段.由第一塊灰色背景區(qū)指示的第一服藥階段是誘導(dǎo)期，給予患者每周100mgLJP394或安慰劑。白色、無(wú)陰影區(qū)域是不服藥階段，不施用LJP394或安慰劑。第二塊灰色背景區(qū)指示第二服藥階段，給予患者每周50mgLJP394或安慰劑。如圖10所示，在高親和力組中，通過(guò)每周施用100mg和50mgLJP394降低了抗dsDNA抗體水平。在低親和力組中，通過(guò)每周施用100mgLJP394使抗dsDNA抗體水平降低了一些，而每周施用50mgLJP394不引起降低.如圖10所示，在高親和力組中抗dsDNA抗體顯著降低。r財(cái)圖11A與圖5A相似，只是用暗盒鑒別展示SLE相關(guān)紅肺的患者.圖11B(用LJP394治療的患者)與圖11A相似，只是擴(kuò)充了用于分析的患者群。圖IIC顯示了用安慰劑治療的患者的親和力百分比變化.實(shí)心形狀(方形表示用LJP394治療的患者，圓形表示用安慰劑治療的患者)指示在治療期間經(jīng)歷腎紅腫的患者。在圖11和圖12中，低親和力患者中腎紅胂的群集是顯然的.這些數(shù)據(jù)指示，根據(jù)血清學(xué)和臨床測(cè)量，對(duì)于LJP394具有高親和力的患者對(duì)藥物的響應(yīng)更好，經(jīng)歷的腎紅胂更少。如圖13所示，在施用安慰劑4個(gè)月后，安慰劑治療對(duì)Kd'似乎沒(méi)有影響。雖然該圖中數(shù)據(jù)點(diǎn)的數(shù)目是有限的，但是安慰劑治療對(duì)Kd'沒(méi)有影響是與第一項(xiàng)研究相同的。圖14描述了高親和力個(gè)體(K。'低于0.8mg/ml)的腎紅肺分析。X軸是自第一次服用LJP394(或安慰劑)后的時(shí)間(以月計(jì))，Y軸是不經(jīng)歷腎紅腫的個(gè)體的比例。在接受LJP394的高親和力患者中，與接受安慰劑的高親和力患者相比，較高比例不具有腎紅胂。對(duì)于用安慰劑治療的患者，發(fā)生了更多的紅腫，而且這些紅腫在試驗(yàn)的更早期發(fā)生。實(shí)施例4:對(duì)皮質(zhì)類(lèi)固醇和/或環(huán)磷酰胺的依賴(lài)性從第一次用高劑量皮質(zhì)類(lèi)固醇和/或環(huán)磷酰胺(HDCC)治療進(jìn)行干預(yù)的時(shí)間方面對(duì)研究2(見(jiàn)實(shí)施例3)中的高親和力患者(Kd，〈0.8mg/ml)進(jìn)行分析.這種分析的結(jié)果描述于圖15。實(shí)線(xiàn)表示用LJP394治療的個(gè)體，虛線(xiàn)表示用安慰劑治療的個(gè)體。X軸表示自第一劑LJP394(或安慰劑)后的時(shí)間(以月計(jì))，Y軸表示不接受HDCC干預(yù)的個(gè)體百分比.HDCC干預(yù)指單獨(dú)或聯(lián)合環(huán)磷酰胺使用加大劑量的皮質(zhì)類(lèi)固醇的第一次干預(yù)，其中加大劑量是至少15mg/天增量，并且使得皮質(zhì)類(lèi)固醇和/或環(huán)磷酰胺的總量超過(guò)20mg/天?？梢允褂脴?biāo)準(zhǔn)臨床方案來(lái)施用HDCC。臨床醫(yī)生可以通過(guò)評(píng)估某些因素(包括但不限于蛋白尿水平、血尿水平、和血清肌酸酐水平)來(lái)監(jiān)控患者并確定何時(shí)需要HDCC治療.一般而言，對(duì)經(jīng)歷腎紅胂的患者給予HDCC治療。與用LJP394治療的高親和力患者相比，在用安慰劑治療的高親和力患者中，需要更多的HDCC干預(yù)；而且在用安慰劑治療的患者中，需要HDCC干預(yù)的時(shí)間更早.50實(shí)施例5:LJP394的使用影響臨床結(jié)果對(duì)高親和力組分析了臨床效果的四個(gè)參數(shù)貫穿試驗(yàn)過(guò)程的腎紅腫、誘導(dǎo)期過(guò)程中的腎紅腫、HDCC干預(yù)、和主要SLE紅腫，結(jié)果顯示于圖16.斜線(xiàn)柱表示用安慰劑治療的高親和力患者，實(shí)心柱表示用LJP394治療的高親和力患者(Kd，〈0.8mg/ml)。HDCC干預(yù)指第一次發(fā)生的施用加大劑量皮質(zhì)類(lèi)固醇和/或環(huán)磷酰胺，正如本文定義的。主要SLE紅胂包括因SLE而住院、第一次發(fā)生的高劑量強(qiáng)的松、第一次發(fā)生的高劑量環(huán)磷酰胺、和/或因SLE而死亡。誘導(dǎo)期(在其過(guò)程中測(cè)量腎紅肺)指每周100mgLJP394(或安慰劑)治療的前4個(gè)月。在治療期間，在最初的誘導(dǎo)期之后，間歇給藥。對(duì)于非誘導(dǎo)期，劑量是每周50mgLJP394(或安慰劑)，某些時(shí)期沒(méi)有治療。圖16圖解了高親和力患者對(duì)LJP394治療的應(yīng)答顯著好于用安慰劑治療的患者，而且高親和力患者的臨床效果顯著的更好。