專利名稱：一類β氨基酸組成的二肽硼酸及其酯類化合物、制備方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物合成領(lǐng)域，具體涉及一類新型肽硼酸及其酯類化合物的制備方法及其在藥效學(xué)上的應(yīng)用。

背景技術(shù)：
目前，惡性腫瘤仍然是威脅人們生命的主要疾病之一。癌癥的治療目前雖然已經(jīng)取得了很大的進步，但還未能從根本上治療癌癥。目前上市的抗癌藥物雖然具有一定的療效，但它們大多是細胞毒藥物，具有嚴重的毒副作用。因此，如何從有效的腫瘤靶點出發(fā)來研究靶向性的新型抗癌藥物成為醫(yī)藥工作者的當務(wù)之急。
泛素-蛋白酶體途徑(Ubiquitin-Proteasome Pathway，簡稱UPP)能夠調(diào)控參與細胞周期控制的蛋白質(zhì)的水平，這一途徑與癌癥、心腦血管疾病及神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病的發(fā)病等都有重要的關(guān)系。使用一些有效的抑制劑來抑制這一途徑過度降解重要的蛋白質(zhì)將會為上述疾病的治療提供新的思路。針對這一新型靶點，美國千年制藥公司于2003年在美國成功地上市了第一個蛋白酶體抑制劑萬珂，用于復(fù)發(fā)性骨髓瘤的治療。2004年該藥又被批準在歐盟上市。2005年9月，該藥由西安楊森首次在我國廣州上市。2005年，該藥同時在法國、比利時和荷蘭獲得具有醫(yī)藥界的諾貝爾獎稱號的“PrixGalien”獎。在2007年7月11日又經(jīng)美國FDA批準用于治療復(fù)發(fā)或難治性套細胞淋巴瘤(Mantle Cell Lymphoma，簡稱MCL)，成為目前唯一獲FDA批準用于治療MCL的藥物。
2007年萬珂的銷售額達到7.64億美元，與2006年相比增長20％。2008年5月日本制藥大亨武田制藥收購了千年公司，從而使得該藥預(yù)計在2008年全年銷售額達到13億美元，目前占市場份額的57.19％，預(yù)計到2011年市場份額達到69.36％。萬珂在中國市場售價為每支約1萬4千元，治療一個周期費用約4萬元。這樣昂貴的藥物對許多患者來說是非常沉重的經(jīng)濟負擔(dān)。而且，目前的臨床數(shù)據(jù)顯示，這類藥物也存在比較多的副作用，如腹瀉、嘔吐以及神經(jīng)病變等。因此，如何開發(fā)出一種價廉、療效更高、副作用更低的蛋白酶體抑制劑藥物是目前我們所關(guān)注的問題。
針對這一療效確證的靶點，我們設(shè)計了一類結(jié)構(gòu)全新的蛋白酶體抑制劑。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種結(jié)構(gòu)新穎的且具有抑制蛋白酶體功能的新型硼酸和硼酸酯類化合物。它們作為20S蛋白酶體抑制劑，能阻斷腫瘤細胞增殖，誘發(fā)腫瘤細胞凋亡，從而可用于人和動物的多種疾病如惡性腫瘤的治療和預(yù)防。
本發(fā)明的另一目的是提供一種上述肽硼酸及其酯類化合物的制備方法。
本發(fā)明還有一個目的是提供一種上述肽硼酸及其酯類化合物在制備抗腫瘤藥物方面的應(yīng)用。
本發(fā)明的目的具體可以通過以下措施來達到 一種肽硼酸及其酯類化合物，其結(jié)構(gòu)如式I所示，
其中 R1為C1～10的烷基、C3～6的環(huán)烷基或雜環(huán)烷基、苯基、萘基或吲哚基，任選地被C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、氰基、羥基、巰基、氨基或鹵素取代；R1優(yōu)選為C1～10的烷基、苯基、萘基或吲哚基，任選地被C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、氰基、羥基、巰基、氨基或鹵素取代；R1最優(yōu)選為C1～10的烷基或苯基，任選地被C1～4的烷基、C1～4的烷氧基或鹵素取代。
R2為C1～10的烷基、C3～6的環(huán)烷基或雜環(huán)烷基、芐基、萘甲基或吲哚甲基，任選地被C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、氰基、羥基、巰基、氨基或鹵素取代；R2優(yōu)選為C1～10的烷基、芐基、萘甲基或吲哚甲基，任選地被C1～4的烷基、氰基、羥基、巰基、氨基或鹵素取代；R2最優(yōu)選為C1～10的烷基或芐基，任選地被C1～4的烷基取代。
Z1或Z2分別獨立地為羥基、C1～10的烷基、C1～10的烷氧基或芳氧基，或者B、Z1和Z2一起形成含有N、S或O的雜環(huán)基團；Z1或Z2優(yōu)選分別獨立地為羥基、C1～10的烷基、C1～10的烷氧基或芳氧基，或者B、Z1和Z2一起形成硼酸-α-蒎烷二醇酯；Z1或Z2最優(yōu)選分別獨立地為羥基，或者B、Z1和Z2一起形成硼酸-α-蒎烷二醇酯。
Pg為C1～10的烷?；?、C1～10的烷氧?；蚍枷阕艴；?，或者含有N、S或O的雜環(huán)?；鶊F，任選地被C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、鹵素或C1～4的鹵代烷基取代；Pg優(yōu)選為C1～10的烷氧酰基、苯酰基、吡啶?；⑦拎乎；?，任選地被C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、鹵素或C1～4的鹵代烷基取代；Pg最優(yōu)選為C1～10的烷氧甲酰基、苯甲酰基、吡啶甲酰基、吡嗪甲?；芜x地被C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、鹵素或C1～4的鹵代烷基即代。更進一步，Pg進一步優(yōu)選為
其中R3或R4分別獨立地為氫、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴或三氟甲基。
本發(fā)明R1、R2和Pg基團中的“任選地被…取代”是指R1、R2和Pg的基團可以被這些基團取代，也可以不被這些基團取代，即并不僅限于被所列舉的這些基團取代的情況，也包括不被所列舉的這些基團取代的情況。這種表達方式與“R1為取代或非取代的C1～10的烷基、C3～6的環(huán)烷基或雜環(huán)烷基、苯基、萘基或吲哚基，其中取代基為C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、氰基、羥基、巰基、氨基或鹵素”的表達方式相同，但是取代或非取代的限定并非僅狹義地指C1～10的烷基，而是擴大到所有所述的基團，即包括取代或非取代的C3～6的環(huán)烷基或雜環(huán)烷基、取代或非取代的芐基、取代或非取代的萘甲基、取代或非取代的吲哚甲基等，其中取代基為C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、氰基、羥基、巰基、氨基或鹵素。
術(shù)語“烷基”用于表示飽和烴基，C1～10的烷基是指含有1～10個碳原子的飽和烴基，C1～4的烷基是指含有1～10個碳原子的飽和烴基。
術(shù)語“環(huán)烷基”指非芳族碳環(huán)基，包括環(huán)化的烷基。環(huán)烷基可以包括二環(huán)或多環(huán)系統(tǒng)。環(huán)烷基的例子包括環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基，環(huán)庚基，C3～6的環(huán)烷基是指含有1～10個碳原子的環(huán)烷基。
術(shù)語“芐基”是指苯甲基，取代的芐基是指在芐基的苯環(huán)上至少一個氫原子被非氫部分取代，芐基的取代基可以是鹵素，-CN，-OH，-SH，-NH2，1-6個碳的直鏈或支鏈烷基，1-6個碳的取代的直鏈或支鏈烷基。
術(shù)語“雜環(huán)烷基”是指非芳族雜碳環(huán)基，包括環(huán)化的烷基，其中一個或多個成環(huán)碳原子被雜原子例如O，N或S原子取代。雜環(huán)烷基優(yōu)選具有3，4，5，6或7個成環(huán)原子。
“1-萘甲基”是指
“2-萘甲基”是指
“吲哚甲基”是指
“烷氧基”是指-O-烷基基團，其碳原子數(shù)一般為1～10個。烷氧基的例子包括甲氧基，乙氧基，丙氧基(如，n-丙氧基和異丙氧基)，t-丁氧基等。
“芳基”是指芳族碳環(huán)基，包括單環(huán)或多環(huán)芳烴例如苯基，萘基，蒽基，菲基等。
“芳氧基”是指-O-芳基，而芳基的概念如上所述，芳氧基最優(yōu)選的例子是苯氧基。
“鹵素”包括氟，氯，溴和碘。
本發(fā)明化合物中的R2基團可以為消旋體，也可以具有光學(xué)活性，本發(fā)明中的R2基團優(yōu)選為R構(gòu)型。
本發(fā)明化合物可以用以制備抗腫瘤藥物，其總的制備路線為
該反應(yīng)式中各基團Pg，R1，R2，Z1，Z2的定義如前所述，式(II-1)在SOCl2作用下與甲醇反應(yīng)得到式(II-2)，式(II-2)在肽縮合劑下與Pg縮合生成式(II-3)或者式(II-2)與酰氯的Pg反應(yīng)生成式(II-3)，式(II-3)皂化再酸化生成(II)；而另一邊，(III-6)與金屬試劑R2MgX反應(yīng)，再在室溫下被無水ZnCl2催化成式(III-7)，式(III-7)與MN(SiMe3)2反應(yīng)生成式(III-8)，式(III-8)在酸性條件下脫保護形成式(III)；最后(II)和(III)縮合成式(I)。式(I)還可脫除與B連接的基團從而得到硼酸產(chǎn)物。
