專利名稱：：五環(huán)三萜皂苷化合物的用途的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及醫(yī)藥領域，具體涉及一種五環(huán)三萜類化合物用于制備降血脂的藥物。
背景技術：
：中藥材救必應為冬青科植物鐵冬青(IlexrotundaThunb.)的干燥樹皮，廣泛分布于中國南方各省，主產于廣西、廣東省，民間常用于清熱解毒，消腫止痛，治感冒發(fā)熱，急慢性肝炎，急性腸胃炎，胃及十二指腸潰瘍，風濕關節(jié)痛。救必應的化學成分研究報道不多，在文獻"救必應化學成分的研究"(中草藥，1991，22(6):246-248)中報道了救必應中含鐵冬青酸(救必應酸)、具棲冬青苷，鐵冬青酸異丙叉酮縮醇，丁香苷、芥子醛、芥子醛葡萄糖苷、丁香醛、3—乙酰齊墩果酸及硬脂酸。救必應中含有大量的五環(huán)三萜類皂苷，據(jù)文獻"高效液相色譜法測定救必應藥材中具棲冬青苷的含量"(特產研究2007，4:45-47)報道，救必應藥材中具棲冬青苷含量高達8.8%，如果再加上其苷元救必應酸的含量，其總皂苷含量更高。因此，救必應中五環(huán)三萜類化合物的開發(fā)利用有很好的經濟價值。救必應是有著廣泛用途的藥材，目前對其藥理作用的研究主要集中于心血管系統(tǒng)，其次是體外抗菌作用的一些研究，但從救必應提取的化學成分的有關藥理活性報道極少。在中國專利CN101033245A公開了具棲冬青苷的制備方法及應用，救必應用乙醇提取，提取物加水，離心，得沉淀物和上清液。沉淀物加50-95%乙醇回流提取，濾過，濾液濃縮，放置，濾過，沉淀物干燥得一部分總皂苷，總皂苷用乙醇結晶，得一部分具棲冬青苷。上清液濃縮，離心，沉淀物用適量水洗干燥后用乙醇結晶，又制得另一部分具棲冬青苷。兩次制得的具棲冬青苷合并，用乙醇多次重結晶得具棲冬青苷純品。制得的具棲冬青苷含量可達98%以上，治療冠心病，心絞痛，中風，腦梗死等心腦血管系統(tǒng)疾病。而有關救必應酸的藥理活性報道幾無見到。具棲冬青苷(pedunculoside)，在國外早就有文獻報道，日本學者長谷綱男等在1973年報道從日本產的具柄冬青葉、四季青葉、救必應葉中分離得到五環(huán)三萜類化合物pedunculoside(長谷綱男等，日本化學會志，1973(4):778-785)。因長谷綱男等從具柄冬青(IlexpedunculosaMiq.)葉中分離到此新化合物并命名為pedunculoside，故化合物中文名應釋為具柄冬青苷，但文獻報道為具棲冬青苷(中草藥，1991，22(6):246-248)，實為筆誤造成，但一直沿用至今，所以本發(fā)明還是采用具棲冬青苷的名。救必應酸(Rotundicacid)和具棲冬青苷(pedunculoside)還存在于其他的冬青屬植物中，如四季青(IlexpurpureaHassk.)的干燥葉中(中國天然藥物，2005，3(6):344-346)。另外，有報道在茜草科植物烏檀中也存在有救必應酸(熱帶亞熱帶植物學報，2005，13(2)167-170)。目前，全球高血脂患者不斷增加，是危害人類健康的重大疾病。市場上有效控制血脂且副作用少的藥物不多，常用西藥為氯貝丁酯類如非諾貝特等，以及氧乙酸類如洛伐他汀等，這此藥物有較多付作用，大多數(shù)對肝臟有影響，如非諾貝特會引起轉氨酶升高等(見非諾貝特膠囊說明書)。因此開發(fā)安全性高、確實有效的降血脂的天然藥物具有重要的意義，有廣闊的市場前景。本發(fā)明的目的是從植物中提取分離有效成分用于制備降血脂藥物。