相反，圖17顯示了所有患者群集合(即噫欲治療的"群體)，包括低和高親和力患者.用LJP394治療的患者在臨床效果中相對(duì)于用安慰劑治療的患者顯示一些改善；然而，這種")花合的"LJP394治療群的臨床效果與高親和力患者的結(jié)果(如圖16所示)相比不顯著.因而，高親和力患者展示更為積極的臨床效果(即貫穿試驗(yàn)過(guò)程中腎紅腫較少、誘導(dǎo)期過(guò)程中的腎紅腫較少、需HDCC干預(yù)的時(shí)間較后、且主要SLE紅腫較少).盡管為了清楚理解的目的已經(jīng)以一些細(xì)節(jié)通過(guò)圖解和例示方式描述了上述發(fā)明，對(duì)于本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員是顯然的，可以進(jìn)行某些變化和修改.因此，不應(yīng)當(dāng)將描述和實(shí)施例解釋為限制由所附權(quán)利要求書(shū)描述的發(fā)明范圍.本發(fā)明還公開(kāi)了以下內(nèi)容1.治療個(gè)體的系統(tǒng)性紅斑狼掩(SLE)的方法，包括對(duì)個(gè)體施用包含下述的綴合物(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子，和(b)可特異(dsDNA)表位；其中所述dsDNA表位對(duì)于來(lái)自個(gè)體的抗體的親和力被用作選擇接受或繼續(xù)接受治療的個(gè)體的基礎(chǔ)。2.項(xiàng)目1的方法，其中dsDNA表位是多核苷酸。3.項(xiàng)目2的方法，其中多核普酸是雙鏈DNA。4.治療個(gè)體的SLE的方法，包括對(duì)個(gè)體施用包含下述的綴合物(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子，和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)多核苷酸，所述多核苷酸基本上由序列5，-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'組成；其中在開(kāi)始治療之前或之時(shí)，該多核苷酸對(duì)于來(lái)自個(gè)體的抗體的表觀(guān)平衡解離常數(shù)Ud')低于大約l.OmgIgG/ml，而且其中所述K。'值或其功能等同物被用作選擇接受治療的個(gè)體的基礎(chǔ)。5.項(xiàng)目4的方法，其中K。'值低于大約O.8。6.項(xiàng)目4的方法，其中K。'值低于大約O.5。7.項(xiàng)目4的方法，其中K。'值低于大約O.2。8.項(xiàng)目4的方法，其中平臺(tái)分子是CH2OCH2CH20-AHAB-TEGOiO-NHCO(CH2〉5NHCOCH2S(CH2)60—"—0~PNOOII-NHCO(CH2)5NHCOCH2S(CH2)60~P_0_PNO其中PN指所述多核苷酸。9.項(xiàng)目5的方法，其中所述多核苷酸由序列5-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3，組成。10.項(xiàng)目9的方法，其中平臺(tái)分子是<formula>formulaseeoriginaldocumentpage53</formula>II其中PN指所述多核苷酸。11.項(xiàng)目9的方法，其中K。'值低于大約O.5。12.治療個(gè)體的SLE的方法，包括(1)評(píng)估來(lái)自個(gè)體的抗雙鏈DNA抗體對(duì)于治療中待用dsDNA表位的親和力，其中基于所述抗體親和力來(lái)選擇治療的個(gè)體；并(2)對(duì)所述選擇的個(gè)體施用包含下述的綴合物(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)兩個(gè)或多個(gè)dsDNA表位。13.項(xiàng)目12的方法，其中dsDNA表位是多核苷酸。14.項(xiàng)目13的方法，其中多核苷酸是雙鏈DNA。15.治療個(gè)體的SLE的方法，包括(1)在開(kāi)始治療之前，評(píng)估綴合物中的多核苷酸對(duì)于來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的表觀(guān)平衡解離常數(shù)(KD)或其功能等同物，所述綴合物包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自該個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)多核苷酸，所述多核苷酸基本上由序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'組成，其中選擇L'值低于大約l.OmgIgG/ml的個(gè)體來(lái)接受治療；并(2)以足以提高K。