以下詳述本發(fā)明化合物的制備方法
Pg，R1，R2，Z1，Z2的定義如上所述。
化合物(II)的制備方法包括如下的步驟 1)式(II-1)結(jié)構(gòu)的氨基酸在SOCl2作用下與甲醇反應(yīng)得到式(II-2)結(jié)構(gòu)的化合物； 2)式(II-3)結(jié)構(gòu)的化合物可以通過以下兩種途徑來制備a、式(II-2)結(jié)構(gòu)的化合物在肽縮合劑存在下，與Pg發(fā)生縮合反應(yīng)，生成式(II-3)的化合物；b、Pg首先與SOCl2發(fā)生反應(yīng)生成酰氯，然后再與式(II-2)結(jié)構(gòu)的化合物反應(yīng)生成式(II-3)結(jié)構(gòu)的化合物。
3)式(II-3)結(jié)構(gòu)的化合物在堿性條件下發(fā)生皂化反應(yīng)生成其鈉鹽，然后在酸性條件下生成化合物(II)。

其中，Pg和R1的定義如上所述。
上述反應(yīng)中常見的肽縮合劑為N，N-二環(huán)己基-碳二亞胺(縮寫為DCC)，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(縮寫為EDC·HCl)，1-羥基苯并三氮唑(縮寫為HOBt)或氯甲酸異丁酯。
化合物(III)的制備方法包括如下的步驟(以B、Z1和Z2一起構(gòu)成硼酸-α-蒎烷二醇酯為例) 1)式(III-1)所示的α-蒎烯在氧化劑OsO4的作用下生成手性的蒎烷二醇(III-2)； 2)干燥的CH2C12在-110℃下與正丁基鋰發(fā)生反應(yīng)，生成式(III-3)所示的有機金屬中間體； 3)式(III-3)結(jié)構(gòu)的化合物與式(III-4)所示的硼酸酯在-110℃下反應(yīng)，生成式(III-5)所示的同源硼酸酯； 4)式(III-5)結(jié)構(gòu)的化合物與式(III-2)結(jié)構(gòu)的手性蒎烷二醇進行酯交換，生成式(III-6)所示的硼酸酯； 5)式(III-6)結(jié)構(gòu)的化合物與金屬試劑R2MgX在-78℃下反應(yīng)，然后在室溫下被無水ZnCl2催化生成式(III-7)所示的化合物； 6)式(III-7)結(jié)構(gòu)的化合物與MN(SiMe3)2反應(yīng)生成雙(三甲基硅)保護的胺基硼酸酯如式(III-8)所示的化合物； 7)式(III-8)所示的化合物在酸性條件下將保護基雙(三甲基硅)脫除生成氨基裸露的如式(III)所示的硼酸酯類化合物。

其中，R1的定義同前所述，R5是指1到4個碳原子的直鏈、支鏈或取代烷烴，X代表鹵素如F、Cl、Br、I，M代表堿金屬如Li、Na、K等。
最后將化合物(II)和(III)在一定的縮合劑存在下反應(yīng)生成(I)。所用縮合劑為TBTU(O-苯并三氮唑-N，N，N’，N’-四甲脲四氟硼酸酯)，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(縮寫為EDC·HCl)，1-羥基苯并三氮唑(縮寫為HOBt)或氯甲酸異丁酯。
式(I)所示的硼酸酯化合物可以脫去酯基生成硼酸，即脫去Z1和Z2基團生成式(IV)化合物，反應(yīng)方程式如下
脫除酯基的方法有兩種一是在高碘酸鈉的作用下，二醇發(fā)生斷裂，生成硼酸的鈉鹽，將體系pH值調(diào)為酸性，得到硼酸；二是硼酸酯與空間位阻較大的硼酸(如異丁基硼酸、苯基硼酸)發(fā)生酯交換得到目的產(chǎn)物硼酸，經(jīng)過一些分離手段得到產(chǎn)物。
本發(fā)明的發(fā)明人通過實驗證實，本發(fā)明化合物具有良好的抑制蛋白酶體的活性和抗腫瘤活性，部分化合物在納摩爾水平下表現(xiàn)出較好的蛋白酶體抑制活性和抗腫瘤作用，具有制備蛋白酶體抑制劑或抗腫瘤藥物方面的應(yīng)用價值。同時，本發(fā)明所設(shè)計的化合物制備方法產(chǎn)率較高，工藝簡單，可適合于工業(yè)化生產(chǎn)。

具體實施例方式 第一部分 化合物的合成 本發(fā)明的化合物的制備可按照如下過程實施 一、化合物(II)的制備
1、β-氨基酸甲酯鹽酸鹽II-2的制備 將不帶任何保護基的β-氨基酸II-1溶解于無水甲醇中，-5℃下向反應(yīng)體系中滴加SOCl2，緩慢升至室溫后反應(yīng)1小時，再回流1小時。蒸除溶劑，得到的固體經(jīng)重結(jié)晶(甲醇/乙醚)得到β-氨基酸甲酯的鹽酸鹽(式II-2)。
2、氨基保護的β-氨基酸甲酯II-3的制備 方法a 將氨基保護劑Pg和1中所制備的β-氨基酸甲酯II-2溶于THF中，0℃下加入N-甲基嗎啉及合適的肽縮合反應(yīng)試劑(DCC+HOBt)。緩慢升至室溫，繼續(xù)反應(yīng)一定時間，直至TLC顯示反應(yīng)完成。過濾除去不溶性固體，蒸干濾液，向得到的粘稠液體中加入適量的乙酸乙酯溶解，有機相分別用堿洗(5％碳酸氫鈉)，酸洗(10％檸檬酸)，堿洗(5％碳酸氫鈉)及飽和食鹽水洗。干燥劑干燥(無水硫酸鈉或無水硫酸鎂)。濾除干燥劑，減壓蒸干溶劑，得到氨基保護的β-氨基酸甲酯II-3的粗產(chǎn)品。粗產(chǎn)品未經(jīng)純化，直接用于下步皂化反應(yīng)。
方法b 在0℃下，將氨基保護劑Pg溶解于SOCl2中，加入催化量的干燥DMF，室溫下反應(yīng)20分鐘，升溫到50℃反應(yīng)一定時間，蒸除未反應(yīng)的SOCl2。得到保護劑Pg的酰氯。用適量的干燥甲苯溶解，干燥放置備用。
將β-氨基酸甲酯II-2溶于有機溶劑(甲苯)中，加入過量的N-甲基嗎啉，在0℃下滴加上述制備的Pg的酰氯的甲苯溶液。在0℃下反應(yīng)一定時間，然后緩慢升至室溫反應(yīng)一定時間，直至TLC顯示反應(yīng)完成。減壓蒸除溶劑，得到的固體用適量有機溶劑(乙酸乙酯)溶解，分別用堿洗(5％碳酸氫鈉)，酸洗(10％檸檬酸)，堿洗(5％碳酸氫鈉)及飽和食鹽水洗。干燥劑干燥(無水硫酸鈉和無水硫酸鎂)。濾除干燥劑，減壓蒸干溶劑，得到氨基保護的β-氨基酸甲酯II-3的粗產(chǎn)品。粗產(chǎn)品未經(jīng)純化，直接用于下步皂化反應(yīng)。
3、化合物II的制備 將上述制備好的II-3的粗產(chǎn)品溶解于有機溶劑(丙酮或甲醇)中，在0℃下加入無機堿的水溶液(2N NaOH)，使體系pH值保持在11～13之間，直至TLC顯示反應(yīng)完成。減壓蒸除有機溶劑，在0℃下滴加無機酸的水溶液(5N HCl)直至體系pH值為1～3之間。用有機溶劑(乙酸乙酯)萃取，有機相用干燥劑干燥(無水硫酸鈉或無水硫酸鎂)。濾除干燥劑，減壓蒸干溶劑，得到較純產(chǎn)物II。
二、化合物(III)的制備 1、化合物III-a的制備
1)III-2a的制備 將Me3NO·2H2O溶解于水中，向反應(yīng)體系中加入III-1a、叔丁醇、少量吡啶及催化量的四氧化鋨。一定溫度下(100℃)加熱回流24小時，TLC檢測反應(yīng)完畢。自然降至室溫，加入適量還原劑(NaHSO3)及固體食鹽。分液，水層用有機溶劑(乙醚)提取，合并有機相，有機相用干燥劑干燥(無水硫酸鈉和無水硫酸鎂)。濾除干燥劑，減壓蒸干溶劑，得到粘稠液體。過柱得到產(chǎn)品III-2a。
2)化合物III-3的制備 在-110℃下，向惰性氣體(如N2或Ar氣)保護的無水二氯甲烷和無水四氫呋喃體系中慢慢滴加正丁基鋰溶液，滴加完畢后保持-110℃繼續(xù)反應(yīng)1小時。得到化合物III-3的溶液。直接用于下步反應(yīng)。
3)化合物III-5的制備 在-110℃下，向2)中制備好的化合物III-3的反應(yīng)體系中慢慢滴加式III-4所示的硼酸三酯，保持-110℃攪拌1小時后加入無機酸溶液(5N HCl)淬滅反應(yīng)，自然升至室溫。分液，水層用有機溶劑(乙醚)萃取，合并有機相，有機相用干燥劑干燥(無水硫酸鈉或無水硫酸鎂)。濾除干燥劑，減壓蒸干溶劑得白色粘稠狀固體化合物III-5。產(chǎn)品未經(jīng)純化直接用于下步反應(yīng)。
4)化合物III-6a的制備 將化合物III-5用有機溶劑(無水乙醚或二氯甲烷)溶解，加入制備好的III-2a，室溫攪拌反應(yīng)18小時后，TLC顯示反應(yīng)完成。分液，水相用有機溶劑(乙酸乙酯)提取，合并有機相，有機相用干燥劑干燥(無水硫酸鈉和無水硫酸鎂)。濾除干燥劑，減壓蒸干溶劑，經(jīng)柱層析分離得化合物III-6a。
5)格式試劑R2MgX的制備 在嚴格干燥過的反應(yīng)瓶內(nèi)加入鎂屑、無水有機溶劑(無水THF或無水乙醚)及一小粒碘片。室溫下向反應(yīng)體系中滴加鹵代烴R2X和無水有機溶劑(無水THF或無水乙醚)的混合溶液。用水浴將反應(yīng)體系加熱至微沸狀態(tài)，待大部分鎂反應(yīng)完后，加熱回流體系30分鐘，使剩余的鎂全部反應(yīng)完全。使反應(yīng)體系慢慢冷卻，備用。
6)化合物III-7a的制備 在惰性氣體(如N2或Ar氣)保護下，用無水有機溶劑(無水THF或乙醚)溶解III-6a，反應(yīng)體系降溫至-78℃。向其中慢慢滴加5)中制備好的R2MgX格式試劑的有機溶劑(無水THF或乙醚)溶液。滴加完畢后，加入干燥好的ZnCl2粉末。反應(yīng)體系自然升至室溫，室溫下繼續(xù)攪拌18h后TLC顯示反應(yīng)完成。過濾除去固體，濃縮后柱層析分離得化合物III-7a。
