專利名稱：：蚶類提取物凍干粉的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及海洋生物提取領(lǐng)域，特別是涉及海洋生物蚶類提取物的蚶類提取物凍干粉的提取方法。
背景技術(shù)：
：海洋覆蓋著地球表面積的71%，海水總體積占地球總水量的97%,尚未被利用的海洋與海岸的有效面積比陸地大5~10倍，海洋中生活著大量海洋生物，資源極其豐富，而且海洋生物是在海洋高鹽特定環(huán)境中生存發(fā)展，比陸源生物有它獨(dú)特特點(diǎn)和藥理活性，是目前世界上被污染少的生物資源，是獲取生物活性物質(zhì)的新資源，開發(fā)海洋生物藥物越來越引起世界各國(guó)醫(yī)藥界的高度重視，紛紛進(jìn)行開發(fā)研究，它是海洋藥物工業(yè)發(fā)展的未來。海洋生物品種繁多，各異獨(dú)特，其中蚶類生物是極其豐富的海洋生物之一，屬于軟體動(dòng)物，據(jù)中藥大辭典記載其性味甘、溫、具補(bǔ)血、溫中、健胃之功，主治血虛痿痹、胃痛，消化不良，下痢膿血等癥?！夺t(yī)林纂要》注"蚶肉補(bǔ)心血、散瘀血、破結(jié)消痰。"其肉含粗蛋白15.79%，粗脂肪0.45%,糖原1.067%，每100克含維生素A400國(guó)際單位，維生素B"00ug，維生素B2200ug，以及尼克酸、?；撬岬榷喾N氨基酸，有很高的藥用價(jià)值，深入開發(fā)研究蚶類這一獨(dú)特豐富醫(yī)藥資源具有重要意義。迄今為止，從海洋蚶類中提取有效藥物成份，國(guó)外尚未見到報(bào)道。國(guó)內(nèi)已有文獻(xiàn)及專利報(bào)道，中國(guó)專利CN1600792A公開了毛蚶中的多肽蛋白類抗腫瘤有效成分，提取物經(jīng)離子交換柱層析、脫鹽后，再經(jīng)凝膠柱層析分離截取分子量3150KDa成份。中國(guó)專利CN1857717A以及中國(guó)海洋藥物雜志V0123,No5，P35-37公開了一種蚶類抗癌肽類提取物，以及注射液的抗癌作用，提取方法經(jīng)硫酸銨分級(jí)沉淀，Superdex75凝膠過濾層析分離及脫鹽制備肽類化合物，分子量3000Dal;其注射液用于各種癌癥的治療，并進(jìn)行小鼠抗腫瘤效果研究。臨床應(yīng)用中，口服給藥途徑較注射給藥更方便容易。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在不足以及目前海洋藥物資源匱乏，經(jīng)發(fā)明人長(zhǎng)期從事海洋生物提取的開發(fā)研究和臨床經(jīng)驗(yàn)，開發(fā)一種生物活性高，便于口服，安全無毒副作用，療效好的一種蚶類提取物凍千粉的提取方法。本發(fā)明提供的一種蚶類提取物凍干粉的提取方法，包括下列步驟-①洗凈將鮮活海洋生物蚶類，優(yōu)選為毛蚶，用飲用水洗凈泥污，再用純化水洗多次，去殼取軟體(軟體組織或肉)，再用純化水洗至無血污瀝干水份得凈料。②搗碎將步驟①的凈料進(jìn)行搗碎，搗碎粒度(粒子直徑)為0.2~0.4cm。③提取將步驟②的搗碎物料與純化水混合，搗碎物料與純化水重量比為1:l至l:2，優(yōu)選h1.5，在提取裝置中于0-1(TC攪拌提取1次或2次，優(yōu)選1次，每次提取時(shí)間為2-6小時(shí)，優(yōu)選4小時(shí)，攪拌速度50~100轉(zhuǎn)/分，分離提取液，再進(jìn)行離心(如釆用GQ105高速管式離心機(jī)，20000轉(zhuǎn)/分)去渣得離心液。凍干將步驟③的離心液放入凍干箱，預(yù)凍溫度為-20至-40°C，優(yōu)選-30-35°C，降溫速度為20-40°C/h，優(yōu)選為30。C/h，保溫3-5小時(shí)，優(yōu)選為4小時(shí)，一期升華溫度為5-15°C，優(yōu)選為10。C，升溫速度為5-15°C/h，優(yōu)選為10。C/h，保溫時(shí)間為2-6小時(shí)，優(yōu)選為4小時(shí)；二期升華溫度20-40°C，優(yōu)選為30。C，升溫速度為10-20°C/h，優(yōu)選為15°C/h，保溫時(shí)間為4-8小時(shí)，優(yōu)選為6小時(shí)，得蚶類提取物凍干粉(簡(jiǎn)稱凍干粉)。蚶類提取物凍干粉為淡黃棕色疏松塊狀物，味微咸，微腥，干燥失重1.0-9.0重量％。熾灼殘?jiān)?.0_12重量％。微生物限度檢査符合規(guī)定(《中國(guó)藥典》2005版一部附錄Xm檢驗(yàn))。葡萄糖含量20-50mg/g。氮含量55-95mg/g(以上按中國(guó)藥典2005)版規(guī)定測(cè)試。根據(jù)本發(fā)明提供的蚶類提取物凍干粉的提取方法中，所述蚶類為毛蚶、泥蚶、魁蚶等，優(yōu)選為毛蚶。