值的量對(duì)個(gè)體施用綴合物。16.項(xiàng)目15的方法，其中K。'值低于大約O.8。17.項(xiàng)目15的方法，其中K。'值低于大約O.5。18.項(xiàng)目15的方法，其中K。'值低于大約O.2。19.項(xiàng)目15的方法，其中平臺(tái)分子是53<formula>formulaseeoriginaldocumentpage54</formula>其中PN指所述多核苷酸。20.項(xiàng)目19的方法，其中K。'值低于大約O.8。21.治療個(gè)體的狼瘡腎炎的方法，包括對(duì)個(gè)體施用包含下述的綴合物(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自該個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)dsDNA表位。22.項(xiàng)目21的方法，其中dsDNA表位是多核苷酸。23.項(xiàng)目22的方法，其中所述多核苷酸基本上由序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3，組成。24.項(xiàng)目22的方法，其中所述多核苷酸由序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'組成。25.項(xiàng)目24的方法，其中平臺(tái)分子是其中PN指所述多核苷酸。26.項(xiàng)目23的方法，其中以足以降低個(gè)體中腎臟紅腫發(fā)病率的量施用綴合物。27.項(xiàng)目23的方法，其中以足以降低患者皮質(zhì)類(lèi)固醇或環(huán)磷酰胺施用量的量施用綴合物。28.項(xiàng)目21的方法，其中dsDNA表位對(duì)于來(lái)自該個(gè)體的抗體的親和力被用作選擇接受治療的個(gè)體的基礎(chǔ)。29.項(xiàng)目23的方法，其中多核苷酸對(duì)于來(lái)自該個(gè)體的抗體的親和力被用作選擇接受治療的個(gè)體的基礎(chǔ)。30.項(xiàng)目23或24的方法，其中在開(kāi)始治療之前或之時(shí)，綴合物的多核普酸對(duì)于來(lái)自該個(gè)體的抗體的表觀(guān)平衡解離常數(shù)(K。')或其功能等同物低于大約l.OmgIgG/ml或其功能等同物，而且其中所述K。'值或其功能等同物被用作選擇接受治療的個(gè)體的基礎(chǔ)。31.項(xiàng)目30的方法，其中L'值低于大約O.8。32.項(xiàng)目29的方法，其中以足以降低親和力的量施用綴合物。33.治療個(gè)體的SLE的方法，包括(1)在開(kāi)始治療之前或之時(shí)，評(píng)估綴合物中的dsDNA表位對(duì)于來(lái)自該個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的表觀(guān)平衡解離常數(shù)(K。')，所述綴合物包含(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合(2)以^足以提高K。'值的量對(duì)該個(gè)體施用綴^物，其中若I)'值相對(duì)于開(kāi)始治療之前或之時(shí)的K。'值提高了至少大約20%，則繼續(xù)治療。34.項(xiàng)目33的方法，其中dsDNA表位是多核苷酸。35.項(xiàng)目34的方法，其中多核苷酸基本上由序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'組成。36.項(xiàng)目34的方法，其中多核苷酸由序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'組成。37.項(xiàng)目35或36的方法，其中若K。'值相對(duì)于開(kāi)始治療之前或之時(shí)的Kd值提高了至少大約50%,則繼續(xù)治療。38.項(xiàng)目35或36的方法，其中若K。'值相對(duì)于開(kāi)始治療之前或之時(shí)的K。'值提高了至少大約100%，則繼續(xù)治療。39.項(xiàng)目36的方法，其中平臺(tái)分子是<formula>formulaseeoriginaldocumentpage56</formula>其中PN指所述多核苷酸。40.監(jiān)控個(gè)體的SLE治療的方法，所述治療包括施用包含下述的綴合物(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自該個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)dsDNA表位；所述方法包括測(cè)量來(lái)自個(gè)體的抗體對(duì)于所述治療中所用dsDNA表位的親和力。