7)化合物III-8a的制備 用無水有機溶劑(無水THF)溶解6)中制備好的III-7a，反應(yīng)體系用惰性氣體(如N2或Ar氣)保護并降溫至-78℃，然后慢慢滴加MN(SiMe3)2溶液。滴加完畢后，自然升至室溫，室溫下繼續(xù)攪拌。TLC檢測顯示，20h后反應(yīng)完畢。減壓蒸除溶劑，得到粘稠液體。加入正己烷溶解，過濾除去不溶物，得到III-8a的正己烷溶液。備用。
8)化合物III-a的制備 將上述制備好的III-8a的正己烷溶液用惰性氣體(如N2或Ar氣)保護并降溫至-78℃。向反應(yīng)體系中加入溶解氯化氫氣體的有機溶劑(如二氧六環(huán)、乙醚)溶液，然后自然升至室溫，析出固體。過濾，濾餅用有機溶劑(無水乙醚)洗滌，得到化合物III-a。產(chǎn)品未經(jīng)純化，直接用于下步反應(yīng)。
2、化合物III-b的制備
1)III-2b的制備 將Me3NO·2H2O溶解于水中，向反應(yīng)體系中加入III-1b、叔丁醇、少量吡啶及催化量的四氧化鋨。一定溫度下(100℃)加熱回流48小時，TLC檢測反應(yīng)完畢。自然降至室溫，加入適量還原劑(NaHSO3)及固體食鹽。減壓蒸餾除去有機溶劑，向殘余的液體和固體的混合物中加入有機溶劑(乙醚和乙酸乙酯)，分液，水層用有機溶劑(乙醚和乙酸乙酯)提取，合并有機相，有機相用干燥劑干燥(無水硫酸鈉或無水硫酸鎂)。濾除干燥劑，減壓蒸干溶劑，得到粘稠液體。高真空度下減壓蒸餾得產(chǎn)品III-2b。
2)化合物III-3的制備 在-110℃下，向惰性氣體(如N2或Ar氣)保護的無水二氯甲烷和無水四氫呋喃體系中慢慢滴加正丁基鋰溶液，滴加完畢后保持-110℃繼續(xù)反應(yīng)1小時。得到化合物III-3的溶液。直接用于下步反應(yīng)。
3)化合物III-5的制備 在-110℃下，向2)中制備好的化合物III-3的反應(yīng)體系中慢慢滴加式III-4所示的硼酸三酯，保持-110℃攪拌1小時后加入無機酸溶液(5N HCl)淬滅反應(yīng)，自然升至室溫。分液，水層用有機溶劑(乙醚)萃取，合并有機相，有機相用干燥劑干燥(無水硫酸鈉和無水硫酸鎂)。濾除干燥劑，減壓蒸干溶劑得白色粘稠狀固體化合物III-5。產(chǎn)品未經(jīng)純化直接用于下步反應(yīng)。
4)化合物III-6b的制備 將化合物III-5用有機溶劑(無水乙醚或二氯甲烷)溶解，加入制備好的III-2b，室溫攪拌反應(yīng)24小時后，TLC顯示反應(yīng)完成。減壓蒸除有機溶劑，向剩余粘稠液體中加入有機萃取劑(乙酸乙酯或乙醚)，分液，水相用有機溶劑(乙酸乙酯或乙醚)提取，合并有機相，有機相用干燥劑干燥(無水硫酸鈉或無水硫酸鎂)。濾除干燥劑，減壓蒸干溶劑，經(jīng)柱層析分離得化合物III-6b。
5)格式試劑R2MgX的制備 在嚴格干燥過的反應(yīng)瓶內(nèi)加入鎂屑、無水有機溶劑(無水THF或無水乙醚)及一小粒碘片。室溫下向反應(yīng)體系中滴加鹵代烴R2X和無水有機溶劑(無水THF或無水乙醚)的混合溶液。用水浴將反應(yīng)體系加熱。使溶液呈微沸狀態(tài)，待大部分鎂反應(yīng)完后，加熱回流體系30分鐘，使剩余的鎂全部反應(yīng)完全。使反應(yīng)體系慢慢冷卻，備用。
6)化合物III-7b的制備 在惰性氣體(如N2或Ar氣)保護下，用無水有機溶劑(無水THF或乙醚)溶解III-6b，反應(yīng)體系降溫至-78℃。向其中慢慢滴加5)中制備好的R2MgX格式試劑的有機溶劑(無水THF或乙醚)溶液。滴加完畢后，加入干燥好的ZnCl2粉末。反應(yīng)體系自然升至室溫，室溫下繼續(xù)攪拌24h后TLC顯示反應(yīng)完成。過濾除去固體，濃縮后柱層析分離得化合物III-7b。
7)化合物III-8b的制備 用無水有機溶劑(無水THF)溶解6)中制備好的III-7b，反應(yīng)體系用惰性氣體(如N2或Ar氣)保護并降溫至-78℃，然后慢慢滴加MN(SiMe3)2溶液。滴加完畢后，自然升至室溫，室溫下繼續(xù)攪拌。TLC檢測顯示，24h后反應(yīng)完畢。減壓蒸除溶劑，得到的粘稠液體。加入大量干燥的石油醚溶解，過濾除去不溶物，得到III-8b的石油醚溶液，備用。
8)化合物III-b的制備 將上述制備好的III-8b的石油醚溶液用惰性氣體(如N2或Ar氣)保護并降溫至-78℃。向反應(yīng)體系中加入溶解氯化氫氣體的有機溶劑(如二氧六環(huán)、乙醚)溶液，然后自然升至室溫，析出固體。過濾，濾餅用干燥的有機溶劑(無水乙醚)洗滌，得到化合物III-b。產(chǎn)品未經(jīng)純化，直接用于下步反應(yīng)。
三、化合物(I)的制備
1、硼酸酯(I)的制備 將II及III溶解在有機溶劑(如THF、CH2Cl2)中，冷卻到-5℃，加入N-甲基嗎啉及縮合劑(TBTU或EDC·HCl+HOBt或氯甲酸異丁酯)，反應(yīng)2小時后，升至室溫反應(yīng)1小時。過濾除去不溶性固體，減壓蒸干溶劑。得到的固體用有機溶劑(乙酸乙酯)溶解，有機相分別用堿洗(5％碳酸氫鈉)，酸洗(0.1N鹽酸)，堿洗(5％碳酸氫鈉)及飽和食鹽水洗。有機相用干燥劑干燥(無水硫酸鈉和無水硫酸鎂)。濾除干燥劑，減壓蒸干溶劑得玻璃狀固體化合物硼酸酯I。
2、硼酸(IV)的制備
方法a酯交換法 用有機溶劑(如乙醚和CH2Cl2)溶解1中制備的硼酸酯I，加入水及苯基硼酸。室溫攪拌反應(yīng)4小時后TLC顯示反應(yīng)完成。有機相用水提取3遍，合并水相，減壓蒸發(fā)至干。得到的粘稠固體用少量乙醚洗滌，得到膠狀固體化合物硼酸IV。
方法b氧化斷裂法 用有機溶劑(丙酮或甲醇)溶解1中制備的硼酸酯I，然后加入醋酸銨水溶液及NaIO4。室溫下攪拌24小時后，TLC顯示反應(yīng)完成。減壓蒸除有機溶劑，水相用無機酸(鹽酸)調(diào)節(jié)pH值為3，用有機溶劑(乙酸乙酯或CH2Cl2)萃取，合并有機相，有機相用干燥劑干燥(無水硫酸鈉和無水硫酸鎂)。濾除干燥劑，減壓蒸干溶劑得泡沫狀固體化合物硼酸IV。
以下以具體化合物的合成來描述本發(fā)明的化合物制備過程 一、式(II)中化合物的制備
1、N-苯甲?；?β-苯丙氨酸(3aA)的制備 (1)β-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽(1a)的制備
在100mL反應(yīng)瓶中加入25mL無水甲醇，冰鹽浴冷卻到-10℃以下，攪拌下緩慢滴加SOCl2(7mL，96mmol)，然后于-10℃以下反應(yīng)10min，再加入β-苯丙氨酸(1.65g，10mmol)，低溫反應(yīng)40min，撤去冰鹽浴，于室溫反應(yīng)48h，減壓濃縮，再加入15mL甲醇，反復(fù)減壓濃縮兩次。加入50mL乙醚，放置，析出針狀結(jié)晶，過濾干燥，粗產(chǎn)品再用甲醇-乙醚重結(jié)晶，得白色晶體β-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽2.0g，收率95％，[α]D25＝+37.2°(c＝1，CH3CH2OH)，m.p.155-158℃。
本發(fā)明中所用到的其它β氨基酸甲酯的鹽酸鹽可以采用上述步驟制備，化合物1b按合成化合物1a的方法采用β-4-甲基苯基丙氨酸合成；化合物1c按合成化合物1a的方法采用β-4-氯苯基丙氨酸合成；化合物1d按合成化合物1a的方法采用β-4-甲氧基苯基丙氨酸合成。合成的具體化合物及其性質(zhì)如下表。

(2)N-苯甲?；?β-苯丙氨酸甲酯(2aA)的制備
方法aDCC縮合法 將化合物1a(1.12g，5.2mmol)溶于20mL THF中，用N-甲基嗎啉(NMM)(0.7mL，6.2mmol)中和，于冰浴下冷卻備用。在另一反應(yīng)瓶中加入苯甲酸(0.64g，5.2mmol)，用THF 20mL溶解，冰水浴冷卻，于0℃加入二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)(1.07g，5.2mmol)，HOBt(0.84g，6.2mmol)，于0℃反應(yīng)40min，然后加入已制備并冷卻好的中和完畢的1a的THF溶液。TLC檢測反應(yīng)，4h后反應(yīng)完畢，過濾除去不溶物N，N’-二環(huán)己基脲(DCU)，濾液加入乙酸乙酯150mL，分別用5％NaHCO3溶液(30mL)、10％的檸檬酸溶液(30mL)、5％NaHCO3溶液(30mL)和飽和食鹽水溶液洗滌(2×20mL)。乙酸乙酯層用無水Na2SO4干燥，過濾，減壓蒸除溶劑，得化合物1.44g，產(chǎn)物為白色固體，收率98％。產(chǎn)品未經(jīng)純化，直接用于下步反應(yīng)。
方法b酰氯法 在室溫下，向苯甲酸(0.64g，5.2mmol)中加入SOCl2(3.8ml，52mmol)，然后加入催化量的干燥DMF。反應(yīng)20分鐘，再升溫回流反應(yīng)1小時，停止反應(yīng)。蒸除未反應(yīng)的SOCl2。得到苯甲酰氯。將之溶解于10ml干燥的THF中，備用。