發(fā)明內容本發(fā)明的技術方案是取一種五環(huán)三萜皂苷化合物用于制備降血脂的藥物，所說的五環(huán)三萜皂苷化合物是指用下式所示化合物<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中R為H或B-D-葡萄糖，B-D-葡萄糖的結構式為:<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage5</formula>當式中的R為H時，化合物名為救必應酸(Rotundicacid),又稱為鐵冬青酸，當式中R為e-D-葡萄糖基時，化合物名為具棲冬青苷(pedunculoside)，又稱為長梗冬青苷。它可以從冬青科植物鐵冬青(IlexrotundaThunb.)的干燥樹皮即救必應藥材中提取分離制得到(中草藥，1991，22(6):246-248)取救必應藥材(IlexrotundaThunb.)用90-95。/。的乙醇提取，濃縮，濃縮物加水，過濾，取不溶物(沉淀物)得到粗提取物，此提取物用硅藻土、或硅膠、或石英砂分散后于沙氏提取器中，先用中低極性的有機溶劑，如二氯甲烷，乙醚，石油醚等的一種或二種混合溶劑加熱回流提取，溶劑回收，得救必應酸粗品，再用有機溶劑重結晶得救必應酸，含量達98%以上；殘渣再用較強極性的溶劑，如乙酸乙酯，丙酮，乙醇，甲醇等的一種或二種混合溶劑加熱回流提取，回收溶劑，得到具棲冬青苷粗品，用含水的甲醇或乙醇(40-80%)重結晶，得到具棲冬青苷，含量達98%以上。具棲冬青苷和救必應酸也可以從四季青葉中提取分離得到，即四季青葉粉碎后，用丙酮浸提，提取液回收溶劑，濃縮，過濾，濾液經S印hadexLH-20柱層析，用水-甲醇洗脫，分離得到(趙浩如等，中國中藥雜志，1993，18(4):226-228)。當式中的R為e-D-葡萄糖基時，化學名為具棲冬青苷(pedunculoside)，它可從冬青科植物鐵冬青(IlexrotundaThunb.)的干燥樹皮即救必應藥材中提取分離制得，可依專利CN101033245A公開的具棲冬青苷的制備方法制備。以下通過試驗證明本發(fā)明提供的五環(huán)三萜皂苷的用途五環(huán)三萜皂苷化合物的降脂試驗1材料與方法1.1受試藥物具棲冬青苷，救必應酸。1.2儀器和試劑全自動生化分析儀、離心機；1°/。羧甲基纖維素鈉(自配)。1.3高脂飼料1%膽固醇、10%豬油、10%蛋黃粉、0.2%膽鹽，78.8%基礎飼料。由江蘇省協(xié)同醫(yī)藥生物工程責任有限公司提供。1.4動物及分組取SD大鼠，雌性，體重210士10g，由揚州大學比較醫(yī)學中心提供，合格證號SYXK(蘇)2002-0045。隨機分為5組，每組8只，即①正常對照組，喂基礎飼料；②高脂模型組、③陽性對照組(血脂康108mg/kg)、給藥A組(具棲冬青苷450mg/kg)、⑤給藥B組(救必應酸350mg/kg)，②-⑤組均喂高脂飼料。.1.5實驗方法.各組自由攝取普通詞料適應性喂養(yǎng)9d后，除正常組外，其余各組換食高脂飼料造模，每籠每天定量給200g，次日稱量剩余飼料以確定每日每籠進食量。同時開始灌胃給藥正常組與模型組給1%羧甲基纖維素鈉(lml/100g體重)，陽性對照組給血脂康1%羧甲基纖維素鈉混懸液(lml/100g體重)，給藥A組給具棲冬青苷P/。羧甲基纖維素鈉混懸液(lml/100g體重)，給藥B組給救必應酸1%羧甲基纖維素鈉混懸液(lml/100g體重)，連續(xù)給藥30d，每3d稱量體重，以調整給藥劑量。