41.項(xiàng)目40的方法，其中通過(guò)測(cè)量綴合物的dsDNA表位對(duì)于來(lái)自個(gè)體的抗雙鏈DNA抗體的表觀(guān)平衡解離常數(shù)(K。')或其功能等同物來(lái)測(cè)量親和力。42.項(xiàng)目41的方法，其中dsDNA表位是多核苷酸。43.項(xiàng)目42的方法，其中多核苷酸基本上由序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'組成。44.項(xiàng)目42的方法，其中多核苷酸由序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'組成。45.項(xiàng)目44的方法，其中平臺(tái)分子是其中PN指所述多核苷酸。46.鑒定可能適合于治療SLE的個(gè)體的方法，所述治療包括施用包含下述的綴合物(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage56</formula>所述多核苷酸基本上由序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'組成，所述方法包括在開(kāi)始治療之前或之時(shí)，測(cè)量綴合物中的多核苷酸對(duì)于來(lái)自個(gè)體的抗雙鏈DM抗體的表觀(guān)平衡解離常數(shù)U。')或其功能等同物，其中通過(guò)低于大約l.OmgIgG/ml的K。'值或其功能等同物鑒定出個(gè)體。47.項(xiàng)目46的方法，其中通過(guò)低于大約O.8mgIgG/ml的L'值或其功能等同物鑒定出個(gè)體。48.項(xiàng)目46的方法，其中通過(guò)低于大約O.2mgIgG/ml的K。'值或其功能等同物鑒定出個(gè)體。49.鑒定可能不適合于治療SLE的個(gè)體的方法，所述治療包括施用包含下述的綴合物(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性酸，所述多核苷酸基本上由序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'組成，所述方法包括在開(kāi)始治療之前或之時(shí)，測(cè)量綴合物中的多核苷酸對(duì)于來(lái)自該個(gè)體的抗雙鏈DNA抗體的表觀(guān)平衡解離常數(shù)(KD')或其功能等同物，其中通過(guò)高于大約l.OmgIgG/ml的KD'值或其功能等同物鑒定出個(gè)體。50.項(xiàng)目l、4、12、21、33、40、46、或49任一項(xiàng)的方法，其中個(gè)體是人。51.可指示治療適用性的抗體親和力的鑒定方法，所述治療用于由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)，所述方法包括(1)對(duì)個(gè)體集合中的每一個(gè)個(gè)體測(cè)量由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)中涉及的抗體的親和力，所述個(gè)體具有由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)，所述親和力是所述抗體與由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)中涉及的免疫原的類(lèi)似物之間的親和力；(2)對(duì)個(gè)體集合施用包含該類(lèi)似物的分子；(3)使由抗體介導(dǎo)的病理學(xué)程度與最初親和力相互關(guān)聯(lián)。52.試劑盒，其在合適包裝中裝有包含可結(jié)合抗雙鏈DNA抗體的表位的分子，還裝有關(guān)于^f吏用該表位來(lái)檢測(cè)表位對(duì)于來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的親和力的說(shuō)明書(shū)。53.項(xiàng)目52的試劑盒，其中表位是多核苷酸。54.項(xiàng)目53的試劑盒，其中多核苷酸是DNA。55.項(xiàng)目54的試劑盒，其中多核苷酸包含序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'。56.項(xiàng)目54的試劑盒，其中多核苷酸基本上由序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3，組成。57.項(xiàng)目54的試劑盒，其中多核苷酸由序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'組成。