將化合物1a(1.12g，5.2mmol)溶于20mLTHF中，加入N-甲基嗎啉(NMM)(0.7mL，6.2mmol)，在0℃下滴加上述制備好的苯甲酰氯的THF溶液。在0℃下反應(yīng)2小時，然后緩慢升至室溫反應(yīng)1小時，TLC顯示反應(yīng)完成。減壓蒸除溶劑，得到的固體用30ml乙酸乙酯溶解，分別用5％碳酸氫鈉(30mL)、10％檸檬酸(30mL)、5％碳酸氫鈉(30mL)及飽和食鹽水洗(2×20mL)。有機相用無水Na2SO4干燥。濾除干燥劑，減壓蒸干溶劑，得到粘稠的白色固體1.42g，收率96.9％。產(chǎn)品未經(jīng)純化，直接用于下步皂化反應(yīng)。
鑒于DCC縮合法得到的產(chǎn)品不但產(chǎn)率高，而且色澤較好，所以本發(fā)明中所用到的其它氨基保護的氨基酸甲酯可以采用實施例(2)中所述的DCC縮合法制備，所有甲酯均未純化，直接用于下步反應(yīng)。
化合物2bA按DCC縮合法利用苯甲酸和1b合成；2cA按DCC縮合法利用苯甲酸和1c合成；2dA按DCC縮合法利用苯甲酸和1d合成；2aB按DCC縮合法利用煙酸(吡啶-3-甲酸)和1a合成；2bB按DCC縮合法利用煙酸和1b合成；2cB按DCC縮合法利用煙酸和1c合成；2dB按DCC縮合法利用煙酸和1d合成；2aC按DCC縮合法利用吡嗪甲酸和1a合成；2bC按DCC縮合法利用吡嗪甲酸和1b合成；2cC按DCC縮合法利用吡嗪甲酸和1c合成；2dC按DCC縮合法利用吡嗪甲酸和1d合成。
合成的具體化合物及其性質(zhì)如下表。


(3)N-苯甲?；?β-苯丙氨酸(3aA)的制備
將化合物2aA(1.0g，3.53mmol)用10mL丙酮溶解，冰水浴下慢慢滴加2N NaOH至pH值為12～13，繼續(xù)保持冰水浴中反應(yīng)，TLC檢測，2h后反應(yīng)完畢。冰水浴下滴加鹽酸至pH值為2～3，產(chǎn)生大量白色固體，過濾產(chǎn)生的沉淀，用水、乙醚洗滌后真空干燥，得白色產(chǎn)品0.89g，收率93.7％，m.p.198.6-199.8℃。1H-NMR(DMSO-d6，500MHz)δ2.78(-CH2，q，J1＝6.15，J2＝9.53，1H)，2.90(-CH2，q，J1＝6.73，J2＝8.95，1H)，5.42～5.45(-CH，m，1H)，7.23～7.25(-Ph，m，1H)，7.32(-Ph，t，J1＝7.84，2H)，7.40～7.42(-Ph，m，2H)，7.45～7.48(-Ph，m，2H)，7.51～7.62(-Ph，m，1H)，7.84～7.86(-Ph，m，2H)，8.86(-CONH，d，J＝8.25，1H)，12.15(-COOH，br，1H)。MS(ESI)observedm/z 268.0[M-H]-，calcd269.1。
本發(fā)明中所用到的其它氨基保護的氨基酸可以采用實施例(3)中所述的方法制備。
3bA將2bA采用實施例(3)的方法合成；3cA將2cA采用實施例(3)的方法合成；3dA將2dA采用實施例(3)的方法合成；3aB將2aB采用實施例(3)的方法合成；3bB將2bB采用實施例(3)的方法合成3cB將2cB采用實施例(3)的方法合成；3dB將2dB采用實施例(3)的方法合成；3aC將2aC采用實施例(3)的方法合成；3bC將2bC采用實施例(3)的方法合成；3cC將2cC采用實施例(3)的方法合成；3dC將2dC采用實施例(3)的方法合成； 合成的具體化合物及其性質(zhì)如下表。



二、式(III)中化合物的制備 1、化合物III-a的制備 (1)(+)-α-蒎烷二醇(化合物III-2a)的制備
將Me3NO·2H2O(165.6g，1.49mol)用216mL水溶解，攪拌下依次加入(+)α-蒎烯1b(191.4g，1.4mol)、1L叔丁醇、108mL吡啶和四氧化鋨(1g，3.9mmol)。然后通入氮氣，10分鐘后，加熱至100℃回流。TLC檢測顯示，72小時反應(yīng)完畢。自然降至室溫，加入NaHSO3(20g，0.19mol)攪拌60分鐘，待溶液顏色變?yōu)榈S色時，再加入60g的NaCl，再攪拌10分鐘后，減壓蒸除有機溶劑。釜底殘液用3×200mL乙醚提取，合并有機相，并用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸除有機溶劑，得到的紅棕色液體高真空度下減壓得白色固體230.1g，收率96.5％，[α]D20＝+8.3°(c＝6.5，甲苯)，m.p.53-56℃。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ0.94(3H，s)，1.27(3H，s)，1.31(3H，s)，1.37(1H，d，J＝5.4)，1.62～1.66(1H，m)，1.91～1.93(1H，m)，2.01(1H，t，J＝5.8)，2.18～2.21(1H，m)，2.44～2.48(1H，m)，2.81～2.95(2H，m)，3.97～4.00(2H，q，J＝5.0)。13C-NMR(CDCl3，125MHz)δ24.15，27.89，28.08，29.64，38.18，39.00，40.60，54.10，69.27，73.88. (2)二氯亞甲基鋰(化合物III-3)的制備
在250mL三口瓶中加入無水二氯甲烷(4.26mL，66mmol)和120mL無水四氫呋喃，通入氮氣，降溫至-110℃，然后慢慢滴加正丁基鋰的正己烷溶液(25.2mL，60mmol)，滴加完畢后低溫繼續(xù)攪拌1小時。溶液直接用于下步反應(yīng)。
(3)二氯亞甲基硼酸二甲酯(化合物III-5-1)的制備
在-110℃下，向上述制備好的化合物III-3a的溶液中加入硼酸三甲酯(7.5mL，66mmol)，繼續(xù)低溫攪拌1小時后加入5N HCl溶液12mL，自然升至室溫。反應(yīng)液轉(zhuǎn)入分液漏斗，分出有機相，水層用乙醚提取(2×10mL)，合并有機相，無水硫酸鈉干燥。蒸除溶劑得白色粘稠狀固體9.3g，收率99.4％。產(chǎn)品未經(jīng)純化直接用于下步反應(yīng)。
(4)二氯亞甲基硼酸二異丙酯(化合物III-5-2)的制備
在-110℃下，向已制備好的化合物III-3a的溶液中加入硼酸三異丙酯(9.3mL，40mmol)，繼續(xù)低溫攪拌2小時后加入5N HCl溶液10mL，自然升至室溫。反應(yīng)液轉(zhuǎn)入分液漏斗，分出有機相，水層用乙醚提取(2×15mL)，合并有機相，無水硫酸鈉干燥。蒸除溶劑得白色粘稠狀固體8.73g，收率＞100％。產(chǎn)品未經(jīng)純化直接用于下步反應(yīng)。
(5)二氯亞甲基硼酸-(+)-α-蒎烷二醇酯(化合物III-6a)的制備
方法a從化合物III-5-1出發(fā) 在25mL瓶中加入化合物II-2a(32.2g，0.19mol)和化合物III-5-1(51.6g，0.33mol)。再加入30mL THF溶解，室溫下攪拌。TLC檢測，20h后反應(yīng)完畢。柱層析分離(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶18)得無色液體49.4g，收率98.9％。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ0.85(3H，s)，1.21(1H，d，J＝11.2)，1.31(3H，s)，1.46(3H，s)，1.93～1.97(2H，m)，2.13(1H，t，J＝5.2)，2.27～2.30(1H，m)，2.38～2.39(1H，m)，4.47(2H，dd，J＝8.8)，5.40(1H，s)。13C-NMR(CDCl3，125MHz)δ23.90，26.19，26.95，28.19，35.00，38.32，39.23，51.17，79.43，88.03。
方法b從化合物III-5-2出發(fā) 在60mL瓶中加入化合物II-2a(2g，0.012mol)和化合物III-5-2(6.36g，0.03mmol)。再加入20mLTHF溶解，室溫下攪拌。TLC檢測，48h后反應(yīng)完畢。柱層析分離(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶15)得無色液體2.92g，收率92.7％。
(6)2-甲基-4-氯-丁基硼酸-(+)-α-蒎烷二醇酯(化合物III-7a)
于250mL三口瓶中加入剪碎的鎂條(1.45g，60mmol)、70mL無水四氫呋喃，再加入一小粒碘，室溫下滴加叔丁基溴(8.22g，60mmol)的四氫呋喃溶液30ml，滴完后加熱微沸至鎂條溶解完畢，自然冷卻得叔丁基格式試劑的四氫呋喃溶液。干燥放置備用。
將二氯甲基硼酸-α-蒎烷二醇酯III-6a(15.78g，60mmol)用100mL無水四氫呋喃溶解。通入干燥的氮氣，并降溫至-78℃，然后慢慢滴加上述制備好的叔丁基格式試劑的四氫呋喃溶液，滴加完畢后，加入干燥好的ZnCl2粉末(4.09g，30mmol)。自然升至室溫，繼續(xù)室溫下攪拌。TLC檢測，18h后反應(yīng)完畢。過濾除去固體，濃縮后柱層析分離(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶200)得無色液體15.26g，收率89.5％。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ0.85(-CH3，s，3H)，0.92(-CH3，q，J＝6.6，6H)，1.19(-CH2，d，J＝11.0，1H)，1.30(-CH3，s，3H)，1.42(-CH3，s，3H)，1.60～1.66(-CH2，m，1H)，1.78～1.80(-CH2，m，1H)，1.88～1.94(-CH2，-CH，m，3H)，2.09(-CH，t，J＝5.1，1H)，2.24～2.26(-CH，m，1H)，2.34～2.37(-CH2，m，1H)，3.51～3.55(-CH，m，1H)，4.35～4.37(-CH，m，1H)。13C-NMR(CDCl3，125MHz)δ21.22，21.27，22.85，23.94，25.58，25.64，26.30，27.02，28.41，35.28，38.25，39.40，42.81，51.26，78.50，86.63。