各組動物于給藥30d后禁食不禁水16h，各組摘眼球取血，分離血清，測定血清總膽固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)、血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和血清低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)。1.6統(tǒng)計處理檢測數(shù)據(jù)采用SPSS軟件進行處理，計數(shù)資料均以f±S表示2結果結果見表l表l具棲冬青苷及救必應酸對高脂模型大鼠血脂指標的影響辣(f±s)<table>complextableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注與模型組比較，fP〈0.05有顯著差異；**P<0.01有非常顯著差異與正常組比較，△P〈0.05有顯著差異；△△P〈0.01有非常顯著差異結論從表l可以看出，對高脂血癥的大鼠，具棲冬青苷與救必應酸能顯著降低血清總膽固醇(TC)含量和血清甘油三酯(TG)含量；顯著降低血清低密度脂蛋白膽固醇含量(LDL-C),顯著升高血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量。以上結果初步表明具具棲冬青苷、救必應酸，可以用于制備低毒性的降血脂的藥物?？梢詥我怀煞謶?，或二個成分合并應用。將其與口服制劑輔料混合制成片劑，軟膠囊，硬膠囊，咀嚼片，含片，糖槳劑，混劑，顆粒劑等口服制劑，也可制成注射劑。實施例1具棲冬青苷和救必應酸的制備取救必應藥材(IlexrotundaThunb.)20Kg用95%的乙醇提取，提取液濃縮至5.6Kg，加16Kg水，過濾，取不溶物(沉淀物)得到粗提取物，此提取物用硅膠分散后于沙氏提取器中，先用二氯甲垸加熱回流提取，溶劑回收，得救必應酸粗品，再用二氯甲烷重結晶得救必應酸，含量達98.8%(用高效液相色譜法測定)；沙氏提取器中的殘渣，用乙酸乙酯加熱回流提取，回收溶劑，得到具棲冬青苷粗品，產品用60%的乙醇液重結晶，得到具棲冬青苷，含量達99.2%(用高效液相色譜法測定)。實施例2、取具棲冬青苷310g，研成細粉，加入20%淀粉糊約150g，混合，14目篩制粒，于10(TC干燥，整粒，加入淀粉20g，硬脂酸鎂2g，混勻，壓制成1000片，即得。每片重0.35g，含具棲冬青苷300±5mg。實施例3、取救必應酸260g，研成細粉，加入20°/。淀粉糊約150g，混合，14目篩制粒，于10(TC干燥，整粒，加入淀粉20g，硬脂酸鎂2g，混勻，壓制成1000片，即得。每片重0.3g，含救必應酸250士5mg。實施例4、取具棲冬青苷210g,取救必應酸105g，研成細粉，加入20%淀粉糊約150g，混合，14目篩制粒，于100'C干燥，整粒，加入淀粉20g，硬脂酸鎂2g，混勻，壓制成1000片，即得。每片重0.3g，含含具棲冬青苷200士5mg，救必應酸100±5mg。權利要求1、一種五環(huán)三萜皂苷的用途，其特征在于用于制備降血脂的藥物或食品，所說的五環(huán)三萜皂苷是指用下式所示化合物其中R為H或β-D-葡萄糖基，β-D-葡萄糖基的結構式為全文摘要五環(huán)三萜皂苷化合物的用途，涉及醫(yī)藥領域，具體涉及五環(huán)三萜類化合物用于制備降血脂的藥物。所說的五環(huán)三萜皂苷是指用右式所示化合物其中R為H或β-D-葡萄糖基，β-D-葡萄糖基的結構式為右式。文檔編號A61K31/7028GK101342186SQ200810198190公開日2009年1月14日申請日期2008年9月1日優(yōu)先權日2008年9月1日發(fā)明者劉國樵申請人:劉國樵