58.項(xiàng)目55、56、或57的方法，其中多核苷酸是生物素化的。59.試劑盒，其中包括(1)包含下述的綴合物(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)多核苷酸；和(2)有關(guān)使用綴合物來(lái)檢測(cè)綴合物對(duì)于來(lái)自個(gè)體的抗dsDNA抗體的親和力的說(shuō)明書(shū)。60.項(xiàng)目59的試劑盒，其中綴合物包含序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'和平臺(tái)分子CH2OCH2CH20-AHAB-TEGO1-NOH-NHCO(CH2)5NHCOCH2S(CH2)6O"~P—0—PNOOII-NHCO(CH2)5NHCOCH2S(CH2)60~—O"PNOJ2其中PN指多核苷酸。61.項(xiàng)目59或60的試劑盒,其中多核苷酸是生物素化的。62.試劑盒，其中包括(1)包含下述的綴合物(a)非免疫原的抗體的兩個(gè)或多個(gè)多核苷酸；(2)包含綴合物中的多核苷酸的多核苷酸；和(3)有關(guān)使用包含綴合物中的多核苷酸的多核苷酸來(lái)檢測(cè)多核苷酸對(duì)于來(lái)自個(gè)體的抗dsDNA抗體對(duì)于多核苷酸的親和力的說(shuō)明書(shū)。63.試劑盒，其中裝有包含可結(jié)合抗體所介導(dǎo)病理學(xué)中涉及的抗體的表位的分子和有關(guān)使用該分子來(lái)測(cè)定抗體所介導(dǎo)病理學(xué)中涉及的抗體對(duì)于包含類(lèi)似物或表位的分子的親和力的說(shuō)明書(shū)。64.項(xiàng)目63的試劑盒，其中分子是生物素化的。58權(quán)利要求1.治療個(gè)體的系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)的方法，包括對(duì)個(gè)體施用包含下述的綴合物(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子，和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)雙鏈DNA(dsDNA)表位；其中所述dsDNA表位對(duì)于來(lái)自個(gè)體的抗體的親和力被用作選擇接受或繼續(xù)接受治療的個(gè)體的基礎(chǔ)。2.權(quán)利要求l的方法，其中dsDNA表位是多核苷酸。3.權(quán)利要求2的方法，其中多核苷酸是雙鏈DNA。4.治療個(gè)體的SLE的方法，包括對(duì)個(gè)體施用包含下述的綴合物(a)非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子，和(b)可特異性結(jié)合來(lái)自個(gè)體且可特異性結(jié)合雙鏈DNA的抗體的兩個(gè)或多個(gè)多核苷酸，所述多核苷酸基本上由序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'組成；其中在開(kāi)始治療之前或之時(shí)，該多核苷酸對(duì)于來(lái)自個(gè)體的抗體的表觀(guān)平衡解離常數(shù)(K。')低于大約l.OmgIgG/ml，而且其中所述K。'值或其功能等同物被用作選擇接受治療的個(gè)體的基礎(chǔ)。5.權(quán)利要求4的方法，其中K。'值低于大約O.8。6.權(quán)利要求4的方法，其中K。'值低于大約O.5。7.權(quán)利要求4的方法，其中K。'值低于大約O.2。8.權(quán)利要求4的方法，其中平臺(tái)分子是其中PN指所述多核苷酸。9.權(quán)利要求5的方法，其中所述多核苷酸由序列5'-GTGTGTGTGTGTGTGTGTGT-3'組成。10.權(quán)利要求9的方法，其中平臺(tái)分子是<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中PN指所述多核苷酸。全文摘要本發(fā)明提供了基于測(cè)量抗體親和力來(lái)鑒定適合于治療狼瘡的個(gè)體的方法和監(jiān)控治療的方法，以及基于測(cè)量抗體親和力來(lái)治療狼瘡的方法。治療必需施用包含非免疫原性效價(jià)平臺(tái)分子和可結(jié)合來(lái)自患者的抗DNA抗體的至少兩個(gè)雙鏈DNA表位(諸如DNA分子)的綴合物。文檔編號(hào)A61K38/11GK101422614SQ20081016567公開(kāi)日2009年5月6日申請(qǐng)日期2000年11月28日優(yōu)先權(quán)日1999年11月28日發(fā)明者M(jìn)·D·林尼克,P·A·麥克尼利申請(qǐng)人:拉卓拉藥物公司