(7)5-氯-戊基硼酸-(+)-α-蒎烷二醇酯(化合物III-8a)
于100mL三口瓶中加入剪碎的鎂條(0.14g，6mmol)、20mL無水乙醚，再加入一小粒碘，室溫下滴加正丁基溴(0.82g，6mmol)的乙醚溶液10ml，滴完后加熱微沸至鎂條溶解完畢，自然冷卻得正丁基格式試劑的乙醚溶液。干燥處放置備用。
將二氯亞甲基硼酸-α-蒎烷二醇酯III-6a(1.58g，6mmol)用20mL乙醚溶解，室溫下攪拌。通入氮氣，并降溫至-78℃，然后慢慢滴加制好的正丁基格式試劑的乙醚溶液。滴加完畢后，加入干燥好的ZnCl2粉末(0.41g，3mmol)。自然升至室溫，繼續(xù)室溫下攪拌。TLC檢測，18h后反應(yīng)完畢。過濾除去固體，濃縮后柱層析分離(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶250)得無色液體1.44g，收率84.5％。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ0.85(3H，s)，0.91(3H，t，J＝7.2)，1.18(1H，dd，J＝11.0)，1.30(3H，s)，1.31～1.41(3H，m)，1.42(3H，s)，1.48～1.51(1H，m)，1.82～1.95(4H，m)，2.09(1H，t，J＝5.2)，2.23～2.28(1H，m)，2.33～2.39(1H，m)，3.44～3.48(1H，m)，4.36(1H，dd，J＝8.8)。13C-NMR(CDCl3，125MHz)δ13.91，22.19，23.94，26.34，27.02，28.45，29.50，33.91，35.29，38.22，39.41，51.24，78.51，86.65。
(8)1-苯基-2-氯-乙基硼酸-(+)-α-蒎烷二醇酯(化合物III-9a)
于100mL三口瓶中加入剪碎的鎂條(0.12g，5mmol)、20mL無水乙醚，再加入一小粒碘，室溫下滴加芐氯(0.63g，5mmol)的乙醚溶液10ml，滴完后加熱微沸至鎂條溶解完畢，自然冷卻得芐氯的格式試劑的乙醚溶液。干燥處放置備用。
將二氯亞甲基硼酸-α-蒎烷二醇酯III-6a(1.31g，5mmol)用20mL乙醚溶解，室溫下攪拌。通入氮氣，并降溫至-78℃，然后慢慢滴加制好的芐氯的格式試劑的乙醚溶液。滴加完畢后，加入干燥好的ZnCl2粉末(0.41g，3mmol)。自然升至室溫，繼續(xù)室溫下攪拌。TLC檢測，24h后反應(yīng)完畢。過濾除去固體，濃縮后柱層析分離(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶15)得無色液體1.24g，收率77.8％。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ0.83(3H，s)，1.07(1H，d，J＝11.0)，1.28(3H，s)，1.37(3H，s)，1.84～1.90(2H，m)，2.05(1H，t，J＝4.8)，2.15～2.17(1H，m)，2.30～2.34(1H，m)，3.08～3.23(2H，m)，3.64(1H，q，J＝8.6)，4.32(1H，q，J＝8.8)，7.21～7.30(5H，m)。13C-NMR(CDCl3，125MHz)δ23.92，26.18，26.99，28.33，29.68，35.14，38.21，39.34，40.42，51.19，78.54，86.77，126.71，126.76，128.34，129.17，129.23，138.40。
(9)1-對甲苯基-2-氯-乙基硼酸-(+)-α-蒎烷二醇酯(化合物III-10a)
于100mL三口瓶中加入剪碎的鎂條(0.48g，20mmol)、30mL無水乙醚，再加入一小粒碘，室溫下滴加對甲基芐氯(2.81g，20mmol)的乙醚溶液15ml，滴完后加熱微沸至鎂條溶解完畢，自然冷卻得對甲基芐氯的格式試劑的乙醚溶液。干燥處放置備用。
將二氯亞甲基硼酸-α-蒎烷二醇酯III-6a(4.52g，20mmol)用30mL乙醚溶解，室溫下攪拌。通入氮氣，并降溫至-78℃，然后慢慢滴加制好的對甲基芐氯的格式試劑的乙醚溶液。滴加完畢后，加入干燥好的ZnCl2粉末(0.55g，4mmol)。自然升至室溫，繼續(xù)室溫下攪拌。TLC檢測，24h后反應(yīng)完畢。過濾除去固體，濃縮后柱層析分離(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶15)得無色液體5.33g，收率80.3％。1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ0.83(3H，s)，1.09(1H，d，J＝11.1)，1.28(3H，s)，1.38(3H，s)，1.83～1.92(2H，m)，2.06(1H，t，J＝5.0)，2.14～2.21(1H，m)，2.29～2.37(4H，m)，3.01～3.21(2H，m)，3.58～3.66(1H，m)，4.29～4.36(1H，m)，7.08～7.16(4H，m)。13C-NMR(CDCl3，75MHz)δ21.02，23.91，26.10，26.23，27.00，28.33，35.15，38.21，39.35，40.01，51.21，78.52，86.71，128.26，128.96，129.02，129.08，135.30，136.21。
(10)1-對氟苯基-2-氯-乙基硼酸-(+)-α-蒎烷二醇酯(化合物III-11a)
于100mL三口瓶中加入剪碎的鎂條(0.24g，10mmol)、15mL無水乙醚，再加入一小粒碘，室溫下滴加對氟芐溴(3.36g，10mmol)的乙醚溶液10ml，滴完后加熱微沸至鎂條溶解完畢，自然冷卻得對氟芐溴的格式試劑的乙醚溶液。干燥處放置備用。
將二氯亞甲基硼酸-α-蒎烷二醇酯III-6a(2.26g，10mmol)用20mL乙醚溶解，室溫下攪拌。通入氮氣，并降溫至-78℃，然后慢慢滴加制好的對氟芐溴的格式試劑的乙醚溶液。滴加完畢后，加入干燥好的ZnCl2粉末(0.27g，2mmol)。自然升至室溫，繼續(xù)室溫下攪拌。TLC檢測，24h后反應(yīng)完畢。過濾除去固體，濃縮后柱層析分離(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶10)得無色液體2.04g，收率60.7％。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ0.82(3H，s)，1.00(1H，dd，J＝11.1)，1.28(3H，s)，1.36(3H，s)，1.83～1.90(2H，m)，2.06(1H，t，J＝5.3)，2.31～2.35(1H，m)，3.04～3.19(2H，m)，3.58～3.63(1H，m)，4.30～4.35(1H，m)，6.95～6.99(2H，m)，7.22～7.26(2H，m)。13C-NMR(CDCl3，125MHz)δ23.95，26.16，26.99，28.40，35.19，39.35，39.65，51.23，71.49，78.68，86.92，115.21，130.79，134.22，162.90。
(11)2-甲基-4-氨基-丁基硼酸-(+)-α-蒎烷二醇酯鹽酸鹽(化合物III-12a)
于150mL單口瓶中加入LiN(SiMe3)2(10mL，10mmol)，通入氮氣，并降溫至～78℃，然后用注射器慢慢加入含有2-甲基-4-氯-丁基硼酸-α-蒎烷二醇酯III-7a(2.85g，10mmol)的THF溶液10mL，滴加完畢后，自然升至室溫，繼續(xù)室溫下攪拌。TLC檢測，20h后反應(yīng)完畢。減壓蒸除溶劑，加入30mL正己烷溶解，過濾除去不溶物。將濾液降溫至～78℃，加入23mL濃度為1.3M氯化氫的乙醚溶液，然后自然升至室溫，出現(xiàn)大量乳白色固體。冷凍使固體完全析出，過濾，乙醚洗滌產(chǎn)品得乳白色固體2.11g，收率70.1％。1H-NMR(DMSO-d6，500MHz)δ0.82(3H，s)，0.85～0.88(6H，m)，1.12～1.16(1H，m)，1.26(3H，s)，1.37(3H，s)，145～1.55(2H，m)，1.72～1.78(2H，m)，1.87～1.89(1H，m)，2.00(1H，t，J＝5.4)，2.17～2.20(1H，m)，2.7-2.76(1H，m)，4.42～4.45(1H，m)，7.42(3H，t，J＝50.7)，7.98(3H，s，)。13C-NMR(CDCl3，125MHz)δ22.07，22.43，23.53，24.41，25.82，26.75，28.07，34.59，37.76，38.33，38.79，50.69，75.49，77.52，86.55。MS(ESI)observedm/z 266.3[M+H]+，calcd265.2。