蚶類提取物凍干粉是海洋生物蚶類的提取物，其有效成份是蛋白質(zhì)類物質(zhì)，具有生物活性蛋白質(zhì)類物質(zhì)，為了便于提取出有效成份生物活性蛋白質(zhì)類物質(zhì)在低溫O-l(TC條件下進(jìn)行提取分離。海洋生物蚶類經(jīng)洗凈去殼取軟體先要進(jìn)行搗碎，搗碎粒度(粒子直徑)為0.2-0.4cm，因?yàn)槿绻６认鄬?duì)過大不利于有效成份的溶出，如果粒度相對(duì)過小影響提取液分離同時(shí)會(huì)使后續(xù)的離心環(huán)節(jié)增加負(fù)荷。提取時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，提取1次或2次，每次提取時(shí)間2-6小時(shí)，優(yōu)選為4小時(shí)，如果提取時(shí)間過短，有效成份提取不完全，時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)使提取成份在空間暴露時(shí)間過長(zhǎng)引起進(jìn)一步的分解(因?yàn)楸井a(chǎn)品有效部位為蛋白質(zhì)類成份)。本發(fā)明提供的蚶類提取物凍干粉的提取方法特點(diǎn)提取工藝簡(jiǎn)單有效，提取有效生物活性蛋白質(zhì)類物質(zhì)高，收率為凈料(毛蚶軟體洗凈瀝干物料)重量的6%。制成蚶類提取物腸溶膠囊對(duì)早、中、晚期癌癥患者例如肺癌、肝癌、胃癌腎癌及宮頸癌等可明顯改善癥狀，縮小瘤體，提高生存質(zhì)量，延長(zhǎng)生存期。具體實(shí)施例方式本發(fā)明用下列實(shí)施例來進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不限于下列實(shí)施例。實(shí)施例1取鮮活毛蚶400Kg，以飲用水反復(fù)沖洗至貝殼表面無泥污，再用純化水清洗三次，去殼取軟體組織用純化水清洗至無血污，瀝干水分得凈料稱重，凈料經(jīng)搗碎機(jī)搗碎，粒度為0.3cm，按重量比(w/w)1:1.5加入純化水，在0-10。C用攪拌機(jī)慢速(60r/min)攪拌提取4小時(shí)，提取裝置GQ105高速管式離心機(jī)(20000r/min)離心去渣，進(jìn)行凍干，得凍干粉原料，混合均勻，真空包裝，冷藏箱放置，結(jié)果如下表1<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>實(shí)施例2-3實(shí)施例2-3制造步驟相同于實(shí)施例1，不同是提取工藝于上述表1所列。權(quán)利要求1、一種蚶類提取物凍干粉的提取方法，包括下列步驟①洗凈將鮮活海洋生物蚶，用飲用水洗凈泥污，后用純化水洗多次，去殼取軟體，用純化水洗至無血污瀝干水份得凈料；②將步驟①的凈料進(jìn)行搗碎，搗碎粒度為0.2～0.4cm；③提取將步驟②搗碎物料與純化水混合，搗碎物料與純化水重量比為1∶1至1∶2，在提取裝置中于0～10℃攪拌提取1次或2次，每次為2-6小時(shí)，分離提取液，再進(jìn)行離心去渣得離心液；④凍干將步驟③的離心液放入凍干箱中，預(yù)凍溫度為-20至-40℃，降溫速度為20-40℃/h，保溫3-5小時(shí)，一期升華溫度為5-15℃，升溫速度為5-15℃/h，保溫時(shí)間為2-6小時(shí)，二期升華溫度20-40℃，升溫速度為10-20℃/h，保溫時(shí)間為4-8小時(shí)，得蚶類提取物凍干粉。2、根據(jù)權(quán)利要求1的蚶類提取物凍干粉的提取方法，其特征在于所述提取次數(shù)為1次，提取時(shí)間4小時(shí)；所述搗碎物料與純化水重量比為1:1.5;預(yù)凍溫度-30-35'C，降溫速度30'C每小時(shí)，保溫4小時(shí)，一期升華溫度l(TC，升溫速度10°C/h,保溫時(shí)間4小時(shí)，二期升華溫度3(TC，升溫速度15。C/h，保溫時(shí)間6小時(shí)。全文摘要本發(fā)明涉及一種蚶類提取物凍干粉的提取方法，其特征在于包括洗凈鮮活海洋生物蚶類用水洗凈泥污去殼取軟體，洗凈至無血污瀝干得凈料；搗碎粒度0.2～0.4cm；提取與水為1∶1至1∶2混合于提取裝置中0～10℃提取2～6小時(shí)，分離、離心去渣得離心液；凍干經(jīng)預(yù)凍，一期二期升華得蚶類提取物凍干粉。該提取方法簡(jiǎn)單有效，有效成分生物活性蛋白質(zhì)類物質(zhì)含量高，用于制造蚶類提取物腸溶膠囊治療早、中、晚期癌癥如肺癌、肝癌、腎癌、胃癌、宮頸癌等患者。文檔編號(hào)A61K35/56GK101416985SQ20081023913公開日2009年4月29日申請(qǐng)日期2008年12月10日優(yōu)先權(quán)日2008年12月10日發(fā)明者王春波,陳守國(guó),韓彥弢申請(qǐng)人:青島海生腫瘤醫(yī)院