(12)5-氨基-戊基硼酸-(+)-α-蒎烷二醇酯鹽酸鹽(化合物III-13a)
于150mL單口瓶中加入LiN(SiMe3)2(15mL，15mmol)，通入氮氣，并降溫至-78℃，然后用注射器慢慢加入含有5-氯-戊基硼酸-α-蒎烷二醇酯III-8a(4.28g，15mmol)的THF溶液15mL，滴加完畢后，自然升至室溫，繼續(xù)室溫下攪拌。TLC檢測，18h后反應(yīng)完畢。減壓蒸除溶劑，加入30mL正己烷溶解，過濾除去不溶物。將濾液降溫至-78℃，加入34.5mL濃度為1.3M氯化氫的乙醚溶液，然后自然升至室溫，出現(xiàn)大量乳白色固體。冷凍使固體完全析出。過濾，乙醚洗滌產(chǎn)品得乳白色固體3.86g，收率76.7％。1H-NMR(DMSO-d6，500MHz)δ0.83(3H，s)，0.86(3H，J＝6.6)，1.12～1.16(1H，m)，1.24～1.32(5H，m)，1.38(3H，s)，161～1.63(2H，m)，1.76(2H，d，J＝14.5)，1.88～1.90(1H，m)，2.01(1H，t，J＝5.6)，2.19～2.21(1H，m)，2.32～2.36(1H，m)，2.72～2.74(1H，m)，4.45(1H，d，J＝8.9)，7.30(3H，t，J＝50.7)，7.90(3H，s)。13C-NMR(CDCl3，125MHz)δ13.60，21.79，23.51，24.41，25.87，26.74，28.00，28.85，34.63，37.76，38.79，50.67，75.45，77.53，86.58。MS(ESI)observedm/z 266.3[M+H]+，calcd265.2。
(13)1-苯基-2-氨基-乙基硼酸-(+)-α-蒎烷二醇酯鹽酸鹽(化合物III-14a)
于100mL單口瓶中加入LiN(SiMe3)2(10mL，10mmol)，通入氮氣，并降溫至-78℃，然后用注射器慢慢加入含有1-苯基-2-氯-乙基硼酸-α-蒎烷二醇酯III-9a(3.19g，10mmol)的THF溶液10mL，滴加完畢后，自然升至室溫，繼續(xù)室溫下攪拌。TLC檢測，24h后反應(yīng)完畢。減壓蒸除溶劑，加入30mL正己烷溶解，過濾除去不溶物。將濾液降溫至-78℃，加入23mL濃度為1.3M氯化氫的乙醚溶液，然后自然升至室溫，出現(xiàn)大量乳白色固體。冷凍使固體完全析出。過濾，乙醚洗滌產(chǎn)品得乳白色固體2.31g，收率68.8％。1H-NMR(DMSO-d6，500MHz)δ0.78(3H，s)，1.06(1H，d，J＝10.9)，1.23(3H，s)，1.26(3H，s)，1.62～1.66(2H，m)，1.80～1.83(1H，m)，2.00(1H，t，J＝5.4)，2.07～2.11(1H，m)，2.23～2.27(1H，m)，2.88～2.93(1H，m)，3.03～3.10(2H，m)，4.35(1H，dd，J＝8.8)，7.22～7.32(5H，m)，7.42(3H，t，J＝50.7)，8.14(3H，s)。13C-NMR(CDCl3，125MHz)δ23.50，25.76，26.73，27.97，34.38，35.14，37.72，38.72，50.57，77.50，86.55，126.65，128.28，128.33，129.04，129.08，136.92。MS(ESI)observedm/z 300.3[M+H]+，calcd299.2。。
(14)1-對甲苯基-2-氨基-乙基硼酸-(+)-α-蒎烷二醇酯鹽酸鹽(化合物III-15a)
于100mL單口瓶中加入LiN(SiMe3)2(3mL，3mmol)，通入氮氣，并降溫至-78℃，然后慢慢加入含有1-對甲苯基-2-氯-乙基硼酸-α-蒎烷二醇酯III-10a(1g，3mmol)的THF溶液5mL，滴加完畢后，自然升至室溫，繼續(xù)室溫下攪拌。TLC檢測，24h后反應(yīng)完畢。減壓蒸除溶劑，加入40mL正己烷溶解，過濾除去不溶物。將濾液降溫至-78℃，加入6.9mL濃度為1.3M氯化氫的乙醚溶液，然后自然升至室溫，出現(xiàn)大量乳白色固體。冷凍使固體完全析出。過濾，乙醚洗滌產(chǎn)品得乳白色固體0.76g，收率72.5％。1H-NMR(DMSO-d6，500MHz)δ0.78(3H，s)，1.08(1H，d，J＝10.9)，1.23(3H，s)，1.27(3H，s)，1.63～1.67(2H，m)，1.81～1.84(1H，m)，1.94(1H，t，J＝5.4)，2.09～2.11(1H，m)，2.23～2.28(4H，m)，2.85～2.89(1H，m)，2.97～3.03(2H，m)，4.35(1H，dd，J＝8.9)，7.11(5H，q，J＝8.1)，7.45(3H，t，J＝50.7)，8.12(3H，s)。13C-NMR(CDCl3，125MHz)δ20.50，23.44，25.72，26.70，27.93，34.33，34.65，37.67，38.72，50.59，77.50，86.49，128.77，128.82，128.90，128.95，133.80，135，56。MS(ESI)observedm/z 314.3[M+H]+，calcd313.2。
(15)1-對氟苯基-2-氨基-乙基硼酸-(+)-α-蒎烷二醇酯鹽酸鹽(化合物III-16a)
于100mL單口瓶中加入LiN(SiMe3)2(10mL，10mmol)，通入氮氣，并降溫至-78℃，然后慢慢加入含有1-對氟苯基-2-氯-乙基硼酸-α-蒎烷二醇酯III-11a(3.36g，10mmol)的THF溶液10mL，滴加完畢后，自然升至室溫，繼續(xù)室溫下攪拌。TLC檢測，24h后反應(yīng)完畢。減壓蒸除溶劑，加入60mL正己烷溶解，過濾除去不溶物。將濾液降溫至-78℃，加入23mL濃度為1.3M氯化氫的乙醚溶液，然后自然升至室溫，出現(xiàn)大量淡黃色固體。冷凍使固體完全析出。過濾，乙醚洗滌產(chǎn)品得乳白色固體1.93g，收率54.6％。1H-NMR(DMSO-d6，500MHz)δ0.77(3H，s)，0.95(1H，d，J＝10.9)，1.22(3H，s)，1.26(3H，s)，1.63～1.66(1H，m)，1.81(1H，d，J＝5.1)，1.92(1H，t，J＝11.0)，2.06～2.11(1H，m)，2.22～2.27(1H，m)，2.88～2.93(1H，m)，3.01～3.09(2H，m)，4.34～4.36(1H，m)，7.11(2H，t，J＝8.9)，7.28～7.31(2H，q，J＝5.7)，7.38(3H，t，J＝50.3)，8.18(3H，s)。13C-NMR(DMSO-d6，125MHz)δ23.53，25.78，26.75，28.00，34.41，37.73，38.75，50.59，77.54，86.59，114.93，115.09，131.10，133.24，160.19，162.12。MS(ESI)observedm/z 318.3[M+H]+，calcd317.2。
2、化合物III-b的制備 (1)(-)-α-蒎烷二醇(化合物III-2b)的制備
將Me3NO·2H2O(11.3g，102mmol)用16mL水溶解，攪拌下依次加入(-)α-蒎烯1b(13.2g，96.9mmol)、74mL叔丁醇、7.4mL吡啶和四氧化鋨(60mg，0.24mmol)。然后通入氮氣，10分鐘后，加熱至回流。TLC檢測，18小時反應(yīng)完畢。自然降至室溫，加入NaHSO3(1.2g，11.5mmol)攪拌10分鐘，待溶液顏色變?yōu)辄S色時，再加入20g的NaCl。分出有機相，水層用乙醚提取(3×20mL)，合并有機相，并用無水硫酸鈉干燥。濃縮后柱層析分離(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶30)，得白色固體15.33g，收率92.9％，[α]D20＝-10.79°(c＝5.5，甲苯)，m.p.52-54℃。1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ0.94(3H，s)，1.28(3H，s)，1.32(3H，s)，1.37(1H，d)，1.66(1H，m)，1.93(1H，m)，2.01(1H，t)，2.20(1H，m)，2.33(2H，s)，2.49(1H，m)，4.00(1H，q)；13C-NMR(CDCl3，75MHz)δ24.11，27.80，28.00，29.54，38.21，38.99，40.51，53.98，69.26，73.88；Anal.Calcd.for C10H1802C，70.55；H，10.66。FoundC，70.55；H，10.67。
(2)二氯亞甲基鋰(化合物III-3b)的制備
將無水二氯甲烷(7.1mL，110mmol)和200mL無水四氫呋喃在氮氣保護下，降溫至-110℃，然后慢慢滴加正丁基鋰的正己烷溶液(44mL，110mmol)，滴加完畢后低溫繼續(xù)攪拌1小時。溶液直接用于下步反應(yīng)。
(3)二氯亞甲基硼酸二甲酯(化合物III-4b)的制備
在-110℃下，向上述制備好的化合物III-3b的溶液中加入硼酸三甲酯(12.5mL，110mmol)，繼續(xù)低溫攪拌1小時后加入5N HCl溶液20mL，自然升至室溫。反應(yīng)液轉(zhuǎn)入分液漏斗，分出有機相，水層用乙醚提取(2×20mL)，合并有機相，無水硫酸鈉干燥。蒸除溶劑得白色粘稠狀固體17.6g，收率102.1％。產(chǎn)品未經(jīng)純化直接用于下步反應(yīng)。
(4)二氯亞甲基硼酸二異丙酯(化合物III-5b)的制備
在-110℃下，向已制備好的化合物III-3b的溶液中加入硼酸三異丙酯(10.2mL，44mmol)，繼續(xù)低溫攪拌2小時后加入5N HCl溶液15mL，自然升至室溫。反應(yīng)液轉(zhuǎn)入分液漏斗，分出有機相，水層用乙醚提取(2×20mL)，合并有機相，無水硫酸鈉干燥。蒸除溶劑得白色粘稠狀固體10.32g，收率＞110.2％。產(chǎn)品未經(jīng)純化直接用于下步反應(yīng)。
(5)二氯亞甲基硼酸-(-)-α-蒎烷二醇酯(化合物III-6b)的制備
方法a從化合物III-4b出發(fā) 在25mL瓶中加入化合物II-2b(3.23g，0.019mol)和化合物III-4b(5.38g，0.035mol)。再加入10mLTHF溶解，室溫下攪拌。TLC檢測，18h后反應(yīng)完畢。柱層析分離(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶20)得無色液體4.92g，收率98.5％。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ0.85(3H，s)，1.22(1H，d，J＝11.2)，1.31(3H，s)，1.46(3H，s)，1.94～1.96(2H，m)，2.13(1H，t，J＝5.1)，2.27～2.30(1H，m)，2.36～2.41(1H，m)，4.47(2H，dd，J＝8.9)，5.40(1H，s)。13C-NMR(CDCl3，125MHz)δ23.87，26.15，26.92，28.17，34.97，38.29，39.20，51.14，79.40，88.00。。
方法b從化合物III-5b出發(fā) 在50mL瓶中加入化合物II-2b(1.70g，0.01mol)和化合物III-5b(5.30g，0.025mmol)。再加入15mLTHF溶解，室溫下攪拌。TLC檢測，48h后反應(yīng)完畢。柱層析分離(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶15)得無色液體2，38g，收率90.8％。
(6)2-甲基-4-氯-丁基硼酸-(-)-α-蒎烷二醇酯(化合物III-7b)
于100mL三口瓶中加入剪碎的鎂條(1.1g，45.8mmol)、30mL無水乙醚，再加入一小粒碘，室溫下滴加叔丁基溴的乙醚溶液(6.0mL，45mmol)，滴完后加熱微沸至鎂條溶解完畢，自然冷卻得叔丁基格式試劑的乙醚溶液。干燥放置備用。
將二氯甲基硼酸-α-蒎烷二醇酯III-6b(1.18g，4.49mmol)用12mL乙醚溶解，室溫下攪拌。通入氮氣，并降溫至-78℃，然后慢慢滴加制好的叔丁基格式試劑的乙醚溶液(6mL，4.50mmol)，滴加完畢后，加入干燥好的ZnCl2粉末(0.44g，3.25mmol)。自然升至室溫，繼續(xù)室溫下攪拌。TLC檢測，18h后反應(yīng)完畢。過濾除去固體，濃縮后柱層析分離(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶200)得無色液體1.13g，收率88.5％。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ0.85(3H，s)，0.90～0.94(6H，m)，1.19(1H，dd，J＝11.0)，1.30(3H，s)，1.42(3H，s)，1.63～1.66(1H，m)，1.78～1.80(1H，m)，1.88～1.93(3H，m)，2.09(1H，t，J＝5.2)，2.24～2.26(1H，m)，2.33～2.38(1H，m)，3.51～3.55(1H，m)，4.36(1H，dd，J＝8.9)。13C-NMR(CDCl3，125MHz)δ21.29，21.34，22.88，23.97，25.68，26.36，27.07，28.46，35.34，38.30，39.47，42.90，51.35，78.56，86.66。
(11)2-甲基-4-氨基-丁基硼酸-(-)-α-蒎烷二醇酯鹽酸鹽(化合物III-8b)
于100mL單口瓶中加入LiN(SiMe3)2(5mL，5mmol)，通入氮氣，并降溫至-78℃，然后用注射器慢慢加入含有2-甲基-4-氯-丁基硼酸-α-蒎烷二醇酯III-7b(1.42g，5mmol)的THF溶液10mL，滴加完畢后，自然升至室溫，繼續(xù)室溫下攪拌。TLC檢測，20h后反應(yīng)完畢。減壓蒸餾除去溶劑，加入20mL正己烷溶解，過濾除去不溶物。將濾液降溫至-78℃，加入12mL濃度為1.3M氯化氫的乙醚溶液，然后自然升至室溫，出現(xiàn)大量乳白色固體。冷凍使固體完全析出，過濾，乙醚洗滌產(chǎn)品得乳白色固體1.12g，收率74.6％。1H-NMR(DMSO-d6，500MHz)δ0.82(3H，s)，0.86～0.89(6H，m)，1.11～1.16(1H，m)，1.25(3H，s)，1.37(3H，s)，144～1.55(2H，m，)，1.71～1.79(2H，m)，1.86～1.88(1H，m)，1.99(1H，t，J＝5.3)，2.17～2.20(1H，m)，2.30～2.34(1H，m)，2.70～2.75(1H，m)，4.41～4.44(1H，m)，7.45(3H，t，J＝50.7)，8.01(3H，s)。13C-NMR(CDCl3，125MHz)δ22.04，22.45，23.54，24.42，25.83，26.76，28.06，34.60，37.77，38.33，38.80，50.68，75.48，77.52，86.55。MS(ESI)observedm/z 266.3[M+H]+，calcd265.2。。
三、式(I)的制備 1、硼酸酯化合物(I)的制備 (1)N-苯甲?；?β-苯丙酰胺-D-亮氨酸硼酸-(+)-α-蒎烷二醇酯的制備(I-1)
在氮氣保護下，將實施例一中N-苯甲?；?β-苯丙氨酸(3aA)(0.10g，0.37mmol)溶解在10ml干燥的THF中，將體系冷卻到-5℃，加入HOBt(0.06g，0.44mmol)，反應(yīng)20分鐘后，將體系降溫到-15℃，加入EDC·HCl(0.37mmol)。最后加入實施例二中的2-甲基-4-氨基-丁基硼酸-α-蒎烷二醇酯鹽酸鹽III-12a(0.11g，0.37mmol)和DIPEA(0.064mL，0.37mmol)。繼續(xù)保持在-15℃反應(yīng)2小時，升至室溫反應(yīng)3小時，TLC顯示反應(yīng)結(jié)束。過濾除去不溶物，減壓蒸除溶劑，用20mL乙酸乙酯溶解，分別用5％NaHCO3溶液(20mL)、10％的檸檬酸溶液(20mL)、5％NaHCO3溶液(20mLl)、飽和食鹽水溶液(2×20mL)洗滌。乙酸乙酯層用無水Na2SO4干燥，過濾，濃縮后得玻璃狀固體0.166g，收率87％。所有硼酸酯化合物均未純化，直接用于下步反應(yīng)。
本發(fā)明的其它類似化合物的合成方法可以采用上述的方法。I-2將3bA與III-12a反應(yīng)制備；I-3將3cA與III-12a反應(yīng)制備；I-4將3dA與III-12a反應(yīng)制備；I-5將3aB與III-12a反應(yīng)制備；I-6將3bB與III-12a反應(yīng)制備；I-7將3cB與III-12a反應(yīng)制備；I-8將3dB與III-12a反應(yīng)制備；I-9將3aC與III-12a反應(yīng)制備；I-10將3bC與III-12a反應(yīng)制備；I-11將3cC與III-12a反應(yīng)制備；I-12將3dC與III-12a反應(yīng)制備；I-13將3aC與III-14a反應(yīng)制備；I-14將3aC與III-15a反應(yīng)制備；中間體羧酸部分采用實施例一中制備的化合物(II)，中間體硼酸-α-蒎烷二醇酯氨基的鹽酸鹽采用實施例二中制備的化合物(III)。


2、硼酸的制備 N-苯甲酰基-β-苯丙酰胺-D-亮氨酸硼酸的制備(IV-1)
將N-苯甲?；?β-苯丙酰胺-D-亮氨酸硼酸-(+)-α-蒎烷二醇酯(0.21g，0.407mmol)用6mL的甲醇溶解，加入2-甲基丙基硼酸(0.207g，2.04mmol)及6mL正己烷，最后加入HCl溶液(1M，1mL)，室溫攪拌反應(yīng)。5小時后TLC顯示反應(yīng)完成。分層，下層用10mL己烷洗滌1遍，無水硫酸鈉干燥下層。減壓蒸干溶劑，過柱得到無色固體116mg，收率74.6％。1H-NMR(CD3OD，500MHz)δ0.84～0.89(-CH3，m，6H)，1.14～1.32(-CH2，m，2H)，1.50～1.62(-CH，m，1H)，2.62(-CH，t，J＝7.1，1H)，3.04～3.18(-CH2，m，2H)，5.62～5.67(-CH，m，1H)，7.26～7.41(-Ph，m，3H)，7.42～7.53(-Ph，m，5H)，7.82～7.85(-Ph，m，2H)。13C-NMR(CD3OD，75MHz)δ22.12，23.82，27.01，37.76，40.93，45.18，52.09，127.74，128.44，129.52，129.78，132.81，135.44，141.85，169.62，177.12。MS(ESI)observedm/z 409.3[M+27]-，m/z419.2[M+37]+，calcd382.3. 本發(fā)明的其它類似的硼酸類化合物的合成可以采用上述相類似的方法。具體的化合物如下表所示。





第二部分 抑制蛋白酶體活性測定 蛋白酶體抑制活性 本方法利用熒光底物多肽Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC(簡寫Suc-LLVY-AMC，Suc表示琥珀酰基，AMC表示7-酰胺-4-甲基香豆素)在蛋白酶體作用下會發(fā)生水解，釋放出具有熒光的AMC(Ex380nm，Em460nm)的原理，通過改變待測化合物濃度，測得不同濃度藥物作用后的蛋白酶體催化底物得到的產(chǎn)物熒光值判斷藥物對酶的抑制程度，從而計算藥物對蛋白酶體抑制的IC50值。
本實驗所用的蛋白酶體為人紅細胞20S蛋白酶體，酶、熒光底物及測試緩沖液均購自biomol公司。實驗體系為100ul，其中含有蛋白酶體90μl(0.2μg)，底物10μl，其終濃度為50μM，藥物(抑制劑)0.1μl，其終濃度為10-7M～10-11M，實際配置濃度為10-4M～10-8M。具體實驗過程如下 1、藥物配置 準確稱量藥物，加入DMSO溶解至10-2M。用移液器吸取10μl加至90μlDMSO得到10-3M，然后從10-3M濃度藥物中吸取10μl加90μlDMSO得到10-4M，同樣方法得到10-5M、10-6M、10-7M、10-8M濃度的藥物。
2、底物制備 將5mg底物Suc-LLVY-AMC(mw763.9)粉末溶解于654μlDMSO中，得到10mM儲備液，-20℃保存，使用時用緩沖液稀釋20倍，每份樣品中加入10μl，使得反應(yīng)體系中的底物濃度為50μM。
3、反應(yīng)體系制備 將20S蛋白酶體(1μg/μl)以緩沖溶液稀釋成濃度為0.0022μg/μl的溶液，96孔熒光酶標板中每孔加入90μl，然后每孔中加入0.1μl待測樣品，使用已上市藥物萬珂為陽性對照藥，同時空白對照組及本底對照組中加入0.1μl DMSO，37℃反應(yīng)20min。反應(yīng)完畢后，每孔加入10μl熒光底物，避光37℃反應(yīng)1小時，380nm/460nm熒光酶標儀(Tecan，InfiniteM200)檢測熒光值。
4、數(shù)據(jù)處理 計算扣除本底后不同濃度藥物作用下所得產(chǎn)物的熒光值，運用SPSS軟件，計算藥物對蛋白酶體抑制的IC50濃度。
部分化合物的結(jié)果如下表 備注ND表示沒有抑制蛋白酶體的活性。
Velcade(萬珂)的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為
本發(fā)明化合物的治療劑量可以根據(jù)例如該治療的具體用途，化合物的給藥方式，病人的健康狀況，以及處方醫(yī)生的判斷而改變。藥物組合物中本發(fā)明化合物的比例或濃度將隨多種因素而改變，包括劑量，化學(xué)特性(如疏水性)，以及給藥途徑。例如，本發(fā)明化合物可以提供于含有大約0.1到大約10％w/v化合物的水性生理緩沖液中用于非腸道給藥。一些通常的劑量范圍為每天大約1μg/kg到大約1g/kg體重。在一些實施方案中，劑量范圍從每天大約0.01mg/kg體重到大約100mg/kg體重。劑量極可能取決于這樣的變量，如疾病或失調(diào)的類型和進展程度，特定病人的總體健康狀態(tài)，選定的化合物的相對生物學(xué)功效，賦形劑的配方，及其給藥途徑。有效劑量可以從來自體外或動物模型測試系統(tǒng)的劑量反應(yīng)曲線推出。
權(quán)利要求
1.一種式I結(jié)構(gòu)的化合物，
其中，
R1為C1～10的烷基、C3～6的環(huán)烷基或雜環(huán)烷基、苯基、萘基或吲哚基，任選地被C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、氰基、羥基、巰基、氨基或鹵素取代；
R2為C1～10的烷基、C3～6的環(huán)烷基或雜環(huán)烷基、芐基、萘甲基或吲哚甲基，任選地被C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、氰基、羥基、巰基、氨基或鹵素取代；
Z1或Z2分別獨立地為羥基、C1～10的烷基、C1～10的烷氧基或芳氧基，或者B、Z1和Z2一起形成含有N、S或O的雜環(huán)基團；
Pg為C1～10的烷?；?、C1～10的烷氧?；?、芳香族?；蚝蠳、S或O的雜環(huán)?；?，任選地被C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、鹵素或C1～4的鹵代烷基取代。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中R1為C1～10的烷基、苯基、萘基或吲哚基，任選地被C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、氰基、羥基、巰基、氨基或鹵素取代。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物，其中R1為C1～10的烷基或苯基，任選地被C1～4的烷基、C1～4的烷氧基或鹵素取代。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中R2為C1～10的烷基、芐基、萘甲基或吲哚甲基，任選地被C1～4的烷基、氰基、羥基、巰基、氨基或鹵素取代；
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的化合物，其中R2為C1～10的烷基或芐基，任選地被C1～4的烷基取代。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中Z1或Z2分別獨立地為羥基、C1～10的烷基、C1～10的烷氧基或芳氧基，或者B、Z1和Z2一起形成硼酸-α-蒎烷二醇酯；
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的化合物，其中Z1或Z2分別獨立地為羥基，或者B、Z1和Z2一起形成硼酸-α-蒎烷二醇酯。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中Pg為C1～10的烷氧?；⒈锦；?、吡啶?；⑦拎乎；芜x地被C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、鹵素或C1～4的鹵代烷基取代。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的化合物，其中Pg為
R3或R4分別獨立地為氫、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴或三氟甲基。
10.一種權(quán)利要求1～9中任一所述的化合物的制備方法，式(II-1)化合物在SOCl2作用下與甲醇反應(yīng)得到式(II-2)化合物，式(II-2)化合物在肽縮合劑下與Pg縮合生成式(II-3)化合物或者式(II-2)化合物與酰氯的Pg反應(yīng)生成式(II-3)化合物，式(II-3)化合物皂化再酸化生成式(II)化合物；另一邊，式(III-6)化合物與金屬試劑反應(yīng)，再被無水ZnCl2催化成式(III-7)化合物，式(III-7)化合物與MN(SiMe3)2反應(yīng)生成式(III-8)化合物，式(III-8)化合物在酸性條件下脫保護形成式(III)化合物，最后式(II)化合物和式(III)化合物縮合成式(I)化合物，其反應(yīng)路線如下
其中R1、R2、Z1、Z2或Pg的定義如權(quán)利要求1中所述，且Z1和Z2不為羥基。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的制備方法，將式(I)化合物脫去Z1和Z2基團生成式(IV)化合物，其反應(yīng)方程式為
12.權(quán)利要求1～9中任一所述的化合物在制備蛋白酶體抑制劑或抗腫瘤藥物方面的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種硼酸及其酯類化合物、制備方法及其用途，該化合物具有式I結(jié)構(gòu)，R1為取代或非取代的C1～10的烷基、C3～6的環(huán)烷基或雜環(huán)烷基、苯基、萘基或吲哚基，R2為取代或非取代的C1～10的烷基、C3～6的環(huán)烷基或雜環(huán)烷基、芐基、萘甲基或吲哚甲基，Z1或Z2分別獨立地為羥基、C1～10的烷基、C1～10的烷氧基或芳氧基，或者B、Z1和Z2一起形成含有N、S或O的雜環(huán)基團；Pg為取代或非取代的C1～10的烷?；?、C1～10的烷氧?；?、芳香族?；蚝蠳、S或O的雜環(huán)?；?。本發(fā)明的化合物可以應(yīng)用在制備蛋白酶體抑制劑或抗腫瘤藥物方面。
文檔編號A61P35/00GK101747354SQ20081023572
公開日2010年6月23日 申請日期2008年12月4日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月4日
發(fā)明者朱永強, 吳剛, 趙欣, 朱新榮, 李月杰, 馬玉恒, 殷曉進 申請人:江蘇先聲藥物研究有限公司